JPWO2008114828A1 - 細胞選別方法および細胞選別装置 - Google Patents
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Abstract
Description
2 ファイバユニット
3 収納容器
4 コントローラ
5 測定装置
6 光ファイバ
10 細胞群
11 対象細胞
12 対象外細胞
61,62,63,64,65 光ファイバ
ファイバユニット2は、図2に詳しく示すように、複数の光ファイバ6(61,62,63,64,65・・・・)を縦横に規則正しく碁盤の目状(マトリックス状)に配置して構成され、各光ファイバ6の端面が上下を向くようにして収納容器3の中に収納されている。
なお、光ファイバ6は石英系光ファイバ、プラスチック系光ファイバや多成分系ガラスファイバなどによって構成することができ、材料は特に限定されない。また、光ファイバ6は直径3〜10ミクロン程度のコア径を有し、ファイバユニット2を分割し、個別に取り出すなどの際に屈曲などがおきないように適宜な長さに設定されている。
次に、以上の構成を有する細胞選別装置1を用いた細胞選別方法について、図3〜5を参照して説明する。この細胞選別方法は以下に示す選別手順Aで実施することができるが選別手順Bで実施することもできる。
まず、収納容器3の蓋部3bをはずして容器本体部3aに収められた液体f中に細胞群10を散布する(S1)。この細胞群10は選別の対象とされる対象細胞(または細胞群)11のほか、そのほかの細胞(選別の対象外とされる細胞で、以下「対象外細胞」という)12が含まれている。
選別手順Aでは、光ファイバの分離の際に多数の細胞群の中から対象細胞11を選別しなければならず、その選別が困難な場合もある。また、対象細胞11だけを選別したとしても、何らかの理由で対象外細胞12が混じることもある。このような事態に的確に対処するためには、図5に示すようにして選別手順Bにしたがい不要な細胞を除去することが望ましい。選別手順Bによる細胞選別は図7に示すフローチャートにしたがって行われる。なお、図7に示すように、選別手順Bによる細胞選別は選別手順Aによる細胞選別と比較して、S2、S3の間にS6、S7が加わっている点で相違し、そのほかは同じである。
S3における光学特性の測定は、例えば次のようにして行うことが考えられる。まず、光源7からファイバユニット2に光を照射し、ファイバユニット2を透過した透過光を測定する。こうすると、例えば、図8に示すように、光ファイバ71,72,73の示す透過光について、それぞれの透過光の濃淡に着目して光ファイバ6を分離することができる(光ファイバ71,72,73の中で光ファイバ71の透過光が最も濃く、光ファイバ71,72,73の順に透過光の色が薄くなっている)。
上述の実施の形態では、光ファイバ61,62,63,64,65・・・を光感受性樹脂で一体にしてファイバユニット2としているが、光ファイバ61,62,63,64,65・・・・は図13に示すような格納容器20に収めてファイバユニット2としてもよい。
Claims (10)
- 複数のファイバが離合自在に束ねられたファイバユニットを用いた細胞選別方法であって、
選別の対象とされる対象細胞を含む細胞群を前記ファイバユニットが浸された流体中に散布し、
前記複数のファイバのうちの前記対象細胞が付着している対象ファイバを前記ファイバユニットから分離し、
該分離した前記対象ファイバを用いて前記対象細胞を増殖させることを特徴とする細胞選別方法。 - 前記対象細胞を増殖させるときに、前記対象ファイバの周囲に細胞の付着していない別のファイバを配置することを特徴とする請求項1記載の細胞選別方法。
- 前記対象ファイバを前記ファイバユニットから分離する前に、前記複数のファイバのうちの選別の対象外とされる対象外細胞が付着または近接している対象外ファイバから前記対象外細胞を取り除くことを特徴とする請求項1または2記載の細胞選別方法。
- 前記対象ファイバを前記ファイバユニットから分離する前に、前記ファイバユニットから取り出される光の光学特性を測定し、該測定された光学特性に基づいて、前記対象ファイバを分離することを特徴とする請求項1〜3のいずれか一項記載の細胞選別方法。
- 複数のファイバが離合自在に束ねられたファイバユニットを用いた細胞選別方法であって、
選別の対象とされる対象細胞を含む細胞群を前記ファイバユニットが浸された流体中に散布し、
前記複数のファイバのうちの選別の対象外とされる対象外細胞が付着または近接している対象外ファイバから前記対象外細胞を取り除いた後、
前記ファイバユニットを用いて前記対象細胞を増殖させることを特徴とする細胞選別方法。 - 複数のファイバが離合自在に束ねられたファイバユニットを用いた細胞選別方法であって、
前記ファイバユニットを構成する前記ファイバのそれぞれに座標を割り当て、
選別の対象とされる対象細胞を含む細胞群を前記ファイバユニットが浸された流体中に散布し、
前記複数のファイバのうちの前記対象細胞が付着している対象ファイバに割り当てられた前記座標を指定し、
前記座標を指定した前記対象ファイバを前記ファイバユニットから分離し、該分離した前記対象ファイバを用いて前記対象細胞を増殖させることを特徴とする細胞選別方法。 - 前記対象ファイバに割り当てられた前記座標を指定する前に、前記複数のファイバのうちの選別の対象外とされる対象外細胞が付着または近接している対象外ファイバから前記対象外細胞を取り除くことを特徴とする請求項6記載の細胞選別方法。
- 前記対象外ファイバから前記対象外細胞を取り除くときに、前記対象外ファイバに光を照射して前記対象外細胞と光ファイバとの接着力低下を誘導させ、前記対象外細胞に障害を発生させ若しくは前記対象外細胞を死滅させることを特徴とする請求項3,5,7のいずれか一項記載の細胞選別方法。
- 複数のファイバが離合自在に束ねられ、かつ前記ファイバのそれぞれに座標が割り当てられているファイバユニットと、
前記ファイバユニットから得られる光の光学特性を測定する測定装置とを有することを特徴とする細胞選別装置。 - 前記複数のファイバに割り当てられた座標のうち、選別の対象とされる対象細胞が付着している対象ファイバに割り当てられた前記座標を特定する座標特定手段を更に有することを特徴とする請求項9記載の細胞選別装置。
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