JPS6284099A - ペプチドの新規製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は一般式（１） 式中Ｒ１は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基、炭
素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７〜９
のアルアルキル基、保護または無保護の水酸基で置換さ
れた炭素数１〜６のアルキル基、保護または無保護の水
酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、低級
アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキル基
、保護まだは無保護のチオール基で置換された炭素数１
〜４のアルキル基まだはインドリルメチル基を表わし、 Ｒ２は水素原子、アミン基の保護基まだは基（ここでＲ
１は前記と同一意義を表わし、Ｒ４は水素原子またはア
ミン基の保護基を表わす）を表わし、 Ｒ３は水素原子または低級アルキル基を表わす〕を有す
るＲプチドの新規製造法に関する。

さらに詳しく述べれば、本発明は有機溶媒中で活性エス
テルの分解、あるいは塩基によるラセミ化なしでＲプチ
ドを合成する極めて有用な方法であり、さらにα−アミ
ノ酸を保護基なしで使用できるという画期的な手法であ
る。

本発明の方法に、よって得られる化合物は各種ホルモン
、農薬、食品（たとえば甘味剤）などとして、あるいは
該化合物からさらに上記の如き諸用途を有する最終目的
化合物を合成する中間体として有用である。

（従来技術） イプチド類の合成は固相合成法と液相合成法に大別され
る。固相法は精製工程が少なく、そのだめ迅速な合成が
可能であり、且つ合成機械による省力化が計れる利点が
ある。一方液相法は一般的に各段階における収率、２セ
ミ化の割合において優っていて、両方法ともに利点を有
している。

液相法において、その基本的な合成法は３つに分類され
る。（１）Ｃ端活性化法　（２）縮合法　（３）Ｎ端活
性化法（イソシアナート法） （１）の方法は一方のアミノ酸のカルボキシル基を活性
エステルとし、もう一方のアミノ酸と塩基の存在下また
は不存在下縮合をする方法であり、（２）の方法は縮合
剤を用いることによシフラスコ内で一方のアミノ酸のカ
ルボキシル基が活性エステルとなシ、もう一方のアミノ
酸のアミン基と縮合する方法である。

これら２つの方法が、液相法で各種ペプチド合成に最も
よく使用されている。

しかしながら、通常両者共、活性エステルに縮合するア
ミン成分のカルボキシル基をエステル化により保護する
ことが必須である。

アミノ酸は解離した分子内塩を形成しておシミ気的に中
和されている。このため水及び有機溶媒に難溶である。

かかる理由から液相法ではアミノ基の窒素の塩基性（求
核性）を引き出すべくカルボキシル基を保護し中和しな
ければならない。

アミノ酸のアミンの塩基性を引き出す方法として°、強
塩基を加えカルボン酸塩を生成させる事がある。この方
法としてショツテン・バウマン（Ｓｃｈｏｔｔｅｎ−Ｂ
ａｕｒｎａｎｎ）法が知られている（ボダンスキ−（Ｂ
ｏｄａｎｓｋｙ）　ラ＜　フチド・シンセシス・セカン
ドＪ＋エディジョン（Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓ
ｉｓ２ｎｄ　Ｅａ、）　８５頁） しかしながら、この方法では活性エステル基がアミノ基
と水に夷る加水分解との競争反応をうけるため不安定（
よシ活性の強い）な活性エステルを用いることができな
い。

（発明が解決しようとする問題点） 本発明の目的は水による活性エステルの分解を防ぐため
、有機溶媒中で反応を行ない、塩基によるラセミ化を防
ぐために、中性に近い反応条件下で、アミンの塩基性を
引き出すことである。

本発明のもう１つの目的は、さらに応用範囲を広げるた
め、α−アミノ酸について無保護で上記の条件を満たす
方法を提供することである。

（問題点を解決するための手段） 遊離アミノ酸のカルボキシル基を中和シ、アミノ基の塩
基性を引き出し、且つ有機溶媒に可溶化する方法として
、本発明者はシリル化による方法を検討した。

シリル化はトリメチルシリルイミダゾールを用いること
により解決した。

α−アミノ酸とトリメチルシリルイミダゾールをＯ℃〜
３０℃で有機溶媒中反応させると速やかに反応が進みＮ
−）リメチルシリルアミノートリメチルシリルエステル
が得られる。

このことを利用して一般式（２） （式中Ｒ５は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基、
炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７〜
９のアルアルキル基、保護または無保護の水酸基で置換
された炭素数１〜６のアルキル基１、保護または無保護
の水酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、
低級アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキ
ル基、保護されたチオール基で置換された炭素数１〜４
のアルキル基またはインドリルメチル基を表わす）を有
するα−アミノ酸を有機溶媒中トリメチルシリルイミダ
ゾールと処理すると一般式（４）（式中Ａは水素原子、
炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数２〜６のアルケニ
ル基、フェニル基、炭素数７〜９のアルアルキル基、保
護された水酸基で置換された炭素数１〜６のアルキル基
、保護された水酸基で置換された炭素数７〜９のアルア
ルキル基、低級アルキルチオ基で置換された炭素数２〜
６のアルキル基、保護されたチオール基で置換された炭
素数１〜４のアルキル基またはインドリルメチル基を表
わす） を有するＮ−トリメチルシリルアミノ−トリメチルシリ
ルエステルが得られる。

本工程にお℃・て反応温度は００〜３０℃がよく、反応
溶媒はアミド系、エーテル系、エステル系および塩素系
がよい。α−アミノ酸に対して用いられるトリメチルシ
リルイミダゾールの量は一般式（４）が得られる量でよ
し・。

トリメチルシリルイミダゾールを用いＮ−トリメチル・
ンリルアミノートリメチルシリルエステルとする利点は
、反応系中に出てくるイミダゾールが中性化合物であシ
何ら反応に関与せず、かつラセミ化の心配がないことで
ある。

このことはＮ−トリメチルシリルアミノ・トリメチルシ
リルエステルを単離することなく次〜・で活性エステル
を加えはプチドを合成できることである。

一般式（２）で表わされるα−アミノ酸基について、ア
ミン基およびカルボキシル基に対し当量、すなわち２当
量が最もよいが、１当量でも以後の反応条件を用℃・る
ことにより被プチド形成反応は進行する。ただし収量は
１当量の場合低下することはさけられない。

次に一般式（４）を有するＮ−）リメチルシリルアミノ
・トリメチルシリルエステルとアミノ酸の活性エステル
化合物との縮合反応を検討した。

一般式（２）のα−アミノ酸をトリメチルシリルイミダ
ゾールと作用させ、前記一般式（４）を有する化合物と
し、単離することなく一般式（３）〔式中Ｒ６は水素原
子、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数２〜６のアル
ケニル基、フェニル基、炭素数７〜９のアルアルキル基
、保護された水酸基で置換された炭素数１〜６のアルキ
ル基、保護された水酸基で置換された炭素数７〜９のア
ルアルキル基、低級アルキルチオ基で置換された炭素数
２〜６のアルキル基、保護されたチオール基で置換され
た炭素数１〜４のアルキル基またはインドリルメチル基
を表わし、 Ｒ７はアミン基の保護基または基 （ここでＲ６は前記と同一意義を表わし、Ｒ８はアミノ
基の保護基を表わす）を表わす〕を有するアミノ酸活性
エステル化合物を加えることに−よシ収率よく一般式（
１ａ） （式中Ａ、　　Ｒ６およびＲ７は前記と同一意義を表わ
す） を有する本発明化合物が得られる。

この反応に用いられる活性エステルはｐ−ニトロフェニ
ルエステル、ジニトロフェニルエステル、はンタクロル
フェニルエステル、トリクロルフェニルエステルナトの
フェノール類、Ｎ−オキシコハク酸イミドのエステル、
Ｎ−オキシフタルイミドのエステル等でもよいが、ピリ
ジルチオエステルが好ましい。

以上のはプチド新規合成法において、まず前記一般式（
２）のアミノ酸を有機溶媒に懸濁させ、次いでトリメチ
ルシリルイミダゾールを加える。反応が進行すれば、不
溶物がとけて半透明の溶液になる。例えば溶媒としてジ
メチルホルムアミドを用いると、半透明の溶液が得られ
、容易にＮ　−）　＋）メチルシリルアはツートリメチ
ルシリルエステルの生成が確認できる。

過剰のトリメチルシリルイミダゾールを用いた場合には
１反応が進まない。このことは一般式（５）（式中Ａは
前記と同一意義を表わす） を有するＮ、Ｎ−ｕトリメチルシリルアミノ化合物にな
ったからと考えられる。このことよシトリメチルシリル
イミダゾールの量を常に正確に使用する必要がある。

前述の本発明化合物（ｌａ）のカルボキシル基を一般的
なアルキル化剤と作用さすと一般式（１ｂ）（式中Ａ、
　　Ｒ６およびＲ７は前記と同一意義を表わし、Ｒ９は
低級アルキル基を表わす）を有する他の本発明化合物が
得られる。

ここで用いられるアルキル化剤は一般的なアルキル化剤
でよく、例えばジアゾメタン等があげられる。

又前述の化合物（１ａ）の保護基をはプチド化学におい
て一般に用いられている方法を用い除去することによシ
他の本発明化合物（１ｃ）〔式中ＲＩＯは水素原子、炭
素数１〜１０のアルキル基、炭素数２〜６のフルケニル
基、フェニル基、炭素数７〜９のアルアルキル基、 水酸基で置換された炭素数１〜６のアルキル基、水酸基
で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、低級アル
キルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキル基、チ
オール基で置換された炭素数１〜４のアルキル基まだは
インドリルメチル基を表わし、 Ｒ１１は水素原子または 基 （ここでＲＩＯは前記と同一意義を表わす）を表わす〕 を有する本発明のはプチドは得られる。

本発明の製造方法を要約すると、まずアミノ酸にトリメ
チルシリルイミダゾールを加えることによりアミノ酸の
Ｎ−トリメチルシリルアミノ・トリメチルシリルエステ
ルとする。

ここで分離されてくるのはイミダゾールであシ反応には
何ら関与しない。次いで活性エステル（ピリジルチオエ
ステル）を加える。

ここで分離してくるのは２−ピリジンチオールである。

このような反応条件下では、弱塩基などの触媒を加える
必要はない。又、中間体としてのシリル化されたアミノ
酸を単離する必要もない。

反応系中に存在する化合物は、はぼ中性でありラセミ化
の心配は全くない。反応条件としては室温以下が好まし
く、室温ないし一２０’Ｃで反応は進むことより、温度
制御はいらない。

反応終了後、水洗することによりイミダゾール、２−ピ
リジンチオールは除去出来る。

これにより濃縮後、再結晶、カラムクロマトグラフィー
、升取薄層クロマトグラフィー等により容易に精製でき
る。

アミノ酸の種類、溶媒、反応時間などを検討することに
より収率は定量的になると考えられる。

本発明の方法を用いると、溶媒が適応できるものであれ
ば、理論上はいくらでもにプチド鎖をのばすことができ
る。

（実施例） 以下に実施例および参考例でもって本発明をさらに具体
的に説明するが、これら実施例に本発明が限定されるも
のでな℃・のはいうまでもない。

実施例１ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−バリル−２−
アミノ−４−ペンテン酸 Ｌ−アリルグリシン（２３（ｌｙ）のジメチルホルムア
ミビ（５ｉ／ｌ’）懸濁液にトリメチルシリルイミダゾ
ール（５６（１９）を窒素気流下、室温で加え１時間攪
拌した。

次に、Ｎ−ペンジルオキシカルボニルバリンヒリシルチ
オエステル（５５０ｍｌｉｌ）のジメチルホルムアミビ
溶液（３ｍＪ）を室温で加え、２時間攪拌した。

反応液を水にあけ、ＩＮ塩酸でｐＨ２とし、３０分攪拌
したのち酢酸エチル（２００ｍｌ）で３回抽出を行い、
有機層を飽和食塩水で洗浄、乾燥後濃縮し粗結晶５０Ｃ
１ｇ（収率８８チ）を得た。

クロロホルム・ヘキサンで再結晶し４６７ｍｐ（収率８
１％）の標記化合物を得た。

実施例１においてトリメチルシリルイミダゾールは以下
の実験例により２当量が最適であることが判った。

又溶媒の影響をみるため以下の溶媒で実施例１と同じ方
法を用いて実験した。

標記化合物をエーテルにとかし過剰のジアゾメタンを加
えることによりＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ
−バｖルー２−アミノ−４−はシテン酸メチルエステル
とした。

メチルエステルの物性を以下に示す。

融点：１１６．５−１１７．０℃ 〔α）Ｄ：＋１２．９°　（Ｃ−１，０１，クロロホル
ム）ＩＨスはクトル（クロロホルム、ｃｍ　　）：３４
５０゜１７４０．１７２０．１６８０ ７　ス、２．−＜クトル（ｍ／ｚ　）：　３６３　（Ｍ
＋ｌ　ｆ、２５４゜ＮＭＲス（クトル（ＣＤＣ１３，δ
）　：０．８７　（３Ｈ，ｄ。

Ｊ＝７．０Ｈ２）、０．９３　（３Ｈ，ｄ、　　Ｊ−７
，０Ｈ２）。

２．０６（ＩＨ，ｗ）、２．４８（２Ｈ，ｔ、Ｊ−７，
０Ｈｚ）。

３．６８（３Ｈ，ｓ）、４．００（ＩＨ，ａａ、Ｊ−６
゜８．５Ｈ２）　＋　　４．６０　（Ｉ　Ｈ，、ｉｔ、
　　Ｊ＝６．　８．５Ｈ２）　ｒ５．０４（２Ｈ，θ）
、　　６．４６　（ＩＨ，ａ、　　Ｊ−８，５）。

７．２８（５Ｈ，θ） 実施例２ Ｎ−（−くンジルオキシカルボニル）−バリル−Ｌ−メ
チオニン Ｌ−７１チオニニ・（９０ｍｌＦ、）のジメチルホルム
アミドシリルイミダゾール（１７６μｌ）を加え、２時
間攪拌巳た。

次いでＮ−＜ンジルオキシカルボニルーＬーパリ二′ビ
リジルナオニステル＜１７ｏｍｙ）のジメチルホルムア
ミド溶液（２ｍｌ）を加え１４時間攪拌した。

ＩＮ塩酸３ｍｅを加え反応を止め、酢酸エチル抽出後，
有機層を実施ｆｌＪ　１と同様に処理し白色結晶として
標記化合物１６８■（収率８９％）を得た。

融点：１８０−１８２。

３α：］Ｄニー２２．６°（Ｃ＝１．０５，　　クロロ
ホルム）ＩＲｘ−ｅクトル（ヌジョール，ｃｒｒＬ−１
）：３３５ｏ。

３３００、１７４０，１６４０ マスクはクトル（ｍ／ｚ）：２７６、２０３，１８３Ｎ
　Ｍ　Ｒ　スフ）　トル（　ＣＤ　ａ　ＯＤ，　　Ｊ　
）　：　ｏ．　９　６　（　３　Ｈ，　　ｄ。

Ｊ　＝７．ＯＨｚ）、　　Ｏ。９９（３Ｈ，　　ｄ，　
　Ｊ’＝７．０Ｈｚ）。

２、０５（３Ｈ，　　ｓ）、　　３．９６（ＩＨ，　　
ｄ，　Ｊ−８．０Ｈｚ）。

４、５８（ＩＨ，ａｄ，、Ｔ＝４．　　８Ｈｚ）、５．
０８（２Ｈ。

ｓ）、７．３２（５Ｈ，Ｂ）一 実施例３ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−バリル−Ｌーフェ
ニルアラニンメプルエステル Ｌ−フェニルアラニン（９９ｍＬｉ）のジメチルホルム
アミビ売１ン蜀，夜（１ｍｅ）、トリメチルシリルイミ
ダノ゛−ル（１７６μｌ）およびＮ−ベンジルオキシカ
ルボニル−Ｌ−バリンの２−ピリジルチオエステル（１
６１２グ）のジメチルホルムアミド溶液（１ｍｌりを用
い実施例２と同様に反応し，処理することによシ得られ
た粗結晶を５ｍＪの酢酸エチルにとかし過剰のジアゾメ
タンのエーテル溶液を加えメチルエステルとした。

濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付しエ
ーテル・ヘキサン（２５ニア５）で溶出し白色結晶とし
て標記化合物１７１７ｆｆｐ．（収率８６％）を得た。

融点：１４２−１４３℃ 〔α〕Ｄ　：＋３６６°（Ｃ＝１．１，　　クロロホル
ム）マス、Ｘ．　＜りｌ−ル（ｍ／ｚ）：４１２（Ｍ＋
）、３０４。

２４５、２０６ ＩＨス−！’クトル（クロロホルム、　ｃｍ−”）　：
３４５０。

３３５０、１７５０，１７４０。

１７３０、　　１６８Ｏ Ｎ　Ｍ　Ｒ　スハクＦ　ル（　Ｃ　Ｄ　Ｃ　ｌ　３ｒ　
　δ）：０．８７（３Ｈ。

ｄ．Ｊ＝６０Ｈｚ）、０９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ−６，ｏＨ
ｚ）。

２、０８　（　ＩＨ，　　ｑ，　　Ｊ＝６Ｈｚ）、　　
３．１　０　（　２Ｈ，　　ｄ。

Ｊ＝６Ｈｚ）、３．７２（３Ｈ，ｓ）、ｊ、００（ＩＨ
，ｄｄ。

Ｊ＝６．　９Ｈｚ）＋　　４．８８（ＩＨ，ｄｔ、　Ｊ
−６，１３Ｈｚλ５．１０（２Ｈ，ｓ）、　　５．３４
（ＩＨ，ｄ、　Ｊ−９Ｈ２）。

６．３６（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝８Ｈｚ）、７．３６（５Ｈ，
ｅ）。

７．０−７．４　（５Ｈ，ｍ　） 実施例４ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル〕バリルクリジグリシ
ン＜１ｏｏｍｙ）のジメチルホルムアミド懸濁液（１ｍ
Ｊ）、）リンチルシリルイミダゾール（３９０μｌ）お
よびＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ　−、ｓリンの
ピリジルチオエステル（３８１”？　）のジメチルホル
ムアミド溶液（１，０ｔｎｌ　）を用い実施例１と同様
に処理し、′室温で１６時間反応させた。実施例１と同
様に処理Ｉ〜得られた油状物を酢酸エチルにとかし、ジ
アゾメタンのエーテル溶液を加えメチルエステルとした
。このメチルエステルをシリカゲルのカラムクロマトグ
ラフィー（溶出溶媒：エーテル）に付し３７７ｍ９の標
記化合物を白色結晶として得だ（収率９７チ）。

融点：Ｉ５９．５−１６１．５℃ 〔α）Ｄニー１３．１°（Ｃ−１，１６，メタノール）
工Ｒスはクトル（クロロホルムｌ−ｃｍ−”　）　：　
３４５０　ｒ１７５０．１７４０，１７２０゜ ？　スス−＜クトル（ｍ／ｚ）　：　３２２　（Ｍ”　
）、　　２５５゜ＮＭＲスＲクトル（ＣＤＣ１３，δ）
：０．９４（３Ｈ，ｄ。

Ｊ＝７Ｈｚ）、　０．９８　（３Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝７Ｈ
ｚ）、　２．０５（ＩＨ，ｑ、Ｊ−７Ｈ２）、３．７２
（３Ｈ，Ｓ）。

３．９０−４．２２（３Ｈ，ｍ）、５．０８（２Ｈ，ｓ
）。

５．５８（ＩＨ，ｄ、Ｊ−９Ｈｚ）、６．８０（ＬＨ。

ｄｄ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）、７．３２（５Ｈ，８）実施例
５ Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−バリル−Ｌ−
スレオニンメチルエステル ○Ｈ Ｌ−スレオニン（２３８ｍ９）のジメチルホルムアミド
懸濁液（０，５ｍｌ　）に室温、窒素気流下トリメチル
シリルイミダゾール（８８μｌ）を滴下し攪拌し半透明
の溶液を得た。次にＮ−ベンジルオキ７カルボニルーＬ
−バリンピリジルチオエステル（６１１１！ｉ＋）のジ
メチルホルムアミド溶液を滴下し実施例４と同様に処理
して得られた油状物を過剰のジアゾメタン・エーテル溶
液と処理した。粗生成物をシリカゲルのカラムクロマト
ダシフィーに付し標記化合物を白色結晶として得だ。収
量２９５ｍｇ、収率４１条。

融点：１４１−１４２℃ 〔α）Ｄニー８．３°（Ｃ−１，０，クロロホルム）マ
ススペクトル（ｍ／ｚ　）　：　３６６　（Ｍ”　）、
　　３２２工Ｒスはクトル（りｏｏホルム、ｃｍ　　）
、３４５０゜１７５０．１７３０，１７１０゜ 　６８Ｏ ＮＭＲス−？り）ル（ＣＤＣｌ３．　　δ）：　０．９
３　（３Ｈ，ｄ。

Ｊ＝７Ｈｚ）、Ｑ、９ら（３Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝７Ｈ２）
、　　１．１６（３Ｈｌｄｒ　　Ｊ　＃７　Ｈｚ　）　
＋　　３７０　（３Ｈ＋　　日）　。

４．０５　（ＩＨ，ｄｄ、　　Ｊ＝７．　９Ｈｚ）、　
　４．５８　（ｌ　Ｈ。

ｄ　ｄ　ｒ　　Ｊ＝２−５　ｒ　　８　Ｈｚ　）　、５
，０５　（２Ｈ、ｅ　）　＋　　５．７０（ＩＨ，ａ、
　　Ｊ＝８Ｈｚ）、　　７．１１　（ＩＨ，ａ、　　Ｊ
＝９Ｈｚ）、　　７．３０（５Ｈ，８） 実施例６ Ｎ−（−１”シリルオキシカルボニル）−Ｌ−ノ；リル
−０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−Ｌ−スレオニン
メチルエステル ｏ　−ｔ　−フ＋ルジメチル／リルーＬ−スレオニン３
８ｍグのジメチルホルムアミド（０，５ｍｇ）懸濁ン夜
ととトリメチル７リルイミダゾール４９μｌを用（・、
３０分攪拌することにより得られた透明な４７１にＮ−
ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−バリンピリジルチオエ
ステル５６Ｔｎｇのジメチルホルムアミド９（０，５ｍ
／）溶液を滴下し、室温で３時間反応させた。

０、５　Ｎ塩酸２ｒｎｅを加え、酢酸エチルで抽出し常
法通シ処理し得られた粗生成物に過剰のジアゾメタン・
エーテル溶液を加えエステル化した。このエステル化物
をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーに付し、はン
ゼン・酢酸エチル（３：１）で溶出し標記化合物５５ｒ
ｎ９（収率７０％）を油状物として得た。

〔α）Ｄ：＋４．３１°（Ｃ−１，１６，クロロホルム
）マスクはクトル（ｍ／ｚ）：４８１（Ｍ＋１）”＋４
２３．３１５ 工Ｒｘ−？クトル（フィルム＋ｃｍ　　）：３４５０１
３３００．１７２５，１６７Ｏ ＮＭＲスはクトル（ＣＤＣＩ　３．　　δ）：０．０Ｏ
（３Ｈ。

ｓ）、０．０６（３Ｈ，ｅ）、、０．８５（９Ｈ，ｓ）
。

１．００（３Ｈ，ｄ、Ｊ−７Ｈ２）、１．０３（３Ｈ，
ａ。

Ｊ−７Ｈ２）、　　１．１７　（３Ｈ，ｄ、　　Ｊ−７
Ｈｚ）、　　２．１６（”　Ｊ　　ｑ　ｐ　　Ｊ−７Ｈ
ｚ　）　ｔ　　３．７０　（３Ｈ＋　　８　）　＋４．
１３　（ＩＨ，ａｄ、　　Ｊ−６，８Ｈｚ）、　　４．
３５−４．６０（２Ｈ，ｍ）、５．１２（２Ｈ，ｓ）、
５．５０（ＩＨ。

ｄ、Ｊ＝８Ｈ２）、６．３６　（ＩＨ，ｄ、Ｊ−８Ｈ２
）。

７．３５（５Ｈ，ｅ） 実施例７ Ｎ−（ｔ−ブト叡りカルボニル）−２−アミノ−４−、
，２ンテノイルー０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−
Ｌ−スレオニンメチルエステルＮＨ−ＣＯＯＣ（ＣＨ３
）　３ Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリルスレオニン（９５３ｒｎ
Ｐ　　４．０　ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド溶液
（８，０ｍｌ　）　Ｋ　）リメチルシリルイミグゾール
（１，１７ｍ／　　８．０ミリモル）を加え、窒素雰囲
気上室温で１時間攪拌すると、透明な溶液となった。

この溶液に、Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアリルグリシ
ンチオビリジルエスｆル（１，０５，９，３，４ミリモ
ル）の塩化メチレン溶液（１０ｍＡ’）を、室温攪拌下
ゆつくシ滴下した。その後室温で一晩攪拌したものを、
水にそそぎ込み、１０％クエン酸水溶液でｐＨ３にした
後、酢酸エチルで数度抽出した。有機層を無水硫酸マグ
ネシウムで乾燥後、濾過、溶媒を減圧留去し、黄色油状
物の反応混合物を得た。（２，２５ｇ　） この反応混合物の一部（４１４９）のエーテル溶液に、
ジアゾメタンエーテル溶液を加えたのち。

溶液を留去し、得られた無色油状物をカラムクロマトグ
ラフィーに付しくエーテル／ヘキサン＝’／１）Ｎ−ｔ
−ブトキシカルボニルアリルグリシン−〇−ｔ−ブチル
ジメチルシリルスレオニンメチルエステルを得た。（２
５２ｍｙ　　収率９５％）性状：無色油状物質 ＩＲス深クりル（フィルム、ｃｍ−’）：３４５０゜３
３３５．３０８０．．１７６０゜ １７２０．１６８５ ７、ｌ！、　スＲクトル（ｍ／ｚ）：４４５　（Ｍ＋ｌ
　）＋、４００゜ＮＭＲスイクトル（ＣＤＣＩ！３．　
δ）ニー０．０４（３Ｈ。

ｓ）、０．０２（３Ｈ，ｓ）、０．８３（９Ｈ，ｓ）。

１．１４（３Ｈ，ｄ、Ｊ−７，０Ｈｚ）＋　　１．４２
（９Ｈ，ｓ）。

２．５２（２Ｈ，ｍ）、３．６８（３Ｈ，ｓ）、４．１
〜４．６　（３Ｈ，ｍ　）、５．０〜５．３　（３Ｈ，
ｍ）、５．８０　（ＩＨ。

ｄ　ｄ　ｔｙ　Ｊ−１８，０，１０，０，７，０Ｈ２）
　、６−６７　（Ｉ　Ｈｌｄｔ　１（１０Ｈｚ）実施例
８ Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−７ミノー４−は
ンテノイルー０−（ｔ−７’チルジメチルシリル）−Ｌ
−スレオニル−２−アミノ−にンテン酸メチルエステル アリルグリシ／（２５５ｍ９　２．２ミリモル）のジメ
チルホルムアミド溶液（５ｍｌ　）にトリメチルシリル
イミダゾール（０，６５ｍ／　　４．４ミリモル）を加
え、室温下１時間攪拌し透明な溶液を得た。この溶液に
、Ｎ−ｔ−プトキシカルボニルアリルグリシン−０−ｔ
−、／チルジメチルシリルスレオニンチオビリジルエス
テル（９６６ｍ９１．８５ミリモル）の塩化メチレン溶
液（８ｍ／）を窒素気流下、室温で滴下し、その後−晩
攪拌を行なった。この反応溶液を水にそそぎ込み、１０
％クエン酸水溶液でｐＨ３にしたのち、酢酸エチルで数
置抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、
濾過、溶媒を減圧留去し、黄色油状物を得た。

このもののエーテル溶液（１０ｍｌ）にジアゾメタンエ
ーテル溶液を、０℃水冷下加えたのち、溶媒を留去し、
得られた無色油状物をカラムクロマトグラフィーに付し
、（エーテル／ヘキサン−１／１）で溶出し、標記化合
物８７５ｍｇ（収率８８％）を得た。

性状：無色結晶 融点＝１３５ど１３６５℃（再結晶溶媒：ヘキサン）工
Ｒスはクトル（りｏｏホルム、　Ｃｍ−”）　：　３４
２０゜３３８０．３０８０，１７４０゜ １７１５、　１６７０ −ｒ　スス−＜クトル（、ｍｌｚ）　：　５４２　（Ｍ
＋　１　）”、　　４　ｇ７゜〔α）　　：＋９．９°
（Ｃ−１，０，クロロホルム）ＮＭＲｘ−？クトル（Ｃ
ＤＣｌ３＋　　δ）：０．１４（ｓ、３Ｈ）。

０１７（θ、３Ｈ）、０．９３（９Ｈ，θ）、１．１．
２（３Ｈ，ａ、　　、Ｔ−６，０Ｈ２）、　　１．４５
（９Ｈ，ｓ）。

２−５３　（４Ｈ９ｍ　）　ｔ　　３．７４　（３Ｈ＋
　　ｅ　）　、４１９（ＩＨ，ａ、　Ｊ−，６，０Ｈｚ
）、　４．３６（ＩＨ，ａａ、　Ｊ＝７．０．　３．０
Ｈ２）、　　４．４１　（ＩＨ，ｂｒｅ）、　　４．６
５（ＩＨｔ　　（１１；Ｉ＝７．０Ｈｚ）１　５．００
（ＩＨ，ｂｒｅ）。

５、１〜５．２　（４Ｈ，ｍ　）　ｔ　　５．６〜５．
８　（２Ｈ，ｍ、）　。

７．０２（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ−６，０Ｈｚ）、　　７．
２９　（ＩＨ，ｄ。

Ｊ−７，ｏＨｚ）。

この化合物（実施例８）を０．５　Ｎ水酸化す）　ＩＪ
ウム水溶液で加水分解することによりＮ−（ｔ−ブトキ
シカルボニル）−２−アミノ−４−−！！ンテノイルー
０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−Ｌ−スレオニル−
２−アミンにンテン酸を得た。

性状：無定形結晶 ＮＭＲス＜クト／’（１００ＭＨｚｔ　　ＣＤａＯＤｓ
　　δ）二０．０８（３Ｈ，θ）、０．１０（θ、３Ｈ
）、０．９２（９Ｈ，８）、１．１６（３Ｈ，ｄ、Ｊ−
６，０Ｈ２）。

１．４５　（９Ｈ，ｓ　）、　　２．５２（４Ｈ，ｍ）
、４．０〜６．０　（１２Ｈ，ｍ）、　７．６８　（Ｉ
Ｈ，ｄ、　Ｊ＝８．０Ｈｚ）。

７．８１　（Ｌ　Ｈ，ｄ、　　Ｊ−８，０Ｈｚ）。

実施例９ （２３，３Ｒ）７Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２
−アミノ−３−（テトラヒドロピラニル）オキシ−４−
（、ｔ−ブチルジメチルシリルオキシフェニル）−フチ
ロイル−０−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−スレオニ
ンピリジンチオエステル０−（１−ブチルジメチルシリ
ル）−スレオニン３５ｍＶを無水Ｎ、Ｎ−ジメチルホル
ムアミビ０．３　ｍｌに懸濁し、トリメチルシリルイミ
ダゾール４４μｌを加え窒素下、室温で１時間攪拌した
。

参考例３の化合物４５．５〜の無水ジメチルホルムアミ
）’　（０，７ｍｌ　）溶液を次いで上記のシリル化物
に室温で加えさらに１５時間攪拌した。反応液に水を加
え、ＩＮ塩酸でｐＨ４４したのち酢酸エチルで抽出した
。

有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮して油状物
を得た。

この油状物を無水ジクロロメタン０．５　ｍｌにとかシ
、トリフェニルホスフィン２３．８■およびジピリジル
ジスルフイ）’　１６．７■を加え窒素気流下室温で１
．５時間攪拌した。

反応液を減圧濃縮し、得られた油状物質をシリカゲルの
カラムクロマトグラフィーに付しエーテル・ヘキサン（
１：１）で溶出し標記化合物３８．９ｍｙ　（収率６３
％）を得た。

性状：油状物質 ＮＭＲスにクトル（ＣＤＣ１３，δ）：　０．０１．　
０．０５（各３Ｈ，日）、０．１６（６Ｈ，θ）、０．
８８と０．９０（各８．あわせて９Ｈ）、０．９５（９
Ｈ，θ）、１．１４と１．２０（各ａ　＋　３　Ｈ＋　
Ｊ　寥６　Ｈｚ　）　、１４８　（９Ｈ＋ｂｒｓ）、　
　６．７２と６７３（各ａ　、　　２　Ｈ，Ｊ　＝８　
Ｈｚ　）　＋７．０９　（２Ｈ９ｄ、　　Ｊ＝８　Ｈｚ
）、　　７．１６〜７．８０（３Ｈ，ｍ）、８．５９（
ＩＨ，ｄ、Ｊ＝５Ｈｚ）。

参考例Ｉ Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−アミノ−４−投
ンテノインクアシツビチオピリジルエステル Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアリルクリシン（５００ｍ
９　２．３　ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液（８ｍｌ　
）に、ジピリジルスルフィド゛（５１１＋７゜２．３ミ
リモル〕、次いでトリフェニルホスフィン（７３１ｍ？
、　　２．８　ミＩＪモル）を加えた。室温で一晩攪拌
した後、溶媒を減圧留去し、得られた反応混合物をカラ
ムクロマトグラフィーに付しくエーテル／ヘキサン−２
／３）　Ｎ　−ｔ−ズトキシカルボニルアリルグリシン
チオピリジルエステルを淡黄色油状物として得た。（６
５（１１９，収率９１％）性状：淡黄色油状物質 ＮＭＲス”クトル（ｌ　ＯＯＭＨｚ　ｐ　　ＣＤＣ１ａ
　＋　　δ）　：１．４４（９Ｈ，ｓ）、２．５４（２
Ｈ，ｍ）、４．４８（Ｉ　Ｈ＋　　ｄ　ｔ　、　　Ｌ＝
７．０＋　　７．５　Ｈｚ）　、５．０〜５．３（３Ｈ
，ｍＬ　　５．７０　（ＩＨ，ａａｔ、　、Ｔ−１８，
０゜９．０．　７．０Ｈ２）、　　７．２３　（ＩＨ，
ｄｄｄ、　　Ｊ−７，０゜５．０．　２．０Ｈ２）、、
　７．５４　（Ｉ　Ｈ，ｄｄｄ、　　Ｊ−８゜０゜２．
０，１．０Ｈｚ）、７．７０（ＩＨ，ａｄｄ、Ｊ−８，
Ｑ。

７．０，２．０Ｈ２）、８．５６　（ＩＨ，ｄａａ、　
　Ｊ−５，０゜２．０，１．０Ｈｚ）。

参考例２ Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−２−アミノ−４−イ
ンテノイル−〇−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−Ｌ−
スレオニンチオヒリシルエステル実施例７で得られだＮ
−ｔ−ブトキシカルボニルアリルグリシン−〇−ｔ−ブ
チルジメチルシリルーＬ−スレオニン（１，３，ｌの塩
化メチレン溶液（８ｍｌ）に、ジピリジルスルフィド（
４４０ｍｇ）次いでトリフェニルホスフィン（６２９ｍ
ｒ）　ヲ加え、室温下４時間攪拌した。溶媒を減圧留去
したのちカラムクロマトグラフィーに付しくエーテル／
ヘキサン−２／３）Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニルアリル
グリシン−〇−ｔ−ブチルジメチルシリルスレオニンチ
オピリジルエステル８４２ｍ？Ｃ収率８２％）を淡黄色
油状物として得た。

性状：淡黄色油状物質 ＮＭＲスはクトル（６０ＭＨ２，ＣＤＣｌ３．　δ）ニ
ー−０，０４（３Ｈ，θ）、０．０２　（３Ｈ，ａｌ　
ｔ　　０．８５（９Ｈ，ＳＬ　　１．１１　（３Ｈ，ａ
、Ｊ−７，０Ｈｚ）。

１．４０（９Ｈ，ｅ）、２．５８（２Ｈ，ｍ）、４．０
−０−６０（７Ｈ１，６６〜８．６（５Ｈ２ｍ）。

参考例３ （２３，３Ｒ）−４−（４−ｔ−ブチルジメチルシリロ
キシフェニル）−３−（２−テトラヒト５０ピラニル）
オキシ−２−Ｎ−ｔ−ブトキシカルボ５ルアミノ酪酸−
２−ピリジルチオールエステル（２３，３Ｒ）−４−（
４−ｔ−ブチルジメチルシリロキシフェニル）−３−（
２−テトラヒト５０ピラニル）オキシ−２−Ｎ−ｔ−ブ
トキシカルボニルアミノ酪Ｈ１，ｏ３ｇを無水ジクロロ
メタン１０ｍＪＫとかし、トリフェニルホスフィン９５
４ｍ９、ジピリジルスルフィド７１２〜を加え窒素気流
下４０℃で８．５時間、室温で１４時間攪拌した。反応
液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付
しヘキサン：エーテル（１：１）で溶出し標記化合物８
４６ｍｆ（収率６９％）を得た。

性状：油状物質 ＩＨスはクトル（フィルム、ｃｍ　　）：３４５０゜？
　ス、ｘ、−？クトル（ｍ／ｚ）：　４６４ＮＭＲスに
クトル（ＣＤ（Ｊ３．　　δＣ０，１６（６Ｈ，日）。

０．９６（９Ｈ，θ）、１．５４（９Ｈ，ｓ）、６．７
４および７０６（各２Ｈ，ｄ、　Ｊ−８Ｈ２）、　　７
．２４　（ＩＨ。

ｍ）、７．４４〜７．８０（２Ｈ，ｍ）、８．５２（Ｉ
Ｈ。

ｍ）。

（発明の効果） 本発明の方法を用いることにより　ｏプチドを合成する
ことができる。この方法の特徴は有機溶媒を用いること
であシ、可溶化できる溶媒があれば理論上はどんな高分
子のペプチドも合成できると考えられる。本発明の方法
によシ得られるペプチドはホルモン、農薬、食品等巾広
い分野で応用できる基本的物質なので、該ペプチドを効
率よく生成できる本発明の方法は当分野に稗益するとこ
ろ大であろう。

（外５名）

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）一般式（１） ▲数式、化学式、表等があります▼（１） 〔式中Ｒ＾１は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基
   、炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７
   〜９のアルアルキル基、保護または無保護の水酸基で置
   換された炭素数１〜６のアルキル基、保護または無保護
   の水酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、
   低級アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキ
   ル基、保護または無保護のチオール基で置換された炭素
   数１〜４のアルキル基またはインドリルメチル基を表わ
   し、 Ｒ＾２は水素原子、アミノ基の保護基または基▲数式、
   化学式、表等があります▼ （ここでＲ＾１は前記と同一意義を表わし、Ｒ＾４は水
   素原子またはアミノ基の保護基を表わす）を表わし、 Ｒ＾３は水素原子または低級アルキル基を表わす〕を有
   するペプチドを製造する方法であつて、一般式（２） ▲数式、化学式、表等があります▼（２） （式中Ｒ＾５は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基
   、炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７
   〜９のアルアルキル基、保護または無保護の水酸基で置
   換された炭素数１〜６のアルキル基、保護または無保護
   の水酸基で置換された炭素数７〜９のアルアルキル基、
   低級アルキルチオ基で置換された炭素数２〜６のアルキ
   ル基、保護されたチオール基で置換された炭素数１〜４
   のアルキル基またはインドリルメチル基を表わす）を有
   するα−アミノ酸をトリアルキルシリルイミダゾールと
   反応させ、次いで一般式（３） ▲数式、化学式、表等があります▼（３） 〔式中Ｒ＾６は水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基
   、炭素数２〜６のアルケニル基、フェニル基、炭素数７
   〜９のアルアルキル基、保護された水酸基で置換された
   炭素数１〜６のアルキル基、保護された水酸基で置換さ
   れた炭素数７〜９のアルアルキル基、低級アルキルチオ
   基で置換された炭素数２〜６のアルキル基、保護された
   チオール基で置換された炭素数１〜４のアルキル基また
   はインドリルメチル基を表わし、 Ｒ＾７はアミノ基の保護基または基 ▲数式、化学式、表等があります▼ （ここでＲ＾６は前記と同一意義を表わし、Ｒ＾８はア
   ミノ基の保護基を表わす〕 を有する活性エステル化合物を有機溶媒中反応させるか
   、反応させたのち脱保護するか、又は反応させたのちア
   ルキル化することを特徴とする方法。
2. （２）トリアルキルシリルイミダゾールがｔ−ブチルジ
   メチルシリルイミダゾール、トリメチルシリルイミダゾ
   ール、トリエチルシリルイミダゾール、ジメチルフェニ
   ルシリルイミダゾールまたはｔ−ブチルジフェニルシリ
   ルイミダゾールである特許請求の範囲第１項記載の方法
   。
3. （３）ペプチド形成反応に用いられる溶媒がアミド系溶
   媒、エーテル系溶媒または塩素系溶媒である特許請求の
   範囲第１項記載の方法。
4. （４）ペプチド形成方法における反応温度が３０〜０℃
   である特許請求の範囲第１項記載の方法。
5. （５）反応に用いられるトリアルキルシリルイミダゾー
   ルの量が前記式（２）のα−アミノ酸基に対し１〜２当
   量である特許請求の範囲第１項記載の方法。
6. （６）前記式（２）および（３）が光学活性体である特
   許請求の範囲第１項記載の方法。
7. （７）前記式（１）が光学活性体である特許請求の範囲
   第１項記載の方法。