JPS6384556A

JPS6384556A - 抗凝血性医用材料

Info

Publication number: JPS6384556A
Application number: JP61232832A
Authority: JP
Inventors: 宏中島; 宗彦鈍寳; 北畠　千嗣; 富岡　功
Original assignee: Unitika Ltd
Current assignee: Unitika Ltd
Priority date: 1986-09-29
Filing date: 1986-09-29
Publication date: 1988-04-15
Anticipated expiration: 2010-05-17
Also published as: JPH0744951B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、抗凝血性医用材料に関するものである。

（従来の技術）従来から９人工臓器９人工血管、カテーテル。

輸血装置環、直接血液に接触して使用される医用器材の
材料として、抗凝血性の材料が求められている。このよ
うな材料を得るためにすでに種々の提案がなされ、一部
実用にも供されている。例えば、フッ素樹脂やシリコー
ン樹脂等の疎水性表面のポリマー（外科治療　２９巻、
５８５頁、　１９７３年）、カルボキシセルロース、ク
ロルスルホン化ポリエチレン等の負電荷を存するポリマ
ー〔マクロモレキュラー・ケミストリー（Ｍａｒｃｒｏ
ｍｏｌ。

Ｃｈｅｍ、）　１７９巻、１）２１頁、　１９７８年〕
、ポリー２−ヒドロキシエチルメタクリレート等の親水
性のポリマー〔ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）　　１８５
巻。

１）７頁、　１９６０年）、！１）水性のポリウレタン
と疎水性のポリジメチルシロキサンのコポリマーのよう
なミクロドメイン構造を有するポリマー（人工臓器、１
０巻、１０６６頁、　１９８１年）等、材質そのものの
特性を利用したものが知られている。

しかし、これらの材料においては、抗凝血性が不充分で
あったり、あるいは材質の表面構造がミクロドメイン化
等のように複雑であるため、製造が困難であったりして
いた。これら欠点を改良する試みとして、血液凝固阻害
剤であるヘパリンを固定化した材料〔トランスアクショ
ンズ・アメリカン・ソサイアテイー・アーティフィシャ
ル・インターナル・オルガンズ（Ｔｒａｎｓ、　Ａｍｅ
ｒ、　Ｓｏｃ。

Ａｒｔｉｆ、　Ｉｎｔ、　Ｏｒｇａｎｓ）　２１巻、４
３６頁、　１９７５年〕。

線溶活性物質であるウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ
を固定化した材料（特開昭５４−２６３９４号公報）等
が提案されている。

（発明が解決しようとする問題点）しかし、これらの薬剤は生体高分子であることから、安
定性に乏しく、充分満足できるものではなかった。しか
も、優れた抗凝血性の材料を得るためには、大量の薬剤
を付着する必要があり、そのため、出血過多を生ずる恐
れがある等、完全に満足できるものではなく、改良が望
まれていた。

（問題点を解決するための手段）本発明者らは、このような問題点を解決するために鋭意
検討の結果、抗凝血性材料にジアデノシン四リン酸が利
用できることを見い出し２本発明を完成した。

すなわち２本発明は２種々の形状を有する構造物からな
る医用材料において、該構造物にジアデノシン四リン酸
が固定化されていることを特徴とする抗凝血性医用材料
を要旨とするものである。

本発明における医用材料とは、綿１紙、布２不織布、織
物１編物等の繊維集合体、パイプ、チューブ、フィルム
、モノフィラメント、スポンジ。

粉末、マイクロカプセル等種々の形状を有する構造物及
びこれらの構造物を複合した構造物からなる公知の材料
をいう。それらの構造物を構成する素材としては１例え
ば、セルロース、再生セルロース、セルロースアセテー
ト等のセルロース誘導体、絹、コラーゲン、カゼイン、
ゼラチン等の蛋白質、ポリエステル、ポリアミド、ポリ
ウレタン。

ポリアクリロニトリル、ポリアクリルアミド、ポリアク
リル酸エステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ
塩化ビニル、シリコーン、ポリビニルアルコール、ポリ
ヒドロキシエチルメタクリレート、ポリビニルピロリド
ン、ポリカーボネート。

ポリアルキルシロキサン、スルホン化ポリスチレン等の
合成高分子ならびにこれらの共重合体、ガラス、アスベ
スト雲母、活性炭、ポリフォスフアゼン等の無機物質等
があげられる。

本発明に用いられるジアデノシン四リン酸（以下ＡＰ４
Ａと略記する。）としては、ジアデノシン−５’、　５
”−Ｐ’、　Ｐ’−テトラホスフェート又はこのものの
塩があげられる。このＡｐ４Ａ又はその塩には、血栓形
成を防ぐ作用はまったく知られていない。このＡｐ４Ａ
は、アデノシン−５′−二リン酸（以下ＡＤＰと略記す
る。）の二量体構造を有しており、アデノシン−５′−
リン酸モルホリゾートとアデノシン−５′−三リン酸（
以下ＡＴＰと略記する。）との反応により化学合成され
た例が報告されている〔レイス、モファット（Ｒｅｉｓ
ｓ。

Ｍｏｆｆａｔｔ）ジャーナル・オーガニック・ケミスト
リー（Ｊ、　Ｏｒｇ、　ＣｈｅＩＩ＋、）　３０巻、３
３８１頁、　１９６５年〕。また、ＡＩ）４Ａの酵素法
による合成法としては２例えば、アミノアシル−ｔＲＮ
Ａ合成酵素を用いた方法が報告されている〔ジャクボッ
スキ−（Ｊａｋｕｂｏｗｓｋｉ）アクタ・ビオキミ力・
ボロ二カ（Ａｃｔａ　Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　Ｐｏ１ｏ
ｎｉｃａ）　　３０巻、５０頁。

１９８３年〕。

本発明において、上記の製造法によってもＡｐ４Ａを得
ることができるが、高純度のＡｐ４Ａを得るためには、
ＡＤＰをＡＴＰに変換する酵素の存在下に、アミノアシ
ル−ｔ　ＲＮＡ合成酵素の触媒作用により、ＡＴＰとア
ミノ酸とを反応させてＡｐ４Ａを製造するのが望ましい
。特に、アデノシン−５′−一リン酸（以下Ａ　Ｍ　Ｐ
と略記する。）をＡＤＰに変換する酵素と、ＡＤＰをＡ
ＴＰに変換する酵素の存在下で行うことが好ましい。

また、アミノアシル−ｔ　ＲＮＡ合成酵素としては、Ａ
ｐ４Ａを合成する能力を存するものであればいかなるも
のでもよいが、エシェリキア・コリ由来のリジル−１Ｒ
ＮＡ合成酵素、ヒスチジルーｔＲＮＡ合成酵素、フェニ
ルアラニル−ｔ　ＲＮＡ合成酵素、酵母由来のリジル−
ｔＲＮＡ合成酵素。

フェニルアラニル−ｔＲＮＡ合成酵素、フザリウム由来
のフェニルアラニル−ｔＲＮＡ合成酵素。

バチルス・ステアロサーモフィルス等の耐熱性細菌由来
のロイシル−ｔ　ＲＮ　Ａ合成酵素、羊肝細胞由来のフ
ェニルアラニル−ｔ　ＲＮＡ合成酵素等が具体例として
あげることができる。

また、アミノ酸としては１例えば、チロシン。

アラニン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン
、メチオニン、リジン、セリン、バリン。

アスパラギン、アスパラギン酸、グリシン、グルタミン
、グルタミン酸、システィン、トレオニン。

トリプトファン、ヒスチジン、プロリン、アルギニン等
のα−アミノ酸があげられ、Ｌ体、Ｄ体のいずれでもよ
い。

このとき、アミノアシル−ｔＲＮＡ合成酵素は。

アミノ酸に特異性のあるものが用いられ１例えば。

ロイシンに特異性のあるものとしては、ロイシル−ｔＲ
ＮＡ合成酵素が用いられる。

さらに、ＡＭＰをＡＤＰに変換する酵素としては３例え
ば、アデニル酸キナーゼが使用され、この際、ＡＭＰへ
のリン酸供与体としては、ＡＴＰが使用される。また、
ＡＤＰをＡＴＰに変換する酵素としては、酢酸キナーゼ
、カルバミン酸キナーゼ、クレアチンキナーゼ、３−ホ
スホグリセリン酸キナーゼ、ピルビン酸キナーゼ、ポリ
リン酸キナーゼ等、多くのものが使用できるが、酵素の
入手の容易さ等を勘案すると、酢酸キナーゼを使用する
のが最も有利であり、この際、リン酸供与体としては、
アセチルリン酸が使用される。アセチルリン酸は、アン
モニウム塩、カリウム・リチウム塩、ナトリウム塩等の
塩として使用することができるが、入手のしやすさから
ニナトリウム塩を用いることが好ましい。

このように、アデニル酸キナーゼと酢酸キナーゼを使用
するに際して、各酵素のリン酸供与体としては、ＡＴＰ
とアセチルリン酸を使用することになるが、リン酸供与
体としてのＡＴＰは、最終変換物であるＡＴＰを循環使
用することができるので、結局リン酸供与体としてはア
セチルリン酸だけを供給すればよいことになる。

本発明において、Ａｐ４Ａと医用材料とを固定化させる
には９種々の方法で行うことができる。

例えば、構造物がカルボキシル基、アミノ基、クロロホ
ルミル基、クロルトリアジニル基、アどド基、ジアゾニ
ウム基の塩、エポキシ基、ホルミル基、酸無水物基、ブ
ロモアセチル基、イソシアナート基、イミノカーボネー
ト基等の共有結合を形成しうる反応性官能基、あるいは
アミノ基、アンモニウム基、カルボキシル基、カルボキ
シレート基、スルホキシル基、スルホネート基、ホスホ
ニウム基、スルホニウム基等のイオン交換基を有する場
合は、Ａｐ４Ａを含む溶液にて構造物を処理することに
より、Ａｐ４Ａを構造物に共有結合させるか、あるいは
イオン結合させることができる。

また、構造物が共有結合を形成しうる官能基及びイオン
交換基を有しない場合は、予め構造物にそれらの基を高
分子反応により導入した後、ＡＰ４Ａをその構造物に結
合させることができる。

種々の構造物にＡＩ）４Ａを結合させる例を以下に列記
する。

（１）Ｉｔｉ、コラーゲン、カゼイン、ゼラチン等の蛋
白質は、共有結合を形成しうる官能基でもあり。

かつイオン交換基でもあるアミノ基及びカルボキシル基
を有するもので、蛋白質を素材とする構造物の場合には
、前処理をしなくてもＡＩ）４Ａを共有結合させるか、
あるいはイオン結合させることができる。共有結合させ
る場合は、ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−シク
ロへキシル−３−（２−モル承り二ノエチル）−カルボ
ジイミド−メトーＰ−トルエンスルホネート等の脱水縮
合剤を用いるのが好ましい。

（２）ｌ、再生セルロース、セルロースアセテート等の
セルロースあるいはセルロース誘導体。

あるいはポリビニルアルコールを素材とする構造物の場
合は、それらの構造物をグルグルアルデヒド、ジアルデ
ヒドでんぷん等のポリアルデヒドにより処理して構造物
にホルミル基を導入し、しかる後ホルミル基が導入され
た構造物をＡｐ４Ａにより処理することにより、ＡＩ）
４Ａを共有結合させることができる。ポリアルデヒドの
代わりに。

ブロムシアンによりイミノカーボネート基、ブロモアセ
チルプロミドによりブロモアセチル基、無水マレイン酸
共重合体等のポリ無水マレイン酸によす酸無水物基、ト
ルエンジイソシアナートへキサメチレンジイソシアナー
ト等のポリイソシアナートによりイソシアナート基、エ
チレングリコール、テトラメチレングリコール、グリセ
リン等のポリグルシジルＳＭ　４体によりエポキシ基、
塩化シアヌルによりクロルトリアジニル基を構造物に導
入することができるので、これらの共有結合を形成しう
る官能基を用いてＡｐ４Ａを結合させることもできる。

ホルミル基、イミノカーボネート基、ブロモアセチル基
、酸無水物基、イソシアナート基、エポキシ基、クロル
トリアジニル基が導入された構造物は、ポリエチレンイ
ミン等のポリアミンにより処理することによりアミノ化
される。

イオン交換基であるアミノ基を有する構造物には。

ＡＰ４Ａをイオン結合させることができる。

（３）ポリアミドやポリエステルのように、末端カルボ
キシル基を有する高分子物質を素材とする構造物の場合
は、それらの構造物を脱水縮合剤存在下にポリエチレン
イミンで処理し、引き続き無水マレイン酸共重合体で処
理することにより、構造物に酸無水物基が導入される。

酸無水物基が導入された構造物は、ＡＰ４Ａにより処理
することにより、Ａｐ４Ａを共有結合させることができ
る。

ポリエチレンイミンにより処理して得られたアミノ化構
造物、あるいはそのアミノ化構造物を臭化エチル、エチ
レンブロムヒドリン等により４級塩化したものには、Ａ
ｐ４Ａをイオン結合させることができる。

（４）カルボキシル基、アミノ基、クロロホルミル基、
クロロトリアジニル基、アジド基、ジアゾニウム基、エ
ポキシ基、ホルミル基、酸無水物基。

ブロモアセチル基、インシアナート基、イミノカーボネ
ート基等の共有結合を形成しうる反応性官能基、あるい
はアミノ基、アンモニウム基、カルボキシル基、カルボ
キシレート基、スルホキシル基、スルホネート基、ホス
ホニウム基、スルホニウム基等のイオン交換基を有する
場合は、ＡＩ）４Ａを含む溶液にて構造物を処理するこ
とにより。

Ａｐ４Ａを構造物に共有結合させるか、あるいはイオン
結合させることができる。

また２本発明の抗凝血性医用材料は２次のようにして構
造物にＡｐ４Ａを吸着させることによっても製造するこ
とができる。

すなわち、構造物を湿潤しうるか、あるいは溶解しうる
溶媒に膨潤し、あるいは溶解し、かつＡｐ４Ａを溶解し
うる溶媒にＡｐ４Ａを溶解し、この溶液により構造物を
処理することにより、構造物にＡり４Ａを吸着させた抗
凝血性医用材料を製造することができる。この場合、溶
媒としては。

例えば、水あるいはメタノール、エタノール、アセトン
、ジオキサン、テトラヒドロフラン等の一般有機溶媒が
用いられるが、必要ならばこれらは２種以上混合して用
いても差し支えない。さらに。

酸、アルカリ、塩等を添加し、構造物の湿潤性。

膨潤性、溶解性、あるいはＡＩ）４Ａの溶解性等を調節
することができる。吸着させる場合も、数種類のＡＰ４
Ａを溶解した混合溶液にして構造物を処理することがで
きる。処理温度は、溶媒の融点以上で、かつ溶媒の沸点
以下であればよいが、０〜１００℃の範囲が特に望まし
い。また、処理に際しては、構造物表面を更新しながら
行うことが望ましい。

また２本発明の抗凝血性医用材料は、スポンジ等のゲル
の微細な格子の中にＡｐ４Ａを包み込んだり、ポリマー
のゾルにＡｐ４Ａを加えて混合した後、マイクロカプセ
ル、フィルム、板、チューブ等の構造物に成形加工する
混入法によっても製造することができる。

また２本発明においては、ＡＰ４Ａと共に線溶活性酵素
又は血液凝固系阻害因子を構造物に結合するか、吸着す
るか、混入するかすることができる。ここに用いられる
線溶活性酵素とは、フィブリンの溶解に寄与する酵素を
いい９例えば、プラスミン、ブリノラーゼ、ウロキナー
ゼ、ストレプトキナーゼ等があげられる。血液凝固系阻
害因子とは、フィブリンの凝固に関与する因子を阻害す
る物質をいい１例えば、ヘパリン等があげられる。

（実施例）次に２本発明を実施例により具体的に説明する。

なお、抗血栓性の評価は、　ＲｏＴ、　Ｌｅｅ及びＰ、
　Ｄ。

Ｗｈ　ｉ　ｔｅによって提案された方法（Ａｍ、　Ｊ、
　Ｍｅｄ、　Ｓｃｉ、＋１４５巻、４９５頁、　１９１
８年）に基づいて行うか。

あるいは以下のように変法として行った。

すなわち、材料を小片にして、内径１０ｍｍの試験管内
に入れ、これにヒトクエン酸血１ｍｊ２を加え、試験管
を１分毎に傾けて、血液の凝固時間を測定した。また、
材料がチューブ形状の場合には。

Ｃｈａｎｄｌｅｒの回転チューブ法（Ａ、　Ｂ、　Ｃｈ
ａｎｄｌｅｒ。

Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ＋
　　７巻、１）０真、　１９５８年）により、ヒトクエ
ン酸血をチューブ内に注入し、Ｃａ”を添加した後の血
栓形成時間を用いて血栓形成時間を測定することにより
行った。

実施例１内径３ｍｍ、外径５　ａｍのナイロン６チューブの内部
に、３Ｎ塩酸を１００　ｍ　Ｉｔ　／ｍｉｎの速度で１
０分間循環した後、イオン交換水で塩酸を置換洗浄した
。この塩酸処理後、チューブ内を５０ｍ１／ｗｉｎの速
度で１０％ポリエチレンイミン水溶液１００ｍｌとメタ
ノール５００ｍｌとからなる混合液で３０℃で１時間循
環した。

次に、ジシクロへキシルカルボジイミドの５ｗｔ％メタ
ノール溶液２００ｍ！を添加して、引き続き５０ｍ１．
／１Ｗｉｎの流速で６時間循環した。チューブ内より処
理液を流し出した後、メタノールを循環して洗浄した。

チューブを減圧乾燥することにより、ポリエチレンイミ
ン処理ナイロンチューブを得た。

上記のポリエチレンイミン処理ナイロンチューブに、Ａ
ｐ４Ａアンモニウム塩（シグマ社製）５０■及び１−（
３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイ
ミド塩酸塩２００ｍｇを５　ｍ　ｌのイオン交換水に溶
かした溶液を、３０℃で５０ｍ１／ｓｉｎの速度で６時
間循環して処理した。処理後のチューブを水洗し、減圧
乾燥した。

このようにして得たＡｐ４Ａ結合ナイロンチューブを、
　Ｃｈａｎｄｌｅｒ法で血栓形成時間を測定したところ
、４０分であった。

比較のため５同一内径の未処理ナイロン６デユープ及び
医用シリコーンチューブの血栓形成時間を測定したとこ
ろ、それぞれ１０分及び２０分であった。

実施例２内径３１−１外径４１重のポリエチレンテレフタレート
チューブの内部に、４−ｔ％の水酸化ナトリウム水溶液
を９０℃で１時間循環した。水酸化ナトリウ溶液を取り
出した後、０．ＩＮ塩酸を同様９０℃で１時間循環した
。水洗後、実施例１と同様にして、１０％ポリエチレン
イミンとジシクロへキシルカルボジイミド処理より、ポ
リエチレンイミン処理したポリエチレンテレフタレート
チューブを得た。このチューブを実施例１と同様にして
ＡＩ）４Ａ結合チューブを得た。

次いで、　Ｃｈａｎｄｌｅｒの回転チューブ法に従って
血栓形成時間を求めた。

その結果、血栓形成時間は４５分以上であった。

実施例３バチルス・ステアロサーモフィルスより調製したロイシ
ル−ｔ　ＲＮ　Ａ合成酵素及びバチルス・ステアロサー
モフィルス由来の酢酸キナーゼとアデニル酸キナーゼ（
生化学工業社製）を用いて、バッチ法でＡｐ４Ａの合成
を行った。

このとき、ＡＴＰ１２．７ｍＭ、　　ロイシン１０ｍＭ
、塩化マグネシウム６水和物２０ｍＭ、　ピコホスファ
ターゼ（ベーリンガーマンハイム社製）２ユニツト／　
ｍ　Ｒ、酢酸キナーゼ３０ユニツト／ｍ１゜アデニル酸
キナーゼ４６ユニツト／　ｍ　ｌ　、　ロイシル−ｔＲ
ＮＡ合成酵素０．２５ユニツト／　ｍ　１　、　ヘペス
緩街’ｌ（１（ｐＨ７，５）　　１００　ｍＭからなる
反応溶液に、アセチルリン酸を反応スタート時に１β当
り１４ｍｍｏｊ！添加し、４０℃で２時間反応させた２
Ｌ１６当り４．６ｍｍｏ／を追加し、２時間反応させた
後、さらに１）当り４．５ｍｍｏｌ加えた後、５時間反
応させた。

得られた反応生成物を、カスタムバックカートリ・ンジ
Ｃｐｓ−３００人（ウォーターズ社！！りカラムを用い
て高速液体クロマトグラフィーで分離し。

５ｍＭ（収率約８０％）のＡＩ）４Ａを得た。リン核磁
気共鳴スペクトルで分析したところ、得られたＡｐ４Ａ
中にはジアデノシンー三リンフ１．ＡＭＰ、ＡＤＰは検
出されなかった。

このようにして得たＡｐ４Ａ２０■を用いて。

実施例１と同様にしてポリエチレンイミン処理ナイロン
６チューブにＡｐ４Ａを結合した。このチューブは、　
Ｃｈａｎｄｌｅｒ法で血栓形成時間を測定したところ、
４５分以上であった。

実施例４バチルス・ステアロサーモフィルス由来の酢酸キナーゼ
とアデニル酸キナーゼ（生化学工業社製）。

ロイシル−ｔＲＮＡ合成酵素及びピロホスファターゼ（
ベーリンガーマンハイム社ｍ＞　を、それぞれＣＮ−Ｂ
ｒ−活性化セファロース４Ｂ（ファルマシア社製）に固
定化した。固定化酢酸キナーゼ３００ユニツト、固定化
アデニル酸キナーゼ４００ユニツト、固定化ロイシル−
ｔＲＮＡ合成酵素１０ユニット及び固定化ピロホスファ
ターゼ２０ユニツトを１つのカラム（カラム容ｉ１５　
ｍ　（１）に充填した。

次に、１０ｍＭの塩化マグネシウムを含む１００ｍＭヘ
ペス緩衝液（ｐＨ７，０）に、溶解した１０ｍＭのＡＴ
Ｐ、５ｍＭのアセチルリン酸、１０μＭのロイシンから
なる原料を、固定化酵素充填カラムの上端から１ｍｊ！
／ｈｒの流速で供給し、カラムの下端から反応生成物を
連続的に抜き取った。

得られた反応生成物を実施例３ど同じ方法により分離し
、４ｍＭ（収率約８０％）のＡｐ４Ａを得た。

一方、７０％ジメチルシランー３０％ヒドロキシプロビ
ルメチルシランコボリマーとメチルトリアセトキシシラ
ンを１００：５（重量比）の割合でジオキサン５倍容量
に混合して得た溶液に、ナイロン６６製タフタをジオキ
サンで洗浄した後。

浸漬した０次いで、３０分間風乾した後、１００℃で１
０分間加熱してシリコーンコートされたナイロンタフタ
を得た。このタフタを５ｗｔ％ブロムシアン溶液（ｐＨ
１））に浸漬し、ｐＨを１）に保ちながら５分間攪拌し
た。０．１Ｍの重炭酸ソーダで洗浄することにより、ブ
ロムシアン活性化フッタを得た。

次いで、５−ｔ％のへキサメチレンジアミン水溶液に、
上記のようにして得た活性化タフタを浸漬し、５時間振
盪攪拌した後、イオン交換水で洗浄した。

上記のようにして得たタックに、５−ｔ％のジシクロへ
キシルカルボジイミドのメタノール溶液を加え、３０分
後にメタノール溶液を除き、さらに上記で得た１ｗｔ％
Ａｐ４Ａ水溶液をタックに加え。

浸漬し、４℃で１夜振！攪拌した後、イオン交換水で洗
浄した。

得られたタフタを小片に切断し、試験管に入れ。

ヒトクエン酸血を用いて、血液凝固時間をＬｅｅとＷｈ
ｉｔｅの方法で測定した結果、８０分であった。

なお、比較のため、Ａｐ４Ａを含まない液で同様のタフ
タを浸漬したものでは、凝固時間は２０分であった。

実施例５実施例１で得られたポリエチレンイミン処理ナイロンチ
ューブを、臭化エチルを３ｗｔ％含有する含水エタノー
ル溶液（エタノール：水＝ｌ：１重量比）によりチュー
ブ内を満たして、３日間放置した後、処理水を流し出し
、エタノールで洗浄した。次に、０．０５Ｎ水酸化ナト
リウムによりチューブ内を満たして、２時間室温で放置
した後、イオン交換水で洗浄した。

上記のようにして得た４級化処理ナイロンチューブに、
実施例３で得た５ｗｔ％のＡｐ４Ａと、ウロキナーゼ（
ミドリ十字社製）５００単位／　ｍ　１を含む溶液を循
環した。室温で５時間処理した後。

水洗して、Ａｐ４Ａとウロキナーゼを共に固定化したナ
イロンチューブを得た。

得られたチューブを長さ１０ｃｍに切り、一方をクリッ
プで閉じ、ヒトクエン酸血１ｍ＆を加え。

ＬｅｅとＷｈ　ｉ　ｔｅの方法に従って血液凝固時間を
測定したところ、９０分であった。

実施例６ポリヒドロキシエチルメタアクリレートを０．１Ｍ炭酸
ソーダ中に浸し、ＩＮ水酸化ナトリウムでｐ　Ｈを１）
に調製しながら、７ｗｔ％のブロムシアン水溶液を加え
、４℃で２時間反応させた。反応後、ポリマーを濾別し
、０．ＩＮの重炭酸ソーダで洗浄後、水洗し、活性化ポ
リマーを得た。これに５ｗｔ％のヘキサメチレンジアミ
ン水溶液を加え。

４℃で５時間反応させた。水洗後、５−ｔ％の１−シク
ロヘキシル−３−（２−モルホリニノエチル）−カルボ
ジイミド−メト−Ｐ−トルエンスルホネ−トと、５ｗｔ
％のＡｐ４Ａアンモニウム塩水溶液を加え、１０℃で３
時間反応させた。反応後２ポリマーを濾別した後、水洗
し、Ａｐ４Ａ固定化ポリマーを得た。

得られたポリマーを試験管に入れ、　ＬｅｅとＷｈｉｔ
ｅの方法に準じて血液凝固時間を測定したところ。

８７分であった。

（発明の効果）本発明の抗凝血性医用材料は、生体高分子を使用しない
ため、非常に安定であり、しかも優れた抗血栓性を有し
、また、その効果が長時間持続する特徴を有するので、
血液接触医療材料１例えば。

人工血管、カテーテル、人工弁９人工心臓２人工肺２人
工腎臓、血管縫合糸等として有用である。

さらに１本発明の抗凝血性医用材料は、それを製造する
操作が非常に筒便であり、かつ原料も安価であるので、
コスト的にも極めて有利なものである。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）種々の形状を有する構造物からなる医用材料にお
いて、該構造物にジアデノシン四リン酸が固定化されて
いることを特徴とする抗凝血性医用材料。