JPS6236A - 特異的抗原に対する免疫耐性賦与組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、　　Ｈの量　な普゛■ （産業上の利用分野） 本発明は、薬物に対する好ましくない免疫反応。

アレルギー反応、および器官同種移植片耐性誘導の制御
を含む、特異的免疫応答を調節する方法に関連する。特
に、ネズミの分化抗原Ｌ３Ｔ４に相当する被検体種のＴ
細胞分化抗原と反応する結合成分は、同時にあるいはＬ
３Ｔ４抗原保持Ｔ細胞の除去の期間内に投与された免疫
原に対する。−次的および二次的免疫応答両者を阻止す
るのに有用である。

（従来の技術） 免疫系の有効な機能は両刃の剣である。感染細菌、ウィ
ルス、または悪性の細胞のような敵対する外来生物の侵
入に対し防御するというその能力は脊椎動物の健康に必
要である；事実、その生存はこの防御のいかんに依って
いる。他方、この効果に対し、それが宿主が出くわす外
来物質に関する場合でさえ、何らかの副作用が存在する
。外来ｍ織の侵入は必ずしも敵ではない。火傷患者に対
する皮膚移植の拒絶反応での問題には長い歴史がある；
臓器移植を含む処置のこの最近の発展は外来組織拒絶を
一般大衆の注目する問題とした。

さらに、アレルギ一応答は免疫系の作動に基づくことが
分かってきた。アレルギー源は見かけ上杭体形成に至る
応答の引き金となる。あるもの（１ｇＢ＞はアレルギー
に関連する好ましくない症候を引出すマスト細胞に結合
能がある。これらの症状は単に不快であるだけかもしれ
ないし、あるいはある種の薬物１例えばペニシリン、に
対する患者のアレルギーのように厳しいものであるかも
知れない、免疫原になるのに充分大きなペプチド分子を
含む薬物の出現はこの問題の重要性を拡大した。

抗ウィルスや抗癌治療のような種々の処置に有用なペプ
チド薬は最近９組換えＤＮＡ技術により極めて容易に手
に入るようになった。

好ましくない免疫応答を阻止する試みは特に成功してい
ない、というのが常識である。例えば。

外来物質に対する免疫応答を最小にするように臓器移植
受容者と供給者を杏わせる努力が払われている。−卵性
双生児の場合のみうまく行くことは確かである。そのよ
うなアプローチの限界は、これ以上コメント出来ない程
、明らかである。一方。

抗有糸分裂剤、の投与のような、一般の免疫系を抑制す
る暴力的な努力は、感染に対する感受性をもたらすため
、患者の生命と引き換えに拒絶反応を防ぐものであろう
。

組織拒絶の防止にのみ適用できる他のアプローチは組織
適合性抗原に対する抗体で受容者を受動的に免疫するこ
とである（Ｄａｖｉｅｓ、口、Ａ、Ｌ、　ｅｔ　ａｌ、
＋Ｔｒａｎｓ　１ａｎｔ　Ｒｅｖｉｅｗｓ（１９７９）
３０：１Ｂ−３９）　ｏ移植拒絶問題のみにまた適用可
能な他のアプローチは供給者のＭＩＬｍの処理に用いら
れる。これらは、拒絶反応が移植に伴い運ばれる供給側
の白血球の表面の組織適合性抗原により生じる。そして
この白血球はそれ自体型まれる組織の本質的部分でない
、という仮定に基づいている。供給側移植組織のインビ
ボ培養が供給側白血球の除去に用いられてきたＣと」肛
Ｌ（１９７７）８１ニア４−７９；５ｃｉｅｎｃｅ　（
１９８０）２０９　：２８３ニー２８５　；　Ｔｒａｎ
ｓ　　Ｐｒｏｃ（１９８２）　８　：　１０９４−１０
９８）。

供給側組織はまた適当な抗体と直接処理された（Ｆａｕ
！Ｌ＋ｍａｎ、　ｏ、、　ｅｔ　ａｌ＋　Ｔｒａｎｓ　
１ａｎｔａｔｉｏｎ（１９８２）３４　！　３０２−３
０５）、　１９８５年５月８日公開のＥＰＯＰｕｂｌｉ
ｃａｔｉｏｎｍ０１４０１０９は供給側組織の前処理に
細胞毒性部分と抗体との結合により形成された免疫毒素
の利用を開示する。

可溶性抗原に対する免疫応答を防ぐ方法は露出できない
ため、大きな制限を受けてきた。ある薬物にアレルギー
性の患者は、使える場合は別のやり方で処置された；花
粉症患者は免疫原の花粉から離れていようとする。もし
回避が不可能ならば。

この症候を処置するために転地しなければならない。

望まれることは、免疫系の一般の能力を正常にしたまま
で、特定の抗原に関する特異的な免疫耐性である。従来
のアプローチにはそのような対象となるものの選択的免
疫抑制に成功したものはない。受容者自身に対する移植
拒絶の防止に用いられる処置は、一般に全体の系を抑え
る；供給側組織の処理は導入される外来物質の性質を変
えてしまう。薬物や環境の抗原に対するアレルギー反応
の場合、外来物質の変更は好ましくないか、または非実
用的である。本発明においては、受容者の免疫系を特定
の免疫原に関し選択的にそして特異的に、一般の免疫能
力を損なうことなく、抑制する。本発明はこの結果をヘ
ルパーＴ細胞の表面で分化抗原に対するその特異性によ
り達成され、かくしてこれらの細胞を、同時にあるいは
少なくともヘルパーＴ細胞の回復期間内に、導入された
特定の抗原に対する免疫応答の開始に関与することから
阻止する。

（発明が解決しようとする問題点） 本発明は、被験体に対する投薬が望まれるか。

あるいは無害であるが投薬が避けられない、どちらかの
抗原に対するアレルギー反応のような望ましくない免疫
応答を抑制する方法を提供する。また２組織移植への抵
抗性を誘導する方法も提供する。

１つの重要な応用例として１組換え技術の開発は、しば
しば望ましくない免疫応答を引き出す。

例えばインターフェロン、やインターロイキンのような
潜在的に効力のある相当数の治療的タンパク質を利用可
能にした。もちろん、非常によ（用いられる薬剤に対す
るアレルギー反応は知られていないが、新規のポリペプ
チド性薬剤は、おそらくその大きさのためであろうが、
これに関してはより面倒である。本発明は、所望の薬剤
の好ましい治療効果を免疫反応なしで被験体に体験させ
ることを可能にする。

他の応用例は２周囲の食物あるいは素材に対するアレル
ギーの問題に対するものである。何百万という人々は９
例えばブタフサあるいは他の花粉といったある点では環
境の完全に無害な成分に反応して重症になる０本発明の
方法は、広くはびこっている不快となるこの免疫応答を
妨げたり、あるいは減じたりすることができる。

３番目の応用例は、移植操作における組織の拒絶の発生
率を減じることであるが、これら生命を救済する操作を
安全でかつ実用的なものにするのに重要である。これら
の操作は、今世紀にはまた。

不適合の問題を明瞭になくすことができるであろう。

４番目の応用例は、癌のようなある種の病気の治療に、
外来異種のモノクローナル抗体のような外来タンパク質
を用いることを可能にすることである。

本発明の方法は、免疫耐性が求められている抗原とＴ細
胞上の“Ｌ３Ｔ４−等価”分化抗原に特異的なある抗体
とを共に投与することにあり、それによってこれらヘル
パーＴ細胞が、特別に共に注入あるいは投与された抗原
に対して同時に備えている免疫応答に関与することを妨
げる。防御的抗体は直接的に投与されてもよいし、ある
いはこれらの抗体あるいはそれのＬ３Ｔ４等価結合部分
は細胞毒性成分に抱合させて免疫毒性抱合体としてもよ
い。

細胞毒性成分は、抗体あるいは断片だけとの反応によっ
てもまた妨げられるヘルパーＴ細胞の機能を破壊するの
を助成する可能性がある。防御組成物の必須成分はＬ３
Ｔ４等価物に特異的に結合する部分である。

２つの一般的な状況が興味ある。１つは９問題にしてい
る抗原に以前にさらされていない純潔な被験体に関する
。これは、移植受容者あるいは新しくあるいはたまに投
与される薬剤で処置される患者に関して普通の場合であ
る。他方は、同じ抗原に以前さらされている個人に関す
る。これは。

環境の成分に対するアレルギー反応に最も普通にある場
合である。　′ 新しい薬剤あるいは移植のような以前に体験していない
物質゛に対する防御免疫抑制に関して、外来物質導入に
対する一次的免疫応答を抑制することは充分である。本
発明の方法では、この−次的応答は、外来物質を、結合
成分９例えば抗体あるいはネズミのＬ３Ｔ４表面糖タン
パク質に対応する被験体種内の分化抗原（すなわち“Ｌ
３Ｔ４等価物”）に特異的な免疫反応性を示す免疫毒物
、と同時にあるいはヘルパーＴ細胞回復期間内に、投与
することにより抑制される。従って、ある面では本発明
は、抗Ｌ３Ｔ４等価物結合成分と免疫原性物質を適当な
時期で共に投与することにより免疫原に対する免疫応答
を妨げたりあるいは改良したりする方法に関する。

以前に経験した免疫原に対する応答の軽減に関して、被
験体の由来従って被験体自身は異なるが。

技術は同じである。応答の性質も異なる。このような以
前の接触の最も頻繁な例は環境のアレルギー環、の場合
であるが９本発明のこの見地はそれ自体はアレルギー環
のようなものに限定されない。

同じアレルギー環に対する以前の接触は標準で。

本発明はこの応用において特に有用である。免疫原との
２次免疫反応に対するこの応答でさえ、“効能促進剤”
との接触と同時にあるいは直前に。

Ｌ３Ｔ４等価物に結合している成分を投与することによ
り和らげることができる。免疫原はまた。適当な時間に
慎重に投与することにより、即座の抑制に伴いさらなる
免疫性を供することができる。従って、他の見地で本発
明は、免疫原に以前に接触している被験体に、関連した
Ｌ３Ｔ４等価物の特異的結合成分を免疫原への接触と適
当に組合せで投与することにより、２次免疫応答、最も
一般的にはアレルギ一応答の改良に関する。

他の見地では本発明は２発明方法を行うのに適した組成
物を含むキットを企図する。

（問題点を解決するための手段） 本発明の組成物は、脊椎動物被検体において特異的抗原
に対する免疫耐性を与える方法を行うのに使用される組
成物であって、　Ｌ３Ｔ４等価物に特異的に結合する成
分を含み、該成分が薬学的に許容されるキャリアーとの
混合物である。

本発明の組成物は、前記脊椎動物が以前に前記抗原にさ
らされた。

本発明のキットは、特異的抗原に免疫耐性を与えるキッ
トであって、特異的抗原の適当量を薬学的に許容される
賦形剤に含む容器およびＬ３Ｔ４等価物結合成分を薬学
的に許容される賦形剤に含む容器を有する。

本発明の方法は、あるサブクラスのＴリンパ球。

つまりヘルパー細胞の関与を無能にすることおよび免疫
原の゛存在下でこれら細胞を再生させることにより、特
異的な免疫応答を妨害することに依存する。これらＴ細
胞は、ネズミの系ではＬ３Ｔ４と表される２表面産生糖
タンパク質の分化抗原により認識される。

簡単に言うと、２つの主要なタイプのリンパ球が免疫応
答に関与していることが長年にわたって確立されてきた
。すなわち２種々のエフェクター機能へと分化するＴ細
胞と、抗原に特異的な抗体を分泌するために分化するＢ
細胞である。非常に一般的な点で、Ｂリンパ球分化細胞
（形質細胞）の第１の機能は抗体を分泌することである
。分化したＴ細胞は、キラー細胞、ヘルパー細胞、およ
びサプレッサー細胞のようなエフェクター機能を供する
。Ｔ細胞は、抗原特異的認識部位に加えて。

その特別な亜型に特徴的な分化抗原を含む。従って１本
発明の方法は、ヘルパーＴ細胞の亜型の特徴的な分化抗
原を阻止することにより免疫応答の過程に影響を及ぼし
、これにより、ヘルパーＴ細胞のエフェクター機能を阻
害する。

ヘルパー細胞は見かけ上Ｂ細胞と相互作用し。

Ｂ細胞の分化と増殖を“助ける２よう働く。さらにそれ
らは９例えばキラー細胞のようなエフェクターの役割へ
とＴ細胞が分化するのを“助ける”。

これらヘルパーＴ細胞上球（ＩＩＴＬ）の大半は、ネズ
ミの系でＬ３Ｔ４として表される表面分化抗原を含む。

この分化抗原は見かけの分子ｉ１５２．ＱＱＯ（Ｄｉａ
ｌｙｎａｓ。

Ｄ、Ｐ、、ｅｔ　ａｌ、　　Ｊ、　　　Ｉｍｍｕｎｏｌ
（１９８３）１３１：２４４５−２４５１）の糖タンパ
ク質であり、見かけ上ヒトのヘルパーＴ細胞上のＬｅｕ
３あるいはＴ４分化抗原に類似している。Ｌ３Ｔ４分化
抗原に特異的なモノクローナル抗体（Ｍａｂｓ）が調製
されている（Ｄｉａｌｙｎａｓ、　Ｄ、Ｐ、＋ｅｔ　ａ
、ｌ＋（前出））。ＧＫｌ、５と表されるモノクローナ
ル抗体を分泌するハイブリドーマは、クローン化Ｔ細胞
系を注入したラット由来の肺臓細胞とマウスの非分泌型
ミエローマ５ｐ２１０との融合により得た。

分泌されたＭａｂは、　Ｌ３Ｔ４に対して特異的なラッ
トのＩｇＧ　２ｂ抗体である。

他に、免疫応答におけるＧＫｌ、５　Ｍａｂの注入効果
が研究されている。ＷＳＣＩ、　Ｆｅｂｒｕａｒｙ　４
−６＋１９８５に発表されている論文で−ｏｆｓｙ＋　
Ｄ、＋等は、自己免疫疾患を発達させる傾向にふるマウ
スのある種に抗Ｌ３Ｔ４抗体を毎週注入すると、　Ｌ３
Ｔ４陽性細胞の循環レベルが９０％−９５％減少し、自
己免疫の発達を抑制すると報告した。彼らはさらに、マ
ウスはラットＩｇＧに対する抗体がほとんどないか全く
ないことを見出した。Ｗｅｓｔｅｒｎ　ＡＦＣＲＦｅｂ
ｒｕａｒｙ　４−６＋１９８５に発表されている抜粋中
で−ｏｏｄｃｏｃｋ、Ｊ、、等は、外来種の皮膚移植３
日前にＧＫｌ、５由来１ｇＧ　２ｂモノクロ一ナル抗体
をマウスに静脈注射で注入すると。

拒絶する時間を遅らせるということを開示した。

注入されたマウスは２８日後でもＬ３Ｔ４陽性細胞の減
少を示した。モノクローナル抗体の付加的な投与は、循
環しているＬ３Ｔ４−陽性細胞の減少を高めた。

この結果は、　ＩｇＧ　２ｂ抗体がｉｎ　　ｖｉｖｏで
このマーカーを持つＴ細胞の部分集合を排除するのに成
功していることを示すＣｏｂｂｏｌｄ、Ｓ、Ｐ、、等の
Ｎａｔｕｒｅ（１９８４）３１２　：５４８−５５１の
結果と矛盾しない。

Ｗｅｓｔｅｒｎ　ＡＦＣＲＦｅｂｒｕａｒｙ　４−６＋
１９８５に発表されている抜粋中で−ｏ　ｆ　ｓ　ｙ　
＋　Ｄ　、ｒ等は、可溶性抗原に対す。

る免疫応答におけるＧＫｌ、５分泌Ｍａｂ注入の効果を
報告している。牛血清アルブミン（ＢＳ＾）を注入され
たマウスでは昔通抗ＢＳＡ　ＩｇＭが生産され、すぐ直
後に抗ＢＳ＾ＩｇＧ抗体のレベルが迅速に増加する。

ＩｇＧ応答は、免疫化４８時間以内にＧＫｌ、５分泌Ｍ
ａｂを一回注入することで阻止できたが、　ＢＳへの投
与後４８時間以上たってから注入を行えばＩｇＧ機能の
抑制は起こらなかった。−ｏｆｓｙはまた。マウスにＧ
Ｋｌ、５　Ｍａｂを注入すると免疫応答を除かないが。

他のラットＩｇＧ２ｂ　Ｍａｂで処理すると高力価の抗
ラット抗体を確かに刺激することを見出した。

八−り教 ここで用いられているように、“同時に”を抗原とＬ３
Ｔ４等価物結合成分の注入に対して用いる場合、一方を
他方の約２４〜４８時間以内に注入あるいは投与するこ
とを意味する。いずれを最初に投与してもよい。しかし
ながら、受容体に結合する成分の投与は、抗体の注入あ
るいは投与の前４８時間であるいは以内に実質的に同時
に行われることが好ましい。

“ヘルパーＴ細胞回復期間”は、結合成分の投与後、　
Ｌ３Ｔ４等価物保持ヘルパー細胞がおよそ正常レベルに
まで、好ましくは９本発明の範囲では。

正常レベルの５０％にまで回復するのに必要な時間を意
味する。

“Ｌ３Ｔ４等価物に対する結合成分”は、ネズミＨＴＬ
細胞のＬ３Ｔ４表面分化抗原に相当する被験体種の分化
抗原に特異的な物質を意味する。いくつかの成分は、い
くつかの種でＨＴＬ細胞上の相応する分化抗原と交叉反
応する。これら分化抗原上の決定基に対して免疫反応性
を有する可能性がある。一般的に３本発明で有用な抗体
は強力な免疫抑制活性を有するため、それらは被験体種
に由来する必要はない。例えば、ラットＩｇＧ２ｂモノ
クローナル抗体ＧＫ１．５はネズミのＬ３Ｔ４に対して
反応性があり。

これらＭａｂはネズミの試験系に用いるのに便利である
。というのは、それらがマウスではラットＩｇに対して
抗体を生じないからである。他の市販されているモノク
ローナル抗体９例えばＬｅｕ３　（ベクトン　ディキン
ソンＢｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｈｋｉｎｓｏｎ）あるいはＴ
４　（オルソ０ｒｔｈｏ）は、ヒトのＬｅｕ３あるいは
Ｔ４分化抗原に対して反応する。被験体のＴ細胞にある
相当する分化抗原と特異的に反応するモノクローナル抗
体を産生ずる様々な他のハイプリドーマ系列は本発明の
方法に適している。

モノクローナル抗体をＬ３Ｔ４等価物結合部分として使
うことはもちろん必要でない。モノクローナル抗体調製
物はより高度な親和力と同一性という利点を持つが、ポ
リクローナル調製物も使用し得る。また、標的特異性を
維持する免疫グロブリンの断片２例えばＦ　（ａｂ）　
を断片、も同様に使える。さらに、　Ｌ３Ｔ４等価物あ
るいはその断片に対する特異的な抗体は、細胞毒素と抱
合させ得る。完全なりシン、リシンＡ、ジフテリア毒素
、ボークウィード抗つィルス性タンパク質（ＰＡＰ）　
、あるいは他の自然界にあるあるいは人工的な毒素、の
ような種々の細胞毒性成分を用いての免疫毒素の構築は
。

分野では今までよく理解されている。総説として。

Ｔｈｏｒｐｅ＋　Ｐ、Ｅ、、ｅｔ　ａｌ、　Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ　Ｒｅｖｓ（１９Ｂ２）６２　：　１１９−１５８
；Ｊａｎｔｚｅｎ、　ｅｔ　ａｌ、　　（同上）　ｐｐ
１８５−２１６　；　０１ｓｎｅｓ。

Ｓ、、　ｅｔ　ａｌ、　Ｐｈａｒｍ　Ｔｈｅｒ　（１９
Ｂ２）１５　：　３３５−３８１を見よ。

従って、まとめると“Ｌ３Ｔ４等価物に結合する成分”
という語は２問題の種でＬ３Ｔ４等価物に結合する特異
的な能力が維持されている限り、モノクローナル抗体、
ポリクローナル抗体、その断片、あるいは細胞毒素に結
合するこれらのいずれをも意味する。

“特異的抗原”は１問題の免疫原物質を意味する。従っ
て特異的抗原は５球状タンパク質、免疫グロブリンのよ
うな糖タンパク賞、花粉タンパク質のような粒子上にあ
る物質、インターフェロン。

インターロイキン２あるいは腫瘍壊死因子のような治療
用のポリペプチド、ロイチニングホルモン（Ｉｅｕｔｉ
ｎｉｚｉｎｇ　ｈｏｒｍｏｎｅ）その類似物質あるいは
その拮抗物のようなホルモン代替物、などを含む。

受容体遮断のために用いられるタンパク質性治療剤の合
成ペプチド類似物は、可溶性抗原の他の重要なりラスで
ある。さらに他の重要なサブクラスは、アロ抗原のもの
、すなわち主要組織適合複合体の産物であるものである
０組織移植あるいは皮膚移植における外来組織の拒絶の
おそらく原因となっているのはアロ抗原である。

本発明の重要な面は、被験体が以前抗原性物質にさらさ
れたことがあるかどうかにかかわりなく効果的であると
いうことである。なぜなら１本発明は一次接触および二
次接触の際に特異的抗原に対して免疫耐性を供するから
である。抗原に対する一次的応答は、一般的に、抗原に
特異的な多数のＩｇＭ抗体を形成することを含む。抗原
に対する“効能促進薬”接触（あるいは９本当は、初期
投与に関する遅延応答）は二次的応答、つまり抗原に特
異的なＩｇＧ、Ｉｇ＾、および１ｇ８分布が比較的劇的
に増加するという結果となる。言い換えると、二次的応
答は特異的なＩｇＧ、　Ｉｇ＾、およびＩｇＥレベルが
増加することにより特徴づけられる。ＩｇＭ分布はやや
速く減少し、抗原が付加的に投与されたときだけ再び補
充される＊　ｒｇｃ、ＩｇＬおよびＩｇＥレベルはより
長期にわたり維持される。同じ抗原に以前に接触してい
ることにより、それに続く接触の際の促進された二次的
応答という結果となる。

（以下余白） 旦−二ョ没豹１し賢夫 本発明の本質的な特徴は、被験体の“Ｌ３Ｔ４”分化抗
原もしくは、より正確には、被験体種の相当する表面糖
タンパク質を妨げるために、特異的抗原の投与と同時に
、もしくは抗原の投与に先立って、正確な特異性を有す
る結合成分を投与することである。ここで、抗原は回復
期間中に投与される。結合成分の実際の効果は、　Ｌ３
Ｔ４等価物保持細胞を殺すこと、またはある非細胞毒性
現象においてこれらの細胞のエフェクター機能を妨げる
ことであり、いずれの場合においても９種に特有な期間
マウスでは約２週間から１ケ月にわたり正常なヘルパー
Ｔ細胞成分を再生させることであろう。

本発明方法の実施の機構に関してはいかなる特定の理論
によっても限定するつもりはないが、出願者は、ある特
別な抗原の存在下におけるヘルパーＴ細胞の再生により
２それが自己として認識されると考えている。

Ｌ３Ｔ４等価物結合成分を細胞毒性物質との免疫的抱合
体として調製することは、その有効性を増加させるであ
ろう。従って、細胞毒素は、目標のＴヘルパー細胞へ特
異的に向けられるであろう。

Ｌ３Ｔ４　　　　　” Ｌ３Ｔ４等価物に結合する成分の投与量は、その形。

それが免疫毒素に変換されているか否か、投与の様式、
および被験体の状態に依存するであろう。

明らかに、最も好ましい投与の様式は、注射できれば静
脈注射によるものである。典型的には、このように特異
的に免疫的抑制を受ける被験体に。

−回の静脈注射または腹膜注射で、生理食塩水のような
適当な賦形剤に溶かした約２００■から５ｇ好ましくは
１から２ｇのＬ３Ｔ４等価物結合成分を注射する。

所望の結合成分の抗体部分は、従来の手順により得られ
る。　Ｌ３Ｔ４等価物血清は、免疫化した被験体より得
られる。Ｌｅｕ３またはＴ４等価のヒト分化抗原につい
ては、ヒト・ヘルパーＴ細胞を注射して免疫化した宿主
から血清を採取することにより。

マウス、ウマ、ヤギ、ウサギ、ヒツジまたはラットなど
の被験動物から抗血清を調製する。Ｌ３Ｔ４等漬物結合
成分は選択的な特異的免疫抑制を与えるので、非ヒト抗
血清の使用は差し支えない。他の哺乳動物被験体に対す
る所望の抗体は、これら哺乳動物由来のヘルパーＴ細胞
並集団を注射することにより、同様に得られる。

モノクローナル抗Ｌ３Ｔ４等価物抗体も、　Ｋｏｈｌｅ
ｒ＋Ｇ、、　ｅｔ　ａｔ、、　Ｎａｔｕｒｅ　（１９８
５）　２５６　：　４９５−４９７により最初に記述さ
れた体細胞ハイブリダイゼーション操作により作成し得
る。この操作で用いられる株化細胞系、試薬および条件
はよく知られている。

簡単に言えば、この操作には、上記のように宿主を免疫
化し、抗体産生細胞を採取し、ポリエチレングリコール
のような融合促進剤を用いてこれらの細胞を適当な株化
細胞系と融合し２選択培地中で細胞を増殖させてハイブ
リダイズしなかった相手細胞を除き、免疫原に対する抗
体を産生ずるハイブリドーマを同定し、これらのハイプ
リドーマを培養し、得られた培養液からＭａｂを採取す
ることが含まれる。与えられた特異的免疫抑制のため。

融合に用いた株化の相手はまた。　Ｍａｂに対し被験体
と和合可能な性質を与える必要はない。上記のように、
抗Ｌ３Ｔ４等価物モノクローナル抗体は、ヒトおよび多
くの他の種に対するものが市販されている。

ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体の抗原結
合断片（Ｆ（ａｂ）、　Ｆ（ａｂ’）、　Ｆ（ａｂ’）
ｚ、　Ｆ（ｖ）は、適当なプロテアーゼ、例えばＦ　（
ａｂ）の場合はパパイン＊　Ｆ（ａｂ’）ｚの場合はペ
プシン、で完全な免疫グロブリンを分解することにより
作成する。

用いられる抗体のクラス（およびサブクラス）は重要で
はない。ポリクローナル抗血清はおそらくＩｇクラスの
混合物である。生成したＭａｂは単一のサブクラスのも
のである。

もしＬ３Ｔ４等価物結合成分が免疫毒素として投与され
る場合は、標準的な抱合技術を用いて抗体成分を細胞毒
素に抱合させる。Ｔｈｏｒｐｅ、　Ｐ、　Ｅ、＋　ｅｔ
ａｔ　（前出）　；　０１ｓｎｅｓ＋　Ｓ、、　ｅｔ　
ａｌ＋　（前出）。典型的なカップリング剤には１例え
ば還元可能なジスルフィド結合を作る３、３゛　−ジメ
チル−ジチオ（ビス）プロピオン酸およびＮ−サクシニ
ミジル−３−（２−ビリジルージチオ）プロピオン酸（
ＳＰＤＰ）　　；および例えばチオエステルを作る６−
マレイミシルカプロン酸の例えばＮ−ヒドロキシサクシ
ニジルエステルが含まれる。グルタルアルデヒドまたは
カルボジイミドのような他のカップリング剤は、他の化
学現象を生み出す。

細胞毒素成分は９例えば細菌または植物の毒素。

もしくは、その酵素学的活性断片または類似した活性タ
ンパク質を含むそれらの一部である。このような毒素の
例として、ジフテリア毒素、シュードモナス、分泌毒素
、リシン、アブリン、モモルディン、ゲロニン、などが
ある。毒素およびタンパク質は、細菌または植物から抽
出するか、または（もし比較的短ければ）既知のペプチ
ド合成技術を用いて、または遺伝子配列が入手可能なら
ば組み換え技術により１合成する。

豊且煎五凰 所望の特異的免疫抑制を与えるための同時注射に用いら
れる物質の景および性質は、抗原の型に依存する。

アレルギー環に関しては、薬のような可溶性抗原が環境
的または意識的のいずれで投与されたかに関わらず、抗
原成分は１０μｇから１■の量を適当な賦形剤に溶かし
て静脈注射することにより簡単に投与することができる
。あるいはまた、環境的アレルギー環に関しては、接触
は“自然の”接触に類似しており、エアロゾルまたは経
口組成物を使用し、計算した接触の度合に近い量が適当
である０例えば、被験体を自然に生成する花粉に対する
免疫応答から保護するために“花畑”の方法が用いられ
るかも知れない。これは９例えばアカシアの花が咲く季
節の初めに、保護結合成分の投与と同時に、またはその
ような投与後の回復期間内に、被験体を不快な花の近く
に置くことである。

これらの自然接触と、特異的アレルギー環の単離および
結合成分の投与時または投与直後の注射という高度に人
為的な方法との間の漸次移行も用いられる。抗原を投与
するための適当な薬剤組成の・処方箋は、当業者にはよ
く知られている。

もしアレルギー環が治療用剤である場合、投与されるよ
うに意図されたものに近い抗原の量、および投与におけ
る類似の経路、が用いられる。一般的に言って、抗原は
すでに適当に処方された薬剤組成として入手可能であり
２期待される接触量と期待される投与経路は既知である
ので、一般にこの保護が有する問題はより簡単なもので
ある。

移植組織、特に同種移植片についての場合における拒絶
の抑制に関しては、多様な投与の様式が可能である。同
種移植片とは、意図された宿主と同じ種の個体由来であ
るが宿主と遺伝学的に異なる個体由来である組織もしく
は器官を特定する多様な細胞もしくは連合した細胞であ
る。これらの細胞の多様性それ自身には、心臓、腎臓、
肝臓。

肺、などのような血管系器官が含まれる。内分泌腺（脳
下垂体、甲状腺、副腎、副甲状腺、および膵Ｗ＆）また
は皮膚移植片は、移植片の拒絶を引き起こす原因となる
主要組織適合性抗原を含まないであろう。これらの抗原
は、移植細胞中に不純物として含まれる白血球のような
供与細胞により運搬される。

２つの一般的な方法が用いられる：移植材それ自身を抗
原源として用いることができる。あるいは、特定の組織
適合性抗原を分離して得、それのみもしくは移植片供与
体の組織適合性抗原を有する細胞、すなわち末梢血液リ
ンパ球、として投与してもよい。このような供与白血球
表面にあって運搬され２組織拒絶の原因となる主要な抗
原は。

ネズミＩａの等価抗原であり、ヒトではＨＬ＾−ＤＲ（
ＭＨＣクラス■抗原）と名付けられている。ヒトＨＬＡ
−ＤＲ抗原はサブクラス化されており、もし供与体の型
が決められていれば、適当な抗原１例えば供与体組織に
伴う末梢血液リンパ球は手近に得ることができ、移植前
にＬ３Ｔ４等価物結合成分の投与と一緒に、もしくは投
与の回復期間内に注射する。たぶん、より大ざっばであ
るが、効率的な投与の様式は、移植片と一緒、またはそ
の直前におけるＬ３Ｔ４等価物結合成分の同時注射、も
しくは、保護結合成分と共に、適度に細かく分割し処方
した組織の一部の移植前同時注射である。

甚 前節から分かるように、各々の特異的抗原はその性質に
適した別の投与経路を供する。すべてのものは、精製抗
原取得および静脈投与の利用の可能性を供する。ある場
合には、適当な薬剤組成の特異的抗原と結合成分との混
合物を含む組成物を注射することが可能である。

要約すると、一般的に抗体に関しては、静脈投与が最も
便利であるが、他の様式の投与も同様に有用である。消
化管外投与以外の経路には、皮下。

腹膜中、または筋肉中注射が含まれる。注射可能なもの
は、液体状の溶液もしくは懸濁液、注射前に液中で溶液
または懸濁液にすることができる固体、もしくは乳状液
、として調製が可能である。

適当な賦形剤は１例えば、水１食塩水、デキストロース
、グリセロール、エタノール、などである。

さらに、必要に応じて、投与される薬剤組成物は。

湿潤剤もしくは乳化剤、　ｐＨ緩衝剤などの無毒な補助
物質を少量含んでもよい。本発明の方法で投与される特
異的抗原のような、免疫系を刺激するための物質に関し
てはフロイントの完全アジュバントのようなアジュバン
トが一般に用いられる。

非経口投与に対する追加的な方法は、一定量の投与を保
つような、ゆっくり放出する系、もしくは維持された放
出の系を移植することを用いる。

全身的投与は座薬によって行われる。このような方式に
ついては、伝統的な包装および担体１例えばポリアルカ
レン・グリコールまたはトリグリセリド、が含まれる。

このような座薬は、　Ｌ３Ｔ４等価物結合成分もしくは
抗原を０．５％から１０％、好ましくは１％から２％、
の範囲で含む混合物から作られる。

エアロゾル投与に関しては、抗原は細かく分割された形
で表面活性剤と推進剤と共に供給するのが好ましい。活
性成分の典型的なパーセンテージは０．０１から２０重
量％であり、好ましくは０．４％から１．０重量％であ
る。もちろん表面活性剤は無毒でなければならず、好ま
しくは推進剤に可溶性であるべきである。このような薬
剤の典型は、カプロン酸またはオクタン酸のような脂肪
酸のエステルモジくは不完全エステル、マンニトールや
ソルビトールのようなポリオール、またはそれらの無水
物もしくはエステル、およびそれらのポリオキシエチレ
ン誘導体とポリオキシプロピレン誘導体。

である。好ましい表面活性剤には、ソルビタンのオレー
ト、例えば”Ａｒ１ａｃｅｌ　Ｃ″、　　”　５ｐａｎ
　８０’、および“５ｐａｎ　８５”の登録商標に販売
されているもの。

が含まれる。表面活性剤は１重量組成で０．１％から２
０％、好ましくは０．２５％から５％を占める。組成の
バランスは通常の推進である。例えば、ブタンやプロパ
ンのような低分子アルカン、および好ましくは＋　　”
　Ｆｒｅｏｎ”の登録商標で販売されているような、フ
ッ化アルカンまたはフッ化塩化アルカンである。エアロ
ゾルを作る場合、適当なバルブの付いた容器に細かく分
割した活性成分と表面活性剤とを含む適当な推進剤を詰
める。成分はバルブを開いて放出するまでに加圧下で保
存する。

経口投与する場合、もしくは投与用に再構成する場合に
は、抗原もしくはＬ３Ｔ４３重物結合成分の固体組成物
を用いてもよい。従来の無毒の固体担体には２例えば、
薬品等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、もし
くはステアリン酸マグネシウムが含まれる。それに対応
する液体の薬品的に投与可能な組成物は、上記の担体中
に、上記の抗原もしくは結合成分と任意の薬品的アジュ
バントを溶解、拡散などさせることにより調製すること
ができる。

上記の投与形態を調製する実際の方法は当業者には既知
であるか、または容易に解るであろう。

例えば、　Ｒｅｎ＋ｉｎ　ｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃ
ｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅ。

Ｍａｃｋ　　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　　Ｃｏｍｐａｎｙ
、　　Ｅａｓｔｏｎ、　　ＰＡ、　　１５ｔｈＥｄｉｔ
ｉｏｎ、　１９７５を見よ。投与する組成物と方式には
、少なくとも、所望の特異的な免疫抑制を得るに効果的
な量の、多量の結合成分あるいは抗原が含まれる。

キット− 治療投与用として、特異的抗原と保１１Ｌ３Ｔ４等価物
結合成分は、キットに包装しであるのが便利である。従
って２例えば、アレルギーの治療用キットには、最も好
ましくは、フロイントの完全アジュバントのようなアジ
ュバント調製液を含む適当な賦形剤に、ブタフサのタン
パク質、牛乳のタンパク質、あるいは他のアレルギー性
物質、のようなアレルギー原を単位投与レベル含む容器
が備わっているだろう。もう１つの容器は９例えば、　
ＬａＩ３に特異的な適当なモノクローナル抗体、あるい
は抗体から得た免疫毒素を、生理的食塩水あるいは他の
薬学上の賦形剤に懸濁したような投与形態か、または再
構成される固体形態か、を供給するであろう。ある抗原
／結合成分の組み合わせでは。

これらの成分を混合物として供給してもよい。このよう
なキットの付加成分は、滅菌使い捨て注射器であっても
よい。すべての材料は、その使用指示にそって、当該分
野で知られているように投与用の便利な容器に包装され
てよい。

（実施例） 以下の実施例は実例を示すものであって２本発明を限定
するものではない。

マツコラクジラのミエオグロビンをＢａ１ｂ／Ｃマウス
における抗原として用い、そして、この抗原に関して特
異的な免疫抑制を生じるＧＫｌ、５分泌Ｍａｂの能力を
、４つの方法を用いて確認した。その４つの方法は、抗
原と防御的抗体の注射時機においてのみ異なるものであ
る。各方法において、３匹の生後６〜８週間のマウスか
ら成る１つの実験グループと、３匹の同様のマウスから
成る２つの対照グループを用いた。１つの対照グループ
には。

ＧＫｌ、５分泌Ｍａｂの代わりに＋　　ａ　　Ｔｈｙ　
Ｍａｂを同時期に同量注射して対応する投与を行なった
。もう１つの対照グループには、対応する量の緩衝液を
注射した。すべての方法におけるすべてのグループに、
０日目にフロイントの完全アジュバントに溶かした１０
０μｇのミエオグロビンを投与し、その後。

１４日おきにアジュバントに溶かした５０μｇのミエオ
グロビンの注射を続けた。各免疫化後、血清を７日目と
１００日目採取し、以下の実施例３に示すように、　Ｅ
ＬＩＳＡにより抗ミエオグロビン全免疫グロブリン（Ｉ
ｇＭとＩｇＧの両方を含む）の存在を検定した。その特
定の方法は以下の通りである。

ｉＬＬ：　　（抗体と抗原を腹腔内注射した。）抗体ニ
ー１日と０日目に２００μｇ、１日と２日目に１００μ
ｇ。

抗原：０日目に１００μｇ、それ以後１４日おきに５０
μｇ。

方法」ノ　（抗体と抗原を静脈内注射した。）抗体：ｏ
、５＋　１．１．５．および２日目に１００μｇ。

抗原二〇日月に１００μｇ、それ以後１４日おきに５０
μｇ。

′Ｊ３ｉ’　　（抗原と抗体を静脈内注射した。）抗体
：０，１．および２日目に１００μｇ。

抗原：０．１．および２日目に１００μｇ、それ以後１
４日おきに５０μｇ＃ 方法」−（抗原と抗体を静脈内注射した。）抗体：０．
１．および２日目に１００μｇ。

抗原：ｏ、ｉ＋および２日目に１００μｇ、それ以後１
４日おきに５０μｇ。

第１図は、各々４つの方法においてマウスから典型的な
採血で得られた結果を示す。結果は、血清希釈の関数と
してＥＬＩＳＡ単位（下記実施例３を見よ）で示す。示
したデータは、０日以後の６回の１４日間の後、９日経
ったものであるが、初期の採血で得られた結果を代表す
るものである。白丸はα−ｔｈｙを注射した対照におけ
る。ミエオグロビンに特異的な全免疫グロブリンのレベ
ルを示す。

黒丸は２つの血清希釈での実験グループの対応する結果
を示す。

４つの方法すべてから同様の結果を得た。対照は、血清
希釈と相関して高レベルの特異的な抗ミエオグロビン免
疫グロブリンを示している。抗ミエオグロビン抗血清は
、　ＧＫｌ、５分泌Ｍａｂを注射したグループにはない
。

各々３匹のマウスから成る実験グループと対照グループ
は、実施例１で用いたものと同様である。

すべてのグル−プに０日目に１００μｇのミエオグロビ
ンを投与し、それ以後１４日おきに１００μｇのミエオ
グロビンを続いて注射した。１４４日目、　ＧＫｌ、５
分泌Ｍａｂあるいは対照を１００μｇ投与し、血清を様
々な間隔で採取し、ミエオグロビンに対して特異的なＩ
ｇＧをＥＬＩＳＡによって検定した。結果は第２図に示
す。ここではＩＩ！ＬＩＳＡ単位を時間に対してプロッ
トしである。

点線と実線で結んだ白丸はそれぞれ緩衝液とα−’ｒｈ
ｙを注射した対照の血清中の抗ミエオグロビンＩｇＧの
レベルを示す。黒丸はＧＫｌ、５分泌Ｍａｂを注射した
マウスの血清中のＩｇＧレベルを示す。対照マウスのＩ
ｇＧレベルは、その動物が続いて抗原を投与されるに従
って、単調に上がる。しかしながら、１４４日目ＧＫｌ
、５を投与されたマウスは続く抗原注射に対するＩｇＧ
　２次的応答を示さない。

全抗ミエオグロビンＩｇ：マイクロタイタープレート　
（Ｄｙｎａｔｅｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ＋　Ａ
ｌｅｘａｎｄｒｉａ、　ＵＡ）を、　ＰＢＳ　ニ溶かし
た１１００ｐ／　ｍｌｌ　（’）　？　ン’：ｌ　’ｙ
　’）シラのミエオグロビンで被覆して、室温で１時間
あるいは４℃で一晩おいて、　ＰＢＳで洗った。残存し
ている非特異的な結合部位を３％ＢＳＡ　ＰＢＳで飽和
させ、そのプレートを洗った。５０μｌの血清希釈液を
加えて、そのプレートを室温で２時間インキュベートし
１次いでＴ％ｖｅｅｎ　２０を含む洗浄緩衝液で洗った
。

結合したＩｇは、１００〜２００μｌの希釈した。パー
オキシダーゼが結合したヤギの抗マウスＩｇ　（ＧＡＭ
Ｉｇ）を用いて、室温で２時間インキュベートし。

その後洗浄緩衝液で３回洗って、検出した。検出液ＯＰ
Ｄ／Ｈ□０２を各ウェルに加え、５分インキュベートし
て各ウェルのＯＤ４ｗｚをグイナテックＥＬＩＳＡリー
ダーで測定した。ＯＤ単位は標準手順によりμｇタンパ
ク質と相関した。

ＩｇＧ　　：手順は、ラベルしたヤギの抗マウスＩｇＧ
をヤギの全抗マウスＩｇの代わりに用いたこと以外は、
上記と同じである。

Ｂａ１ｂ／Ｃマウスに３日続けて、フロイントの完全ア
ジュバントに溶かしたＧＫｌ、５分泌Ｍａｂを２００μ
ｇ腹腔内注射した。３匹のマウスのリンパ節細胞を取っ
ておいて、細胞表面の表現型を２球型子細胞マーカーと
してｔ、ｙｔｔを用いて、２色のＦＡＣ５分析によって
検定した。Ｌ３Ｔ４とＬｙｔ２に対し染まるリンパ節細
胞がマウスにおける全Ｔ細胞の分布を構成し。

そしてそれぞれの量を第３図に総Ｔリンパ球におけるパ
ーセンテージとして表した。第３図に示されるように、
抗体の投与と同時に、　Ｌ３Ｔ４の分布がｔ、ｙｔ２の
ために劇的に落ち、３Ｔ日間にわたってほとんど直線的
に回復し、その時点で前の値の約５０％に達する。

より強い免疫原であるキーホール・リンピットへマシア
ニン（ＫＬＨ）と比較して、マツコラクジラのミエオグ
ロビンについて、特異的な免疫抑制を生じるＧＫｌ、５
分泌Ｍａｂの能力を、実施例１の手順と方法によって調
べた。但し、これらタンパク質に対するＩｇＧを定期的
に測定した。その結果を第ＡふｔｖＢ ４〔す。抗Ｌ３Ｔ４を注射したマウスは、定期的な抗原
の投与にもかかわらず、５６日間の試験期間中、より弱
い抗原であるマツコラクジラのミエオグロビンに対して
低い抗体力価を維持できた。より強い抗原ＫＬＨに対し
ては、免疫応答性は実施例４で決定したように、ヘルパ
ーリンパ球のための回復期間の後回復した。

Ｂａ１ｂ／Ｃマウスを５５■／ｋｇストレプトシトシン
の静脈内注射によって糖尿病にした。処置後−週間以内
で、グルコースレベルが上昇したことにより。

マウスが実際に糖尿病であることがわかった。それぞれ
５匹のマウスから成る比較グループを用いて、同腹マウ
スの膵臓組織からランゲルハンス島とり出すことによっ
て調製したランゲルハンス島の同質の移植組織は、Ｉ！
尿病を回復さすことができ、その結果、マウスの生存期
間は１８００〜２０００島の投与から１００日を越える
ことが示された。（ランゲルハンス島はＬｅｒｍａｒｃ
ｋ、八、、ｅｔ　ａｌ、　Ｊ　Ｃｅ１ｌ　Ｒｉｏｔ（１
９７６）７１　：　６０６により開示された技術を手直
しした方法で単離する。）異質種の同様なランゲルハン
ス島標品を調製し、そして糖尿病被験体に同レベルに投
与した時、一様に拒絶され１０日以内の生存期間であっ
た。

５匹のマウスから成る３組の付加グループには。

ランゲルハンス島投与後−１，０，＋１および＋２日ロ
ー、　ＧＫｌ、５により分泌されたＭａｂを投与した。

ここでは初めの３日間に１００μｇ、最後に５０μｇで
計３５０μｇを投与した。このように処理し１次いで６
００〜８００島を移植したグループは、同質の処理をし
たグループに匹敵する生存期間を示し。

８５０〜１２００島を投与したものも同様であった。予
備のデータは、　１５００以上のランゲルハンス島を投
与した場合もまた同じ生存期間であろうことを示してい
る。

正常および処理されたマウスのリンパ節細胞懸濁液を２
％ｐｃｓと０．１％ＮａＮ５を含むＰＯＳ中に調製し、
フィコール−ハイバークでの勾配遠心により赤血球を除
いた。５Ｘ１０’の細胞を、あらかじめ力価を調べた結
合抗体２５μβ中で３０分間水中に置き、そして２回洗
った。２色検定のために、緑色蛍光は直接ＦＩＴＣ−結
合試薬（抗Ｌ３Ｔ４および抗Ｌｙｔ２）から得た。２度
目のインキュベーションで。

アビジンでラベルしたテキサス　レッドを加え。

ビオチンラベルした初期段階の抗体（抗Ｌｙｔｌ）に結
合させる。バックグラウンド蛍光レベルに対する対照と
して、染色していないか、または同型の無関係な抗体と
インキュベートした対照細胞調製物を検定した。流束微
蛍光分析は、対数増幅器を装備した修正ＦＡＣ５ｎシス
テム（Ｂｅｃｔｏｎ−Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ。

Ｍｏｕｎｔａｉｎ　Ｖｉｅｗ、　ＣＡ　）で行なった。

データ分析はＨａｙａｋａ、に：、ｅｔ　ａｌ、　Ｊ　
Ｅｘｐ　Ｍｅｄ　（１９８８）　１５７　：２０２に述
べられであるように行なった。死細胞は、散乱礼法（ｓ
ｃａｔｔｅｒ　ｇａｔｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ）と更に最
終濃度１μｇ／ｍｌでのヨウ化プロピジウム染色により
２分析から除いた。データは緑と赤の蛍光強度の増加を
１ｏｇＩｏの目盛りで表し９等高線プロットで示した。

（発明の概要） ヘルパーＴ細胞上のＬ３Ｔ４分化抗原を妨害することに
より、免疫系を選択的に抑制し、そして特異的抗原に対
して免疫耐性を与える方法を述べる。

被験体のＬ３Ｔ４等価物に対し特異的な結合成分と。

特異的抗原との同時投与は、該被験体が以前に該抗原に
さらされたか否かに拘らず、該被験体の抗原に対する免
疫的応答能を軽減させる。

４、図　のΔ単なｉ′日 第１図は、　ＧＫｌ、５モノクロ一ナル抗体（Ｍａｂ）
を同時注射した場合とそうでない場合の、マウスで得ら
れた全特異的な抗ミエオグロビンの免疫グロブリンレベ
ルを示す。

第２図は、　ＧＫｌ、５　Ｍａｂを注射した場合とそう
でない場合の、マウスの血流中の抗ミエオグロビンＩｇ
Ｇのレベルを示す。

第３図は、　ＧＫｌ、５分泌Ｍａｂを投与した場合の。

応答の抑制の比較を示す。

政府は本発明の権利を、　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ
　）Ｉｅａｌｔｈａｎｄ　Ｈｕｍａｎ　５ｅｒｖｉｃｅ
ｓによって与えられたＮＩＨＧｒａｎｔ隘Ａｌ−１８７
１６に従い、所有する。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、脊椎動物被検体において特異的抗原に対する免疫耐
   性を与える方法を行うのに使用される組成物であって、
   Ｌ３Ｔ４等価物に特異的に結合する成分を含み、該成分
   が薬学的に許容されるキャリアーとの混合物である組成
   物。 ２、前記方法が、前記被検体に前記薬学的組成物を投与
   すること、そして更に前記被検体に該組成物投与と同時
   に、またはヘルパーＴ細胞回復期内に、該特異抗原を投
   与すること、を含む特許請求の範囲第１項に記載の組成
   物。 ３、前記脊椎動物がヒトであり、そして前記Ｌ３Ｔ４等
   価物結合成分がＬｅｕ３とＴ４から選択された特許請求
   の範囲第１項に記載の組成物。 ４、前記Ｌ３Ｔ４等価物結合成分が免疫毒素またはモノ
   クローナル抗体の形である特許請求の範囲第１項または
   第２項に記載の組成物。 ５、前記抗原が移植組織またはアレルギー源である特許
   請求の範囲第１項または第２項に記載の組成物。 ６、前記脊椎動物が以前に前記抗原にさらされた特許請
   求の範囲第１項または第２項に記載の組成物。 ７、特異的抗原に免疫耐性を与えるキットであって、特
   異的抗原の適当量を薬学的に許容される賦形剤に含む容
   器およびＬ３Ｔ４等価物結合成分を薬学的に許容される
   賦形剤に含む容器を有するキット。 ８、特異的抗原に対する免疫耐性を与える薬学的組成物
   であって、有効量の特異的抗原と有効量のＬ３Ｔ４等価
   物結合成分を含み、該抗原と該成分が１つまたはそれ以
   上の薬学的に許容される賦形剤との混合物である組成物
   。