JPS6193129A - 治療活性を有するタンパク質の経口投与製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、経口投与後、胃腸（ＧＩ）管壁からの治療活
性を有するポリペプチドの吸収を可能ならしめた該ポリ
ペプチドの医薬製剤に関する。本発明の製剤は、ヒトの
みならす動物にも適用し得る。

発明の背景 獣医の立場からすれば、あるいはヒトの患者の立場から
すれば、治療剤は非経口投与するよりも経口投与する方
が好ましいことが多い。しかし、この様な治療剤の多く
は、それを経口的に投与する場合、有効に吸収させる為
には非常に多量投与する必要がある。このことは、量を
多量確保てきない治療剤の場合には問題である。極性の
生物活性を有する治療物質の経口吸収を改善する試みが
ヨーロッパ特許出願公開第３６１４５号（１９８１年９
月２３日公開）（ＥＰ出願）に開示されている。この出
願には、ポリペプチド類を含む広範囲の生物活性物質に
、サリチル酸およびその塩類の様な、ヒドロキシアリー
ルまたはヒドロキンアルアルキルの酸類を含む多種多様
の補助剤を添加することが記載されている。この出願に
は、要すれば適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤な
どを添加してもよいと記載されている。注目すべきこと
は、インシュリン（分子量約６０００）より大きいポリ
ペプチド類は、治療物質のリストにのっていないことで
ある。この様な大きいポリペプチド類は、経口投与用治
療剤の重要な一部門となるであろう。バイオテクノロジ
ーの出現により、これまで入手することができなかった
治療活性を有する多くのタンパク質を生産し得る様にな
ったからである。

上記の文献に大きいペプチドの経口投与について何ら記
載されていない理由は、この出願からすつと後に発行さ
れた文献〔コールドウェル（Ｃａｌｄｗｅｌｌ、　Ｌ、
Ｔ、　）らのファーマンニーティカル−チク１０ジー（
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
）５０（１９８３年１０月）〕（３人の著者の内、２名
は該ヨーロッパ特許出願の発明者である）から推定≠す
ることができる。即ち、多くのポリペプチド類の経口投
与には、ＣＩ＋化学的および酵素的分解、および（２）
有効な血漿中濃度を得るには不十分な吸収率、という問
題が生じる。この問題を解決するために、この文献では
、患者の立場からすれば望ましくないことではあるけれ
ども、直腸内投与型体Ｃｊ形彦とるへきだとしている。

この文献の５４頁には、伝統的理由で、直腸内投与の標
的化合物としてインシュリンが挙げられている。その理
由は、著者はこの分子を「非常に大きい」と考えている
からである（経口投与には絶対的に大きすぎる）。ＥＰ
出願の光明者によるこの文献は、直腸内投与ですら、こ
れより実質的に大きいポリペプチド類には有効であろう
とは示唆していない。

これは多分、この文献の５０頁に記載されている様に、
直腸内投与でも吸収率が不十分であるため１こ大きいポ
リペプチド類は使用てきないと著者は考えていたからで
あろう。

本発明の要約 本発明ｌこよれば、分子ｆｆｉ　１２．０００ダルトン
以上の治療活性を有する両性親和性（ａｍｐｈｏｐｈ　
ｉ　ｌ　ｉ　ｃ　）タンパク質を、経口投与剤形でヒト
または動物に投与することができる。この経口投与剤形
は、脂肪親和性媒体として役立つ１つの成分、好ましく
は鉱油、およびＣＩ管吸収促進剤（例えばサリチル酸ナ
トリウム）を含んでいることが好ましい。

これらの２つの成分は、回腸および結腸に於ける両性親
和性タンパク質の吸収に、相乗効果を発揮ト”ｅ、”ｆ
”；”；’フ、第２図は回腸に注入した後のｈＧＩ−１
△ の吸収を時間に対してプロットしたグラフ、第３図はＰ
ｉ１０）’ｌ’：に注入した後のｈＧＩＩの吸収を時間
に対してプロットしたグラフである。尚、第２図および
第３図に於いて、÷は１．水性緩衝液中のｈＧＨ１１ト
は２．水性Ｍ衝液中のｈ　Ｇ　Ｈ＋サリチル酸塩、“は
３・鉱゛油中のｈ　Ｃ，Ｈ１十は４．鉱油中のｈＧＨ＋
サリチル酸塩を表わす。

本発明の好ましい態様 本発明は、１−治療活性を有する両性親和性タンパク質
を経口投与剤形で投゛与する方法に適用されるものであ
る。このタンパク質はインシュリン（約１２、０００ダ
ルトン）の２倍より大きいサイズであり、分子に親水性
の性質と疎水性の性質を持った領域をつくる様なアミノ
酸組成を持ったものである。このタンパク質は、非経口
的に投与した場合に治療活性を有するものである。ヒト
に使用する場合、これらは以下のタンパク質または「構
造的に類似した生物活性を有する等個物」を包含する二
ヒト成長ホルモン、ヒトα−インターフエロン、ヒトチ
ーインターフェロン、ヒト組織プラスミノーゲン賦活体
、ヒト腫瘤ネクローゼ因子など。一方、動物に使用する
場合には、このタンパク質は牛成長ホルモン、牛α−イ
ンターフエロン、牛γ−インターフエロン、ブタ成長ホ
ルモン、鶏成長ホルモンなどである。

本発明は特に、成長期のヒトに、ヒト成長ホルモン（ｈ
　Ｇ　Ｉ−１）またはその構造類似の生物活性等価物を
経口投与剤形で投与することに応用できるものである。

このｈ　Ｇ　Ｈは、ロス（Ｒｏｏｓ、　Ｐ、）らが記載
している方法で〔バイオケミカル・バイオフイジクス・
アクタ（Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ　。

Ａｃｔａ、）、７５：５２５（１９６３））ヒトの脳下
垂体の様な天然物から得ることができる。ｈＧＨを得る
ための別の方法は、米国特許第４．３４２，８３２号に
具体的に示されている組換えＤＮＡ技術を使って組立て
られたベクターを用いるものである〔ゲラデル（Ｇｏｅ
ｄｄｅｌ　）ら、ネーチャー（Ｎａｔｕｒｅ）、影巳、
５４４　（］　９７９　）参照〕。

「構造的に類似した生物活性を有する等価物」という用
語は、天然に存在するｈ　Ｇ　Ｈとそのアミノ酸配列が
同じてはないが、ｈＧＨ自体による患者の成長期に及は
す影響と実質的に同等の効果を持つに十分な類似した構
造を持ったペプチドを意味する。

驚くべきことに、比較的大きいタンパク質であるｈ　Ｃ
，Ｈ（分子■＝約２４０００ダルトン）の経口投与剤形
を、ＧＩ管での吸収を実質的に増大させる補助剤を使っ
て製剤化し得ることがわかった。

これは、ポリペプチド類を経口投与剤形にすることを妨
げて来た理由と思われる粘膜非透過性の問題を解決する
ものである。

前記のゲラデルの方法に従って製造したメチオニルｈＧ
Ｈを、組合せた補助画、具体的にはサリチル酸ナトリウ
ムと鉱油と共に製剤化すると、そのｈＧＨのＧＩ管での
吸収が相乗効果的に増強されることがわかった。

一般的に言うと、とのｈＧＨの経口投与剤形は、成分＋
１）−脂肪親和性媒質および成分（ｂｌ　−Ｇ　１管吸
収促進剤、を含んでいる。成分（ａｌは、脂肪親和性、
水との非混和性、ｈＧＨ（または、前記のその他の活性
物質）との相容性、および腸内投与される医薬品に使用
され得る、という諸性質で特徴ずけられる。好適な脂肪
親和性媒質には、鉱油、トリグリセライド類、エステル
化グリコール類、疎水性アルキル鎖を持ったポリグリコ
ール類、燐脂質類およびスチロール類などが挙げられる
。米国薬局方の鉱油（Ｍｉｎｅｒａｌ　Ｏｉ＋　）が特
に有効である。これらの一群の化合物の残りのものも、
その類似の疎水的性質により、成分＋ｂｌとの組合せで
使用された時、ＧＩ管吸収の増強を補助するのに適して
いると考えられる。

成分（ｂｌには、ヒドロキシアリールまたはヒドロキシ
アルアルキルの酸類、それらの塩類、エステル類または
アミド類などが含まれる。サリチル酸ナトリウムがこの
目的に有効で−あることがわかった。類似した性質を持
ったその池の化合物としては、その池のサリチル酸誘導
体、アミノ酸および１．３−ジカルボニル化合物のアミ
ン類およびエナミノ酸類、およびそれらの塩類、アミド
類およびエステル類などが挙げられる。

Ｇｌ管吸収増強の理論的な機構は正確にはわからないが
、以下の理論が適用できると思われる。

大きいタンパク質が血流またはリンパ系へと吸収され、
生物学的に利用されるには、このタンパク質は腸管壁に
並んでいる細胞間を通過するか、あるいは、能動輸送ま
たは受動輸送のいづれかによって脂質粘膜を通って輸送
されなければならない。

ここに、成分子ａｔおよびｆｂｌの組み合せが必要にな
ると考えられる。成分（ａｌは腸管壁と腸管内部との間
の粘膜バリヤーの性質を変化させると共に、腸管壁の細
胞を通過する輸送機構に影響を与えると考えられる。こ
れは、脂肪親和性の担体として役立つ。成分子ａｌと（
ｂｌが組み合わさって、大きい無傷のタンパク質を血流
またはリンパ系に有効に輸送させるのに役立つ。この吸
収促進および必要とされる脂肪親和性分子をもたらすの
は、このタンパク質の両性親和性の性質、即ち、親水性
と疎水性の混合した性質である。

製剤中の成分子ａｎと成分子ｂｌとの比率は臨界的では
ない。投与すべきタンパク質１単位当たり少なくとも約
１単位の成分（ａｌが含まれていることが望ましい。勿
論、投与しようとするタンパク質の投与量は、個々の患
者に応じて、よく確立されている医薬品の常道に従って
決定された治療有効量であタンパク質を経口投与しよう
とする場合の１つの起り得る障害は、タンパク質が腸粘
膜に吸収される前にこのタンパク質を不活性化させてし
まう胃内の低ｐＨおよびＣＩ管の上部に存在するタンパ
ク分解酵素である。この問題は、成分ｔａｌを腸溶コー
チング剤と共に使用することにより解決し得る。このコ
ーチングは錠剤にもカプセル剤にも適用可能であり、腸
管の下流部位（例えば回腸および結腸）で薬物を放出さ
せることができ、従って、胃のきびしい条件を避けるこ
とができ、更に、多くのタンパク分解酵素、および小腸
上部に存在する胆汁酸塩をも避けることができる。この
種の腸溶コーチングとしては、レミングトンのファーマ
シューテイカル・サイエンｘ　（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’
ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ）
、１３版および１６版に記載されているセルロース・ア
セテート・フタレート類が挙げられる。

成分（ｂ）は、液状であって適当な外部容器（シェル）
に入れられている成分（ａ）（鉱油）に溶解または懸濁
する。適切な容器は、モダン・ファーマノニーティクス
（Ｍｏｄｅｒｎ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ　）、４
１２（１９７９）に挙げられているゼラチンで成形され
たカプセルなどからなる。製剤のための外部容器は、既
知の常法に従って選択してもよい。あるいはまた、ザオ
イベス（Ｔｈ　ｅ　ｅ　ｕｗｅ　ｓ　、　Ｆ、　）のド
ラッグ・デビジョン・アンド・インダストリアル・ファ
ーマシイー　（Ｄｒｕｇ　Ｄｅｖ、ａｎｄ　Ｉｎｄ、Ｐ
ｈａｒｍ）　、９　（７１゜１３３１、（１９８３）に
記載されている様な放出制御経口投与剤に含まれていて
もよい。本発明はｈＧＦｌについて特に有効であるが、
その他の活性物質（その他の活性物質とは、治療活性を
有し、一定の球状構造を持った両染性タンパク質であり
、分子量が１２．ＱＱＱダルトン以上である）を経口投
与剤形の形で経口投与するのに有効である。ヒトの患者
のための好適な活性剤には、ｈＧＨの他に、ヒトα−イ
ンターフエロン、ヒトグーインターフェロン、ヒト組織
プラスミノーゲン賦活剤、ヒト腫瘍ネクローゼ因子、お
よびこれらの活性剤のいずれかと構造の類似している生
物活性等個物などが含まれる。動物用の適当な活性剤に
は、牛成長ホルモン、牛α−インターフエロン、牛γ−
インターフエロン、ブタ成長ホルモン、鶏成長ホルモン
、およびこれらの活性剤のいずれかと構造の類似してい
る生物活性等価物が含まれる。

以下に実施例を挙げて、組換えＤＮＡ法で製造したメチ
オニルｈＧＨと組合せてサリチル酸ナトリウムおよび鉱
油補助剤を使用した場合の顕著な効果を例示する。具体
的には、このｈＧ）（はゲッタ／ｌ／　（Ｇｏｅｄｄｅ
ｌ　）らおよびｏ　ス（Ｒｏｏｓ　）らの方法で製造し
た。

実施例 水性マンニトール燐酸緩衝液中、上記のｈＧＨを０．１
５　”ｆ／＋ｒｎｌの割合で含む注射用投与剤形を調製
した。比較の基礎とするために、まず、この製剤を体重
約３５（ｌのＣＤ系雄ラットに注入した。このラットを
一夜絶食させ、ロンゾ々ｏｍｐｕｎ）（４■／Ｋｐ）を
筋肉的注射して麻酔し、２０分後にケタミン（４０Ｗ９
／ＫＳＩ）およびアセプロマシン（１■／に２）を筋肉
内投与した。第１図は静脈内注射した動物について血清
中濃度を時間に対してプロットしたものである（ＨＧＨ
ＩＶ薬物動力学、１５０ＵＧ／ＫＧ　Ｌ、　Ｖ、ポーラ
スとして投与）。静脈内注射には６匹の動物を使った。

注射から２．５．５．１Ｏ１２０，３０，４５，６０お
よび９０分後に採血した。

台形ルールによって計算した曲線上面積は１４゜６３１
ｎｇ−分／ｄである。第１図に示した結果を、腸管内投
与処置群のバイオアベイラビリティ−（生物学的利用率
）の計算に使用する。静脈内注射に使った投与量は、以
下に示す胆管内投与に使った量のわずか５％であったの
で、これをバイオアベイラビリティ−を計算する上で計
算に入れた。

補助剤を使った４種の異なった製剤を使って、Ｇｌ管の
４つの異なった領域、即ち胃、十二指腸、回腸および結
腸にｈＧＨを注入した。注入後５．１０．２０．３０．
４５．６０および９０分後に採血した。放射免疫分析に
よりｈＧＨの血清中濃度を測定した。鉱油およびサリチ
ル酸ナトリウムを組合せて用いることにより、冑および
十二指腸に於いてｈ　Ｇ　Ｈの吸収増強に多少の改善が
みられたが、この様な増強は回腸および結腸に於いて特
に顕著であった。これらの結果を、それぞれ第２図およ
び第３図に示す。各注射部位毎に、各製剤について６匹
の動物を使用した。各部位には、以下の製剤を注入した
；（１）水性緩衝液（０，２ｍｌ　）中の成長ホルモン
（５ｍＷ／　ｍｅ　）　、　（２１水性緩衝液（０，２
ｍｌ　）中、成長ホルモン（５〜／ｍｅ）＋サリチル酸
ナトリウム（４０Ｔ９／ｍｌ）、１３）鉱ｍ　（０，２
ｍｌ　）中の成長ホルモン（５’Ｑ／　ｍｅ　）　、（
４１鉱油（０，２ｍ／）中、成長ホルモン（５■／ｍｅ
）＋サリチル酸ナトリウム（４０■／　ｒａｔ　）。第
２図および第３図に示した様に、鉱油ベース中でサリチ
ル酸ナトリウムを使用すると、回腸および結腸に於いて
、実質的な吸収の増強がみられた。腸のこれらの部位か
らのｈＧＨの吸収は、少なくとも９０分間継続していた
に違いないと結論することができる。というのは、血清
中濃度は、この期間中比較的高いままであったからであ
る。もし吸収が存意にもつと急速に起ったのなら、第１
図に示した静注データにより示された血清中半減期に基
つき、その濃度はもつと早く低下するはずである。時間
に対する血清中濃度曲線の下の面積に基づく生物学的利
用率を静脈内投与の場合と比較して以下の表に示した。

表中、番号は上記の製剤を意味する。

表１ １、　１．０　１．３　０．９　　０．２２、　０．６
　０．５　０．６　　０．８３、　１．２　３．７　２
．９　　２．１４、　１．２　２．２　８．９　１２．
８表１のデータは、回腸および結腸についての、第２図
および第３図に示したものを数値で表わしたものである
が、このデータに基づき、サリチル酸塩および鉱油をそ
れぞれ単独使用した場合と両者併用を比較すると、その
両者の存在下でのｈＧＨの回腸および結腸での吸収には
、相乗効果が見られることがわかる。

以上の試験の結果は、回腸および結腸からのｈＧＨの吸
収には十分な増強がみられ、従って本発明に係る製剤は
経口投与剤形として有用であることを示している。

【図面の簡単な説明】

第１図は静脈注射した動物に於ける、血清中のｈＧＨｆ
ｉ度と時間との関係を示すグラフ、第２図は回腸に注入
した後のｈＧＨの吸収量と時間との関係を示すグラフ、
第３図は結腸に注入した後のｈＧＨの吸収量と時間との
関係を示すグラフである。 特　許　出　願　人　　　ジエネンテク・インコーホレ
イテッド

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）治療活性を有し、一定の球状構造を有し、１２，
   ０００ダルトン以上の分子量を有する両性親和性タンパ
   ク質からなる活性成分でヒトまたは動物の患者を治療す
   るに際し、経口投与剤形にした該活性成分を該患者に経
   口投与する方法であつて、該経口投与剤形には、（ａ）
   脂肪親和性であり、水に非混和性であり、該活性成分と
   相溶性があり、腸管内投与される医薬品に使用し得る脂
   肪親和性媒質、および（ｂ）ヒドロキシアリールまたは
   ヒドロキシアリールアルキルの酸類、その塩類、エステ
   ル類またはアミド類、およびアミノ酸および１，３−ジ
   カルボニル化合物のエナミン誘導体、およびそれらの塩
   類、アミド類およびエステル類からなる群から選ばれる
   胃腸管吸収促進剤、が含まれていることを特徴とする方
   法。 （２）該患者が成長期にある患者であり、該活性成分が
   ヒトの成長ホルモンまたはその構造類似の生物活性等価
   物である第１項に記載の方法。 （３）該患者がヒトの患者であり、該活性成分がヒト成
   長ホルモン、ヒトα−インターフエロン、ヒトγ−イン
   ターフエロン、ヒト組織プラスミノーゲン賦活剤、ヒト
   腫瘍ネクローゼ因子およびこれらの活性成分のいずれか
   と構造類似の生物活性等価物からなる群から選ばれるも
   のである第１項に記載の方法。 （４）該患者が動物であり、該活性成分が牛成長ホルモ
   ン、牛α−インターフエロン、牛γ−インターフエロン
   、ブタ成長ホルモン、鶏成長ホルモン、およびこれらの
   活性成分のいずれかと構造類似の生物活性等価物からな
   る群から選ばれるものである第１項に記載の方法。 （５）成長ホルモンまたはその構造類似の生物活性等価
   物を経口投与剤形の形で成長期の患者に投与することか
   らなる該患者の成長を促進させる方法。 （６）患者がヒトであり、成長ホルモンがヒト成長ホル
   モンである第５項に記載の方法。 （７）患者が動物である第５項に記載の方法。 （８）投与が経口投与である第５項に記載の方法。 （９）経口投与剤形が、脂肪親和性であり、水に非混和
   性であり、活性成分と相溶性があり、腸管内投与される
   医薬品に使用され得る脂肪親和性媒質を含んでいるもの
   である第５項に記載の方法。 （１０）該脂肪親和性媒質が、鉱油、トリグリセライド
   類、エステル化グリコール類、エステル化ポリグリコー
   ル類、疎水性アルキル側鎖を持つたポリグリコール類、
   燐脂質類およびスチロール類からなる群から選ばれるも
   のである第１項または第９項に記載の方法。 （１１）脂肪親和性媒質が鉱油である第１項または第９
   項に記載の方法。 （１２）経口投与剤形が、カルシウムキレート化性質を
   持つた胃腸管吸収促進剤をも含んでいる第１項または第
   ９項に記載の方法。 （１３）吸収促進剤が、ヒドロキシアリールまたはヒド
   ロキシアリールアルキルの酸類、その塩類、エステル類
   またはアミド類、アミノ酸および１，３−ジカルボニル
   化合物のエナミン誘導体、およびそれらの塩類、アミド
   類およびエステル類からなる群から選ばれるものである
   第１２項に記載の方法。 （１４）吸収促進剤がサリチル酸ナトリウムである第１
   項または第１２項に記載の方法。 （１５）治療活性を有し、１２，０００ダルトン以上の
   分子量を有する両性親和性タンパク質からなる活性成分
   を含んでいる経口投与製剤であつて、該製剤が、脂肪親
   和性であり、水と非混和性であり、該活性成分と相溶性
   があり、かつ胃腸管内投与される医薬品に使用し得る脂
   肪親和性媒質、およびヒドロキシアリールまたはヒドロ
   キシアリールアルキルの酸類、その塩類、エステル類、
   アミド類、およびアミノ酸および１，３−ジカルボニル
   化合物のエナミン誘導体およびそれらの塩類、アミド類
   およびエステル類からなる群から選ばれる胃腸管吸収促
   進剤、を含んでいることを特徴とする経口投与製剤。 （１６）治療有効量のｈＧＨまたはその構造類似生物活
   性等価物を含んでいる経口投与剤形の形の成長促進製剤
   。 （１７）経口投与剤形が腸溶コーティングを含んでいる
   第１６項に記載の成長促進製剤。 （１８　経口投与剤形が放出制御製剤の形である第１６
   項に記載の成長促進製剤。 （１９）経口投与剤形が、脂肪親和性であり、水に非混
   和性であり、活性成分と相容性があり、腸管内投与され
   る医薬品と使用し得る脂肪親和性媒質を含んでいる第１
   ６項に記載の成長促進製剤。 （２０）脂肪親和性媒質が鉱油、トリグリセライド類、
   エステル化グリコール類、エステル化ポリグリコール類
   、誘導ポリグリコール類、燐脂質類、およびスチロール
   類からなる群から選ばれるものである第１５項〜第１９
   項のいずれかに記載の製剤。 （２１）脂肪親和性媒質が鉱油である第１５項〜第１９
   項のいずれかに記載の製剤。 （２２）経口投与剤形が、カルシウムキレート化性質を
   持つた胃腸管吸収促進剤をも含んでいる第１６項に記載
   の成長促進製剤。 （２３）経口投与剤形が、鉱油およびサリチル酸ナトリ
   ウムからなる添加物の組合せを含んでいる第１５項また
   は第１６項に記載の製剤。