CN103037857B - 用于治疗/预防眼部炎性疾病的化合物 - Google Patents

用于治疗/预防眼部炎性疾病的化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN103037857B
CN103037857B CN201180037311.XA CN201180037311A CN103037857B CN 103037857 B CN103037857 B CN 103037857B CN 201180037311 A CN201180037311 A CN 201180037311A CN 103037857 B CN103037857 B CN 103037857B
Authority
CN
China
Prior art keywords
amino
eye
tresperimus
compound
uveitis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201180037311.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN103037857A (zh
Inventor
乔斯林·安纳特
埃莱娜-塞利娜·于盖
奥利维耶·拉孔瓦
路卡·赖布莱顿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Laboratories Fournier SAS
Original Assignee
Laboratories Fournier SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from FR1056290A external-priority patent/FR2963238B1/fr
Application filed by Laboratories Fournier SAS filed Critical Laboratories Fournier SAS
Publication of CN103037857A publication Critical patent/CN103037857A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103037857B publication Critical patent/CN103037857B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/20—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A61K9/0051—Ocular inserts, ocular implants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/14—Decongestants or antiallergics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/12—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及式（I）化合物及其药学上可接受的盐在治疗或预防眼部炎性疾病、特别是在治疗和/或预防葡萄膜炎、重度结膜炎、干眼综合征或糖尿病性视网膜病方面的用途。

Description

用于治疗/预防眼部炎性疾病的化合物
技术领域
本发明涉及如下定义的式（I）化合物的新的治疗用途。
具体来说，本发明涉及这些化合物衍生物及其药学上可接受的盐在治疗和/或预防眼部炎性疾病、特别是葡萄膜炎、重度结膜炎（春季角结膜炎）、干眼综合征（干燥性角结膜炎）或糖尿病性视网膜病方面的用途。
背景技术
眼部炎性疾病是世界范围内视力变化的主要原因。
更确切地说，葡萄膜炎是指葡萄膜的炎症，葡萄膜是眼球壁富含血管的中层，由虹膜、睫状体和脉络膜组成。葡萄膜的炎症导致各种创伤性损伤和免疫介导的损伤。
结膜炎包括以肿胀、发痒或灼烧感、或者结膜呈红色为特征的疾病，结膜为覆盖眼白的膜。结膜炎的病因包括感染性和非感染性结膜炎。对于细菌或病毒感染的情况，结膜炎通常是急性的；对于过敏的情况，结膜炎通常是慢性的。
干眼综合征为最普遍的眼科疾病之一。又称干燥性角结膜炎（KCS）。其以眼部刺激症状为特征，并可导致视力模糊，这些症状加大了角膜感染和溃烂的风险。尽管广泛认为干眼症与眼表炎症有关，然而干眼症的发病机理还并不十分清楚。
糖尿病性视网膜病由慢性高血糖引发，并导致毛细管损害与功能性变化，如水肿与局部缺血。激光光凝术仍是治疗护理标准（standardofcaretreatment），且玻璃体切除术在视网膜脱离的情况下使用。（雷珠单抗（ranibizumab））被用于治疗黄斑水肿。
对于患有葡萄膜炎、重度结膜炎和干眼综合征的受试者的主要治疗方式在于局域（locally）或全身给予的皮质类固醇。然而无论通过全身途径还是通过局域途径，皮质类固醇都具有严重的副作用，如可的松诱发的白内障或青光眼、二次感染以及延缓伤口愈合。
也存在非甾族抗炎药，例如双氯芬酸或氟比洛芬。然而，许多受试者对甾族或非甾族疗法不响应或变得难治。
还存在抗代谢药物如硫唑嘌呤和甲氨蝶呤，具有血液毒性和肝脏毒性，所述抗代谢药物实质上用来治疗顽固性和非常严重的葡萄膜炎；免疫抑制剂如由口服途径给药的环孢素A和他克莫司也显出许多副作用，例如肾损害的风险、淋巴增殖综合征与恶性皮肤病的风险增高。为了限制这些副作用，这些免疫抑制剂可通过局部途径（tropicalroute）使用，然而这些化合物由于其大环结构而不溶于水介质。其尤其以油辅料（oilvehicles）配制，所述油辅料具有刺激性、产生疼痛以及使视力模糊等缺点。这些化合物总的来说不能被受试者充分接纳。
本发明通过提供一种或多种式（I）化合物及其药学上可接受的盐的新用途、尤其是在治疗和/或预防眼部炎性疾病（如葡萄膜炎、重度结膜炎、干眼综合征或糖尿病性视网膜病）方面的用途，克服了现有技术的缺点。
此外，本发明提供包含式（I）化合物的水性药物组合物，所述组合物可抵达眼后房。这代表了治疗眼部炎性疾病方面巨大的进步。
而且，本发明的化合物对系统免疫反应几乎没有影响或完全无影响，因此显著限制了与给予所述化合物相关的潜在副作用。
发明内容
本文所基于的预料不到的结果证明，式（I）化合物（此后称为“本发明的化合物”）及其药学上可接受的盐在局域给药时能够改善葡萄膜炎模型的临床症状，并尤其是保护血眼屏障（bloodocularbarrier）以及前后房的眼部组织而不改变系统免疫反应。本发明的化合物同样可用于治疗重度结膜炎、干眼综合征以及糖尿病性视网膜病。
本发明的化合物及其药学上可接受的盐、尤其是曲培莫司（tresperimus）和阿尼莫司（anisperimus）在不同药理学模型中获得的有益效果表明，这些化合物能够诱导对眼部巨噬细胞活化以及由T淋巴细胞介导的响应所进行的调节。
本发明的化合物及其药学上可接受的盐具有直线型结构，在水性介质中可溶并保持稳定，因此能够以水性制剂局域给药，而水性制剂是完全生物相容的，不会导致刺激或视力模糊。
根据第一方面，本发明因此涉及本发明的化合物及其药学上可接受的盐、尤其是曲培莫司和阿尼莫司在制备药物方面的用途，所述药物用于治疗和/或预防眼部炎性疾病、尤其是葡萄膜炎、重度结膜炎、干眼综合征或糖尿病性视网膜病。
根据第二方面，本发明提供治疗和/或预防眼部炎性疾病、尤其是葡萄膜炎、重度结膜炎、干眼综合征或糖尿病性视网膜病的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，本发明的化合物或其药学上可接受的盐是曲培莫司或阿尼莫司。本发明的化合物可以滴眼剂、通过眼内或眼周途径注射的溶液、或者可植入体系进行给药。
本发明的化合物及其药学上可接受的盐、尤其是曲培莫司和阿尼莫司尤其用于治疗和/或预防葡萄膜炎、干眼综合征或糖尿病性视网膜病。
根据第三方面，本发明涉及药物组合物的适当制剂，所述药物组合物包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐作为唯一活性物质，从而向患有眼部炎性疾病的受试者提供局域给药；本发明更确切地涉及适于局域给药的药学上可接受的水性制剂。
根据第四方面，本发明的化合物（尤其是曲培莫司和阿尼莫司）及其药学上可接受的盐可与抗VEGF剂、抗TNF剂、皮质类固醇、非甾族抗炎药、抗生素或免疫抑制剂联合给药。
通过参考说明书以下部分和权利要求书，可进一步理解本发明的本质与优点。
附图说明
图1显示注射曲培莫司对大鼠临床实验的自身免疫性葡萄膜炎（EAU）的效果。
图2显示相比于注射盐溶液（B）的大鼠，在用曲培莫司（C）处理的大鼠体内进行玻璃体内（IVT）曲培莫司注射对于EAU组织病理学评分（A）以及EAU组织病理学变化的影响。a、b、d、e=光感受器层；c、f＝视神经乳头。
图3显示在通过玻璃体内注射进行处理的大鼠体内，曲培莫司在S-抗原特异性的迟发型超敏反应（DTH）方面的效果。
图4显示以1%曲培莫司溶液眼内滴注4日、每日2次后，雄性新西兰兔中曲培莫司的眼部分布情况。
图5显示曲培莫司在滴注处理后对由LPS（脂多糖）诱发的葡萄膜炎的临床征象的效果。
图6显示在由LPS诱发的葡萄膜炎中，曲培莫司在滴注处理后对渗透的炎性细胞的数量的影响。
图7显示曲培莫司对由酚红试验测定的泪液体积的影响。
图8显示曲培莫司对由泪膜破裂时间测定的泪膜稳定性的影响。
图9显示曲培莫司对在玻璃体内产生MCP-1和IL-6的影响。
图10显示曲培莫司对不同频率的假性振荡的振幅的影响。
具体实施方式
除非另有说明，否则本文中使用的所有科技术语与本发明所属领域技术人员所通常理解的术语具有相同含义。此外，提供以下定义以辅助读者实施本发明。
“受试者”优选为哺乳动物，更优选为人。
本文中使用的术语“用于治疗和/或预防”可理解为涵盖直接使用所述化合物或其盐来治疗和/或预防特定疾病。
“预防和/或治疗的方法”可理解为涵盖了给予化合物或衍生物或其盐以治疗和/或预防特定疾病的方法。
“眼部炎性疾病”为影响眼部或眼周组织任何部分的炎症的上位概念。涉及眼部的炎症可包括从熟知的过敏性枯草热结膜炎到可能导致失明的罕见病症，例如重度结膜炎（春季角结膜炎）、葡萄膜炎、巩膜炎、表层巩膜炎、视神经炎、角膜炎、眼眶炎性假瘤、视网膜血管炎、干眼综合征、糖尿病性视网膜病、以及年龄相关性黄斑变性（AMD）、对眼部组织（即视网膜）有损害的全身性疾病的眼部表现，最终可导致失明。炎症发生的部位决定了眼部炎性疾病的诊断名称。眼部炎性疾病可由多种原因导致。
根据本发明，葡萄膜炎为非传染性，并且源于药物诱导的创伤原因、免疫介导原因、恶性原因、或眼科术后原因。
本发明的药物组合物也可于导致眼部炎症的眼科手术后使用，所述眼科手术例如角膜移植。
“葡萄膜炎”指葡萄膜的炎症，葡萄膜为眼球壁富含血管的中层，包含虹膜、睫状体和脉络膜。葡萄膜炎按照其部位、临床过程及其偏侧性（laterality）分类。
“前葡萄膜”指的是包括虹膜、角膜、瞳孔、眼房水或睫状体。例如，川崎氏病可以被称为前葡萄膜炎。
“中间葡萄膜”指的是玻璃体、睫状体平坦部（parsplana）、外周视网膜以及巩膜。
“后葡萄膜”指的是脉络膜或视网膜，引申开来还有中心凹（fovea）和视神经。在非感染性后葡萄膜炎中，可提到Behcet病、Vogt-小柳原田病、睫状体平坦部炎、类肉状瘤病、特发性视网膜血管炎以及多病灶视网膜脉络膜炎。
“全葡萄膜炎”这一概念在累及两个或更多部分时使用。
根据本发明，结膜炎为非传染性的，且主要源于严重的眼部过敏；结膜炎有时可导致溃疡，溃疡总是包含重要且明确的视力丧失的风险。
过敏性结膜炎是结膜（覆盖眼球和眼睑内侧的细膜）的炎性反应。眼部可因此发红、刺痛、烧灼、发痒、刮伤和流泪。难以忍受光照（畏光）。有时发现，眼睑经常红肿，并且结膜肿胀（结膜水肿）、或甚至眼部外形更深的痕迹或严重的粘液分泌。结膜炎几乎不影响角膜。它是眼部过敏的更频繁、但可能相对不严重的形式。这一I型反应经常是春夏季节大量花粉（树和草的花粉）的结果。术语“过敏性角结膜炎”在损害不仅涉及结膜、也涉及角膜时使用。
还有其他更罕见、更特殊也更严重的过敏类型，有时为I型过敏反应（typeIsensitivity）与IV型过敏反应的组合。例如春季性结膜炎是一种严重类型的眼部过敏，这是因为其有时导致溃疡，溃疡通常包含重要且明确的视力丧失的风险。这些溃疡经常位于角膜上部，并在结膜、尤其是上眼睑处形成乳头状突起（papillae）。
类似于葡萄膜炎，重度结膜炎可用皮质类固醇、非甾族抗炎药或免疫抑制剂治疗。
“干眼综合征或干燥性角结膜炎或眼部干燥”指的是所有由泪腺分泌的泪液在质或量方面不足导致的眼部病理。在本发明中，干眼综合征还涉及所有所有形式的泪液不足（包括自身免疫综合征和非综合征的泪液不足）以及蒸发过强型（evaporativeforms）。干眼症也被称为泪液功能单元损伤，所述泪液功能单元是包含泪腺、眼表（角膜、结膜和睑板腺）和眼睑、以及连接它们的感觉神经的综合系统。
“糖尿病性视网膜病”指的是由于慢性的高血糖造成的视网膜及脉络膜微循环的损害（损坏器官为视网膜、脉络膜、视乳头和虹膜）。存在两种类型：单纯性（或非增殖性）和增殖性。
在某些情况下显出视网膜和普遍的黄斑水肿。在其他情况下，产生视网膜毛细血管闭塞，导致视网膜局部缺血。此外，这两种主要特征可相互组合，导致视网膜外周局部缺血和黄斑部渗出物。
本发明的化合物同样可用于治疗年龄相关性黄斑变性（AMD）。
本发明的化合物具有式（I）：
其中：
-N等于6或8；并且
-A为键、CH2基团、CH(OH)基团、CHF基团、CH(OCH3)基团、CH2NH基团或CH2O基团；
-R是氢原子或CH3。
本发明的化合物的“盐”可由无机酸或有机酸与式（I）化合物经如下所述的化学反应获得。
用于成盐的优选无机酸为：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸。
用于成盐的优选有机酸为：富马酸、马来酸、草酸、柠檬酸、三氟乙酸、酒石酸以及磺酸（从甲磺酸到十二烷基磺酸）。
式（I）化合物有利地选自：
N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基］氨基］-2-氧代乙酯；
N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-2-羟基-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-2-氟-丙二酰胺；
N-[6-[(脒基)氨基]己基]-N'-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-2-甲氧基-丙二酰胺；
N-[6-[(脒基)氨基]己基]-2-[[[[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]氨基]羰基]氨基]-乙酰胺；
N-[6-[(脒基)氨基]己基]-N'-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-乙二酰胺；
N-[8-[(脒基)氨基]辛基]-N'-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-乙二酰胺；
N-[8-[(脒基)氨基]辛基]-N'-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-丙二酰胺；
N-[8-[(脒基)氨基]辛基]-N'-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-2-羟基-丙二酰胺；
N-[8-[(脒基)氨基]辛基]-N'-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-2-氟-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-2-甲氧基-N'-[8-[(脒基)氨基]辛基]-丙二酰胺；
N-[8-[(脒基)氨基]辛基]-2-[[[[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-氨基]羰基]氨基-]-乙酰胺；
N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]氨基甲酸2-[[8-[(脒基)氨基]辛基]氨基]-2-氧代乙酯；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基]氨基]-2-氧代乙酯；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-乙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-丙二酰胺；
2-[[[[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]氨基]羰基]氨基]-N-[6-[(脒基)氨基]己基]-乙酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-2-羟基-丙二酰胺;
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-2-氟-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[6-[(脒基)氨基]己基]-2-甲氧基-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[8-[(脒基)氨基]辛基]-乙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[8-[(脒基)氨基]辛基]-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]氨基甲酸2-[[8-[(脒基)氨基]辛基]氨基]-2-氧代乙酯；
2-[[[[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]氨基]羰基]氨基]-N-[8-[(脒基)氨基]辛基]-乙酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[8-[(脒基)氨基]辛基]-2-羟基-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[8-[(脒基)氨基]辛基]-2-氟-丙二酰胺；
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-N'-[8-[(脒基)氨基]辛基]-2-甲氧基-丙二酰胺；
以及上述化合物药学上可接受的盐。
优选的式（I）化合物选自：
N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基]氨基]-2-氧代乙酯（曲培莫司）以及
N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基]氨基]-2-氧代乙酯，
以及上述化合物药学上可接受的盐。
尤其优选的式（I）化合物为N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基]氨基]-2-氧代乙酯三盐酸盐以及N-[4-[(3-氨基丁基)氨基]丁基]-氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基]氨基]-2-氧代乙酯四盐酸盐。
本发明的药物组合物通常包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐作为单一活性物质，还包含一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
“药物载体”指的是能进行给予活性物质的、药学上可接受的赋形剂或多种药学上可接受的赋形剂的混合物。所述药物载体使得能够制备组合物，并促进或改善组合物的制备，还能够使组合物保持稳定。并且，药学上可接受的载体能够提高组合物的效力、改善眼部对活性物质的耐受性和/或改变其释放曲线。
所述载体还必须在药物上和生理上是可接受的，这意味着与组合物的其他成分相容，并具有生物相容性而且无毒。这些载体可依照所需用于给药的制备形式采取各种形式，例如局域给药。
“局域给药（localadministration）”可理解为定义了所有眼部途径，即局部和注射给药、以及通过可植入体系给药。
“局部给药（topicaladministration）”的形式可不受限制地例如：滴眼剂（eyedrops）、洗眼剂或眼部滴剂（ocularinstillation）、喷雾剂、乳膏（creams）、软膏（ointment）、凝胶、水凝胶、油凝胶、亲水性镜片、嵌入物（inserts）或植入物。剂型可不受限制地例如：溶液、悬浮液、胶体体系（例如脂质体、乳液、微乳液、纳米乳液、微粒、纳米颗粒、微球、囊泡（niosomes）、树枝状分子（dendrimers））、胶束、混合胶束、配位体系（例如环糊精溶液）、以及非可植入性嵌入物（不受限制地为例如圆片、膜或条的形式）。
“注射给药”可不受限制地为：眼内（玻璃体内，IVT）给药；眼周给药，包括结膜下、筋膜下（subtenon's）、眼球后以及巩膜内给药。
“玻璃体内给药”可作为可注射体系或可植入体系进行。剂型可不受限制地例如：溶液、悬浮液、胶体体系（例如脂质体、乳液、微乳液、纳米乳液、微粒、纳米颗粒、微球、囊泡、树枝状分子）、胶束、混合胶束、以及可生物降解的或不可生物降解的植入物（不受限制地例如为棒状、钉状或小球（pellets）的形式）。
在本发明中，当浓度以m/V表示时，认为溶液密度为1。
对于两种给药途径（局部给药以及注射给药），根据所输送的化合物不同，上述多数剂型可潜在地延长有效成分在眼表或玻璃体内的停留时间、提供所封装化合物缓慢持续的释放、和/或避免毒性并增强眼部耐受性。
根据本发明，为了治疗和/或预防眼部炎性疾病、尤其是葡萄膜炎、重度结膜炎、干眼综合征或糖尿病性视网膜病，可通过水性的药学上可接受的组合物或制剂给予本发明的化合物及其药学上可接受的盐，所述组合物或制剂适于局部给药（优选通过滴注给药）或注射给药（优选玻璃体内给药）。
对于局部或注射给药，赋形剂必须为药学上可接受的，并适于此类眼部给药。
本发明使用的水性介质由不含有生理上和眼科上不利的试剂的水组成。本发明的药物组合物为水性制剂形式，所述水性制剂具有与眼部途径在生理上相容的pH。“与眼部途径在生理上相容的pH”是指pH范围为约5.5到约8，优选为约6.0到约7.5。制剂的pH值由以下物质进行调节：酸，例如乙酸、硼酸、乳酸、盐酸；碱，例如氢氧化钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠；或药学上可接受的缓冲溶液，例如磷酸钠缓冲溶液、磷酸钾缓冲溶液、柠檬酸钠缓冲溶液。本发明的水性制剂对于眼部、局部和眼内给药是等渗且生理上适应的。该制剂的渗透压接近生理压力，并通常为约200mOSm到约400mOsm、优选约260到约340mOsm。如有必要，可用合适量的生理上和眼科可接受的赋形剂对渗透压进行调整。氯化钠通常用作张度剂（tonicityagent），其浓度（以m/V表示）不超过0.9%。也可使用等当量的一种或多种由阳离子和阴离子组成的盐。根据本发明的治疗适应症，渗透压可任选通过单独或作为组合混合物添加糖或多元醇进行校正。本发明的制剂具有0到约2000厘泊、优选低于约100厘泊、更优选低于约30厘泊的粘度。
本发明的组合物可包含提高粘度的试剂，从而延长滴注后有效成分在角膜前的停留时间。这些增粘剂还可具有粘膜粘着性。本发明可使用能与显著存在于结膜中的糖蛋白产生非共价键的粘膜粘着性聚合物，从而将制剂局限于眼部，局域优化制剂的停留时间并潜在地增强有效成分的眼部生物利用率，以及减少给药频率从而提高治疗依从性。这些聚合物通常为高分子水胶体。所述聚合物可在本发明中单独使用或组合使用，并例如为：纤维素衍生物，如甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素；丙烯酸衍生物，如聚丙烯酸盐及其官能化衍生物（或聚卡波非（polycarbophils））；卡波姆（carbomers）；天然产物，如藻酸盐/酯、壳聚糖、果胶、透明质酸及其衍生物；多糖衍生物，如结冷胶（gellangum）及其衍生物、黄原胶（xanthangum）、角叉菜胶（carrageenans）；共聚物，如泊洛沙姆（poloxamer）。可将具有原位胶凝能力的聚合物引入本发明药物组合物的制剂。所谓的相变体系为液体，并使得根据pH和温度下发生离子活化，形成与眼部功能相容的凝胶。例如，可举出下述聚合物，如聚丙烯酸衍生物、纤维素衍生物、甲基纤维素、共聚物和泊洛沙姆。
本发明的组合物还可包含本领域技术人员公知的赋形剂，例如表面活性剂、助表面活性剂、助溶剂、穿透剂、胶凝剂、乳化剂、抗氧化剂、防腐剂、用于缓释作用的高分子。
所述药物组合物还可为嵌入物或固体植入物的形式，这些形式能够进行眼部给药并缓释有效成分。例如嵌入物可使用水溶性固体聚合物制备。用于制备适于眼部途径的嵌入物的、眼部生物相容的惰性聚合物可为合成、半合成或天然产物。固体植入物的组合物还可由合成、半合成或天然聚合物组成，所述聚合物优选为可生物降解的聚合物，例如聚乙烯醇、聚乳酸-共-乙醇酸、聚-ε-己内酯、透明质酸酯。这些可生物降解的聚合物也可将有效成分封装入分散于水溶液中的微球、纳米球或纳米胶囊，从而提供有效成分的持续定向释放。
其他基质、例如浸渍或包含有效成分的水溶性颗粒（lentilles）可延长有效成分在眼表的停留时间。
对这些制剂进行制造与消毒的原则在剂型技术的领域是传统上公知的。
根据第一个优选的实施方式，滴眼剂或注射溶液形式的药物组合物包含有效剂量的本发明的化合物（如曲培莫司），本发明的化合物溶于作为主要载体的生理水溶液。这一溶液理想地包括浓度优选不高于0.9%（m/V）的氯化钠水溶液、或浓度优选不高于2.5%（m/V）的甘油水溶液，从而获得渗透压为约260mOsm到约340mOsm的药物组合物。这一溶液用例如氢氧化钠调节至pH接近6.5。加入生物粘附聚合物，例如优选为透明质酸或其衍生物。这一剂型优选经γ辐射杀菌。这一剂型可为单一剂量（unidose）包装的形式。
根据另一个优选的实施方式，用于作为可生物降解的植入物进行给药的注射溶液包含有效剂量的至少一种本发明的化合物，优选以聚-ε-己内酯微粒或纳米颗粒封装。
本发明的主要优点在于所有眼部组织（前房或后房）都暴露至本发明的化合物，例如在给予药学上可接受的水性组合物之后。在眼部滴注1%溶液、每日2次持续4日后，在评价曲培莫司在雄性新西兰兔（图4）眼部分布的研究中注意到，在每日2次眼部重复滴注单一的1%水溶液后，视网膜/脉络膜（后房）以及睫状体/虹膜（前房）在24h中暴露至0.5-0.7μM以及0.3-0.7μM的曲培莫司水平。因此与另一局域给药（例如眼内注射或植入物）相比，除了较好的依从性以外，局部给予本发明的化合物可使得对眼部组织活性物质浓度的控制大为改善。此外，在眼部滴注后，观察到血浆水平（plasmalevel）低（滴注后5min-2h内<50ng/mL）并在短时间内低于定量下限（Blq）（给药后4h内2ng/mL）。这使得可以避免不希望的免疫抑制全身作用。
在用于玻璃体内途径的制剂中，治疗活性物质的浓度可为0.1μM-100mM，优选为1μM-10mM，更优选为10μM-0.1mM。在用于眼部局部滴注的制剂中，治疗活性物质的浓度可为0.001%-5%（以m/V表示），优选为0.001%-1.5%，更优选为0.01%-1.5%。这些浓度可用于其他眼部局域给药途径，并可根据治疗适应症改变。给药途径和剂量留待医师根据受试者、其症状及其疾病严重程度进行判断。
这些组合物可由制药技术领域公知的制备剂型的任何方法制备。
根据另一个方面，本发明的化合物可与其他治疗药物进行组合，或以组合形式使用。例如，可将一种或多种本发明的化合物或其药学上可接受的盐、特别是曲培莫司和/或阿尼莫司与其他用于治疗眼部炎性疾病的传统药物一起使用，从而对受试者进行治疗。多种活性物质可同时、连续或在一段时间内给药。本发明的化合物或其药学上可接受的盐将优选不与Lck酶抑制剂组合给药。
根据一个实施方式，本发明因此涉及药物组合物，作为活性物质，所述药物组合物包含至少一种式（I）化合物或其药学上可接受的盐，并且组合有一种或多种用于治疗葡萄膜炎的药物，所述药物选自：类皮质激素，例如地塞米松、脱氢皮质醇以及曲安西龙（triamcinolone）；具有与本发明的化合物不同的作用机理的免疫抑制剂，例如环磷酰胺、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、环孢素A、他克莫司（tacrolimus）、西罗莫司（sirolimus）、霉酚酸酯（mycophenolatemofetil）；抗TNF剂，如利妥昔单抗（rituximab）、达克珠单抗（daclizumab）、英利昔单抗（infliximab）、阿达木单抗（adalimumab）以及依那西普（etanercept）。
根据一个实施方式，本发明因此涉及药物组合物，作为活性物质，所述药物组合物包含至少一种式（I）化合物或其药学上可接受的盐，并且组合有一种或多种用于治疗重度结膜炎的药物，所述药物选自：类皮质激素，例如地塞米松、脱氢皮质醇；非甾族抗炎药，例如奈多罗米（nedocromil）、洛度沙胺（iodoxamide）、奥洛他定（olopatadine）；抗生素、抗真菌剂及抗细菌剂，例如妥布霉素（tobramycine）、那他霉素（natamycine）、莫西沙星（moxifloxacine）；具有与本发明的化合物不同的作用机理的免疫抑制剂，例如环孢素A、他克莫司、西罗莫司。
根据另一个实施方式，本发明涉及药物组合物，作为活性物质，所述药物组合物包含至少一本发明的化合物或其药学上可接受的盐，同时组合有一种或多种用于治疗干眼综合征的药物，所述药物选自：具有与本发明的化合物不同的作用机理的免疫抑制剂，例如环孢素A和霉酚酸酯；皮质类固醇，例如氯替泼诺（loteprednol）、利美索隆（rimexolone）以及氟米龙（fluorometholone）；以及四环素。所述药物组合物还可与人工泪液以及促分泌素（secretogogues）组合使用。
根据另一个实施方式，本发明涉及药物组合物，作为活性物质，所述药物组合物包含至少一种本发明的化合物或其药学上可接受的盐，同时组合有一种或多种用于治疗糖尿病性视网膜病的药物，所述药物选自：抗VEGF剂，例如雷珠单抗、哌加他尼（pegaptanib）、贝伐单抗（bevacizumab）；抗TNF剂，例如利妥昔单抗、达克珠单抗、英利昔单抗、阿达木单抗以及依那西普；皮质类固醇，例如地塞米松、脱氢皮质醇以及曲安西龙；以及具有与本发明的化合物不同的作用机理的免疫抑制剂，例如环孢素A、他克莫司、依维莫司（everolimus）和西罗莫司。所述药物组合物也可与激光疗法（激光光凝术）组合使用。
实施例
以下将以涉及曲培莫司的实施例详细叙述本发明，然而本领域技术人员能够领会，本发明并不局限于这一式（I）化合物。
应当理解本文中描述的实施例和实施方式仅为对本发明进行说明，并且对于本领域技术人员而言，根据所述实施例和实施方式的启示可作出多种修改或改变，这些修改或改变必须在本申请及所附权利要求书的精神和范围之内。尽管与本文中描述类似的方法和材料可用于本发明的实施或测试，然而还描述了优选的方法和材料。
实施例1：葡萄膜炎
眼部是免疫豁免部位（siteofimmunologicalprivilege）；然而由免疫系统失衡引起的眼病会发展，并导致可导致失明的视力障碍。主要为实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）及内毒素诱导的葡萄膜炎（EIU）的动物模型被认为是眼部疾病的相关临床模型，并且是研究能够调节人体疾病的免疫机制的宝贵工具：
通过纯化大鼠视网膜抗原、主要是S-抗原（S-Ag）免疫作用而诱导的EAU被认为是用于人体后葡萄膜炎的机理研究、并开发葡萄膜炎新型治疗策略的相关模型；
EIU是急性葡萄膜炎的模型，经自然免疫系统参与自发消除（spontaneouslyresolvent）。这一模型是研究眼部炎症的局部方面的有效模型，并认为是人体前葡萄膜炎的相关模型。
在本发明中，我们首次证明向眼部局域给予式（I）化合物及其药学上的盐在这两个实验模型中非常有利，所述实验模型被认为是人体葡萄膜炎的相关临床模型。
EAU模型
EAU模型有助于理解视网膜损坏的病理生理学机制，尤其是CD4+（表面抗原分化簇4）淋巴细胞、巨噬细胞和促炎性细胞因子的参与。
EAU是与人葡萄膜炎相比具有许多共同临床和组织病理学特征的炎性疾病模型，所述人葡萄膜炎例如交感性眼炎、鸟枪弹样视网膜脉络膜病变（birdshotretinochoroidopathy）、Vogt-小柳原田综合征、Becht病以及类肉状瘤病。它是人眼部炎症的临床相关模型。
EAU以纯化的视网膜自身抗原、S-抗原（S-Ag）免疫作用而诱导，S-抗原也被患有葡萄膜炎的受试者所确认。EAU依赖CD4+Th1（产生γ-干扰素的细胞）和CD4+Th17（产生白介素-17的细胞）效应细胞，各效应物表型可诱导病理反应。
然而，IL-17（白介素-17）在由IRBP蛋白（光感受器间视黄醇类结合蛋白（interphotoreceptorretinoid-bindingprotein））诱导的EAU中起主导作用。IL-17的中和作用预防疾病或逆转其进展。并且Th17效应细胞在缺乏γ-干扰素（IFN）的情况下诱导EAU。
随后，巨噬细胞和小胶质细胞将反应局部放大，并诱导破坏光感受器和视网膜组织。单核细胞/巨噬细胞以及中性粒细胞在EAU中是重要的效应细胞，然而T细胞在发起和维持响应中起更大作用。巨噬细胞穿过血视网膜屏障（blood-retinabarrier）并渗入视网膜，此处介体如NO（一氧化氮）和THF（肿瘤坏死因子）的释放可导致严重的视网膜损伤并因此导致受试者的视力丧失。
本文研究了局部给予曲培莫司对于由S-Ag免疫诱导的眼部和全身免疫反应和EAU的影响。
材料和方法
I.在Lewis大鼠中诱导EAU
对8周龄的雌性Lewis大鼠（R.Janvier,LeGenestSaintIsle，法国）以40μg的前述纯化的视网膜自身抗原S-抗原（S-Ag）进行全身免疫（deKozakY，Sainte-LaudyJ,BenvenisteJ以及FaureJP.EurJImmunol.1981;11:612-617)。
II.治疗方案
通过双眼玻璃体内（IVT）注射（5μL）给予曲培莫司，注射在S-Ag免疫后第6、9和12日进行。在实验结束时、即免疫后19-20日，通过腹腔内注射戊巴比妥（Sanofi-Aventis，法国）麻醉大鼠，然后通过心脏内穿刺收集血液。随后以致死量的戊巴比妥对大鼠进行安乐死，并收集双眼和血液样品用于分析。
在第一个实验中，使一组大鼠接受含有9mM曲培莫司、大体等渗并且生理上无菌的盐水，从而在玻璃体内达到1mM的最终溶液；使一组大鼠接受辅料（盐水），对照组的大鼠不加处理。从S-Ag免疫后第9日起至安乐死为止，用裂隙灯对动物进行临床检验。对用低温恒温器（cryostat）获得的切片执行眼部的组织病理学并进行免疫染色。取得腹股沟淋巴结用于细胞因子的RT-PCR分析。
在第二个实验中，使一组大鼠接受三次玻璃体内的曲培莫司注射，对照组的大鼠注射盐水。临床观察大鼠并进行迟发型超敏反应（DTH）分析。在第三次注射后1h、3日以及8日时，测量血浆中和眼部组织中的曲培莫司水平。
III.EAU严重程度的评价
1.临床评价
在第7日、以及第11日直至安乐死的每日用裂隙灯检查动物，评价疾病的起效时间（onsettime）和严重程度。以前述方法对各眼临床眼部炎症的强度以0-7的量表评分（deKozakEurJImm2004）。
2.组织病理学
在安乐死时（免疫后第19-20日），将摘除的大鼠眼球固定、处理、石蜡切片并以苏木精-伊红-藏红花（haematoxylin-eosin-safran）染色以用于组织学评价。对切片进行检查并根据EAU的严重程度评分，所述评分根据以下0-7的半定量量表进行：（0）无组织破坏、（1-2）杆状体（rods）和锥状体（cones）的外段破坏、（3-4）外核层破坏、（5-6）内核层破坏、以及（7）神经节细胞层破坏。
3.免疫组织化学
如前所述，在免疫后的第19-20天，收集眼球（每组2只眼），用低温恒温器切片（10μm）并染色用于免疫生物化学。使用了下列抗体：抗NOS-2初级抗体（BecktonDickinsonBiosciences,Transductionlaboratories,SanJose,美国）；抗NF-κB/p65初级抗体，然后是缀合有Alexa488（MolecularProbes,Eugene,OR）的二级抗体；抗巨噬唾液酸蛋白（antimacrosialin）CD68初级抗体（ED1克隆）（Serotec,Oxford,GB），然后是缀合有Alexa564（红色）的二级抗体。通过荧光显微照相观察切片（FXA;Microphot;NikonMelville,NY），用数码相机（Spot;BFIOptilas,Evry,法国）获得数字化的显微照片。
IV.免疫反应评价
1.迟发型超敏反应
在免疫后第18日，通过对特异性抗S-Ag响应进行测定的耳部分析来估算DTH。在大鼠右耳施以10μg的S-Ag，左耳施以盐水来进行敏化。敏化后24h和48h时测量特异性耳部肿胀，并计算双耳间厚度差异（mm）。
2.淋巴结以及眼部细胞中的逆转录PCR、RNA提取
在免疫后19-20日由排出（draining）免疫部位的淋巴结分离总RNA，以及由对各组眼球的眼房水/玻璃体进行离心后收集的细胞分离总RNA。
V.统计分析
数据以平均值±平均值标准误差（SEM）表示。使用非参数的Mann-WhitneyU测试以及随后的Bonferroni多重比较检验（multiplecomparisontest）来对比临床和组织学的EAU和DTH评价。在每个实验中计算由多重比较检验所调整的p值。
VI.结果
1.玻璃体内注射后，眼部组织和血浆内曲培莫司的药物动力学
在Lewis大鼠中玻璃体内注射曲培莫司后，血浆、眼房水/玻璃体和视网膜/脉络膜中的曲培莫司浓度在表1中记录：
表1：S-Ag免疫后19-20日，玻璃体内注射曲培莫司对于EAU组织病理学的影响（M±SEM）
Blq:低于定量下限（6ng/mL）
在玻璃体内注射曲培莫司后，测试样品的血浆水平只在注射后1h的第一个时间点进行定量，平均浓度低至约0.1μM（约40ng/mL）。眼部组织高度暴露至曲培莫司，注射后8日其视网膜/脉络膜中的含量显著（>10μM）。
2.玻璃体内注射曲培莫司是对EAU的有效治疗；临床观察
用曲培莫司进行治疗使EAU的临床严重程度在免疫后13日起与接受注射盐水的大鼠相比（第13日：*p<0.02；第14-19日，***p<0.0006）、或与未接受任何眼内治疗的大鼠相比（第12日：*p<0.02；第19日，***p<0.0006）显著降低（图1）。至免疫后19日，治疗显著降低了疾病的严重程度，表明眼内疗法十分有效。
3.眼内注射曲培莫司保护视网膜不受破坏，并调节巨噬细胞活性
与注射盐水的对照大鼠观测到的损伤（平均EAU严重程度级别：3.25±0.5，n=10）相比，以及与未接受任何眼内治疗的大鼠（平均EAU严重程度级别：3.15±0.6，n=10，p=0.08）相比，三次注射曲培莫司所治疗的大鼠呈现很低级别的组织学EAU（平均EAU严重程度级别：1.45±0.26，n=10，p=0.007）（图2A）。平均EAU组织病理学得分基于视网膜的变化。
对来自注射盐水的对照大鼠的视网膜进行组织病理学检验（图2B）显出严重的后葡萄膜炎，伴有感光细胞层的广泛破坏（a,b,白色星号）、视网膜下间隙炎性细胞渗透物（箭头）和玻璃体内纤维蛋白渗出物（箭头）。玻璃体内在视神经乳头的水平存在大量炎性细胞（箭头）（c）。相反，在以曲培莫司治疗的大鼠中（图2C），感光细胞层大部分免于破坏（e，白色星号）或显出外段部分损失（d，箭头）与炎性细胞渗入脉络膜（d，箭头）。在视神经乳头的水平没有可见炎症（f，箭头）。
如注射盐水的对照大鼠中的免疫染色所示，大量ED-1阳性巨噬细胞和淋巴细胞主要在玻璃体内表达了NF-κBp65细胞质和细胞核表达，所述玻璃体内有大量可见的炎性细胞渗透物。相反，在曲培莫司治疗的大鼠中，眼部组织内可见的炎性细胞渗透物几乎没有，在眼部组织和介质中具有降低的渗透细胞数，并显出仅有NF-κBp65的细胞质表达。
4.玻璃体内注射曲培莫司对体内的全身免疫反应没有作用
a.腹股沟淋巴结中的细胞因子（RT-PCR）
治疗的大鼠和对照大鼠在腹股沟淋巴结中未检测到TNFα、IL-2、IFN-γ和IL-17水平的差异，表明治疗不具有全身效应。
b.迟发型超敏反应
通过测量特异性抗-S-Ag响应的耳部试验来评价DTH。与接受IVT注射盐水的对照大鼠相比，用曲培莫司治疗的大鼠在24h和48h时未显出耳部肿胀明显减少（分别为p=0.8；p=0.4），说明用曲培莫司治疗不会降低对体内S-Ag的T细胞活性，证明治疗不具有全身效应（图3）。
总之，在眼后极、睫状体后部区域注射曲培莫司能够使其扩散至眼部前后段，这一点已由对EAU中眼部前后部炎症的效果所证明。此外，曲培莫司在血浆中的水平较低（<90ng/mL），且对免疫系统响应无任何影响。事实上，曲培莫司的作用限于眼部，证明了体循环中未发生有效扩散。
本文证明，在疾病传入期以S-Ag免疫后，3次玻璃体内注射曲培莫司（第6、9、12日）可有效降低临床眼部炎症并保护视网膜光感受器。
为了检验曲培莫司在何种水平上起作用，以耳部试验评定的对S-Ag的迟发型超敏反应在对照大鼠和治疗的大鼠中并无不同（图3），表明治疗并未改变全身T细胞对S-Ag的反应性。
此外，本文表明眼部治疗对全身免疫反应不具有影响。事实上，在排出免疫部位的淋巴结中，炎性细胞因子（例如TNF-α）和由T淋巴细胞产生的细胞因子（例如IL-2、IFN-γ（γ干扰素）和IL-17）未被采用曲培莫司的治疗改变。
EIU模型
内毒素诱导的葡萄膜炎模型是小鼠或大鼠的急性眼部炎症模型，由全身或局域注射革兰氏阴性细菌的脂多糖（LPS）诱发。这是人急性前葡萄膜炎的模型，人急性前葡萄膜炎经常与全身性紊乱（例如在Crohn氏病、强直性脊柱炎和Blau综合征期间）相联系。
EIU的特征在于血眼屏障的破坏、炎性细胞对眼后段和前段的眼内渗透、以及由渗透的炎性细胞和眼部细胞产生NO和炎性细胞因子和趋化因子，所述炎性细胞主要为巨噬细胞和多形核白细胞（PMNs），所述眼部细胞为血管内皮细胞、视网膜色素上皮细胞、小胶质细胞和Müller氏细胞。虽然这一葡萄膜的炎症在数天内经自然免疫系统参与自发消除，但其还是重要的眼部组织损伤来源。
本文测试了在这一大鼠EIU模型中，滴注不同浓度的曲培莫司的效果。
材料与方法
1.内毒素诱导葡萄膜炎
将重约250g、8周龄的雌性Lewis大鼠（R.JanvierLeGenestSaintIsle，法国）用于这一研究，并在其一只爪的肉垫中注射溶于0.1mL无菌水中的200μg的鼠伤寒沙门氏菌（Sigma）LPS。
2.治疗方案
以每只眼每日2次滴注4日给予曲培莫司，滴液为处于0.1%（m/m）透明质酸钠水溶液中的5%（m/m）和0.5%（m/m）的曲培莫司。
在第三日，在爪垫中给予LPS，并于24h后最后一次给予曲培莫司。随后用裂隙灯检查，收集血液，并将动物处死。随后收集眼球用于分析。
3.临床检查
在对应于葡萄膜临床炎症峰值的LPS给药24h后，用裂隙灯检查动物。各眼炎症强度按前述方法（DeKozakY.等,J.Neuroimmunol.1998;86(2):171-181）以1-6的量表进行以下评分：0，无炎症迹象；1，虹膜和结膜的离散炎症；2，虹膜和结膜血管的扩张；3，虹膜充血，伴有前房中的丁达尔效应；4-6，与第3级类似的征象，然而另外存在粘连、类纤维蛋白渗出或眼前房积脓。如果级别大于或等于1则认为临床EIU为阳性。
4.组织病理学与炎性细胞的计数
将动物安乐死（即，LPS注射后24h）之后，取出大鼠眼球，随后固定并处理。切取石蜡切片用于组织学评价。在用于组织学评价的苏木精-伊红-番红花素染色后，在眼球前段切片上（每只眼5片切片）对渗透的炎性细胞进行计数。如前所述，细胞数以各动物每只眼中的细胞总数的平均值±SEM表示（deKozakY.等，IOVS1999年9月;40(10):2275-82）。
5.统计分析
结果以平均数±SEM表示，并使用Mann-WhitneyU测试进行比较。P<0.05即认为是统计学上显著的。
6.结果
评价了大鼠EIU模型中曲培莫司的效果。LPS注射诱发的急性双侧眼部炎症的特征在于注射后4h时的炎性细胞渗透。所述渗透在18h-24h时达到最大，并在4日后消失。
以每日2次滴注4日给予曲培莫司，滴液为处于0.1%（m/m）透明质酸钠水溶液中的5%（m/m）和0.5%（m/m）的曲培莫司。各眼结果（图5）以临床得分±SEM表示。
与对照动物相比，曲培莫司治疗能够使得眼部炎症明显减少（分别为p=0.001和p=0.0001）。
为了证实使用曲培莫司观测到的临床效果，对眼前房中存在的总细胞数进行计数，如图6所示，其清楚地显示炎性细胞的渗透与对照动物（平均细胞数/切片：12.2±0.8，n=17片）相比显著降低（平均细胞数/切片：7.7±0.9，n=13片，p=0.003；7.3±0.7，n=13片，p=0.0004）。
结果表明如下事实：向大鼠眼内滴注曲培莫司能够在内毒素诱发的葡萄膜炎模型中获得降低眼部炎症的有益效果。该结果表明，曲培莫司可以通过滴注滴眼剂治疗葡萄膜炎的临床征象，并且一般而言可以治疗重度结膜炎；目前在这两种动物药理学模型中，这些病理主要由类皮质激素和免疫抑制剂进行有效治疗。
实施例2：干眼综合征
现有疗法基本上是姑息性的，旨在通过频繁施用人工泪液来替代或保持受试者的泪液。重度干眼症其特征在于严重的角膜损伤并具有升高的二次感染的危险，有时可通过抗炎疗法进行治疗。
已开发了数种动物模型以反映不同的涉及KCS的病理生理学机制。研究了曲培莫司在小鼠干眼症模型中的效果；该模型使用药理学抑制泪液产生，诱发类似于人KCS的眼表上皮细胞变化，这些变化被干燥的环境压力所加重。
通过联合使用莨菪胺（scopolamine，其阻断毒蕈碱胆碱能受体）、并将小鼠置于降低湿度并加大气流的排气罩（extractorhood）内，在小鼠中诱发干眼症。在治疗前、以及治疗后每两周，评价水性泪液的产生和体积、泪液清除作用和角膜屏障功能。将置入排气罩内、以抗胆碱能药莨菪碱处理、使用或不使用曲培莫司治疗的小鼠组的结果与未处理的对照小鼠组比较。
这一实验性模型诱发的干眼症导致眼表上皮细胞变化（采用角膜荧光素染色）、角膜上皮屏障功能改变、结膜杯状细胞密度降低、以及结膜上皮增生增加。这一动物模型模拟水分不足型和蒸发过剩型的人干眼综合征。
I.材料与方法
1.在排气罩内通过胆碱能感受器阻断和除湿诱发干眼症
将雄性129SV/CD-1小鼠用于此研究，在21日内使其接受3次皮下注射浓度为2.5mg/mL的莨菪碱的盐水溶液200μl。在整个实验期间将小鼠置于排气罩内（湿度<50%）。
2.水性泪液产生
泪液产生（PRTT）通过以浸渍有酚红（Zone-quick；Menicon，日本）的棉线接触眼表外眦（lateralcanthus）60s来测量。棉线的润湿情况使用棉线上的刻度以毫米测量。
3.泪膜稳定性
泪膜稳定性测试（TBUT）用于通过测量完整眨眼和泪膜上产生干斑的第一个迹象之间所经过的时间来评价干眼症。
将1微升的0.1%钠荧光素施用于结膜囊，并在此后三次眨眼，之后测量干斑出现的时间（以秒计）。90s后，以使用钴蓝光裂隙灯的生物显微镜测量并对角膜上皮的损伤进行照相。使用Draize计分量表记下临床得分。
II.结果
使用酚红试验在三周内于C57B16小鼠中测量泪液体积。结果示于图7，以平均泪液体积（毫米）±平均值标准误差（SEM）表示。结果显示，泪液体积在皮下注射莨菪碱后两日时大大减少。曲培莫司滴注每日2次，剂量为1%（m/m）处于0.1%透明质酸钠溶于盐水（0.6%NaCl）中的溶液；与用0.1%透明质酸钠溶于盐水（0.9%NaCl）中的溶液组成的辅料处理的小鼠相比，在第6日至第20日的泪液体积显著增加（使用Bonferroni多重对比检验的双因素方差分析，p<0.0001）。相反，每日2次滴注0.1%地塞米松未显示出对泪液体积有显著影响。
图8显示用莨菪碱处理和暴露于除湿后的空气导致了泪膜稳定性下降（通过泪膜破裂试验测量），在前三天显著减少，随后逐渐减少直至第21日。与采用0.1%透明质酸钠溶于盐水（0.9%NaCl）中的溶液组成的辅料处理的小鼠相比，每日2次滴注给予1%曲培莫司从第7日至第21日显著改善了泪膜稳定性（p<0.0001）；相比之下，地塞米松仅显出并未在第21天得以持续的一般效果。
总之，这些结果显示，局部施用曲培莫司通过增加泪液分泌和泪膜稳定性（干眼症的两个特征性临床参数），对于干眼综合征具有有益效果。这些结果证明了滴注曲培莫司来治疗干眼症的临床征象的好处。
实施例3：糖尿病性视网膜病
激光光凝术仍是护理治疗标准，在视网膜脱离的情况下使用玻璃体切除术。然而显著比例的受试者难以用激光光凝术治疗，并且在中央凹下方有时发展出与激光瘢痕相关的视网膜色素上皮细胞萎缩，随时间推移导致视力下降。雷珠单抗新近批准用于治疗黄斑水肿，然而其他抗VEGF剂（贝伐单抗）也在标示外使用。与抗VEGF剂组合治疗可能延误激光治疗。
皮质类固醇使得可以观察新生血管形成（neovascularization）和黄斑水肿的退化。然而，副作用频繁出现（眼部高压、白内障、眼内炎）；此外，与激光疗法相比，皮质类固醇在糖尿病黄斑水肿中的长期效力未经证明。
已经利用普遍描述的糖尿病性视网膜病模型（链脲菌素诱发的I型糖尿病模型）来评价曲培莫司在大鼠中的效果。这一大鼠模型通过诱发与破坏胰岛β细胞相关的高血糖来模拟人类疾病，这些β细胞通常通过产生胰岛素来调节血糖。尽管这一模型中有血管变化，人体观测中的血管病变不会发展成新生血管形成。
将链脲菌素静脉注射至禁食的大鼠。在链脲菌素处理后，高血糖在5日内迅速发展。诱发糖尿病3周后，测定玻璃体中的VEDF水平和炎症生物标记。分析视网膜电流图（ERG）测量的a波和b波以及振荡电势，从而监测光感受器的损伤。在对照组的非糖尿病大鼠和用曲培莫司或辅料处理的糖尿病大鼠组之间对结果进行比较。
材料与方法
I.链脲菌素诱发糖尿病
在整夜禁食后的SpragueDawley（SD）大鼠中，通过静脉注射链脲菌素（Sigma）在柠檬酸钠缓冲液中的溶液（pH4.5）诱发糖尿病。对照的非糖尿病动物仅给予柠檬酸盐缓冲液。5日后，血糖高于5g/L的动物认为患有糖尿病。
1.炎症生物标记
通过链脲菌素诱发糖尿病3周后，切除大鼠眼球并分离玻璃体。利用用于大鼠的多路Luminex试验试剂盒（VEGF、MCP-1、ICAM-1、IL-6、IL-1β；Procarta）根据制造者的建议测量数种炎症生物标记。
2.视网膜电流图（ERG）
糖尿病大鼠在使用视网膜电图仪（electroretinograph，LKC公司）进行ERG检验前整夜适应黑暗。使用一系列Ganzfeld闪光记录一系列适应黑暗的强度响应，从而获得杆状体介导的视网膜响应（rod-mediatedretinalresponses）。以传统方式测量个体ERG波形分量（a-和b-波，闪烁）的振幅和潜伏期以及振荡电势
II.结果
评价了曲培莫司在由链脲霉素诱发的SD大鼠糖尿病性视网膜病的实验模型中的效果。链脲霉素破坏了胰腺的β细胞并诱发高血糖，因此模拟了I型糖尿病。糖尿病动物的视网膜显出炎症相关的生物化学和电生理学的异常。
以0.2%（m/m）的曲培莫司处于0.1%透明质酸钠溶于盐水（0.9%NaCl）中的溶液进行滴注，每日给药两次处理两周，与以0.1%透明质酸钠的盐水溶液（0.9%NaCl）组成的辅料处理的糖尿病大鼠相比并不改变血糖或体重。
通过使用多路Luminex试验技术，对玻璃体样品的细胞因子和趋化因子水平进行了评价。记载于图9的结果显示，玻璃体介质中的MCP-1和IL-6水平在由链脲霉素诱发糖尿病3周后大大增加。以0.2%的曲培莫司滴注，从第7日到第21日在两眼中每日给药两次治疗两周，这显著降低了糖尿病大鼠中玻璃体内的MCP-1和IL-6水平，表明在炎性过程期间对单核细胞的募集起抑制作用（利用Dunnett多重对比检验的单因素方差分析，p≤0.001）。
链脲霉素处理3周后，无论闪光强度如何，ERG检验显示糖尿病大鼠在适应黑暗后显示出减小的a-波和b-波振幅、异常的振荡电势、以及较大的闪烁劣化（图10）。锥状体和杆状体是两类的受高血糖影响的光感受器。图10显示每日2次给予0.2%曲培莫司眼部滴注持续两周后，曲培莫司与对照批次相比（以辅料处理的糖尿病大鼠）显著增大了闪光振幅，还增大了a-波和b-波和振荡电势的振幅，表明糖尿病大鼠中视网膜功能、尤其是锥状体和杆状体的神经保护效应。
总而言之，这些结果因此表明，局部给予曲培莫司通过降低视网膜炎症水平和保护神经-视网膜功能、尤其是锥状体和杆状体不受高血糖影响，对糖尿病大鼠的视网膜具有有益效果。这些结果因此证明了曲培莫司滴注用于治疗人类糖尿病性视网膜病和用于预防糖尿病受试者视力削弱方面的好处。

Claims (5)

1.下述化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗或预防眼部炎性疾病的药物方面的用途，所述眼部炎性疾病选自葡萄膜炎、干眼综合征和糖尿病性视网膜病，其中所述化合物为N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基]氨基]-2-氧代乙酯。
2.如权利要求1所述的用途，其中所述化合物的药学上可接受的盐为N-[4-[(3-氨基丙基)氨基]丁基]-氨基甲酸2-[[6-[(脒基)氨基]己基]氨基]-2-氧代乙酯三盐酸盐。
3.如权利要求1或2所述的用途，其中所述葡萄膜炎为非传染性葡萄膜炎。
4.如权利要求1或2所述的用途，其中所述眼部炎性疾病为干眼综合征。
5.如权利要求1或2所述的用途，其中所述眼部炎性疾病为糖尿病性视网膜病。
CN201180037311.XA 2010-07-29 2011-07-08 用于治疗/预防眼部炎性疾病的化合物 Expired - Fee Related CN103037857B (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1056290 2010-07-29
FR1056290A FR2963238B1 (fr) 2010-07-29 2010-07-29 Derives de 15-desoxyspergualine pour le traitement et/ou la prevention des maladies inflammatoires oculaires
FR1152836 2011-04-01
FR1152836 2011-04-01
PCT/FR2011/051639 WO2012013884A1 (fr) 2010-07-29 2011-07-08 Composes pour le traitement/la prevention des maladies inflammatoires oculaires

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103037857A CN103037857A (zh) 2013-04-10
CN103037857B true CN103037857B (zh) 2016-02-10

Family

ID=44514307

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201180037311.XA Expired - Fee Related CN103037857B (zh) 2010-07-29 2011-07-08 用于治疗/预防眼部炎性疾病的化合物

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20130190278A1 (zh)
EP (1) EP2598131A1 (zh)
JP (1) JP5878172B2 (zh)
KR (1) KR20130099926A (zh)
CN (1) CN103037857B (zh)
AU (1) AU2011284589B2 (zh)
BR (1) BR112013002144A2 (zh)
CA (1) CA2806942C (zh)
MX (1) MX339759B (zh)
RU (1) RU2582609C2 (zh)
WO (1) WO2012013884A1 (zh)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9827191B2 (en) 2012-05-03 2017-11-28 The Johns Hopkins University Compositions and methods for ophthalmic and/or other applications
US11596599B2 (en) 2012-05-03 2023-03-07 The Johns Hopkins University Compositions and methods for ophthalmic and/or other applications
KR102310775B1 (ko) 2012-05-03 2021-10-07 칼라 파마슈티컬스, 인크. 개선된 점막 수송을 나타내는 제약 나노입자
CA2871745C (en) 2012-05-03 2023-01-24 Kala Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical nanoparticles showing improved mucosal transport
WO2014127214A1 (en) 2013-02-15 2014-08-21 Kala Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and uses thereof
US9688688B2 (en) 2013-02-20 2017-06-27 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of 4-((4-((4-fluoro-2-methyl-1H-indol-5-yl)oxy)-6-methoxyquinazolin-7-yl)oxy)-1-(2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)butan-1-one and uses thereof
US9353123B2 (en) 2013-02-20 2016-05-31 Kala Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and uses thereof
WO2015066482A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
US9890173B2 (en) 2013-11-01 2018-02-13 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
US9632096B2 (en) * 2013-11-04 2017-04-25 Becton, Dickinson And Company Methods of assessing the immunomodulatory potential of a multipotent stromal cell (MSC) population, and systems and kits for practicing the same
AU2015355169A1 (en) * 2014-12-02 2017-05-25 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Animal model for dry eye and methods of use of such animals
US10456347B2 (en) 2015-11-24 2019-10-29 Bmi Korea Co., Ltd Composition for injection of hyaluronic acid, containing hyaluronic acid derivative and DNA fraction, and use thereof
CN109906075A (zh) * 2016-04-29 2019-06-18 恩瑟拉德斯医药有限公司 用于在发炎病灶或区域中局部注射的脂质体皮质类固醇
US10253036B2 (en) 2016-09-08 2019-04-09 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
KR20190051010A (ko) 2016-09-08 2019-05-14 칼라 파마슈티컬스, 인크. 치료 화합물의 결정형 및 그의 용도
EP3509423A4 (en) 2016-09-08 2020-05-13 Kala Pharmaceuticals, Inc. CRYSTALLINE FORMS OF THERAPEUTIC COMPOUNDS AND USES THEREOF
RU2633349C1 (ru) * 2016-11-24 2017-10-11 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ определения дифференцированных показаний к срокам лечения нарушений прекорнеальной слезной пленки после лазерного in situ кератомилеза с фемтолазерным сопровождением у детей
WO2019108602A1 (en) * 2017-11-28 2019-06-06 University Of Florida Research Foundation Methods and compositions for retinal drug delivery
SG11202105025VA (en) * 2018-11-14 2021-06-29 Zhuhai Qiwei Bio Tech Ltd Animal models, screening methods, and treatment methods for intraocular diseases or disorders

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2698628B1 (fr) * 1992-12-02 1995-02-17 Fournier Ind & Sante Analogues de 15-déoxyspergualine, leur procédé de préparation et leur utilisation en thérapeutique.
FR2716452B1 (fr) * 1994-02-24 1996-05-10 Fournier Ind & Sante Analogues de la 15-déoxyspergualine, leur procédé de préparation et leur utilisation en thérapeutique.
BR0306811A (pt) * 2002-01-11 2004-10-26 Sankyo Co Composto, éster farmacologicamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica e métodos para prevenção ou tratamento de doenças autoimunes, da artrite reumatóide e da rejeição causada pelo transplante de vários órgãos em um mamìfero
US20050008640A1 (en) * 2003-04-23 2005-01-13 Wendy Waegell Method of treating transplant rejection
JP2006176457A (ja) * 2004-12-24 2006-07-06 Wakamoto Pharmaceut Co Ltd 医薬用水性液状組成物

Also Published As

Publication number Publication date
MX2013001204A (es) 2013-08-15
AU2011284589A1 (en) 2013-02-21
RU2013108857A (ru) 2014-09-10
JP2013532678A (ja) 2013-08-19
CN103037857A (zh) 2013-04-10
EP2598131A1 (fr) 2013-06-05
WO2012013884A1 (fr) 2012-02-02
US20130190278A1 (en) 2013-07-25
BR112013002144A2 (pt) 2016-05-24
CA2806942A1 (en) 2012-02-02
MX339759B (es) 2016-06-08
RU2582609C2 (ru) 2016-04-27
AU2011284589B2 (en) 2015-07-16
CA2806942C (en) 2019-06-25
JP5878172B2 (ja) 2016-03-08
KR20130099926A (ko) 2013-09-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103037857B (zh) 用于治疗/预防眼部炎性疾病的化合物
Al-Saedi et al. Dry eye disease: present challenges in the management and future trends
JP2008520671A (ja) 眼科用組成物および眼の治療方法
EP1978926A2 (en) Topical mecamylamine formulations for ocular administration and uses thereof
CN108785251A (zh) 一种眼用药物组合物及其制备方法和应用
CN107735091B (zh) 包含伊马替尼作为活性成分的用于预防和治疗干眼病的药物组合物
Billowria et al. Topical advances in mucoadhesive ocular drug delivery system
JP2016000757A (ja) ドライアイおよび／または角結膜障害に対する処置に有効な薬剤のスクリーニング方法および該方法によって得られた医薬組成物
JP4475802B2 (ja) 緑内障の局所治療用フルナリジンの使用法
WO2012068998A2 (zh) 一种曲安奈德眼用制剂及其制备方法
CN112891326B (zh) 一种载有那他霉素的海藻酸凝胶药膜及其制备方法
DK3229780T3 (en) Ophthalmic composition for use in the treatment of dry eye syndrome
Kaul et al. An insight into ocular insert
CN114126580A (zh) 用于治疗眼部过敏的眼用组合物
Rupenthal et al. Ocular drug delivery
Smith et al. Tolerability, pharmacokinetics, and pharmacodynamics of a brinzolamide episcleral sustained release implant in normotensive New Zealand white rabbits
Alagöz et al. Comparison of ocular surface side effects of topical travoprost and bimatoprost
Aswin Outcome of glaucoma surgery in patients on prostaglandin analogues
Ajith et al. THERAPEUTIC APPLICATION OF OLATPATADINE KETAROLAC, MOXIFLOXACINE KETOROLAC, FLUOROMETHOLONE IN EYE DISORDERS
US20210052582A1 (en) Methods of use and pharmaceutical compositions of a selective syk inhibitor
Shirkhedkar et al. Herbal Drugs for the Treatment of Ocular Infections
CN113876701A (zh) 一种用于治疗糖尿病视网膜病变的地塞米松原位液晶凝胶制剂、制备方法及应用
Gandhi et al. A review on: ocular inserts a novel drug delivery system
Sarvaiya Polymeric Hydrogels for Controlled Drug Delivery to the Eye
Al-Ebini Investigations into Drug Delivery to the Eye: Nanoparticle Comparisons

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160210

Termination date: 20180708

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee