JPWO2002092096A1

JPWO2002092096A1 - 抗腫瘍剤

Info

Publication number: JPWO2002092096A1
Application number: JP2002589013A
Authority: JP
Inventors: 真由美山野
Original assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2001-05-11
Filing date: 2002-05-08
Publication date: 2004-08-26
Also published as: EP1391203A1; WO2002092096A1; EP1391203A4; US20040138207A1; CA2445477A1

Abstract

（３Ｒ）−Ｎ−（１−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル）−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−ピリジル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−Ｎ’−（３−（メチルアミノ）フェニル）ウレアを有効成分として含有する本発明の抗腫瘍剤は、各種担癌マウスにおいて、良好に癌の増殖を抑制し、しかも低毒性であることが確認されており、殊に、膵臓癌、大腸癌並びに胃癌の治療に有用である。特に本発明医薬を多剤併用化学療法に用いた場合、副作用の強い抗腫瘍剤の投与量を減少させることが可能であり、良好な抗腫瘍作用を有する副作用の低減された多剤併用化学療法の実現が期待される。

Description

技術分野
本発明は、医薬、殊に膵臓癌の治療に有用な抗腫瘍剤に関する。
背景技術
近年、癌の発生率は増加の一途をたどり、この治療には外科手術や放射線療法とともに各種の抗腫瘍剤による化学療法が行われてきた。例えば、５−ＦＵ（５−ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）及びその誘導体（ｔｅｇａｆｕｒ，ＵＦＴ，ｃａｒｍｏｆｕｒ，ｅｔｃ．）、ＭＭＣ（ｍｉｔｏｍｙｃｉｎＣ）、ＡＤＭ（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）及びその誘導体（ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ，ａｃｌａｒｕｂｉｃｉｎ，ｅｔｃ．）などの抗腫瘍剤を併用する多剤併用療法が広く行われている（「癌の化学療法ハンドブック抗癌剤の使い方と副作用対策」（小川一誠、堀越昇監訳；医薬書院ＭＹＷ社；１９９４年１０月２０日発行），ｐ２３５−３２３）。しかし、効果並びに強い副作用（消化器毒性、骨髄抑制、腎毒性、心毒性、脱毛、悪心・嘔吐等）の点から、更に抗癌作用の優れた、副作用の少ない抗腫瘍剤の開発が切望されている。
特に、難治癌の一つである膵臓癌に対して、高い奏効率を示す化学療法剤は未だ無く、標準的なレジメンは確立されていない。最近治療成績が報告された各種抗腫瘍剤のなかで、代謝拮抗剤であるｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ（ＧＥＭ）が比較的良好な成績を示しているが、骨髄抑制、発熱、悪心・嘔吐等の副作用を有する。膵臓癌の予後を改善するためには、新しいタイプの有効な抗癌剤の創製が切望されている（化学療法の領域，Ｖｏｌ．１４，Ｓ−１，ｐ２７５−２８０，（１９９８）；及び「抗癌剤の選び方と使い方（改訂第２版）」（小川一誠編集、南江堂、１９９９年１０月１５日発行），ｐ４１−４２）。
一方、本発明医薬の有効成分である下式で示される（３Ｒ）−Ｎ−（１−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル）−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−ピリジル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−Ｎ’−（３−（メチルアミノ）フェニル）ウレア（以下化合物Ａと略記する）は、優れた選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗作用を有し、殊にガストリンによって引き起こされる胃酸分泌を良好に抑制することが報告されている（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７，４０（３），３３１−３４１）。

また、ＷＯ９３／１６９９９号公報には、下記一般式（Ｉ）のベンゾジアゼピン誘導体又はその塩、並びにこれらの化合物を有効成分として含有するガストリン又はＣＣＫ−Ｂレセプター拮抗剤として作用する医療用組成物、殊に、ガストリンによって制御される生理的機能の不全によって誘発される疾病の治療用医薬品である前記組成物が開示されている。実施例５７には、化合物Ａのラセミ体が開示されているが、光学活性体である化合物Ａ自体の開示は無い。

（式中、Ｒ^１は、−ＣＨ_２ＣＨＯＨ（ＣＨ_２）ａＲ^４、ケトン基−ＣＨ_２ＣＯ（ＣＨ_２）ａＲ^５又は−ＣＨ_２ＣＯＣ（ＣＨ_３）_２−Ｒ^５、ａは０又は１、Ｒ^４及びＲ^５はアルキル及びシクロアルキル基並びにヘテロ原子が任意に置換された飽和複素環基から選択され、（中略）、Ｒ^２及びＲ^３は独立して、任意に置換された芳香族炭素環及び任意に置換された芳香族複素環残基から選択され、そして、Ｗ及びＸは独立してハロゲン及び水素原子並びにアルキル及びアルコキシ基から選択される。）
また、ＷＯ９５／０６０４０号公報の実施例５２には、化合物Ａが開示され、その製造法並びに該化合物を活性成分として含むガストリンによって制御される生理的機能の不全によって誘発される疾病の治療用医薬組成物が開示されている。
前記２件の特許公報には、ガストリンによって制御される生理学的機能の不全によって誘導される疾病として、胃及び十二指腸潰瘍、胃炎、逆流性食道炎等と併せて、胃及び結腸癌が挙げられている。しかし、これらの公報には、ＣＣＫ−Ｂに対する結合親和性とラットにおけるペンタガストリン刺激性胃酸分泌の阻害作用が開示されているのみであり、胃及び結腸癌に対する作用については具体的開示が全く無い。
肺癌や大腸癌細胞にはガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体が発現しており、ガストリンがこれらの癌細胞の増殖を増大させるとの報告が有る（Ａｍ．Ｊ．Ｓｕｒｇ．，１４９，３５−８，１９８５；及びＡｒｃｈ．Ｓｕｒ．１２４，４７０−２，１９８９）。また、１−メチルフェナシルベンゾジアゼピン誘導体がヒトガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体を発現したマウス細胞において、受容体への結合阻害により細胞増殖抑制効果を発現した報告が有る（特開平８−４０９０８号公報）。
しかし、選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗薬の抗腫瘍剤としての有用性を示す臨床報告は現在まで無い。また、動物モデルを用いた試験においても、選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗薬の抗腫瘍効果を明確に裏付ける報告は無い。
例えば、グルタミン酸誘導体ＣＲ２０９３はヒト胃癌、ラット膵臓癌Ｒ４２Ｊ、若しくはヒト大腸癌担癌マウスへの静脈内投与において、別途ガストリンを投与したガストリン刺激群ではガストリン刺激によって誘導された癌増殖が抑制されたが、ガストリン刺激が無い群では癌増殖が抑制されなかった（Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６５，８７９−８８３，１９９２）。同様に、ベンゾジアゼピン化合物であるＬ−３６５２６０においても、ガストリン刺激が無い群では、癌増殖抑制が見られなかった（Ｃａｎｃｅｒ，６８，１２５５−１２６０，１９９１）。これらの事実は、外部から強制的にガストリン刺激を与えた場合のみ、そのガストリンによって誘導された癌細胞の増殖を、選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗薬が抑制したことを意味し、臨床における胃癌、膵臓癌、大腸癌等（即ち、外部からのガストリン刺激のない場合）において、これらの選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗薬が癌増殖抑制効果を有する根拠は何等示されていない。
非選択的なガストリン／ＣＣＫ受容体拮抗薬であるプログルミドが大腸癌担癌マウスの大腸癌の増殖を良好に抑制し、マウスの死亡率を低下させたことが報告されている（ＡＮＮ．Ｓｕｒｇ．２０２，３０３−９，１９８５）。しかし、ＣＣＫ−Ａ受容体が消化器癌に関与することを示す報告（ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｕｒｇｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ５３（３）：２３４−２３７（１９９２）；及びＣａｎｃｅｒＬｅｔｔｅｒｓ１０６（２）：２５７−２６２（１９９６））があり、プログルミドの抗腫瘍効果が、ＣＣＫ−Ａ受容体を介するものであるのか、或いはガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体を介するものであるのかは不明であった。
また、非ベンゾジアゼピン化合物である選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗薬ＣＩ−９８８は、ヒト大腸癌担癌マウスにおいて２５ｍｇ／ｋｇの経口投与時、ガストリン刺激無しで増殖抑制作用を示したものの、５０ｍｇ／ｋｇでは全く効果が見られず癌増殖抑制作用が消失していた（ＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２３，４３８−４０，１９９６）。
上記の通り、癌におけるガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体の役割は未だ解明されておらず、選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体阻害剤が、臨床的に有用な抗腫瘍剤になるか否かは、実際に不明であった。
一方、抗癌作用を有するベンゾジアゼピン誘導体として、２，３，４，５−テトラヒドロ−１−（１Ｈ−イミダゾール−４−イルメチル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン誘導体（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４３（２０），３５８７，２０００）が報告されているが、本願化合物とは全く構造を異にする。
発明の開示
本発明者等は、化合物Ａの生理活性作用について鋭意研究を行った結果、意外にも化合物Ａ（（３Ｒ）−Ｎ−（１−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル）−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−ピリジル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−Ｎ−（３−（メチルアミノ）フェニル）ウレア）が、良好な抗癌作用、殊に膵臓癌に対して優れた抗癌作用を有し、しかも高用量投与においても副作用が少ないことを見い出し、本発明を完成した。
即ち、本発明は化合物Ａ又はその塩を有効成分として含有する抗腫瘍剤に関する。好ましくは、１日当たりの経口投与量が０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１ｍｇ／ｋｇ以上である抗腫瘍剤、並びに、１日当たりの静脈内投与量が０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇである抗腫瘍剤である。また、本発明の抗腫瘍剤は、膵臓癌、大腸癌若しくは胃癌の治療剤として好ましく、中でも、膵臓癌の治療剤として特に好ましい。更に、本発明の抗腫瘍剤は、多剤併用化学療法に用いられる抗腫瘍剤、即ち、少なくとも１つの他の抗腫瘍剤と、同時又は異なる時に、同一又は異なる頻度で、及び同一又は異なる投与形態で、併用投与される抗腫瘍剤を包含する。
また、本発明は、化合物Ａ又はその塩の、抗腫瘍剤、殊に多剤併用化学療法に用いる抗腫瘍剤である医薬の製造への使用、有効量の化合物Ａ又はその塩を患者に投与することからなる癌患者の治療方法、並びに、有効量の化合物Ａ又はその塩と、少なくとも１つの他の抗腫瘍剤を投与することを含む多剤併用化学療法による癌患者の治療方法を包含する。
発明を実施するための最良の形態
本発明の有効成分である化合物Ａ又はその塩は前記Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７，４０（３），３３１−３４１、或いはＷＯ９５／０６０４０号公報記載の方法により製造することができる。ここに、化合物Ａの塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、酢酸塩等の無機酸又は有機酸との塩が挙げられる。
本発明の医薬製剤は，当分野において通常用いられている薬剤用担体，賦形剤等を用いて通常使用されている方法によって調製することができる。投与は錠剤，丸剤，カプセル剤，顆粒剤，散剤，液剤等による経口投与，又は，静注，筋注等の注射剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
本発明による経口投与のための固体組成物としては，錠剤，散剤，顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては，活性物質が少なくともひとつの不活性な希釈剤，例えば乳糖，マンニトール，ブドウ糖，ヒドロキシプロピルセルロース，微結晶セルロース，デンプン，ポリビニルピロリドン，メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等と混合される。組成物は，常法に従って，不活性な希釈剤以外の添加剤，例えばステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤や崩壊剤，安定化剤，溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要によりショ糖，ゼラチン，ヒドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートなどの糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
経口投与のための液体組成物は，薬剤的に許容される乳濁剤，溶液剤，懸濁剤，シロップ剤，エリキシル剤等を含み，一般的に用いられる不活性な希釈剤，例えば精製水，エタノールを含む。この組成物は不活性な希釈剤以外に湿潤剤，懸濁剤のような補助剤，甘味剤，風味剤，芳香剤，防腐剤を含有していてもよい。
非経口投与のための注射剤としては，無菌の水性又は非水性の溶液剤，懸濁剤，乳濁剤を含有する。水性の溶液剤，懸濁剤としては，例えば注射用蒸留水及び生理食塩液を用いることができる。非水溶性の溶液剤，懸濁剤としては，例えばプロピレングリコール，ポリエチレングリコール，オリーブ油のような植物油，エタノールのようなアルコール類，ポリソルベート８０（商品名）等を用いることができる。このような組成物は，さらに防腐剤，湿潤剤，乳化剤，分散剤，安定化剤，溶解補助剤のような補助剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過，殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。これらはまた無菌の固体組成物を製造し，使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。
本発明医薬における化合物Ａの投与量は、その投与方法、患者の症状，年令，性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。通常、経口投与の場合、１日の投与量は、０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．５〜５００ｍｇ／ｋｇ、更に好ましくは１〜１００ｍｇ／ｋｇが、静脈内投与される場合、１日の投与量は、約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇがそれぞれ適当であり，これを１日１回乃至複数回に分けて投与する。
本発明医薬を多剤併用化学療法に用いる場合は、例えば、前出の「癌の化学療法ハンドブック抗癌剤の使い方と副作用対策」に記載の各種多剤併用化学療法に追加して、或いは、その中の１〜２種の抗癌剤と置換して、適用することができる。本剤と併用できる他の抗腫瘍剤としては、好ましくは、代謝拮抗剤（５−ＦＵ及びその誘導体（ｔｅｇａｆｕｒ，ＵＦＴ，ｃａｒｍｏｆｕｒ，ｄｏｘｉｆｌｕｒｉｄｉｎｅ，ｔｅｇａｆｕｒ−ｇｉｍｅｓｔａｔ及びｏｔａｓｔａｔｐｏｔａｓｓｉｕｍ），ＧＥＭ，ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ，６−ｍｅｒｃａｐｔｏｐｕｒｉｎｅ，ｅｎｏｃｉｔａｂｉｎｅ，ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ等）、抗癌性抗生物質（ＭＭＣ，ＡＤＭ，ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ，ａｃｌａｒｕｂｉｃｉｎ，ｐｉｒａｒｕｂｉｃｉｎ，ＴＨＲ，ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ，ｎｅｏｃａｒｚｉｎｏｓｔａｔｉｎ等）、アルキル化剤（ｎｉｍｕｓｔｉｎｅ，ｃａｒｂｏｑｕｏｎｅ，ＡＣＮＵ，ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ等）、抗癌性植物アルカロイド（ｖｉｎｃｒｉｓｔｅｉｎｅ，ｖｉｎｂｌａｓｔｅｉｎｅ，ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ等）、タキサン（ｔａｘｏｌ、ｔａｘｏｔｅｒａ）、その他（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ、ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ等）の併用化学療法に用いられている抗腫瘍剤が挙げられる。より好ましくは、代謝拮抗剤及びタキサンである。殊に、膵臓癌治療作用の知られる５−ＦＵ、ＧＥＭ、ｔａｘｏｌ及びｔａｘｏｔｅｒａが好ましい。
化合物Ａ並びに併用される他の抗癌剤の投与量は、併用する薬剤、患者の症状、投与方法等に応じて各薬剤毎に適宜決定される。多剤併用化学療法における化合物Ａの投与量は前記と同様である。また、投与時期、投与頻度及び投与形態は、併用する各薬剤毎に最適の方法が選択される。即ち、本発明医薬は、少なくとも１つ（好ましくは１〜４）の他の抗腫瘍剤と、同時又は異なる時に、同一又は異なる頻度で、及び同一又は異なる投与形態で投与される。多剤併用化学療法における化合物Ａの投与形態としては、１日１回乃至複数回の経口投与が好ましい。
後記実施例に示す様に、本発明医薬は他の抗腫瘍剤と併用することによって、副作用を増大させることなく、優れた抗腫瘍効果を達成することが確認されている。よって、本発明医薬を多剤併用化学療法に取り入れることによって、副作用の強い他の抗腫瘍剤の投与量を減少させることが可能であり、更に優れた抗腫瘍効果を得ることが期待される。
化合物Ａのガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体への結合親和性（ＩＣ_５０値）は０．１ｎＭと強力であり、また、イヌにおけるガストリン刺激胃酸分泌を０．０１ｍｇ／ｋｇの経口投与で５０％抑制することが報告されている（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９７，４０（３），３３１−３４１）。それに比して、本願の抗腫瘍作用を発現する用量ははるかに高用量であり、その作用がガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体を介するものか否かは不明である。
化合物Ａの抗腫瘍作用並びに毒性を以下の実施例１〜５により示す。また、本発明抗腫瘍剤の調製例を実施例６に示す。
実施例１（各種担癌マウスにおける抗腫瘍作用）
ヒト膵臓癌細胞株（ＢｘＰＣ−３、ＰＡＮＣ−１）、ヒト大腸癌細胞株（ＨＴ２９、ＣＯＬＯ３２０ＤＭ）並びにヒト胃癌細胞（ＭＫＮ２８）の３〜１０×１０^６個を雌性Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスの背側部皮下に移植した。癌細胞皮下移植の翌日から、１日当たり２００ｍｇ／ｋｇの化合物Ａを、０．５％メチルセルロース懸濁液として２回に分けて毎日経口投与した。また、対照群には０．５％メチルセルロース溶液を同様に投与した。腫瘍径の測定にはノギスを用い、最終投与の翌日まで経時的に測定した。腫瘍容量および腫瘍増殖抑制率は以下の計算式で算出した。
腫瘍容量（ｍｍ^３）＝１／２×短径（ｍｍ）^２×長径（ｍｍ）
腫瘍増殖抑制率（％）＝
［（対照群の腫瘍容積−化合物Ａ投与群の腫瘍容積）／対照群の腫瘍容積］×１００
結果を下表に示す。

本発明の医薬は、ヒト膵臓癌、ヒト大腸癌並びにヒト胃癌において、良好な抗腫瘍作用を有する事が確認された。
実施例２（ＢｘＰＣ−３担癌マウスにおける抗腫瘍作用と毒性）
ヒト膵臓癌細胞株ＢｘＰＣ−３担癌マウスにおいて、腫瘍体積が約１２０ｍｍ^３と大きくなってから、試験例１と同様にして化合物Ａの投与を開始した。１日当たりの投与量は２００又は６００ｍｇ／ｋｇであり、投与期間は２１日間であった。
腫瘍増殖抑制率は以下の計算式で算出した。
腫瘍増殖抑制率（％）＝
｛［（対照群の投与終了日の腫瘍容積−対照群の投与開始前の腫瘍容積）−（化合物Ａ投与群の投与終了日の腫瘍容積−化合物Ａ投与群の投与開始前の腫瘍容積）］／（対照群の投与終了日の腫瘍容積−対照群の投与開始前の腫瘍容積）｝×１００
２００又は６００ｍｇ／ｋｇ投与時の腫瘍増殖抑制率は各々４８％および７９％と用量依存的な抗腫瘍作用が確認された。また、このときの体重変化を下表に示す。化合物Ａは、６００ｍｇ／ｋｇを２１日間連投してもマウス体重に影響を及ぼさず、副作用も観察されなかった。よって、化合物Ａは高投与量においても、副作用の少ない良好な抗腫瘍剤となり得ることが確認された。

実施例３（他の選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗薬との比較）
ヒト大腸癌細胞株ＣＯＬＯ３２０ＤＭ担癌マウスにおいて、腫瘍体積が約１２０ｍｍ^３と大きくなってから、実施例２と同様にして化合物Ａを投与した。１日あたりの投与量は６０又は２００ｍｇ／ｋｇであり、投与期間は１０日間であった。比較化合物として、前出のＷＯ９３／１６９９９号公報中に「実施例３８の化合物」としてイヌにおける良好なペンタガストリン刺激胃酸分泌阻害データが開示される（３ＲＳ）−Ｎ−（１−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル）−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−ピリジル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−Ｎ’−（３−（ジメチルアミノ）フェニル）ウレア２００ｍｇ／ｋｇも同様に投与した。
腫瘍増殖抑制率を実施例２と同様にして求めた。化合物Ａ６０又は２００ｍｇ／ｋｇ投与時の腫瘍増殖抑制率は、それぞれ２０及び２７％であった。一方、比較化合物は腫瘍増殖抑制作用を示さなかった。
本発明の化合物Ａが抗腫瘍作用を呈する条件で、先行技術に開示される選択的ガストリン／ＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗化合物は抗腫瘍作用を示さなかった。
実施例４（Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅとの比較試験）
ヒト膵臓癌株ＢｘＰＣ−３を３×１０^６個を雌性Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス（６週齢）の背側部皮下に移植した。腫瘍体積が約１１０ｍｍ^３と大きくなってから、実施例２と同様にして１日当たり６０、２００又は６００ｍｇ／ｋｇの化合物Ａを、２回に分けて毎日経口投与した（ｎ＝５）。また、対照群には０．５％メチルセルロース溶液を同様に投与した。投与期間は１４日間であった。
比較化合物として、既知の膵臓癌治療剤であるＧｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ（ＧＥＭ）を同様に試験した。ＧＥＭは、１日当たり６０、１２０又は２４０ｍｇ／ｋｇを、３日に１回静脈内投与した。対照群には生理食塩液を同様に投与した。
腫瘍増殖抑制率は実施例２と同様にして求めた。
表３に化合物Ａ投与群の、また、表４にＧＥＭ投与群の、腫瘍増殖抑制率を、副作用の程度を示唆する各種パラメーターと共に示す。

化合物ＡはＢｘＰＣ−３担癌モデルにおいて、用量依存的な抗腫瘍作用を示した。この時、体重、臓器重量（脾臓、腎臓、肝臓）および赤血球数に影響を及ぼさなかった。また他の血液学的パラメーター（白血球数、血小板数）にも影響はなかった。
一方、ＧＥＭの２４０ｍｇ／ｋｇｉ．ｖ．群では死亡例が観察されたことから、ＭＴＤ（ｍａｘｉｍｕｍｔｏｌｅｒａｔｅｄｄｏｓｅ）は１２０ｍｇ／ｋｇであった。ＧＥＭはＢｘＰＣ−３担癌マウスにおいて、用量依存的な抗腫瘍作用を示したが、赤血球数に対しても用量依存的且つ有意な減少作用を誘発した。さらに、軽度ではあるが体重増加抑制および肝臓重量の減少も見られた。
本発明の化合物Ａは、既存抗腫瘍剤ＧＥＭと同等の良好な抗腫瘍作用を有し、しかも特に副作用が見られないことから、有用な抗腫瘍剤となり得ることが確認された。
実施例５（Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅとの併用試験）
実施例４と同様にして、化合物Ａを１日当たり２００又は６００ｍｇ／ｋｇを毎日経口投与し、且つＧＥＭを３日に１回６０又は１２０ｍｇ／ｋｇ静脈内投与した（ｎ＝５）。
結果を下表に示す。

化合物Ａ２００ｍｇ／ｋｇとＧＥＭ６０ｍｇ／ｋｇの併用群において、その抗腫瘍作用（９３．４％）はＧＥＭ単独６０ｍｇ／ｋｇ投与群（２２．２％）並びに化合物Ａ２００ｍｇ／ｋｇ群（２５．１％）と比較して格段に優れていた。そして、その作用はＧＥＭのＭＴＤである１２０ｍｇ／ｋｇ投与群（８０．２％）よりも更に優れるものであった。この時、副作用についてはＧＥＭ単独６０ｍｇ／ｋｇ投与群と比較して、変化は見られず、併用により抗腫瘍作用が格段に増強されたにもかかわらず、副作用は同等であることが確認された。また、化合物Ａ６００ｍｇ／ｋｇとＧＥＭ１２０ｍｇ／ｋｇの併用群においては、更に抗腫瘍作用が増強し、増殖抑制率１００％以上、即ち腫瘍の退縮が観察された。副作用については、ＧＥＭ単独投与群で見られた赤血球数減少、体重増加抑制および肝臓重量減少が若干増強する傾向が見られたが、死亡例等の危篤な副作用は見られなかった。
以上の結果は、化合物ＡのＧＥＭとの併用により、副作用を抑え且つ優れた抗腫瘍効果が達成されたこと、また、ＧＥＭ単独投与では成し得なかった、腫瘍退縮効果まで達成されたことを示すものである。
実施例６（１００ｍｇ錠の調整法）
化合物Ａ２００ｇ、乳糖１４６ｇ、コーンスターチ３６ｇを流動造粒コーティング装置（大川原製作所製）を使用して均一に混合した。これに１０％ヒドロキシプロピルセルロース溶液９０ｇを噴霧して造粒した。乾燥後、２０メッシュの篩を通し、これにカルボキシメチルセルロースカルシウム７．６ｇ、ステアリン酸マグネシウム１．４ｇを加え、ロータリー打錠機（畑鉄工所製）で８ｍｍ×９Ｒの臼杵を使用して１錠あたり２００ｍｇの錠剤を得た。
産業上の利用可能性
本発明の医薬は、各種担癌マウスにおいて、良好に癌の増殖を抑制し、しかも低毒性であることが確認されており、膵臓癌、大腸癌並びに胃癌等の抗腫瘍剤として有用である。殊に、難治性の膵臓癌に対して優れた抗腫瘍作用を有することから膵臓癌の治療に有用である。また、本発明の医薬は毒性が低く、高用量の投与も可能である。そして、経口投与可能であることから投与形態も簡便である。
本発明医薬を多剤併用化学療法に用いた場合、副作用の強い抗腫瘍剤の投与量を減少させることが可能であり、良好な抗腫瘍作用を有する副作用の低減された多剤併用化学療法の実現が期待される。

Claims

（３Ｒ）−Ｎ−（１−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル）−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−ピリジル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−Ｎ’−（３−（メチルアミノ）フェニル）ウレア又はその塩を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
膵臓癌、大腸癌又は胃癌の治療剤である請求の範囲１記載の剤。
膵臓癌の治療剤である請求の範囲２記載の剤。
少なくとも１つの他の抗腫瘍剤と、同時又は異なる時に、同一又は異なる頻度で、及び同一又は異なる投与形態で、併用投与されるものである請求の範囲１〜３記載の剤。
（３Ｒ）−Ｎ−（１−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル）−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−ピリジル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−Ｎ’−（３−（メチルアミノ）フェニル）ウレア又はその塩の、抗腫瘍剤である医薬の製造への使用。
医薬が、少なくとも１つの他の抗腫瘍剤と、同時又は異なる時に、同一又は異なる頻度で、及び同一又は異なる投与形態で、併用投与される抗腫瘍剤である請求の範囲５記載の使用。
癌患者の治療方法であって、有効量の（３Ｒ）−Ｎ−（１−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル）−２，３−ジヒドロ−２−オキソ−５−（２−ピリジル）−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−３−イル）−Ｎ’−（３−（メチルアミノ）フェニル）ウレア又はその塩を患者に投与することからなる方法。
請求の範囲７記載の治療方法であって、更に少なくとも１つの他の抗腫瘍剤を、同時又は異なる時に、同一又は異なる頻度で、及び同一又は異なる投与形態で、患者に投与することを含む治療方法。