JPS6233871B2 - - Google Patents
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- Publication number
- JPS6233871B2 JPS6233871B2 JP56162999A JP16299981A JPS6233871B2 JP S6233871 B2 JPS6233871 B2 JP S6233871B2 JP 56162999 A JP56162999 A JP 56162999A JP 16299981 A JP16299981 A JP 16299981A JP S6233871 B2 JPS6233871 B2 JP S6233871B2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- water
- multilayer
- filter member
- test device
- culture
- Prior art date
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- Expired
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/10—Petri dish
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/02—Membranes; Filters
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
発明の背景
(技術分野)
本発明は培養検査操作を簡便にした、検体から
細菌、真菌等の微生物を分離培養する器具に関す
るものである。 (先行技術およびその問題点) 従来は、検査材料によつてその培養操作は異な
るが、例えば血中菌の検査を例にとると、まず液
体増菌培地と血液を混和・培養し、その後血液寒
天平板、チヨコレート寒天平板等の分離培地を用
いて分離培養を行つている。このように検体から
微生物を直接分離することが不可能で、増菌培養
という付加的操作を必要とするため、相当繁雑な
操作と時間を要している。また、検体中の微生物
数が少ない場合には検出不可能な場合もあつた。 発明の目的 従つて、本発明の目的は検体中微生物の増菌培
養等の付加的操作を必要とせず、口過によつて直
接検体中の微生物を集め、そのまま分離培養が可
能な多層微生物培養検査器を提供しようとするに
ある。 発明の具体的構成 本発明による多層微生物培養検査器は、所定の
微生物の培養に適した培地を含漬させ、乾燥させ
た吸水性部材と、この吸水性部材上に固着され、
微生物を通さない大きさの孔を有するフイルター
部材とを滅菌状態で積層してなるものである。フ
イルター部材の上表面およびまたはフイルター部
材と吸水性部材との界面には検体中に存在するこ
とのある抗生物質を吸着する物質をコートしてお
く。吸水性部材の吸水能力は過する検体量とほ
ぼ等しく、また吸水性部材に含漬乾燥させる培地
の量は、過の際フイルター部材を透過した検体
に溶解された時その濃度が実質的に通常液体培地
として使用されている濃度になるようにするのが
好ましい。フイルター部材の孔径は微生物を実質
的に通さないものとし、0.75ミクロン以下にする
のが良い。吸水性部材とフイルター部材とは積層
固着されるが、その固着は親水性高分子接着剤に
よる接着により行うのが好適である。 次に、本発明による多層微生物培養検査器を添
付図面に示す好適実施例につき血液培養を代表例
として詳細に説明する。 本発明による多層微生物培養検査器は、所定の
細菌の培養に適した培地を含漬乾燥させた吸水性
部材1上に、微生物を通さない大きさの孔2を多
数有するフイルター部材3を積層して固着し、適
当な方法で滅菌したものである(第1図および第
2図参照)。血液培養の場合のように、検体中に
抗生物質を含んでいることがあるので、第1図に
示すようにフイルター部材3の上表面に、あるい
は、第2図に示すようにフイルター部材3と吸水
性部材1との界面に抗生物質を吸着する樹脂(例
えば、マリオンラボラトリーズ社製)の被覆4を
形成しておくのが好ましい。 上述した吸水性部材の構成材料は水溶液を吸収
するものであれば何でも良いが、速やかな吸収能
を有するセルロース系の紙、不織布などが望ま
しい。 フイルター部材の構成材料は検体に対して不活
性であれば何でも良いが、代表例としてはポリカ
ーボネート、ポリアミド、セルロースエステルな
どを挙げることができ、市販のものとしてはミリ
ポア(商標、ミリポアコーポレーシヨン)、メト
リセル(商標、ゲルマンインストルメントカンパ
ニー)などがある。 このフイルター部材の孔径は全ての微生物を
過する機能を重視するならば、最小の微生物であ
る霊菌をも過できる0.22ミクロンが最適である
が、フイルター部材の孔径が目的とする微生物よ
り大きくとも微生物が全部通過してしまうわけで
はないので、微生物の実質的補促ができ、吸水部
材への検体の透過が早い0.75ミクロン以下に、望
ましくは0.45ミクロン以下にするのが良い。 吸水性材料に含漬させる培地は検体に適する培
地であれば何でも良いが、望ましくは嫌気培養お
よび好気培養によつてそれぞれ嫌気性菌および好
気性菌が増殖する培地が良い。前述の血液培養に
適した培地としては例えばチオグリコレート培地
を挙げることができる。血液培養の場合において
嫌気および好気培養に適する培地の代表的組成例
を下表1に示す。かかる培地を含漬させた多層微
生物培養検査器は検査時2個用意し、それぞれに
検体を流しこんで過し、1個は嫌気培養に、1
個は好気培養に用いることができ便利である。
細菌、真菌等の微生物を分離培養する器具に関す
るものである。 (先行技術およびその問題点) 従来は、検査材料によつてその培養操作は異な
るが、例えば血中菌の検査を例にとると、まず液
体増菌培地と血液を混和・培養し、その後血液寒
天平板、チヨコレート寒天平板等の分離培地を用
いて分離培養を行つている。このように検体から
微生物を直接分離することが不可能で、増菌培養
という付加的操作を必要とするため、相当繁雑な
操作と時間を要している。また、検体中の微生物
数が少ない場合には検出不可能な場合もあつた。 発明の目的 従つて、本発明の目的は検体中微生物の増菌培
養等の付加的操作を必要とせず、口過によつて直
接検体中の微生物を集め、そのまま分離培養が可
能な多層微生物培養検査器を提供しようとするに
ある。 発明の具体的構成 本発明による多層微生物培養検査器は、所定の
微生物の培養に適した培地を含漬させ、乾燥させ
た吸水性部材と、この吸水性部材上に固着され、
微生物を通さない大きさの孔を有するフイルター
部材とを滅菌状態で積層してなるものである。フ
イルター部材の上表面およびまたはフイルター部
材と吸水性部材との界面には検体中に存在するこ
とのある抗生物質を吸着する物質をコートしてお
く。吸水性部材の吸水能力は過する検体量とほ
ぼ等しく、また吸水性部材に含漬乾燥させる培地
の量は、過の際フイルター部材を透過した検体
に溶解された時その濃度が実質的に通常液体培地
として使用されている濃度になるようにするのが
好ましい。フイルター部材の孔径は微生物を実質
的に通さないものとし、0.75ミクロン以下にする
のが良い。吸水性部材とフイルター部材とは積層
固着されるが、その固着は親水性高分子接着剤に
よる接着により行うのが好適である。 次に、本発明による多層微生物培養検査器を添
付図面に示す好適実施例につき血液培養を代表例
として詳細に説明する。 本発明による多層微生物培養検査器は、所定の
細菌の培養に適した培地を含漬乾燥させた吸水性
部材1上に、微生物を通さない大きさの孔2を多
数有するフイルター部材3を積層して固着し、適
当な方法で滅菌したものである(第1図および第
2図参照)。血液培養の場合のように、検体中に
抗生物質を含んでいることがあるので、第1図に
示すようにフイルター部材3の上表面に、あるい
は、第2図に示すようにフイルター部材3と吸水
性部材1との界面に抗生物質を吸着する樹脂(例
えば、マリオンラボラトリーズ社製)の被覆4を
形成しておくのが好ましい。 上述した吸水性部材の構成材料は水溶液を吸収
するものであれば何でも良いが、速やかな吸収能
を有するセルロース系の紙、不織布などが望ま
しい。 フイルター部材の構成材料は検体に対して不活
性であれば何でも良いが、代表例としてはポリカ
ーボネート、ポリアミド、セルロースエステルな
どを挙げることができ、市販のものとしてはミリ
ポア(商標、ミリポアコーポレーシヨン)、メト
リセル(商標、ゲルマンインストルメントカンパ
ニー)などがある。 このフイルター部材の孔径は全ての微生物を
過する機能を重視するならば、最小の微生物であ
る霊菌をも過できる0.22ミクロンが最適である
が、フイルター部材の孔径が目的とする微生物よ
り大きくとも微生物が全部通過してしまうわけで
はないので、微生物の実質的補促ができ、吸水部
材への検体の透過が早い0.75ミクロン以下に、望
ましくは0.45ミクロン以下にするのが良い。 吸水性材料に含漬させる培地は検体に適する培
地であれば何でも良いが、望ましくは嫌気培養お
よび好気培養によつてそれぞれ嫌気性菌および好
気性菌が増殖する培地が良い。前述の血液培養に
適した培地としては例えばチオグリコレート培地
を挙げることができる。血液培養の場合において
嫌気および好気培養に適する培地の代表的組成例
を下表1に示す。かかる培地を含漬させた多層微
生物培養検査器は検査時2個用意し、それぞれに
検体を流しこんで過し、1個は嫌気培養に、1
個は好気培養に用いることができ便利である。
【表】
培地を含漬乾燥させた吸水性部材とフイルター
部材との固着は接着により行うのが良いが、接着
剤としてはポリビニルピロリドン(PVP)などの
親水性高分子接着剤が好適である。 このように構成される本発明の多層微生物培養
検査器の形状は特に限定されることはないが、一
般に使用されているシヤーレ等の適用器具に円形
のものが多いので円形にするのが最も望ましい。
また、そのサイズについても特に限定されること
はないが、例えば検体として血液5mlを滴下する
場合、これに適合させるためには直径90mm、培地
含漬部の肉厚は2〜3mmとするのが良い。 発明の具体的作用効果 本発明の多層微生物培養検査器の使用方法を血
液培養を例にとつて説明する。検体(血液)は適
当な抗凝固剤で抗凝固された状態で、これにサポ
ニン等の溶血剤を無菌的に加えて赤血球を全溶血
させ、これを第1図または第2図に示すような本
発明の多層微生物培養検査器上に滴下する。血液
中の微生物はフイルター部材3により別され、
これ以外のものはフイルター部材3の孔2を透過
して吸水性部材1に吸着され、吸水性部材に含漬
乾固されている培地を溶解する。前述したよう
に、所定量の検体の投与により、吸水性部材1は
程度な吸水能力を有するように、また培地は通常
使用される濃度になるよう構成されているから、
本発明においてはフイルター部材の孔上に別さ
れた微生物は適当な条件の培地上で培養がなされ
る。これを適当な培養条件下で培養する。この培
養は、前述の如く、検体および検査器ともに2個
用意し、1方は好気的に、他方は嫌気的に行うよ
うにするのが望ましい。このようにして培養され
た微生物は、第3図に示すように、フイルター部
材3上でコロニー5を形成する。また、血液中に
抗生物質が含まれていても吸着除去されるから、
微生物の培養に悪影響を及ぼさない。 また、本発明による多層微生物培養検査器は、
第4図に示されるように、下容器6に地点7にお
いて融着し、蓋8を被着できるようにし、蓋8と
下容器6との間には通気用隙間9を有し、全体的
に滅菌して構成することもできる。これにより、
培養操作中の汚染の機会も減少するし、使用上非
常に便利である。 以上説明した処から明らかなように、本発明に
よる多層微生物培養検査器には以下に述べるよう
な多くの利点がある。 (1) 従来の培養検査におけるような増菌培養が不
要で、直接分離培養が可能であると同時に、培
養作業が極めて簡素化される。 (2) 培地は吸水性材料中に含漬乾固されているか
ら、培地の安定性が高く、乾燥状態からの通常
状態への溶解は、吸水性部材の吸水能および培
地の含漬量を適度に調節できるから、常に一定
になされ、通常使用されている状態に復帰し、
培養条件にばらつきを与えない。 (3) 微生物濃度が小さくても本発明品によれば検
出が可能となる。 (4) 検体が抗生物質を含んでいても特別な操作を
行うことなく正確な検査結果を得ることができ
る。
部材との固着は接着により行うのが良いが、接着
剤としてはポリビニルピロリドン(PVP)などの
親水性高分子接着剤が好適である。 このように構成される本発明の多層微生物培養
検査器の形状は特に限定されることはないが、一
般に使用されているシヤーレ等の適用器具に円形
のものが多いので円形にするのが最も望ましい。
また、そのサイズについても特に限定されること
はないが、例えば検体として血液5mlを滴下する
場合、これに適合させるためには直径90mm、培地
含漬部の肉厚は2〜3mmとするのが良い。 発明の具体的作用効果 本発明の多層微生物培養検査器の使用方法を血
液培養を例にとつて説明する。検体(血液)は適
当な抗凝固剤で抗凝固された状態で、これにサポ
ニン等の溶血剤を無菌的に加えて赤血球を全溶血
させ、これを第1図または第2図に示すような本
発明の多層微生物培養検査器上に滴下する。血液
中の微生物はフイルター部材3により別され、
これ以外のものはフイルター部材3の孔2を透過
して吸水性部材1に吸着され、吸水性部材に含漬
乾固されている培地を溶解する。前述したよう
に、所定量の検体の投与により、吸水性部材1は
程度な吸水能力を有するように、また培地は通常
使用される濃度になるよう構成されているから、
本発明においてはフイルター部材の孔上に別さ
れた微生物は適当な条件の培地上で培養がなされ
る。これを適当な培養条件下で培養する。この培
養は、前述の如く、検体および検査器ともに2個
用意し、1方は好気的に、他方は嫌気的に行うよ
うにするのが望ましい。このようにして培養され
た微生物は、第3図に示すように、フイルター部
材3上でコロニー5を形成する。また、血液中に
抗生物質が含まれていても吸着除去されるから、
微生物の培養に悪影響を及ぼさない。 また、本発明による多層微生物培養検査器は、
第4図に示されるように、下容器6に地点7にお
いて融着し、蓋8を被着できるようにし、蓋8と
下容器6との間には通気用隙間9を有し、全体的
に滅菌して構成することもできる。これにより、
培養操作中の汚染の機会も減少するし、使用上非
常に便利である。 以上説明した処から明らかなように、本発明に
よる多層微生物培養検査器には以下に述べるよう
な多くの利点がある。 (1) 従来の培養検査におけるような増菌培養が不
要で、直接分離培養が可能であると同時に、培
養作業が極めて簡素化される。 (2) 培地は吸水性材料中に含漬乾固されているか
ら、培地の安定性が高く、乾燥状態からの通常
状態への溶解は、吸水性部材の吸水能および培
地の含漬量を適度に調節できるから、常に一定
になされ、通常使用されている状態に復帰し、
培養条件にばらつきを与えない。 (3) 微生物濃度が小さくても本発明品によれば検
出が可能となる。 (4) 検体が抗生物質を含んでいても特別な操作を
行うことなく正確な検査結果を得ることができ
る。
第1図および第2図は、それぞそれ本発明の多
層微生物培養検査器の構造を誇張して示す線図的
断面図である。第3図は、本発明の多層微生物培
養検査器の培養状態を示す線図的断面図である。
第4図は本発明の多層微生物培養検査器の他の構
成例の線図的断面図である。 符号の説明、1……吸水性部材、2……孔、3
……フイルター部材、4……抗生物質吸着剤コー
テイング、5……微生物のコロニー、6……下容
器、7……融着点、8……蓋、9……隙間。
層微生物培養検査器の構造を誇張して示す線図的
断面図である。第3図は、本発明の多層微生物培
養検査器の培養状態を示す線図的断面図である。
第4図は本発明の多層微生物培養検査器の他の構
成例の線図的断面図である。 符号の説明、1……吸水性部材、2……孔、3
……フイルター部材、4……抗生物質吸着剤コー
テイング、5……微生物のコロニー、6……下容
器、7……融着点、8……蓋、9……隙間。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1 所定の微生物の培養に適した培地を含浸さ
せ、乾燥させた吸水性部材と、この吸水性部材上
に固着され、微生物を実質的に通さない大きさの
孔を有するフイルター部材とを滅菌状態で具える
多層微生物培養検査器であつて、 前記フイルター部材の上側表面およびまたは前
記フイルター部材と前記吸水性部材との界面に抗
生物質吸着剤をコートしてなることを特徴とする
多層微生物培養検査器。 2 前記吸水性部材の吸水能力は投与する検体量
とほぼ等しくしたことを特徴とする特許請求の範
囲第1項に記載の多層微生物培養検査器。 3 前記吸水性部材に含浸乾燥させる培地の量
は、投与の際フイルター部材を透過した検体に溶
解された時その濃度が実質的に通常液体培地とし
て使用されている濃度になるようにしたことを特
徴する特許請求の範囲第2項に記載の多層微生物
培養検査器。 4 前記培地含浸吸水性部材と前記フイルター部
材との固着は親水性高分子接着剤による接着であ
ることを特徴とする特許請求の範囲第1項ないし
第3項のいずれかに記載の多層微生物培養検査
器。 5 前記フイルター部材の孔径は0.75ミクロン以
下であることを特徴とする特許請求の範囲第1項
ないし第4項のいずれかに記載の多層微生物培養
検査器。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56162999A JPS5863382A (ja) | 1981-10-13 | 1981-10-13 | 多層微生物培養検査器 |
| US06/416,594 US4485171A (en) | 1981-10-13 | 1982-09-10 | Multi-layer microorganism culture testing apparatus |
| AU88327/82A AU544287B2 (en) | 1981-10-13 | 1982-09-13 | Multi layer microorganism culture testing apparatus |
| NL8203908A NL8203908A (nl) | 1981-10-13 | 1982-10-08 | Meerlagige inrichting voor het onderzoekend kweken van microoerganismen. |
| FR8217066A FR2514366B1 (fr) | 1981-10-13 | 1982-10-12 | Assemblage et tampons multicouches pour l'examen de cultures de micro-organismes, et appareil comprenant cet assemblage |
| BE0/209235A BE894694A (fr) | 1981-10-13 | 1982-10-13 | Appareil d'essai de culture de microorganismes en plusieurs couches |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56162999A JPS5863382A (ja) | 1981-10-13 | 1981-10-13 | 多層微生物培養検査器 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5863382A JPS5863382A (ja) | 1983-04-15 |
| JPS6233871B2 true JPS6233871B2 (ja) | 1987-07-23 |
Family
ID=15765270
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56162999A Granted JPS5863382A (ja) | 1981-10-13 | 1981-10-13 | 多層微生物培養検査器 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4485171A (ja) |
| JP (1) | JPS5863382A (ja) |
| AU (1) | AU544287B2 (ja) |
| BE (1) | BE894694A (ja) |
| FR (1) | FR2514366B1 (ja) |
| NL (1) | NL8203908A (ja) |
Families Citing this family (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3483914D1 (de) * | 1983-04-15 | 1991-02-21 | Terumo Corp | Verfahren zur abtrennung von bakterien aus blut. |
| JPS59196085A (ja) * | 1983-04-22 | 1984-11-07 | Terumo Corp | 血中細菌分離培養器 |
| US4717667A (en) * | 1984-07-11 | 1988-01-05 | Fmc Corporation | Colony replicating device |
| JPS6192561A (ja) * | 1984-10-09 | 1986-05-10 | Kobayashi Seiyaku Kk | 細菌培養用シヤ−レ |
| JPS62121331A (ja) * | 1985-11-21 | 1987-06-02 | Johoku Ika Kiki Seisakusho:Kk | 顕微鏡観察用標本及びその作成器具 |
| FI873387A7 (fi) * | 1986-09-26 | 1988-09-27 | Becton Dickinson Co | Menetelmä ja laite hiukkasten konsentroimiseksi kiinteälle pinnalle. |
| JPS62202200U (ja) * | 1987-06-10 | 1987-12-23 | ||
| GB8905001D0 (en) * | 1989-03-04 | 1989-04-19 | Univ Leicester | Screening for natural products of microbial metabolism |
| IE910985A1 (en) * | 1990-03-26 | 1991-10-09 | Hampshire Advisory Tech Serv | Sterile or specific pathogen free environment products |
| BE1005999A4 (nl) * | 1992-06-19 | 1994-04-12 | Leuven K U Res & Dev | Absorbent voor cultuurmedium en een daarvan voorziene houder. |
| US5858793A (en) * | 1992-11-05 | 1999-01-12 | Hampshire Advisory And Technical Services Limited | Sterile or specific pathogen free environment products |
| US5905038A (en) * | 1995-05-25 | 1999-05-18 | Severn Trent Water Limited | Filtration and culture methods and apparatus |
| EP0970183B1 (en) * | 1997-03-20 | 2005-10-05 | Allen C. Barnes | Micropathological patient replica based on unadulterated whole blood |
| US6391578B2 (en) | 1997-04-09 | 2002-05-21 | 3M Innovative Properties Company | Method and devices for partitioning biological sample liquids into microvolumes |
| US6596532B1 (en) * | 1997-12-12 | 2003-07-22 | BIOMéRIEUX, INC. | Device for isolation and surface culture of microorganisms from bulk fluids |
| EP1064351A1 (en) | 1998-03-19 | 2001-01-03 | Amanzi Technologies Limited | Microbiological testing of a liquid sample |
| US6174699B1 (en) | 1999-03-09 | 2001-01-16 | 3M Innovative Properties Company | Disc assay device with inoculation pad and methods of use |
| USD473950S1 (en) | 2001-05-25 | 2003-04-29 | Lord Corporation | Combined container and field responsive material |
| US20040072284A1 (en) * | 2002-10-15 | 2004-04-15 | Mccarthy Kevin J. | Critical association concentration assembly |
| US20040146965A1 (en) * | 2003-01-29 | 2004-07-29 | Hach Company | Petri dish |
| DE10329996A1 (de) * | 2003-07-02 | 2005-01-27 | Universität Tübingen | Verbund-Kulturgefäß |
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