JPWO2004113343A1 - 三環性トリアゾロベンゾアゼピン誘導体の新規結晶性物質 - Google Patents

Abstract

本発明は、溶解性および吸収性に優れた三環性トリアゾロベンゾアゼピン誘導体の新規な結晶性物質を提供するものである。

Description

発明の背景

本発明は、医薬品として有用な２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンの新規な結晶性物質に関する。

２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピン（以下、本明細書において「化合物Ａ」という）は、下記の化学構造を示す化合物であり、ＷＯ９９／１６７７０号公報（日本特許第３１８８４８２号公報、米国特許第６３７２７３５号公報）に記載されているように抗アレルギー剤としての利用が期待されている（これら公報の記載は引用することにより本明細書の開示の一部とされる）。

前記公報記載の方法に準じて得られる化合物Ａの粗製物を塩化メチレンに溶解させ、メタノールを用いて再結晶させる場合、安定な化合物Ａの結晶性物質を得ることができる（以下、「α型結晶性物質」という）。しかしながら、このα型結晶性物質は水などの溶媒に対して難溶性であり、そのままの形態では生体内に吸収されにくいことが、本発明者らの実験から明らかとなった。好適な化合物Ａの薬理活性を発現させる製剤を設計・製造するためには、溶解性および吸収性に優れた化合物Ａの新規な形態を創出することが望まれる。

本発明者らは、今般、溶解性および吸収性に優れた化合物Ａの新規な結晶性物質を得ることに成功した。本発明はこれらの知見に基づくものである。
従って、本発明は、溶解性および吸収性に優れた化合物Ａの新規結晶性物質の提供をその目的としている。
発明の概要

そして、本発明による化合物Ａの結晶性物質は、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角（２θ）：４．７±０．１°、７．４±０．１°、１１．８±０．１°、１３．４±０．１°、１６．５±０．１°、１８．６±０．１°に回折ピークを示すものである。

本発明による化合物Ａの結晶性物質は、水およびメタノール、エタノール等の水性有機溶媒に対して優れた溶解性を示すことができる。さらに、本発明による化合物Ａの結晶性物質は、生体への吸収性に優れており、化合物Ａについて顕著に優れた生物学的利用能を有するものである。

［図１］は、実施例１により得られた化合物Ａの結晶性物質の粉末Ｘ線回折パターンである。
［図２］は、参考例１により得られた化合物Ａの結晶性物質の粉末Ｘ線回折パターンである。
［図３］は、実施例１により得られた化合物Ａの結晶性物質のＤＳＣカーブである。
［図４］は、参考例１により得られた化合物Ａの結晶性物質のＤＳＣカーブである。
［図５］は、実施例１および参考例１により得られた化合物Ａの結晶性物質の濃水への溶解性を示す図である。
［図６］は、実施例１または参考例１により得られた化合物Ａの結晶性物質を、それぞれ１重量％メチルセルロース水溶液に懸濁させ、カニクイザルに経口投与した場合における、化合物Ｂの血漿中濃度推移を示す図である。
発明の具体的説明

本発明による化合物Ａの結晶性物質は、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角（２θ）：４．７±０．１°、７．４±０．１°、１１．８±０．１°、１３．４±０．１°、１６．５±０．１°、１８．６±０．１°に回折ピークを示す。また、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によるＤＳＣチャートにおいて、１７０〜１９０℃付近に幅の広い吸熱ピークを示し、さらに２２５℃付近に鋭い吸熱ピークを示すものである。このように同定された特定の物理化学的性質を示すような化合物Ａ生成物は、本発明者らの知る限りでは、これまで知られておらず、化合物Ａの新規な結晶性物質といえる。

また、本発明による化合物Ａの結晶性物質はアレルギー疾患の予防または治療に用いることが出来る。アレルギー疾患としては、例えば気管支喘息、湿疹、蕁麻疹、アレルギー性胃腸障害、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎などが挙げられる。従って、本発明の別の態様によれば、本発明による化合物Ａの結晶性物質を含んでなる組成物、とりわけ医薬組成物が提供される。

本発明による化合物Ａの結晶性物質は、そのまま経口投与することもできるが、一般的には公知の医薬上許容される担体とともに組成物として調製することができる。
本発明による化合物Ａの結晶性物質を経口投与する場合には、公知の薬学的に許容される賦形剤（例えば、乳糖、結晶セルロース、デンプン、リン酸カルシウム等）、結合剤（例えば、デンプン、カルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース等）、崩壊剤（カルメロースカルシウム、炭酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム、タルク等）などを用いることにより、医療に通常供される錠剤、カプセル剤、顆粒剤、ドライシロップ剤等の形態に処方することができる。また、本発明による結晶性物質は、水等への溶解性に優れていることから、シロップを含む各種液剤の製造および用時調製において有利に使用することができる。さらに、これらの各種製剤は、長時間にわたって作用が持続する徐放性製剤とすることもできる。

また、本発明による化合物Ａの結晶性物質は、経口投与以外の投与経路を介した各種の治療に適用することができる。そのための剤形としては、舌下錠、坐剤、吸入剤、点鼻剤、点眼剤、さらに経皮吸収製剤としての貼付剤または軟膏・クリーム剤などが挙げられるが、これらに限定されるものではない。

本発明による化合物Ａの結晶性物質は以下の製造方法により、好ましく製造することができる。
化合物Ａを、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、および酢酸から選択される少なくとも一つの有機溶媒に、２０〜８０℃の温度下溶解する。ここで、有機溶媒は、好ましくは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドとされる。この溶液を、所望により濾過した後、攪拌下、２０〜４０℃の水に約１〜３時間かけて滴下し、析出する沈殿物を濾取する。この沈殿物を、２０〜４０℃の水にて洗浄した後、２０〜６０℃にて減圧して乾燥させることにより、本発明による化合物Ａの結晶性物質を得ることができる。

また、以上から明らかなように、本発明による別の態様によれば、医薬組成物の製造のための、本発明による化合物Ａの結晶性物質の使用が提供される。また、本発明による別の態様によれば、抗アレルギー薬の製造のための、本発明による化合物Ａの結晶性物質の使用が提供される。また、本発明の別の態様によれば、本発明による化合物Ａの結晶性物質をヒトを含む動物に投与することを含んでなる、アレルギー疾患の予防または治療方法が提供される。

以下、本発明を実施例によってより具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。なお、以下において、本発明による化合物Ａの結晶性物質を「β型結晶性物質」という。

実施例１：化合物Ａのβ型結晶性物質の製造法１
ＷＯ９９／１６７７０号公報の実施例２０に記載の方法に準じて得られた淡黄色粉末２５．０ｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド０．５３Ｌに加え、約５０℃に加熱しながら溶解させた後、この溶液を濾過した。得られた濾液を、攪拌下水２．５Ｌに約１時間かけて滴下して、析出した沈殿物を濾取した。この沈殿物を、１．２５Ｌの水にて２度洗浄した後、室温減圧下にて１６時間、４０℃減圧下にて１日乾燥させ、β型結晶性物質を得た（２４．２ｇ、収率９６．８％）。

実施例２：化合物Ａのβ型結晶性物質の製造法２
ＷＯ９９／１６７７０号公報の実施例２０に記載の方法に準じて得られた淡黄色粉末２５．６ｇを、ジメチルスルホキシド１Ｌに加え、約６０℃に加熱しながら溶解させた後、この溶液を濾過した。得られた濾液を、パドル回転数２００ｒｐｍで攪拌している水１５Ｌに、約１．５時間かけて滴下し、析出した沈殿物を濾取した。この沈殿物を、２Ｌの水にて２度洗浄した後、室温減圧下で１日、４０℃減圧下で１日乾燥させ、β型結晶性物質を得た（２３．５ｇ、収率９１．８％）。

実施例３：化合物Ａのβ型結晶性物質の製造法３
ＷＯ９９／１６７７０号公報実施例２０に記載の方法に準じて得られた淡黄色粉末９．９８ｇを、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド０．４Ｌに加え、約６０℃に加熱しながら溶解させた後、この溶液を濾過をした。得られた濾液を、パドル回転数２００ｒｐｍで攪拌している水６Ｌに約４０分間かけて滴下し、析出した沈殿物を濾取した。この沈殿物を、１．２Ｌの水にて２度洗浄した後、室温減圧下にて１日乾燥させ、β型結晶性物質を得た（９．６２ｇ、収率９６．４％）。

参考例１：化合物Ａのα型結晶性物質の製造法
ＷＯ９９／１６７７０号公報の実施例２０に記載の方法に準じて得られた淡黄色粉末１０．０１ｇに塩化メチレン０．２Ｌを加え、攪拌して懸濁液を得た。次に、ロータリーエバポレータを用いて、この懸濁液中の溶媒を留去した。得られた残留物に２−プロパノール０．２Ｌを加えて３時間攪拌し、懸濁液を得た。この懸濁液を濾過し、得られた濾取物に、再度２−プロパノール０．２Ｌを加え３時間攪拌し、懸濁液を得た。さらに、この懸濁液を濾過し、得られた濾取物に１０％２−プロパノール水溶液を０．２Ｌ加えて、１日攪拌して懸濁液を得た。この懸濁液を濾過後、得られた濾取物を約１８時間室温にて減圧乾燥させ、化合物Ａのα型結晶性物質を得た（９．７９ｇ、収率９７．８％）。

試験例１：粉末Ｘ線回折
実施例１により得られたβ型結晶性物質及び参考例１により得られたα型結晶性物質を粉末Ｘ線回折装置により評価した。その測定条件は以下の通りであった。
装置：ＲＩＮＴ２１００（理学電機製）
測定条件：Ｘ線；ＣｕＫα_１、管電圧；４０ｋＶ、管電流；２０ｍＡ、単色化；グラファイトモノクロメータ、スキャンスピード；４°／ｍｉｎ、スキャンステップ；０．０２°、走査軸；２θ／θ、走査範囲；２θ＝３〜４０°

実施例１により得られたβ型結晶性物質の粉末Ｘ線回折パターンは図１に示される通りであり、参考例１により得られたα型結晶性物質の粉末Ｘ線回折パターンは図２に示される通りであった。β型結晶性物質は、回折角（２θ）：４．７±０．１°、７．４±０．１°、１１．８±０．１°、１３．４±０．１°、１６．５±０．１°、１８．６±０．１°に特徴的な回折ピークを示していた。一方、α型結晶性物質は、１１．２±０．１°、１４．４±０．１°、１５．５±０．１°、２５．３±０．１°に特徴的な回折ピークを示していた。β型結晶性物質とα型結晶性物質の粉末Ｘ線回折パターンは明確に異なっていた。

試験例２：ＤＳＣ
実施例１により得られたβ型結晶性物質および参考例１により得られたα型結晶性物質を示差走査熱量計により評価した。その測定条件は下記の通りであった。
装置：ＤＳＣ２２０Ｕ（セイコーインスツルメンツ製）
測定条件：パン；アルミニウム製開放パン、雰囲気；窒素、ガス流量；５０ｍＬ／ｍｉｎ、昇温速度；５℃／ｍｉｎ、測定温度範囲；５０〜２８０℃

実施例１により得られたβ型結晶性物質は、図３に示されるＤＳＣカーブにおいて、１７０℃から１９０℃付近に幅の広い吸熱ピークと２２５℃付近に鋭い吸熱ピークを示した。一方、参考例１により得られたα型結晶性物質は、図４に示されるＤＳＣカーブにおいて、２４３℃付近に吸熱ピークを示し、１７０℃から１９０℃付近及び２２５℃付近には吸熱ピークを示さなかった。

試験例３：溶解性試験
実施例１により得られたβ型結晶性物質または参考例１により得られたα形結晶性物質を試験サンプルとして用い、水（３７℃）に対する溶解性評価を行った。試験サンプル（約１０ｍｇ）を水（３７℃）１００ｍＬ中に加え、１０００ｒｐｍにて攪拌した。そして、経時的に採取した試料をメンブランフィルター（Ｍｉｌｌｅｘ ＬＧ−１３、ミリポア製）を用いて濾渦し、濾液中の化合物Ａの濃度を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて分析した。その測定条件は以下の通りとした。

ＨＰＬＣ：ＬＣ−１０ｖｐシリーズ（島津製作所製）
システムコントローラー：ＣＢＭ−１０Ａ
ポンプ：ＬＣ−１０Ａｄｖｐ
デガッサー：ＤＧＳ−１４Ａ
オートサンプラー：ＳＩＬ−１０Ａｄｖｐ
カラムオーブン：ＣＴＯ−ＡＣｖｐ
検出器：ＳＰＤ−１０Ａｖｐ
測定波長：２４６ｎｍ
カラム：Ｍｉｇｈｔｙｓｉｌ ＲＰ−１８ ＧＰ ４．６×２５０ｍｍ（関東化学製）
カラム温度：４０℃付近の一定温度
移動相：メタノール／水混液（５５：４５）
流量：１ｍＬ／分
注入量：１０μＬ
内標準溶液：パラオキシ安息香酸プロピルのアセトニトリル溶液（濃度：２００μｇ／ｍＬ）

実施例１により得られたβ型結晶性物質および参考例１により得られたα型結晶性物質のそれぞれの試験液中における化合物Ａの濃度推移は図５に示される通りであった。各サンプリング時間における化合物Ａの濃度を比較すると、β型結晶性物質の示す化合物Ａの濃度は、α型結晶性物質の示す化合物Ａの濃度の約２〜４倍となっており、β型結晶性物質はα型結晶性物質よりも水に対する溶解性が高いことが示された。

試験例４：吸収性試験
化合物Ａは生体内に吸収されると、その生理活性を発現する本体である７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピン（以下、化合物Ｂと称する）に変換される。この化合物Ｂを指標として、以下の試験を行った。
参考例１により得られたα型結晶性物質または実施例１により得られたβ型結晶性物質を、１重量％メチルセルロース水溶液を用いて懸濁液とした。この懸濁液を、１晩絶食させたカニクイザル（５ｍｇ／ｋｇ、ｎ＝５）に経口投与し、化合物Ｂの血漿中濃度推移および最終観察時点までの血漿中薬物濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）を比較することで、試料間の吸収性の差を評価した。採取した血液中の化合物Ｂの血漿中薬物濃度は下記の方法により定量した。

伏在静脈から採取した血液（１ｍＬ）をヘパリン存在下遠心分離（４℃、３０００ｒｐｍ、１０分間）して血漿を得た。得られた血漿（１００μＬ）に、内標準物質（７−メチル−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンナトリウム）を含有するメタノール溶液（１００ｎｇ／ｍＬ、１００μＬ）およびメタノール（４００μＬ）を添加・撹拌し、遠心分離（４℃、１００００ｒｐｍ、５分間）した。得られた上清に、再度メタノール（３００μＬ）を添加し、上記と同様に遠心分離した後、上清を遠心減圧して濃縮乾固させ、残渣にＨＰＬＣ移動相（１５０μＬ）を加えて再溶解させ、これをＨＰＬＣ試料とした。試験例２に用いたＨＰＬＣの測定条件は以下の通りである。

ＨＰＬＣポンプ：６００Ｅ（日本ウォーターズ製）
オートサンプラー：７１７ｐｌｕｓ（日本ウォーターズ製）
検出器：ＲＦ−１０ＡＸＬ（島津製作所製）
蛍光検出波長：Ｅｘ２７０ｎｍ、Ｅｍ４６６ｎｍ
カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ５Ｃ１８−ＡＲ−ＩＩ（４．６×１５０ｍｍ、ナカライテスク製）
ガードカラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ５Ｃ１８−ＡＲ（４．６×１０ｍｍ、ナカライテスク製）
カラム温度：３５℃
移動相：１０ｍｍｏｌ／Ｌ リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）：メタノール（７５：２５）
流速：０．８ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：２０μＬ

結果は図６に示される通りであった。化合物Ｂの血漿中濃度については、β型結晶性物質の投与群は、α型結晶性物質の投与群よりも高い値を示した。さらに、ＡＵＣについては、β型結晶性物質の投与群は、α型結晶性物質の投与群よりも約５〜６倍大きかった。

Claims (8)

1. 粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角（２θ）：４．７±０．１°、７．４±０．１°、１１．８±０．１°、１３．４±０．１°、１６．５±０．１°、１８．６±０．１°に回折ピークを示す、２−（１−イソプロポキシカルボニルオキシ−２−メチルプロピル）−７，８−ジメトキシ−４（５Ｈ），１０−ジオキソ−２Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｃ］［１］ベンゾアゼピンの結晶性物質。
2. 示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によるＤＳＣチャートにおいて、１７０〜１９０℃付近および２２５℃付近に吸熱ピークを示す、請求項１に記載の結晶性物質。
3. 請求項１または２に記載の結晶性物質を含んでなる、組成物。
4. 請求項１または２に記載の結晶性物質を含んでなる、医薬組成物。
5. 請求項１または２に記載の結晶性物質を含んでなる、抗アレルギー薬。
6. 医薬組成物の製造のための、請求項１または２に記載の結晶性物質の使用。
7. 抗アレルギー薬の製造のための、請求項１または２に記載の結晶性物質の使用。
8. 請求項１または２に記載の結晶性物質をヒトを含む動物に投与することを含んでなる、アレルギー疾患の予防または治療方法。

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