JPWO2011065475A1 - ドライアイおよび/または角結膜障害に対する処置に有効な薬剤のスクリーニング方法および該方法によって得られた医薬組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
「ドライアイは、涙液と眼表面の多因子的な疾患であり、その結果として眼表面の潜在的な障害とともに、不快感、視覚障害、涙液層の不安定性などの症状を生じる。それは涙液層の浸透圧の上昇と眼表面の炎症を伴う。」
(1)ウサギにn-ヘプタノール溶液を点眼して角結膜上皮が剥離した角結膜障害モデルウサギを作製すること、および該モデルウサギの眼に被験薬剤を点眼投与して該被験薬剤の角膜組織回復効果を評価することを特徴とする、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害に対する処置に有効な薬剤のスクリーニング方法。
(2)(1)記載のスクリーニング方法によって得られた薬剤を含む、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物。
(3)該薬剤がヒト由来アルブミンである、(2)記載の医薬組成物。
(4)ヒト由来アルブミンを有効成分とする、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物。
(5)ヒト由来アルブミンがヒト血清アルブミンである、(4)記載の医薬組成物。
(6)(1)記載のスクリーニング方法によって得られた薬剤の有効量を、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害を有する患者へ投与することを含む、ドライアイおよび/または角結膜障害処置方法。
(7)ヒト由来アルブミンの有効量を、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害を有する患者へ投与することを含む、ドライアイおよび/または角結膜障害処置方法。
(8)(1)記載のスクリーニング方法によって得られた薬剤の、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物の製造のための使用。
(9)ヒト由来アルブミンのドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物の製造のための使用。
本明細書並びに請求の範囲における「国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害」とは、上記分類に定義されるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/またはこれと同じ徴候または症状のいずれかを示す角結膜障害を意味する。
本明細書並びに請求の範囲における「約」という語は数値とともに用いる場合、+/−30%および+/−20%、好ましくは+/−10%の意味である。
点眼するn-ヘプタノール溶液とはn−ヘプタノール単独あるいはn−ヘプタノールとエタノールとの混合溶液である。親水性を向上させ眼表面になじみやすくし、障害を与えやすくする理由から、n−ヘプタノールとエタノールの混合溶液が好ましい。n-ヘプタノールとエタノールの比率は約9:1から約7:3、好ましくは約8:2である。n-ヘプタノール溶液の点眼量は、総量(約0.01〜約0.1mL、好ましくは約0.03〜約0.05mL)で、角膜、球結膜に行き渡りやすいように数回(2〜4回)に分けて点眼するのが好ましい。
n-ヘプタノール溶液点眼後、強制瞬目(1〜5回、好ましくは2〜4回)させ、次いで数分程度(約0.5〜約5分、好ましくは約1〜約3分)閉眼させると、角結膜上皮が剥離する。本発明によって安定した角結膜障害モデルを作製することができる。
(角結膜障害モデルの作製方法)
ウサギ(std:NZW)にケタミン(10mg/kg)およびキシラジン(4mg/kg)の筋肉内注射による麻酔後、0.4%オキシブプロカイン(2滴/眼)の点眼により眼局所麻酔を施した。ウサギを横臥位にし、片眼ずつ、用時に調製したn-ヘプタノール溶液(n-ヘプタノール:エタノール=8:2)0.04ml(0.01mlを4回)を角膜、球結膜に行き渡るように点眼した後、3回強制瞬目させ、3回目の強制瞬目では2分間閉眼させることにより角結膜障害モデルを作製した。
角結膜障害作製日から、血清あるいは0.3%ヒアルロン酸ナトリウム製剤をそれぞれ1日2回、10日間反復点眼した。各被験薬剤点眼眼の対側眼には生理食塩水を同様に点眼した。1回の点眼容量は、いずれも50μl/眼とした。
血清については、ヒトプール血清(コージンバイオ株式会社(日本))を濾過滅菌(MILLEX GV、PVDF、0.22μm、MILLIPORE)したものを、ドライアイ治療を目的に用いられる自己血清療法における血清点眼液の調製方法に準じ、生理食塩液で5倍希釈して用いた。
0.3%ヒアルロン酸ナトリウム製剤は、ヒアレイン(登録商標)ミニ点眼液0.3%(参天製薬株式会社(日本))を用いた。
角結膜の状態の観察を、n-ヘプタノール処置前(初回投与前日)、処置直後、各投与日の1回目の点眼前、投与4、5および6日目の2回目の点眼後、ならびに最終投与日の翌日に行った。
1%フルオレセイン2μlを点眼し、その2分後にデジタルマイクロスコープ(VHX-900、株式会社キーエンス(日本))を用い、発光部にはコバルトブルーフィルター(FUJI FILTER BPB45)を、レンズ手前にはイエローフィルター(FUJI FILTER SC52)を装着し、角結膜の染色状態の写真撮影および観察を行い、角膜の障害の程度をスコア化した。スコア化は、角膜を5区画(中央、上、耳側、鼻側、下)に分け、各区画のフルオレセイン染色度を3点満点とし、その合計点(15点満点)で評価した。染色度は、無染色が0点、一部染色が1点、3分の2程度までの染色の場合は2点、全面に染色している場合は3点とした。
なお、1%フルオレセインは、フルオレセインナトリウム塩を生理食塩液に溶解させて調製した。
n-ヘプタノール処置後の角膜のフルオレセイン染色スコアを表3に示した。なお、n-ヘプタノール処置前における角膜のフルオレセイン染色スコアは、すべての個体について0点であった。
表3に示すように、血清点眼では、障害処置後4日目において、点眼に対し有意な角膜上皮回復効果がみられた(p<0.05)。
一方、0.3%ヒアルロン酸ナトリウムの点眼では、角膜上皮回復効果はみられなかった。
(試験方法)
角結膜障害モデルの作製方法、被験薬剤の投与、角膜障害の評価は試験例1と同様に行った。
被験薬剤には、0.05%シクロスポリン製剤あるいは陽イオン乳剤を用いた。0.05%シクロスポリン製剤は、Restasis(登録商標)(Allergan, Inc.(米国))を用いた。陽イオン乳剤は、Cationorm(登録商標)(Novagali Pharma SA(フランス))を用いた。
n-ヘプタノール処置後の角膜のフルオレセイン染色スコアを表5に示した。なお、n-ヘプタノール処置前における角膜のフルオレセイン染色スコアは、すべての個体について0点であった。
表5に示すように、0.05%シクロスポリン、陽イオン乳剤の点眼では、いずれにおいても角膜上皮回復効果はみられなかった。
(試験方法)
角結膜障害モデルの作製方法、被験薬剤の投与、角膜障害の評価は試験例1と同様に行った。
被験薬剤には、10% nHSAを用いた。
10% nHSAについては、献血アルブミン-Wf(25%ヒト血清アルブミン製剤、田辺三菱製薬株式会社)を、生理食塩液とほぼ等張となるように塩化ナトリウム溶液で希釈して用いた。
n-ヘプタノール処置後の角膜のフルオレセイン染色スコアを表7に示した。なお、n-ヘプタノール処置前における角膜のフルオレセイン染色スコアは、すべての個体について0点であった。
表7に示すように、10% nHSAの点眼により、障害処置後4、4.5、5、5.5、6および10日目における角膜のフルオレセイン染色スコアは、生理食塩液点眼に対し有意に低値を示し、角膜上皮回復効果がみられた(4、5、5.5、6、10日目:p<0.05、4.5日目:p<0.01)。
Claims (9)
- ウサギにn-ヘプタノール溶液を点眼して角結膜上皮が剥離した角結膜障害モデルウサギを作製すること、および該モデルウサギの眼に被験薬剤を点眼投与して該被験薬剤の角膜組織回復効果を評価することを特徴とする、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害に対する処置に有効な薬剤のスクリーニング方法。
- 請求項1記載のスクリーニング方法によって得られた薬剤を含む、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物。
- 該薬剤がヒト由来アルブミンである、請求項2記載の医薬組成物。
- ヒト由来アルブミンを有効成分とする、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物。
- ヒト由来アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項4記載の医薬組成物。
- 請求項1記載のスクリーニング方法によって得られた薬剤の有効量を、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害を有する患者へ投与することを含む、ドライアイおよび/または角結膜障害処置方法。
- ヒト由来アルブミンの有効量を、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害を有する患者へ投与することを含む、ドライアイおよび/または角結膜障害処置方法。
- 請求項1記載のスクリーニング方法によって得られた薬剤の、国際ドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物の製造のための使用。
- ヒト由来アルブミンのドライアイ研究会2007年報告におけるドライアイ重症度3以上のドライアイおよび/または角結膜障害の処置のための医薬組成物の製造のための使用。
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