JPS6270376A - ジスルフイド化合物及び抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 一輩】上の利用外野一 本発明は抗菌活性、抗腫瘍活性を有する新規マイトマイ
シン誘導体および抗腫瘍剤に関する。

従来の技術および問題点 マイトマイシン類は抗菌活性、抗腫瘍活性を有する抗生
物質として一般に知られている。代表的なマイトマイシ
ン類としてはマイトマイシンＡ。

Ｒ，Ｃ，、ｔ！ルフィロマイシン（以下はメルクインデ
ックス第１０版に記載されている。）、マイトマイシン
Ｄ、Ｅ（以上は特開昭５４−１２２７９７　）に記載さ
れている。）、マイトマイシンＦおよび、■（特開昭５
５−４５３２２に記載されている。）等がある。

これらはストレプトマイセス・ケスピトーサスの菌株を
培養することにより得ることができる。

マイトマイシン類は優れた抗腫瘍活性を有するが、一方
では白血球の減少等の副作用も有することから、活性の
増強あるいは毒性の軽減を目的として多数の誘導体が合
成されてきている。

これらのマイトマイシン誘導体の中で、７位のアミノ基
が修飾されたものとしては７位のアミノ基が修飾された
マイトマイシンＣおよびポルフィロマイシンの誘導体が
あり、例えば特開昭５６−９２２８８、特開昭５７−１
８８５９０　、　Ｊ、　Ｍｅｄ。

Ｃｈｅｍ、、　　２４．９７５〜９８Ｎ１９８１）、　
ＪｌＭｅｄ、Ｃｈｅｍ、。

２６、１６〜２０（１９８３）、　Ｊ０Ｍｅｄ’、　Ｃ
ｈｅｍ、、　２６．１４５３〜１４５７　（１９８３）
などにその例が報告されている。また、これらの文献に
は７位のアミノ基が修飾されたマイトマイシン誘導体は
生体＃月ごおいても抗腫瘍活性を示すことも記載されて
る。７位のアミン基が修飾されたマイトマイシン誘導体
の中からさらに本発明と関係の深いものを挙げると、７
位の置換基が２−チアゾールアミノ基、２−チェニルメ
チルアミノ基、（４−スルホンアミドフェニル）メチル
アミノ基であるマイトマイシン誘導体く以上は特開昭５
６−９２２８８に記載されている。）、２−メルカプト
エチルアミノ基、２−エチルチオエチルアミノ基、チオ
モルホリノ基、チアゾリジル基、４−メルカプトアニリ
ノ基、２−（４−メチルチアゾリル）アミノ基、２−（
５−メチル−１，３゜４−チアジアゾリル）アミノ基、
４−（２，’１゜３−ベンゾチアジアゾリル）アミン基
であるマイトマイシン誘導体（以上は特開昭５７−１８
８５９０に記載されている。）、７位に−ＮＩＩＣＨ２
ＣＨ２ＳＳ［：Ｈ２Ｃ８２ＮＩＩ　−で表される基を有
するマイトマイシン誘導体、例えば７−Ｎ、７′−Ｎ’
−ジチオジエチレンシマイトマイシンＣ，７−Ｎ、７′
−Ｎ’−ジチオジエチレンシマイトマイシンＤ等（特開
昭５９−１０４３８６　）がある。また本特許により関
係の深いものを挙げると７位の置換基がＲ３５（ＣＨ２
）２ＮＨ−で表されるマイトマイシン誘導体があり、例
えば、Ｒがアルキル、置換アルキル基である７−Ｎ−プ
ロピルジチオエチルマイトマイシンＣ，７−Ｎ−メトキ
シカルボニルメチルジチオエチルマイトマイシンＣ，’
７−Ｎ−（２−（２−ヒドロキシエチルジチオ）エチル
〕マイトマイシンＤ等（特願昭５９−１７５４９３＞、
　Ｒが置換基を有する芳香環からなる、例えば、’１−
Ｎ−［２−（４−アセトアミドフェニルジチオ）エチル
コマイトマイシンＣ（特開昭５９−１７５４９３）、　
　７−Ｎ　−（２−、（４−フルオロフェニルジチオ）
エチルコマイトマイシンＣ（特願昭昭５９−１１２４２
８　’）　、　　さらにＲがチオール基を含むアミノ酸
の残基または、該アミノ酸の残基を含むペプチドで表さ
れる、例えば’１−Ｎ−Ｃ２−（（Ｌ−システィン−８
−イル）チオ〕エチル］マイトマイシンＤ、７−Ｎ−［
２−（（グリシノ−Ｌ−システィン−８−イル）チオ〕
エチル］マイトマイシンＣ等（特願昭５９−１１２４２
８）がある。

特にＲ３５（ＣＨ２）２ＮＨを７位に有するマイトマイ
シン誘導体で特記すべきことは、Ｒ−３Ｓ−ａｌｋ２を
有するマイトマイシンＣの誘導体く特開昭５９−２０５
３８２　）であり、記載されているＲは上記の特開昭５
９１７５４９３と重複する部分を有するものである。ま
た製法上、ＲＳ、Ｓ　　ａｌｋ２−ＮＦ２と７位がアミ
ノ基に容易に置換されうる置換基、例えば、７位にメト
キシ基を有するマイトイシン等と反応させるためのＲＳ
Ｓ　　ａｌｋｚ−Ｎ　Ｈ２も開示し、さらにＲ−３Ｓ　
　ａ　Ｉ　ｋ２．　ＮＦ２の原料となるＲ−３Ｈも開示
している。しかしながら、該特開昭５９−２０５３８２
ではＲ−３Ｓ−ａｌｋ。

−ＮＦ２のａｌｋ、は任意な置換基を有し、炭素原子２
から６の直鎮または分岐鎖アルキレン基を表すとしなが
ら、ａ　］　ｋ２として具体的に例示されているものは
ジメチレン鎖（−ＣＨ２ＣＨ２−）　　に限定されてい
る。一般的な記載中に原料としてａｌｋ２がへキサメチ
レンである６−〔（シクロプロピル）メチルジチオ〕ヘ
キシルアミンがあげられているが、これを用いて目的化
合物をつくった実例は報告されていない。

より優れた性質を有するマイトマイシン誘導体が求めら
れている。先の特開昭５９１０４３８６と特願昭６０−
７６０４７に明示されたマイトマイシン誘導体の対比か
ら明らかなように、硫黄原子とマイトマイシンの７位の
窒素原子との間に存在するメチレン鎖が生物活性、特に
抗腫瘍活性に大きく影響を及ぼすことを発見し、詳細に
研究を進めより優れた抗腫瘍活性を有する化合物、副作
用の軽減した化合物、さらには製剤上優利な水溶性をも
持ち合わせたマイトマイシン誘導体を得るに至った。

問題点を解決するための手段 本発明の優れた抗菌、抗腫瘍活性を有するマイトマイシ
ン誘導体は以下の式（１）で表される。

（式中、Ｘは炭素数１から７　（Ｉ）γ７１キル斌、炭
素数：）から７０）／クローどルキル基（該アルキルＪ
ｉ（またはンタＹ］アルキル括は１かｔ）１３個の水酸
１８（，１個のアミン基または１個の低級アルカノイル
アミノ基でｉ７Ｉ′換されでいてもよい）、ビルシル基
、式　［ｔ・−〈す４≧−（式中、Ｒａ〜［ぐ・は水素
原子、Ｒ６１７、 低級アルキル基、水酸基、低級アルコキシル基、ニトロ
基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、低級ｒルカノイ
ルアミ７基またはハロゲン原子である。）で表される＋
＋（、またはチ」−ル基を有するアミノ酸または該アミ
ノ酸゛目格４含むジペプチドもしくはトリペプチドの−
ｙ：４−ル基を除く残基である。Ｉ゛記のアミノ酸、ジ
ペプチドお３上びトリペプチドはそのカルボキシル基が
低級アルキルエステル基として、および／またはぞのア
ミノ基が低級アルカノイル基に３Ｌって保護されていて
もよく、また該カルボキシル基はアルカリ金属塩、アン
モニウト塩または有機アミン付加塩を形成していでもよ
い。ｎは３から８の整数４表す。Ｒ１お３１びＲ２は水
素原子Ｊ［たは−ＣＩ”１２０　ＣＯＮ　Ｈ２である。

ＹおよびＺは水素原子１またはメヂル基である。〕［以
下化合物（Ｉ）という。、他の大番号の化合物について
も同様〕。

一般式（１）のＸの定義中、炭素数１から７０）アルキ
ル基は直鎖状でも分岐状でもよく、メチル、エチル、ｎ
−ブｌ］ピル、ｌ−プロピル、Ｔ１−ブチル、Ｓ−ブチ
ノペ　ｔ−ブチル等を包含する。炭素数３から７のシク
ロアルキル基はシクロペンチル、シクロアキル等を包含
するこれらのアルキル、シクロアルキル基の置換基とし
ての低級アルカノイルアミノは炭素数１から３のもの、
例えばアセトアミド等を包含する。該置換アルキル、置
換シクロアルキルの例としては２−ヒドロキシエチル、
３−１ニトロキシプロピル ロピル、２−アミノエチル、３−アミノプロピル、４−
了ミノブチル、２−アセト了ミドエチル、４−ヒト［］
キシシクロヘキシル等があげられる。

ピリジルとしては２−ピリジル、４−ピリジル等が例示
される。

低級アルキル基は炭素数１から５の直鎖状または分岐状
のアルキル基、例えばメチノベエチル、１−プロピノベ
ｎーブチル、ｎ−ペンチル等、低級アルコキシ基は炭素
数１から３のアルコキン基、例えば、メトキン、工ｌ・
キン、ｌ−プロポキシ等、低級アルキルア（）基は炭素
数１から３のアルキルアミノ基、例えばメヂルアミノ、
エチルアミン等、低級アルカノイルアミノ基は炭素数１
から３のもの、例えばホル１３アミド、アセトアミド、
ｒｌプロピ」〉′アミド等、ハロゲン原子はフッ素、塩
素、臭素等を包含ずろ．、Ｒ３からＲ１の組合せについ
て好適なものは、Ｌ？．３からＲ７の１つまたは２つが
同一・もしくは異なった低級アルキル基、水酸基、低級
アルコキシ基、ニトロ基、アミノ基、低級アルキルアミ
ノ基または低級アルカノイルアミノ基であり、他が水素
原子であるか、Ｒ３からＲ７　０）１．　””’　５が
ハ■】ゲン原子で＋ｔｂが水素原子であＲ覧７Ｒ・ フェニル、３−アミノフェニル、４−アミノフェニル、
３，４−ジアミノフェニル、２−アセトアミドフェニル
、３−アセトアミドフェ！．ノベ４ーアセトアミドフェ
ニル、４−アセトアミド−３−アミンフェニル、３−ア
セトアミド−４−アミノフェニル、４−二トＬ】フェニ
ル、２−メトキシフェニル、３−メトキシフェニル、４
−メトキシフェニル、４−エトキシフェニル、４−メチ
ルフェニル、４−エチルフェニル、２−クロロフェニル
、４−クロロフェニル、２−フｒ］モフェニル、４−ブ
ロモフェニル、４−フルオロフェニノヘ２．５ージクロ
ロフェニル、２．６−ジクロ［］フェニル、３。

４−ジクロロフェ！−ル、２，　４．　５　−　）リク
Ｖ１０フェニル、２，　ｌ’ｌ，　５．　６−チトラフ
ルオロフエニル、４−ヒトｒ７キンフエニル、３．４−
ジヒドＶ１キンフェニル等が挙げられろ。

Ｘの定義に関して、チ」−ル基を有するアミノ酸または
該アミノ酸の残基を含むジペプチドもしくはトリペプチ
ドはシスティン、ホモシスティン、ペニシラミン、アス
パラキンシステイン、グリシノシスティン、グリシノシ
スティン、フェニルアラニノシステイン、チロジノシス
ティン、グルタチオン等を包含する。これらのアミノ酸
またはアミノ酸残基の立体配置はり，Ｄ，ＤＬのいずれ
であってもよい。これらのアミノ酸、ジペプチド、トリ
ペプチドのカルボキシル基は低級アルキルエステル基と
して保護されていてもよく、その低級アルキル基はメチ
ル、エチル基を包含し、またアミノ基の保護のための低
級アルカノイル基は炭素数１から３のアルカノイル基、
例えばホルミル、アセチル等を包含する。また該カルボ
キシル基と塩を形成するアルカリ金属はナトリウム、カ
ワウム等を、有機アミンはトリエチルアミン、ピリジン
等を包含する。

次に化合物Ｎ）の製造法について説明する。

化合物（１）中、式（１−１） （式中、ｎ、Ｒ＋　　、Ｒ２、ＹおよびＺは前記と同義
である。）で表される化合物は式（ＩＴ）（式中、Ｒ，
、Ｒ２，ＹおよびＺは前記と同義である。）で表される
化合物と （式中、ｎは前記と同義である。）で表される化合物も
しくはその酸付加塩とを不活性溶媒中〔化合物（■）の
酸付加塩を用いるときは塩基性条件下〕反応させること
により製造することができる。

用いる不活性溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメ
タン、メタノール、エタノール、イソプロパノーノペア
セトニトリル等を単独もしくは混合して用いることがで
きる。用いる化合物（ＴＩＴ）が酸付加塩を形成してい
る場合は中和するために塩基が必要となり、塩基として
はトリエチルアミン、ピリジン等の有機塩基が適当であ
り、塩基の量としては用いる化合物（Ｉ）の酸付加塩の
２倍当量以上を反応系に加えるのが好ましい。反応温度
、反応時間は化合物（ＩＴＪ）あるいは用いる溶媒によ
って異なるが、通常０℃から３０℃の範囲で数時間から
数日でよい。

化合物（Ｉ）中、式（Ｉ−２） （式中、Ｘ′は式（Ｉ）における２−ピリジル基を除く
Ｘと同義であり、ｎ、Ｒ，、Ｒ２，ＹおよびＺは前記と
同義である。）で表される化合物は化合物Ｎ−１）と式
（ＴＶ） Ｘ’−３Ｈ（ＴＶ） （式化、Ｘ′は前記と同義である。）で表される化合物
とを不活性溶媒中反応させることにより製造することが
できる。

反応に用いられる溶媒はクロロホルム、ジクロロメタン
等のハロゲン化低級アルカン、メタノール、エタノール
、イソプロパツール等の低級アルカノール、アセトニト
リル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、
水等を包含し、これらは単独もしくは混合して用いられ
る。反応温度、反応時間は化合物（］’Ｖ）によって異
なるが、通常０℃から３０℃の範囲で、数分から数時間
でよい。

化合物（Ｉ−１）および（ＩＩ）の製造における後処理
は反応生成物の溶解性によって異なるが、生成物が水に
不溶性または離溶性の場合には反応液をそのまま減圧下
で濃縮するか、またはクロロホルムもしくは酢酸エチル
で抽出し、抽出液を濃縮してから精製する。生成物が水
溶性の場合にはそのまま精製工程へ進めるか、または反
応液にクロロホルムあるいは酢酸エチルを加えた後、水
で抽出し、水層を減圧下で濃縮した後に精製工程に進め
る。いずれの場合にも精製はカラムクロマトグラフィー
、薄層クロマトグラフィーあるいは再結晶法等で行われ
る。上記の方法は特開昭５９−１０４３８６、特開昭５
９−１７５４９３および特願昭５９（１２４２８に記載
されている。

化合物（Ｉ）は一般に優れた抗菌活性、抗腫瘍性を有す
る一方、急性毒性、骨髄毒性が式（１）でｎ＝２の化合
物に比べ大幅に減じている。この効果は化合物Ｎ）でｎ
＝４〜８の化合物において特に顕著である。化合物（１
）中、もっとも優れた化合物は、式（Ｉ）でＸがチオー
ル基を有するアミノ酸または該アミノ酸の残基を含むジ
ペプチドもしくはトリペプチドのチオール基を除く残基
である化合物、好ましくはｎ＝４〜８、特にｎ＝５〜８
の化合物である。すなわち、これらの化合物は化学療法
係数（ＣＩ値）において、同系統のｎ＝２の化合物に比
べ優れている一方、骨髄毒性が大巾に減じている。さら
にｘり（チオール基を有するアミノ酸または該アミノ酸
の残基を含むジペプチドもしくはトリペプチドのチオー
ル基を除（残基である化合物（Ｉ）は水溶性に優れてい
る。

上記から明らかなごとく、本発明はまた化合物（Ｉ）を
含有してなる抗腫瘍剤に関する。すなわち化合物（Ｉ）
は１回あたり０．０６　ｍｇ　〜５　ｍｇ／　ｋｇの投
与量で生理食塩水、ブドウ糖、ラクトース、マンニット
注射液に溶解して静脈内に投与すればよい。また日本薬
局法に基づいて凍結乾燥してもよい。さらに医薬品的用
途を満たした塩類のようなよく知られた薬学的に許容さ
れている稀釈剤、補助剤および／または担体を含んでい
てもよい。

投り、＠は年令やｊｉ’Ｔ、状により適宜増減できろ。

投！ｊスケジュールも投１］量に、Ｌ−１て変えること
ができろが、例えば門１回、１３門聞１．＝１回の間歇
投与がイえられる。また同様の投ＩｊＭで経［１的に投
与することができろ３．経１１投与に際しては適当な賦
形剤と共に、錠剤、粉剤、粒剤として投与できる。

さらに動脈内投写、腹腔内股５１、胸腔内股５もｉｉ■
鮨である。

実施例 以下の実施例で示される物理化学的データは次の機器類
に３Ｌっで測定された。

■ｌり　　島津ＩＩＮ’−Ｇ−２７（ＫＢｒ法によって
測定。）Ｎ　Ｍ　Ｒ１本型ＴＦＸ−１００（１００Ｍ１
ｌｚ）、ブルーカーＡＭ４０　［］　（４（］　ＯＭｔ
（ｚ）。

ＭＳＲ立ｒ（８［＋（ＳＩ　　ＭＳ法によろ測定）。

Ｌ（、Ｐ、　　杓１１本ミク工」融点測定型（熱板１５
式）。

”Ｉ”　１．　ＣメルクΔ８工５７１４　　（シリカゲ
ルプレート）、。

実施例で示される化合物の構造は第１表および第２表に
示す通りである。

化合物１〜５ 第１表　化合物（＋　−１）の代表例 化合物６〜１７ 第２表　化合物（１−２）の代表例 実施例１．　　７−Ｎ−［３−、−（２−ピリジルジチ
オ）プロピル〕マイトマインンＣ（化合物１）マイトマ
イシン△］、ｎ１８ｇとトリエチルアミン１．６３ｍ１
をＩＦｉｍｌのメタノールに溶解し、粗３−　（２−ピ
リジルジチオ）プロピルアミン・２塩酸塩（参考例−川
を参照＞　７９７ｍｇのメタノール１０ｍ１溶液を滴下
［７氷冷下攪拌１７た。２．５時間後にマイトマイシン
Ａを５２ｍｇ加え、冷室内に一夜放置した。反応液を飽
和重曹水に注入し、酢酸エチルで抽出（１００ｍｌ　Ｘ
　３）　　Ｌ、抽出液を水、飽和食塩水で洗浄し、無水
芒硝で乾燥（７た。乾燥剤を／ｌ″ｊ別後、溶媒を減圧
留去した。残渣を少Ｍのクロロポルノ、に溶解し、シリ
ノＪゲルカラムクＩ］マドグラフィー（１５０ｇ、クロ
ロホルｌ、；メタノール−９６：４）にかけ、ンリカゲ
ル薄層りロマトクラフィー（クロロホルｌ、：メタノー
ルー９：１）でＲｆＯ，３５を示す青色画分を集ｙ〕だ
。溶媒を減圧留去し、ｎ−ヘキサンークロロホルムより
粉末化することにより、濃青紫色粉末として５２４ｍｇ
　（３４，７％）の化合物ｌを得た。

実施例２〜５ 実施例１と同様な操作により化合物２〜５が合成された
。化合物１〜５の原料、収率、ＩＪ、Ｐ、およびＭＳを
第３表に、Ｉ　ｌ、！およびＮＭＲデータを第４表にそ
れぞれ示した。

実施例６．　７−Ｎ−［３−Ｃ（４−アセトアミドフェ
ニル）ジチオ〕プロピル］マイトマイシンＣ（化合物６
） １４９ｍｇの化合物１を３ｍｌのメタノールに溶解し、
水冷攪拌下、４−アセトアミドチオフェノール４８ｍｇ
を加え２０分間攪拌した。溶媒を減圧留去後、残渣を少
量のクロロホルムに溶解し、シリカゲルカラムクロマト
グラフィー（４０ｇ、クロロホルム：メタノール−９３
＋７）にかけ、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（ク
ロロホルム：メタノール−９：１）でＲｆ　０．４６の
青色画分を集めた。溶媒を減圧留去後、η〜ヘキサンー
クロロホルムより粉末化することにより、ａ緑青色の粉
末として１５０ｍｇ（９９％）の化合物６を得た。

実施例７．　７−Ｎ−［３−［：（２−アセトアミドエ
チル）ジチオ〕プロピル］マイトマイシンＤ（化合物９
） １０、３　ｍｇの化合物２を１ｍｌのメタノールに溶解
し、４．２μＱのトリエチルアミンを加えた。室温攪拌
下、２−アセチルチオエチルアミン・塩酸塩３．１ｍｇ
を加え１時間攪拌した。反応液を酢酸エチルで稀釈し、
重曹水で洗浄した。酢酸エチル層を水洗後、無水芒硝で
乾燥した。乾燥剤を沖別後、溶媒を減圧留去し、残渣を
少量のクロロホルムに溶解し、シリカゲル薄層クロマト
グラフィー（クロロホルム：メタノール−９：１）にか
け、Ｒｆ　０．２３の青緑色画分をかきとり、同一の溶
媒で溶出した。溶出液を減圧乾固し、η−ヘキサンーク
ロロホルムより粉末化することにより、濃緑色粉末とし
て７．Ｏｍｇ（６６％）の化合物９を得た。

実施例８．　　’１−Ｎ−〔４＝（２，３−ジヒドロキ
シプロピルジチオ）ブチルシマイトマイシンＣ（化合物
１３） ９１ｍｇの化合物３と３６μＱの３−メルカプト−１，
２−プロパンジオールを用い、実施例６と同様の操作の
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（２５ｇ、ク
ロロホルム：メタノール＝９　：　１）にかけ、シリカ
ゲル薄層クロマトグラフィー（同一溶媒）でＲｆ　Ｏ，
２６を示す青色画分を集めた。

溶媒を減圧濃縮後、ｎ−ヘキサン−クロロホルム−アセ
トンより粉末化することにより、濃青色の粉末として７
９ｎ＋ｇ（８７％）の化合物１３を得た。

実施例９．　７−Ｎ−［５−（（グリシノ−Ｌ−システ
ィン−８−イル）チオ〕ペンチル］マイトマイシンＣ（
化合物１５） ３０１ｍｇの化合物４を５ｍｌのメタノールに溶解し、
水浴中で攪拌し、９５ｍｇのし一システイニルグリシン
を加え１５分間攪拌した。４０ｍ１の水を加え、５０１
Ｔｌ］の三菱ダイヤイオンＨＰ２Ｄを担体とするカラム
に吸着させた。カラムを水洗後、水−メタノール（１６
）で溶出する青色画分を集め、減圧下に濃縮し、濃縮液
を凍結乾燥することにより濃青紫色粉末きして２０８ｍ
ｇ（６４％）の化合物１５を得た。

実施例１ｆ）〜１６ 実施例６〜９のいずれかと同様の操作により化合物７．
８．１０〜１２．１４．１６が合成された。化合物６〜
１６の原料および試薬量、外観、収率、Ｍ、　Ｐ。

およびＭＳデータを第５表に、ＴＲおよびＮＭＲデータ
を第６表に示した。

実施例１７ 本発明に含まれる化合物（Ｈの中からいくつかの化合物
４例にと−３て第７表に抗ｒ＜＋　７１ζＩＩ−を最少
生育用１１．ａ度（μｇ／ｍ］　）　テ示ず３、最小ｔ
１育阻１１・濃度は寒天稀釈法によりｐ　１１７．０で
測定した１１表中、細菌に対して用いられている記号は
次の意■ｔを示す。

丁３Ｓ　バチルス・ズブチリス＋０７０７゜ＰＶ　　プ
ロテウス・ブルガリスＡＴＣＣ６８９７゜第７表　抗菌
活性（最小生育ＦｆｂｔＪｔ度、μｇ／ｍ１）実施例１
８゜ 勺刀コーマ１８０固型腫瘍に対ずろ抗腫瘍２．Ｉ；性お
よび毒性、。

本発明に含まねる化合物（１）の中からいくつかの化合
物を例にとり、→Ｊル二】−７１８０固型腫瘍に対する
抗腫瘍活性（ＲＯ６゜）と急性毒性（［，１］５ｏ）お
よび末梢白血球に対する影響（ＷＢＣ４０００）を第８
表に示す。

ＷＢＣ４［］０（１は末梢白血球Ｇ４　［１００７ｍｍ
”に減少させる薬物の投与量を表す。

表中のＣＩは化学療法係数（Ｃｂｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ
　Ｉｎｄｅｘ）でありＣＩ　＝　１．丁）ｓｏ　／　Ｅ
　Ｄｓｏで求められろ。、二の定義から明らかなように
ＣＩ値は腫瘍に対する選択毒性を反映するものであり、
ＣＩ値が大きいほど抗腫瘍剤としてはすぐれているし、
また臨床上では薬物の投与量の許容範囲が広くなるとい
うことにもなり、抗腫瘍剤の評価においては最も重要な
指標の一つである。

また第８表には参照化合物（既に公開あるいは出願され
ているメチレン鎖が２個、すなわちｎ＝２に相当する以
下の３化合物）の抗腫瘍活性等のデータもあわせ示す。

これらの化合物は第２表の表示に従うと次のごとく表さ
れる。

化合物　　　Ｘ　　　　　　　ｎ　　　Ｒ，Ｒ２Ｙ　　
　２Ａ　　［”１１３［ｌｌＮ１１　　＜、６＞−２ａ
　　　Ｉｆ　　　Ｍｅ　　ＩＩト３　　１１ｆｌｃ１１
　、ＣＩＩ（［１１１）［：Ｉｔ、　−２ａ　　　　Ｉ
Ｉ　　　　〜に、　　　Ｉｔ（〕１１［ＩＪ：［’１ｔ
ＬＮｆｌｆｌ［Ｉ［１ｌＣｌｈ　　　　２　　　　ａ　
　　　Ｉｆ　　　　Ｍ［！　　　Ｉｆａ　　：　　ｆｌ
ｌｌ。［］ｆ：ｆｌＮｌｌ。

化合物Δ、［（は特開昭５　！］　−１７５４９３に、
化合物Ｃは特願昭５９−１１２４２８にそれぞれ具体的
に開示されている。

第８表　抗腫瘍活性および毒性 化合物８．１５．１６は化合物Ｃとｎが異なるだけで、
丁１はそれぞれ３．５．６である。化合物７，１３は化
合物Ｂと１１が異なるだけで、ｎはそれぞれ３゜４であ
る。化合物１２は化合物Ａとｎが異なるだけでｎは４で
ある。

第８表から化合物８．１５．１６の群では対照化合物に
比べＣＩ値、ＷＢＣ４ｎｏｏとも犬［ＩＪに増大しでい
ることが分る。また化合物７，１３の群でも対照化合物
に比べ、ＷＢＣ＜ｏｏｏが大巾に増大し、化合物１３で
はＣＩ値も増大し、化合物１２は化合物Δに比べＷＢＣ
４ＱＯＯが増大している。

実験は以下の方法により行われた。

（１）サルコーマ１８０固型腫瘍に対する効果５　Ｘ　
１０６個のザルコーマ１８０細胞をｄｄｙマウスの腹腔
内に移植し、７目目の腹水から細胞を採取し、滅菌生理
食塩水で１回洗浄後、滅菌生理食塩水で５　Ｘ　１０７
個／ｍｌの細胞浮遊液を作製した。このＯ，］、ｍｌを
体重２ｏ±２ｇのｄｄｙ雄性マウスの右腋窩部皮下に移
植した。

薬剤は、生理食塩水、またはツイーン８ｏ含有生理食塩
水に溶解し、腫瘍移植後２４時間目に１群５匹のマウス
尾静脈より０．１〜０．２ｍｌを投与した。薬剤の抗腫
瘍活性の測定は、移植後７日目に腫瘍の長径（ａ）　　
と短径（ｂ）を測定し、腫瘍体積に相当するａｘｂ２／
２の値を求めた。

対照群（Ｃ）に対する薬物投与群（Ｔ）の体積比（Ｔ／
Ｃ）によって抗腫瘍効果をあられした。

（２）　　ＥＤ５０の求め方 サルコーマ１８０固型腫瘍体積を非投与対照群の腫瘍体
積の５０％に低下させる投与量をＥＤｓｏとした。縦軸
に通常目盛でＴ／Ｃ１横軸に対数目盛で投４１を表した
グラフに、各投与量におけるＴ／Ｃをプロットし、投与
量とＴ／Ｃの関係を最小二乗法により直線としてもとめ
た。得られた直線の回帰式より、Ｔ／Ｃが０．５を示す
投与量を計算した。

（３）急性毒性 ＬＤｓｏはｄｄｙマウスに薬剤を１回腹腔内に投与し、
１群５匹のマウスの投与後１４日間の生死を観察し、各
投与群の死亡率より、ベーレンス・ケルバー法に従いＬ
Ｄｓｏを算出した。

（４）末梢白血球数に対する影響 ５×１０６個のサルコーマ１８０細胞を１群５匹の体重
２０±２ｇのｄｄｙ雄性マウスの右腋窩皮下部に移植し
、２４時間後に薬剤を腹腔内に投与した。薬物投与後４
日目に担癌マウスの眼窩静脈数より血液を０．０２ｍ１
採取し、９．９８ｍ１のセルキットセブン液に分散させ
た。サポニン液を１滴加え赤血球を溶解させた後、ミク
ロセルカウンターで白血球数を測定した。縦軸に通常目
盛で末梢白血球数を、横軸に対数目盛で投与量を示した
グラフに各投与量における白血球数をプロットし、投与
量と末梢白血球数の関係をもとめ、末梢白血球数４００
０／ｍｍ３　（正常マウスにおける末梢白血球数のほぼ
１／２の数）を与える投与量をＷＢＣ，。。。とじた。

参考例１．３−（２−ピリジルジチオ）プロピルアミン
・２塩酸塩の合成 ３．３′−ジチオジプロピルアミン・２塩酸塩１０、１
　ｇを４　Ｑｍｌの水に溶解した後、３０％過酸化水素
水１２．Ｑｍｌを加え、室温にて３日間放置した。溶媒
を減圧下で除去し、水・エタノールより結晶化すること
により、３−アミノプロピル−３′−アミノプロパンチ
オールスルホナート・２塩酸塩２．５０　ｇを得た。以
下の反応に用いる時は、上記反応液をそのまま凍結乾燥
して得られる粗３−アミノプロピルー３７−アミツプロ
パンチオールスルホナート・２塩酸塩でよい。粗３−ア
ミノプロピルー３′−アミノプロパンチオールスルホナ
ート・２塩酸塩３．２５　ｇを１６．８ｍｌの水と９．
５ｍｌのエタノールに溶解し、濃塩酸１．１４ｍ１を加
えた。１．２７ｇの２−メルカプトピリジンを加え室温
にて３日間攪拌した。エタノールを減圧留去し、５０ｍ
１の水を加え水溶液をクロロホルム抽出（５０ｍｌｘ３
）した。水溶液に水冷下、水酸化カリウム３．２ｇを加
え、クロロホルム抽出（５０ｍｌＸ３）Ｌ、直ちに集め
たクロロホルム層を濃塩酸で逆抽出（３０ｍｌｘ３）し
、塩酸溶液を減圧下濃縮乾固し、少量の水を加え、凍結
乾燥することにより淡黄色の粗３−（２−ピリジルジチ
オ）プロピルアミン・２塩酸塩１．６７　ｇを得た。

４−（２−ピリジルジチオ）ブチルアミン・２塩酸塩、
５−（２−ピリジルジチオ）ペンチルアミン・２塩酸塩
および６−（２−ピリジルジチオ）ヘキシルアミン・２
塩酸塩はそれぞれ４，４′−ジチオジブチルアミン・２
塩酸塩、５．５′−ジチオジペンチルアミン・２塩酸塩
および６，６′−ジチオジブチルアミン・２塩酸塩を原
料として上記と同様の操作により得ることができた。

発明の効果 化合物（１）は優れた抗菌活性および抗腫瘍活性を有し
、抗腫瘍剤として利用され得る。

特許出願人（１０２）協和醗酵工業株式会社手続補正書 昭和６０年　７１月　／、？日 １、事件の表示 昭和６０年特許願第２１０４４２号 ２、発明の名称 ジスルフィド化合物及び抗腫瘍剤 ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 郵便番号　１００ 住　所　　東京都千代田区大手町−丁目６番１号名　称
　（１０２）協和醗酵工業株式会社（１）特許請求の範
囲を別紙のとおり訂正する。

（２）１６頁第１表の下の「化合物６〜１７シ〜ｉンＸ
（３）　］　！ｌ　’ｔＬ第４表中で化合物４の項のＮ
　Ｍ　Ｒの鎖中、１２．ｆｉ　８　（２ｔｌ、　ｍ）　
Ｇ　ｒ７．６８　（２Ｈ。

［ｎ）１に訂１Ｆ：する３、 （４）　　２３　’Ｆｊｆ！　５表中最後（’）　Ｊｌ
’＋　（’　記！ｌ！　（ＩＧ’ｊ　Ｅｌ　カ化合物５
て１１成物が化合物１７である個所の物性値等）を削除
する。。

（５）２７自１行の１×−（をｒ−Ｘ　’−１に訂正す
る。

特許請求の範囲 （１）式 〔式中、Ｘは炭素数１から７のアルキル基、炭素数３か
ら７のシクロアルキル基（該アルキル基またはシクロア
ルキル基は１がら３個の水酸基、１個のアミノ基または
１個の低級アルカノイルア壮υ（で置換されていてもよ
い）、ピル４　　Ｒ３ ：＞、−−−＼ ’；　ｚ１′７４・”　Ｒ＝−″＞Ｏ，、ニー　ば中゛
２・へパ・１寸６１（７ は水素原子・、低級アルキル基、水酸基、低級アルコキ
シ基、ニトロ基、アミノ基、低級アルキルアミノ基、低
級アルカノイルアミノ基またはハロゲン原子である。）
で表される基、またはチオール基を有するアミノ酸また
は該アミノ酸の残基を含むペプチドもしくはトリペプチ
ドのＪオ二ソ１溝を除く残基である。［”記のアミノ酸
、ジペプチドおよびトリペプチドはそのカルボキシル基
が低級アルキルエステル基として、および／またはその
アミン基が低級アルカノイル基によって保護されていで
もよく、また該カルボキシル基はアルカリ金属塩、アン
モニウム塩または有機アミン付加塩を形成していでもよ
い。

ｎは３から８の整数を表ず。Ｒ１および１り、は水素原
子または一自＋２ｏｃＯＮＩＩ、である。ＹおよびＺは
水素原子またはメチル基である。〕で表されるマイトマ
イシン誘導体。

（２）式 ルアミノ基、低級アルカノイルアλノ基または剤。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｘは炭素数１から７のアルキル基、炭素数３か
   ら７のシクロアルキル基（該アルキル基またはシクロア
   ルキル基は１から３個の水酸基、１個のアミノ基または
   １個の低級アルカノイルアミノ基で置換されていてもよ
   い）、ピルジル基、式▲数式、化学式、表等があります
   ▼（式中、Ｒ＿３〜Ｒ＿７は水素原子、低級アルキル基
   、水酸基、低級アルコキシ基、ニトロ基、アミノ基、低
   級アルキルアミノ基、低級アルカノイルアミノ基または
   ハロゲン原子である。）で表される基、またはチオール
   基を有する酸または該アミノ酸の残基を含むペプチドも
   しくはトリペプチドのチオール酸を基を除く残基である
   。上記のアミノ酸、ジペプチドおよびトリペプチドはそ
   のカルボキシル基が低級アルキルエステル基として、お
   よび／またはそのアミノ基が低級アルカノイル基によっ
   て保護されていてもよく、また該カルボキシル基はアル
   カリ金属塩、アンモニウム塩または有機アミン付加塩を
   形成していてもよい。ｎは３から８の整数を表す。Ｒ＿
   １およびＲ＿２は水素原子または−ＣＨ＿２ＯＣＯＮＨ
   ＿２である。ＹおよびＺは水素原子またはメチル基であ
   る。〕で表されるマイトマイシン誘導体〔以下、化合物
   （ I ）という〕。
2. （２）化合物（ I ）を含有してなる抗腫瘍剤。