JPS63243099A - 抗菌性ポリペプチド - Google Patents
抗菌性ポリペプチドInfo
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Classifications
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は新規な生理活性ポリペプチドに係り、殊にセン
チニクバエ由来の抗菌性ポリペプチドに係る。
チニクバエ由来の抗菌性ポリペプチドに係る。
（従゛来技術）
昆虫等の無を推動物にワクチン等を接種すると、その体
液中に抗菌性の生理活性物質が出現する事が知られてい
る。［Ｅｕｒ、Ｊ、、Ｂｉｏｃｈｅｍ。
液中に抗菌性の生理活性物質が出現する事が知られてい
る。［Ｅｕｒ、Ｊ、、Ｂｉｏｃｈｅｍ。
第１０６巻第７頁（１９８０年）等］。
本発明者等もセンチニクバエ（Ｓａｒｃｏｐｈａｇａ
ｐｅｒｅｇｒｉｎａ）の幼虫に関して、体表に傷を与
えると体液中に分子量約４０００のポリペプチドが出現
することを見出だすと共に、これを精製して理化学的性
質及び構造を明らかになした（特開昭５９−１３７３０
及び同６１−１２２２９９公報）。
ｐｅｒｅｇｒｉｎａ）の幼虫に関して、体表に傷を与
えると体液中に分子量約４０００のポリペプチドが出現
することを見出だすと共に、これを精製して理化学的性
質及び構造を明らかになした（特開昭５９−１３７３０
及び同６１−１２２２９９公報）。
（発明の課題）
前記の特開昭５９−１３７３０及び同６１−１２２２９
９公報に開示されているようにセンチニクバエ由来のポ
リペプチド（分子量約４０００）は抗菌スペクトルが広
く且つ前隅が低いと言う利点を有している。従って、本
発明の課題はセンチニクバエが免疫的に産生ずる生理活
性物質を更に研究し、上記のポリペプチド以外の新規な
抗菌性ポリペプチドを検索することにある。
９公報に開示されているようにセンチニクバエ由来のポ
リペプチド（分子量約４０００）は抗菌スペクトルが広
く且つ前隅が低いと言う利点を有している。従って、本
発明の課題はセンチニクバエが免疫的に産生ずる生理活
性物質を更に研究し、上記のポリペプチド以外の新規な
抗菌性ポリペプチドを検索することにある。
（課題を解決するための手段及び作用）本発明によれば
、上記課題は体表に傷を与えたセンチニクバエ由来のも
のであって、 ａ）ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分
子量が約７０００であり、 ｂ）アミノ酸組成が Ａｓｐ （ｎ） １２．６ （モル％）Ｔｈ
ｒ ３．８Ｓｅｒ７．
７．７Ｇｌｕ （ｎ）
９． ９Ｐｒｏ
８．１Ｇｌｙ １５．９Ａｌａ
２．１Ｃｙｓ
０Ｖａｌ ４．６Ｍｅｔ
０１ｉｅ １．３Ｌｅｕ
３・ ９Ｔｙｒ
５．ＩＰｈｅ
５．７Ｌｙｓ ６．８
Ｈｉｓ ３．ＩＡｒｇ
９．３Ｔｒｐ
Ｏのボッペプチドであることを特徴とする、抗菌性ポ
リペプチドにより解決される。
、上記課題は体表に傷を与えたセンチニクバエ由来のも
のであって、 ａ）ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分
子量が約７０００であり、 ｂ）アミノ酸組成が Ａｓｐ （ｎ） １２．６ （モル％）Ｔｈ
ｒ ３．８Ｓｅｒ７．
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３・ ９Ｔｙｒ
５．ＩＰｈｅ
５．７Ｌｙｓ ６．８
Ｈｉｓ ３．ＩＡｒｇ
９．３Ｔｒｐ
Ｏのボッペプチドであることを特徴とする、抗菌性ポ
リペプチドにより解決される。
本発明による上記の抗菌性ポリペプチドは、前記の特開
昭５９−１３７３０及び同６１−１２２２９９公報に開
示されている分子量約４０００のポリペプチドにほぼ匹
敵する抗菌活性を有しており、毒性も極めて低く且つ熱
安定性にも優れている。
昭５９−１３７３０及び同６１−１２２２９９公報に開
示されている分子量約４０００のポリペプチドにほぼ匹
敵する抗菌活性を有しており、毒性も極めて低く且つ熱
安定性にも優れている。
本発明による抗菌性ポリペプチド（分子量約７００）は
上記特許出願公開公報に開示の方法に準じて処理する事
により得る事ができる。即ち、センチニクバエの価又は
幼虫の体表に傷を与えて飼育した後に体液を採取するか
ホモジネート化して原料となし、これをイオンクロマト
グラフィー及びＨＰＬＣ逆相クロマトグラフィーにより
分離及び分画処理して抗菌活性を有する両分を採取する
事により精製すれば得る事ができる。
上記特許出願公開公報に開示の方法に準じて処理する事
により得る事ができる。即ち、センチニクバエの価又は
幼虫の体表に傷を与えて飼育した後に体液を採取するか
ホモジネート化して原料となし、これをイオンクロマト
グラフィー及びＨＰＬＣ逆相クロマトグラフィーにより
分離及び分画処理して抗菌活性を有する両分を採取する
事により精製すれば得る事ができる。
センチニクバエの輔又は幼虫が採取されるのは成虫の体
表に傷を与えても抗菌性ポリペプチドが産生されるが、
その活性は低い事がすでに判明しているからである。体
表に傷をつけてから体液の採取又はホモジネート化迄の
間に若干の飼育期間をおくのは抗菌性ポリペプチドの産
生に充分な時間的余裕を与えると共にその活性低下が生
じる前に体液の採取又はホモジネート化を行うためであ
り、これらの面からその期間は２４〜４８時間程度が好
ましい。イオン交換クロマトグラフィーは多段的に行わ
れ、最終段のクロマトグラフィーで得られた両分の内で
抗菌活性が比較的高い画分を採取してＨＰＬＣ逆相クロ
マトグラフィーにより精製すれば前記の特許出願公開公
報に開示の分子量約４０００のポリペプチドが得られ又
抗菌活性が比較的低い両分を採取して同様に精製すれば
本発明による分子量約７０００のポリペプチドが得られ
る。
表に傷を与えても抗菌性ポリペプチドが産生されるが、
その活性は低い事がすでに判明しているからである。体
表に傷をつけてから体液の採取又はホモジネート化迄の
間に若干の飼育期間をおくのは抗菌性ポリペプチドの産
生に充分な時間的余裕を与えると共にその活性低下が生
じる前に体液の採取又はホモジネート化を行うためであ
り、これらの面からその期間は２４〜４８時間程度が好
ましい。イオン交換クロマトグラフィーは多段的に行わ
れ、最終段のクロマトグラフィーで得られた両分の内で
抗菌活性が比較的高い画分を採取してＨＰＬＣ逆相クロ
マトグラフィーにより精製すれば前記の特許出願公開公
報に開示の分子量約４０００のポリペプチドが得られ又
抗菌活性が比較的低い両分を採取して同様に精製すれば
本発明による分子量約７０００のポリペプチドが得られ
る。
（発明の効果）
本発明による抗菌性ポリペプチドは抗菌活性が比較的高
く、毒性が低く且熱安定性が高い。従って、医薬品の有
効成分や食品添加物としての利用が期待される。ことに
、熱安定性が良好なために加工して熱処理が要求される
ような用途には特に適している。
く、毒性が低く且熱安定性が高い。従って、医薬品の有
効成分や食品添加物としての利用が期待される。ことに
、熱安定性が良好なために加工して熱処理が要求される
ような用途には特に適している。
（製造例等）
次に、製造例及び試験例に関連して本発明を更に詳細に
説明する。
説明する。
製造例
１）原料の調整
センチニクバエの幼虫（３令〜脱皮を３回して成熟した
幼虫）の体表に注射針を用いて傷を与えた後に室温下に
２４〜２８時間飼育した。次いで幼虫の尾部を鋏で切断
し、氷冷ベトリ皿の上で体液を搾取させた。得られた体
液を遠心処理して（２００Ｘｇ、１０分間）固型分を除
去し、得られた体液上清を出発原料とする（保存は一８
０度Ｃで行う）。
幼虫）の体表に注射針を用いて傷を与えた後に室温下に
２４〜２８時間飼育した。次いで幼虫の尾部を鋏で切断
し、氷冷ベトリ皿の上で体液を搾取させた。得られた体
液を遠心処理して（２００Ｘｇ、１０分間）固型分を除
去し、得られた体液上清を出発原料とする（保存は一８
０度Ｃで行う）。
２）抗菌性蛋白質の予備処理（多段的イオン交換クロマ
トグラフィー） ａ）第１回ＣＭセルロースカラムクロマトグラフィー 原料体液３０ｍ１に１０ｍＭりん酸緩衝液を１２０ｍ１
添加してＰＨを６．０に調整した。これをＣＭセルロー
スカラム（３，４Ｘ２０ｃｍ）にかけ、１０ｍＭりん酸
緩衝液で洗浄した。２５０ｍＭのＮａＣ１含有りん酸緩
衝液（ＰＨ６，０）をこのカラムに流して、両分を５ｍ
ｌ宛分取し、各画分につき０ＫＡＤＡ等の方法［Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ、Ｊ、第２１１巻第７２７〜７３４頁（１，９
８３年）コに従って大腸菌（Ｋ１２５９４株）による抗
菌活性を測定し、又２８０ｎｍ及び６５０ｎｍでの吸光
度を測定した。
トグラフィー） ａ）第１回ＣＭセルロースカラムクロマトグラフィー 原料体液３０ｍ１に１０ｍＭりん酸緩衝液を１２０ｍ１
添加してＰＨを６．０に調整した。これをＣＭセルロー
スカラム（３，４Ｘ２０ｃｍ）にかけ、１０ｍＭりん酸
緩衝液で洗浄した。２５０ｍＭのＮａＣ１含有りん酸緩
衝液（ＰＨ６，０）をこのカラムに流して、両分を５ｍ
ｌ宛分取し、各画分につき０ＫＡＤＡ等の方法［Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ、Ｊ、第２１１巻第７２７〜７３４頁（１，９
８３年）コに従って大腸菌（Ｋ１２５９４株）による抗
菌活性を測定し、又２８０ｎｍ及び６５０ｎｍでの吸光
度を測定した。
ｂ）セファデックスＧ−５０カラムクロマトグラフイー
上記のａ）で抗菌活性の認められた両分を集め１００度
Ｃで１０分間熱処理し、次いで遠心処理して固型分を除
去する。限外ろ過装置により上清を濃縮し、これをセフ
ァデックスＧ−５０カラム（１，５Ｘ６０ｃ、ｍ）にか
け、１３０ｍＭのＮａＣ１含有りん酸緩衝液（ＰＨ６，
０）を流して両分を各２ｍｌ宛分取し、ａ）項と同様に
して各面分につき抗菌活性を２８０ｎｍでの吸光度にて
測定した。
Ｃで１０分間熱処理し、次いで遠心処理して固型分を除
去する。限外ろ過装置により上清を濃縮し、これをセフ
ァデックスＧ−５０カラム（１，５Ｘ６０ｃ、ｍ）にか
け、１３０ｍＭのＮａＣ１含有りん酸緩衝液（ＰＨ６，
０）を流して両分を各２ｍｌ宛分取し、ａ）項と同様に
して各面分につき抗菌活性を２８０ｎｍでの吸光度にて
測定した。
尚、上記ａ）及びｂ）項における測定結果は特開昭５９
−１３７３０及び同６１−１２２２９９公報に開示され
ている結果とほぼ同等の結果を示していた。
−１３７３０及び同６１−１２２２９９公報に開示され
ている結果とほぼ同等の結果を示していた。
Ｃ）第２回ＣＭセルロースカラムクロマトグラフィー
上記のｂ）項で得た画分の内で最も抗菌活性の高い両分
を１０ｍＭりん酸緩衝液（ＰＨ６，０’）により５倍に
希釈し、再度０Ｍセルロースカラム（２，ＯＸ４．Ｏｃ
ｍ）にかけ、りん酸緩衝液中に段階式にＮａＣ１濃度を
上昇させて溶出させ、両分を３ｍｌ宛分取し、各両分に
つき上記ａ）項と同様にして抗菌活性及び２８０ｎｍで
の吸光度を測定した。結果は第１図に示される通りであ
った。
を１０ｍＭりん酸緩衝液（ＰＨ６，０’）により５倍に
希釈し、再度０Ｍセルロースカラム（２，ＯＸ４．Ｏｃ
ｍ）にかけ、りん酸緩衝液中に段階式にＮａＣ１濃度を
上昇させて溶出させ、両分を３ｍｌ宛分取し、各両分に
つき上記ａ）項と同様にして抗菌活性及び２８０ｎｍで
の吸光度を測定した。結果は第１図に示される通りであ
った。
ｄ）Ｃ＄セファロースカラムクロマトグラフィ第１図に
おいて抗菌活性が認められる画分Ｃ■即ち２６０ｍＭの
ＮａＣ１含有りん酸緩衝液を流し始めてから、かくて得
られた画分てあって分画番号４４〜５３のものを分取し
く２５ｍ１）、これを１０ｍＭ蟻酸アンモニウム２５０
ｍ１で希釈した。
おいて抗菌活性が認められる画分Ｃ■即ち２６０ｍＭの
ＮａＣ１含有りん酸緩衝液を流し始めてから、かくて得
られた画分てあって分画番号４４〜５３のものを分取し
く２５ｍ１）、これを１０ｍＭ蟻酸アンモニウム２５０
ｍ１で希釈した。
１０ｍＭの蟻酸アンモニウムで平衡化した０Ｍセファロ
ースカラム（０，８Ｘ２０ｃｍ）を用いて上記希釈液の
所望成分を吸着させ、０．１Ｍ〜０．５Ｍの蟻酸アンモ
ニウム各３０ｍ１を用いたリニアグラジェントにより溶
出させ、両分を１ｍｌ宛分取し、各両分について抗菌活
性と２８００ｍでの吸光度を測定した。結果は第２図に
示される通であった。
ースカラム（０，８Ｘ２０ｃｍ）を用いて上記希釈液の
所望成分を吸着させ、０．１Ｍ〜０．５Ｍの蟻酸アンモ
ニウム各３０ｍ１を用いたリニアグラジェントにより溶
出させ、両分を１ｍｌ宛分取し、各両分について抗菌活
性と２８００ｍでの吸光度を測定した。結果は第２図に
示される通であった。
３）抗菌性蛋白質の精製
上記のｄ）項で得られた両分の内で最初に抗菌性活性を
示している画分１（分画番号５２〜５６に該当）を回収
し、濃縮し、下記の条件でＨＰＬＣ逆相クロマトグラフ
ィー（シシンクロパックＲＦＰ−ＣＩ８カラム）分画を
行い、２８０ｎｍでの吸光度を測定した。
示している画分１（分画番号５２〜５６に該当）を回収
し、濃縮し、下記の条件でＨＰＬＣ逆相クロマトグラフ
ィー（シシンクロパックＲＦＰ−ＣＩ８カラム）分画を
行い、２８０ｎｍでの吸光度を測定した。
Ａ液：０．０５％Ｉ・リフルオロ酢酸水溶液Ｂ液：０．
０５％トリフルオロ酢酸／９９％アセトニトリル グラジエント二Ａ液中に１５％のＢ液を、又Ａ液中に５
０％のＢ液を添加してリニアグラジェント流速：２ｍｌ
／分 結果は第３図に示される通りであり、アセトニトリル濃
度が高まるにつれて吸光度値は減少し負値に移行する傾
向を有するが、吸光度かピーク（Ａ、Ｂ及びＣ）を示す
画分があった。
０５％トリフルオロ酢酸／９９％アセトニトリル グラジエント二Ａ液中に１５％のＢ液を、又Ａ液中に５
０％のＢ液を添加してリニアグラジェント流速：２ｍｌ
／分 結果は第３図に示される通りであり、アセトニトリル濃
度が高まるにつれて吸光度値は減少し負値に移行する傾
向を有するが、吸光度かピーク（Ａ、Ｂ及びＣ）を示す
画分があった。
従って、これらのピークを示す各両分を回収し０ＫＡＤ
Ａ等の方法（既述のａ項参照）に従い抗菌活性の測定を
行った。この測定結果は第４図に示されている通りであ
り、ピークＣの両分のみが抗菌活性を有している事並び
にその抗菌活性は特開昭５９−１３７３０及び同６１−
１２２２９９公報に開示のポリペプチドと比較して若干
弱い程度のものである事が判明した。
Ａ等の方法（既述のａ項参照）に従い抗菌活性の測定を
行った。この測定結果は第４図に示されている通りであ
り、ピークＣの両分のみが抗菌活性を有している事並び
にその抗菌活性は特開昭５９−１３７３０及び同６１−
１２２２９９公報に開示のポリペプチドと比較して若干
弱い程度のものである事が判明した。
試験例１（分子量の測定）
１５％のＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動法を用
い、上記の製造例で得られた抗菌性ポリペプチドの分子
量測定を行った。尚、試験サンプルとしては上記の実施
例で得た抗菌性ポリペブチｌ ドを、又対照サンプルとしては特開昭５９−１３７３０
及び同６１−１２２２９９公報に開示の抗菌性ポリペプ
チド（分子量約４０００を用い、これらのサンプルにつ
いては１％のＳＤＳと２％の２−メルカプトエタノール
で処理し又分子量、マーカとしてはキモトリプシノーゲ
ン（分子量２５０００）、チトクロームＣ（分子１ｋ
１２４００ ）及びアプロチニン（分子Ｊｔ ６５００
）を用いた。
い、上記の製造例で得られた抗菌性ポリペプチドの分子
量測定を行った。尚、試験サンプルとしては上記の実施
例で得た抗菌性ポリペブチｌ ドを、又対照サンプルとしては特開昭５９−１３７３０
及び同６１−１２２２９９公報に開示の抗菌性ポリペプ
チド（分子量約４０００を用い、これらのサンプルにつ
いては１％のＳＤＳと２％の２−メルカプトエタノール
で処理し又分子量、マーカとしてはキモトリプシノーゲ
ン（分子量２５０００）、チトクロームＣ（分子１ｋ
１２４００ ）及びアプロチニン（分子Ｊｔ ６５００
）を用いた。
結果は第５図に示される通りであり、レーン１の対照サ
ンプル及びレーン２の試験サンプルの分子量は、左側に
示される分子量マーカの泳動位置から明らかなように、
それぞれ約４０００及び約７０００であり、本発明によ
る抗菌性ポリペプチドは分子量約７０００であって、特
開昭５９−１３７３０及び同６１−１２２２９９公報に
開示の抗菌性ポリペプチドとは異なることが判明した。
ンプル及びレーン２の試験サンプルの分子量は、左側に
示される分子量マーカの泳動位置から明らかなように、
それぞれ約４０００及び約７０００であり、本発明によ
る抗菌性ポリペプチドは分子量約７０００であって、特
開昭５９−１３７３０及び同６１−１２２２９９公報に
開示の抗菌性ポリペプチドとは異なることが判明した。
試験例２（アミノ酸組成）
製造例で得られた物質２５ｕｇを６Ｎ塩酸により１２０
度Ｃで１２時間処理して加水分解させ、これを試料とし
てアミノ酸自動分析機（日立製作新製の日立８３５型）
によりアミノ酸分析を行った結果は下記の通りであった
。
度Ｃで１２時間処理して加水分解させ、これを試料とし
てアミノ酸自動分析機（日立製作新製の日立８３５型）
によりアミノ酸分析を行った結果は下記の通りであった
。
Ａｓｐ （ｎ） １２．６ （モル％）Ｔｈ
ｒ ３．８ Ｓｅｒ ７．７ Ｇｌｕ （ｎ） ９．９ Ｐｒｏ ８．１ Ｇｔｙ １５．９ Ａｌａ ２．１ Ｃｙｓ Ｑ Ｖａｌ ４．６ Ｍｅｔ Ｑ １１ｅ １．３ Ｌｅｕ ３．９ Ｔｙｒ ５．１ Ｐｈｅ ５．７ Ｌｙｓ ６’、８ Ｈｉｓ ３．Ｉ Ａｒｇ ９．３ Ｔｒｐ Ｑ 試験例３（毒性試験） 製造例により得られた物質を生理食塩水に溶解し、ＢＡ
ＬＢ／Ｃ及びＩＣＲ系マウスを実験動物として皮下及び
腹腔内に１１００ｕ／ｋｇの用量で連続１０日間投与し
たがアナフィラキシ−ショックは何等認められず、又剖
検においても壊死や炎症等の異常は認められなかった。
ｒ ３．８ Ｓｅｒ ７．７ Ｇｌｕ （ｎ） ９．９ Ｐｒｏ ８．１ Ｇｔｙ １５．９ Ａｌａ ２．１ Ｃｙｓ Ｑ Ｖａｌ ４．６ Ｍｅｔ Ｑ １１ｅ １．３ Ｌｅｕ ３．９ Ｔｙｒ ５．１ Ｐｈｅ ５．７ Ｌｙｓ ６’、８ Ｈｉｓ ３．Ｉ Ａｒｇ ９．３ Ｔｒｐ Ｑ 試験例３（毒性試験） 製造例により得られた物質を生理食塩水に溶解し、ＢＡ
ＬＢ／Ｃ及びＩＣＲ系マウスを実験動物として皮下及び
腹腔内に１１００ｕ／ｋｇの用量で連続１０日間投与し
たがアナフィラキシ−ショックは何等認められず、又剖
検においても壊死や炎症等の異常は認められなかった。
試験例４（熱安定性試験）
製造例により得られた物質を生理食塩水に溶解し、加熱
して１００度Ｃで２０分間維持し、次いで放冷させた後
に、上記の製造例におけると同様０ＫＡＤＡ等の方法に
従って抗菌活性を測定したところ、活性低下は何等認め
られなかった。
して１００度Ｃで２０分間維持し、次いで放冷させた後
に、上記の製造例におけると同様０ＫＡＤＡ等の方法に
従って抗菌活性を測定したところ、活性低下は何等認め
られなかった。
第１図は本発明による抗菌性ペプチドの分離過程におけ
る第２回ＣＭセルロースカラム処理でＮａｃ１含有りん
酸緩衝液でリニアグラジェント溶出させて得た各両分と
、その吸光度及び抗菌活性との関係を示すグラフ。 第２図は第１図中に示されている画分Ｃ■をＣＭセファ
ロースカラムに吸着させ、蟻酸アンモニウムでリニアグ
ラジニント溶出させて得た各画分と、その吸光度及び抗
菌活性との関係を示すグラフ。 第３図は第２図中に示されている画分１についてＨＰＬ
Ｃ逆相クロマトグラフィーを実施し、アセトニトリルで
クラジエント溶出させて得た各両分とその吸光度との部
体を示すグラフ。 第４図は第３図中に示されているピークＡ、 Ｂ及びＣ
の各画分並びに対照ないし参考としての公知抗菌性ポリ
ペプチド（分子量約４０００）につき、その量を可変と
して抗菌活性を調べた結果を示すグラフ。 第５図は本発明による抗菌性ポリペプチドと公知の抗菌
性ポリペプチドの分子量測定結果を示すＳＤＳポリアク
リルアミドゲル電気泳動パターンである。 特許出願人 株式会社 三相化学研究所第１図 ○−○ 吸光度 ・−・ 菌の生育をコントロールに 対する２６で表した抗菌活性 −） 各ＮａＣ１濃度の緩衝液流 下開始位置 第３図 二 一一一−アセトニトリル □ 吸光度 ○−○ 公知の抗菌性ポリペプチド ｌ−表 ピークＡ画分 ・−・ ピー２３画分 １−１ ピークＣ画分く本発明による抗菌性ポリペプ
チド） 第５図 ン］；公知の抗菌性 ポリペプチド ン２：本発明による 抗菌性ポリベプチド 手続補正書（自発） 昭和６２年５月２５日
る第２回ＣＭセルロースカラム処理でＮａｃ１含有りん
酸緩衝液でリニアグラジェント溶出させて得た各両分と
、その吸光度及び抗菌活性との関係を示すグラフ。 第２図は第１図中に示されている画分Ｃ■をＣＭセファ
ロースカラムに吸着させ、蟻酸アンモニウムでリニアグ
ラジニント溶出させて得た各画分と、その吸光度及び抗
菌活性との関係を示すグラフ。 第３図は第２図中に示されている画分１についてＨＰＬ
Ｃ逆相クロマトグラフィーを実施し、アセトニトリルで
クラジエント溶出させて得た各両分とその吸光度との部
体を示すグラフ。 第４図は第３図中に示されているピークＡ、 Ｂ及びＣ
の各画分並びに対照ないし参考としての公知抗菌性ポリ
ペプチド（分子量約４０００）につき、その量を可変と
して抗菌活性を調べた結果を示すグラフ。 第５図は本発明による抗菌性ポリペプチドと公知の抗菌
性ポリペプチドの分子量測定結果を示すＳＤＳポリアク
リルアミドゲル電気泳動パターンである。 特許出願人 株式会社 三相化学研究所第１図 ○−○ 吸光度 ・−・ 菌の生育をコントロールに 対する２６で表した抗菌活性 −） 各ＮａＣ１濃度の緩衝液流 下開始位置 第３図 二 一一一−アセトニトリル □ 吸光度 ○−○ 公知の抗菌性ポリペプチド ｌ−表 ピークＡ画分 ・−・ ピー２３画分 １−１ ピークＣ画分く本発明による抗菌性ポリペプ
チド） 第５図 ン］；公知の抗菌性 ポリペプチド ン２：本発明による 抗菌性ポリベプチド 手続補正書（自発） 昭和６２年５月２５日
Claims (1)
- （１）体表に傷を与えたセンチニクバエ由来のものであ
って、 ａ）ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動法による分
子量が約７０００であり、 ｂ）アミノ酸組成が Ａｓｐ（ｎ） １２．６（モル％） Ｔｈｒ ３．８ Ｓｅｒ ７．７ Ｇｌｕ（ｎ） ９．９ Ｐｒｏ ８．１ Ｇｌｙ １５．９ Ａｌａ ２．１ Ｃｙｓ ０ Ｖａｌ ４．６ Ｍｅｔ ０ Ｉｌｅ １．３ Ｌｅｕ ３．９ Ｔｙｒ ５．１ Ｐｈｅ ５．７ Ｌｙｓ ６．８ Ｈｉｓ ３．１ Ａｒｇ ９．３ Ｔｒｐ ０ のポリペプチドであることを特徴とする、抗菌性ポリペ
プチド。
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62077154A JPS63243099A (ja) | 1987-03-30 | 1987-03-30 | 抗菌性ポリペプチド |
| EP88104588A EP0284965A3 (en) | 1987-03-30 | 1988-03-22 | Antibacterial polypeptide |
| US07/711,417 US5118789A (en) | 1987-03-30 | 1991-06-05 | Antibacterial polypeptides from sarcophaga peregrina |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62077154A JPS63243099A (ja) | 1987-03-30 | 1987-03-30 | 抗菌性ポリペプチド |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63243099A true JPS63243099A (ja) | 1988-10-07 |
Family
ID=13625872
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62077154A Pending JPS63243099A (ja) | 1987-03-30 | 1987-03-30 | 抗菌性ポリペプチド |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5118789A (ja) |
| EP (1) | EP0284965A3 (ja) |
| JP (1) | JPS63243099A (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6713605B1 (en) * | 1996-04-10 | 2004-03-30 | Kansas State University Research Foundation | Synthetic peptides that inhibit leukocyte superoxide anion production and/or attract leukocytes |
| US5830993A (en) * | 1995-04-10 | 1998-11-03 | Kansas State University Research Foundation | Synthetic antimicrobial peptide |
| FR2735983B1 (fr) | 1995-06-29 | 1997-12-05 | Centre Nat Rech Scient | Peptide permettant de modifier l'activite du systeme immunitaire humain ou animal |
| EP1434591A1 (de) * | 2001-08-10 | 2004-07-07 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Verwendung von fliegenlarvenextrakten zur wundbehandlung |
| GB0524782D0 (en) * | 2005-12-05 | 2006-01-11 | Chiron Srl | Analysis of samples |
| CN102026555A (zh) * | 2008-05-12 | 2011-04-20 | 罗姆股份有限公司 | 饲料、饲料的制造方法以及幼虫刺伤装置 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5913730A (ja) * | 1982-07-15 | 1984-01-24 | Wakunaga Seiyaku Kk | 抗菌性蛋白、その製造法およびその用途 |
| JPS61122299A (ja) * | 1984-11-19 | 1986-06-10 | Wakunaga Seiyaku Kk | 抗菌性ポリペプチド、その製造法およびその用途 |
-
1987
- 1987-03-30 JP JP62077154A patent/JPS63243099A/ja active Pending
-
1988
- 1988-03-22 EP EP88104588A patent/EP0284965A3/en not_active Withdrawn
-
1991
- 1991-06-05 US US07/711,417 patent/US5118789A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0284965A3 (en) | 1989-08-09 |
| US5118789A (en) | 1992-06-02 |
| EP0284965A2 (en) | 1988-10-05 |
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