JPS63307849A - スペルミン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、ソフトコーラルからの抽出成分であるスペル
ミン誘導体またはその塩に関する。

（従来の技術） ソフトコーラル類は、海綿類と並んで最もよ（研究され
ている珊瑚礁生物であるが、それは採取が容易であるこ
と、抽出しやすいことと相まって、構造や生理活性に興
味深いものが多いことにある。

たとえばシヌラリアフレキシビリス（５ｉｎｕｌａｒｉ
ａｆｌａｘｉｂｉｌｉｓ）からは抗腫瘍作用を有する１
４員環ジテルペン化合物　シヌラリオライドが単離され
（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、　３１　、１２９〜１３３
　（１９７５）及びＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ、
、　２９２３〜２６．　（１９７７）　）、またシヌラ
リア　ブロンゲルスマイ（５ｉｎｕｌａｒｉａ　７　）
からは、細胞毒性を有するスペルミジン誘導体が単離さ
れている（　Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ、、　
３６．３３８７〜３３９０．　（１９７９）　）。

しかしながら、海洋生物由来のポリアミンから本発明の
如き抗腫瘍作用を有するスペルミン誘導体が得られたこ
とはこれまで報告がない。

（問題点を解決するための手段） 本発明者等は、我国量のソフトコーラルから生理活性物
質の探索を行なってきたが、高知県竜串海岸より採取し
たシヌラリア（５ｉｎｕｌａｒｉａ　）属のソフトコー
ラルからの水溶性抽出成分中に抗腫瘍活性を有する物質
を認め、この物質を単離し２本発明を完成した。すなわ
ち１本発明は。

下記構造式で示されるスペルミン誘導体またはその塩に
関する。

本発明のスペルミン誘導体は、スペルミン（Ｈ２Ｎ（Ｃ
鵬）、ＮＨ（ＣＨ２）４ＮＨ（ＣＨ２）、Ｎ鴇）の末端
窒素原子にテトラプレニル基がアミド結合を介して結合
した新規な化合物である。

Ｃ’Ａ造法） 本発明の目的化合物（Ｉ）は、シヌラリア属に属するソ
フトコーラルをエタノールで抽出し、抽出成分をエーテ
ルと水で分配し、水層に移行する成分の中から単離する
ことができる。

原料となるソフトコーラルは、たとえば高知県幡多郡竜
串海岸をはじめ、我国近海に生育しており、これを採取
して使用することができる。

採取されたソフトコーラルは、粉砕したのち抽出する。

抽出には７０％エタノールが好適に用いられ。

常温下、約３倍量の７０％エタノールを用い数回性なう
。この抽出液を必要により減圧濃縮したのち、ジエチル
エーテル−水による２層分配に付し２次いで、水層成分
をＴＳＫＧ３０００ＳおよびＴｏｙｏｐｅｒｌ　ＨＷ−
４０カラムクロマトグラフイーに付して活性画分を分離
する。こうして得られた活性画分から、さらに高速液体
クロマトグラフィー等を用いて精製し、純粋なスペルミ
ン誘導体を得る。

このようにして得られる本発明の目的化合物（Ｉ）は遊
離の形で単離することもできるが、その塩としても単離
することができる。このような塩としては２例えば本発
明の目的化合物（Ｉ）の分子内窒素原子にメチル基、エ
チル基、プロピル基、イソプロピル基、ペンチル基等の
低級アルキル基が結合し４級陽イオン化したものに、対
応する塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン等のハロ
ゲン陰イオン、もしくは水酸イオン。

硝酸イオン、炭酸イオン、硫酸イオン等の陰イオンが付
加した塩、あるいは塩駿塩、硝酸塩。

硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、　７
　マＡ／　酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩。

酒石酸塩等の有機酸塩が挙げられる。

次に９本発明のスペルミン誘導体のうち、下記構造式で
示される化合物（以下、この構造の化合物をシヌラミド
という）について理化学的（：）質量分析値；　ｍ／ｚ
　５８１　（ＦＡＢ）第１図にＦＡＢ−ＭＳスペクトル
を示す。また第２図には、　　ＣＩ−ＭＳスペクトルを
示す。ｍ／ｚ　３３８゜３１９、２５１．１８４及び１
０３に各々フラグメントイオンが観察されたことから、
スペルミンの末端窒素原子にテトラプレニル基が結合し
ていることが判明した。

（１１）赤外線吸収スペクトＡ／（ＫＢｒ法）　；　３
３５０，３２５０゜１６６０、　　及び１６４０ｃｍ−
’にアミド結合の吸収が観察された。第３図にその赤外
線吸収スペクトルを示す。

（ｉｉｉｌ　１３ｃ−核磁気共鳴スベクトル；δｐｐｍ
　１５４１（ｓ）ｔ１３４．４（ｓ）、　１３３．８（
ｓ）、　１２９．９（ｓ）、　１２３．４（ｄ、　２Ｃ
）。

１２３．２（ｄ）、　１１７．６（ｄ）、　４０．８　
（ｔ、　２Ｃ）、　３７．７　（ｔ）。

２７．９（ｔ）、２７．７（ｔ）、２７．６（ｔ）、２
６．０（ｑ）、２５．３（ｑ）。

ｔｓ、５（ｑ）、および１６．２（ｔｌ、　２Ｃ）にシ
グナルが観察されたことから、テトラプレニル基の存在
が判明した。またδｐｐｍ　１６７．２にアミド結合の
カルボニル炭素が認められたことから、アミド結合を介
してテトラプレニル基が結合していることが判明した。

更に、δｐｐｍ　４９．７　（ｑ、　４Ｃ）から窒素原
子に結合した４個のメチル基の存在が、δｐｐｍ　６４
．４　（ｔ、　２Ｃ）。

６３．６（ｔ）、　６２．ｏ（ｔ）、　３６．９（ｔ）
および３４．１（ｔ）から窒素原子に結合した６個のメ
チレン炭素の存在を確認した。この他δｐｐｍ　２０．
６　（ｔ、　２Ｃ）、　２２．１　（ｔ　）。

及び２３．９（ｔ）から４個のメチレン基が存在するこ
とが判った。

第４図に重メタノール中で測定したｌ３Ｃ−核磁気共鳴
スペクトルを示す。

Ｏｖ）’Ｈ−核磁気共鳴スベクトル、δｐｐｍ　３．１
０（１２Ｈ，ｓ）から、窒素原子に結合した４個のメチ
ル基が。

チレン基が、更に１．７〜１．９０（８Ｈ）から４個の
メチレン基が存在することが判った。

第５図に重メタノール中で測定した’Ｈ−核磁気共鳴ス
ベクトルを示す。

以上の理化学的性状により２本発明の目的化合物（Ｉ）
のうちシヌラミドの構造式は前述の通り決定した。

（有用性） 本発明のスペルミン誘導体は、優れた抗腫瘍作用を有し
ている。以下にｉｎ　ｖｉｔｒｏにおける腫瘍細胞増殖
抑制作用を実験方法と共に示す。

（実験方法） 試験管内で継代維持されたマウスＬ１２１０白血病細胞
を、１０％牛新生児血清を含むＲＰＭ１１６４０培養液
に入れ、培養液中の細胞数をｌＸｌ０’個／ｍｌに調整
した。

また、マウス腹腔内に移殖後７日月のマウスＰ３８８白
血病細胞についても１０％牛脂児血清を含むＲＰＭＩ　
１６４０培養液に入れ、同様にｌＸＩＯ３個／ｍｌに細
胞数を調整した。

シヌラミドをエタノールに溶解し、エタノールの最終濃
度０．４容量％で、シヌラミドが所定濃度となるように
細胞浮遊培養液に添加したのち。

５％炭酸ガスを含む空気中で３日間培養した。

対照としてエタノール０．４容量％を加えた細胞浮遊培
養液を同様に培養した。

培養後、トリバンプルー染色液で染色し、生細胞数を計
測し、対照に対する抑制率からｒｃ。

値（５０％細胞増殖抑制濃度）を求めた。この結果を表
１に示す。

表１　スペルミン誘導体のマウスＬ１２１０白血病細胞
及びマウスＰ３８８白血病細胞に対する細胞増殖抑匍昨
用本発明によって得られたスペルミン誘導体を医薬とし
て使用するには、抗腫瘍効果を発現するのに都合のよい
形で投与する。スペルミン誘導体はそのままの状態で医
薬となり得るが、製薬上の慣習に従って製薬的に許容し
得る希釈剤及び／又は他の薬理作用物質との混合物とし
て組成された状態でも提供され得る。従って本発明のス
ペルミン誘導体は、経口的又は非経口的に投与するため
の形態を適宜に採り得る。例えば散剤、顆粒９錠剤、糖
衣錠、カプセル、ビル。

坐剤、懸濁剤、液剤、乳剤、注射剤、エアゾール剤であ
る。

本発明のスペルミン誘導体の投薬量は、感受性差２年令
、性別２体重、投与方法、投与の時期９間隔、病状９体
調、医薬製剤の性質、調整の種類静穏々の原因によって
変動する。

（実施例） つぎに実施例を挙げて２本発明の化合物およびその製造
法をさらに説明する。

実施例　１ 高知県幡多郡竜串海岸（水深的２ｍ）から採取したソフ
トコーラル５ｉｎｕｌｒｉａ　ｓｐ、（色；灰褐色、大
きさ；高さ約２０ｃｍ　（岩に付着して群体を形成する
）。

形状；表面に粘液が豊富）の凍結品の粉砕試料５００ｇ
を１，５ｔの７０％エタノールで３回抽出した。

抽出液を減圧濃縮後、ジエチルエーテルと水で３回分配
した。得られた水層をＴＳＫ　Ｇ３０００Ｓカラム（１
０Ｘ１０ｃｍ、東洋曹達工業社製）に添加したのち、水
、５０％メタノール、　７０％メタノール、１００％メ
タノールおよびアセトン各ＩＺで順次溶出した。

７０％メタノール、１００％メタノールおよびアセトン
画分に活性が認められたので合一した（収量５．５　ｇ
　）。

この活性画分をメタノールに溶かし更にＴｏｙｏｐｅａ
ｒｌＨＷ　−４０ｆｉｎｅカラム（４，５Ｘ　３０ｃｍ
　）に添加しメタノールで溶出した。得られた活性画分
（８１０Ｉｒ１ｇ）を最終的にＤｅｖｅｌｏｓｉｌ　Ｏ
ＤＳカラム（１，５Ｘ　３０ｃｍ）及び０．１％酢酸を
含む４５％メタノールを用いる高速液体クロマトグラフ
ィーにより精製し、純粋なシヌラミド１２０■を無色粉
末として得た。このものの理化学的性状は前記の通りで
あった。

【図面の簡単な説明】

第１図は、シヌラミドのＦＡＢ　−ＭＳスペクトルを示
す。 第２図は、シヌラミドのＣＩ−ＭＳスペクトルを示す。 第３図は、　　ＫＢｒ法で測定したシヌラミドの赤外線
吸収スペクトルを示す。 第４図は９重メタノール中で測定したシヌラミドの１３
Ｃ−核磁気共鳴スペクトルを示す。 第５図は１重メタノール中で測定したシヌラミドのｌＨ
−核磁気共鳴スペクトルを示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ で示されるスペルミン誘導体又はその塩。