JPS62155290A - 炭水化物代謝制御剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 放射画材の多数の微生物、なかんずく、７２チノプラナ
セアエ（Ａ　ｃｔｉｎｏｐｌａｎａｃｅａｅ）が、グリ
コシド水解酵素、好ましくは消化管の炭水化物分Ｍ＃素
のための抑制因子を生成することは、公知である（西ド
イツ特許出願公開明細書２，０６４，０９２号）。

更に、ストレプトマイシス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｍｙｅｅ
ｓ）属の微生物の菌株から誘導する、制菌作用を有する
抗生物質である、７ノリマイシンが、ある種の微生物の
α−グルコシグーゼを抑制するということが公知である
（Ｔ、Ｎｉｗａら、Ａ　Ｈｒ、　Ｂ　ｉｏｌ、　Ｃｈｅ
ｍ。

１４．９６６（１９７０）］。

本発明によって、バチルス（Ｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）
科の微生物の培養によって、特に桿菌（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓ）属の菌株によって、消化管中で活性である、グリコ
シド水解酵素に対する抑制因子（抑制剤）、特にグルコ
シグーゼ抑制因子（抑制剤）、特にサッカラーゼ抑制因
子（抑制剤）を生成せしめる。

加うるに、われわれは、バチルス科の微生物のある種の
菌株、特にＤＳＭ７、ＤＳＭ７０４およびＤＳＭ６７５
Ｗｉ株が、１−デスオキシノノリマイシンとして公知の
抗生物質を生産することをも見出した。それ故、本発明
は、バチルス属の１−デスオキシ７ノリマイシン生産微
生物を培養することから成る、１−デスオキシノノリマ
イシンの製造方法を提供する。

本発明は、特には、桿菌族（ｇｅｎｕｓ　　Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ）に属するグリコシド水解酵素抑制因子生産性微
生物を培養することにより得られたグリコシド水解酵素
に対する抑制因子を、活性成分として含有することを特
徴とする消化管における炭水化物代謝制御剤に関する。

以下に記す方法は、本発明の方法において用いる適当な
菌株を発見するために用いる。

バチルス科の菌株、特に桿菌属の菌株は、公知のように
して土の試料から単離することができる。

これらの菌株の成長を可能とする栄養溶液を含有する培
！フラスコに、これらの菌株の転移接種（ｔｒａｎｓｉ
ｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ）で接種する。たとえば、１リッ
トル当り５ｇのヘプトンおよび３ｇの肉エキスを含有す
る栄養溶液を用いることができるが、原則として、適当
な炭素および窒素源ならびに栄養素塩類を含有する多く
のその他の種類の栄養溶液を使用することができる。栄
養溶液のｐＨ値は広い範囲内で変えることができる。６
．０〜８．０の栄養溶液の初期ｐＨを選ぶことが好まし
い。

きわめて多種の有機物質を、栄養溶液中に炭素を供給す
る物質として使用することができる。例として炭水化物
、有機酸およびアルコールを挙げることができる。

酵母エキス、大豆粉、ペプトン、肉エキスおよびその他
の多ぐの物質を、窒素源ならびに適当な無機窒素源とし
て用いることができる。

炭素および窒素源ならびに、例としてＦＩ！ＳＯ４、ｃ
ａｃｏ、およびＭ９ＳＯ，を挙げることができる栄養塩
類の濃度は、広い範囲内で変えることができる。

ある場合には、栄養塩類は、複雑な窒素源中に、付随す
る物質として、しばしば含有されているから、これらの
塩類の別個の添加全省ぐことができる。

抑制因子の生成は、しばしば、栄養培地の組成に著るし
ぐ依存するから、生産能力を最高とするために菌株を異
なる栄養溶液中で培養することが望ましい。適当な計画
は実施例により仰ることができる。

たとえば１００〜２００ｒｎｔの栄養溶ｇ、’ｋ１６の
円錐フラスコ中に入れ、公用のようにして滅歯したのち
、試験すべき菌株全接種し、次いでフラスコを、振とう
機上で、１５〜８０℃において、好ましぐは２４〜４０
℃、または好熱性の細菌の場合には５０〜７０℃におい
て、培養する。培養物が、一般に１〜１０日後に、通常
は１〜５日後に、認めることができる生長２示すときは
、たとえば５ｄの試料を取出して、この試料中の細胞を
、濾過または遠心分離によって分離する。以下に記す試
験においては、１〜１００μにの培養液を用いて、１ｒ
ｎｔ当りの抑制能力を計算する。

細胞を、各回５容量（細胞の容量に対して）のアセトン
を用いて２回抽出し、次いで５容量のジエチルエーテル
によって１回抽出する。併せた抽出物を乾固するまで濃
縮し、水中に取って凍結乾燥する。凍結乾燥物を１０〜
１０００μ？／−の濃度で、以下に記す試験に用いる。

アミラーゼ試験 アミラーゼ抑制因子単位（ＩＡＩＵ　）は、２アミラ一
ゼ単位１ｆｒ、５０％の範囲まで抑制する抑制因子の量
と定義する。アミラーゼ単位（ＡＵ）は、下記の試験条
件下に、１分間に殿粉中の１μ当量のグルコシド結合を
分解する酵素の量である。分解した結合のμ当量数は、
比色的に、ジニトロサリチル酸を用いて、生成する還元
糖のμ−適当量して測定し且つマルトース標準口線の助
けをかりて、マルトース当量のμ−適当量して示す。試
ｌ倹ヲ行なうためには、ｐＨ６，９の０．４ｄの０．０
２Ｍグリ七ロ燐酸ナトリウム緩衝液１０．００１＆に’
αＱｌ。

中の１０〜１０００μ？の抑制因子、すなわち１〜１０
０．Ｊ？の試験すべき培養液を、０．１−のアミラーゼ
溶液（２０〜２２ＡＵ／ｒｒｔ）に加え、且つその混合
物を３５℃の水浴中で約１０〜２０分間平衡化する。次
いで、予め３５℃に加温しである、濃度１％の殿粉溶液
０．５ｍｌと共に３５℃において５分間培養したのち、
１＋＋＋ｊのジニ）ａサリチル酸試薬（Ｃｏｌ　ｏｕｔ
ｉｃｋ−Ｋａｐｌａｎ、Ｍｅ　ｔｈ、　ＥｎｚＰｏｌ。

第１巻、１４９頁中のＰ、　Ｂｅ　ｒｎｆ　ｔ　ｌｄに
よる）を加える。発色させるために、このバッチを沸と
う水浴上で５分間加熱し、次いで冷却し且つ１０−の蒸
留水を加える。５４０　ｎｍにおける吸光を同様にして
調表した、アミラーゼを含有しないブランク値に対比し
て測定する。評価のために、抑制因子の添加後になお有
効なアミラーゼの活性を、予め記録しであるアミラーゼ
標準ＩＩＢ腺から読み取り、この値から使用したアミラ
ーゼの抑制百分率会計算する。抑制百分率を、商 ＡＵ※※ ×　乾燥物質に対して ※※　抑制せしめてない同系列のバッチ中のＡＵの関数
としてプロットし、このＯＢ線から５０％抑制点を読み
取り、抑制因子のＡＩＵ／ηに換算する。

サッカラーゼ試験 サッカラーゼ抑制因子単位（ＳＩＵ）は、２サツ力ラー
ゼ単位を５０Ｘの範囲まで抑制する抑制因子の量として
定義する。１サツ力ラーゼ単位（ＳＵ）は、下記の試験
条件下に、１分間に１μモルのスクロースをグルコース
とフルクトースに分解する酵素の量である。生成するグ
ルコースのμモル数は、サッカラーゼによるスクロース
のそ九以上の分署がもはや生じない条件下に、グルコー
スオキシダーゼの助けをかりて、定量する。この試験を
行なうためには、１〜２０μＩの抑制因子、すなわち１
〜２０μβの測定すべき溶液を、０．１２ＳＵの含量に
調節した０、０５ｒｎ！、のサッカラーゼ溶液に加え、
その混合物ｆｐＨ６，Ｑの０．１　Ｍマレイン酸ナトリ
ウム緩衝７ｙ、を用いてｏ、１ｒｎｔにする。ｐＨ６，
０の０．１Ｍマレイン酸ナトリウム、緩衝液を用いて適
当なＳＵ含量に希釈した、Ｂ。

Ｂ　ｏｒｌｓ　ｔ　ｒｏｍ、Ａ、Ｄａｈｌｑｔｂｉ　ｓ
ｔ　、Ａｃ　ｔａ　、ｃｈ　ｃｍ、　Ｓ　ｃａｎｄ、　
。

±裟（１９５８）、１９９７頁による豚の小腸粘膜から
の可溶化したサッカラーゼを用いることが適当である。

この混合物を３５℃で１ｏ分間平衡化させたのち、予め
３５℃に加温した、ｐＨ６，０の０．１　Ｍマレイン酸
ナトリウム緩衝液中における０、０５＃のスクロース溶
液０．１ゴを加える。この混合物を３５℃で２０分間培
養し、１−のグルコースオキシダー・ゼ試薬の添加によ
ってサッカラーゼの反応を停止させ、次いで混合物ｉ３
５°Ｃにおいて更に３０分間培養する。グルコースオキ
シダーゼ試薬は、２ηのグルコースオキシダーゼ（メツ
サーズベーリンケ９ル、純度！　）　’ｃｐＨ７，０の
１００ｄの０．５６５Ｍ）リスーＨＣ２中に溶解し、次
いで１ｒｎＩ！の洗剤溶液（２ｙ−のトリトンＸ＋８　
ｇ−溶液（２０−の、１１２０中の２６０〜のＯ−ジア
ニシジン・２ＨＱｌ）および０．５ｒｎｔのベルオキン
ダーゼ（メツサーズベーリングル、凍結乾燥物、純度Ｉ
）の濃度０．１％水溶液を加えることによって調製する
ことが適当である。次いで１ｒｎｔの濃度５０％のＨ，
ＳＯ４を加えたのち、混合物を、相当するブランク値と
対比して、５４５ｎｍＶＣｈいて測定する。

評価のために、使用するサッカラーゼの抑制百分率を計
算し且つグルコース標準凹線の助けをかシて、５０％抑
制点からＳ　Ｉ　Ｕ／　Ｐｉ　７？Ｊｊ：　ＳＩＵ／１
３に換算する。

マルターゼ試験 マルターゼ抑制因子単位（ＭＩＵ）は、２マルタ一ゼ単
位全５０％の範囲まで抑制する抑制因子の量として定義
する。１マルタ一ゼ単位（ＭＵ）は、下記の試験条件下
に１分間に１μモルのマルトース全２μモルのグルコー
スに分解する酵素の量である。生成するグルコースのμ
モルは、マルターゼによるマルトースのそれ以上の分解
がもはや生じない条件下に、グルコースオキシダーゼ反
応の助けによって、定量する。試験を行なうために、１
〜２０μｍの抑制因子、すなわち１〜２０μ２の試！険
すべき浴液全、０．０６０−０．０７０ＭＵの含量に調
節した０、０．５＋ｍのマルターゼ溶７仮に加える。Ｅ
、　Ｂｏｒｇｓｔｒｏｍ　ｚ−よびＡ、Ｄａんｌｑｕ、
ｉｒｔ。

Ａｃｔａ　Ｃｈｔｍ、５ｃａｎｄ、、１２．１９９７（
１９５８）に従がい、豚の小腸粘膜からの可溶化したマ
ルターゼを使用し、ｐＨ６，０のαＩＭマレインインド
リウム緩衝液によって適当なＭＵ含量に希釈することが
適当である。この混合物ｋｐＨ６，０の０．１Ｍマレイ
ン酸ナトリウム援衝液を用いて０．１　ｄとし且つ３５
℃において１０分間平衡化させる。次いで、予め３５℃
に加温した、ＰＨ６，０ｔＤ　Ｏ−Ｉ　Ｍマｖ　イン酸
ナトリウム緩衝液中の０．０５＆マルトース溶液帆１ゴ
を加える。この混合′吻を３５℃において２０分間培養
し、マルターゼ反応を、サッカラーゼ試験方法において
記したグルコースオキシ２−−ゼ試薬１−の添加によっ
て、停止させたのち、混合換金３５℃において更に３０
分間培養する。次いで１ゴの濃度５０％Ｈ２５０４を加
え且つ混合物を、相当するブランク値に対比させて、５
４５　ｎｍで測定する。

評価のために、使用するマルターゼの抑ｉ１＋＋を百分
率を計算し且つグルコース標準凹線の助けによって、５
０％抑制点からＭ　Ｉ　Ｕ／　９−またはＭ　Ｉ　Ｕ／
４に換算する。

バチルス科の多数の菌株を、上記の方法によって試験し
た。グリコシド水解酵素に対する顕著な抑制活性が、特
にバチルス属の菌株の場合に、ここに認められた。枯草
菌（Ｂ、　ｊ−ｕｂｔｉｌｉｐ）、枯草菌ニダル変種（
７３，５ｔｔＡｔｉｌｉｓ　ｔｔａｒ＋ｎ１ｙｅｒ入　
７　ミＯリケファシエンス函（Ｂ、ａｍｙｌｏｌｉｑｒ
ｂｔｆαｃｉ　ｅｎｙ）、ロンギスールス哨（Ｂ、１ｏ
ｙＬｙｉｓｐｏｒｔｂｚ入ｒＲリミクサ菌（Ｂ、ｐｏｌ
ｙｍｙｘａ）およびコアギユランスｍ（，１３，ｃｏα
ダｕ、１ａｎｓ）の種は、収率に関してもつとも有利で
あることが認められた。

試駆において活性な抑制剤であることが記載の方法忙よ
って認められた菌株における頻度は、５％を超えた。特
に活性な萌株の例を、第１表に示す： 上の表の菌株は、ケ０ツチンケ０ンにちるドイツ微生物
蒐果所（ＤｔＬＬｔｓｃｈｅ　Ｓａｍｗｂｌｗｎｙ　ｆ
Ｑ；ｐＭｉｋｒｏｏｒｙ）αｎｉｚｍｔル）（ＤＳＭ）
において、規定したＤＳＭ番号のもとに保管されてお９
、且つそこから取得することができる。

菌株ＤＳ、’１１０４．７４０．７４１および７４２は
新菌株である。それ故、本発明は、これらの菌株の試験
管内坩養全も包含する。これらの菌株の性質を第２表に
示す。残りの菌株は、文献により公矧であυ且つＤＳＭ
の″’１９７４年菌株カタログ中に記されている。

第２表 杆の長さ、μ　　　　　　　　３−６　２−５　３−７
　２−４グラム反応　　　　　　　＋　　士　　士　　
十第　２　表（続き） ＤＳＭ　ＤＳＭ　ＤＳＭ　ＤＳＭ 菌株の性質　　　７４０７４１７４２７０４砲子、楕円
状／円筒状　　　　＋　　＋　　十　　や内形　　　　
　−−−− 末端／末端近ぐ　　　　　　　　＋　　＋＋＋中心／副
中心　　　　　　　　　七　　ト＋十゛膨化胞子母細胞
　　　　　　　＋　　＋＋−＋−性　　　　＋　ト＋＋ 最高生長温度−生長場性’Ｃ４０４０４５５５生長陰性
温度、’Ｃ４５４５５０６０ カタラーゼ　　　　　　　　　＋　　＋＋＋＋＋性生長
　　　　　　　＋　　＋十−ホｒスープロスカウエル反
応　　　　　　＋　　　＋　　＋ＶＰ培地中のｐｆｌ　
　　　　　　　６−２　　６．５　　６−５　　５．６
卵黄反応　　　　　　　−一一一 生長 ＤＳＭ　　ＤＳＭ　　ＤＳＭ　　ＤＥＭ閑株の性質　　
　７４０７４１７４２７０４ｐｆ１５．７　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　＋　　　　　　＋　　　　
　　＋　　　　　　−ト５％ｏｓａｃｔ　　　　　　　
　±　　−−＋７％のＮαＣ１−−−＋ １ｏｙにのＮｘ　Ｃ１−−−＋ リゾチーム（０，００１％）　　　　　　−＋−−Ｄ−
グルコースからＤ酸の生成　　＋　　　＋＋＋Ｄ−キシ
ロースかり）便の生成　　＋　　　＋＋＋＋＋コースか
らυガラスの形成−）−＋＋　　　　−殿粉の減成　　
　　　　　　　＋　　＋＋＋＋＋インの減成　　　　　
　＋　　＋＋＋＋＋チンの減成　　　　　　　＋　　＋
＋＋チロンンの減成　　　　　　　−一一−馬尿酸塩の
減成　　　　　　　−一一−ＤＳＭ　　ＤＳＭ　　ＤＳ
Ｍ　　ＤＳＭ歯株の性質　　７４０　７４１　７４２７
０４イクチンの減成　　　　　　　÷　　　＋　　　＋
くえん酸塩の評価　　　　　　−−一十プロシオン酸塩
の評価　　　　−−ｍ−フェニルアラニンの脱アミン化
　　−−−Ｎｏ、−からＮＯ２−へ４）１元　　　　十
　　　十　　　　−ト　　　十硝酸塩からのガスの主ｔ
　　　　　　−−−−結晶（生デキストリンｙｙ４ＥＩ
戊　　　−−−−Ｃンドールの生成　　　　　　−−ｍ
−ジヒドロキシアセトンの生成＋＋− 胞子の形成および好気性生長の故に・菌株ＤＳＭ７４０
、ＤＳＭ７４１、ＤＳＭ７４２およびＤＳＭ７０４は、
桿＠属として帰属せしめるべきである。

菌株ＤＳＭ７４０、ＤＳＭ７４１およびＤ　Ｓ　Ｍ７４
２について測定した形態学的２よび生理学的特性はポリ
ミクサ粟のそれに相当するが、菌株ＤＳＭ７０４は枯草
菌の種に帰属せしめるべきである。

同定は、Ｒ，Ｅ、ＧｏｒｄｏｎＪＶ、Ｃ，Ｈａｙｎ、ｅ
ｓおよびａＨｏｒ−Ｎａｙ　ｐｏｎｙ：桿直属、ワシン
トン１９７３、に従って行なった。

グリコシド水解酵素抑制因子全取得するために、上に表
示した菌株を、たとえば、前記のような栄養溶液中で培
養する。本発明において用いる微生物の培養物は一般に
、微生’＠に加えて、炭素および窒素源を含有する栄養
培地から成っている。しかしながら、最高の生産のため
には、はとんどすべての菌株が、異なる定性的な組成お
よび鼻なる定量的な組成の栄養溶液を必要とするという
ことに注意すべきである。

一般に、微生物は、異なる大きさの振とうフラスコまた
は醗酵器中で、１５〜８０℃、好ましくは２４〜４０℃
、または、好熱性の場合には、５０〜７０℃において１
〜１０日間培養する。次いで培養液から細胞含分離し且
つ、抑制因子の存在に依存して、活性化合物を、培養液
および／ま几は細胞から！１縮する。

抑制因子は、培養液から、凍結乾燥によって、または塩
あるいは水溶性有機溶剤（たとえば低級アルコールおよ
びケトン類つを用いる沈殿によって、または活性化合物
のイオン交換体上における吸着によって、単離する。

抑制因子は、細胞からは、たとえばアルコール、ケトン
、エーテル、エステルおよびスルホキシドのような有機
溶剤を用いる抽出によって、単離する。

そのためには、醗酵バッチを、３．０００〜２０．００
０回転／分、好ましくは６，０００〜ｔｏ、ｏｏｏ回転
／分で１０〜６０分、好まし゛ぐは３０分間遠心分離す
るか、ある１ハは好ましくは圧力下に且つ濾過助剤を使
用して、濾過し、且つこのようにして培養液と細胞残渣
に分離する。

特定の培養液からの抑制因子の単離は、いろいろな方法
で行なうことができる： α）　！：ｆｊ養液の、減圧下（１０〜５０ツＨｆ／−
）における２０〜１００℃、好ましくは４０〜８０℃の
浴温においての、出発容量の約％〜”Ａｎへの濃縮。

濃縮した抽出物を濾過または遠心分離し、透明なＰ液（
透明な上澄液）を、必要に応じ、予め塩の除去後に、凍
結乾燥する。

ｂ）たとえば、アルコールまたはケトン、好ましくはメ
タノール、エタノールまたはアセトンのような水溶性有
機溶剤を６０〜９０Ｘの含量に至るまで添加することに
よる培養液から（あるいはα）Ｋ従って濃縮した培養液
から）の抑制因子の沈殿。

不活性な共存物質は、比較的低い溶剤濃度に訃いて沈殿
するから、この沈殿方法は、望ましくない共存物質を分
離するための分別沈殿に対して特に適している。

Ｃ）たとえば硫酸アンモニウム、塩化ナトリ９ムなどを
用いる、抽出物（あるいはα）に従って＠縮した抽出物
）からの抑制因子の塩析。分離する沈殿物を遠心弁＠ｉ
たは濾過によって捕集し、且つ直ちにアセトンおよびエ
ーテルで洗浄したのち、真空乾燥するか、あるいは水中
に再溶解したのちに、透析および凍結乾燥する。

の　抑７１υ因子のイオン交換体上における吸着。この
方法は、化学的性質の故に電荷を有して込る抑制因子の
単離のために適当である。抑制因子の脱着は、溶出媒体
のイオン強度またはｐＨ＠を変えることによって行なう
。

培養液中には、抑制因子のほかに、しばしば、望ましく
ない共存物質が存在する。これらの共存物質は、いろい
ろな方法によって、たとえば熱に対して安定な抑制因子
の場合には加熱によって共存物質を変性することによυ
、あるいは、低分子量抑制因子の場合には適当な＠を用
いて透析して望ましくない共存物質を膜上に留置せしめ
ることによって、あるいは分別沈殿（ｈ虐照）によって
、あるいはイオン交換体上における共存物質の吸着によ
って、分層することができる。

抑制因子は、細胞からは、細胞ヲＭ機溶剤によって数回
抽出することにより、好ましくは細胞を３〜５容１のア
セトン（湿った細胞の容量に対して）により１０〜２０
分間２回抽出し、次いでそれをエーテルによって５〜１
０分間１回抽出することによって単離する。アセトン抽
出物およびエーテル抽出物を真空下に乾固するまで濃縮
し、残渣を水中に取シ且つ凍結乾燥する。

新規物質は、水中に容易に溶解する。これらの抑制因子
の１グループは、中性のｐＨ値において熱に対し安定で
あり、酸（ｐｆｆ２）に対して安定であり且つアルカリ
（Ｆｆｆ１２）に対して安定であυ且つ透析することが
できる。これらの抑制因子はトリアジンおよびペプシン
によって不活性化されず、一方、それらは先に挙げた酵
素を抑制しｒｌい。これらは典型的な蛋白質染料で染色
することができる。グル濾過による推定によれば、これ
らの抑制因子の分子量は、１００より大であるが２．０
００よりも小である。

これらのグループの中の最良の抑制因子は、サッカラー
ゼに対するきわめて高い抑制御作用によって顕著である
。

菌株ＤＳＭ７ｔ、組成Ａ（実施例４参照）の栄養溶液中
で醗酵させるときは、４日間の醗酵後に、４００．０Ｏ
Ｏ５ＩＵ／１３以上を取得することができ且つこの菌株
を、栄養溶液ＳＳ　　（実施例３参照）中で培養すると
きは、６日間の醗酵後に、３００，０００ＳＩＵ／１以
上を取得することができる。

約４ｏ、０ＯＯ５ＩＵ／？の粗製抑制因子は、Ｈ■形態
にある強酸性カチオン又換樹脂上の吸着およびその後の
ＮＨ，水溶液による脱着ならびに脱着溶液の濃縮および
凍結乾燥によって取得することができる。粗製抑制因子
のメタノールによる抽出、抽出物の乾固に至るまでの濃
縮、残留物の水中への再溶解およびその水溶液のデキス
トランまタハセルロース、特にカルボキシメチルセルロ
ースに基づく弱酸性変換体上のクロマトグラフィー、希
鉱酸、好ましくは１０”〜１０”＃塩酸による脱着、サ
ッカラーゼ抑制作用を有する両分の濃縮ならびにこれら
の両分の凍結乾燥は、約２５０，０００５１　Ｕ／　５
Ｆ−の＊ｍ粗生成物を与える。この濃縮粗生成物のメタ
ノール中の修飾デキストラン（セファデックス■ＬＨ２
０）上におけるクロマトグラフィー、サッカラーゼ抑制
１作用を有する両分の濃縮および濃鉱酸、好ましくは濃
塩酸の添加による１〜３のｐＨ値までのｐＨの低下は、
５４０．０００ＳＩＵ／Ｐの結晶性生成物を与える。こ
の物質はりＯ？トゲラフイーによると純粋である。頌、
０４Ｎまたは、塩酸塩に対して、Ｃ６ＨＩ３０４ＮＣ１
が、経験式として、測定された。その物理的ノぐラメー
タ（ＪＲ，ＮＭＲおよびＵＶスペクトル；融点および比
旋光度）ならびに化学的性質（過ヨウ素酸塩酸化および
元素分析）に基づいて、これらはＳ。

ｌＮ０ＹＥら（Ｔｅｔｒａんｙｄｒｏｎ　　２３．２１
２５（１９６８））によって記されている経験式Ｃ６Ｈ
，、Ｏ，Ｎまたは、塩酸塩に対する、Ｃ、Ｈ，、０，Ｎ
Ｃｌ、の化合物と同一であるが、この化合物は上記の著
者らによって、構が与えられ且つこれに対して６１−デ
スオキシノジリマイシン“の名称が提案されている。

この化合物は、上記著者らにより、抗生物質ノジリマイ
シンの水酸化により、化学的な手段によって、取得され
た。出発物質のノジリマイシンは、Ｔ、ＮＩＩＤＡら（
Ｊ、Ａｎｔｔｂｉｏｔｉｃｖ、　Ｓｅｒ、Ａ、　　２０
　。

６２（１９６７））によって、ストレフ０トマイシス属
の微生物の醗酵によって、得ることができる。

本発明は、比較的不安定であり、そのために取扱いが難
しいノジリマイシンを経る、回りくどい手／［を用いる
ことなく、直接的な微生物学的合成により、１回の操作
で、良好な収率でデスオキシノジリマイシンヲ調造する
ことを始めて可能にするものである。

このような化合物が桿函属の微生物にょシ生産されると
いうことは、これらの微生物は一般に二次的な物質の生
産者としてはあまシ適しておらず、よぐても本質的にペ
プチド状の二次物質を生成するに過ぎないから、きわめ
て意外なことであり且つ予想し得なかったことである。

その上、個々の菌株、たとえばＤＳＭ３７２、は、混合
物として、デスオキシノジリマイシンおよび／″または
ノジリマイシンに加えて、薄層クロマトグラムによって
明確に区別することができる、サッカラーゼ抑制作用を
有する、その他の成分をも生産する、サッカラーゼ抑制
因子を生成する。

他の国法、たとえばＤＳＭ７４１は、デスオキシノジリ
マイシンまたはノジリマイシンを薄層クロマトグラム中
に検出することができず且つかぐして別の化学構造ｆｔ
有している、抑制因子を生成する。

動物および人間において、炭水化物含有食品および炭酸
飲料（たとえば穀物殿粉、じゃがいも殿粉、果物、果物
ジュース、ビールおよびチョコレート）の摂取後に、下
式に従って、グリコシド水解酵素（たとえば唾液および
膵臓アミラーゼ、マルターゼ訃よびサッカラーゼ）によ
る炭水化物の迅速な減成の結果として生ずる過血糖症が
起るということは公知である： 糖尿病患者の場合には、このような過血糖症は、特に強
く且つ長く持続する顕著な性質のものである。脂肪質の
被験者の場合には、食餌性過血糖症が、しばしば特に激
しいインシュリン分秘をみちびき、−万、それが脂肪合
成の増大および脂肪減成の低下をもたらす。このような
過血糖症に続いて、健全な代謝を有する脂肪性肥満者の
場合には、インシュリン分秘の結果として、しばしば、
低血糖症が起る。低血糖症訃よび胃中に残存する食物泥
の両者が、胃液の生産を促進し、−万、それは胃炎また
は胃あるいは十二指腸潰瘍の生成を起すか、または起し
やすぐすることが知られている。

炭水化物、特にスクロースは、微生物によって口腔中で
分解され、それによって餡歯の生成が促進されるという
ことも、公知である。

たとえばｉ腸管内のサッカラーゼ不足の結果としての、
炭水化物の病的吸収は、下痢を起させる。

グルコシダーゼ抑制・剤の適当な投与は、合成的病的吸
収に効果があり、それてよって便秘の治療に対して適し
てＡる。

かぐして、本発明による抑制因子は、下記の適応症に対
する治療剤として使用するために適している：脂肪症、
過脂肪蛋白質症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病、糖
尿病前期、胃炎、便秘および餡歯。

活性のスイクトルを拡大するためには、互にそれぞれの
作用を補足する、グリコシド水解酵素に対するいくつか
の抑制因子を組み合せることが望ましいと思われるが、
この組合わせは、本発明による抑制因子同士の組合わせ
、あるいは本発明による抑制因子と既に公知の抑制因子
との組合わせの何れであってもよい。かぐして、たとえ
ば、本発明によるサッカラーゼ抑制因子と公知のアミラ
ーゼ抑制因子を併用することが適当である場合がある。

ある場合には、本発明による抑制因子の、公知の経口抗
糖尿病剤（β−内向細胞スルホニル尿素誘導体および／
または血糖に対する作用を有するビグアニド類）との併
用および、たとえば、クロフイプラット、ニコチン酸、
コレスチラミンその他のような、血液脂質低下活性化合
物との併用もま、た、有利である。

本発明の化合物は、希釈ぜずに、たとえば粉末としてま
たはゼラチン包装中で、あるいは製薬組成物中で賦形剤
と組み合わせて、投与することができる。

かぐして本発明は、固体または液化ガス状の希釈剤との
混合物中で、あるいは界面活性剤の存在する場合を除い
ては、２００よりも小さい（好ましくは３５０工りも小
さい）分子量を肩する溶剤以外の液体希釈剤との混合物
中で、本発明の化合物を活性成分として含有する製薬組
成物を提供する。

更に本発明は、本発明の化合物を活性成分として含有す
る、滅笛または等張水溶液の形態にある製薬組成物を提
供する。

また本発明は、本発明の化合物を包含する服用単位形態
にある薬剤を提供する。

更に本発明は、本発明の化合物を包含する、錠剤（ロゼ
ンジおよび顆粒を含む）、糖剤、カプセル剤、丸剤、ア
ンプ剤または生薬を提供する。

本明細書において使用する場合の１薬剤”とは、医療投
与に対して適する物理的に分離した合着部分を意味する
。１服用単位形態にある薬剤”とは、本明細書において
用いる場合には、担体と組み合わせたおよび／または外
包内に封入した本発明の化合物の１日分投与量あるいは
１日分投与量の倍量（４倍に至るまで）または約量（低
くは４０分の１４で）を含有する医療投与に対して適す
る物理的に分離した合着部分を意味する。その薬剤が１
日分の投与量または、たとえば、１日分投与量の半分、
３分の１あるいは４分の１を含有しているかどうかは、
その薬剤を、それぞれ、１日に１回、または、たとえば
２回、３回あるいは４回投与せしめるべきかによってき
、まる。

本発明による製薬組成物は、たとえば、軟膏、グル剤、
泥胃、クリーム剤、噴霧剤（エーロゾルを含む）、洗浄
剤、懸濁剤、水性または非水性希釈剤中の活性成分の液
剤および乳剤、シロップ、粒剤あるいは散剤の形態をと
ることができる。

錠剤、糖剤、カプセル剤および丸剤として成形せしめる
ために適する製薬組成物（たとえば粒体）において使用
すべき希釈剤は、次のものを包含する： （α］　充填剤および増量剤、たとえば殿粉、糖類、マ
ンニトール、お工び珪酸；（ｂ］　　結合剤、たとえハ
カルポキシメチルセルロースお工びその他のセルロース
誘導体、アルギン酸塩、ゼラチンならびにポリビニルピ
ロリドン；（ＣＪ　　ｉ湿剤、たとえば、グリセリン；
（自　　崩壊剤、たとえば寒天、炭酸カルシウムおよび
重炭酸°ナトリウムｓ　（’＋　　溶解遅延剤、たとえ
ばｌ？ラフイン：び１　吸収促進剤、たとえば四級アン
モニウム化合物：（５＋５￥面活性剤、タトエば化チル
アルコール、グリセリンモノステアレー）　；　（Ａ）
　　吸着性担体、たとえばカオリンおよびベントナイト
；（０潤滑剤、たとえばメルク、ステアリン酸カルシウ
ムおよびマグネシウムナラびに固体ポリエチレングリコ
ール。

散剤である裏薬組成物は、たとえば、通常の希釈剤、た
とえばラクトース、メルク、珪酸、水酸化アルミニウム
、珪酸カルシウムおよびポリアミド粉末ならびにこれら
の物質の混合物を含有することができる。エーロゾル噴
霧剤は、たとえば、通常の抛射薬、たとえばクロロフル
オロ炭化水素を含有することができる。

散剤は、活性物質を適当な大きさまで粉砕し且つそれを
、同じく粉砕しである！Ｒ薬賦形剤と混合することによ
って、製造する。通常は、そのために、たとえば殿粉、
ラクトース、スクロースまたはグルコースのような食用
となる炭水化物を使用し且つまたここで使用することが
できるけれども、たとえばセルロース誘導体のような、
代謝不可能な炭水化物を使用することが望ましい。

甘味剤、香味剤、防腐剤、分散剤および染料を存在せし
めることもできる。

本発明の製薬組成物から形成せしめる錠剤、糖剤、カプ
セル剤および丸剤は、不透明化剤を含有していてもよい
、通常の剤皮、外包および保護基質を有することができ
る。これらは、活性成分を、湯管内の特定部分のみで、
または特定部分で優先的に、できうれば一定の時間にわ
たって、放出するように構成せしめることができる。剤
皮、外包および保護基質は、たとえば重合体物質または
ワックスから成るものとすることができる。

活性成分は、上記希釈剤の１種または数種と共に、ミク
ロカプセル状に仕上げることもできる。

カプセル剤は、前記の散剤混合物を配合し、且つ既に形
成せしめであるゼラチンケーシング中に充填することに
よって、製造することができる。

たとえばシリカゲル、メルク、ステアリン酸マグネシウ
ム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレング
リコールのようす潤滑剤を、充填作業前に、散剤混合物
に添加することができる。たとえば、寒天、炭酸カルシ
ウムまたは炭酸ナトリウムのような崩壊剤または可溶化
剤を、カプセルを飲むときの接触性の改善のために、混
合物に添加することもできる。

錠剤は、たとえば、粗い、ｉたけ微細な散剤混合物を調
製し且つ潤滑剤および崩壊剤を添加することによって、
製造することができる。錠剤は、この混合物から成形せ
しめる。散剤混合物は、適当な方法によって粉砕しであ
る活性物質を混合し且つ前記のような希釈剤またはその
他の賦形剤を加えることによって、製造する。場合によ
っては、結合剤、たとえば、カルボキシメチルセルロー
ス、アルギン酸塩、ゼラチンまたはポリビニルビαリド
ン、溶解遅延剤、たとえば）ぐラフイン、吸収促進剤、
たとえば四級塩ｆ？工び／または吸着剤、たとえばベン
トナイト、カオリンまたは燐酸二カルシウムを加える。

散剤混合物は、たとえばシａツ１、殿粉イーストまたは
アカシアゴム、アルイはセルロースまたは重合体材料の
溶液のような結合剤と共に、造粒することができる。然
るのち、製品を粗いふるい全通して圧縮する。また別の
方法として、散剤混合物全錠剤製造機中に供給し且つ生
成する均一でない成形体を粒子状の大きさに粉砕するこ
とも可能である。生ずる粒子が錠剤成形機のノズルをふ
さぐことがないように、次とえばステアリン酸、ステア
リン醗塩、メルクまたは鉱油のような潤滑剤を加えるこ
とができる。潤滑しであるこの混合物を、次ｒで錠剤の
形態に圧縮する。活性化合物全自由流動性の不活性賦形
剤と混合し、且つ造粒または粉砕工程を省略して、直接
に、錠剤の形態とすることもできる。生成物には、透明
または不透明な保護ケーシング、たとえばシェラツクの
剤皮、糖または重合体物質の剤皮、およびワックスによ
る光沢あるケーシングを与えることができる。異なる適
量単位の間の区別全行なうことができるように、これら
の剤皮に染料音訓えることができる。

液剤および乳剤である製薬組成物は、たとえば、通常の
希釈剤（いうまでもなく、界面活性剤が存在する場合を
除いて２００よシ低い分子量を有する溶剤の前記のよう
な除外のもとて）、たとえば溶剤、溶解剤および乳化剤
を含有することができる；このような希釈剤の特定的な
例は、水、エチルアルコール、インプロピルアルコール
、炭９エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息
香酸ヘンシル、プロピレングリコール、１，３−ブチレ
ングリコール、ジメチルホルムアミド、油ゆ（たとえば
落花生油）、グリセリン、テトラヒドロフルフリルアル
コール、ポリエチレングリコールおよびソルビトールの
脂肪酸エステルまたはこれらの混合物である。

懸濁剤である製薬組成物は、たとえば液体希釈剤のよう
な通常の希釈剤、たとえば水、エチルアルコール、プロ
ピレングリコール、界面活性剤（りとえばエトキシル化
インステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルバ
イトおよびンルビタンエステル如）、ミクロクリスタリ
ンセルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト
、寒天、およびトラガカントまたはこれらの混合物を含
有することができる。

たとえば液剤、シロップ剤およびエリキシルのような、
経口的に投与すべき配合形態物は、その配合物の特定量
が特定量の活性化合物を金回するように、服用単位に調
製することができる。シロップ剤は、活性化合物を適当
な香味物質を含有する水溶液中に溶解することによって
、ｖＩ４製することができる。エリキシルは、無毒性の
アルコール系賦形剤を用いて取得する。懸濁剤（／ｉ、
化合物を無毒性の賦形剤中に分散させることによって、
製造することができる。たとえばエトキシル化インステ
アリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトー
ルエステルのような可溶化剤分よび乳化剤、防腐剤なら
びにたとえば薄荷油またはサッカリンなどのような香味
や甘味を与えるための添加剤をもＪｌｌｌえることがで
きる。

カプセル剤には、服用注意を与えることができる。その
上、友とえば活性化合物を重合体物質、ワックスなど中
に保持することによって、活性化合物を遅延させる具合
１・て放出させるように、安全を図ることもできる。

本発明によるすべての製薬組成物は、着色剤および防腐
剤ならびに香料および香味添加剤（たとえば薄荷油およ
びユーカリ油）ならびに甘味剤（たとえばサッカリン）
をも含有することができる。

本発明による製薬組成物は一般に、全組成物の重量の０
．１〜９９．５％、通常は０．５〜９５％の活性物質を
含有している。

本発明の化合物に加えて、本発明による製薬組成物およ
び薬剤は、その他の医薬として活性な化合物を含有する
こともできる。また、これらは、複数の本発明の化合物
を含有することもできる。

本発明の薬剤中の希釈剤は、本発明の製薬組成物に関し
て先に記したものの中の任意のものとすることができる
。かかる薬剤は、単独希釈剤として２００よりも低い分
子量を有する溶剤を包含することができる。

本発明による薬剤を構成する分離した合着部分は一般に
、その形状および包装によって、医療投与に対して適応
せしめてあシ且つ、たとえば、次のものの中のどれかと
することができる：錠剤（ロゼンジおよび顆粒を含む）
、丸剤、糖剤、カプセル剤、生薬およびアングル剤。こ
れらの形態の中のいくつかは、活性成分の遅延した放出
を行、・工うように仕上げることができる。たとえばカ
プセル剤のような、ある種のものは、物理的に分離し且
つ合着した薬品の部分ならしめる保護外包を有している
。

本発明の薬剤の投与のための好適な１日分の投与量は、
１５００〜３ｘｌＯ’、４７［乃至５０〜ｌＸ１０５Ａ
ＩＵの活性成分である。

本発明は更に、炭水化物代謝を調節し且つ／または人間
および非人間動物における前記の病気と戦う（予防、軽
減および治癒を含む）ための方法をも提供するが、この
方法は、動物に対して本発明の化合物を単独で、または
希釈剤との混合物として、あるいは本発明による薬剤の
形態として、投与することから成っている。

これらの活性化合物は、経口的に投与することが期待さ
れる。

一般に、■効な結果全達成するためＫは、１日当り体Ｎ
　Ｉ　Ｋｑにライて３０〜３Ｘ１０’　ＡＩＵ乃至１〜
ｌＸ１０′ＳＩＵの量を投与することが有利であること
が認められている。しかしながら、時によると、このよ
うな投与率から外れる必要かあることもあり、特に治療
すべき人間または動物対象の本質および体重、この対象
の治療に対する個々の反応、活性成分を投与せしめる配
合物の形態および投与を行なう方式、ならびに病気の進
行上の時点または薬剤を投与すべき間隔に応じて、その
ようにしなければならない。かぐして、ある場合には、
上記の最低投与率よりも少ない量を用いて充分であるの
に対して、他の場合には望ましい結果を得るためには、
前記の上限を超えねばならない。比較的多量を投与する
場合には、１日の経過にわ之って、これらを何回かの個
々の投与に分けることが望ましいことがある。

上記のＲ薬組成物および薬剤に加えて、本発明は、更に
本発明の活性化合物および栄養材料を含有する薬物全添
加した食品（人間または動物の消費のために配合するこ
とができる）ｆｔも包含する。

人間の消費に適するこのような食品の例は、本発明によ
る抑制因子の少なぐとも１種の医薬として活性な量が添
加しである、？塘、パン、じゃがいモ製品、果物ジュー
ス、ビール、チョコレートおよびその他の菓子類、なら
びに、たとえばジャムのような保存食品である。

その上、本発明による抑制因子は、動物において、望ま
しくない脂肪の望ましい低脂肪含量の肉に対する割合を
、低脂肪の肉を増大させる方向で、高度に左右するとい
う性質を有している。これは、農業用家畜動物の飼育、
たとえば豚の肥育に訃いて特に重要なことであるばかり
でなく、その他の家畜動物およびペット動物の飼育に対
しても、かなり重要である。その上、本発明の抑制因子
の使用は、時間、量および質の何れの点においても、動
物の飼育の合理化をみちびくことができる。これらは一
定の消化の遅延を生じさせるから、腸管内における栄養
物の滞留時間が延長され、それによって費用の低下を伴
なう任意量の飼育が可能となる。その上、本発明による
抑制剤全使用する場合には、多ぐの場合１（、高価な蛋
白質飼料のかなシの箇約が可能である。

か（して本発明の活性化合物は、動物の栄養のほとんど
すべての部分において脂肪層の形成の低下のため、およ
び飼料蛋白質の節約の友めの薬品として、用いることが
できる。

活性化合物の活性は、この場合において、本質的に動物
の本質および性には無関係である。活性化合物は一般に
、比較的多量の脂肪を蓄積する傾向があるか、またはそ
の寿命の特定段階において、そのような傾向がある、動
物の種において、特に価値があることがわかっている。

脂肪層の形成の低減のためおよび／または飼料蛋白質の
節約の之めに本発明の抑制因子を使用することができる
動物の例としては、以下の家畜動物およびペット動物を
挙げることができる：温血動物、たとえば、牛、豚、馬
、羊、山羊、猫、犬、兎、毛皮動物、たとえばミンクお
よびチンチラ、ならびにその他のＲット動物、たとえば
てんじぐねすみおよびハムスター、実験ｍ物および動物
園の動物、たとえば、ラット、マイス、猿など、家禽、
たとえばブロイラー、にわとシ、ガチョウ、鴨、七面鳥
および鳩、おおむおよびカナリヤ、ならびに冷血動物、
たとえば鯉のような魚および爬虫類、たとえば蛇。

活性化合物の好都合な性質の故に、望ましい効果を達成
するために動物に対して投与する活性化合物の量は、実
質的に変化さ・ビることができる。

飼料Ｉ　Ｋｑ当りに約０．５η〜２．５１、特に１０〜
１００ｑが好ましい。活性化合物を投与せしめる期間は
、数時間または数日から、数年に至るまで、とすること
ができる。適当な量の活性化合物および適当なその投与
期間に飼育の対象物と密接な関係がある。特に、それは
動物の種類、年令、性および健康状態ならびに動物の飼
育の方法に依存するが、この技術分野の熟練者であれば
容易に決定することが可能であろう。

本発明による活性化合物は、通常の方法によって動物に
投与する。投与の方法は、特に、動物の種類、機能およ
び全般的な状態に依存する。かくして、経口的に１日に
１回または数回、規則的または不規則的な間隔で、投与
を行なうことができる。多ぐの場合に、特に動物の飼料
および／または飲料摂取の周期において、経口的に投与
することが、便宜上の理由で好適である。

活性化合物は、純粋な物質として、または配合した形態
として、投与することができる。配合形態は、プレミッ
クスとして、すなわち任意の望ましい種類の無毒性不活
性賦形剤と混合して、且つまたは補充飼料の形態として
全給餌景の一部として、且つまた混合飼料自体の混合物
の成分としての何れをも包含する。飲料水による適当な
配合物の投与もまた、包含される。

場合によっては、配合形態にある活性化合物は、他の栄
養物および活性化合物、たとえば、無機塩類、痕跡元素
、ビタミン烟、蛋白質、エネルギー担体（たとえば殿粉
、砂糖または脂肪）、染料および／または香味物質、あ
るいはその他の飼料添加剤、たとえば生長促進剤と共に
、適当な形態で投与することができる。活性化合物は、
飼料の摂取の前、間または後に投与することができる。

飼料および／または飲料水と同時の経口投与が有利でち
ゃ、活性化合物は、必要に応じて、飼料および／または
飲料水の全量に対して、あるいはその一部に対してのみ
、加えることができる。

活性化合物は、常法に従がい、好ましくは細かく粉砕し
た状態で、純物質として単に混合することにより、ある
いは食用となる無毒性の賦形剤と混合した配合形態で、
且つ場合によってはプレミックスまたは濃厚飼料の形態
で、飼料および／または飲料水に対して添加することが
できる。

飼料および／または飲料水は、たとえば、約０．００１
〜５．０％、特に０．０２〜２−ＯＸ（重量）の濃度で
、本発明による活性化合物を含有することができる。飼
料および／または飲料水中における活性化合物濃度の最
適水準は、特に、動物の飼料および／または飲料水の摂
取量に依存し、専門家によれぼ容易に決定することが可
能であろう。

飼料の種類およびその組成は、この場合には重要ではな
い。調和のとれた栄養の供給に対して必要な、ビタミン
および無機物質を含む、エネルギー物質と蛋白質の通常
の釣合を有することが好ましい、現在南中で人手するこ
とができる飼料または特別な飼料組成物のすべてを使用
することができる。飼料はたとえば、植物質のもの、た
とえば細断し次曲かす、粉砕した穀類および穀類副製品
、更に乾草、生牧草飼料、ビート、およびその他の飼料
植物、動物質のもの、友とえば肉および前製品、骨粉、
脂肪およびビタミン類、比とえばビタミンＡ、ＤＳＥ％
におよびＢ−複合体、ならびに特別な蛋白質源、たとえ
ば酵母およびある種のアミノ酸、ならびに無機物質訃よ
び痕跡元素、たとえば燐および鉄、亜鉛、マンガン、銅
、コバルト、沃素など、から成ることができる。

プレミックスは、何らかの望ましい食用賦形剤および／
または無機塩、たとえば炭酸性飼料石灰に加えて、約０
．１〜５０　Ｘｓ特に０．５〜５．０％（重量）の式ｌ
の活性化合’ｍｔ含有することが好ましく、且つ通常の
混合方法によりて調製することができる。

混合飼料は、それに対する通常の原材料成分、たとえば
細断した穀類または穀類副産物、細断した油かす、動物
蛋白質、鉱物質、微量元素およびビタミンに加えて、０
．００１〜５．０％、特に０．０２〜２０　Ｘ　（重量
）の式１の活性化合物を含有することが好ましい。これ
らは通常の混合方法によって、調製することができる。

プレミックスおよび混合飼料中の活性化合物は、その表
面を被覆する適当な物質によって、たとえば無毒性のワ
ックスまたはゼラチンを用いて、空気、光、および／ま
たは湿気から適当に保護する　゛こともまた、好ましい
。

以下のものは、本発明の活性化合物を含Ｍする家禽用の
、仕上がった配合飼料の組成の１例である：２０（ｌの
小麦、３４０？のとうもろこし、３６０．３５１−の徂
い大豆粉、６０Ｐの牛脂、１５ｇ−の燐酸二カルシウム
、１０？の炭酸カルシウム、４ｙ−の法度化塩化ナトリ
ウム、７５？のビタミン／無機物混合物および３．２１
の活性化合物プレミックス。これは注意深い混合後に、
１匂の飼料を与える。

ビタミン／無機物混合物は、次のものから部：６ＩＯ０
０ＩＵのビタミンＡ、　　１．０００１−Ｕ、のビタミ
ンＤ３．１０ηのビタミンＥ、１■のビタミンＫｓ　、
３　ｑのり？フラビン、２１１９のピリドキシン、２０
ｗ９のビタミンＢ、、、５■の）ｆ７）テン炭酸カルシ
ウム、３０ηのニコチン駿、２００■の塩化＋　）　Ｉ
Ｊ　’７　Ａ、２００　”Ｓ’　Ｏｉ’ｙｌｎｓ　０４
・Ｈ２Ｏ，１４０Ｔｎ９のＺｎ５Ｏ，−７Ｈ，０，１０
０ｖの、７’　ｅ　Ｓ（％　・７Ｈｚ　□および２０■
のＣｕ、ＳＯ，・５Ｈ，０，活性化合物プレミックスは
、友とえば、所望量、たとえば１，６００■の１−デス
オキシノジリマイシン、およびそれに加えて１９−のＤ
Ｌ−メチオニンならびに３．２Ｐのプレミックスを与え
るに充分な量の大豆粉を含有する。

式■の活性化合ｗを含有する、豚用の、混合飼料の組成
の１例金次に示す：６３０Ｌ？の細断した穀物飼料（２
００５’の粉砕とうもろこし、１５０？の粉砕大麦１５
０Ｊの粉砕カラス麦および１３０？の粉砕小麦から成る
）、８０に魚粉、６偏り粗い大豆粉、５８．８５’のタ
ピオカ粉、３８Ｐのビール酵母、５０？の豚用ビタミン
／無機物混合物（組成は、たとえば家禽飼料用と同じ）
、３０？のアマニ油かす粉、３偏りとうもろこしグルテ
ン飼料、１（Ｈ）−の大豆油、ＩＯＰの砂掘きび糖量お
よび２？の活性化合物プレミックス（組成は、たとえば
、家禽飼料と同じ）。これは、注意深い混合後に、ＩＫ
ｇの飼料を与える。

上記の飼料混合物は、好ましくはそれぞれ、鶏および豚
の飼育および肥育のためのものである：しかしながら、
これらは、同一または類似の組成において、その他の動
物の飼育および肥育に対しても使用することができる。

既に述べたように、抑制因子は純粋な活性化合物および
、場合によっては大ざっばな′Ｉ′ｆＩｔ製後の製造に
おいて取得した粗活性化合物の両者を使用して、個々に
、または何らかのΔましい相互の混合物として、用いる
ことができる。

以下の実施例は本発明を例証するものである。

実施例り 組成： ２．０％のとうもろこし殿粉 １．０％のグルコース ０．５％のカゼイン加水分解物 １．０％の酵母エキス ｆ）ＨをＮａｚＣＯｓによって７．２に調節＋０．４％
のＣｃＬＣＯ３ １２１℃において３０分間滅菌 を有する栄養溶液１２０ｄを含有する円錐フラスコを菌
株ＤＳＭ７０４の胞子懸濁物で接種し且つフラスコを回
転振とう機上で２８℃で培養するときは、５日後に培養
溶液は、７０ｓＩＵ／ｍｌの活性を示す。

実施例２ 組成ニ ア、５％の麦芽エキス ０．３％のカゼイン加水分解物 ０．７％の酵母エキス ０．３％のＱａＣＯｓ ０．３％ｆ）ＫｚＨＰＯａ 水道水、１２１℃で３０分滅菌し、その後に７）ＨをＩ
ＣｚＣＯｓによって６．６〜６．８に調節を有する栄養
溶液１２０ｄを含有する円錐フラスコを菌株ＤＳＭ７０
４の胞子懸濁物で接種し且つフラスコを回転振とう機上
で２８℃において培養するときは、５日後に、培養溶液
は、１９７ＳＩＵ／ゴの活性を示す。

実　施　例　ａ−栄養溶液Ｓ３ 組成ニ ア、５％の麦芽エキス ０・３％のカゼイン加水分解物 ０・７％の酵母エキス ０．３％のＣａ　ＣＯ３ ０，３％のＫｚＨＰＯ４ 水道水、１２１℃で３０分間滅菌、 滅菌後にＫｚＣＯ３によってｐＨを６．６〜６．８に調
節 を有する１００ｔの栄養溶液を含有する１４０１の醗酵
器を、それぞれ１２０ゴの同一組成の栄養溶液を含有す
る１０ｔの円錐振とうフラスコに菌株ＤＳＭ７０４を接
種して培養することによって取得した、１．２７＝の予
備培養物で接種し、且つ醗酵器を、２８℃において５日
間、攪拌し且つ通気し々から、培養すると、２６０ＳＩ
Ｕ／ｍｌを含有する培養液を取得する。

実　施　例　屯−栄養溶液Ａ 組成： ３・０％の大豆粉 ３．０％のグリセリン ０．２％のＣｃＬＣＯ３ 水道水 １２１℃において３０分滅菌 を有する１２０ゴの栄養溶液を含有する１ｔの円錐フラ
スコを菌株ＤＳＭ７の胞子懸濁物で接種し且つフラスコ
を回転振とう機上で２８’Ｃで培養すると、４日後に、
培養溶液は４３７ＳＩＵ／ｒｎｔの活性を示す。

実施例＆ 実施例１による栄養溶液１２０ゴを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ７の胞子懸濁物で接種し且つフラ
スコを回転振とう機上で２８℃、−卦いて培養すると、
５日後に、培養液は１６２ＳＩＵ／ｍｌの活性を示す。

組成： １．０％のグルコース １．０％の可溶性殿粉 ０．５％のカゼイン加水分解物 ０．７５％の肉エキス ０．７５％のペプトン ０．５％の酵母エキス ０．１％のＫｚＨＰ　Ｏ４ ０，３％のＮａＣ１ ０，１％のＭ　ｇ　Ｓ　０４・７　Ｈ２０水道水、Ｎａ
、２ＣＯ３によりｐＨを７．２に調節減菌＝１２１℃で
３０分 を有する１２０−の栄養溶液を菌株ＤＳＭ７の胞子懸濁
物によって接種し、且つフラスコを回転振とう機上で２
８℃において培養すると、５日後に、培養液は３６．４
ＳＩＵ／ｒｄの活性を示す。

実施例７ 実施例３による栄養溶液２００ｒＩＬｔを含有する１リ
ツトルの円錐フラスコを菌株ＤＳＭ７の胞子懸濁物で接
種し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃にかいて培
養すると、６日後に、培養液はｚ２４ｓＩＵ／ｍｔの活
性を示す。

実施例＆ 実施例４による栄養溶液１００ｔを含有する１４０１の
醗酵器を、同一組成の１２０ｄの栄養溶液をそれぞれ含
有する１Ｏｔの振とうする円錐フラスコに菌株ＤＳＭ７
によって接種し且つ培養することによって取得した１、
２ｔの予備培養物で接種し、且つ醗酵器を、攪拌し且つ
通気しながら、２８℃において５日間培養すると、２８
６ＳＩＵ／ゴを含有する培養液を取得する。

実施例ａ 実施例２による栄養溶液１２０ｒｎｌを含有する１ｔの
円錐フラスコを菌株ＳＤＭ１の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培養
するときには、６日後に、培養液は２８．４　Ｓ　ＩＵ
／ｍｔの活性を示す。

実施例１α 実施例１による栄養溶液１２０−を含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ３６５の胞子懸濁物で接種し且つ
フラスコを回転振とり機上で２８℃において培養すると
、４日後に、培養液は１５６ＳＩＵ／−の活性を示す。

実施例ＩＬ 実施例２による１２０ｍ／の栄養溶液を含有する１ｔの
円錐フラスコを菌株ＤＳＭ３６５の胞子懸濁物によって
接種し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において
培養すると、４日後に・培養液は２５ｅ８　Ｓ　Ｉ　Ｕ
／ｒｒｔの活性を示す。

実施例１ｚ 実施例４による栄養溶液１２０ｒｒＬｌを含有する１ｔ
の円錐フラスコを菌株ＤＳＭ７４１の胞子懸濁物によっ
て接種し且つフラスコを回転振とり機上で２８℃におい
て培養するときは、５日後に、培養液は３．２　Ｓ　Ｉ
　Ｕ／−の活性を示す。

実施例１ａ 実施例１による組成の栄養溶液１２０ｄを含有する１ｔ
の円錐フラスコを菌株７４１の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培養
すると、５日後に、培養液は２６．４　Ｓ　Ｉ　Ｕ／ｍ
ｌの活性を示す。

実施例１４゜ 実施例２による組成の栄養溶液１２０ｄを含有する１ｔ
の円錐フラスコを菌株ＤＳＭ７４１の胞子懸濁物によっ
て接種し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃におい
て培養すると、３日後に、培養液は２４．Ｏｓ　ｒ　Ｕ
／ａｔの活性を示す。

実施例１５ 組　成： ２．０％のとうもろこし殿粉 ０．５％のグルコース ０．３％のカゼイン加水分解物 Ｎα２ＣＱ３によってｐＨを７．２に調節０．４％のＣ
ａＣＯ３ 滅菌＝１２１℃で３０分間 を有する１２０ｒｎｔの栄養溶液を含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ７４１の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培養
すると、２日後に、培養液は８Ｌ７ｄの活性を示し、３
日後に、それは１２１ＳＩＵ　　　　／ｄの活性を示す
。

実施例１ａ 実施例４による栄養溶液１２０ｄを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ６７５の胞子懸濁物で接種し且つ
フラスコを回転振とう機上で２８℃において培養すると
、５日後に、培養液は８．６８ＩＵ／ａｔの活性を示す
。

実施例１による栄養溶液１２０ｄを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ６７５の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とり機上で２８℃にかいて培養
すると、５日後に、培養液は５３．ＯＳ　Ｉ　Ｕ／ａｔ
の活性を示す。

実施例２による栄養溶液１２０ｒｌｔを含有する１ｔの
円錐フラスコを菌株ＤＳＭ６７５の胞子懸濁物によって
接種し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃にかいて
培養すると、４日後に、培養物は１７．８　ｓ　ｚ　Ｕ
／ｌＬｔの活性を示す。

実施例１ａ 実施例４による栄養溶液１２０ｄを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ３７２の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培養
すると、５日後に、培養液は６０ＳＩＵ／ｍｌの活性を
示す。

実施例２α 実施例１による栄養溶液１２０ｄを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ３７２の胞子懸濁物によって接種
し、且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培
養すると、４日後に、培養液は２１．６　Ｓ　Ｉ　Ｕ／
ｄの活性を示す。

実施例２Ｌ 実施例２による栄養溶液２００ｄを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ３７２の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃にかいて培養
するときは、３日後に培養液は２６．８　Ｓ　Ｉ　Ｕ／
ａｓの活性を示す。

実施例２ｚ 組成： ２．０％のとうもろこし殿粉 １．０％のグルコース ０．５％のカゼイン加水分解物 ０．５％の酵母エキス ｐＨをＮαｔｃＯ３によって７．２に調節子０．４％の
ＣｃＬＣＯ３ 殺菌：１２１℃にシーて３ｏ分間 を有する栄養溶液１２０＋ｄを含有する１ｔの円錐フラ
スコを菌株ＤＳＭ３７２の胞子懸濁物によって接種し且
つフラスコを回転振とぅ機上で２８℃にｉ−込て培養す
ると、３日後に、培養液は２６．５ＳＩＵ／ｍｔの活性
を示す。

実施例２ａ 実施例２２による栄養溶液１２０−を含有するＩＬの円
錐フラスコを菌株ＤＳＭ４７９の胞子懸濁物によって接
種し且つフラスコを回転振とぅ機上で２８℃において培
養すると、３日後に、培養液は７．９ＳＩＵ／ゴの活性
を示す。

実施例２４゜ 実施例６による栄養溶液１２０ｍを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌＊ＤＳＭ３６の胞子懸濁物によって接種し
且つフラスコを回転振とり機上で２８℃において培養す
ると、３日後に、培養液は５．４ＳＩＵ／ｍｔの活性を
示す。

実施例２＆ 実施例２による栄養溶液１２０ｍ／を含有する１ｔの円
錐フラスコを菌株ＤＳＭ３６の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培養
すると、３日後に、培養液は５．４ＳＩＵ／Ｗｔの活性
を示す。

実施例２ａ 実施例２による栄養溶液１２０−を含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ３５６の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とり機上で２８℃において培養
すると、３日後に、培養液は８．８　Ｓ　Ｉ　Ｕ／ゴの
活性を示す。

実施例２？ 実施例１による栄養溶液１２０−を含有する１ｔの円錐
フラスコを苗株ＤＳＭ２９２の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培養
すると、３日後に、培養液は９−Ｏｓ　Ｉ　Ｕ／−の活
性を示す。

実施例２ａ 実施例２による栄養溶液１２０ゴを含有する１ｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ２９２の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において培養
すると、３日後に、培養液は９．２８　ＩＵ／ｍｌの活
性を示す。

実施例２ａ 実施例２による栄養溶液１２０ｔＩｔを含有する１ｔの
円錐フラスコを菌株ＤＳＭ７４２の胞子懸濁物によって
接種し且つフラスコを回転振とう機上で２８℃において
培養すると、３日後に培養液は９．８ＳＩＵ／−の活性
を示す。

実施例３α 実施例１による栄養溶液１２０−を含有するｌｔの円錐
フラスコを菌株ＤＳＭ７４０の胞子懸濁物によって接種
し且つフラスコを回転振とり機上で２８℃にカイて培養
すると、４日後に、培養液は５．７　Ｓ　Ｉ　Ｕ／ｒｄ
の活性を示す。

実施例３１゜ 実施例３による１００Ｌの醗酵器からの醗酵液を半ａ縮
ＨＣＬによってｐＨ３，０〜３．５に調節し且つ、綿化
後に、細菌体を遠心分離する。２２０，０００：ＳＩＵ
／ｌのＳＩＵ含量を有する’ｒｏｔの濃褐色の培養液を
取得する。この溶液を２０１７時間の流速で、Ｈ形態に
ある１２ｋｇのレワチットの＋ ＣＬｔｔｗａｔｉｔ）ＳＣｌ　０４を充填した直径３０
ｔ−ｒｌｌのカラム上に送る。透過物は、はとんど全く
サッカラーゼ抑制作用を有していないので廃棄する。カ
ラムを５０ｔの蒸留水（洗浄水工）、２０１のＯ乃１Ｎ
ＨＣｌ、次いで再び２０１の蒸留水（洗浄水■）によっ
て洗浄する。次いで活性物の脱着のために、濃＆２．５
％のアンモニアを通す。サッカラーゼ抑制活性物を、溶
出液の伝導度の上昇および褐色の増大と平行して、溶出
させる。伝導度が上昇するまでの最初の流出物（２０ｔ
）を棄て、活性を有する両分（３５ｔ）を、回転エバポ
レータ″−上中で濃縮したのち、少量の水中に再溶解す
る（濃縮物、３ｔ）。この濃縮液を凍結乾燥する。２８
８？の３８０００ＳＩＵ／９−の濃褐色粗生成物Ｉを得
る。

実施例３ｚ 実施例８による１００／、の醗酵器からの醗酵液を半濃
縮ＨＣＬによってｐＨ３，０〜３．５に調節し、且つ綿
化後に、菌１体を遠心分離する。２４０，０００ＳＩＵ
／ｌのＳＩＵ含量を有する６０１の濃褐色培養液を取得
する。この溶液を２０１７時間の流＋ 速で、Ｈ形態にある１２に９のダウエックスＣＤｏｗｅ
ｚ）　５０　ＷＸ　４を充填した直径３０Ｃｒｎのカラ
ム上に送る。透過液はほとんど全くサッカラーゼ抑制活
性を有しておらず、これを廃棄する。この方ラムを５０
ｔの蒸留水（洗浄水工）、２０１の０．０１　Ｎ　ＨＣ
Ｉ　、次いで再び２０ｔの蒸留水（洗浄水■）で洗浄す
る。次いで活性物の脱着のために２．５％の濃度のアン
モニアを通す。サッカラーゼ抑制活性物を、溶出液の伝
導度の上昇および褐色の増大と平行して、溶出させる。

伝導度が上昇するまでの最初の流出物（２０ｔ）を棄て
、活性を有する両分（３５ｔ）を、回転エバポレーター
中で濃縮し且つ少量の水で再溶解する（ａ線源３ｔ）。

この濃縮液を凍結乾燥する。３６０１の２４，０ＯＯ８
ＩＵ／９−の濃褐色の粗生成ウニを得る。

実施例３１からの５０５’の粗生成物を乳鉢中で細かく
粉砕したのち、それぞれ３００ゴの工業用メタノールで
３回抽出する。そのためには、先ずバッチをウルトラツ
ラツクス均等器中で２分間均等化したのち、水浴中で４
０〜５０℃に加温しながら２０分間攪拌する。各抽出後
に、混合物を、ひだ付きｐ紙を用いて濾過する。３回目
の抽出液に戸紙上に残留する残渣を真空乾燥する（　２
　ｇ、４ｔｊ−）。この残渣は、試験の結果、低い比活
性を示すのみであるので棄てる。メタノール抽出物を合
わせて、真空下に乾固するまで濃縮する。フラスコ中に
残留する活性残渣を７５０ｄのＩｈＯ（Ｌ　＝２−８ｍ
Ｓ　、　ｐＨ＝７−２　）中に溶解し、その溶液を５０
０ｍｊ／時間の流速で、Ｈ＋形態にあるＣＭセルロース
ＣＣＨセルロース、メツサーズ　ウオットマン製、Ｃ５
２形）を充填し＊　５　Ｘ　５０　ｃｍのカラム上に通
ずる。このカラムを５ｔの水で洗浄し、次いで２０１の
０．００２ＮＨＣＬを用いて溶出する。

透過液、洗浄水および溶出液を約Ｏ，Ｓ　ｔの部分に分
別的に捕集する。サッカラーゼ抑制活性を測定して、３
０，０００　Ｓ　ＩＵ／ｌよりも大きな活性を有する両
分をすべて合わせる。透過液にｂｍては、これらは濃褐
色の両分２〜４であり、淡黄色の溶出液にかいては両分
１６〜３５である。合わせた両分を濃縮し且つ凍結乾燥
する。４，０００　ＳＩＵ／？の比活性を有する１８・
２？の透過液画分２〜４（廃棄した）および２５０．０
００ＳＩＵ／Ｐの３．１１のいわゆる粗生成物■（約５
０〜６０％の純度）を得る。粗生成物■は強く吸湿性で
あり且つ空気中で短時間に潮解して粘稠物を与える。

実施例３４゜ 付随するペプチドの大部分を分離するために、実施例３
３からの２．５？の粗生成物■を１５ゴのメタノール中
に溶解し且つメタノール中でセファデツクスＬＨ２０を
充填した５Ｘ９０ｃ！ｎのカラム上でクロマトグラフィ
ーを行々う。１０ｄの両分をｘｏＯｇ／時間の流速およ
び４〜５℃の温度で集める。１０μｔのこれらの両分を
、シリカゲルプレート（メツサーズメルク）に付着させ
て、エタ／−ｋｌａ度２５％ＮＨ３／Ｈ２０（８０／　
１０　／１０）の系中で薄層クロマトグラフィーにより
調べる。Ｎ層りロマトグラフィーに従って、抑制因子を
含有する画分を合わせ、５〜ｌＯｍ／！に濃縮し、同じ
カラム上で再びクロマトグラフィーを行なう。

各両分を薄層クロマトグラフィーによって分析し、抑制
因子を含有する両分を合わせるが、きわめて挟込範囲の
ものを切り捨てるのみである。合わせた両分を乾固する
まで濃縮する。ＬＨ２０を用いて、このようにして精製
した抑制因子は、約９０％の純度である。残存する最後
のペプチド不純物を分離するために、回転蒸発器中の蒸
発後に残渣として残留する物質を２〜３ゴのメタノール
中に取り、この黄色のメタノール溶液に５０μｔの濃Ｍ
ＣＩを加える。短時間後に、抑制因子は僅かに黄色の立
方体または平行六面体の形状で晶出する。

ペプチドは母液中に残る。結晶を遠心分離し、氷冷した
メタノールで１回洗浄し、洗浄した沈殿を再び２−のメ
タノール中に、加熱しながら、溶解する。４ゴのブタノ
ールを加え、混合物を４℃で終夜貯蔵する。翌朝、沈殿
している無色の結晶を遠心分離し、氷冷したメタノール
で１回、アセトンで１回、エーテルで１回洗浄したのち
、真空乾燥する。収量：４６０ｑの、塩酸塩の形態にあ
る、５４０．０ＯＯ８ＩＵ／９−の抑制因子。

実施例３５〜４ｚ これらの各実施例にかける、培養液または粗生成物中の
サッカラーゼ抑制区分を検出するために、抑制区分をプ
レート上で直接に検出することを可能とする、プレート
上における後続する酵素反応を伴なう、下記の薄層クロ
マトグラフィ一方法をも使用する。この薄層クロマトグ
ラフィーにおいては、１〜５μｔの醗酵液、すなわち１
〜５μ？の配合物を、シリカゲルの仕上が９プレート（
メツサーズメルク、ＫＧ６０Ｆ２５４形）に付着させ、
且つプレートを、（Ｉ）エタノール／ＮＨ３／Ｈ２０（
８／　１　／　１　）ま几は（ＩＩ）酢酸エチル／メタ
ノール／水（１０／６／４　）中で展開する。サッカラ
ーゼ抑制成分を直接に目視できるようにするために、展
開し且つ完全に乾燥させたプレートを、酵素グル（２０
ｒ！Ｌ１７２０ｍＸ　２０　ｃｍプレート）で噴霧し、
且つグルを固化させる。次いでプレートを湿った室中で
室温にかｈて５分間予備培春したのち、受媒質グルによ
って飽和するまで噴霧する。

この２回目のグル層が固化したのち、プレートを湿った
室に入れて４０℃で陪審する。抑制因子の着色（赤褐色
の背景上の明るいスポット）が６０〜９０分の間に生ず
る。最適の発色の時点にオ込て培養を中止し、寒天層で
おおったプレートを、ファンからの温空気によって乾燥
する。

酵素グル：ｘ、ｓｔのアガロースＣＬ’ｌｎｄｓｓｔｒ
ｉｔＥｉｏｌｏｇｉｑｕｇ　ｐｒａｎｃａｉｓ）をｐＨ
６，０の１０ｍ１の０・２Ｍマレイン酸ナトリウム緩衝
液中に懸濁させたのち、沸とうによって溶解する。透明
なアガロース溶液を５０℃まで冷却し且つ２５０μｔの
トリトンＸ−１００溶液Ｃ２９−のトリトン、￥−Ｚｏ
。

十８１の分析縁エタノール）および０．５　ｍｇのジア
ニシジン溶液（２０ｗのジアニシジン／１ｍｇのアセト
ン）を、攪拌しながら、加える。１ｍｊのＧＯＤ／ＰＯ
Ｄ試薬（１２，５ダのグルコースオキシダーセ、　＃［
１度■、メツサーズベーリングル注文番号１５，４２３
、および２．５ηのにルオキシダーゼ、純度■、メツサ
ーズベーリングル注文番号１５，３０２、を５ｄのマレ
イゾ醗塩緩衝液中に溶解）および４〜５単位の豚の小腸
からのサッカラーゼ（サッカラーゼ抑制試験において先
に記したもの）を、グルの使用直前に添加する。グルは
噴霧するまで５０℃に保たねばならないが、その理由は
、さもないとグルは噴霧操作の間に噴出口中で固化する
からである。

受媒質グル：　０．５５１’−のアガロースを１００ｄ
のｐＨ６，０のマレイン酸ナトリウム緩衝液中に懸濁さ
せ、且つ沸とうさせることによって、溶解する。

次いでこの溶液を５０℃まで冷却し、１００μｔのトリ
トンＣ２９−のトリトン、￥−１００＋８ｆ／の分析級
エタノール）オよびＩｆＰのスクロース（セルバ３５，
５７９　）を加える。スクロースの溶解後に、グルは使
用可能である。

この方法を用いる菌株の培養液の試験は、系Ｉにおいて
は、下記のＲｆ値を有するサッカラーゼ抑制成分を与え
た： ３５　　ＤＳＭ　７　　０．２５ ３６　　ＤＳＭ７４１　０．２５：０．４１：０．５０
：０．５９および０・７１ ３７　　ＤＳＭ　７０４　０．２５ ３８　　ＤＳＭ　３７２　０．２５：０．５１：０．６
０および０．７１ また系πにおいては下記のＲｆ値を与えた：３９　　Ｄ
ＳＭ　７０４　０．０５ ４０　　ＤＳＭ４７９　　（０，０５）：０．２２−０
．３５：０−６２−０．６７および０，８８ ４１　　ＤＳＭ　７４１　　（０，０５）；０−２３−
０．３５および０．６２−０．６７ ４２　　ＤＳＭ　３７２　　（０，０５）：０．２０−
０．２２実施例４ａ 組成： ｉ、ｏ％の殿粉 ０．１％のグルコース ０．５％のカゼイン加水分解物 １．０％の酵母エキス ｐＨｔ　ＮａｚＣＯｓによって７．２に調節子０．４％
のＣαＣＯ３ 滅菌：１２１℃にかいて３０分 を有する栄養溶液１２０ｄを含有する１ｔの円錐フラス
コを菌株ＤＳＭ４７９の胞子懸濁物によって接種し且つ
フラスコを回転振とう機上で２８℃において培養すると
、２日後に、培養液は２０．２ＳＩＵ／ａｔの活性を示
す。

実施例４４ 組成： ２．０％のとうもろこし殿粉 １．０％のグルコース ０・５％のカゼイン加水分解物 １．０％の酵母エキス ０．１％のＫｚＨＰＯ４ ７）ＨｆｔＮｃＬ２ＣＯ３によって７．２に調節＋０．
４％のＣａＣＯ５ 滅菌：１２１℃において３０分 を有する栄養溶液１２０ゴを有する円錐フラスコを菌株
ＤＳＭ３７２の胞子懸濁物によって接種し且つフラスコ
を回転振とう機上で２８℃で培養すると、２．５日後に
、培養液は、５０．３　Ｓ　Ｉ　Ｕ／ｒｄの活性を示す
。

実施例４５〜６ａ これら実施例の各々に於いて、下表に示した様に、実施
例１．２．４又は６の組成物の培養液１２０ｍを含むｌ
ｔ円錐フラスコに、表に示した菌株の胞子懸濁液を接種
し、そしてフラスコを回転振とう機上に於いて２８℃で
培養した、４日後に培養液は下表に示す活性を表わしｆ
ｃ：４５　　ＫＡ−６３ＤＳＭ　　　　　　４　　　３
１４６　　　　＃　　　１０６０　　　　　１　　　６
．６４８　　　１　　　　　　　　　　２　　　７．９
４９　１ＡＭ　１５２３　ＤＳＭ　　　　　４　　　５
０５０　　　　　　　１０６１　　　１　　　４．３５
１　　　　　　　　　　　　　　６　　　３．８５２　
　　　　　　　　　　　　　２　　　２．７５３　０Ｕ
Ｔ８１０８ＤＳＭ　　　　　４　　　８．４５４　　　
　　　　１０６２　　　１　　　３．６２３．１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、桿菌族（ｇｅｎｕｓ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ）に属する
   グリコシド水解酵素抑制因子生産性微生物を培養するこ
   とにより得られたグリコシド水解酵素に対する抑制因子
   を、活性成分として含有することを特徴とする消化管に
   おける炭水化物代謝制御剤。 ２、微生物が枯草菌、枯草菌ニガー変種、アミロリクエ
   フアシエンス菌、メンジスポルス菌およびポリミキサ菌
   の菌種のものである特許請求の範囲第１項記載の剤。 ３、微生物は菌株ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２３３（ＤＳＭ
   ２９２）、ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２４６（ＤＳＭ３５６
   ）、ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２３２（ＤＳＭ３６）、ＦＥ
   ＲＭ−ＰＮｏ．４２４９（ＤＳＭ７４０）、ＦＥＲＭ−
   ＰＮｏ．４２５０（ＤＳＭ７４１）、ＦＥＲＭ−ＰＮｏ
   ．４２５２（ＤＳＭ４７９）、ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２
   ４７（ＤＳＭ３６５）、ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２５１（
   ＤＳＭ７４２）、ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２４３（ＤＳＭ
   ７）、ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２４８（ＤＳＭ３７２）、
   ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．４２４４（ＤＳＭ６７５）またはＦ
   ＥＲＭ−ＰＮｏ．４２３５（ＤＳＭ７０４）のものであ
   る、特許請求の範囲第１項記載の剤。 ４、固体または液化ガス状希釈剤との混合物として、あ
   るいは界面活性剤の存在する場合を除いては２００より
   も小さい分子量を有する溶剤以外の液体希釈剤との混合
   物としての形態である特許請求の範囲第１〜３項の何れ
   かに記載の剤。 ５、０．５〜９５重量％の該活性成分を含有する特許請
   求の範囲第１〜４項の何れかに記載の剤。 ６、服用単位形態にある特許請求の範囲第１項記載の剤
   。 ７、錠剤、丸剤、糖衣剤、カプセル剤またはアンプル剤
   の形態にある特許請求の範囲第１項記載の剤。