JPS62151196A - ｌ−プロプラノロ−ルの生化学的分離法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、８のシ細な量゛Ｈ （産業上の利用分野） 本発明は、微生物の生産するエステラーゼまたはブタ肝
臓起源のエステラーゼなどを利用して。

ｄｌ−プロプラノロールからβ−プロプラノロールを選
択的に分離するｌ−プロプラノロールの生化学的分離法
に関する。

（従来の技術） プロプラノロールは、その化学構造上１つの不斉炭素原
子を有する。従って、プロプラノロールには、ｄ−プロ
プラノロールとＥ−プロプラノロールの立体異性体が存
在する。

プロプラノロールは１通常、ラセミ体で得られ。

不整脈治療薬、抗高血圧薬として実用化されている。し
かし、その薬効は６体と４体とでは大きな差があること
が知られている（Ｎａｔｕｒｅ、皿、　１３３６−１３
３８　　（１９６６）、　　八ｒｃｈ　　Ｐｈａｒｍａ
ｃｏｌ、、　　２８６　　、　　３１９−３２３（１９
７４））。！−プロプラノロールは、ｄｌ−プロプラノ
ロール（ラセミ体）と比較しても、イソプレナリンで誘
発された頻脈に対し、約４〜５倍の有効性がある（Ｈｏ
ｗｅら、　Ｎａｔｕｒｅ、　　２１０．１３３６−１３
３８（１９６６））。ｌ−プロプラノロールは、アドレ
ナリン受容体に拮抗的阻害作用をもつため、抗不整脈作
用、降圧作用が強い。このようなことから、ｄｌ−プロ
プラノロールから！−プロプラノロールのみを分離する
ことが試みられている。

ｄｌ−プロプラノロールからのｌ−プロプラノロールの
分離法としては、ジ−ｏ−トルオイル酒石酸を用いた光
学分割法がある（　Ｈｏｗｅら＊　Ｎａｔｕｒｅ。

麩虹、　１３３６−１３３８　（１９６６））。しかし
、このような方法は、操作が煩雑であるうえにｌ−プロ
プラノロールの回収率が低い。

（発明が解決しようとする問題点） 本発明は上記従来の問題点を解決するものであり、その
目的とするところは、ｄｆｆｉ−プロプラノロールから
！−プロプラノロールが簡単かつ高収率で得られるｌ−
プロプラノロールの生化学的分離法を提供することにあ
る。

（問題点を解決するための手段） 本発明は、ｄｅ−プロプラノロールの有機カルボン酸エ
ステルまたはｄｌ−プロプラノロール−Ｎ−アシル化誘
導体の有機カルボン酸エステルを。

微生物が生産するエステラーゼやブタ肝臓などから採取
したエステラーゼと接触させることにより。

６体のエステル結合のみが加水分解され、ｅ体は未反応
のまま残存し、そのために、ｄｎ−プロプラノロールか
らｌ−プロプラノロールを選択的に分離しうる。との発
明者の知見にもとづいて完成された。

本発明のｌ−プロプラノロールの生化学的分離法は、エ
ステラーゼ、エステラーゼの固定化物。

エステラーゼ生産能を有する微生物、該微生物の固定化
物および該微生物の処理物の固定化物からなる群から選
択された少なくとも一種に、ｄｌ−プロプラノロールの
有機カルボン酸エステルおよび／またはｄ７！−プロプ
ラノロール−Ｎ−アシル化誘導体の有機カルボン酸エス
テルを含水を機溶媒中で接触させることを包含し、その
ことにより上記目的が達成される。

エステラーゼには１例えば、アスペルギラス属。

ロドトルラ属、リゾプス属、シュードモナス属。

キャンディダ属、ジベレラ属、トルロプシス属。

アウレオバシジウム属、ペニシリウム属、バシラス属な
どに属する微生物から生産されたエステラーゼ、ブタ肝
臓起源のエステラーゼなどが用いられる。

エステラーゼ生産能を有する微生物には１例えば、アス
ペルギラス属、ロドトルラ属、リゾプス属、シュードモ
ナス属、キャンディダ属、ジヘレラ属、トルロプシス属
、アウレオバシジウム属。

ペニシリウム属、バシラス属に属する微生物がある。し
かし、これに限定されず、ｄｉ−プロプラノロールの有
機カルボン酸エステルまたはｄβ−プロプラノロール−
Ｎ−アシル化誘導体のを機カルボン酸エステルを不斉加
水分解するためのエステラーゼを生産する微生物であれ
ば、いかなる微生物も使用可能である。

本発明に用いられる微生物の例を下記に示す。

これらの微生物はいずれも公知であり１日本微生物保存
機関連盟の加盟機関１例えば、財団法人醗酵研究所（Ｉ
ＦＯ）や海外の菌株保存機関を通じて容易に入手するこ
とができる。

（１）アスペルギラス属 アスベルギラス・ニガー・プアン・チーケーム　　　　
　　　　　　　ＩＦＯ−４２８０（＾ｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ　　ｎｉｇｅｒ　　ｖａｎ　　Ｔｉｅｇｈｏｍ）（
２）ロドトルラ属 ロドト１１う・チクセンシス・バール・ミヌータ　　　
　　　　　　　　ＩＦＯ−０９３２（Ｒｈｏｄｏｔｏｒ
ｕｌａ　　ｔｅｘｅｎｓｉｓ　　ｖａｒ　　ｍ１ｎｕｔ
ａ）（３）リゾプス属 リゾプス・チネシシス　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　ＩＦＯ−４７６８（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　
　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）（４）シュードモナス属 シュードモナス・フルリレセンス　　　　　　　　　　
　　　　　　　　ＩＦＯ−３０８１（Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ　　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）（５）キャンディ
ダ属 キャンティダ、フルビキャンス　　　　　　　　　　　
　　　　　　　ＩＦＯ−０１９７（Ｃａｎｄｉｄａ　　
ａｌｂｉｃａｎｓ）（６）ジベレラ属 シベレラ・フジクロイ　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　ＩＦＯ−５２６８（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌ
ａ　　ｆｕｊｉｋｕｒｏｉ）（７）トルロプシス属 トルリブシス・キャンダイダ　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　ＩＦＯ−０７６８（Ｔｏｒｕｌｏｐｓ
ｉｓ　　ｃａｎｄｉｄａ）（８）アウレオバシジウム属 ７ウレオバシシウム・プルランス　　　　　　　　　　
　　　　　　　ＩＦＯ−４４６４（Ａｕｒｅｏｂａｓｉ
ｄｉｕｍ　　ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）（９）ペニシリウム
属 ペニシリウム・クリソゲナム　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　ＩＦＯ−４６２６（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉ
ｕｍ　ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）０＠バシラス属 ｌτシラス・サチリス　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　ＡＴＣＣ−６６３３（Ｂａｃｉｌｌｕ
ｓ　　５ｕｂｔｉｌｌｉｓ）本発明におけるエステラー
ゼまたは微生物は。

例えば、液体培地に菌体を培養した培養物、培養液から
分離した菌体、各種の酵素分離法に基づいて菌体または
培養液から分離した精製エステラーゼや粗製エステラー
ゼ、エステラーゼ含有抽出液。

その濃縮液などの処理物の状態で用いられる。エステラ
ーゼ、微生物、微生物の処理物が固定化された固定化物
も使用可能である。

エステラーゼおよび微生物の固定化のための担体には１
例えば、アルギン酸、カラギーナン、コラーゲン、セル
ロース、アセチルセルロース、寒天、セロファン、コロ
ジオンの如き天然物やポリアクリルアミド、ポリスチレ
ン、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコー
ル、ポリウレタン、ポリブタジェンの如き合成高分子な
どがある。

エステラーゼおよび微生物の担体への固定化量は、担体
や菌体の種類、エステラーゼの純度などに依存する。し
かし９通常、微生物菌体１ｇ（湿潤基準）に対し、担体
１〜５ｇが用いられる。また、エステラーゼでは、　１
０■プロテインの蛋白量に対して０．１〜２ｇの担体を
用いるのが適当である。

ｄｆ−プロプラノロールの有機カルボン酸エステルおよ
びｄｉ−プロプラノロール−Ｎ−アシル化誘導体の有機
カルボン酸エステルは、それぞれ。

ｄｌ−プロプラノロールおよびｄｎ−プロプラノロール
−Ｎ−アシル化誘導体と、炭素数１〜７の脂肪族モノカ
ルボン酸のクロライドおよび炭素数３〜７の脂肪族ジカ
ルボン酸のモノエステルモノクロライドのいずれかとを
反応させて得られる。

炭素数１〜７の脂肪族モノカルボン酸としては。

例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン
酸、ヘプタン酸、アクリル酸、クロトン酸がある。炭素
数３〜７の脂肪族ジカルボン酸には。

例えば、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、ピメリン酸
、マレイン酸、フマール酸が挙げられる。

これらのカルボン酸は、塩化チオニルと反応させる公知
の方法により、容易に酸クロライドとされる。カルボン
酸の酸クロライドは、アルキル基および／またはハロゲ
ンと置換されていてもよい。

有機溶媒には、前記エステルを充分に溶解し。

かつエステラーゼの活性を損なわないあらゆる溶媒が用
いられ２例えば、ｎ−ヘプタン、イソヘプタン、ｎ−ヘ
キサン、イソヘキサン、ｎ−ペンタン、イソペンタン、
ｎ−オクタン、イソオクタンなどの脂肪族鎖式炭化水素
、シクロペンクン、シクロヘキサン、シクロヘプタンな
どの脂肪族環式炭化水素、ベンゼン、トルエン、キシレ
ンなどの芳香族炭化水素、メタノール、エタノール、　
　ｎ　−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノ
ール、イソブタノールなどのアルコール類、アセトン、
メチルイソプロピルケトンなどのケトン類。

テトラヒドロフラン、ジメチルエーテル、ジエチルエー
テル、ジオキサンなどのエーテル類、酢酸メチル、酢酸
エチル、酢酸ブチルなどのエステル類、四塩化炭素、ク
ロロホルム、塩化メチレン。

塩化メタンなどのハロゲン化炭化水素、ジメチルホルム
アミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン
、ジメチルスルホキシド、アセトニトリルなどがある。

これら有機溶媒は、単独もしくは混合して用いられる。

前記エステルを加水分解するために有機溶媒中に含有さ
せる水の量は。

掻く少量でよい。水の溶解度が低い有機溶媒でも。

その飽和水量程度の水で充分である。また有機溶媒と水
との二層系で反応を行ってもよい。この場合、水系のｐ
Ｈは６〜８．好ましくは７〜８に調整される。ｐＨがこ
の範囲を逸脱すると、酵素反応の進行が妨げられる。

ｄｌ−プロプラノロールの有機カルボン酸ニス）　　　
　　テ″またはｄｉ−ブ０プラノｏ−／Ｌ／−Ｎ−アシ
″化誘導体の有機カルボン酸エステルの、含水有機溶媒
中での濃度には特に限定はなく２例えば、０．１〜７０
％というような高濃度でも使用可能である。

上記エステルは２例えば、エステラーゼの蛋白量１■プ
ロテインに対し、０．１〜２ｇ、好ましくは。

０．５〜Ｉｇの範囲で配合される。エステラーゼ生産能
を有する微生物では、微生物１ｇ（凍結乾燥基準）に対
し１例えば、０．１〜２ｇのエステルが用いられる。

本発明におけるｄｌ−プロプラノロールの有機カルボン
酸エステルまたはｄｎ２−プロプラノロール−Ｎ−アシ
ル化誘導体の有機カルボン酸エステルの加水分解反応に
おける反応温度は、２０〜４５℃。

好ましくは、２５〜３５℃に調整される。２０℃を下ま
わると、加水分解反応が充分に進行しない。４５℃を上
まわると、エステラーゼの活性が低下し１反応の進行が
妨げられる。反応時間は、５〜７２時間が適当である。

しかし、微生物の量またはエステラーゼの量を増加させ
ることにより１反応時間の短縮が可能である。反応に用
いられる反応器は。

回分式、連続流通式いずれでもよい。連続流通式の反応
器を用いる場合、基質液の空間速度は、０．１〜５ｈｒ
−’の範囲が好ましい。

本発明の方法により１選択的に加水分解された反応液か
ら、７！−プロプラノロールの有機カルボン酸エステル
とｄ−プロプラノロールまたはｌ−プロプラノロール−
Ｎ−アシル化誘導体の有機カルボン酸エステルとｄ−プ
ロプラノロール−Ｎ−アシル化誘導体との分離は１例え
ば３次のようにして行われる： 反応液を炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、水層
を除き有機層をボウ硝で脱水する。有機溶媒を留去し、
得られたオイル１ｇに対してカラムクロマト用シリカゲ
ル（ワコーゲルＣ−２００）　３０ｇを用いて、クロロ
ホルム−酢酸エチル混合溶媒により、カラムクロマトを
行う。カラムクロマトにより、加水分解された６体と、
加水分解されていない１体とが分離される。クロロホル
ム−酢酸エチル混合溶媒の混合比率を変えることにより
。

基質である有機カルボン酸の種類が異なっても容易に分
離される。

得られたｌ−プロプラノロール有機カルボン酸エステル
またはｌ−プロプラノロール−Ｎ−アシル化誘導体の有
機カルボン酸エステルを、ＩＮ−ＫＯＨ（メタノール溶
液）中、室温で３時間反応させることにより、目的物質
であるｌ−プロプラノロールが得られる。

（以下余白） （実施例） 以下に本発明を実施例について述べる。

爽施五土 アクリルアミド７２３■およびＮ　−Ｎ’　−メチレン
ビスアクリルアミド３８■を、リン酸カリウム緩衝液（
ｐＨ８，０，５０ｍＭ）　２．３＋ｗｊ！に溶解した。

ロドトルラ・チクセンシス・バール・ミヌータ（Ｒｈｏ
ｄｏｔｏｒ・ｔｅｘｅｎｓｉｓ　ｖａｒ　ｎ＋１ｎｕｔ
ａ　ＩＦＯ−０３９２）　７２０ｍｇ湿潤微生物菌体を
、リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ８，０，５０＋ａＭ）２
Ｉ！＋１に懸濁させ、上記アクリルアミド溶液と混合し
た。混合液にＮ、Ｎ−Ｎ’　　・Ｎ゛　−テトラメチレ
ンジアミン水溶液（０，１ｇ／ｍ　ｌ！　）を０．１ｍ
ｊ２および過硫酸アンモニウム水溶液（５０ｍｇ／ｍ　
ｌ　）を０．１ｍｌ加えた後、窒素ガス雰囲気下、０℃
で５分間さらに室温下で１時間放置し、微生物菌体の固
定化物を得た。この固定化物を２ｍｌ×２ｍ×２ｍｍの
立方体に切断した。

ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒（１７４体積比）の水
飽和物５０ｍｊ２に、基質としてＮ−アセチル−ｄｌ−
プロプラノロール酢酸エステル１ｇを溶解した。この溶
液に、上記固定化物の切断物を加え。

３０℃で４８時間振盪（１８０５ｔｒｏｋｅｓ／５ｉｎ
）　シ反応させた。

反応終了後、未反応の固定化物を除去し９反応液を炭酸
水素ナトリウムの飽和水溶液で洗浄した。

さらに水洗を繰り返し、水層を除いて有機層をボｓｌａ
つ硝で脱水した。有機溶媒を減圧留去し、得られたオイ
ル１ｇに対してシリカゲル３０ｇを用いて。

カラムクロマトを行った。その結果、Ｎ−アセチル−！
−プロプラノロール酢酸エステル４８０■が得られた（
〔α〕。＝−２３，８＠、　　ｃ　；　　１．７％ＣＨ
Ｃｌ３）　−これをＩＮ−ＫＯＨ（メタノール溶液）５
　ｍｌに溶解し、室温下で３時間攪拌しながら反応させ
た。反応後、メタノールを減圧留去し、残留物にエーテ
ル１０ＩＩ１１と水５ＩＩ１１とを加えて充分攪拌した
。水層を除きエーテル層を充分水洗した後、無水硫酸マ
グネシウムで一昼夜脱水した。無水硫酸マグネシウムを
濾過後、濾液のエーテル溶液に水冷下で塩化水素ガスを
吹き込み析出した沈澱を濾取したところ、ｌ−プロプラ
ノロール塩酸塩３７４■（収率８６．６％、　〔α）　
Ｂ０＝　　２７．７’、　　ｃ　；　　１．０％Ｃ２１
（ＳＯＨ）が得られた。ｌ−プロプラノロール塩酸塩の
収率は２次式により算出した。

ｌ−プロプラノロール塩酸塩の収率（％）微生物として
、アスペルギラス・ニガー・ブアン°チーゲーム（Ａｓ
ｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　ｖａｎ　Ｔｉｅｇｈ
ｏｎ＋ＩＦＯ−４２８０）を用いたこと以外は、実施例
１と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。

その結果、収率７５．１％で旋光度〔α〕乙’＝−２７
．７’（ｃ；１．０％Ｃ，Ｈ５ＯＨ）のｌ−プロプラノ
ロール塩酸塩が得られた。

叉韮■↓ 微生物として、リゾプス・チネンシス（Ｒｈｉｚｏｐｕ
ｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　ＩＦＯ−４７６８）を用いたこ
と以外は、実施例１と同様にしてｌ−プロプラノロール
の分離を行った。その結果、収率８７．３％で旋光度〔
α〕６゜＝−２７，１”　（Ｃｉ　　１．０％Ｃ２Ｈ５
０Ｈ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

失止炭↓ ａｌｌとして、シュードモナス・フルロレセンス（Ｐｓ
ｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ　ＩＦＯ
−３０８１）を用いたこと以外は、実施例１と同様にし
てｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結果、収
率９１．３％で旋光度（α）　ｏ０＝　　２３．３’　
　（ｃ　；　　１．０％Ｃ２Ｈ５０Ｈ）のｌ−プロプラ
ノロール塩酸塩が得られた。

実施例ｌ 微生物として、キャンディダ・アルビキャンス（Ｃａｎ
ｄｉｄａ　ａｌｂｉｃａｎｓ　ＩＦＯ−０１９７）を用
いたこと以外は、実施例１と同様にしてｌ−プロプラノ
ロールの分離を行った。その結果、収率６４．２％で旋
光度〔α〕６°＝−２７．７°（ｃ；１．０％ＣｚＨｓ
ＯＨ）　（７）　＃−プロプラノロール塩酸塩が得られ
た。

２旋勇工 微生物として、ジベレラ・フジクロイ　（Ｇｉｂｂｅｒ
ｅｌｌａｆｕｊｉｋｕｒｏｉ　ＩＦＯ−５２６８）を用
いたこと以外は、実施例１と同様にしてｌ−プロプラノ
ロールの分離を行った。その結果、収率８１．２％で旋
光度〔α〕轟０−−２７．７’　　（ｃ　；　　１．０
％ＣＪＳＯＨ）のｌ−プロプラノロー１Ｇ塩酸塩が得ら
れた。

大施勇１ 微生物として、トルロプシス・キャンディダ（Ｔｏｒｕ
ｌｏｐｓｉｓ　ｃａｎｄｉｄａ　ＩＦＯ−０７６８）を
用いたこと以外は、実施例１と同様にしてｌ−プロプラ
ノロールの分離を行った。その結果、収率７７．８％で
旋光度〔α〕６°＝−２７．６’　（Ｃ；　　１．０％
ＣｚｌｌｓＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得ら
れた。

ｌ施五１ 市販のブタ肝臓起源のエステラーゼ（１０■プロテイン
）をリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ８，帆５０ｎ＋Ｍ）２
０ｍ／に溶解した。ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒（
１７４体積比）の水飽和物１０ｎｊｌ！に、基質として
Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステル５
００■を溶解し、この溶液に上記エステラーゼ溶液を加
え二層系とした後、激しく攪拌しながら室温で２４時間
反応させた。

反応終了後、未反応物を除去し、実施例１と同様の操作
により有機層を分離してカラムクロマトを行ったところ
、１−プロプラノロール塩酸塩４２３■（収率９８％、
　〔α〕志０＝−２７．７°、　　Ｃｉ　　１．０％Ｃ
ＪｓＯＨ）が得られた。

実施斑主 Ｎ−アセチル−ｄｉ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−ホルミル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エ
ステルを用いたこと以外は、実施例８と同様にしてｌ−
プロプラノロールの分離を行った。その結果、収率９３
．４％で旋光度〔α〕６０＝−２２．７’　（ｃ　；　
１．０％ＣＺＦ１５０Ｈ＞のｌ−プロプラノロール塩酸
塩が得られた。

大施■刊 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−スクシニル−ｄｌ−プロプラノロールコハ
ク酸エステルを用いたこと以外は。

実施例８と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行
った。その結果、収率８８．４％で旋光度〔α〕６゜＝
−２７，７°（Ｃ；　１．０％Ｃ，Ｈ５ＯＨ）のｌ−プ
ロプラノロール塩酸塩が得られた。

大嵐炭旦 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−ホルミル−ｄ７！−プロプラノロールコハ
ク酸エステルを用いたこと以外は。

実施例８と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行
った。その結果、収率９３．５％で旋光度〔α〕＝−２
６．８°（ｃ　；　１．０％（：２Ｈ５０Ｈ）のｌ−プ
ロプラノロール塩酸塩が得られた。

大隻炎旦 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−プロピオニル−ｄｊ２−プロプラノロール
プロピオン酸エステルを用いたこと以外は、実施例８と
同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その
結果、収率９１．８％で旋光度〔α〕６°＝−２７．７
’　　（ｃ　：　　１．０％ＣＪｓＯＨ）の！−プロプ
ラノロール塩酸塩が得られた。

去隻桝Ｕ　　　　− Ｎ−アセチル−ｄｌ！−プロプラノロール酢酸エステル
に代えて、Ｎ−ホルミル−ｄｌ−プロプラノロールプロ
ピオン酸エステルを用いたこと以外は、実施例８と同様
にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結果
、収率９２．１％で旋光度（（１’３　ｆｔ’＝　２７
．１’　（ｃ　；　１．０％　ＣＪｓＯＨ）　（７）ｌ
−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

犬扇拠■ Ｍ’　　Ｎ−アセチル−ｄｉ−プロプラノロール酢酸エ
ステルに代えて、Ｎ−アクリロイル−ｄｆ−プロプラノ
ロールアクリル酸エステルを用いたこと以外は、実施例
８と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。

その結果、収率６８．３％で旋光度（α）　Ｉ！”＝−
２５，５°（Ｃ；　　１．０％　ＣＪ５０）１　）のｌ
−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

叉詣班長 Ｎ−アセチル−ｄｆ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−ホルミル−ｄｌ−プロプラノロールアクリ
ル酸エステルを用いたこと以外は。

実施例８と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行
った。その結果、収率７２．１％で旋光度〔α〕占０＝
−１８，４＠（Ｃ；１．０％ＣＪｓＯＨ）のｌ−プロプ
ラノロール塩酸塩が得られた。

実嵐炭■ Ｎ−アセチル−ｄＩｌ−プロプラノロール酢酸エステル
に代えて、Ｎ−ヘキサノイル〜ｄｉ−プロプラノロール
カプロン酸エステルを用いたこと以外は、実施例８と同
様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結
果、収率８０．７％で旋光度〔α〕６°＝−２１．１’
　　（ｃ　；　　１．０％ＣＪｓＯＨ）の！−プロプラ
ノロール塩酸塩が得られた。

実施例Ｕ Ｎ−アセチル−ｄ７！−プロプラノロール酢酸エステル
に代えて、Ｎ−マレイニル−ｄｌ−プロプラノロールマ
レイン酸エステルを用いたこと以外は、実施例８と同様
にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結果
、収率６５．４％で旋光度〔α）　ｇ’＝　２０．７’
　（ｃ　；　１．０％Ｃ２Ｈ５ＯＨ）のｌ−プロプラノ
ロール塩酸塩が得られた。

大施徴胆 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ｎ−ペンタ
ンを用いたこと以外は、実施例日と同様にしてｌ−プロ
プラノロールの分離を行った。その結果、収率８５．６
％で旋光度（”）　ｉｔ’＝　　２７．７’（ｃ；１．
０％ＣｔＩ（、ＯＨ）の！−プロブラ／　Ｏ−７Ｌ／塩
酸塩が得られた。

叉血■旦 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に化工て、シクロペン
タンを用いたこと以外は、実施例８と同様にしてｌ−プ
ロプラノロールの分離を行った。

その結果、収率８５．６％で旋光度〔α）Ｐ＝　　２７
．７’（ｃ：１．０％Ｃ，ＩＩ、ＯＲ＞のｌ−プロプラ
ノロール塩酸塩が得られた。

大施拠別 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ｎ−ヘキサ
ンを用いたこと以外は、実施例８と同様にしてｌ−プロ
プラノロールの分離を行った。その結果、収率８６．６
％で旋光度〔α）　ｇ’＝　−２７，７＠（Ｃ；　　１
．０％ＣＪ５０Ｈ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得
られた。

大施勇鉦 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、シクロヘキ
サンを用いたこと以外は、実施例８と同様にして！−プ
ロプラノロールの分離を行った。

その結果、収率８６．８％で旋光度［α］　ｇｏ＝−２
７，７゜（Ｃ；１．０％Ｃ２Ｈ６ＯＨ）のｌ−プロプラ
ノロール塩酸塩が得られた。

ス扇五η ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ベンゼンを
用いたこと以外は、実施例８と同様にしてρ−プロプラ
ノロールの分離を行った。その結果、収率７１．１％で
旋光度〔α〕６°＝−２７．７＠（Ｃ；１．０％Ｃ！Ｉ
（５０Ｈ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

去族炎堕 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、酢酸エチル
を用いたこと以外は、実施例８と同様にしてｌ−プロプ
ラノロールの分離を行った。その結果、収率６１．１％
で旋光度〔α〕轟’＝−２７．７°　（ｃ；１．０％Ｃ
ｔＨｓＯＨ）　（７）　ｌ−ブ０７”う１Ｏ−）Ｌｔ塩
酸塩が得られた。

大隻斑旦 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、クロロホル
ムを用いたこと以外は、実施例８と同様にして！−プロ
プラノロールの分離を行った。その結果、収率８２．３
％で旋光度〔α〕６°＝−２７．７゜（ｃ；１．０％ｃ
ｚｔｔｓｏｕ　）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得ら
れた。

大血拠亜 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ｎ−ヘプタ
ン／クロロホルム混合溶媒（４７１体積比）を用いたこ
と以外は、実施例８と同様にしてｌ−プロプラノロール
の分離を行った。その結果、収率８７．１％で旋光度〔
α〕６°＝−２７．７＠（ｃ　；　　１．０％ＣｚＨｓ
ＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

スｌｌ」但 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ジオキサン
を用いたこと以外は、実施例８と同様にしてｌ−プロプ
ラノロールの分離を行った。その結果、収率６０．６％
で旋光度〔α〕志０＝−２１，７”　（ｃ；１．０％Ｃ
ＪｓＯＨ）のｌ−プロプラ）Ｔ：１−ル塩酸塩が得られ
た。

１廠Ｕ ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、メチルイソ
ブチルケトンを用いたこと以外は、実施例８と同様にし
て！−プロプラノロールの分離を行った。その結果、収
率６７．７％で旋光度〔α〕ミ０＝−２７．７°（ｃＨ
ｌ、０％ＣｚＨＳＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩
が得られた。

大旌桝胆 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、メタノール
／水混合溶媒（１／４体積比）を用いたこと以外は、実
施例８と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行っ
た。その結果、収率８５．１％で旋光度〔α〕６°＝−
２３．２”　（ｃ　；　　１．０％ｃＪｓ０１１　）の
ｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

叉旌拠毅 ヘンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ジオキサン
／水混合溶媒（１／１体積比）を用いたこと以外は、実
施例８と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行っ
た。その結果、収率７８．２％で旋光度〔α〕６°＝−
２３．０°（ｃ；１．０％Ｃ２Ｈ５ＯＨ”）のｌ−プロ
プラノロール塩酸塩が得られた。

大立拠銭 アクリルアミド７２３■およびＮ　−Ｎ’　−メチレン
ビスアクリルアミド３８■を、リン酸カリウム緩衝液（
ｐＨ８，０，５０ｗＭ）　２．３ｍｊ７に溶解した。ア
ウレオバシジウム・プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄ
ｉｕｍ　ｐｕｌｌｕｌａｎｓＩＦＯ−４４６４）　７０
０ｍｇ湿潤微生吻菌体を９リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ
８，０，５Ｏｎ＋Ｍ）　２　ｍｌに懸濁させ。

上記アクリルアミド溶液と混合した。混合液にＮ・Ｎ　
−Ｎ’　　・Ｎ゛　−テトラメチレンジアミン水溶液（
０，１ｇ／ｍ　１　）を０．１＋＋／！および過硫酸ア
ンモニウム水溶液（５０ｍｇ／ｍ　１　）を０．１ｍｌ
加えた後、窒素ガス雰囲気下、０℃で５分間さらに室温
下で１時間放置し、微生物菌体の固定化物を得た。この
固定化物を２鶴Ｘ　’ｌ　ｍ　Ｘ　’ｌ　ｖｎａの立方
体に切断した。

ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒（１７４体積比）の水
飽和物５０１１１１に、基質としてＮ−アセチル−ｄｌ
−プロプラノロール酢酸エステル１ｇを溶解した。この
溶液に、上記固定化物の切断物を加え。

３０℃で４８時間振盪（１８０５ｔｒｏｋｅｓ／ｍ１ｎ
）　Ｌ反応させた。

反応終了後、未反応の固定化物を除去し１反応液を炭酸
水素す）　ＩＪウムの飽和水溶液で洗浄した。

さらに水洗を繰り返し、水層を除いて有機層をボウ硝で
脱水した。有機溶媒を減圧留去し、得られたオイル１ｇ
に対してシリカゲル３０ｇを用いて。

カラムクロマトを行った。その結果、Ｎ−アセチル−ｌ
−プロプラノロール酢酸エステル４４０■が得られたく
（α）　ｏ　＝　　２２．３”、　　ｃ　；　　１．０
％ＣＨＣｌ：Ｉ）これをＩＮ−［０８（メタノール溶液
）５１Ｉｌｌに溶解し、室温下で３時間攪拌しながら反
応させた。反応後、メタノールを減圧留去し、残留物に
エーテル１０ａ＋６と水５ＩｌＮとを加えて充分攪拌し
た。水層を除きエーテル層を充分水洗した後、無水硫酸
マグネシウムで一昼夜脱水した。無水硫酸マグネシウム
を濾過後、濾液のエーテル溶液に水冷下で塩化水素ガス
を吹き込み析出した沈澱を濾取したところ、Ｉｔ−プロ
プラノロール塩酸塩３４２■（収率７９．２％、（α）
ｉ°＝−２７，７°、ｃ；　１．０％ＣｔＨｓＯＨ）が
得られた。ｌ−プロプラノロール塩酸塩の収率は９次式
により算出した。

ｌ−プロプラノロール塩酸塩の収率（％）微生物として
、ペニシリウム・クリソゲナム（、Ｐｅｎｉｃｔｌｌｉ
ｕｍ　ｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ）を用いたこと以外は。

実施例３０と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を
行った。その結果、収率６８．５％　で旋光度〔α）　
ｉ！’＝　　２７．５’　（Ｃｉ　　１．０％　ＣＪｓ
ＯＨ）（７）Ｊ　　７”ロブラノロール塩酸塩が得られ
た。

尖巖斑双 微生物として、バシラス・サチラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ
ｓｕｂｔｉｌｌｉｓ　ＡＴＣＣ−６６３３）を用いたこ
と以外は、実施例３０と同様にしてｌ−プロプラノロー
ルの分離を行った。その結果、収率９３．１％で旋光度
〔α〕６゜＝−２７，７°（ｃ；１．０％Ｃ！Ｈ５ＯＨ
）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

叉立皿皿 Ｎ−アセチル−ｄｆｆｉ−プロプラノロール酢酸エステ
ルに代えて、Ｎ−ホルミル−ｄＩｔ−プロプラノロール
酢酸エステルを用いたこと以外は、実施例３０と同様に
してｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結果、
収率８７．５％で旋光度〔α〕６゜＝−２１，９＠（ｃ
　；　１．０％Ｃ２Ｈ，ＯＲ）のｌ−プロプラノロール
塩酸塩が得られた。

大践桝旦 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−スクシニル−ｄｆｉ−プロプラノロールコ
ハク酸エステルを用いたこと以外は。

実施例３０と同様にしてβ−プロプラノロールの分離を
行った。その結果、収、率８７．９％で旋光度〔α〕６
゜＝−２６，８”　（Ｃ；　１．０％ｃｚｏｓｏｏ　）
のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

去立桝匝 Ｎ−アセチル−ｄＩｌ−プロプラノロールミｌｌエステ
ルに代えて、Ｎ−ホルミル−ｄｌ−プロプラノロールコ
ハク酸エステルを用いたこと以外は。

実施例３０と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を
行った。その結果、収率９２．８％で旋光度〔α）　１
０＝−２７，２’　（ｃ　；　１．０％ｃｚＨｓＯＨ）
のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

夫施奥共 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−プロピオニル−ｄｆ−プロプラノロールプ
ロピオン酸エステルを用いたこと以外は、実施例３０と
同様にしてβ−プロプラノロールの分離を行った。その
結果、収率９０．２％で旋光度〔α〕６°＝−２７．２
°　（ｃ；１．０％Ｃ２Ｈ１ＯＨ）のｌ−プロプラノロ
ール塩酸塩が得られた。

去立炭Ｕ Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−ホルミル−ｄＮ−プロプラノロールプロピ
オン酸エステルを用いたこと以外は、実施例３０と同様
にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結果
、収率９１．５％で旋光度〔α〕６°＝−２６．９’　
（Ｃ；　１．０％Ｃ２Ｈ５ＯＨ）のｌ−プロプラノロー
ル塩酸塩が得られた。

実流■共 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−アクリロイル−ｄｆ−プロプラノロールア
クリル酸エステルを用いたこと以外は、実施例３０と同
様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結
果、収率６２．８％で旋光度〔α〕６°＝−２３．９°
　（ｃ　；　　１．０％Ｃ２Ｈ５ＯＨ）のｌ−プロプラ
ノロール塩酸塩が得られた。

去施勇皿 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−ホルミル−ｄｌ−プロプラノロールアクリ
ル酸エステルを用いたこと以外は。

実施例３０と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を
行った。その結果、収率７１．６％で旋光度〔α〕６゜
＝−１９，５’　（ｃ　；　１．０％Ｃ，Ｈ５０Ｈ）の
ｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

人旅桝並 Ｎ−アセチル−ｄｌ−プロプラノロール酢酸エステルに
代えて、Ｎ−ヘキサノイル−ｄｌ−プロプラノロールカ
プロン酸エステルを用いたこと以外は、実施例３０と同
様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結
果２収率８１．８％で旋光度〔α〕６°＝−１８．５’
　　（ｃ　；　　１．０％Ｃ２Ｈ５ＯＨ）のｌ−プロプ
ラノロール塩酸塩が得られた。

実施拠■ Ｎ−アセチル−ｄｉ−プロプラノロール酢酸エステルに
化工て、Ｎ−マレイニル−ｄｌ−プロプラノロールマレ
イン酸エステルを用いたこと以外は、実施例３０と同様
にしてｌ−プロプラノロールの分離を行った。その結果
、収率５９．４％で旋光度〔α］　ｌ”　２１．３”　
（ｃ　Ｈ１，０％Ｃ２Ｈ５ＯＨ’）のｉ−プロプラノロ
ール塩酸塩が得られた。

尖隻炭婬 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ｎ−ペンタ
ンを用いたこと以外は、実施例３０ど同様にしてｌ−プ
ロプラノロールの分離を行った。その結果、収率９２．
３％で旋光度〔α〕６°＝−２７．７゜（ｃ；１．０％
Ｃ２１１５０Ｈ）の！−プロプラノロール塩酸塩が得ら
れた。

ス屓ｌ粕口 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、シクロペン
タンを用いたこと以外は、実施例３０と同様にしてｌ−
プロプラノロールの分離を行った。

その結果、収率８３．２％で旋光度〔α）Ｐ＝　　２７
．６’（ｃ；１．０％Ｃ２Ｈ１ＯＨ）のｌ−プロプラノ
ロール塩酸塩が得られた。

叉止炎Ｕ ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ｎ−ヘキサ
ンを用いたこと以外は、実施例３０と同様にして！−プ
ロプラノロールの分離を行った。その結果、収率９０．
５％で旋光度〔α）ｆｔ”＝　　２７．７゜（ｃ；１．
０％Ｃ，Ｈ８ＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得
られた。

尖侮桝的 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、シクロヘキ
サンを用いたこと以外は、実施例３０と同様にして！−
プロプラノロールの分離を行った。

その結果、収率９０．２％で旋光度〔α］　、ｉ’＝　
−２７，２’（ｃ；１．０％Ｃ２Ｈ６ＯＨ）　のｌ−プ
ロプラノロール塩酸塩が得られた。

天上±並 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ベンゼンを
用いたこと以外は、実施例３０と同様にしてｌ−プロプ
ラノロールの分離を行った。その結果、収率７３．１％
で旋光度〔α〕轟’＝　　２７．１”　（ｃ　；１．０
％Ｃ，Ｈ３ＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得ら
れた。

尖施開虹 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、酢酸エチル
を用いたこと以外は、実施例３０と同様にしてｌ−プロ
プラノロールの分離を行った。その結果、収率５０．６
％で旋光度〔α）　ｇ”＝　　２１．５°　（Ｃ；　　
１．０％Ｃ２Ｈ５ＯＨ”）のｌ−プロプラノロール塩酸
塩が得られた。

１隻ｍ４８ ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、クロロホル
ムを用いたこと以外は、実施例３ｏと同様にしてｌ−プ
ロプラノロールの分離を行った。その結果、収率６１．
５％で旋光度〔α〕６°＝−２５，２６（ｃ；１．０％
ＣｚＨｓＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られ
た。

大施炭弧 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ｎ−ヘプタ
ン／クロロホルム混合溶媒（４７１体積比）を用いたこ
と以外は、実施例３０と同様にしてｌ−プロプラノロー
ルの分離を行った。その結果、収率７５．２％で旋光度
〔α〕６°＝−２７．０°　（ｃ　；　　１．０％Ｃ２
１１，ＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた
。

ス１１牢設 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ジオキサン
を用いたこと以外は、実施例３０と同様にしてｌ−プロ
プラノロールの分離を行った。その結果、収率６８．５
％で旋光度〔α〕轟’＝−２６．８°（ｃ；１．０％Ｃ
２Ｈ５ＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた
。

大旌桝■ ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、メチルイソ
ブチルケトンを用いたこと以外は、実施例３０と同様に
して！−プロプラノロールの分離を行った。その結果、
収率７３．１％で旋光度〔α〕ｔ０＝−２７．７°（ｃ
；１．０％Ｃ２Ｈ，ＯＨ）のｌ−プロプラノロール塩酸
塩が得られた。

大隻桝屓 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、メタノール
／水混合溶媒（１７４体積比）を用いたこと以外は、実
施例３０と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行
った。その結果、収率９０．０％で旋光度〔α〕轟０＝
−２７．０’　　（ｃ　；　　１．０％Ｃ２Ｈ５０Ｈ）
のｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

大履用皿 ベンゼン／ｎ−ヘプタン混合溶媒に代えて、ジオキサン
／水混合溶媒（１７１体積比）を用いたこと以外は、実
施例３０と同様にしてｌ−プロプラノロールの分離を行
った。その結果、収率８０．６％で旋光度〔α〕６°＝
−２７．５”　（ｃ　；　　１．０％Ｃ，Ｈ６ＯＨ）の
ｌ−プロプラノロール塩酸塩が得られた。

（発明の効果） 本発明によれば、このように、ｄｆ−プロプラノロール
からｌ−プロプラノロールが容易に分離される。ｌ−プ
ロプラノロールの回収率も高い。

得られたｌ−プロプラノロールは、ｄｌ−プロプラノロ
ールに比べて著しく高い抗不整脈作用、降圧作用を示し
、不整脈治療薬、抗高血圧薬として有用である。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、エステラーゼ、エステラーゼの固定化物、エステラ
   ーゼ生産能を有する微生物、該微生物の固定化物および
   該微生物の処理物の固定化物からなる群から選択された
   少なくとも一種に、ｄｌ−プロプラノロールの有機カル
   ボン酸エステルおよび／またはｄｌ−プロプラノロール
   −Ｎ−アシル化誘導体の有機カルボン酸エステルを含水
   有機溶媒中で接触させることを包含するｌ−プロプラノ
   ロールの生化学的分離法。 ２、前記エステラーゼが、アスペルギラス属、ロドトル
   ラ属、リゾプス属、シュードモナス属、キャンディダ属
   、ジベレラ属、トルロプシス属、アウレオバシジウム属
   、ペニシリウム属およびバシラス属のうちの少なくとも
   一つの属に属する微生物から生産されたエステラーゼで
   ある特許請求の範囲第１項に記載のｌ−プロプラノロー
   ルの生化学的分離法。 ３、前記エステラーゼがブタ肝臓起源のエステラーゼで
   ある特許請求の範囲第１項に記載のｌ−プロプラノロー
   ルの生化学的分離法。 ４、前記微生物が、アスペルギラス属、ロドトルラ属、
   リゾプス属、シュードモナス属、キャンディダ属、ジベ
   レラ属、トルロプシス属、アウレオバシジウム属、ペニ
   シリウム属およびバシラス属のうちの少なくとも一つの
   属に属する微生物である特許請求の範囲第１項に記載の
   ｌ−プロプラノロールの生化学的分離法。 ５、前記ｄｌ−プロプラノロールの有機カルボン酸エス
   テルが、ｄｌ−プロプラノロールと、炭素数１〜７の脂
   肪族モノカルボン酸のクロライドおよび炭素数３〜７の
   脂肪族ジカルボン酸のモノエステルモノクロライドのい
   ずれかとを反応させて得られるエステルである特許請求
   の範囲第１項に記載の１−プロプラノロールの生化学的
   分離法。 ６、前記ｄｌ−プロプラノロール−Ｎ−アシル化誘導体
   の有機カルボン酸エステルが、ｄｌ−プロプラノロール
   −Ｎ−アシル化誘導体と、炭素数１〜７の脂肪族モノカ
   ルボン酸のクロライドおよび炭素数３〜７の脂肪族ジカ
   ルボン酸のモノエステルモノクロライドのいずれかとを
   反応させて得られるエステルである特許請求の範囲第１
   項に記載のｌ−プロプラノロールの生化学的分離法。 ７、前記モノカルボン酸が、酢酸、プロピオン酸、酪酸
   、吉草酸、カプロン酸、ヘプタン酸、アクリル酸および
   クロトン酸のうちの少なくとも一種である特許請求の範
   囲第５項および第６項に記載のｌ−プロプラノロールの
   生化学的分離法。 ８、前記ジカルボン酸が、マロン酸、コハク酸、グルタ
   ル酸、ピメリン酸、マレイン酸およびフマール酸のうち
   の少なくとも一種である特許請求の範囲第５項および第
   ６項に記載のｌ−プロプラノロールの生化学的分離法。 ９、前記有機溶媒が、ｎ−ヘプタン、イソヘプタン、ｎ
   −ヘキサン、イソヘキサン、ｎ−ペンタン、イソペンタ
   ン、ｎ−オクタン、イソオクタン、シクロペンタン、シ
   クロヘキサン、シクロヘプタン、ベンゼン、トルエン、
   キシレン、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール
   、イソプロパノール、アセトン、メチルイソプロピルケ
   トン、テトラヒドロフラン、ジメチルエーテル、ジエチ
   ルエーテル、ジオキサン、酢酸メチル、酢酸エチル、酢
   酸ブチル、四塩化炭素、クロロホルム、塩化メチレン、
   塩化メタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトア
   ミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシドお
   よびアセトニトリルからなる群から選択された少なくと
   も一種である特許請求の範囲第１項に記載のｌ−プロプ
   ラノロールの生化学的分離法。