JPS62298536A - 生理活性物質の自動精製方法および自動精製装置 - Google Patents

生理活性物質の自動精製方法および自動精製装置

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JPS62298536A
JPS62298536A JP61139142A JP13914286A JPS62298536A JP S62298536 A JPS62298536 A JP S62298536A JP 61139142 A JP61139142 A JP 61139142A JP 13914286 A JP13914286 A JP 13914286A JP S62298536 A JPS62298536 A JP S62298536A
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liquid
iii
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JP61139142A
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Toshiharu Motokubota
本窪田　利晴
Yutaka Morisei
森勢　裕
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Green Cross Corp Japan
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  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、発明の詳細な説明 （イ）利用分野 本発明は生理活性物質を自動的に精製する方法および装
置に関する。
（ロ）従来技術 大量の検体（例えば、細胞あるいは菌体の培養液あるい
は抽出液、尿あるいは血漿の粗製バルクなど）からその
中に含まれる生理活性物質を精製する方法としては各種
の手法が知られている。
具体的には、例えば、濾過、限外濾過、遠心分離、疎水
クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、
アフィニティクロマトグラフィー、ゲル濾過、ポリエチ
レングリコール分画、硫安分画、塩析などが挙げられる
。
そして、これらの手法を各々の生理活性物質に応じて適
宜組み合わせることにより、充分に満足できる純度の生
理活性物質を得ることができる。
（ハ）本発明が解決しようとする問題点ところが、これ
らの工程を組み合わせて精製操作を行なう場合、これま
では、それぞれの工程ごとに独立してなされていたため
に、次の工程に移るには、精製溶液の移し変えなど、か
なりの手間がかかっていた。
このため、生理活性物質の純度を上げるために工程の組
み合わせ数を増やす程、操作が複雑となり、所要時間も
長くなる傾向にあった。
特に検体中の複数の生理活性物質を分離精製する場合な
どはかなりの手間暇が必要であった。また、人を介して
行なうことから、無菌上の問題なども生じていた。
そこで、本発明者は、精製方法の自動化について検討を
行なった。すなわち、精製に必要な工程の選択、各工程
の条件の設定、自動化の方法などが検討された。
その結果、３工程（濾過、限外濾過、アフィニティクロ
マトグラフィー）を組み合わせることにより生理活性物
質を自動的に精製できる方法および装置を案出して本発
明を完成した。
（ニ）問題点を解決するための手段 本発明は第１に、次の工程よりなる生理活性物質含有溶
液から生理活性物質を自動的に精製する方法により、上
記問題点を解消することができる。
（ｉ）生理活性物質含有溶液を少なくとも１種の孔径５
００〜０．２２μｍのフィルターで濾過することからな
る清澄された生理活性物質含有溶液を得る工程。
（ｉｉ　）清澄された生理活性物質含有溶液を限外濾過
にかけることにより、精製すべき生理活性物質の分子量
未満の分子量を有する物質を分別濾過し、濃縮された生
理活性物質含有溶液を得る工程。
（ｉｉｉ　）所望による工程として清澄または濃縮され
た生理活性物質含有溶液をアフィニティクロマトグラフ
ィーにかけることにより精製された生理活性物質を含有
する溶液を得る工程。
本発明は第２に、次の装置よりなる生理活性物質を自動
的に精製する装置により、同様に上記問題点を解消する
ことができる。
（ｉ）：未精製の生理活性物質を含有する）容液を貯留
するタンク。
（ｉｉ）　　：　　（ｉ）の溶液を゛濾過する孔径０．
２２〜５００μｍを有するフィルター。
（ｉｉｉ）　　：　　（ｉｉ）および（ｉｖ）で得られ
た濾過液を貯留するタンク。
（ｉｖ）　　：所望による装置として（ｉｉｉ）に貯留
された濾過液中に含まれる精製すべき生理活性物質の分
子量未満の分子量を有する物質を分別濾過し、濃縮され
た生理活性物質含有溶液を得るための限外濾過器。
（ｖ）　　：　　（ｉｖ）で得られた濃縮された該溶液
が通され、かつ生理活性物質に対して特異的な親和性を
有する物質を固定化した担体を有する分離装置。
（ｖｉ）　　：　　（ｖ）の洗浄液および／または平衡
溶液を貯留したタンク。
（ｖｉ）　　：　　（ｖ）に吸着された生理活性物質を
溶出するための溶出液を貯留したタンク。
（ｖＵ　　：　　（ｖ）から溶出された生理活性物質を
含有する溶出画分を貯留するタンク。
（ｉｘ）　　：　　（ｉ）の溶液を（ｉｉ　）、（ｉｉ
ｉ　）、（ｉｖ）、（ｖ）へ移送するための送液管。
（ｘ）　　：　　（ｉｖ）で得られた濾液を（ｉｉｉ　
）へ移送するための送液管。
（ｘｉ）　　：　　（ｖｉ）、（ｖｉ）の液を（ｖ）へ
送液するための送液管。
（ｘｉｉ）：　　（ｖ）から排出された液を（ｖｉｉ）
またはその他の所へ送液するための送液管。
（ｘｉｉｉ）　：　　（ｉｘ）および（ｘ）に設けられ
た送液ポンプ。
（ｘｉｖ）　：　　（ｉｘ）、（ｘ）、および（ｘｉ）
に設けられたパルプ。
（ｘｖ）　　：　　（ｉ）、（ｉｉ）、および（ｉｉｉ
　）に設けられた液面センサ。
（ｘｖｉ）　：　　（ｉｉｉ　）と（ｉｖ）間の送液管
、または（ｘ）の送液管に設けられた圧力センサ。
（ｘｖｉｉ）　：　　（ｘｖ）および（ｘｖｉ）を入力
側に、（ｘｉｉｉ）および（ｘｉｖ）を出力側に各々電
気的に接続されているコンピュータ本体。
本発明をさらに詳細に説明する。
■　前処理工程 本工程は出発原料を次の濾過工程に導（までの工程であ
る。この工程では、必要な装置として生理活性物質を含
有する溶液を貯留したタンク（例えば培養タンク、粗製
バルクプールタンクなど）、送液ポンプ、冷却器等が挙
げられる。これらの装置は具体的には第１図あるいは第
２図に示したように接続される。
出発原料、すなわち、生理活性物質を含む溶液としては
、各種細胞培養液が挙げられ、細胞としては、白血球、
リンパ芽球、ハイブリドーマの他、各種培養細胞を含む
。また、生理活性物質産生遺伝子を組み込んだ大腸菌、
枯草菌、酵母、動物細胞等の培養液ならびにその抽出液
、あるいは、凍原、血清、または、血漿および、これら
の粗製バルクなどが含まれる。本発明の出発原料として
は精製度等、特に問題ではないが、その目的上、精製度
の低いものの方が好都合である。
この出発原料中に含まれる生理活性物質としては、（上
記溶液中に含まれうるちのであれば）特に限定されない
。
具体的には各種インターフェロン（ＩＦＮ−α、ＩＦＮ
−β、ＩＦＮ−ｒ）、ウロキナーゼ（ＵＫ）　、プロウ
ロキナーゼ（Ｐｒｏ　ＵＫ）　、カリクレイン（ＫＬ）
　、リゾチーム、トリプシンインヒビター、ヒト由来顆
粒球分化促進性糖蛋白質（ＨＧ　ＩＧＰ）、各種インタ
ーロイキン（１型、２型、３型）、コロニー形成刺激因
子（ＣＳＦ）、組織プラスミノゲン活性化因子（ＴＰＡ
）、Ｂ細胞成長因子（ＢＣＧＦ）　、腫瘍壊死因子（Ｔ
ＮＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、リンフォトキシン（
ＬＴ）　、各種ホルモン、各種モノクローナル抗体、エ
リスロポエチン　（ＥＰＯ）、アンチトロンビンＩＩ［
（ＡＴＩＩ［）　、）ランスフェリン、プラスミノーゲ
ン、プラスミノーゲンアクティヘー　。
ター、アルファフェトプロティン（ＡＦＰ）、などが挙
げられる。またこれらは複数が含まれていてもよい。
前処理工程としては、貯留タンク中より送液ポンプにて
好ましくは１−１００／／時間で溶液を次の工程に移送
する。この時溶液は冷却器により０〜１０℃に保つこと
が好ましい。
■　濾過工程 本工程の目的は溶液中の浮遊物（例えば、細胞、細胞片
、菌体、菌体片、ゴミなど）を取り除き、溶液を清澄に
することにある。
この工程では必要な装置として５００〜０．２２μｍの
各種の孔径をもつフィルター、濾過液を貯留するタンク
などが挙げられる。これらの装置は具体的には第１図あ
るいは第２図に示したように接続される。
フィルターとしては、孔径の違うフィルターを数種組み
合わせて用いることが好ましい。また、溶液の状態に応
じて孔径の大きさおよび組み合わせを変える必要がある
。
例えば、具体的には、株化細胞の培養液の場合、３１１
ｍ、０．４５ｐｍおよび０．２２μｍのフィルターを、
白血球培養液などの場合は、不溶性蛋白質あるいは細胞
塊を除くため１００μｍ、５１’　ｍ％　３　ｐ　ｍ、
０．４５μｍおよび０．２２μｍのフィルターを孔径の
大きい方から順次連結して、溶液を通液していく。また
、遺伝子組換え法による菌体培養液あるいは抽出検温液
の場合には、０．４５μｍ、　０．２２μｍのフィルタ
ーを組み合わせて用いればよい。特に遺伝子組み換え大
腸菌、枯草菌、酵母菌の場合は、限外濾過方式（ミリボ
ア社、プロスタツク・：孔径：　０．２２μｍ）による
高圧、高流速での循環濾過が特に効果的である。
その方法としては、■の前処理工程により送られてきた
溶液を５００〜０．２２μｍの各種フィルターに順次通
液して得られた濾過液または限外濾過により得られた濾
過液のみを貯留タンクにためていく。このタンク中の濾
過液も０〜１０℃（好ましくは４℃前後）に冷却してお
くことが好ましい。
■　限外濾過 本操作の目的は溶液の濃縮にある。装置としては、精製
すべき生理活性物質の分子量未満の分子量を有する物質
を分別濾過し、濃縮された生理活性物質含有溶液を得る
ことのできる限外濾過器が必要である。
限外濾過は、■での貯留液をポンプで移送して限外濾過
器にかけて濾過液は再び貯留タンクに還流することによ
り行なう。このくり返しにより溶液１０〜１０００　Ｊ
を０．１〜５１に濃縮することが望ましい。処理溶液量
が１００！！程度以下の場合は、本操作による濃縮工程
を省略してもさしつかえない。この操作に必要な所要時
間は０．５〜１０時間である。
■　アフィニティクロマトグラフィ一 本工程は、生理活性物質に対して、特異的な親和性を有
する物質を固定化した担体を有するカラム等を用いて生
理活性物質を分離精製することを目的とする。
本工程において用いられる装置としては、■の貯留タン
クより溶液を移送するポンプ、生理活性物質に対して特
異的な親和性を有する物質を固定化した担体を有するカ
ラム、洗浄液および／または平衡溶媒を貯留するタンク
、洗浄液をカラムに移送するポンプ、吸着させた生理活
性物質を溶出させるだめの溶出液を貯留するタンク、溶
出液をカラムに移送するポンプ、溶出させた生理活性物
質画分を貯留するタンクなどが挙げられる。これらの装
置は具体的には第１図及び第２図に示したように接続さ
れる。
生理活性物質に対して特異的な親和性を有する物質とし
ては各種のものが知られている。
例えば、各種抗原に対する抗体（ポリクローナル抗体、
モノクローナル抗体のどちらでも可能）、各種抗体に対
する抗原、各種基質に対する酵素、各種酵素に対する基
質、その他、ベンザミジン、コンカナバリンＡ　（Ｃｏ
ｎＡ）　、アプロチニン、ヘパリン、金属イオン（Ｃｕ
４　＋、Ｚｎ”、Ｎｉ−１４等）などが挙げられる。
親和性を有する物質と生理活性物質の関係は既に数多（
公知となっている。具体的な例を第１表に示す。
不溶性担体としては、アミノ酸共重合体、セルロース、
アガロース（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ・等）、デキストラン
（Ｓｅｐｈａｄｅｘ・等）、ポリアクリルアミド、キト
サンビーズ（キトバール・等）、多孔性ガラス（シリカ
ゲル、ＣＰＧ（Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｐｏｒｅ　ｇｌａ
ｓｓ）等）などが用いられる。
カラム法により大量の試料を精製処理する場合、用いる
担体が耐圧に優れていることが重要である。
すなわち、耐圧が劣るものであれば、担体が変形したり
、破砕され、その結果、カラムの目ヅマリが生じ、通液
流速が著しく低下したり、場合によっては、通液不能に
なる。このようなことから、担体として、好適には、ホ
ルミルセルロファイン（登録商標、生化学工業）、キト
サンビーズ、多孔性ガラス（シリカゲル、ＣＰＧ）など
が用いられる。いずれも試料溶液に応じて、適切な粒径
、ポアサイズのものを選択することが出来る。これらの
うち、多孔性ガラスはいろいろな粒径、ポアサイズのも
のを調製するのが比較的容易で、かつ安価である。多孔
性ガラスへのリガンドの固定化は公知の手段（例えば、
バイオケミカルジャーナル、患１１７．　２５７〜２６
１頁（１９７０年）記載の方法など）により実施出来る
。すなわち、シランカップリング剤（γ−グリシドキシ
プロビルトリメトキシシラン、γ−アミノプロピルトリ
エトキシシラン、Ｔ−メルカプトプロピルトリメトキシ
シラン、Ｔ−クロロプロピルトリメトキシシラン、γ−
シアノプロピルトリメトキシシラン、ビニルトリエトキ
シシラン、Ｔ−メタアクリロキシプロピルトリメトキシ
シラン等）によるシラノール化により、アミノプロピル
ガラス誘導体を調製した後、グルタルアルデヒド法（そ
の他、過ヨウ素酸法、カルボジイミド法等）により蛋白
性リガンドを固定化する。
多孔性ガラスとしては、形状が粒径で、粒子径が６０μ
ｍ以上でポアサイズ（孔径）が１００Å以上のシリカゲ
ルが好適である（例、マイクロビーズシリカゲル：富士
デビソン社製）。
我々は上記のゲル以外にもフィルター状に成形したセル
ロース膜に蛋白性リガンドを結合したカートリッジ（例
えば、キュノ社（旧名ＡＭＦ社）製、商標ゼタフィニテ
ィ　（ＺＥＴＡＦＦＩＮＩＴＹ　）　）を用いることに
より同等の効果が得られることを確認した。
本工程においては、該リガンドを固定化した担体を有す
るカラム等を平衡化するための平衡溶液、吸着された生
理活性物質を溶出するための溶出液、カラム等を洗浄す
るための洗浄液が必要であるが、平衡溶液と洗浄液は同
一の溶液でも良い。
これらの溶液は、各々の分別すべき生理活性物質、およ
び、リガンド（特異的に親和性を有する物質）に応じて
適宜種類が異なる。しかし、これらの関係も公知のもの
が数多い。具体的な例を第１表に示す。
τ肝を、人尿からυＫＳＫＬ、リゾチーム、トリプシン
インヒビター、ＢＰＯｌ　ＨＧＩＧＰを、血漿プール液
あるいは胎盤抽出液から各種活性因子（例えば、ＡＴＩ
［Ｉ。
プラスミノーゲン、セルロプラスミン、第Ｘ！Ｉｔ因子
、リゾチーム、ＡＦＰ　ＳＵＫインヒビター）を、遺伝
子組み換え体により産生したＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、
ＩＰＮ−γ、ルｌ〜３、ＴＮＦ　５Ｃ５Ｆ　、　ＴＰＡ
　、　ＥＧＰ　ＳＬＴ、　ＥＰＯ、ＢＣＧＰｓ　ＩＪＫ
、、Ｐｒｏ　ＵＫ等を自動的に、しかも連続的に精製あ
るいは各音の分離精製を行なうことができる。
（へ）実施例 実施例−１ （培養リンパ芽球細胞由来ＩＦＮ−αおよびＩＦＮ−β
の場合） 産生系：リンパ芽球培養液にセンダイウィルス（ＩＩＶ
Ｊ）を添加し、ＩＦＮ−αを誘発させる。この場合、Ｉ
ＦＮ−βも同時に誘発させた。培養液量は３００　ｇで
あった。
自動精製装置としては、第１図のものを使用した。
フィルターは孔径３．Ｏｐ、一種類（ボール社製二ＡＢ
２００３０　）を使用した。カラムは２種ＩＱ　（Ａ、
　Ｂ）を使用した。カラムＡはポリクローナル抗ＩＰＮ
−α抗体を結合したシリカゲル（マイクロビーズシリカ
ゲル、５００人、富士デヒソン社製）　　５００ｍ１を
充填したもの。
カラムＢはモノクローナル抗ＩＦＮ−β抗体を結合した
シリカゲル（同）　　１００ｗ＋１を充填したものであ
る。
カラム平衡溶液兼洗浄液Ａ、、　Ｂ、としてはＯ，１Ｍ
　−リン酸緩衝液ｐＨ７，０（含０．３Ｍ−ＮａＣ１）
をカラムの１０倍量用いた。
カラム溶出液Ａ＋、Ｂ＋としては０．ＩＭ−クエン酸緩
衝液ｐＨ２，０をカラムの３倍量用いた。
処理時間は４．５ｈであった。
精製結果：　ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−βが同時に下表の
成績で精製出来た。
実施例−２ （白血球細胞由来ＩＦＮ−ｒおよびＴＮＰの場合）産生
系：白血球細胞をＲＰＭＩ＋ｉｎ。培地に懸濁した後、
ＰＨ＾を添加（１０ｗ　／　ｍ　ｌ　）　Ｌ、３日間、
３７℃で培養し、ＩＦＮ−ｒ及びＴＩＩＦを産生した。
培養液量は５０１であった。
自動精製装置は第１図のものを使用した。フィルターは
、孔ｆｉ　１００．Ｅｌｍ　（）゛ランズウインク　イ
ンターナショナル社製ｎ　Ｕｌｏｏ　ＡＷ＋９．５ＡＣ
）及び孔径５．Ｏｔｍ（同ｉＵ５＾１９．５ＡＣ）のプ
レフィルタ−を連続した後、孔径３．θμｓのフィルタ
ーｃボール社製：　ＡＢ２ｔ１０３０　）をｔｌ続した
。
カラムは２［１１（Ａ、Ｂ）を使用した。カラムＡはモ
ノクローナル抗ＩＰＮ−ｒ抗体を結合した。シリカゲル
（富士デビソン社製：マイクロビーズシリカゲル、５０
０人）　　１００ｓ＋Ｉを充填したものである。カラム
Ｂはモノクローナル抗↑ＮＦ抗体を結合したシリカゲル
（同）　　１００Ｎ＋を充填したものである。
カラム平衡溶液兼洗浄液へいしとしてはｏ、ｔｙ−リン
＃ｆｆｌ衝ｉｐｌ＋７．０　　（含０．３Ｍ−ＮａＣ１
）をカラムの１０倍重用いた。
カラム溶出液へ１、Ｂ、としては３．５Ｍ　−ＫＳＣＮ
　ｐＨｉ１．０をカラムの３倍階用いた。
処理時間は３．Ｏｈｒであった。
精製結果：　ＩＰＮ−ｒ及びＴＮＰが同時に下表の成績
で精製出来た。
実施例−３ （遺伝子組み換え大腸菌由来ＩＦＮ−α２の場合）菌体
：大腸菌０６００株にヒトＩＦＮ−α２発現プラスミド
を組み込んだＣ６００／ｐｌα２τｒｐ　４１株を用い
た。
培養液量は５０１であった。
前処理としてＩＦＮ−α２は大腸菌内に蓄積されるため
、予め菌体を破砕する必要がある。菌体を培養液量ノ１
７５ノ抽出緩衝、ａ”　ニ！！１．＜　Ｌ　タＪ、ＤＹ
ＮＱ’　−ＭＩＬｔ、″？！破砕抽出した。抽出液をｔ
ＩＩ製バルクとしてプールした（１０＃）。
＊：０．２５Ｍ−Ｔｒｉｓ＋０．０３Ｍ−ＮａＣ１＋　
　０．０５Ｍ−εＯＴ＾（含ｌＯμｓ／ｍＬ　ＰＭＳＦ
フェニルメタンスルホニルフルオリド）自動精製装置と
しては第２図のものを使用した。
処理：ＩｆＬ量が少ないためベリコンによる濃縮工程は
省略、カラムにはポリクローナル抗ＪＰＮ−α抗体をシ
リカゲルビーズ（マイクロビーズシリカゲル５００人、
富士デビソン社製）に結合したものを充填し、カラムへ
のみ使用した。カラム容量は５００＋＋＋　Ｉである。
カラム平′＃溶液兼洗浄ｔｈＡ＋としてＯ，１Ｍ−リン
酸１１衝液ｐＨ１，０（含０．３Ｍ−ＮａＣＩ　）を５
１用いた。カラム溶出液Ａ、とじて０．ＩＭ−クエンｆ
Ｊス街液ｐＨ２，０を１．５ｉ用いた。
処理時間は１．５時間であった。
精製結果：下表の結果を得た。
手続補正書 昭和６１年　と月　≠日

Claims (2)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）次の工程よりなる生理活性物質含有溶液から生理
    活性物質を自動的に精製する方法。 （ｉ）生理活性物質含有溶液を少なくとも１種の孔径５
    ００〜０．２２μｍのフィルターで濾過することからな
    る清澄された生理活性物質 含有溶液を得る工程。 （ｉｉ）所望による工程として清澄された生理活性物質
    含有溶液を限外濾過にかけることに より、精製すべき生理活性物質の分子量未 満の分子量を有する物質を分別濾過し、濃 縮された生理活性物質含有溶液を得る工程。 （ｉｉｉ）清澄または濃縮された生理活性物質含有溶液
    をアフィニティクロマトグラフィーに かけることにより精製された生理活性物質 を含有する溶液を得る工程。
  2. （２）次の装置よりなる生理活性物質を自動的に精製す
    る装置。 （ｉ）未精製の生理活性物質を含有する溶液を貯留する
    タンク。 （ｉｉ）（ｉ）の溶液を濾過する孔径０．２２〜５００
    μｍを有するフィルター。 （ｉｉｉ）（ｉｉ）および（ｉｖ）で得られた濾過液を
    貯留するタンク。 （ｉｖ）所望による装置として（ｉｉｉ）に貯留された
    濾過液中に含まれる精製すべき生理活性 物質の分子量未満の分子量を有する物質を 分別濾過し、濃縮された生理活性物質含有 溶液を得るための限外濾過器。 （ｖ）（ｉｖ）で得られた濃縮された該溶液が通され、
    かつ生理活性物質に対して特異的な 親和性を有する物質を固定化した担体を有 する分離装置。 （ｖｉ）（ｖ）の洗浄液および／または平衡溶液を貯留
    したタンク。 （ｖｉｉ）（ｖ）に吸着された生理活性物質を溶出する
    ための溶出液を貯留したタンク。 （ｖｉｉ）（ｖ）から溶出された生理活性物質を含有す
    る溶出画分を貯留するタンク。 （ｉｘ）（ｉ）の溶液を（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ
    ）、（ｖ）へ移送するための送液管。 （ｘ）（ｉｖ）で得られた溶液を（ｉｉｉ）へ移送する
    ための送液管。 （ｘｉ）（ｖｉ）、（ｖｉｉ）の液を（ｖ）へ送液する
    ための送液管。 （ｘｉｉ）（ｖ）から排出された液を（ｖｉｉｉ）また
    はその他の所へ送液するための送液管。 （ｘｉｉｉ）（ｉｘ）および（ｘ）に設けられた送液ポ
    ンプ。 （ｘｉｖ）（ｉｘ）、（ｘ）、および（ｘｉ）に設けら
    れたバルブ。 （ｘｖ）（ｉ）、（ｉｉ）、および（ｉｉｉ）に設けら
    れた液面センサ。 （ｘｖｉ）（ｉｉｉ）と（ｉｖ）間の送液管、または（
    ｘ）の送液管に設けられた圧力センサ。 （ｘｖｉｉ）（ｘｖ）および（ｘｖｉ）を入力側に、（
    ｘｉｉｉ）および（ｘｉｖ）を出力側に各々電気的に接
    続されているコンピュータ本体。
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