JPS62291A - 発酵法によるｌ−セリンの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔発明の目的〕 〈産業上の利用分野〉 この発明は発酵法によるＬ−セリン（以下セリンと記す
）の製造方法に関する。セリンは養毛剤などの化粧品の
成分として重要な物質である。

〈従来の技術〉 発酵法によるセリンの製造方法としては、コリネバクテ
リウム属、アルスロバクタ−楓、シュードモナス属等の
微生物により、グリシンより製造する方法が知られてい
る。

さらに、これらの微生物のセリン生産能を向上させる試
みがなされ、例えばシュードモナス属に属し、温度感受
性を付与した微生物によるセリンの製造法（特開昭５５
−２９９０６　）、シュードモナス属に属しグリシンに
耐性を付与した微生物による七リンの製造法（特開昭５
５−２６８７５　）、アルスロバクタ−属に属しメチオ
ニン要求性を付与した微生物によるセリンの製造法（特
開昭５５−３７１６９）、コリネバクテリウム属に属す
る微生物を使用して、糖とグリシンからセリンを生産す
る方法において、メチオニンの要求性を付与した微生物
によるセリンの製造法（特開昭４９−７５７８３　）な
どが知られている。

この他に本出願人によってシュードモナス属に属し、グ
リシンの存在下又は非存在下で葉酸代謝拮抗物質に耐性
を有する微生物によるセリンの製造法が開発されている
（特願昭５９−２５２４７７）。

しかし、シュードモナス属に属し、メチオニン要求性を
有する微生物を用いたセリンの製造法は知られていない
。

く本発明が解決しようとする問題点〉 本発明が解決しようとする問題点は、シュードモナス属
に属する微生物を用い更に安価に発酵法でセリンを製造
する方法を確立することにある。

〔発明の構成〕

〈問題点を解決するための手段〉 本発明者らはより効率のよいセリンの製造法を開発すべ
く研究を行った結果、シュードモナス属に属し、メチオ
ニン要求性を有する変異株の中に、従来のセリン生産株
よシも高い収率でセリンを生成する能力を有する変異株
が存在することを見い出した。

即ち、この発明において用いられる微生物はシ、−トモ
ナス属に稿し、メチオニン要求性を有し、グリシンより
セリンを生成する能力を有する変異株である。従って、
これらの変異株を採取するには、Ｎ−メチル−Ｎ′−二
トローＮ−二トロングアニジンにて処理する等の変異処
理を親株に施した後、メチオニンを含有しない培地上で
は生育できない菌株を選択すればよい。さらに、メチオ
ニン要求性の他にセリンを生成するのに有利な性質、例
えばグリシン耐性、葉酸代謝拮抗体耐性セリンおよびそ
のアナログ耐性等を付与するとセリンの生産性が向上す
る場合がある。これらのセリンを生成するのに有利な性
質は、本発明のメチオニン要求性を付与する前に既に有
していても良く、また後から付与しても良い。

本発明において用いられる変異株として具体的には以下
のものがある。

（メチオニン要求性） 、シュードモナス・ロドメチロファシエンスアー１ｉＪ
Ｉｈｔ ＡＪ　１２２２５　（ＦＥ鏑） （グリシン耐性、メチオニン要求性） 本発明において用いられるメチオニン要求性の変異株は
親株に比べてセリンハイドロキシメチルトランスフェラ
ーゼ（２，１，２，１）の酵素活性が高くなっていた。

これらの変異株を培養する培地は、グリシンのほか、炭
素源、窒素源、無機イオン、更に必要ならばビタミン、
アミノ酸等の有機微量栄養素を含有するものである。

グリシンは培養当初よシ培地に添加してもよいが、グリ
シンによる変異株の生育阻害を軽減するよう、変異株が
ある程度増殖して後添加してもよい、又培地中のグリシ
ン濃度が変異株の生育阻害が生じないような低い濃度に
なるよう少量づつを分割添加してもよい。

炭素源としてはメタノールが最適であるが、適当な菌株
を選択すればエタノール、プロノ譬ノール等の他のアル
コール類、蟻酸、酢酸等の有機酸類。

グルコース等の炭水化物等も使用できる。

窒素源としてはアンモニア水、アンモニアガス。

アンモニウム塩、硝酸塩、アミノ酸、その他の通常の窒
素源がいずれも使用できる。

無機イオンとしてはカリイオン、マグネシウムイオン、
鉄イオン、マンガンイオン、カルシウムイオン、クロル
イオン、硫酸イオン、燐酸イオン。

その他が必要に応じ適宜培地に添加される。

ビタミン、アミノ酸等の有機微量栄養素として、これら
を含有するコーン・ステイー！・リカー。

酵母エキス、肉エキス等を添加してもよい。

さらに本発明で使用する微生物はメチオニンの要求性を
有しているため、培地にはさらにメチオニン等のメチオ
ニン要求性を満足せしめるべき物質を添加する必要があ
る。メチオニンとしてはＬ体、　ＤＬ体のいずれでもよ
く、また、メチオニンを含有する酵母エキス、コーン・
ステイープ・ＩＪ　、Ｆ）−１肉エキス等の有機栄養源
をメチオニンの代わりに適宜添加してもよい。

培養は好気的条件下に行なうのがよく１．Ｈ５から９の
範囲の適当な、Ｈに調節しつつ行なえば最も好ましい結
果が得られる。又培養温度は２５から３７℃の範囲の適
当な温度に調節しつつ培養するのが望ましい。

かくして２から８日間も培養すれば培養液中には著量の
セリンが生成蓄積される。培養液よりセリンを採取する
には、イオン交換樹脂を用いる方法等、通常の方法で行
なうことができる。

実施例 下記組成の液体培地２０ｓｄを５００−客扱とうフラス
コに入れ、殺菌した。これにメタノール２、　Ｏｔｄ／
ｄｔ含有肉汁スラントで３０℃４８時間培養した第１表
に示す菌株を各々ｌ白金耳接種し、３４℃で振とり培養
を行なりた。２４時間抜メタノール１．０　ｄ／ｄｔ’
ｉ添加し、さらに２４時間培養してからグリシンｌ　５
９／ｌ　、メタノール４　ｄ／ｄｔを添加した。その後
さらに２４時間培養を続けた。

セリンの生成量は第１表に示したようになった。

ＫＨ２ＰＯ４０，５１１／１ （ＮＨ４）ＨＰＯ４ｓ、ｏ　　ｇ／１ Ｍｇ５０４−７Ｈ２００，４１／１ ＮａＣＬ　　　　　　　　　　　　Ｏ，５ｉ／ＬＦ＠　
ＳＯ４・７Ｈ２０１０噌μ ＭｎＳＯ４・４Ｈ２０５ｒｎＩｉ／を 酵母エキス　　　　　　　　２．０　９７ｔＬ　−Ｍ＠
ｔ　　　　　　　　　　Ｏ，１５ｇ／　ｔメタノール（
別殺菌）　　　　　　　　　２．０　　　ｗ／１１１Ｃ
ａＣＯ３（Ｉ）　　　　　　　　　５　　　１／／ｄｌ
ＰＨ６，８ 第　　１　　表

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. シュードモナス属に属し、メチオニン要求性を有し、更
   にグリシンよりＬ−セリンを生成する能力を有する変異
   株をグリシンを含有する培地中に培養し、培地中に生成
   蓄積したＬ−セリンを採取することを特徴とするＬ−セ
   リンの製造方法。