JP2958902B2

JP2958902B2 - 三つの新規非ポリグルタマートのデアザアミノプテリンと合成方法

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Publication number: JP2958902B2
Application number: JP3503385A
Authority: JP
Inventors: ネア，マドヘイヴァン，ジー; エイブラハム，アン
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1990-01-18
Filing date: 1991-01-11
Publication date: 1999-10-06
Anticipated expiration: 2014-10-06
Also published as: DE69113025D1; EP0513068A4; JPH04505932A; DE69113025T2; EP0513068B1; WO1991010666A1; EP0513068A1; US4996207A

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景発明の分野本発明は抗がん剤とその合成方法に関する。

発明の目的本発明は部分的に国家衛生協会、衛生、教育および福
祉部門から賛助が得られた。

ガンはヒトの非規則的組織により引き起こされた苦痛
な慢性的疾患であるが、しかしそれがメトトレキセート
のような抗がん剤により治されるのである。

Baugh,KrumdieckおよびNairが“Biochemical and Bio
pysical Research Communications 52:27（1973）”の
論文中に抗がん剤であるメトトレキセートがヒトの組織
中に代謝によりポリ−γ−グルタマートとなったことを
報告した。NairとBaughが“Biochemistry 12:3923（197
3）”の論文中にメトトレキセートの代謝物であるポリ
−γ−グルタミル基誘導体の化学的合成過程、げっし組
織（rodent tissue）中にこの代謝物の形成過程、この
代謝物が豚の腎臓とヒトの血しょうより誘導した酵素
「共役物」に対しての加水分解感受性などを報告した。
メトトレキセートのポリグルタマートの形成が毒性と関
係があるから、ガンの化学療法に影響を与えるのであ
る。

これらの化合物の細胞からの流入はメトトレキセート
ほど速くないが、チミジレート合成酵素（thymidylate
synthase）とAICAR転移酵素を更に強く抑制することが
できる。

他の抗葉酸を絶え間なく研究した後メトトレキセート
のようなたくさんの抗葉酸がポリグルタミル基化過程を
経なければならないことが知られた。1988年Nair,Nanav
ati,Gaumont,Kisliukなどが“Jornal of Medical Chemi
stry"の中でメトトレキセートのような10−デアザアミ
ノプテリンとその10−エチル誘導体のポリグルタミル基
化過程（J.Med.Chem.31:181（1988））およびチミジレ
ート合成酵素（thymidylate synthase）の抑制作用につ
いては、親化合物よりこれらのポリグルタミル基誘導体
のほうが強いということを報告した。有効な抗白血病剤
であるN¹⁰−プロパーギル−5,8−ジデアザフォリン酸
（N¹⁰−propargy1−5,8−dideazafolicacid,CB 3717,PD
DF）が正常な鼠の組織中でポリグルタミル基誘導体とな
った（M.G.Nair,Mehtha and I.G.Nair.Fed.Proc,45:82
1,1986）。Nair,Nanavati,Kisliuk,Gaumont,Hsio,Kalma
nなどが“Journal of Medical Chemistry（29:1754,198
6）”の論文中にPDDFのポリグルタミル基誘導体のチミ
ジレート合成酵素の抑制活性がわりに高いということを
報告した。

Cheng,Dutschman,Starnes,Fisher,Nanavati,Nairなど
が“Cancer Research（34:598,1985）”の論文中にBDDF
と10−デアザアミノプテリンとのポリグルタミル基誘導
体は非ポリグルタミル基化の親化合物よりヒトのチミジ
レート合成酵素を強く抑制することができるということ
を報告したが、まもなくUeda,Dutschman,Nair,DeGraw,S
irotnak,Chengなどが“Molecular Pharmacology（30:14
9,1986）”の論文中に同じことを報告した。よく用いら
れている抗ガン剤と抗関節炎剤であるメトトレキセート
の抗プリン作用はそのポリグルタミル基誘導体がAICAR
転移酵素を抑制することにまとめることができる（Alle
gra,Drake,Jolivet,Chabner,Proc.Nat.Acad.Sci.USA 8
2,4881,1985）。以上のことから、古典的な抗葉酸、た
とえばメトトレキサート、10−デアザアミノプテリン、
PDDFなどの毒性がポリグルタミル基化より生じたどてあ
り、これらの毒性代謝物が長い間に正常の人体組織、た
とえば腎臓、骨髄及び肝臓の中に蓄積して悪い副作用を
生じ、臨床効果により大きな影響を与えるということが
わかった。

そこで、有効にジヒドロ葉酸レダクターゼを抑制する
ことができる上に体内に複雑なポリグルタミル基誘導体
にはならない古典的な抗葉酸の開発が望まれてきた。こ
の種類の化合物はメトトレキセートのように有効に腫瘍
細胞に到達することができるほかに、また優れた抗ガン
の臨床効果もあり、低い毒性を示すべきだ。三つの腫瘍
実験の結果は化合物１，２および３がみな優れた抗腫瘍
活性を示した（表１）。目標酵素でありジヒドロ葉酸レ
ダクターゼを抑制することについては三つの化合物がメ
トトレキセートと似通っているが（表２）、しかし表３
に見られるようにそれらが細胞中に亜葉酸の転送との競
争能力実験によると化合物１，２のほうがメトトレキセ
ートより有効的にH35−ヘパトーマ細胞（H35−Hepatoma
calls）に転送されるということが明らかとなった。

化合物１，２および３はヒトの白血病細胞のフォリル
ポリグルタマート合成酵素（FPGS）を純化するために作
用される物質と抑制剤である。実験の結果はFPGSに作用
される物質が体内にポリグルタミル基化されたというこ
とが示唆された。体内にポリグルタミル基化する相対的
能力を測定することによりこの抗葉酸に作用される物質
が酵素に対する活性を標準物と比較した。表４に見られ
るように化合物１，２および３の作用される物質の相対
的活性を標準物であるアミノプテリンおよび10−デアザ
アミノプテリンと比較したあと、新規化合物１，２およ
び３はヒトのCCRF−CEM白血病細胞のフォリルポリグル
タマート合成酵素に作用される物質ではないということ
が明らかになった。

そこでメトトレキセートと似通って低毒性の新規抗ガ
ン剤としての化合物１，２および３は臨床効果がある以
上リウマチ様関節炎の治療においては同じ程度の免疫能
力を持っている。

本発明は、白血病、腹水腫瘍、固形腫瘍、リウマチ様
関節炎などの治療過程についても説明したが、その温血
動物の白血球の構造が不規則化、ほかの悪性疾患または
リウマチ様関節炎を治療する場合に投与される化合物
１，２または３またはその薬理学の許容される塩の無毒
的な薬量も報告した。

４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−
γ−メチレングルタミン酸（４−amino−４−deoxy−10
−deazapteroyl−γ−methyleneglutamic acid）（１）
と４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−ディア
ザプテロイル−γ−メチレングルタミン酸（４−amino
−４−deoxy−10−ethyl−10−deazapteroyl−γ−meth
yleneglutamic acid）（２）の製造法について以下に説
明する。原料物質４−アミノ−４−デオキシ−10−デア
ザプテロイン酸（４−amino−４−deoxy−10−deazapte
roic acid）（４）または４−アミノ−４−デオキシ−1
0−エチル−10−デアザプロテイン酸（４−amino−４−
deoxy−10−ethyl−10−deazapteroic acid）（５）の
合成はNairの方法（Journal of Organic Chemistry 50:
1879,1985）で行った。そして（４）または（５）をジ
エチル−γ−エチレングルタマート（diethyl−γ−met
hylene glutamate）（６）と結合して、アルカリを加え
加水分解すると化合物（１）または（２）が得られた
（製造法１と製造法２）。同じように４−アミノ−４−
デオキシ−10−デアザプテロイル−３−ハイドロキシグ
ルタミル酸（４−amino−４−deoxy−10−deazapteroyl
−３−hydroxyglutamic acid）（３）は４−アミノ−４
−デオキシ−10−デアザプテロイン酸（４−amino−４
−deoxy−10−deazapteric acid）とジメチル−３−ハ
イドロキシグルタマート（dimethyl−３−hydroxygluta
mate）が結合して、アルカリを加え加水分解することに
より製造し得た（製造法３）。

第一工程（製造法１または製造法２）酸受容体として一番よりのは第三アミンたとえばトリ
エチルアミンまたはＮ−メチルモルフォリンの存在した
以上適当な溶媒たとえばジメチルフォルムアミド中に４
アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイン酸（４）
または４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デ
アザプテロイン酸（５）とアルキルクロロフォーメイト
たとえばアイソブチルクロロフォーメイトとが等量に反
応して混合無水物６または７を得た。０〜30℃でこの反
応を行う。ピリヂン、トリブチルアミン、コリヂン、ル
チヂン、またはMgOなどがトリエチルアミンと代わりに
酸受容体とすることができる。また、アルキルクロロフ
ォーメイトとしてほかにメチル、エチル、イソプロピル
基のクロロフォーメイトなどもあり、溶媒としてほかに
ジメチルスルホキシド、ヘキサメチルフォアマイドまた
はジメチルアセトアミドなどもある。

第２工程混合無水物６または７を過量のγ−メチレングルタミ
ル酸ジエステルたとえばジエチル−γ−メチレングルタ
ミン酸ジエステルと反応する。ジメチル、ジベンゾル、
またはジ−ｔ−ブチル−γ−メチレングルタミン酸がジ
エチル基誘導体に代わることができる。ジエチル−γ−
メチレングルタマートを塩酸塩と形式で混合無水物６ま
たは７の溶液中に加えた後等量または過量の酸受容体た
とえばトリエチルアミンを加える。交代合成法はジエチ
ル−γ−メチレングルタマート塩酸塩を適当な溶媒たと
えばDMF中に溶解し、等量の酸受容体で中和後、これを
混合無水物の溶液に加えたのである。この溶液を25〜30
℃で18時間撹はんし溶媒を減圧蒸留法で除去し、産物を
過量の0.1N NaOH/アセトナイトリンに加え、18時間撹は
んしたあと、主産物１または２を得た。そして、グルタ
ミル酸誘導体１または２をアルカリに溶解した溶液に酸
を加え、析出する沈澱を濾取し、洗浄し乾燥した。

化合物３の製造法について以下の説明する（製造法
３）。混合無水物６を過量の３−ハイドロキシグルタミ
ン酸ジエシテルたとえばジメチル−３−ハイドロキシグ
ルタマートジエステルと反応した。ジエチル、ジベンゾ
ル、ジ−ｔ−ブチル−３−ハイドロキシグルタマートが
ジメチル基誘導体に代わることができる。ジメチル−３
−ハイドロキシグルタマートを塩酸塩の形式で混合無水
物の溶液に加えた後、等量または過量の酸受容体たとえ
ばトリエチルアミンを加えた。交代合成法はジメチル−
３−ハイドロキシグルタマート塩酸塩を適当な溶媒たと
えばDMF中に溶解し等量の酸受容体たとえばトリエチル
アミンまたはＮ−メチルモーフォリンで中和した後、こ
れを混合無水物の溶液に加えたのである。この溶液を25
〜30℃で18〜24時間撹はんし、溶媒を回転減圧蒸留法で
除去し、産物を過量の0.1N NaOH/アセトナイトリン3:1
に加え、10〜18時間撹はんしたあと、主産物３を得た。
そして、化合物３をアルカリに溶解した溶液に氷酢酸を
加え、析出する沈澱を濾取し洗浄し乾燥した。

γ−メチレングルタミン酸誘導体１と２及び３−ハイ
ドロキシグルタミン酸誘導体３の製造法について以下に
詳しく説明する。

実施例１ジエチル−γ−メチレングルタマート塩酸塩 γ−メチレングルタミン酸は Calbiochem−Behring
製を用いた。丸底フラスコ中で上記γ−メチレングルタ
ミン酸795mg（5mmol）無水エチルアルコール25mlに溶解
した。０℃に氷冷下塩化ザイオニル3mlを撹はんしなが
ら除去に滴下する。それから25℃で18時間撹はんし、４
時間加熱還流し、溶媒を除去したあと、半固状物質を得
た。それを、ジエチルエーテル40mlに溶解し、ジエチル
−γ−メチレングルタマートの白色の結晶を得た。融
点;87〜89℃、質量分光（FAB）m/z;217（MH⁺）、収率;
1.0g（80％）。

４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−γ
−メニレングルタミン酸（１）４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイン酸
（Nairの方法に従って得たれた。J.Org.Chem.50:1879,1
985）310mg（1mmol）を乾燥したDMF40mlに溶解し、トリ
エチルアミン0.28ml（2mmol）を添加し、80〜90℃に加
熱し、そして−５℃に氷冷下精製した。イソブチルクロ
ロフォーメイト0.262ml（2mmol）を撹はんしながら、溶
液中に滴下した。15分後、氷浴に退去し、混合無水物６
が完全に形成するまで25℃に30分保持する。混合無水物
の溶液にジエチルーγーメチレングルタマート塩酸塩50
3mg（2mmol）を加え、そしてトリエチルアミン0.28mg
（2mmol）を非常に速く添加し、25〜30℃で18時間撹は
んし、70℃に減圧蒸留し砕氷50gを加え濾別した。その
あと、沈澱を0.1N NaOH 50mlとアセトナイトリン15mlを
含む混合液に加え、18時間撹はんし、透明溶液を得た。
それから1N塩酸でpH7.5とし、回転蒸留、濃縮し、溶液2
0mlぐらいを得、冷却後氷酢酸でpH4.0とした。黄色沈澱
を濾取し、洗浄、乾燥した。産物はHPLC分析により未反
応の４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デア
ザプロテイン酸と目的化合物である４−アミノ−４−デ
オキシ−10−デアザプテロイル−γ−メチレングルタミ
ン酸（１）1:3混合物である。

粗産物（400mg）を５％水酸化アンモニウム10mlに溶
解し、溶媒を減圧回転蒸留で除去し産物１を得た。この
アンモニウム塩を蒸留水10mlに溶解してそれをC18シリ
カゲル15Gを充填したカラムで展開した。展開溶媒は10
％アセトナイトリン水溶液を用い、第一帯溶液5mlを集
め、氷酢酸で酸化し、析出する黄色沈澱を濾取し、洗
浄、乾燥した。収率:300mg（67％），融点：〉300℃，
この化合物の分析データを下に示す。

製造法１４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−γ
−メチレングルタミン酸（１）の製造法実施例２ジエチル−γ−メチレングルタマート塩酸塩 γ−メチレングルタミン酸はCalbiochem−Behring製
を用いた。丸底フラスコ中で上記γ−メチレングルタミ
ン酸795mg（5mmol）無水エチルアルコール25mlに溶解し
た。０℃に氷冷下塩化サイオニン3mlを撹はんしなが
ら、徐々に滴下する。それから、25℃で18時間撹はん
し、４時間加熱還流し、溶媒を除去したあと、半固状物
質を得た。それを、ジエチルエーテル40mlに溶解しジエ
チル−γ−メチレングルタマートの白色の結晶を得た。
融点:87〜89℃、質量分光（FAB）m/z;216（MH⁺）、収
率:1.0g（80％）。

４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デアザプ
ロテイル−γ−メチレングルタミン酸（２）４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デアザ
プロテイン酸（Nairの方法に従って得られた。J.Org.Ch
em.50:1879,1985）337mg（1mmol）を乾燥したDMF 40ml
に溶解し、Ｎ−メチルモーフォリン0.226ml（2mmol）を
添加し、80〜90℃に加熱し、−５℃に氷冷下精製した。
イソブチルクロロフォーメイト0.262ml（2mmol）を撹は
んしながら、溶液中に滴下した。15分後、氷浴を退去
し、混合無水物７を完全に形成するまで25℃に30分保持
する。混合無水物溶液にジエチル−ｒ−メチレングルタ
マート塩酸塩503mg（2mmol）を加え、そしてＮ−メチル
モーフォリン0.226ml（2mmol）を非常に速く添加し、25
〜30℃で18時間撹はんし、70℃に減圧蒸留し、砕氷50g
を加え、濾別した。そのあと沈澱を0.1N NaOH 50mlとア
イソナイトリン15mlを含む混合液に加え、18時間撹はん
し、透明溶液を得た。それから1N塩酸でpH7.5とし、回
転蒸留濃縮し、溶液20mlぐらい得て、冷却後、氷酢酸で
pH4.0とする。黄色沈澱を濾取し、洗浄、乾燥した。産
物はHPLC分析により未反応の４−アミノ−４−デオキシ
−10−エチル−10−デアザプテロイン酸と目的化合物で
ある４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デア
ザプロテイル−γ−メチレングルタミン酸（２）1:3の
混合物である。

粗産物（420mg）を５％水酸化アンモニウム10mlに溶
解し、溶媒を減圧回転蒸留で除去し、産物２を得た。こ
のアンモニウム塩を蒸留水10mlに溶解して、それをC18
シリカゲル15gを充填したカラムで展開した。展開溶液
は10％アセトナイトリン水溶液を用い、第１帯溶液5ml
を集め、氷酢酸で酸化し、析出する黄色沈澱を濾取し、
洗浄、乾燥した。収率:350mg（〜69％），融点：〉300
℃，この化合物の分析データを下に示す。

製造法２４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デアザプ
テロイル−γ−メチレングルタミン酸（２）の製造法実施例３ジメチル−３−ハイドロキシグルタマート塩酸塩３−ハ
イドロキシグルタミン酸は、Vidal−Crosの“Journal O
f Organic Chemistry 50:3163（1985）”の論文中の方
法に従って得られた。丸底フラスコ中で微粉状態の３−
ハイドロキシグルタミン酸8.0g（〜50mmol）を乾燥した
メタノール250mlに溶解した。０℃の氷冷下塩化サイオ
ニル（25ml）を撹はんしながら、徐々に滴下する。それ
から、氷浴を退去し、25℃で18時間撹はんし、４時間加
熱還流し、ベンゼン200mlを加え、溶媒を減圧で全部除
去した。反応残留物をアセトン100mlに溶解し、徐々に
ジエチルエーテルを添加し、最初に微粉状態の結晶を得
た。析出する結晶を濾取し、エチルアルコール50ml及び
アセトン15mlで順次洗浄し、無水P₂O₅を入れた乾燥機の
中で乾燥した。収率:58％，融点:137〜138℃,NMR（TF
A）δ4.75（br,d,IH,αＨ）,3.79,3.65（s,s,3H,3H,car
bomethoxy）質量分光：計算値C₇H₁₃NO₄,（MH^-）192,実
験値192。

４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−３
−ハイドロキシグルタミン酸（４−Amino−４−deoxy−
10−deazapteroyl−３−hydroxyglutamic acid）（３）正確な４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプロテ
イン酸1mmol（310mg）を乾燥したDMF100mlに溶解し、80
℃に加熱し、精製したトリエチルアミン0.28ml（2mmo
l）を添加し、そして０℃に冷却した。そのあと、イソ
ブチルクロロフォーメイト0.262ml（2mmol）を溶液中に
加え、０−５℃で90分撹はんした。それから、混合無水
物（６）を含む反応物を氷浴から除去し、25℃で30分撹
はんした。ジメチル−３−ハイドロキシグルタマート塩
酸塩（456mg,2mmol）をDMF15mlに溶解し、精製したトリ
エチルアミン0.28ml（2mmol）を前の溶液に加えた。そ
して、この混合溶液を混合無水物溶液中に加え25℃で18
時間撹はんし、55℃に真空蒸発させ溶媒を除去した。残
留物をNaHCO₃（５％,10ml）とエーテル10ml溶液に加
え、１時間撹はんし、濾別し、水で洗浄した。ジメチル
エステル沈澱物を0.1N NaOH 80mlに溶解し、アセトナイ
トリン25mlを加え透明溶液を得、25℃で18時間撹はんし
た。真空蒸発でアセトナイトリンを除去し、1N塩酸でpH
7.5−８とした。産物は、イオン交換クロマトグラフィ
ーでDEAEセルロール／塩化物である線状NaCl（階調度
０−0,5M）を用いて純化した。それから氷酢酸で溶液pH
3.5とし、沈澱を得た。溶液を冷却し、濾別し、水で洗
浄し、乾燥した。収率:56％。

４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−
３−ハイドロキシグルタミン酸（３）の分析結果を下に
示す。

製造法３４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−３
−ハイドロキシグルタミン酸（３）の製造法グルタマート化合物１，２または３の酸の形式で使っ
ても良いが、一つ、またいくつかのアミノ基を含むプテ
リディン環である塩の形式で使ってもよい。ほかの塩は
塩酸、臭化水素酸、サルフォン酸、硝酸、燐酸および有
機カーボン酸たとえばマレイン酸、クエン酸、サリチル
酸、メタンサルフォン酸などで合成してよい。

グルタマート化合物１，２または３またはそれらの塩
は温血動物に経口または非経口（腹腔内、静脈内、脊椎
腔内、皮下、筋肉内）的に投与し得る。薬物１，２また
は３を白血病、腹水腫瘍、固形腫瘍、またはリウマチ様
関節炎の治療に用いる場合、0.1mg−500mg/kgに投与す
ればよい。一度に500mg/kgぐらい大用量の場合リューコ
ボリン［６（RS）５−フォーミルテトラヒドロ葉酸］と
一緒に使って毒性を下げた方がよい。

グルタマート化合物１，２または３は複雑な形式およ
び単位薬量の形式で治療を簡単にした。無菌・無毒な担
体は１，２または３の中に加えてよい。これらの担体は
液状、固状、半固状で載色剤、媒質または賦形剤として
よいが、担体としてゼラチン、メチルセルロース、パラ
ハイドロキシ安息香酸塩、タルク、ステアリン酸マグネ
シウム、テオブロマー油、アラビゴム、乳糖、右旋糖、
マンニット、ソルビトール油、ミネラル油などがある。
グルタマート化合物１，２または３と担体または希釈剤
は単位薬量に紙またはほかの入れ物たとえばカプセル、
カチェト、膠化体またはサチェトの中に入れておく。そ
してカチェト剤、座薬、カプセル剤、平板剤などとして
投与される。

マンカ細胞の成長の分析実験はThorndike,Gaumont,Ki
sliuk,Sirotnak,Murthy,Nairなどの“Cancer Research
49,158（1989）”の論文中の方法に従って行った。H35
−ヘパトム細胞の成長に対しての抑制作用の測定はPati
l,Jones,Nair,Garivan,Meley,Kisliuk,Gaumont,Duch,Fe
roneなどの“Tournal of Medicinal Chemistry 32:1284
（1989）”の論文中の方法に従って行ったのである。CC
RF−CEMヒト白血病細胞に対しての抑制作用の測定はMcG
uire,Graber,Licato,Vincenz,Coward,Nimec,Gelivanな
どの方法に従って行ったのである。（Cancer Research
49:4517,1989）。

＊ γ−メチレングルタマートのｄ−エナンサイオマー
の含量が照合検査された。重複実験のデータは一致し
た。

純粋なジヒドロ葉酸レグクターゼがリンフォブラスト
イド（lymphoblastoid）から得られた。酵素実験はPast
ore,Plante,Kisliukなどの方法に従って行った（Method
s in Enzymology 34:281,1974）。

転送実験はPatil,Jones,Nair,Galivan,Maley,Kisliu
k,Gaumount,Duch,Feroneなどの方法に従って行った（Jo
urnal of Medical Chemistry 32:1284,（1989））。亜
葉酸（２μM,15分摂取）。

分析実験がMcGuire,Graber,Licato,Vincenz,Coward,N
imec,Galivanなどの“Cancer Research 49,4517（198
9）”の論文中の方法に従って行ったのである。

本発明の詳しい過程は製造法1,2,3の中で説明する。
全文中同じ番号の化合物が同じ化合物である。

応用上の長所メトトレキセート（Methotrexate,MTX）はヒトのガン
の治療によく用いられている薬物の一つである。近年、
メトトレキセートに類似する10−エチル−10−デアザア
ミノプテリン（10−ethyl−10−deazaaminopterin,10−
EDAM）が高い抗腫瘍活性を示した。MTXと10−EDAMが代
謝によりポリ−γ−グルタミル基誘導体（poly−γ−gl
utamyl derivatives）となった。この二つの抗葉酸（an
ti−folates）MTXと10−EDAMの目標酵素（target enzym
e）がジヒドロ葉酸レダクターゼ（dihydrofolate reduc
tase）である。哺乳類動物の細胞に転送される速度につ
いては10−EDAMのほうがMTXより速い。MTXと10−EDAMの
ポリグルタミル基誘導対はジヒドロ葉酸レダクターゼを
抑制することができるばかりでなく、他の葉酸類レダク
ターゼを抑制することもできる。それで、抗葉酸のポリ
グルタミル基化は細胞中毒することが知られ、これらの
毒性代謝物が長い間に正常な繁殖組織たとえば肝臓・腎
臓・腸の上皮および骨髄中に蓄積して悪い副作用が生じ
るのは言うまでもない。

いかなるメトトレキセートと同じ生物化学物質たとえ
ばジヒドロ葉酸レダクターゼを抑制する性質と腫瘍細胞
に到達する性質がありポリグルタミル基化できない古典
的な抗葉酸は、顕著な低毒性をもつべきだ。化合物１，
２および３はメトトレキセートと同じようにジヒドロ葉
酸レダクターゼを抑制することができる。抗葉酸１と２
の腫瘍細胞に到達する効率はメトトレキセートの３−５
倍であるが、白血病細胞の生成を抑制する効率はその２
倍である。いずれの新規抗葉酸（１，２あるいは３）は
フォリルポリ−グルタメート合成酵素（folylpolygluta
mate synthetase,FPGS）に作用される物質ではない。し
たがって代謝によりポリ−γ−グルタマートになること
はできないのである。想像と一致して、化合物１，２あ
るいは３は比較的に毒性が低い新規非ポリグルタマート
の抗葉酸である。それをガンの治療に用いてメトトレキ
セートと同じあるいは更に優れている免疫抑制活性が現
れた。ヒトにおける経口または非経口的薬量は一日0.1
−500mg/kgである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献特開昭56−51482（ＪＰ，Ａ) 特開昭62−81385（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁶，ＤＢ名) C07D 475/00 - 475/14 A61K 31/505 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】下記の式を有する４−アミノ−４−デオキ
シ−10−デアザプテロイル−γ−メチレングルタミン
酸。
【請求項２】下記の式を有する４−アミノ−４−デオキ
シ−10−エチル−10−デアザプテロイル−γ−メチレン
グルタミン酸。
【請求項３】下記の式を有する４−アミノ−４−デオキ
シ−10−デアザプテロイル−３−ハイドロキシグルタミ
ン酸。
【請求項４】白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を改善す
るのに治療学的に有効な１単位薬量当り0.1乃至500mgの
範囲の量の４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテ
ロイル−γ−メチレングルタミン酸の薬理学的に許容さ
れる無毒的な担体またはその希釈剤と共に含むことから
なる白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を処置するための
単位薬量形態の薬物組成物。
【請求項５】白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を改善す
るのに治療学的に有効な１単位薬量当り0.1乃至500mgの
範囲の量の４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10
−デアザプテロイル−γ−メチレングルタミン酸を薬理
学的に許容される無毒的な担体または希釈剤と共に含む
ことからなる白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を処置す
るための単位薬量形態の薬物組成物。
【請求項６】白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を改善す
るのに治療学的に有効な１単位薬量当り0.1乃至500mgの
範囲の量の４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテ
ロイル−３−ハイドロキシグルタミン酸を薬理学的に許
容される無毒的な担体またはその希釈剤と共に含むこと
からなる白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を処置するた
めの単位薬量形態の薬物組成物。
【請求項７】リウマチ様関節炎を改善するため治療学的
量の４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル
−γ−メチレングルタミン酸を含むリウマチ様関節炎治
療剤。
【請求項８】リウマチ様関節炎を改善するため治療学的
量の４−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デア
ザプテロイル−γ−メチレングルタミン酸を含むリウマ
チ様関節炎治療剤。
【請求項９】リウマチ様関節炎を改善するための治療学
的量の４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイ
ル−３−ハイドロキシグルタミン酸を含むリウマチ様関
節炎治療剤。
【請求項１０】既知の４−アミノ−４−デオキシ−10−
デアザプテロイン酸をアルキルクロロフォーメイトとの
反応により混合無水物へ転化させ、該生成混合無水物を
γ−メチレングルタミン酸ジエステルと反応させ、次い
でアルカリ加水分解し、酸性化することによりなる請求
項１の４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイ
ル−γ−メチレングルタミン酸の調製方法。
【請求項１１】既知の４−アミノ−４−デオキシ−10−
エチル−10−デアザプテロイン酸をアルキルクロロフォ
ーメイトとの反応により混合無水物へ転化させ、該生成
混合無水物をγ−メチレングルタミン酸ジエステルと反
応させ、次いでアルカリ加水分解し、酸性化することに
よりなる請求項２の４−アミノ−４−デオキシ−10−エ
チル−10−デアザプテロイル−γ−メチレングルタミン
酸の調製方法。
【請求項１２】既知の４−アミノ−４−デオキシ−10−
デアザプテロイン酸をアルキルクロロフォーメイトとの
反応により混合無水物へ転化させ、該生成混合無水物を
３−ハイドロキシグルタミン酸ジエステルと反応させ、
次いでアルカリ加水分解し、酸性化することによりなる
請求項３の４−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテ
ロイル３−ハイドロキシグルタミン酸の調製方法。
【請求項１３】白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を改善
するための治療学的量であって相対的に無毒な薬量の４
−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−γ−
メチレングルタミン酸を含む抗がん剤。
【請求項１４】白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を改善
するための治療学的量であって相対的に無毒な薬量の４
−アミノ−４−デオキシ−10−エチル−10−デアザプテ
ロイル−γ−メチレングルタミン酸を含む抗がん剤。
【請求項１５】白血病、腹水腫瘍または固形腫瘍を改善
するための治療学的量であって相対的に無毒な薬量の４
−アミノ−４−デオキシ−10−デアザプテロイル−３−
ハイドロキシグルタミン酸を含む抗がん剤。