JP2003313124A - アポトーシスに起因するドライアイにより生じる眼障害の予防および／または治療のための組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 アポトーシスに起因するドライアイにより生
じる眼障害の予防および／または治療のための組成物を
提供する。 【解決手段】 アポトーシスに起因するドライアイによ
り生じる眼障害の予防および／または治療のための組成
物であって、該組成物が３−ヒドロキシ酪酸および／ま
たはその塩類を有効成分として含有することを特徴とす
る組成物により達成できる。さらには、上記有効成分を
含有する、簡便で且つ効果的な、アポトーシスに起因す
るドライアイにより生じる眼障害、特には角結膜の障害
の予防および／または治療のための組成物により達成で
きる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】 本発明は、アポトーシスに
起因するドライアイにより生じる眼障害の予防および／
または治療のための組成物であって、該組成物が３−ヒ
ドロキシ酪酸および／またはその塩類を有効成分として
含有することを特徴とする組成物に関する。さらに詳し
くは、上記有効成分を含有し、簡便で且つ効果的な、ア
ポトーシスに起因するドライアイにより生じる眼障害、
特には角結膜の障害の予防および／または治療のための
組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】 アポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）
は、細胞の遺伝子に制御された細胞自壊プログラムが発
動することによって起こる細胞死である。このアポトー
シスの特徴は、細胞縮小、クロマチン凝集、クロマチン
ＤＮＡの断片化、アポトーシス小体の出現・細胞断片化
等があり、短時間のうちに進行する能動的な細胞死の形
態であると考えられている。

【０００３】 また、アポトーシスは、生物の発生過程
やホメオスタシスの維持等において必須の現象である
が、自然発生、栄養因子や増殖因子といった諸因子の欠
乏、放射線等の物理的ストレス等により誘導され、その
他にも、例えば細胞培養において、培地より血清を除去
することにより誘導されることも知られている。

【０００４】 現在、このアポトーシスは、様々な疾患
に関与していることが示唆されているが、なかでも、眼
に関する疾患としては、虚血・再灌流による網膜障害、
緑内障、視神経切断、網膜剥離、網膜変性症、白内障、
さらには、近年急速に増加してきた眼障害の１つである
ドライアイもまた、アポトーシスが関与していると考え
られている。

【０００５】 これまで、ドライアイに対する治療法と
しては、主に自覚症状を軽減させる対症療法が行われて
いる。そのような対症療法としては、例えば人工涙液等
（ヒアルロン酸ナトリウム含有人工涙液等）の点眼、涙
点閉鎖、ドライアイ保護用眼鏡の使用といった方法等が
挙げられる。

【０００６】 近年、ドライアイ患者、特に重症ドライ
アイ患者の症状を改善するために、血清を用いる方法が
注目されつつあり、特に患者本人の血清（自己血清）を
用いて治療する方法が注目を浴びつつある。さらに、こ
の自己血清点眼においては、２０％自己血清を点眼する
ことにより、ドライアイ患者の症状改善に、優れた効果
があることが知られている（例えば、非特許文献１参
照）。また、現在では、この自己血清を点眼することに
より、角膜上皮細胞のアポトーシスが抑制されることも
示唆されている（例えば、非特許文献２参照）。

【０００７】 しかしながら、上述した対症療法は、一
時的な症状軽減といった効果はあるものの、ドライアイ
そのものの治療効果はなく、根治的な治療ができるもの
ではなかった。また、血清を用いる方法においては、血
清は保存可能期間が長くはないため、たびたび患者より
採血を行い、血清を得る必要があり、手間がかかること
や、患者自身の負担も大きいといった問題点があった。
さらに、採取した自己血清の管理を十分に行わなければ
ならないといった問題もあった。それゆえ、ドライアイ
患者の症状を改善するにあたり、人工涙液等の点眼とい
った対症療法ではなく、簡便で且つ効果的にドライアイ
により生じる眼障害を治療する点眼剤の開発が待たれて
いる。

【０００８】 また、アポトーシスが関連するドライア
イの治療剤および治療方法が提案されている。そのよう
な例としては、抗Ｆａｓモノクローナル抗体を有効成分
とするドライアイ治療剤が開示されている（例えば、特
許文献１参照）。しかしながら、本発明の有効成分であ
る３−ヒドロキシ酪酸および／またはその塩類が、アポ
トーシスに起因するドライアイにより生じる眼障害の予
防および／または治療に有効であることは知られていな
い。

【０００９】

【特許文献１】特開平１０−１９４９８９号公報

【非特許文献１】Kazuo Tsubota,et al.、「Treatment
of dry eye by autologous serum application in Sjog
ren's syndrome」、Br. J. Ophthalmol.、１９９９年、
８３巻、ｐ３９０−３９５

【非特許文献２】坪田一男、「眼科研究のたのしいアプ
ローチ」、あたらしい眼科、株式会社メディカル葵出
版、２００１年４月３０日、１８巻、４号、ｐ４９１−
４９２

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】 本発明の目的は、ア
ポトーシスに起因するドライアイにより生じる眼障害の
予防および／または治療のための組成物であって、該組
成物が３−ヒドロキシ酪酸および／またはその塩類を有
効成分として含有することを特徴とする組成物を提供す
ることにある。さらに詳しくは、上記有効成分を含有
し、簡便で且つ効果的な、アポトーシスに起因するドラ
イアイにより生じる眼障害、特には角結膜の障害の予防
および／または治療のための組成物を提供することにあ
る。

【００１１】

【課題を解決するための手段】 本発明によれば、本発
明の上記目的および利点は、以下により達成される。 （１）アポトーシスに起因するドライアイにより生じる
眼障害の予防および／または治療のための組成物であっ
て、該組成物が３−ヒドロキシ酪酸および／またはその
塩類を有効成分として含有することを特徴とする組成
物。 （２）３−ヒドロキシ酪酸がＤ−体であることを特徴と
する上記（１）記載の組成物。 （３）３−ヒドロキシ酪酸の塩類が、ナトリウム塩、カ
リウム塩、Ｌ−リジン塩、Ｌ−ヒスチジン塩およびＬ−
アルギニン塩からなる群より選ばれる少なくとも１種で
ある上記（１）または上記（２）記載の組成物。 （４）３−ヒドロキシ酪酸および／またはその塩類の濃
度が、０．１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌである上記（１）
〜上記（３）のいずれかに記載の組成物。 （５）３−ヒドロキシ酪酸および／またはその塩類の濃
度が、１〜１５０ｍｍｏｌ／Ｌである上記（１）〜上記
（４）のいずれかに記載の組成物。 （６）ドライアイにより生じる眼障害が、角結膜の障害
である上記（１）〜上記（５）のいずれかに記載の組成
物。

【００１２】

【発明の実施の形態】 本発明において、有効成分とし
て用いられる３−ヒドロキシ酪酸は、生体成分として知
られており、肝臓で脂肪酸が酸化されることにより生成
され、末梢組織においてエネルギー源として用いられる
ことが知られている（山科郁男監修、「レーニンジャー
の新生化学（上）」、第２版、廣川書店、１９９３年４
月１５日、ｐ６２５−６２６参照）。３−ヒドロキシ酪
酸の化学構造式のＣ３位の立体配置に関しては、Ｄ−
体、Ｄ，Ｌ−ラセミ体およびＬ−体が知られている。本
発明においては、これら全てを使用することができる
が、アポトーシスに起因するドライアイにより生じる眼
障害の予防および／または治療の上で、これらのうちＤ
−体が最も好ましい。また、３−ヒドロキシ酪酸の塩類
は、好ましくは、ナトリウム塩、カリウム塩、Ｌ−リジ
ン塩、Ｌ−ヒスチジン塩およびＬ−アルギニン塩からな
る群より少なくとも１種が適宜選択される。これら３−
ヒドロキシ酪酸および／またはその塩類は、適宜単独で
あるいは２種類以上併用することができる。本発明の組
成物における３−ヒドロキシ酪酸および／またはその塩
類の濃度は、患者の年齢や症状、またその用途に応じて
０．１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌ、より好ましくは０．５
〜５００ｍｍｏｌ／Ｌ、さらには１〜１５０ｍｍｏｌ／
Ｌの範囲にあるのが特に好ましい。

【００１３】 本発明において、有効成分である３−ヒ
ドロキシ酪酸は、アポトーシスに起因するドライアイに
より生じる眼障害の予防および／または治療に対して有
効である。さらに詳しくは、上記有効成分を含有する本
発明の組成物は、アポトーシスに起因するドライアイに
より生じる眼障害、特には角結膜の障害の予防および／
または治療に対して有効である。

【００１４】 本発明の組成物は、経口的（錠剤、顆粒
等）にあるいは非経口的（点眼剤、点滴剤等）に適宜使
用される。本発明の組成物からなる製剤の形態として
は、例えば、点眼剤、点滴剤、注射剤、眼軟膏剤、錠
剤、顆粒、散剤、カプセル剤等が挙げられ、いずれも公
知の方法で適宜調製することができる。これら製剤には
通常用いられる等張化剤、緩衝剤、安定化剤、防腐剤、
粘稠剤、ｐＨ調整剤、賦形剤、結合剤、分散剤、再吸収
促進剤、界面活性剤、溶解補助剤、乳化剤、保湿剤、着
色剤、香料、有機溶媒（例えばアルコール類、油類）、
シリコーン類、重合体、固体脂肪物質（例えばワックス
類）等を含有することができ、用途に応じて適宜選択
し、調製することができる。

【００１５】 本発明の組成物は、上記に挙げた製剤の
形態のなかでも、特に眼に対して局所投与する上で、点
眼剤または眼軟膏剤とするのが好ましく、さらには、点
眼剤とするのがより好ましい。

【００１６】 例えば、本発明の組成物を点眼剤とする
場合には、点眼剤の安定性およびさし心地の良さを得る
ことを目的として、必要に応じて等張化剤、緩衝剤、安
定化剤、粘稠剤、ｐＨ調整剤等を含有することができ
る。なお、これらの成分は単独であるいは２種類以上適
宜含有することができ、多くの場合その方が好ましい。

【００１７】 本発明の組成物を点眼剤とする場合に含
有することができる等張化剤としては、一般に点眼剤と
して用いられているものであれば特に差し支えない。等
張化剤は本発明の組成物を点眼剤とする場合に、該点眼
剤の浸透圧を調製する目的等で含有することができる。
そのような等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウ
ム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム
および硫酸マグネシウム等からなるアルカリまたはアル
カリ土類金属塩の如き無機塩、およびグルコース、マン
ニトール、ソルビトール、キシリトールおよびデキスト
ラン等の糖質等が挙げられる。これらは単独であるいは
２種類以上併用することができる。これら等張化剤の濃
度としては、０．００１〜５ｗ／ｖ％であるのが好まし
く０．０１〜３ｗ／ｖ％であるのがより好ましい。

【００１８】 本発明の組成物を点眼剤とする場合に含
有することができる緩衝剤としては、一般に点眼剤とし
て用いられているものであれば特に差し支えない。緩衝
剤は本発明の組成物を点眼剤とする場合に、該点眼剤の
ｐＨを安定化する目的等で含有することができる。その
ような緩衝剤としては、例えば、リン酸一水素二ナトリ
ウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸一水素二カリウ
ムおよびリン酸二水素カリウムの如きリン酸系緩衝剤、
ホウ酸およびホウ酸ナトリウムの如きホウ酸系緩衝剤な
らびにトリスアミノメタンと希塩酸およびトリスマレー
トと希カセイソーダ液の如きトリス系緩衝剤等が挙げら
れる。これらは単独であるいは２種類以上併用すること
ができる。これら緩衝剤の濃度としては、０．００１〜
５ｗ／ｖ％であるのが好ましく、０．０１〜１ｗ／ｖ％
であるのがより好ましい。

【００１９】 本発明の組成物を点眼剤とする場合に含
有することができる安定化剤としては、一般に点眼剤と
して用いられているものであれば特に差し支えない。安
定化剤は本発明の組成物を点眼剤とする場合に、該点眼
剤の有効成分を安定化する目的等で含有することができ
る。そのような安定化剤としては、例えばエチレンジア
ミン四酢酸二ナトリウム、クエン酸およびクエン酸塩等
が挙げられる。これらは単独であるいは２種類以上併用
することができる。これら安定化剤の濃度としては、
０．００１〜５ｗ／ｖ％であるのが好ましく、０．０１
〜１ｗ／ｖ％であるのがより好ましい。

【００２０】 本発明の組成物を点眼剤とする場合に含
有することができる粘稠剤としては、一般に点眼剤とし
て用いられているものであれば特に差し支えない。粘稠
剤は本発明の組成物を点眼剤とする場合に、該点眼剤の
粘度を調製する目的等で含有することができる。そのよ
うな粘稠剤としては、例えば、グリセリン、エチレング
リコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコ
ールおよびポリビニルアルコールなどのポリオール類、
トレハロース、シュクロース、カルボキシメチルセルロ
ース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルメチルセルロースおよびシクロデキストリン等の糖質
類、カルボキシビニルポリマー、クエン酸塩およびエデ
ト酸塩等のポリカルボン酸／塩等が挙げられ、その他ヒ
アルロン酸塩、ポビドン等も含有することができる。こ
れらは単独であるいは２種類以上併用することができ
る。これら粘稠剤の濃度としては、０．００１〜１０ｗ
／ｖ％であるのが好ましく、０．０１〜５ｗ／ｖ％であ
るのがより好ましい。

【００２１】 本発明の組成物を点眼剤とする場合に含
有することができるｐＨ調整剤としては、一般に点眼剤
として用いられているものであれば特に差し支えない。
ｐＨ調整剤は本発明の組成物を点眼剤とする場合に、該
点眼剤のｐＨを調製する目的等で含有することができ
る。そのようなｐＨ調整剤としては、例えば、塩酸、ク
エン酸またはその塩、ホウ酸またはその塩、リン酸また
はその塩、酢酸またはその塩、酒石酸またはその塩、水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム等が挙げられる。これ
らは単独であるいは２種類以上併用することができる。
本発明の組成物は、これらｐＨ調整剤を適量添加し、目
的のｐＨに調製する。

【００２２】 一方、本発明の組成物を点眼剤とする場
合には防腐剤を含有することもできる。その際、含有す
ることができる防腐剤としては、一般に点眼剤として用
いられているものであれば特に差し支えない。防腐剤は
本発明の組成物を点眼剤とする場合に、該点眼剤に防腐
効果を持たせる目的等で含有することができる。そのよ
うな防腐剤としては、例えばエチルパラベン、ブチルパ
ラベン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、
グルコン酸クロルヘキシジン、クエン酸およびホウ酸等
が挙げられる。これらは単独であるいは２種類以上併用
することができる。これら防腐剤の濃度としては、０．
０００１〜０．１ｗ／ｖ％であるのが好ましく、０．０
０１〜０．０５ｗ／ｖ％であるのがより好ましい。

【００２３】 しかしながら、一般にドライアイにより
生じる眼障害がある場合には、防腐剤を含有する点眼剤
を点眼することにより、さらに眼障害が悪化する可能性
があるため、防腐剤は含有しない方がより好ましい。ま
た、眼に障害を生じていない場合であっても、頻回点眼
を必要とする場合には、同様に防腐剤により眼に障害を
生じる可能性があるため、防腐剤を含有しない方がより
好ましい。なお、防腐剤を含有しない場合には、本発明
の点眼剤を１回の使用で使い捨てるタイプの容器、いわ
ゆる「ディスポ容器」に充填するのが好ましい。

【００２４】 また、本発明の組成物を点眼剤とする場
合には、その他の成分として、眼科用剤として一般に用
いられる抗ヒスタミン剤、血管収縮剤、消炎・収斂剤、
潤滑剤、アミノ酸、抗アレルギー剤、ビタミン類、サル
ファ剤、局所麻酔剤および縮瞳剤等を含有することもで
きる。なお、これらの成分を含有する際には、患者の年
齢や症状等に応じて、有効成分である３−ヒドロキシ酪
酸の効果に影響がでない成分・濃度とする必要がある。

【００２５】 また、本発明の組成物を点眼剤とする場
合には、各種成分を組み合わせてｐＨ範囲をｐＨ５〜８
とするのが好ましい。ｐＨ５以下の酸性またはｐＨ８以
上のアルカリ性領域では眼刺激や眼障害を生じる可能性
があるので好ましくない。また、浸透圧については、眼
に対して安全であるように、１５０〜７００ｍＯｓｍ．
の範囲とするのが好ましい。

【００２６】 本発明の組成物を点眼剤とする場合に
は、眼科的に供与される範囲内であれば投与量が特に制
限されるものではなく、通常、１回につき１〜３滴を１
日数回程度投与するのが好ましい。

【００２７】

【実施例】 以下、本発明を実施例および比較例により
具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるもの
ではない。

【００２８】 実施例１ ラットドライアイモデルを用いて、本発明の有効成分で
あるＤ−３−ヒドロキシ酪酸（以下、ＨＢＡと略す）の
ドライアイにより生じる眼障害に対する効果を調べた。

【００２９】 ラットドライアイモデルは以下のように
して作製した。まず、８週齢の雄性ＳＤラットを、通常
環境下（温度：２３±２℃、相対湿度６０±１０％）に
て１週間馴化した。馴化後、ＳＤラットの角膜上皮中央
部を約０．４ｍｍ ^２程度円状に剥離した。その剥離した
ＳＤラットを乾燥環境下（温度：２３±２℃、相対湿
度：２８±２％）にて飼育し、さらにその間においては
ラットに向けて扇風機にて風速２〜４ｍ／ｓの送風を行
った。この方法により、ドライアイ症状に近いラットド
ライアイモデルを作製することができた。

【００３０】 上記方法にて作製したラットドライアイ
モデルを用い、４０ｍｍｏｌ／Ｌおよび８０ｍｍｏｌ／
ＬのＨＢＡをリン酸緩衝溶液（以下ＰＢＳと略す）に溶
解した点眼液（浸透圧３００ｍＯｓｍ．、ｐＨ７．
４）、０．３％ヒアルロン酸ナトリウム配合の医薬品Ａ
（以下、医薬品Ａと略す）、２０％ラット血清溶液、Ｐ
ＢＳ（浸透圧３００ｍＯｓｍ．、ｐＨ７．４）を用い
て、それぞれの点眼液の角膜上皮剥離面積拡大抑制効果
について調査した。なお、点眼においては、各ラットド
ライアイモデルの左眼にコントロールとしてＰＢＳを点
眼し、同個体の右眼に各種の点眼液を点眼した。また、
点眼は各点眼液を１０μＬずつとした。

【００３１】 各種の点眼液は、ラットドライアイモデ
ル作成直後に１回目の点眼を行い、その後１時間おき
に、計１２回点眼を行った。最後の点眼から１時間後
に、ラット前眼部に１％フルオレセインナトリウムを点
眼し、強制的に瞬目させた後、０．９％塩化ナトリウム
１ｍＬで前眼部を２回洗浄し、余分なフルオレセインナ
トリウムを洗い流した。その後、コバルトブルーライト
をあて、写真撮影を行った。撮影した写真をスキャナー
にて取り込み、画像処理ソフト（Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ；
Ａｄｏｂｅ社製、ＮＩＨ Ｉｍａｇｅ；ＮＩＨ製）を用
いて解析し、フルオレセイン染色面積（ｐｉｘｅｌ数）
を求めた。その面積を換算式（１ｐｉｘｅｌ＝０．００
１３３ｍｍ^２）にて換算し、換算後の値を角膜上皮剥離
面積とした。その結果を表１および表２に示す。なお、
１つの処理につき各１２個体を用い、さらにその角膜上
皮剥離面積について、左眼と右眼での検定を行った。検
定は、対応のあるｔ検定を行った。また、表中の値は、
平均値±標準偏差で示した。

【００３２】

【表１】

【００３３】

【表２】

【００３４】 上記の結果より、左眼をＰＢＳ、右眼を
点眼なしとしたＮｏ．１においては、検定においては有
意差はなかった。また、右眼をヒアルロン酸製剤である
医薬品Ａで点眼したＮｏ．４においては、医薬品ＡとＰ
ＢＳにおいて有意差は見られなかった。一方、右眼を４
０ｍｍｏｌ／Ｌ ＨＢＡで点眼したＮｏ．２において
は、ＰＢＳに比べて有意に角膜上皮剥離面積拡大を抑制
しており、さらに右眼を８０ｍｍｏｌ／Ｌ ＨＢＡで点
眼したＮｏ．３においても、ＰＢＳに比べて有意に角膜
上皮剥離面積拡大を抑制することが示された。

【００３５】 また、Ｎｏ．３、Ｎｏ．４および２０％
血清溶液を用いたＮｏ．５のそれぞれで左眼（ＰＢＳを
点眼）の角膜上皮剥離面積と、右眼（各種の点眼液を点
眼）の角膜上皮剥離面積とを比較した。その結果、ヒア
ルロン酸製剤である医薬品Ａでは、左眼に比べ８５．７
％（１４．３％の抑制）であったのに対し、８０ｍｍｏ
ｌ／Ｌ ＨＢＡでは、左眼に比べ６５．４％（３４．６
％の抑制）であった。また、２０％血清では、左眼に比
べ５３．６％（４６．４％の抑制）であった。これらの
結果より、Ｄ−３−ヒドロキシ酪酸は、ドライアイによ
り生じる眼障害を抑制する効果、特には角結膜の障害を
治療する効果を有しており、現在、対処療法として用い
られているヒアルロン酸製剤の点眼よりも優れた効果を
示した。また、血清点眼よりは若干劣るものの、その有
用性は確保され、本発明の有効成分であるＤ−３−ヒド
ロキシ酪酸は、ドライアイにより生じる眼障害の予防お
よび／または治療、特には角結膜の障害の予防および／
または治療のための組成物として有用であることが分か
った。

【００３６】 実施例２ アポトーシスに起因するドライアイにより生じる眼障害
において、このアポトーシスに特徴的なクロマチン凝集
について、ＨＢＡを用いて調査した。なお、本実施例は
下記の方法にて行った。 実施例１に示した方法にてラットドライアイモデルを
作製し、該モデル作製直後に１回目の点眼を行い、その
後１時間おきに、計６回点眼を行った。なお、点眼液
は、８０ｍｍｏｌ／Ｌ ＨＢＡ溶液（浸透圧３００ｍＯ
ｓｍ．、ｐＨ７．４）およびＰＢＳ（浸透圧３００ｍＯ
ｓｍ．、ｐＨ７．４）を使用した。また、点眼は各点眼
液を１０μＬずつとした。 最後の点眼を行った後、各ラットドライアイモデルの
角膜上皮細胞を採取し、該細胞にＨｏｅｃｈｓｔ３３３
４２（以下Ｈｏと略す）色素をＰＢＳに溶解し１０μｇ
／ｍＬとした溶液を、ｗｅｌｌあたり１００μＬ加え
て、ＣＯ_２インキュベータ内にて３０分間インキュベー
トした。 溶液を回収し、蛍光プレートリーダー（Ａｐｐｌｉｅ
ｄ Ｂｉｏ Ｓｙｓｔｅｍｓ社製）にて、励起波長３６
０ｎｍ、蛍光波長４５０ｎｍにおける各溶液の蛍光強度
を測定した。 測定後のサンプルを回収し、ＰＢＳで細胞を洗浄後、
ニュートラルレッド（以下Ｎｒと略す）を１９９培地
（日水製薬社製）に溶解し０．００５％とした溶液を、
ｗｅｌｌあたり２００μＬ加えて、ＣＯ_２インキュベー
タ内にて３時間インキュベートした。 染色液を除去し、ＰＢＳで細胞を２回洗浄した後、室
温にて１５分間、着色した細胞を１％酢酸・５０％エタ
ノール溶液で処理し、Ｎｒを抽出した。 抽出液を蛍光プレートリーダー（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂ
ｉｏ Ｓｙｓｔｅｍｓ社製）にて、励起波長５３５ｎ
ｍ、蛍光波長６００ｎｍにおける各溶液の蛍光強度を測
定した。 各溶液（Ｈｏ液およびＮｒ液）の蛍光強度からブラン
クとして求めた各溶液の蛍光強度（Ｈｏ液のみおよびＮ
ｒ液のみで測定した値）を引いたものをＨｏ値およびＮ
ｒ値とした。 無処置群のＨｏ値およびＮｒ値の平均値を１．０とし
た場合の、処置群の各個体のＨｏ相対値およびＮｒ相対
値を算出した。 Ｈｏ相対値をＮｒ相対値で割り、各個体のＨｏ／Ｎｒ
ｒａｔｉｏを求めた。 上記の方法に従って行った結果を図１に示す。ここで、
Ｈｏ／Ｎｒ値は単位細胞あたりのクロマチン凝集度を示
す。また、無処置群ではＨｏ／Ｎｒ値は１．０となり、
１．０より値が大きくなると、アポトーシスに起因する
ドライアイにより生じる眼障害が、拡大していることを
示している。さらに、１．０より値が小さくなると、ネ
クローシス（壊死）が起こっていることを示す。

【００３７】 図１に示した結果より、８０ｍｍｏｌ／
Ｌ ＨＢＡ溶液を点眼したラットドライアイモデルの角
膜上皮細胞は、ＰＢＳを点眼したラットドライアイモデ
ルの角膜上皮細胞と比べて、有意に単位細胞あたりのク
ロマチン凝集度が少ないことから、ＨＢＡは、ドライア
イにより生じる眼障害において見られるアポトーシスに
よる細胞死を抑制していることが分かった。すなわち、
本発明の有効成分であるＤ−３−ヒドロキシ酪酸は、ア
ポトーシスに起因するドライアイにより生じる眼障害の
予防および／または治療、特には角結膜の障害の予防お
よび／または治療のための組成物として有用であること
が分かった。

【００３８】

【発明の効果】 本発明の組成物は、３−ヒドロキシ酪
酸および／またはその塩類を有効成分として含有するこ
とにより、アポトーシスに起因するドライアイにより生
じる眼障害の予防および／または治療をすることができ
る。さらには、上記有効成分を含有することにより、簡
便で且つ効果的に、アポトーシスに起因するドライアイ
により生じる眼障害、特には角結膜の障害の予防および
／または治療をすることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 ＨＢＡおよびＰＢＳ点眼処理後のラットドラ
イアイモデルにおける角膜上皮細胞のクロマチン凝集度
を示したグラフである。

フロントページの続き (72)発明者 坪田 一男 千葉県船橋市西船５丁目26番７号 (72)発明者 樋口 明弘 千葉県柏市西山１丁目15番５号 Ｆターム(参考） 4C206 DA02 KA13 MA01 MA04 MA78 NA14 ZA33

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 アポトーシスに起因するドライアイによ
   り生じる眼障害の予防および／または治療のための組成
   物であって、該組成物が３−ヒドロキシ酪酸および／ま
   たはその塩類を有効成分として含有することを特徴とす
   る組成物。
2. 【請求項２】 ３−ヒドロキシ酪酸がＤ−体であること
   を特徴とする請求項１記載の組成物。
3. 【請求項３】 ３−ヒドロキシ酪酸の塩類が、ナトリウ
   ム塩、カリウム塩、Ｌ−リジン塩、Ｌ−ヒスチジン塩お
   よびＬ−アルギニン塩からなる群より選ばれる少なくと
   も１種である請求項１または請求項２記載の組成物。
4. 【請求項４】 ３−ヒドロキシ酪酸および／またはその
   塩類の濃度が、０．１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌである請
   求項１〜請求項３のいずれかに記載の組成物。
5. 【請求項５】 ３−ヒドロキシ酪酸および／またはその
   塩類の濃度が、１〜１５０ｍｍｏｌ／Ｌである請求項１
   〜請求項４のいずれかに記載の組成物。
6. 【請求項６】 ドライアイにより生じる眼障害が、角結
   膜の障害である請求項１〜請求項５のいずれかに記載の
   組成物。