JPWO2011067961A1 - 流路デバイス及びそれを含むサンプル処理装置 - Google Patents
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Abstract
Description
この場合、スイッチングにより電気的刺激を変化させるサブモード1と、スイッチングにより電極対を選択するサブモード2に分けられる。
予め分子を検知することなく、電極対(E1、E2)の間に、或いは電極対(E1、E3)の間に、或いは電極対(E2、E4)の間に、分子Aに固有の直流電圧又は固有の周波数の交流電圧を印加する。印加は、そこを通るどの分子にも与えておく。これにより、 分子Aだけを所定の分岐路に誘導することができる。
第1の実施形態は、ナノ流路に設置された電極対の電極間に電圧を印加し、電極間に分子が存在するときに流れる電流から抵抗を測定し、その測定された抵抗値に基づいて、分子を同定する分子分離装置に関するものである。
図1Eは、本発明の実施形態に係る分子分離装置(サンプル処理装置)で用いられる流路デバイス10の外観構成を示す図である。当該流路デバイス10は、基板上に形成された、サンプルを注入するための部位である注入部11と、分子の同定および分離処理を行う部位であるナノ流路12と、分離された分子を取り出すための部位である出力部13及び14と、を備えている。
図4は、本発明の第1の実施形態による分子分離装置の回路構成を示すブロック図である。当該分子分離装置は、各構成要素からの情報を取得し所定の演算を行い、必要に応じて各構成要素を制御するための演算処理部40と、測定用ナノ電極122と、測定用電流計123と、電極122に電圧を印加する電源(図示せず)とを有する測定部41と、スイッチング用ナノ電極125と、確認用電流計124と、各電極と共通電極間に電圧を印加する電圧印加部(図示せず)とを有するスイッチング部42と、各種分子を含むサンプルに電圧を印加した場合の抵抗値と各種分子との対応関係を示す抵抗値‐分子対応テーブル43と、メモリ44と、ユーザが所定の指示等を入力し、分離処理の結果等を出力(表示)する情報入力/出力部45と、を備えている。
(1)サンプル注入及び流れ制御
まず、注入部11にサンプルが導入される。当該サンプルは、既知の分子や未知の分子を含んでいる。当該分子分離装置によれば、サンプルが既知の分子のみを含む場合には分子の種類ごとに分子を分類することができ、一方、サンプルが未知の分子を含む場合には分子の種類が未知のまま測定される抵抗値が同じ値を示す分子として分類することができるようになる。
ナノ流路12のナノ流路12の幅はナノメートル単位のサイズであるため、サンプルに含まれる各分子が単一分子の形でナノ流路12を移動する。
上述したように、分離の対象となっている分子がナノ流路12の分岐部に到達するタイミングが分かる。従って、このタイミングで、分子の種類又はその電流値に対応して、演算処理部40は、スイッチング用ナノ電極125の共通電極と、当該対象の分子を誘導すべき流路側の出口電極との間に電場を印加する。すると、ナノ流路から誘導すべき流路である分岐流路の方向に誘電泳動、電気泳動、電気浸透流(Electroosmotic flow)の何れかが働き、分子が当該分岐流路に誘導される。
(1)サンプル導入
(i)上述の実施形態では、毛管現象を利用してサンプルをマイクロ流路からナノ流路に導入しているが、ここでは電気的な制御によりサンプルをナノ流路に導入する手段を説明する。このように電気的な制御によってサンプル導入を実現すれば、高精度の流れ制御から測定精度や分離精度を向上することができ、さらに流路デバイス10の基板101が親水性である必要がなくなり、プラスチックやセラミックのような材料でも構成することが可能となる。
図7は、流路デバイス10におけるナノ流路12の測定用ナノ電極122が配置される箇所の別の構成例を示す図である。上述したように、測定用ナノ電極122を用いて、ナノ流路を流れる分子を検知し、その移動速度を複数の電極対における電流値計測タイミングの違いによって算出しているが、より適切に分子を同定できるようにするために、抵抗測定箇所のナノ流路の幅をその箇所以外の幅に比べて狭く設定する。このようにすると、分子による電流変化分は、分子の体積/電極間の体積比に比例するため、電極間の体積が減ることによって体積比が大きくなる。その結果、分子による電流変化分が大きくなるため高感度な抵抗測定に繋がると言える。
第1の実施形態で説明した原理及び動作に基づいて行った実験について説明し、本発明の有効性を示す。
全体の長さが150μm、深さが50〜100nm、幅が50〜500nmの構造を有するナノ流路を用いて実験した。
サイズが15.0kbp(kilo base pairs)、33.5kbp、48.5kbpの3種類のDNAについてそれぞれDNA溶液(サンプル)を作製し、実験に用いた。各サンプルの濃度は、0.1×TBE緩衝液中1fMとなるように調整した。なお、計算上の見掛けの各DNAの長さの予測値は、15.0kbpのDNAは1.1μm、33.5kbpのDNAは2.4μm、48.5kbpのDNAは3.6μmであった。
0.1V
(4)実験内容
(i)各サンプルをナノ流路に独立して導入し、i)流速度を測定し、ii)DNAの1分子を同定し、iii)各DNAに対応させた、流路の適切な出力部への誘導を実行した(実験結果については図8乃至10参照)。
(i)図8は、サイズが15.0kbpのDNA分子がナノ流路を移動する様子を3.3msの間隔で撮影した図(写真)である。なお、ナノ流路は電極の幅(1μm)に比べて極小なので図面上では不可視であるが、白い垂直線はナノ流路を移動するDNAの位置を示している。
第2の実施形態は、ナノ流路に設置された電極対の電極間に分子があるときに交流電圧を印加してインピーダンスを測定し、測定されたインピーダンス値に基づいて、分子を同定する分子分離装置に関するものである。
第2の実施形態で用いられる流路デバイス10の外観構成、及び流路デバイス10のAA’(測定用ナノ電極が設けられた部分)における断面構成は、第1の実施形態(図1E及び3参照)と同じなので、説明を省略する。
図13は、本発明の第2の実施形態による分子分離装置の回路構成を示すブロック図である。当該分子分離装置は、各構成要素からの情報を取得し所定の演算を行い、必要に応じて各構成要素を制御するための演算処理部90と、測定用ナノ電極122と、インピーダンス測定部223とを有する測定部91と、測定部91内の測定用ナノ電極122に交流電圧を印加するための電圧・周波数可変交流電源96と、スイッチング用ナノ電極125と、確認用電流計224と、各電極と共通電極間に電圧を印加する電圧印加部(図示せず)とを有するスイッチング部92と、測定用ナノ電極122間に存在する各種分子を含むサンプルに電圧を印加した場合のインピーダンス値と各種分子との対応関係を示すインピーダンス‐分子対応テーブル93と、メモリ44と、ユーザが所定の指示等を入力し、分離処理の結果等を出力(表示)する情報入力/出力部95と、を備えている。
(1)サンプル注入及び流れ制御
まず、ユーザによって注入部11にサンプルが滴下される。当該サンプルは、既知の分子や未知の分子を含んでいる。当該分子分離装置によれば、サンプルが既知の分子のみを含む場合には分子の種類ごとに分子を分離することができ、一方、サンプルが未知の分子を含む場合には分子の種類が未知のまま測定されるインピーダンス値が同じ値を示す分子として分離することができるようになる。
ナノ流路12の幅はナノメートル単位のサイズであるため、サンプルを構成する各分子が単一分子でナノ流路12を移動する。
上述したように、分離の対象となっている分子がナノ流路12の分岐部に到達するタイミングが分かる。従って、このタイミングで、分子の種類又はそのインピーダンス値に対応して、演算処理部90は、スイッチング用ナノ電極125の共通電極と、当該対象の分子を誘導すべき流路側の出口電極との間に電場を印加する。すると、ナノ流路から誘導すべき流路である分岐流路の方向に誘電泳動、電気泳動、電気浸透流の何れかが働き、分子が当該分岐流路に誘導される。
本発明の第2の実施形態による分子分離装置によれば、上述((2)及び(3))したように、異なる分子を同定又は分離することができるだけでなく、単一分子の立体構造やその動態を測定することができる。以下、単一分子の立体構造の電気的動態測定処理について説明する。
生体分子の機能はその分子構造に由来するというのが構造生物学の基本概念であり、したがって分子構造を知ることは、その機能を理解するための最短路となる。ただし、例え膨大な労力を費やして結晶解析やNMRなどによって複雑な静的、準静的構造が決定されたとしても、生体分子の機能の本質である環境変化(反応基質濃度、pH、温度、イオン濃度等々)に伴う動的な構造変化を捉えることが出来なくては生体分子の構造と機能を理解したことにはならない。今後の分子生物学や構造生物学の発展と、プロテオーム解析や創薬などにおける大規模なタンパク質の機能解析への応用、さらには生体分子のような分子機械を人為的にデザインして創造したりするようなナノバイオテクノロジーへの応用を考えるに、生体分子の立体構造(conformation)やその動的な変化(動態)を検知する手法と、それを応用した生体分子の機能解析や同定手法の開発は必至と考えられる。
従来、生体分子を解析する場合には、X線回折やNMRなどの解析手法を用いており、これらにおいては分子を溶液や結晶の状態で取り扱っている。このように生体分子を懸濁液又は溶液のような多分子系で扱うと、個々の分子で起こっている反応とそれに伴う構造変化や時間応答などの情報が多分子間のランダムな動きの平均化によって失われてしまう。一方、結晶化させれば規則正しく配列している結晶の周期性を利用して静的な立体構造を得ることが出来る反面、生理的環境から逸脱してしまうため肝心の立体構造の変化といった動態に関する情報が失われてしまう。すなわち、構造解析の分解能を上げると動態に関する情報が得られず、動態の情報を得ようとすると分解能が上がらないというジレンマが、従来のX線回折やNMRなどの解析手法にはある。
図15は、例えば生体分子と酵素との反応前後における分子の構造やその動態を検知する原理を説明するための図である。図15において、C1は反応前の生体分子の構造を模式的に示し、C2は反応中若しくは反応後の生体分子の構造を模式的に示している。また、特性P3は、測定用ナノ電極122間にある生体分子がC1構造を採るときに、当該電極間に交流電圧を印加し、周波数をある範囲で掃引させたときのインピーダンス特性を示す。同様に、特性P4は、測定用ナノ電極122間にある同一の生体分子がC2構造を採るときに、当該電極間に交流電圧を印加し、周波数をある範囲で掃引させたときのインピーダンス特性を示す。このように、単一分子であっても構造に変化が起こると、測定されるインピーダンス値に変化が生じる。この性質を利用して、分子の構造やその動態をリアルタイムに検知することができるようになる。
単一分子の構造の動態測定に当たっては、まず、例えば、DNAなどの生体分子を溶解したサンプルを用意する。
幅が大きい(マイクロオーダー以上)流路を用いる場合、数分子といった極微量のサンプルの測定では、周囲の水分子の数に対する測定対象の分子数が小さくなりS/Nが低下してしまう。また、液中の測定の場合、測定感度の向上のために高電圧(図中ではMV/mも印加している)を印加すると電極反応により電極が分解してしまうという問題がある。
(1)サンプル導入部、及びそれを有する分子分離装置の構成
(i)サンプル導入の変形例については、第1の実施形態と同じ構成(図5参照)を適用することが可能であるので、その説明は省略する。
第1の実施形態による、流路デバイス10におけるナノ流路12の測定用ナノ電極122が配置される箇所の別の構成例(図7参照)は、第2の実施形態にも適用可能である。
以下、第1及び第2の実施形態で使用する流路デバイスの製造方法の一例を説明する。
図18は、本発明による流路デバイス10の製造工程を説明するための図である。
図19は、形状の異なる流路を作製する方法について説明するための図である。本発明では、断面が矩形の流路とV字型の流路について考える。ただし、矩形流路の場合、正確な矩形である必要はなく、例えば、底面が丸みを帯びていてもよい。また、V字型流路の場合も、正確にV字である必要はなく、例えば、流路の底面に行くにつれて流路幅が狭くなっていれば良い。
図20は、基板上に形成された異なる電極パターンについて説明するための図である。図20(A)は電極パターンが流路エッジまでしかないパターン1を示し、図20(B)は電極パターンが流路内部にまで入り込んでいる場合のパターン2を示す図である。
図21は、図20のパターン1及びパターン2の電極パターンを形成する工程、具体的には図18(C)で示される工程3の詳細を説明するための図である。
図22は、電極パターン上に絶縁膜をコーティングする様子を示す図である。
図23は、矩形流路とV字型流路(電極パターンがナノ流路側面にない場合)の特徴を比較するための図である。
図24は、上述の製造方法に従って作製した実際の流路デバイスを示す図である。図24からも分かるように、当該流路デバイスは、1つの注入部と、1つのナノ流路と3つの分岐流路からなるナノ流路と、3つの出力部と、(分子速度測定電極及び1分子同定用電極(測定用ナノ電極)と、分岐流路に振り分けるための電極(スイッチング用ナノ電極)と、を有している。
(1)本発明により同定又は分離可能な分子は、ナノメートルサイズの分子例えばDNA、RNA、タンパク質全般、ポリペプチド、アミノ酸、多糖類、脂質、サイトカイン、シグナル伝達物質、ホルモンなどの生体分子である。生体分子の他に一般的な有機高分子、例えばポリエチレン、ポリカーボネイト、アクリルなどの合成樹脂やナイロン、ビニルなどの合成繊維、シリコーン樹脂などや、無機高分子も同定又は分離可能である。さらにナノメートルサイズの粒子状物質、例えばコロイドやナノ粒子なども同定又は分離可能である。
さらに、電極対間に分子(生体分子)を滞留させて、分子の環境を変化(酵素と反応させる、温度を変化させる、pHを変化させる、イオン濃度を変化させる等)させるとともに、交流電源の周波数を変えながら電極間に交流電圧を印加したときのインピーダンスを測定する。そして、測定されたインピーダンス値に基づいて、分子の立体構造やその動態を検知する。なお、交流電源は、周波数可変だけでなく、ナノ流路の電極対間に印加すべき電圧が可変である。この場合、交流電源の周波数及び電圧を変えながら、インピーダンスを測定し、交流電源の周波数及び電圧を変化させたときのインピーダンス値の変化によって分子の立体構造(conformation)とその動的な変化(動態)を検知する。これにより、分子(特に、生体分子)の構造変化を動的に捉えることができるようになるので、分子の機能を把握することができるようになる。
AS…交流電源
E1,E2,E3,E4,E5,E6…電極
10…流路デバイス
11…注入部
12…ナノ流路
12a、12b、12c…分岐流路
13…出力部
14…出力部
15…ガラス
16…接着部材
40…演算処理部
41…測定部
42…スイッチング部
43…電流値‐分子対応テーブル
44…メモリ
45…情報入力/出力部
51…サンプル導入部
90…演算処理部
91…測定部
92…スイッチング部
93…インピーダンス‐分子対応テーブル
94…メモリ
95…情報入力/出力部
96…交流電源
101…基板
122…測定用ナノ電極
123…電流計
124…電流計
223…インピーダンス測定部
224…確認用インピーダンス測定部
125…スイッチング用ナノ電極
511…電極
512…電極
513…電源
Claims (39)
- 分子1個が流れるナノサイズ流路を有し、その近傍に少なくとも1つの電極対が配置され、かつ前記電極に交流電圧を印加するための交流電源を有する流路デバイス。
- 請求項1の流路デバイスにおいて、前記電極が前記流路に露出しているか、又は前記電極と前記流路との間に絶縁層があり、そのため前記電極が前記流路に露出していないことを特徴とする流路デバイス。
- 分子1個が流れるナノサイズ流路、分岐部及び複数の分岐流路を備え、i)前記ナノサイズ流路の近傍であって当該ナノサイズ流路を挟むように電極対が配置され、又はii)電極対の一方が前記ナノサイズ流路の近傍に配置され、他方が前記分岐流路の近傍に配置された流路デバイス。
- 請求項3の流路デバイスにおいて、前記電極が前記流路に露出しているか、又は前記電極と前記流路との間に絶縁層があり、そのため前記電極が前記流路に露出していないことを特徴とする流路デバイス。
- 請求項3の流路デバイスにおいて、前記分岐流路の断面の大きさがナノメートルサイズであることを特徴とする流路デバイス。
- 分子1個が流れるナノサイズ流路、分岐部及び複数の分岐流路を備えた流路デバイス。
- 請求項6の流路デバイスにおいて、前記分岐流路の断面の大きさがナノメートルサイズであることを特徴とする流路デバイス。
- (1)分子1個が流れるナノサイズ流路を有し、その近傍に少なくとも1つの電極対が配置された流路デバイス、(2)前記電極に交流電圧を印加するための交流電源、及び(3)前記流路を流れるサンプルに含まれる分子1個を同定する測定部を備えたサンプル処理装置。
- (1)分子1個が流れるナノサイズ流路、分岐部及び複数の分岐流路を備え、i)前記ナノサイズ流路の近傍であって当該ナノサイズ流路を挟むように電極対が配置され、又はii)電極対の一方が前記ナノサイズ流路の近傍に配置され、他方が前記分岐流路の近傍に配置された流路デバイス及び(2)前記流路を流れるサンプルに含まれる分子1個に前記電極対を介して電気的刺激を与え、これにより前記分子に力学的挙動を促し、この力学的挙動により所定の分岐流路に前記分子を誘導するスイッチング部を備えたサンプル処理装置。
- 請求項9の流路デバイスにおいて、前記分岐流路の断面の大きさがナノメートルサイズであることを特徴とする流路デバイス。
- サンプルに含まれる分子を同定するサンプル処理装置であって、
サンプルを注入するための注入部と、断面の大きさがナノメートルオーダーのサイズを有し、前記サンプルに含まれる分子を移動させるためのナノサイズ流路と、を含む流路デバイスと、
前記ナノサイズ流路に設置された電極対の電極間に電圧を印加し、前記分子が前記電極間を通過するときのインピーダンスを測定する測定部と、
前記測定部によって測定されたインピーダンス値に基づいて、前記分子を同定する演算処理部と、
を備えることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項11において、
前記ナノサイズ流路を移動してきた分子を取り出すための複数の出力部と、
前記同定された分子を分離する分子分離部と、を備え、
前記ナノサイズ流路は、その先に分岐部と当該分岐部から前記出力部につながる複数の分岐流路とを備え、
前記分子分離部は、前記同定された分子を、前記ナノ流路から前記複数の分岐流路のうち所定の分岐流路に誘導することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項12において、
前記分子分離部は、前記ナノ流路側に設けられた電極対又は共通の電極からなる所定電極と、前記複数の分岐流路側にそれぞれ設けられた複数の出口電極と、前記所定電極の対又は前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかに電圧を印加するための電圧印加部と、i)前記所定電極の対又はii)前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかとの対を選択するためのスイッチング部と、を有し、
前記演算処理部は、前記同定された分子の情報に基づいて、前記の対を選択し、前記電圧を印加するように前記分子分離部を制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項13において、
前記ナノサイズ流路には複数の電極対が設けられ、当該各電極対は所定の間隔を隔てて配置されており、
前記計測部は、前記分子が前記各電極対を通過するときのインピーダンスを測定し、
前記演算処理部は、測定したインピーダンス値の測定時間差に基づいて、前記分子の移動速度を算出し、算出した分子の移動速度に基づいて前記電圧を印加するタイミングを制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項11において、
前記流路デバイスは親水性のある絶縁体材料で構成され、
前記サンプルは、前記注入部から前記ナノサイズ流路に毛管現象の作用により導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項11において、
前記サンプルに電圧を印加するための導入用電極対の一方の電極が前記注入部に配置され、他方の電極が前記ナノサイズ流路に配置され、
前記導入用電極対間に電場を生じさせることにより、前記サンプルが前記注入部から前記ナノサイズ流路に導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項11において、
前記注入部は、断面の大きさがマイクロメートルオーダーのサイズを有していることを特徴とするサンプル処理装置。 - サンプルに含まれる所定の分子を分離するサンプル処理装置であって、
サンプルを注入するための注入部と、断面の大きさがナノメートルオーダーのサイズを有し、前記サンプルに含まれる分子を移動させるためのナノサイズ流路と、前記ナノサイズ流路を移動してきた分子を取り出すための複数の出力部と、を含み、前記ナノサイズ流路が、その先に分岐部と当該分岐部から前記複数の出力部につながる複数の分岐流路とを備えた流路デバイスと、
前記ナノサイズ流路に設置された電極対の電極間に電圧を印加し、前記電極間を前記分子が通過したときの抵抗又はインピーダンスを測定する測定部と、
前記測定部によって測定された抵抗値又はインピーダンス値と分子とを関連付ける演算処理部と、
前記測定された抵抗値又はインピーダンス値と関連付けられた分子を、前記ナノサイズ流路から前記複数の分岐流路のうち所望の分岐流路に誘導する分子分離部と、
を備えることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項18において、
前記分子分離部は、前記ナノサイズ流路側に設けられた電極対又は共通電極からなる所定電極と、前記複数の分岐流路側にそれぞれ設けられた複数の出口電極と、前記所定電極の対又は前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかに電圧を印加するための電圧印加部と、i)前記所定電極の対又はii)前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかとの対を選択するためのスイッチング部と、を有し、
前記演算処理部は、前記測定された抵抗値又はインピーダンス値の情報に基づいて、
前記の対を選択し、前記電圧を印加するように前記分子分離部を制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項19において、
前記ナノサイズ流路には複数の電極対が設けられ、当該各電極対は所定の間隔を隔てて配置されており、
前記測定部は、前記分子が前記各電極対を通過するときの抵抗又はインピーダンスを測定し、
前記演算処理部は、測定した抵抗値又はインピーダンス値の測定時間差に基づいて、前記分子の移動速度を算出し、算出した分子の移動速度に基づいて前記電圧を印加するタイミングを制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項18において、
前記流路デバイスは親水性のある絶縁体材料で構成され、
前記サンプルは、前記注入部から前記ナノサイズ流路に毛管現象の作用により導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項18において、
前記サンプルに電圧を印加するための導入用電極対の一方の電極が前記注入部に配置され、他方の電極が前記ナノサイズ流路に配置され、
前記導入用電極対間に電場を生じさせることにより、前記サンプルが前記注入部から前記ナノサイズ流路に導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項18において、
前記注入部は、断面の大きさがマイクロメートルオーダーのサイズを有していることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項11において、
さらに、前記ナノサイズ流路に設置された電極対の電極間に交流電圧を印加する交流電源を有し、
前記測定部は、前記分子が前記電極対間を通過するときのインピーダンスを測定することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項24において、
前記交流電源は、周波数可変の交流電源であり、
前記測定部は、前記交流電源の周波数を所定範囲内で変化させたときのインピーダンスを測定することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項24において、
さらに、前記ナノサイズ流路を移動してきた分子を取り出すための複数の出力部と、
前記同定された分子を分離する分子分離部と、を備え、
前記ナノサイズ流路は、その先の分岐部と当該分岐部から前記複数の出力部につながる複数の分岐流路とを備え、
前記分子分離部は、前記同定された分子を、前記ナノ流路から前記複数の分岐流路のうち所望の分岐流路に誘導することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項26において、
前記分子分離部は、前記ナノ流路側に設けられた電極対又は共通電極からなる所定電極と、前記複数の分岐流路側にそれぞれ設けられた複数の出口電極と、前記所定電極の対又は前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかに電圧を印加するための電圧印加部と、i)前記所定電極の対又はii)前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかとの対を選択するためのスイッチング部と、を有し、
前記演算処理部は、前記同定された分子の情報に基づいて、前記の対を選択し前記電圧を印加するように前記分子分離部を制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項27において、
前記ナノサイズ流路には複数の電極対が設けられ、当該各電極対は所定の間隔を隔てて配置されており、
前記測定部は、前記分子が前記各電極対を通過するときのインピーダンスを測定し、
前記演算処理部は、測定したインピーダンス値の測定時間差に基づいて、前記分子の移動速度を算出し、算出した分子の移動速度に基づいて前記電圧を印加するタイミングを制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項24において、
前記流路デバイスは親水性のある絶縁体材料で構成され、
前記サンプルは、前記注入部から前記ナノサイズ流路に毛管現象の作用により導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項24において、
前記サンプルに電圧を印加するための導入用電極対の一方の電極が前記注入部に配置され、他方の電極が前記ナノサイズ流路に配置され、
前記導入用電極対間に電場を生じさせることにより、前記サンプルが前記注入部から前記ナノサイズ流路に導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項24において、
前記注入部及び複数の出力部は、断面の大きさがマイクロメートルオーダーのサイズを有していることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項18において、
前記電圧は交流電圧であることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項32において、
前記分子分離部は、前記ナノサイズ流路側に設けられた電極対又は共通電極からなる所定電極と、前記複数の分岐流路側にそれぞれ設けられた複数の出口電極と、前記所定電極の対又は前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかに電圧を印加するための電圧印加部と、i)前記所定電極の対又はii)前記所定電極と前記複数の出口電極のどれかとの対を選択するためのスイッチング部と、を有し、
前記演算処理部は、前記測定されたインピーダンス値の情報に基づいて、前記の対を選択し前記電圧を印加するように前記分子分離部を制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項33において、
前記ナノサイズ流路には複数の電極対が設けられ、当該各電極対は所定の間隔を隔てて配置されており、
前記測定部は、前記分子が前記各電極対を通過するときのインピーダンスを測定し、
前記演算処理部は、測定したインピーダンス値の測定時間差に基づいて、前記分子の移動速度を算出し、算出した分子の移動速度に基づいて前記電圧を印加するタイミングを制御することを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項32において、
前記流路デバイスは親水性のある絶縁体材料で構成され、
前記サンプルは、前記注入部から前記ナノサイズ流路に毛管現象の作用により導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項32において、
前記サンプルに電場を印加するための導入用電極対の一方の電極が前記注入部に配置され、他方の電極が前記ナノサイズ流路に配置され、
前記導入用電極対間に電場を生じさせることにより、前記サンプルが前記注入部から前記ナノサイズ流路に導入されることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項32において、
前記注入部及び前記複数の出力部は、断面の大きさがマイクロメートルオーダーのサイズを有していることを特徴とするサンプル処理装置。 - サンプルを注入するための注入部と、断面の大きさがナノメートルオーダーのサイズを有し、前記サンプルに含まれる分子を移動させるためのナノサイズ流路と、を含む流路デバイスと、
前記ナノサイズ流路に設置された電極対の電極間に、少なくとも周波数を変化させながら交流電圧を印加する交流電源と、
前記電極対間に前記分子を滞留させて、前記分子の環境を変化させるとともに、前記交流電源の周波数を変えながら前記電極間に交流電圧を印加したときのインピーダンスを測定する測定部と、
前記測定部によって測定されたインピーダンス値に基づいて、前記分子の立体構造又はその動的な変化を検知する演算処理部と、
を備えることを特徴とするサンプル処理装置。 - 請求項38において、
前記交流電源は、前記ナノサイズ流路の電極対間に印加すべき最大電圧値が可変であり、
前記測定部は、前記交流電源の周波数及び最大電圧値を変えながら、前記インピーダンスを測定し、
前記演算処理部は、前記交流電源の周波数及び最大電圧値を変化させたとき、測定したインピーダンス値の変化によって、前記分子の立体構造又はその動的な変化を検知することを特徴とするサンプル処理装置。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108139419A (zh) * | 2015-10-23 | 2018-06-08 | 国立研究开发法人科学技术振兴机构 | 纳米流体设备以及化学分析装置 |
Families Citing this family (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5549120B2 (ja) * | 2009-06-08 | 2014-07-16 | 株式会社日立製作所 | 鉄道車両用の電力変換装置 |
WO2011108540A1 (ja) | 2010-03-03 | 2011-09-09 | 国立大学法人大阪大学 | ヌクレオチドを識別する方法および装置、ならびにポリヌクレオチドのヌクレオチド配列を決定する方法および装置 |
JP6054604B2 (ja) * | 2011-12-20 | 2016-12-27 | 株式会社日立製作所 | マイクロ・ナノ流体解析デバイスおよびその製造方法 |
US9535033B2 (en) | 2012-08-17 | 2017-01-03 | Quantum Biosystems Inc. | Sample analysis method |
WO2014122873A1 (ja) * | 2013-02-08 | 2014-08-14 | ソニー株式会社 | 微小粒子分析装置及び微小粒子分析システム |
BR112015027225B1 (pt) | 2013-04-30 | 2021-11-03 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Dispositivo sensor microfluídico |
GB201312035D0 (en) * | 2013-07-04 | 2013-08-21 | Cytomos Ltd | Biological sensing apparatus |
KR101451383B1 (ko) * | 2013-08-07 | 2014-10-22 | 한국과학기술연구원 | 입자 제어 장치 |
EP3578987A1 (en) | 2013-09-18 | 2019-12-11 | Quantum Biosystems Inc. | Biomolecule sequencing devices, systems and methods |
JP2015077652A (ja) | 2013-10-16 | 2015-04-23 | クオンタムバイオシステムズ株式会社 | ナノギャップ電極およびその製造方法 |
US10438811B1 (en) | 2014-04-15 | 2019-10-08 | Quantum Biosystems Inc. | Methods for forming nano-gap electrodes for use in nanosensors |
TW201602355A (zh) * | 2014-04-28 | 2016-01-16 | 量子生物系統公司 | 奈米間隙電極裝置、系統及其形成方法 |
WO2015170782A1 (en) | 2014-05-08 | 2015-11-12 | Osaka University | Devices, systems and methods for linearization of polymers |
JP6258144B2 (ja) * | 2014-07-18 | 2018-01-10 | 株式会社東芝 | 半導体マイクロ分析チップ |
WO2016087460A1 (en) * | 2014-12-01 | 2016-06-09 | Damien Chaussabel | Quantitating analytes in a flow cell via electrical measurements |
US10875018B2 (en) | 2015-01-30 | 2020-12-29 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Fluid testing chip and cassette |
NZ740697A (en) | 2015-09-30 | 2022-07-01 | Semen Refinement B V | Microfluidic device for selection of semen |
KR101690455B1 (ko) | 2016-03-16 | 2017-01-10 | 한국기계연구원 | 표적세포 포획용 필터 및 이를 이용한 표적세포 회수방법 |
US10983088B2 (en) * | 2016-03-28 | 2021-04-20 | University Of Massachusetts | Coulometric microfluidic sensors using a silver band electrode, and methods thereof |
US11524294B2 (en) | 2016-09-20 | 2022-12-13 | European Molecular Biology Laboratory | Microfluidic sorting devices and methods |
BR112019017671A2 (pt) * | 2017-04-23 | 2020-03-31 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Separação de partículas |
EP3418717A1 (en) * | 2017-06-23 | 2018-12-26 | Cellix Limited | A microfluidic apparatus for separation of particulates in a fluid |
WO2019017875A1 (en) | 2017-07-17 | 2019-01-24 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | DIELECTROPHORESIS SEPARATORS WITH CELL EJECTION DEVICES |
JP2021038923A (ja) * | 2017-11-02 | 2021-03-11 | 株式会社Screenホールディングス | 基板 |
WO2019147289A1 (en) * | 2018-01-29 | 2019-08-01 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Particle categorization |
JP7207394B2 (ja) * | 2018-03-02 | 2023-01-18 | ソニーグループ株式会社 | 微小粒子の吸引条件の最適化方法、微小粒子分取用装置、微小粒子分取用システム及び微小粒子分取用プログラム |
CN114007867B (zh) | 2019-06-25 | 2024-04-16 | 惠普发展公司,有限责任合伙企业 | 具有通道的模制结构 |
US11779918B2 (en) | 2019-12-05 | 2023-10-10 | International Business Machines Corporation | 3D nanochannel interleaved devices |
JP2023509773A (ja) * | 2020-01-13 | 2023-03-09 | ベックマン コールター, インコーポレイテッド | 固体イオン選択電極 |
JP2021156712A (ja) * | 2020-03-26 | 2021-10-07 | 株式会社アドバンテスト | 微粒子測定システム、計測装置 |
CN114425462B (zh) * | 2020-10-29 | 2023-10-31 | 京东方科技集团股份有限公司 | 微流控芯片及其制备方法 |
JP2023006165A (ja) * | 2021-06-30 | 2023-01-18 | 株式会社Screenホールディングス | 流路チップ、及び、分離システム |
CN114873698B (zh) * | 2022-05-31 | 2023-10-20 | 西北农林科技大学 | 具有再生电能的电容去离子及净水装置、分离仓制作方法 |
JP2024045877A (ja) * | 2022-09-22 | 2024-04-03 | Agc株式会社 | マイクロ流路デバイス |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003510034A (ja) * | 1999-08-26 | 2003-03-18 | ザ トラスティーズ オブ プリンストン ユニバーシティ | 流体の静電容量の変化を検出するためのマイクロ流体およびナノ流体電子素子並びに使用方法 |
US20060275911A1 (en) * | 2005-06-03 | 2006-12-07 | Shih-Yuan Wang | Method and apparatus for moleclular analysis using nanostructure-enhanced Raman spectroscopy |
WO2008041718A1 (fr) * | 2006-10-04 | 2008-04-10 | National University Corporation Hokkaido University | Micropuce, et dispositif d'électrophorèse de micropuce |
WO2008079169A2 (en) * | 2006-07-19 | 2008-07-03 | Bionanomatrix, Inc. | Nanonozzle device arrays: their preparation and use for macromolecular analysis |
JP2008532733A (ja) * | 2005-01-25 | 2008-08-21 | マサチューセッツ・インスティチュート・オブ・テクノロジー | 動電学的な濃縮装置及びその使用方法 |
JP2008536124A (ja) * | 2005-04-06 | 2008-09-04 | ザ プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ | カーボンナノチューブコントロールを用いる分子特性解析 |
US20080251382A1 (en) * | 2007-04-10 | 2008-10-16 | Han Sang M | Separation and extreme size-focusing of nanoparticles through nanochannels based on controlled electrolytic ph manipulation |
US20090023146A1 (en) * | 2007-06-22 | 2009-01-22 | Sony Deutschland Gmbh | Device for processing an analyte and a method of processing and/or detecting an analyte using said device |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP3303004B2 (ja) * | 2000-02-09 | 2002-07-15 | スミダコーポレーション株式会社 | 漏洩磁束型高周波トランス |
US6879143B2 (en) * | 2002-04-16 | 2005-04-12 | Motorola, Inc. | Method of selectively aligning and positioning nanometer-scale components using AC fields |
GB0215779D0 (en) | 2002-07-08 | 2002-08-14 | Deltadot Ltd | Material separation device |
JP4546779B2 (ja) | 2004-07-08 | 2010-09-15 | 積水化学工業株式会社 | 微量液体制御装置及びそれを用いた微量液体制御方法 |
JP2007279028A (ja) | 2006-03-13 | 2007-10-25 | Mitsubishi Chemicals Corp | 孔を有する生体物質構造体及びその製造方法、並びに、それを用いた生体物質担持体、対象物質の精製方法、アフィニティークロマトグラフィー用容器、分離用チップ、対象物質の解析方法、対象物質の解析用分離装置、及びセンサーチップ |
CN101301989A (zh) * | 2008-01-22 | 2008-11-12 | 西北工业大学 | 一种微流体驱动与混合结构及其使用方法 |
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Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003510034A (ja) * | 1999-08-26 | 2003-03-18 | ザ トラスティーズ オブ プリンストン ユニバーシティ | 流体の静電容量の変化を検出するためのマイクロ流体およびナノ流体電子素子並びに使用方法 |
JP2008532733A (ja) * | 2005-01-25 | 2008-08-21 | マサチューセッツ・インスティチュート・オブ・テクノロジー | 動電学的な濃縮装置及びその使用方法 |
JP2008536124A (ja) * | 2005-04-06 | 2008-09-04 | ザ プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ | カーボンナノチューブコントロールを用いる分子特性解析 |
US20060275911A1 (en) * | 2005-06-03 | 2006-12-07 | Shih-Yuan Wang | Method and apparatus for moleclular analysis using nanostructure-enhanced Raman spectroscopy |
WO2008079169A2 (en) * | 2006-07-19 | 2008-07-03 | Bionanomatrix, Inc. | Nanonozzle device arrays: their preparation and use for macromolecular analysis |
WO2008041718A1 (fr) * | 2006-10-04 | 2008-04-10 | National University Corporation Hokkaido University | Micropuce, et dispositif d'électrophorèse de micropuce |
US20080251382A1 (en) * | 2007-04-10 | 2008-10-16 | Han Sang M | Separation and extreme size-focusing of nanoparticles through nanochannels based on controlled electrolytic ph manipulation |
US20090023146A1 (en) * | 2007-06-22 | 2009-01-22 | Sony Deutschland Gmbh | Device for processing an analyte and a method of processing and/or detecting an analyte using said device |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108139419A (zh) * | 2015-10-23 | 2018-06-08 | 国立研究开发法人科学技术振兴机构 | 纳米流体设备以及化学分析装置 |
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