JPS6142823B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、対照試薬、殊に、尿のウロビリノー
ゲン及び場合により更に診断上重要な成分を検出
するために使用する試験片用の対照溶液に関す
る。 定期的尿検査のために試験片の需要は増してい
る。ここで試験片とは、被検溶液中に浸漬する際
に純粋に定性的又は半定量的もしくは定量的であ
りうる特徴的な呈色反応を示す試薬を含有する、
固い片状、棒状又はその他の形の支持材を意味す
る。この種の試験片では、偽陰性所見のパーセン
テージをできるだけ小さく保持するための機能対
照を行なうことが時々必要である。この機能対照
のために、主としていわゆる対照尿が使用され
る。 この対照尿は、大抵、所望の尿成分の添加によ
り屡々「病理学的尿」に変えられるプールされた
人尿から成る。貯蔵性の理由から、この対照尿
を、以後、対照試薬と称し、多くは凍結乾繰させ
る。使用時に、水又は屡々アセトン及び／又は安
定化された赤血球を含有する稀釈剤で復原させ
る。従つてこの復原された対照試薬は、使用準備
のできた対照溶液即ち対照尿である。 対照試薬の基礎としての人尿の代りに使用する
ために、人工的に緩衝された、人尿の特性にでき
るだけ近い混合物も使用できる。人工的対照尿
は、使用準備のできた溶液として、かつ錠剤形又
は粉末形で公知である。 ウロビリノーゲンは尿の診断上重要な成分であ
る。尿中のウロビリノーゲンの検出（これは大抵
Ｐ―メトキシベンゾールジアゾニウム塩とのアゾ
ーカツプリングにより行なう）は、肝臓及び溶血
性の疾病の確認に役立つ。しかしながら、大抵の
公知の対照尿には、ウロビリノーゲンは含有され
ていない。それというのもこの化合物はかなり不
安定であるからである。従つて、従来は、ウロビ
リノーゲンを、ウロビリノーゲンと同様に反応
し、更に安定でもある他の化合物で代替する試み
がなされている。 即に、ウロビリノーゲン代替物として、相当す
る試験片のウロビリノーゲン試験域上でウロビリ
ノーゲンそのものとは異なる反応色を示して反応
する有機化合物を含有する人工的対照試薬（対照
尿）が公知である。これでは、比色ができないの
で、このパラメーターの定量的濃度評価は不可能
である。従つて、この機能試験では陽性／陰性―
決定だけが可能である。 本発明の目的は、ウロビリノーゲンの検査に好
適であり、ウロビリノーゲン―機能対照のため
に、ウロビリノーゲン試験域上で、ウロビリノー
ゲン呈色と直接比較可能であり、従つて定量的濃
度評価を可能とする反応色を示し、ウロビリノー
ゲンとは異なる安定な物質を含有する尿検査―試
験片用対照試薬を得ることである。殊に、本発明
の目的は、ウロビリノーゲンの検出系中でＰ―メ
トキシベンゾールジアゾニウム塩とのアゾカツプ
リングによりウロビリノーゲンと同様に挙動し、
同時に２，６―ジクロルベンゾールジアゾニウム
塩とのアゾーカツプリングに基づくビリルビンの
検出系が存在する際にも阻害しない。前記種類の
対照試薬を得ることである。 前記目的は、尿中のウロビリノーゲン及び場合
によつて存在する他の診断上重要な成分例えばビ
リルビン、ケトン体、グルコース、蛋白質、亜硝
酸塩、血液及びPH―値を検査する試験片用の対照
試薬により解決され、これは、ウロビリノーゲン
に対する対照物質として、２，４―ジメチルピロ
ールカルボン酸(3)又はそのアルカリ金属塩又はア
ルカリ土類金属塩を含有することよりなる。 意外にも、２，４―ジメチルピロールカルボン
酸(3)もしくはそのアルカリ金属塩又はアルカリ土
類金属塩特にナトリウム塩は、反応性、呈色及び
感度に関してこの種の対照試薬中でウロビリノー
ゲンと理想的に代替できることが明らかになつ
た。殊に、この化合物は、意外にも、ビリルビン
検出に役立つ活性２，６―ジクロルベンゾールジ
アゾニウム塩とは反応せず、従つてビリルビン含
分のみせかけによる障害はない。この化合物の貯
蔵性の試験で、遊離の２，４―ジメチルピロール
カルボン酸(3)も、その塩殊にアルカリ金属塩、特
にここではナトリウム塩も、極めて安定であり、
従つて、この種の対照試薬中で不安定なウロビリ
ノーゲンと理想的に代替することが判明した。 有利な実施形では、本発明の試薬は、ケトン体
代替物としてアルミニウム、マグネシウム及び／
又はベリリウムのアセチルアセトネートを含有す
る。これら化合物は極めて安定であり、当該PH値
では、加水分解されず、水に不溶な金属水酸化物
を形成せず、ウロビリノーゲン検出を阻害しな
い。アルミニウム化合物が有利である。前記のア
セチルアセトネートは実際に無色である。 本発明の対照試薬は付加的になお一定量の、通
例診断剤として重要と見なされている尿の成分を
も含有しているのが有利である。ここでは、殊に
亜硝酸塩、蛋白質、殊にアルブミン、グルコー
ス、血液（ヘモグロビン）及びPH―値測定用の緩
衝物質が挙げられる。亜硝酸塩としては、易溶性
の亜硝酸のアルカリ金属塩及びアルカリ土類金属
塩がこれに該当し、亜硝酸ナトリウムが特に有利
である蛋白質としてはアルブミン、例えば牛アル
ブミンを使用するのが有利である。グルコースは
Ｄ（＋）―グルコースの形で使用し、ビリルビン
は可溶性塩特にナトリウム塩の形で存在する。パ
ラメータ血液として、ヘモグロビン、例えば牛の
ヘモグロビンが挙げられる。 緩衝物質としては、原則的に、7.5〜9.0のPH領
域で緩衝するすべての慣用の緩衝剤を使用するこ
とができる。その例は次のものである：トリエタ
ノールアミン／HCl、ピロ燐酸ナトリウム／
HCl、ジエチルバルビツール酸ナトリウム／
HCl、トリス―（ヒドロキシメチル）―アミノメ
タン／HCl、ボラツクス／ホウ酸、ホウ酸ナトリ
ウム／HCl、グツド（Good）による双性イオン
性緩衝剤例えばＮ，Ｎ―ビス―（２―ヒドロキシ
エチル）―グリシン、Ｎ―〔トリス―（ヒドロキ
シメチル）―メチル〕―グリシン及び２―〔４―
ヒドロキシエチル）―ピペラジニル(1)―エタンス
ルホン酸。有利な緩衝剤容量は５〜25ミリモル／
（溶液）である。 本発明の対照試薬のこの種の有利な組成は、実
際に、使用準備のできた溶液１中に、 ２，４―ジメチルピロールカルボン酸(3) 0.002〜0.4ｇ ビリルビン塩 ０〜0.1ｇ アルミニウムアセチルアセトネート 又は相当するマグネシウム― 又はベリリウム化合物相当量 ０〜5.0ｇ 亜硝酸塩 ０〜0.1ｇ アルブミン ０〜７ｇ ヘモグロビン ０〜0.1ｇ 緩衝物質（PH7.5〜9.0） 0.3〜100ｇ を固体形又は溶解した形で含有してなる。 特に有利な組成は、溶液１当り ２，４―ジメチルピロールカルボン酸(3) 0.007〜0.2ｇ ビリルビン塩 ０〜0.07ｇ アルミニウムアセチルアセトネート 又は当量の相当するマグネシウム― 又はベリリウム化合物 ０〜2.0ｇ 亜硝酸塩 ０〜0.01ｇ アルブミン ０〜3.0ｇ Ｄ（＋）―グルコース ０〜3.0ｇ ヘモグロビン ０〜0.04ｇ 緩衝物質（PH7.8〜8.5） 0.3〜25ｇ を固体形又は液状で含有するものよりなる。 前記試薬中で量の記載は、水１中に溶かすた
めの特定量の固体もしくは最終対照試薬溶液（人
工尿）１中の含分に関する。試薬は個々の成分
の量比が前記範囲であるなら前記組成の数倍又は
数分の１を含有していてもよい。緩衝物質として
は、ジエチルバルビツール酸ナトリウム／ジエチ
ルバルビツール酸が有利である。 更に、対照試薬は、対照尿中に公知の他の成
分、例えば他の糖、アスコルビン酸、色素、ホル
モン、尿素、酵素及び類似物を含有していてよ
い。更に打錠助剤、充填剤、結合剤、安定剤例え
ば酸化防止剤かつ／又は滑沢剤を加えてもよい。 ウロビリノーゲンのナトリウム塩に比べた本発
明の対照試薬中に含有される２，４―ジメチルピ
ロールカルボン酸(3)又はそのナトリウム塩の優れ
た安定性を次表に示す。この安定性試験は、試薬
錠剤を溶かして得、錠剤中から生じた物質以外に
なお亜硝酸ナトリウム、緩衝剤（PH8.0）、牛血清
アルブミン、グルコース、ビリルビン酸ナトリウ
ム、アルミニウムアセチルアセトネート及び牛の
ヘモグロビンを含有する溶液で実施した。

【表】 前記の値は、同じ組成のウロビリノーゲン含有
試薬に比べて本発明の対照試薬が安定性に関して
優れていることを示している。更に本発明の対照
試薬は、２，４―ジメチルピロールカルボン酸(3)
―成分のアゾーカツプリングの際に生じる色との
比較によりウロビリノーゲン含分の定量的評価を
可能とする利点を有する。もう１つの利点はビリ
ルビン検出の障害が現われないことである。更に
この有利な実施形では、ケトン体検出反応の対照
も他の検出反応の障害なしに、かつ試薬の安定性
を低めることなく可能である。 次に実施例につき本発明を説明する。 例 次表に、水15mlに溶かして使用準備のできた溶
液の形成下に測定できる錠剤の形の本発明の対照
試薬の組成を示す：

【表】

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 尿中のウロビリノーゲンを検出するための試
   験片用の対照試薬において、２，４―ジメチルピ
   ロールカルボン酸(3)又はそのアルカリ金属塩又は
   アルカリ土類金属塩をウロビリノーゲンの対照物
   質として一定量を含有することを特徴とするウロ
   ビリノーゲン検出試験片用の対照試薬。 ２ 溶液１当り ２，４―ジメチルピロールカルボン酸(3) 0.002〜0.4ｇ を固体形又は溶解した形で含有する。特許請求の
   範囲第１項記載の試薬。 ３ 溶液１当り ２，４―ジメチルピロールカルボン酸(3) 0.002〜0.4ｇ ビリルビン塩 0.1ｇまで アルミニウムアセチルアセトネート 又は当量
   の相当するマグネシウム― 又はベリリウム化合物 5.0ｇまで 亜硝酸塩 0.1ｇまで アルブミン ７ｇまで ヘモグロビン 0.1ｇまで 緩衝物質（PH7.5〜9.0） 0.3〜100ｇ を固体形又は溶解した形で含有する、特許請求の
   範囲第１項記載の試薬。 ４ 溶液１当り ２，４―ジメチルピロールカルボン酸(3) 0.007〜0.2ｇ ビリルビン塩 0.07ｇまで アルミニウムアセチルアセトネート 又は当量の相当するマグネシウム― 又はベリリウム化合物 2.0ｇまで 亜硝酸塩 0.01ｇまで アルブミン 3.0ｇまで Ｄ（＋）―グルコース 3.0ｇまで ヘモグロビン 0.04ｇまで 緩衝物質（PH7.8〜8.5） ３〜25ｇ を固体形又は溶解した形で含有する、特許請求の
   範囲第１項記載の試薬。