JPWO2007126020A1 - Ｎｍｄａ受容体チャネルブロック作用を示す化合物及びそれを用いた薬剤。 - Google Patents

Abstract

【課題】新規なＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物、この化合物を含む薬剤を提供すること。【解決手段】下記式（１）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含む、ＮＭＤＡ受容体の過剰興奮が原因である疾患の治療又は予防に用いる薬剤とする。【選択図】図１

Description

本発明は、ＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物に及びそれを用いた薬剤に関する。

脳梗塞・脳出血等の脳血管障害、アルツハイマー病などの高次脳機能に強く影響する疾患は予後不良であり、高齢者のＱＯＬ（Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ）の低下を招くだけでなく、介護者の心的ストレスをも助長する。現在までにいくつかの脳機能改善薬が開発・市販されているが、いずれも十分な治療効果が得られておらず、より効果的な新規脳機能改善薬・脳機能保護薬の開発が急務である。

ところで、神経の興奮性伝達物質であるグルタミン酸の受容体の一種であるＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（以下、「ＮＭＤＡ」という。）受容体は、Ｃａ^２＋をニューロンに輸送することで記憶の形成や脳虚血時の症状悪化に強く関与していることが知られている。

本発明者等は、既に下記非特許文献１において、アフリカツメガエルの卵母細胞にＮＭＤＡ受容体を発現させ、複数のポリアミン誘導体について誘導体を作用させた際に起こる電位変化を記録した結果、アントラキノン骨格を有するポリアミン誘導体で有意なチャネルブロック作用を観察したことを報告している（下記非特許文献１参照）。
Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、３０９：８８４−８９３

しかしながら、上記非特許文献１に記載の技術であっても、チャネルブロック作用の強さにおいて改善の余地が残る。

そこで本発明は、新規なＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物、この化合物を含む薬剤を提供することを目的とする。

即ち、本発明の一手段に係るＮＭＤＡ受容体の過剰興奮が原因である疾患の治療又は予防に用いる薬剤は、下記式（１）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含むものである。
（Ａ環とＣ環に縮合するＢ環はキノン、ベンゼン、ピロール、ピリジン、１，４−ジヒドロピリジン、アゼピン、４，５−ジヒドロアゼピン又は１，４−チアジンである。Ｒ_１〜Ｒ_５はそれぞれホルミル、アシル基、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ基、アリール基又はカルボキサミド基であり、Ｒ_１又はＲ_２の少なくとも一方はカルボキサミド基のアミノ基を除きアミノ基を３個以上含むポリアミン構造を有するカルボキサミド基である。Ｒ_１〜Ｒ_５は同じであってもよく異なっていてもよい。）

また、限定されるわけではないが、本手段に係る薬剤は、下記式（２）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含むことが好ましい。

また、限定されるわけではないが、本手段に係る薬剤は、下記式（３）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含むことが好ましい。

また、限定されるわけではないが、本手段に係る薬剤は、下記式（４）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含むことが好ましい。

また、限定されるわけではないが、本手段に係る薬剤は、下記式（２）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含むことが好ましい。

なお、上記各手段において、限定されるわけではないがＮＭＤＡ受容体の過剰興奮が原因である疾患は、脳血管障害、脳梗塞、脳内出血、アルツハイマー病、中枢神経変性疾患、外傷性脳損傷、外傷性脊髄損傷若しくは脱髄疾患、又はこれらに付随する後遺症であることが好ましい。

また、本発明の他の一手段に係る化合物は、下記式（１）で示されるものである。
（Ａ環とＣ環に縮合するＢ環はキノン、ベンゼン、ピロール、ピリジン、１，４−ジヒドロピリジン、アゼピン、４，５−ジヒドロアゼピン又は１，４−チアジンである。Ｒ_１〜Ｒ_５はそれぞれホルミル、アシル基、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ基、アリール基又はカルボキサミド基であり、Ｒ_１又はＲ_２の少なくとも一方はカルボキサミド基のアミノ基を除きアミノ基を３個以上含むポリアミン構造を有するカルボキサミド基である。Ｒ_１〜Ｒ_５は同じであってもよく異なっていてもよい。）

また、本手段において、限定されるわけではないが、化合物は下記式（２）で示されるものであることが好ましい。

また、本手段において、限定されるわけではないが、化合物は下記式（３）で示されるものであることが好ましい。

また、本手段において、限定されるわけではないが、化合物は下記式（４）で示されるものであることが好ましい。

また、本手段において、限定されるわけではないが、化合物は下記式（５）で示されるものであることが好ましい。

以上本発明により、新規なＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物、この化合物を含む薬剤、この化合物を用いたスクリーニング方法を提供することができる。

（実施形態）
本発明の一実施形態は、ＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物であり、下記式（１）で示される。

なお、上記式（１）中、Ａ環とＣ環に縮合するＢ環はキノン、ベンゼン、ピロール、ピリジン、１，４−ジヒドロピリジン、アゼピン、４，５−ジヒドロアゼピン又は１，４−チアジンである。Ｒ_１〜Ｒ_５はそれぞれホルミル、アシル基、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ基、アリール基又はカルボキサミド基であり、Ｒ_１又はＲ_２の少なくとも一方はカルボキサミド基のアミノ基を除きアミノ基を３個以上含むポリアミン構造を有するカルボキサミド基である。Ｒ_１〜Ｒ_５は同じであってもよく異なっていてもよい。

即ち本発明者らは、新規なＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物について鋭意検討を行っていたところ、ポリアミンがＮＭＤＡ受容体の活性を阻害し、細胞内へのカルシウムの流入を抑えることを確認し、更に詳細に検討し上記式（１）で示される化合物を得るに至った。ここで「ポリアミン」とは、分子内にアミノ基を二つ以上有する化合物を意味する。また「ポリアミン構造」とは、アミノ基を二つ以上有する構造をいい、限定されるわけではないがポリアミン構造にはプトレスシン、カダベリン、スペルミジン、１，３−ジアミノプロパン、カルジン、ホモスペルミジン、３−アミノプロピルカダベリン、ノルスペルミン、ホモスペルミン、テルモスペルミン、カルドペンタミンなどがあり、より好ましいポリアミン構造としてはホモスペルミンである。ただし、「カルボキサミド基のアミノ基を除きアミノ基を３個以上含むポリアミン構造」であることが本ＮＭＤＡチャネルブロック作用の観点から必要である。このポリアミン構造としては、限定されるわけではないがホモスペルミンが好適である。

なお上記式（１）に示される化合物は、入手することができる限り限定されるわけではないが、後述の実施例により明らかな通り、常法を用いて合成することができる。

また、本発明の他の実施形態は、上記（１）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を有効成分として含む薬剤である。

なお上記薬剤は、上記ＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物の他、薬学的に許容しうる通常の担体、結合剤、安定化剤、賦形剤、希釈剤、ｐＨ緩衝剤、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤等の各種調剤用配合成分を転嫁することができる。またこのＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物を用いる予防若しくは治療方法としては、患者の性別・体重・症状に見合った適切な投与量を経口的又は非経口的に投与することができる。即ち通常用いられる投与形態、例えば粉末、顆粒、カプセル剤、シロップ剤、懸濁液等の剤型で経口的に投与することができ、又は例えば溶液、乳剤、懸濁液等の剤型にしたものを注射の型で非経口投与することができる他、スプレー剤の型で鼻腔内投与することもできる。

以上により、新規なＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物、この化合物を含む薬剤を提供することができる。

ここで、上記実施形態の一に係る化合物の作用について、実施例を挙げてさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

製造例１：アントラキノンホモスペルミン（ＡＱ４４４）の合成
アントラキノン ２−カルボニルクロリド（３００ｍｇ）の無水塩化メチレン溶液（１０ｍＬ）に無水トリエチルアミン（０．４６ｍＬ）、パラニトロフェノール（２３８ｍｇ）を加え、室温にてアルゴン気流下３時間撹拌した。反応液を１規定水酸化ナトリウム水溶液に注ぎ、クロロホルム、５％メタノール／クロロホルム混液で抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮し、析出した固体を吸引濾取すると、アントラキノン ２−ニトロフェニルエステル（２７０ｍｇ、収率６５％）の黄白色固体が得られた。なおこの黄白色固体の^１Ｈ−ＮＭＲ、^１３Ｃ−ＮＭＲそれぞれのスペクトルのデータ及びＥＩ−ＭＳのデータを下記に示す。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ９．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），８．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．９，１．５Ｈｚ），８．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），８．４０−８．３６（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），７．８８（２Ｈ，ｍ），７．５０（２Ｈ，ｍ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１８２．３，１８２．１，１６２．８，１５５．２，１４５．７，１３６．９，１３５．１，１３４．７２，１３４．６６，１３３．８，１３３．５，１３３．３，１２９．３，１２８．０，１２７．６０，１２７．５６，１２５．４，１２２．５。

ＥＩ−ＭＳ
ｍ／ｚ（％） ３７３（Ｍ^＋，１），２３５（１００）。

次に、５，１０−ビス（２−ニトロベンゼンスルホニル）−５，１０−ジアザ−１，１４−テトラデカンジアミン（３６ｍｇ）の無水クロロホルム溶液（２．５ｍＬ）にアントラキノン ２−パラニトロフェニルエステル（１１ｍｇ）の無水クロロホルム溶液（２．５ｍＬ）を加え、アルゴン気流下室温にて４時間、５０度にて１時間撹拌した。反応液をそのままアミノシリカゲルカラム（メタノール／クロロホルム混液）に付して精製し、２％メタノール／クロロホルム溶出液を減圧下濃縮すると、ＡＱ４４４誘導体（１５ｍｇ、収率６０％）が得られた。また、過剰に用いた原料のテトラアミン誘導体を回収した。なおこのＡＱ４４誘導体の^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルのデータ、^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルのデータ及びＦＡＢ−ＭＳのデータを下記に示す。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ８．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），８．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．３１（２Ｈ，ｍ），８．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１，１．７Ｈｚ），７．９９（２Ｈ，ｍ），７．８３（２Ｈ，ｍ），７．７２−７．６０（６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），３．５１（２Ｈ，ｍ），３．３３−３．２２（８Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），２．６４（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．０，７．０Ｈｚ），１．７２−１．４４（１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），１．３５（２Ｈ，ｍ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１８２．６，１８２．０，１６５．９，１４８．０，１３９．８，１３５．１，１３４．５，１３４．４，１３３．６２，１３３．５６，１３３．５，１３３．４，１３３．３，１３３．１，１３１．８，１３１．７，１３０．７２，１３０．６８，１２７．９，１２７．５，１２５．３，１２４．２，４７．６，４７．５，４７．４，４６．９，４５．４，４１．７，３９．７，３０．６，２６．６，２６．０，２５．６，２５．４，２５．１。

ＦＡＢ−ＭＳ（ＮＢＡ）
ｍ／ｚ ８３５（ＭＨ^＋）。

そして、上記で得たＡＱ４４４誘導体（４８ｍｇ）の無水ＤＭＦ溶液（１．０ｍＬ）に炭酸カルシウム（２４ｍｇ）とチオフェノール（７μＬ）を加え、アルゴン気流下室温にて１３時間撹拌した。反応液をそのままアミノシリカゲルカラム（メタノール／クロロホルム混液）に付して精製し、５％、１０％、２０％メタノール／クロロホルム溶出液を減圧下濃縮し、ＡＱ４４４（１９ｍｇ、収率７０％）を得た。なお、この得られたＡＱ４４４の構造式（２）、ＵＶスペクトル、^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルのデータ、^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルのデータ、ＦＡＢ−ＭＳのデータを下記に示しておく。

ＵＶ（ＭｅＯＨ）
λ_ｍａｘ ３２６．０，２５６．５，２１０．０ ｎｍ。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ８．６０（１Ｈ，ｂｒ−ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ），８．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），８．３７−８．３０（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），７．８３（２Ｈ，ｍ），３．５２（１Ｈ，ｂｒ−ｄｄｄ，Ｊ＝５．９，５．９，５．９Ｈｚ），２．７２（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５，６．５Ｈｚ），２．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，６．６Ｈｚ），２．６５−２．６０（３Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），２．５６−２．５０（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），１．７８（２Ｈ，ｂｒ−ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），１．６７（２Ｈ，ｂｒ−ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），１．６４−１．４０（８Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１８２．６，１８２．５，１６５．７，１４０．２，１３４．９，１３４．４２，１３４．３５，１３３．４１３３．３，１２７．８，１２７．４，１２７．３，１２５．１，５１．９，４９．８，４９．７，４９．６，４９．１，４２．１，４０．３，３６．３，３１．５，２７．９，２７．８，２７．７，２７．４。

ＦＡＢ−ＭＳ（ＮＢＡ＋ＮａＣｌ）
ｍ／ｚ ４６５（ＭＨ^＋）。

製造例２：カルバゾールスペルミンの合成
カルバゾール Ｎ−カルボニルクロリド（３００ｍｇ）の無水塩化メチレン溶液（１０ｍＬ）に無水トリエチルアミン（５４６μＬ）、パラニトロフェノール（２７２ｍｇ）を加え、室温にてアルゴン気流下３．５時間撹拌した。反応液を１規定水酸化ナトリウム水溶液に注ぎ、クロロホルム、５％メタノール／クロロホルム混液で抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮すると、カルバゾール Ｎ−パラニトロフェニルエステル（４０１ｍｇ、収率９２％）の黄白色固体が得られた。なおこの得られた黄白色固体の^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルのデータを下記に示す。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ８．３９（２Ｈ，ｄ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），８．３２（２Ｈ，ｄ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），８．０３（２Ｈ，ｂｒ−ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．５７（２Ｈ，ｄ−ｌｉｋｅ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），７．５２（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，７．５，１．２Ｈｚ），７．４５（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，７．５，１．２Ｈｚ）。

次に、スペルミン（４０ｍｇ）の無水クロロホルム溶液（６．５ｍＬ）にカルバゾール Ｎ−パラニトロフェニルエステル（３０ｍｇ）の無水クロロホルム溶液（６．５ｍＬ）を加え、アルゴン気流下室温にて３．５時間撹拌した。反応液をそのままアミノシリカゲルカラム（メタノール／クロロホルム混液）に付して精製し、５％メタノール／クロロホルム溶出液を減圧下濃縮すると、カルバゾールスペルミン（２５ｍｇ、収率７０％）が得られた。なおこの得られたカルバゾールスペルミンの構造式（３）、^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルのデータ、ＦＡＢ−ＭＳのデータを下記に示す。

^１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ８．０８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），８．０２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．４５（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．８，７．８，０．９Ｈｚ），７．３１（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．８，７．８，０．９Ｈｚ），３．６９（２Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝１０．４，５．８Ｈｚ），２．８３（２Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝５．６，５．６Ｈｚ），２．６９（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．９，６．９Ｈｚ），２．５２（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），２．３５（２Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝６．７，６．７Ｈｚ），１．８４（２Ｈ，ｂｒ−ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），１．５４（２Ｈ，ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．７Ｈｚ），１．２８−１．１９（４Ｈ，ｍ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１５２．８，１３８．３，１２６．６，１２４．８，１２１．８，１１９．９，１１３．８，４９．８，４９．７，４９．３，４７．７，４１．６，４０．５，３３．６，２８．１，２７．６，２７．５。

ＦＡＢ−ＭＳ（ＮＢＡ）
ｍ／ｚ ３９６（ＭＨ^＋）。

製造例３：ジベンゾアゼピンホモスペルミン（ＤＢＡ４４４）の合成
５，１０−ビス（２−ニトロベンゼンスルホニル）−５，１０−ジアザ−１，１４−テトラデカンジアミン（１１５ｍｇ）の無水塩化メチレン溶液（６．５ｍＬ）に市販の５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−カルボニルクロリド（２４．５ｍｇ）の無水塩化メチレン溶液（１．５ｍＬ）を加え、アルゴン気流下室温にて２時間撹拌した。反応液をそのままアミノシリカゲルカラム（メタノール／クロロホルム混液）に付して精製し、１％メタノール／クロロホルム溶出液を減圧下濃縮すると、ＤＢＡ４４４誘導体（６０．１ｍｇ、収率７６％）が得られた。また、過剰に用いた原料のテトラアミン誘導体を回収した。なおこのＤＢＡ４４４誘導体の^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルのデータ、^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルのデータ及びＦＡＢ−ＭＳのデータを下記に示す。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ７．９８−７．９４（２Ｈ，m），７．７０−７．６３（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），７．６１−７．５７（２Ｈ，m），７．４５−７．４０（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），７．４０−７．３０（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），６．９２（２Ｈ，ｓ），４．３５（１Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝５．８，５．８Ｈｚ），３．２６−３．２２（６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），３．１９（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，７．６Ｈｚ），３．０９（２Ｈ，ｂｒ−ｄｄｄ，Ｊ＝６．５，６．５、６．５Ｈｚ），２．６５（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．０，７．０Ｈｚ），１．５８−１．３１（１２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１５６．３，１４７．９６，１４７．９４，１４０．０，１３５．２，１３３．４，１３３．３，１３１．７０，１３１．６５，１３０．６０，１３０．５５，１３０．４，１２９．６，１２９．４，１２９．１，１２７．６，１２４．１，１２４．０，４７．３，４７．０，４６．８，４６．７，４１．６，３９．７，３０．５，２７．３，２５．６，２５．３，２５．０。

ＦＡＢ−ＭＳ（ＮＢＡ）
ｍ／ｚ ８２０（ＭＨ^＋）。

そして、上記で得たＤＢＡ４４４誘導体（１８３．５ｍｇ）の無水ＤＭＦ溶液（４．５ｍＬ）に炭酸カルシウム（９２．９ｍｇ）とチオフェノール（５５．２μＬ）を加え、アルゴン気流下室温にて２．５時間撹拌した。反応液をそのままアミノシリカゲルカラム（メタノール／クロロホルム混液）に付して精製し、５％メタノール／クロロホルム溶出液を減圧下濃縮し、ＤＢＡ４４４（６２．４ｍｇ、収率６２％）を得た。なお、この得られＤＢＡ４４４の構造式（４）、ＵＶスペクトル、^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルのデータ、^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルのデータ、ＦＡＢ−ＭＳのデータを下記に示しておく。

ＵＶ（ＭｅＯＨ）
λ_ｍａｘ ２８５．５，２４７．５（ｓｈ），２１３．５ ｎｍ。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ７．４６−７．４０（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），７．３８−７．３０（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），６．９１（２Ｈ，ｓ），４．４６（１Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝５．７，５．７Ｈｚ），３．１３（２Ｈ，ｂｒ−ｄdｄ，Ｊ＝６．３，６．３，６．３Ｈｚ），２．７０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，６．７Ｈｚ），２．６３−２．５９（２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），２．５７−２．５３（２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），１．５６−１．４６（８Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），１．４３−１．３７（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１５６．３，１４０．１，１３５．３，１３０．４，１２９．６，１２９．３，１２９．２，１２７．５，４９．７４，４９．７２，４９．６，４９．３，４２．０，４０．４，３１．５，２７．９４，２７．８５，２７．８４，２７．４，２７．１。

ＦＡＢ−ＭＳ（ＮＢＡ）
ｍ／ｚ ４５０（ＭＨ^＋）。

製造例４：ジヒドロジベンゾアゼピンホモスペルミン（ＤＤＢＡ４４４）の合成
５，１０−ビス（２−ニトロベンゼンスルホニル）−５，１０−ジアザ−１，１４−テトラデカンジアミン（３９６．０ｍｇ）の無水塩化メチレン溶液（２２．０ｍＬ）に市販の１０，１１−ジヒドロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−カルボニルクロリド（８４．９ｍｇ）の無水塩化メチレン溶液（８．０ｍＬ）を加え、アルゴン気流下室温にて１９時間撹拌した。反応液をそのままアミノシリカゲルカラム（メタノール／クロロホルム混液）に付して精製し、１％メタノール／クロロホルム溶出液を減圧下濃縮すると、ＤＤＢＡ４４４誘導体（２５７．５ｍｇ、収率９５％）が得られた。また、過剰に用いた原料のテトラアミン誘導体を回収した。なおこのＤＤＢＡ４４４誘導体の^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルのデータ、^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルのデータ及びＦＡＢ−ＭＳのデータを下記に示す。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ７．９８−７．９５（２Ｈ，m），７．７０−７．６４（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），７．６１−７．５６（２Ｈ，m），７．３６−７．３３（２Ｈ，ｍ），７．２２−７．２０（６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），４．６０（１Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝６．０，６．０Ｈｚ），３．２６−３．１５（１０Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），２．６５（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，６．８Ｈｚ），１．５８−１．３３（１６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１５６．４，１４７．９，１４０．５，１３７．２，１３３．４，１３３．３，１３１．６９，１３１．６４，１３０．６，１３０．５，１３０．３，１２８．９，１２７．８，１２７．０，１２４．１，１２４．０，４７．３，４７．０，４６．８，４６．７，４１．５，３９．９，３０．７，３０．５，２７．４，２５．５，２５．４，２５．０。

ＦＡＢ−ＭＳ（ＮＢＡ）
ｍ／ｚ ８２２（ＭＨ^＋）。

そして、上記で得たＤＤＢＡ４４４誘導体（２００．０ｍｇ）の無水ＤＭＦ溶液（４．５ｍＬ）に炭酸セシウム（２３７．８ｍｇ）とチオフェノール（５９．９μＬ）を加え、アルゴン気流下室温にて３時間撹拌した。反応液をそのままアミノシリカゲルカラム（メタノール／クロロホルム混液）に付して精製し、その５％メタノール／クロロホルム溶出液を減圧下濃縮した。その残渣をアルミナカラム（エタノール／クロロホルム／濃アンモニア水＝５／９５／１混液）に付して精製し、その溶出液を減圧下濃縮し、ＤＤＢＡ４４４（６８．８ｍｇ、収率６３％）を得た。なお、この得られＤＤＢＡ４４４の構造式（５）、ＵＶスペクトル、^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルのデータ、^１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルのデータ、ＦＡＢ−ＭＳのデータを下記に示しておく。

ＵＶ（ＭｅＯＨ）
λ_ｍａｘ ２３９．５（ｓｈ），２０３．０ ｎｍ。

^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ７．３８−７．３６（２Ｈ，m），７．２３−７．２０（６Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），４．６９（１Ｈ，ｂｒ−ｄｄ，Ｊ＝５．４，５．４Ｈｚ），３．２２（２Ｈ，ｂｒ−ｄｄｄ，Ｊ＝６．３，６．３，６．３Ｈｚ），２．７０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５，６．５Ｈｚ），２．６３−２．５４（８Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），１．６３−１．５６（４Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ），１．５３−１．４３（１２Ｈ，ｏｖｅｒｌａｐｐｅｄ）。

^１３Ｃ−ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）
δ１５６．５，１４０．７，１３７．３，１３０．４，１２９．１，１２７．８，１２７．１，４９．９０，４９．８７，４２．２，４０．７，３１．６，３０．９，２８．２，２８．０，２７．５，２７．３。

ＦＡＢ−ＭＳ（ＮＢＡ）
ｍ／ｚ ４５２（ＭＨ^＋）。

実施例１：アフリカツメガエル卵母細胞に発現させたＮＭＤＡ受容体に対するＡＱ４４４のチャネルブロック作用及び電位依存性の検討
ＮＭＤＡ受容体のｃＤＮＡクローンを基にｃＲＮＡを作製し、アフリカツメガエル卵母細胞に注入した。ＮＭＤＡ受容体のサブタイプ１（ＮＲ１）及びサブタイプ２（ＮＲ２Ａ）のｃＲＮＡを１：５（０．１ｎｇ ＮＲ１及び０．５ｎｇ ＮＲ２Ａ）の比率で卵に注入し、数日間恒温槽にて培養することで卵の膜上にＮＭＤＡ受容体を発現させた。発現の有無は２極電位固定法により確認した。３Ｍ塩化カリウム溶液で満たしたガラスキャピラリーを電極として用い、還流液に浸した卵に電極を刺すことで膜電位の変化を測定した。還流液は１００ｍＭ塩化ナトリウム、２ｍＭ塩化カリウム、１．８ｍＭ塩化バリウム、１０ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５の組成のものを使用した。１０μＭグリシン及び１０μＭグルタミン酸存在下におけるＮＭＤＡ受容体を介する電流を基準（ｃｏｎｔｒｏｌ）とし、ＡＱ４４４のチャネルブロック作用を検討した。この結果を図１に示す。なお図１（Ａ）は、膜電位を−７０ｍVに固定した条件で測定し、図に示すバーはグリシン及びグルタミン酸（Ｇｌｙ＋Ｇｌｕ）並びにＡＱ４４４を添加したタイミングを表す。なお図１（Ａ）中、横軸方向は時間を、縦軸方向は電流値を示す。

この結果、図１（Ａ）に示されるように、ＡＱ４４４のＮＲ１／ＮＲ２Ａに対するチャネルブロック作用における５０％阻害濃度（ＩＣ_５０）は０．４７μＭであった。この値は脳機能改善薬として市販されているメマンチン（ＩＣ_５０＝０．９５μＭ）に比べ約２倍強いチャネルブロック作用を示していることが確認できた。

なお、図１（Ｂ）に示されるように、卵の膜電位を−１５０ｍＶから＋１０ｍＶまで連続的に変化させた際のＡＱ４４４のチャネルブロック作用は電位依存性を示していることが確認できた。通常、細胞の膜電位は−７０ｍＶ程度であることから、ＡＱ４４４は静止膜電位の細胞に作用し、ＮＭＤＡ受容体のチャネルブロック作用を示すことが確認できた。

実施例２：ＮＭＤＡ受容体の各サブタイプに対するＡＱ４４４の反応性の検討
実施例１に示した方法により、卵に注入するｃＲＮＡをＮＲ１／ＮＲ２Ａ（０．１ｎｇ ＮＲ１及び０．５ｎｇ ＮＲ２Ａ）、ＮＲ１／ＮＲ２Ｂ（０．１ｎｇ ＮＲ１及び０．５ｎｇ ＮＲ２Ｂ）、ＮＲ１／ＮＲ２Ｃ（４ｎｇ ＮＲ１及び２０ｎｇ ＮＲ２Ｃ）もしくはＮＲ１／ＮＲ２Ｄ（４ｎｇ ＮＲ１及び２０ｎｇ ＮＲ２Ｄ）とし、各々の受容体に対するＡＱ４４４の反応性を検討した。ＡＱ４４４は最終濃度が０．１〜３０μＭとなるように還流液に添加した。その結果を図２に示す。ＡＱ４４４はＮＲ１／ＮＲ２Ａ、ＮＲ１／ＮＲ２Ｂ及びＮＲ１／ＮＲ２Ｄにより選択的にチャネルブロック作用を示した。また各受容体に対するチャネルブロック作用の強さはＮＲ１／ＮＲ２Ａ＝ＮＲ１／ＮＲ２Ｂ＝ＮＲ１／ＮＲ２Ｄ＞＞ＮＲ１／ＮＲ２Ｃの順であった。

実施例３：ＮＭＤＡ受容体アミノ酸置換変異体に対するＡＱ４４４のチャネルブロック作用の検討
部位特異的変異導入法により、ＮＭＤＡ受容体のアミノ酸残基を置換した変異体を作製し、実施例１の方法に従い、変異ＮＭＤＡ受容体を卵に発現させ、ＡＱ４４４のチャネルブロック作用について検討した。その結果を図３に示す。図３で示すとおり、ＮＲ１では６１６番目のアスパラギンをグルタミンに置換させた変異体（Ｎ６１６Ｑ、以下略記で示す）及びＮ６１６Ｒで著しいチャネルブロック作用の低下が見られた。また、ＮＲ２Ｂにおいては、Ｎ６１５Ｑ及びＮ６１６Ｑで著しいチャネルブロック作用の低下が見られた。これらの残基はいずれもＮＭＤＡ受容体Ｍ２領域のチャネル孔の大きさを決定すると考えられる部位に位置し、ＡＱ４４４のチャネルブロック作用に強く関与していることが示された。他に関連するＮＭＤＡ受容体上のアミノ酸残基をモデルと共に図４に示しておく。

実施例４：アフリカツメガエル卵母細胞に発現させたＮＭＤＡ受容体に対するカルバゾールスペルミンのチャネルブロック作用
実施例１と同じ方法でＡＱ４４４をカルバゾールスペルミンに変え、チャネルブロック作用を確認した。この結果、ＩＣ_５０は０．１５μＭであった。この値は、脳機能改善薬として市販されているメマンチン（Ｉｃ５０＝０．９５μＭ）に比べ約６倍強いチャネルブロック作用を示していることを確認した。

アゼピン環及び４，５―ジヒドロアゼピン環を含むDBA444及びDDBA444は電位依存的にNMDA受容体活性を阻害した。両化合物の-70mVにおけるＩＣ_５０はそれぞれ０．２４及び０．０７２μＭで、メマンチンに比べ、それぞれ約４倍及び１３倍の強いチャネルブロック作用を示すことを確認した。また、DBA444及びDDBA444の細胞毒性のＩＣ_５０はメマンチンの１４７μＭと同程度の１３２μＭと１３３μＭであった。従って、メマンチンに比べ少量で効果を発揮し、副作用が少ないことが予測された。

以上により、新規なＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物、この化合物を含む薬剤を提供することができることを確認した。

高齢化社会に伴い、脳血管障害、アルツハイマー病等の高次脳機能に障害を来たす疾患に罹患する人口は年々増加傾向にある。本発明により得られた化合物及びこれを用いる薬剤は、脳機能保護薬として産業上の利用可能性がある。新規脳機能保護薬が開発されると、患者は勿論、介護者のＱＯＬ（Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ）の向上につながることは間違いなく、高齢者医療に対する貢献度は計り知れない。

図１（Ａ）は、アフリカツメガエルの卵母細胞に発現させたＮＭＤＡ受容体を介する電流がＡＱ４４４の投与により抑制された結果を示す波形である。また、図１（Ｂ）は、ＡＱ４４４のチャネルブロック作用に対する電位依存性を示すグラフである。 図２は、ＮＭＤＡ受容体の各サブタイプに対するＡＱ４４４のチャネルブロック作用を示すグラフである。 図３は、ＮＭＤＡ受容体の各種変異体に対するＡＱ４４４のチャネルブロック作用を示すグラフである。 図４は推定されるＮＭＤＡ受容体のチャネル孔付近の構造モデル及びＡＱ４４４のチャネルブロック作用に関わるアミノ酸残基を示したものである。

Claims (11)

1. 下記式（１）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含む、ＮＭＤＡ受容体の過剰興奮が原因である疾患の治療又は予防に用いる薬剤。
   （Ａ環とＣ環に縮合するＢ環はキノン、ベンゼン、ピロール、ピリジン、１，４−ジヒドロピリジン、アゼピン、４，５−ジヒドロアゼピン又は１，４−チアジンである。Ｒ_１〜Ｒ_５はそれぞれホルミル、アシル基、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ基、アリール基又はカルボキサミド基であり、Ｒ_１又はＲ_２の少なくとも一方はカルボキサミド基のアミノ基を除きアミノ基を３個以上含むポリアミン構造を有するカルボキサミド基である。Ｒ_１〜Ｒ_５は同じであってもよく異なっていてもよい。）
2. 下記式（２）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含む、請求項１記載の薬剤。
   
3. 下記式（３）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物若しくはその塩又はそれらの水和物を含む、請求項１記載の薬剤。
   
4. 下記（４）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物もしくはその塩またはそれら水和物を含む、請求項１記載の薬剤。
   
5. 下記（５）で示されるＮＭＤＡ受容体チャネルブロック作用を示す化合物もしくはその塩またはそれら水和物を含む、請求項１記載の薬剤。
   
6. 前記ＮＭＤＡ受容体の過剰興奮が原因である疾患は、脳血管障害、脳梗塞、脳内出血、アルツハイマー病、中枢神経変性疾患、外傷性脳損傷、外傷性脊髄損傷若しくは脱髄疾患、又はこれらに付随する後遺症である請求項１乃至５のいずれか一項に記載の薬剤。
7. 下記式（１）で示される化合物。
   （Ａ環とＣ環に縮合するＢ環はキノン、ベンゼン、ピロール、ピリジン、１，４−ジヒドロピリジン、アゼピン、４，５−ジヒドロアゼピン又は１，４−チアジンである。Ｒ_１〜Ｒ_５はそれぞれホルミル、アシル基、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ基、アリール基又はカルボキサミド基であり、Ｒ_１又はＲ_２の少なくとも一方はカルボキサミド基のアミノ基を除きアミノ基を３個以上含むポリアミン構造を有するカルボキサミド基である。Ｒ_１〜Ｒ_５は同じであってもよく異なっていてもよい。）
8. 下記式（２）で示される請求項７記載の化合物。
   
9. 下記式（３）で示される請求項７記載の化合物。
   
10. 下記式（４）で示される請求項７記載の化合物。
    
11. 下記式（５）で示される請求項７記載の化合物。