JPS61227795A - α‐インターフエロンの単離および精製法 - Google Patents
α‐インターフエロンの単離および精製法Info
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- JPS61227795A JPS61227795A JP61066118A JP6611886A JPS61227795A JP S61227795 A JPS61227795 A JP S61227795A JP 61066118 A JP61066118 A JP 61066118A JP 6611886 A JP6611886 A JP 6611886A JP S61227795 A JPS61227795 A JP S61227795A
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- Japan
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- interferon
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- aqueous
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/56—IFN-alpha
-
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- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/811—Interferon
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- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
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- General Health & Medical Sciences (AREA)
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
すでに１９５６年にアイザックス（Ｉｓａａｃｓ）およ
びリンデマン（Ｌｉｎｄｅｍａｎｎ）はインターフェロ
ンを細胞内ウィルス増殖の間接的な抑制物質として発見
している。それ以来天然超厚の多数の異なる型のインタ
ーフェロンが確認され、これらは、なかんずく異なる起
源細胞により下記のように分類される。
びリンデマン（Ｌｉｎｄｅｍａｎｎ）はインターフェロ
ンを細胞内ウィルス増殖の間接的な抑制物質として発見
している。それ以来天然超厚の多数の異なる型のインタ
ーフェロンが確認され、これらは、なかんずく異なる起
源細胞により下記のように分類される。
白血球から得られるα−インターフエロン線線維側細胞
ら得られるβ−インターフエロンリンパ球から得られる
γ−インターフエロン適当な刺激によりそれぞれの細胞
において誘発（ｉｎｄｕｃｅ）されるインターフェロン
は化学的には糖蛋白の群に属し、一部分は酸（−２〜３
）に安定であυそして１０８〜１０９ ＩＵ／■のそれ
らの完全な抗ウィルス活性を種物異的様式で示す０１４
６〜１６６個のアミノ酸で構成される一連のα−１β−
およびγ−インターフエロンの主要な構造が解明された
。それと並んで、遺伝子工学的方法によりその構造が短
縮されるか、または天然のインターフェロンに比較して
アミノ酸配列が修飾された天然に存在しないインターフ
ェロンが公開されている。
ら得られるβ−インターフエロンリンパ球から得られる
γ−インターフエロン適当な刺激によりそれぞれの細胞
において誘発（ｉｎｄｕｃｅ）されるインターフェロン
は化学的には糖蛋白の群に属し、一部分は酸（−２〜３
）に安定であυそして１０８〜１０９ ＩＵ／■のそれ
らの完全な抗ウィルス活性を種物異的様式で示す０１４
６〜１６６個のアミノ酸で構成される一連のα−１β−
およびγ−インターフエロンの主要な構造が解明された
。それと並んで、遺伝子工学的方法によりその構造が短
縮されるか、または天然のインターフェロンに比較して
アミノ酸配列が修飾された天然に存在しないインターフ
ェロンが公開されている。
大腸菌においてインターフェロン遺伝子が発現される遺
伝子工学の分野での最も最近の研究テハ、いくつかの天
然のインターフェロン中に確認されるグリコジル側、＠
または多糖類側鎖は蛋白質の生物学的活性に何の影響も
及ぼさないと思われることが示された。その上、天然の
糖蛋白を用いて得られる抗体を用いて、大腸菌かう得ら
れる非グリコジル化インターフェロンへの画定された結
合が比較でき、このことは抗原決定基としてのインター
フェロンの蛋白構造の優勢な影響を示している・ それらの治療的な効力のゆえに、インターフェロンは適
当な細胞培養物の培地を収穫することによるか、または
遺伝子工学的方法でインターフェロンをコードするＤＮ
Ａベクター１−クローニングした大腸菌菌株を発酵させ
ることにより工業的な大きな規模で産生される。得られ
た粗製インター７エロシ製剤（平均活性、蛋白質１町当
り１０３〜１０４ＩＵ）を単離および精製するには。
伝子工学の分野での最も最近の研究テハ、いくつかの天
然のインターフェロン中に確認されるグリコジル側、＠
または多糖類側鎖は蛋白質の生物学的活性に何の影響も
及ぼさないと思われることが示された。その上、天然の
糖蛋白を用いて得られる抗体を用いて、大腸菌かう得ら
れる非グリコジル化インターフェロンへの画定された結
合が比較でき、このことは抗原決定基としてのインター
フェロンの蛋白構造の優勢な影響を示している・ それらの治療的な効力のゆえに、インターフェロンは適
当な細胞培養物の培地を収穫することによるか、または
遺伝子工学的方法でインターフェロンをコードするＤＮ
Ａベクター１−クローニングした大腸菌菌株を発酵させ
ることにより工業的な大きな規模で産生される。得られ
た粗製インター７エロシ製剤（平均活性、蛋白質１町当
り１０３〜１０４ＩＵ）を単離および精製するには。
一般にアフィニティクロマトグラフィーおよび吸着クロ
マトグラフィー操作が用いられる・これらは固定された
疎水性リガンド、金属イオン。
マトグラフィー操作が用いられる・これらは固定された
疎水性リガンド、金属イオン。
チオール、有機水銀化合物、ポリヌクレオチド、制御さ
れた多孔性ガラス、ならびに抗体に高特異的に結合する
インターフェロンの特殊な能力を利用するものである。
れた多孔性ガラス、ならびに抗体に高特異的に結合する
インターフェロンの特殊な能力を利用するものである。
精製法の多様性にも拘らずそれにより得られたインター
フェロンの収車および純度は人間でのインターフェロン
ノ臨床検査において副作用の原因についての不確実性が
示すように満足できるものではないままである。
フェロンの収車および純度は人間でのインターフェロン
ノ臨床検査において副作用の原因についての不確実性が
示すように満足できるものではないままである。
特にインターフェロンが変性する傾向があることが多大
の困難をもたらしそして重合体状の不溶性集合物の形成
ゆえにインターフェロンのｌ／′ｉｌ製および単離にお
いである場合には多大の損失を生ずる。それゆえ新規な
、効果的な単離法が必要である。
の困難をもたらしそして重合体状の不溶性集合物の形成
ゆえにインターフェロンのｌ／′ｉｌ製および単離にお
いである場合には多大の損失を生ずる。それゆえ新規な
、効果的な単離法が必要である。
この課題は本発明により、遺伝子工学的に修飾された細
菌培養物から得られたプラスミドにより生成されたα−
インターフエロンおよヒ誘発された哺乳動物細胞の培養
土層みから得られたα−インターフエロンを単離および
精製するにあたり、変性されたα−インターフエロンを
含有する適当な、好ましくは凍結乾燥された粗生成物か
ら得られたα−インターフエロンをａ）変性させる条件
下に好ましくは高濃度のグアニジン塩酸塩水溶液中に溶
解させそして次に好ましくは水でゆつくシと段階的に希
釈することにより不純物を分離したのち富化されたα−
インターフエロンを難溶性の、オリゴマー性の変性され
た形態で沈殿させそして／または ｔ＋） ＨＩＯカラム（疎水性の相互作用クロマトグ
ラフィー用カラム）に適用しそして次に吸着されたα−
インターフエロンを好ましくは非イオン性の界面活性剤
水溶液を用いてまたは基金ｔｏ、１Ｍ以下の塩水耐液を
用いて、再生条件下に溶離する ことからなる方法により解決される。
菌培養物から得られたプラスミドにより生成されたα−
インターフエロンおよヒ誘発された哺乳動物細胞の培養
土層みから得られたα−インターフエロンを単離および
精製するにあたり、変性されたα−インターフエロンを
含有する適当な、好ましくは凍結乾燥された粗生成物か
ら得られたα−インターフエロンをａ）変性させる条件
下に好ましくは高濃度のグアニジン塩酸塩水溶液中に溶
解させそして次に好ましくは水でゆつくシと段階的に希
釈することにより不純物を分離したのち富化されたα−
インターフエロンを難溶性の、オリゴマー性の変性され
た形態で沈殿させそして／または ｔ＋） ＨＩＯカラム（疎水性の相互作用クロマトグ
ラフィー用カラム）に適用しそして次に吸着されたα−
インターフエロンを好ましくは非イオン性の界面活性剤
水溶液を用いてまたは基金ｔｏ、１Ｍ以下の塩水耐液を
用いて、再生条件下に溶離する ことからなる方法により解決される。
工程（１１および（１））は完全に別々にまたは連続し
て実施されうる。
て実施されうる。
工程（ａ）および（１））を連続して実施する場合、本
発明による方法は知られた方法に比較して、変性された
インターフェロンの性質を富化および精Ｉ！に用いるこ
と、およびクロマトグラフィー精製の最終工程ではじめ
て天然のインターフェロンへの再生が行われるという長
所を有する。
発明による方法は知られた方法に比較して、変性された
インターフェロンの性質を富化および精Ｉ！に用いるこ
と、およびクロマトグラフィー精製の最終工程ではじめ
て天然のインターフェロンへの再生が行われるという長
所を有する。
従ってすべての他の方法で不可欠でそして変性されたイ
ンターフェロンの分離が反復して必要であるゆえに損失
の多い天然インターフェロンを用いる操作が回避される
。反対に天然のインターフェロンは精製の最終工程では
じめてその方法に固有の様式で得られる。
ンターフェロンの分離が反復して必要であるゆえに損失
の多い天然インターフェロンを用いる操作が回避される
。反対に天然のインターフェロンは精製の最終工程では
じめてその方法に固有の様式で得られる。
方法（ａ）はインター７エｑンが実質上変性された形態
で存在する適当なインターフェロン含有粗製物質を知ら
れた変性条件下に場合により慣用の還元剤例えばβ−メ
ルカプトエタノール。
で存在する適当なインターフェロン含有粗製物質を知ら
れた変性条件下に場合により慣用の還元剤例えばβ−メ
ルカプトエタノール。
ジチオトレイトールまたはグルタチオンの１種類を添加
して６〜８ＭのグアニジンＨｅβ溶液中に溶解させ（Ｃ
，Ｇｈｅｌｉｓ氏他の［Ｐｒｏｔ、ｅｉｎ ＦＯＩ−ｄ
ｉｎｇＪ 。
して６〜８ＭのグアニジンＨｅβ溶液中に溶解させ（Ｃ
，Ｇｈｅｌｉｓ氏他の［Ｐｒｏｔ、ｅｉｎ ＦＯＩ−ｄ
ｉｎｇＪ 。
Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｅａ出版、Ｎ、Ｙ、Ｌｏｎｄ
ｏｎ、Ｂ、Ｈｏｒｅａｋｅｒ他編、１９８２年第２５４
頁以下）、そして水で注意深く希釈することによりネ鈍
物を段階的に沈殿させる方法で実施されるのが好ましい
。その場合インターフェロンの変性された状況が保持さ
れねばならず、そしてそれが後程の０，５〜２Ｍグアニ
ジンＨＯｊＱ含量における希釈工種で沈殿しそして変性
されたインターフェロンとして富化された形態で単離さ
れうる。
ｏｎ、Ｂ、Ｈｏｒｅａｋｅｒ他編、１９８２年第２５４
頁以下）、そして水で注意深く希釈することによりネ鈍
物を段階的に沈殿させる方法で実施されるのが好ましい
。その場合インターフェロンの変性された状況が保持さ
れねばならず、そしてそれが後程の０，５〜２Ｍグアニ
ジンＨＯｊＱ含量における希釈工種で沈殿しそして変性
されたインターフェロンとして富化された形態で単離さ
れうる。
通常インターフェロン含量１０チ以上を有するこの物質
は工程（１））によりさらに＄１製されうる。
は工程（１））によりさらに＄１製されうる。
この目的には、好ましくはこのものは変性条件下に約６
ＭのグアニジンＨＯＪＩ中に溶解されそしてグアニジン
Ｈｅｊｌ含量約１〜３Ｍとなるまで迅速に水で希釈した
のち場合により前記した還元剤の１種類を添加してＨＩ
ｃカラムに適用する。
ＭのグアニジンＨＯＪＩ中に溶解されそしてグアニジン
Ｈｅｊｌ含量約１〜３Ｍとなるまで迅速に水で希釈した
のち場合により前記した還元剤の１種類を添加してＨＩ
ｃカラムに適用する。
ＨＩ（３に適当なゲルはｎ−ブチル−ＴＳＫ （ブチＡ
／ −’ｒｏｙｏｐｅａｒ１■６５０Ｍ）である。これ
らＨＩＯに使用されるゲルはインターフェロンを高い塩
濃度で吸着する性質を有する。脱着は０．５ ％のツイ
ーン（Ｔｗｅｅｎ■）２０を含有する水分勾配を用いる
ことにより塩濃度を減少させて、すなわち再生条件下に
行われる。慣用のＨＩＯ（Ｍ、５ｈｉｎ氏他のＡｎａｌ
、ＢｉＯｃｈｅｍ、 １３８％２５９〜２６１ （１９
８４））とは異なシ、・インターフェロンの吸着は変性
された形態でもグアニジンＨｅβがら起こることが見出
されたが、一方慣用の条件では蛋白質の天然の球状構造
を安定化させる硫酸アンモニウム溶液のような非変性性
塩溶液を必要とするものでろる。
／ −’ｒｏｙｏｐｅａｒ１■６５０Ｍ）である。これ
らＨＩＯに使用されるゲルはインターフェロンを高い塩
濃度で吸着する性質を有する。脱着は０．５ ％のツイ
ーン（Ｔｗｅｅｎ■）２０を含有する水分勾配を用いる
ことにより塩濃度を減少させて、すなわち再生条件下に
行われる。慣用のＨＩＯ（Ｍ、５ｈｉｎ氏他のＡｎａｌ
、ＢｉＯｃｈｅｍ、 １３８％２５９〜２６１ （１９
８４））とは異なシ、・インターフェロンの吸着は変性
された形態でもグアニジンＨｅβがら起こることが見出
されたが、一方慣用の条件では蛋白質の天然の球状構造
を安定化させる硫酸アンモニウム溶液のような非変性性
塩溶液を必要とするものでろる。
使用例
１、 インターフェロン産生性大腸菌（ｉ、ｃｏｘｌ）
菌株の凍結乾燥された細胞崩壊物１００：ｐを８Ｍグア
ニジンＨＯρ溶液２１中にｐＨ７で溶解させそしてこの
溶液を遠心分離して清澄化させる。
菌株の凍結乾燥された細胞崩壊物１００：ｐを８Ｍグア
ニジンＨＯρ溶液２１中にｐＨ７で溶解させそしてこの
溶液を遠心分離して清澄化させる。
粗製物質の溶液を水６Ｉ２中にかきまぜ入れそして生成
する沈殿を冷却室中で一夜沈降亡しめる。沈降物を遠心
分離により単離しそして湿ったまま再び８Ｍグアニジン
ＨＯｆｌ溶液２５〇−中に溶解させる。この溶液中に５
回の連続する工程で平均１２５−ずつの水をかきまぜ入
れセして生成する沈−殿を各工程で遠心分離する。水ｓ
ｏｏｍｔをさらに添加し続いて攪拌すると微細なゼラチ
ン様沈殿が生成し、これは放射線免疫測定尺よれば出発
物質の総インターフェロンの約８（ｌを含有している。
する沈殿を冷却室中で一夜沈降亡しめる。沈降物を遠心
分離により単離しそして湿ったまま再び８Ｍグアニジン
ＨＯｆｌ溶液２５〇−中に溶解させる。この溶液中に５
回の連続する工程で平均１２５−ずつの水をかきまぜ入
れセして生成する沈−殿を各工程で遠心分離する。水ｓ
ｏｏｍｔをさらに添加し続いて攪拌すると微細なゼラチ
ン様沈殿が生成し、これは放射線免疫測定尺よれば出発
物質の総インターフェロンの約８（ｌを含有している。
湿った遠心分離された沈殿を一１８℃で保存する・２、
ＩＩ−クロマトグラフィー：変性された粗製インタ
ーフェロン０．２９ ヲ６ Ｍ クアニジンＲｏｊｌ溶
液６−中に溶解させこの溶液を水６１Ｌｔで希釈しそし
て３ＭグアニジンＨＣ１で平衡となされたＦｒａｋｔＯ
ｇｅｌ■’ｌ’ｓＫ−ブチ／Ｉ／６５０を充填したクロ
マトグツフィーカラム（２，５Ｘ ５０ｃｍ） 中に適
用する。クロマトグラフィーの展開は連続流れＷ分光光
度計を用い２８０ ｎｍで監視する。最初のピークが溶
出されるまでカラムを３ＭグアニジンＨＯｆｔ溶液で展
開させる。次に０．５チツイーン２０を含有する水で洗
う。約２−ずつのクラクションを集める。流速は毎分ｔ
５ｍｌである。インターフェロンの主要量は約３５フラ
クシヨン後に出現する。合一したクラクションは限外濾
過により所望のインターフェロン含量となるまで濃縮し
そして適轟な溶離液中に調整する。かくして得られたα
−インターフエロンは８Ｄ８− ｙ／Ｉ／電ｆｉ泳動（
還元剤なし）によれば単量体であシそして蛋白質１１１
５当り３．７ ｘ １０８ ＩＦ単位なる比活性を有し
、これは５Ｘ１０８ＩＦ単位／蛋白■なる外部ＩＰ標準
物に基づき純度的７４１に相当する。
ＩＩ−クロマトグラフィー：変性された粗製インタ
ーフェロン０．２９ ヲ６ Ｍ クアニジンＲｏｊｌ溶
液６−中に溶解させこの溶液を水６１Ｌｔで希釈しそし
て３ＭグアニジンＨＣ１で平衡となされたＦｒａｋｔＯ
ｇｅｌ■’ｌ’ｓＫ−ブチ／Ｉ／６５０を充填したクロ
マトグツフィーカラム（２，５Ｘ ５０ｃｍ） 中に適
用する。クロマトグラフィーの展開は連続流れＷ分光光
度計を用い２８０ ｎｍで監視する。最初のピークが溶
出されるまでカラムを３ＭグアニジンＨＯｆｔ溶液で展
開させる。次に０．５チツイーン２０を含有する水で洗
う。約２−ずつのクラクションを集める。流速は毎分ｔ
５ｍｌである。インターフェロンの主要量は約３５フラ
クシヨン後に出現する。合一したクラクションは限外濾
過により所望のインターフェロン含量となるまで濃縮し
そして適轟な溶離液中に調整する。かくして得られたα
−インターフエロンは８Ｄ８− ｙ／Ｉ／電ｆｉ泳動（
還元剤なし）によれば単量体であシそして蛋白質１１１
５当り３．７ ｘ １０８ ＩＦ単位なる比活性を有し
、これは５Ｘ１０８ＩＦ単位／蛋白■なる外部ＩＰ標準
物に基づき純度的７４１に相当する。
蛋白質含量はローＩＪ −（Ｌｏｗｒｙ）法で測定され
る。インターフェロン活性は牛腎臓細胞（ＭＥＥＫ）に
対する小水泡性口内炎ウィルスの細胞病理学的作用につ
いての生物活性としておよび放射線免疫学的に測定され
る。アミノ酸分析の値は理論的な数値と実質上一致する
。
る。インターフェロン活性は牛腎臓細胞（ＭＥＥＫ）に
対する小水泡性口内炎ウィルスの細胞病理学的作用につ
いての生物活性としておよび放射線免疫学的に測定され
る。アミノ酸分析の値は理論的な数値と実質上一致する
。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １）遺伝子工学的に修飾された細菌培養物から得られた
プラスミドにより生成されたα−インターフエロンおよ
び誘発された哺乳動物細胞の培養上澄みから得られたα
−インターフエロンを単離および精製するにあたり、変
性されたα−インターフエロンを含有する適当な粗生成
物から得られたα−インターフエロンを ａ）変性させる条件下にグアニジン塩酸塩水溶液中に溶
解させそして次に水で希釈する ことにより富化されたα−インターフエロ ンを難溶性の、オリゴマー性の変性された 形態で沈殿させそして／または ｂ）ＨＩＣカラムに適用しそして次に吸着されたα−イ
ンターフエロンを界面活性剤水溶 液を用いてまたは塩含量０．１Ｍ以下の塩水溶液を用い
て再生条件下に溶離する、 ことからなる方法。 ２）工程ａ）およびｂ）が連続して実施されることから
なる前記特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３）工程ａ）または工程ｂ）のいずれかを実施すること
からなる前記特許請求の範囲第１項記載の方法。 ４）遺伝子工学的に修飾された細菌培養物から得られた
α−インターフエロンを単離および精製することからな
る前記特許請求の範囲第１〜３項のいずれか１項記載の
方法。 ５）ハイブリットα−インターフエロンを単離および精
製することからなる前記特許請求の範囲第４項記載の方
法。 ６）工程ａ）における水での希釈が段階的に遂行される
ことからなる前記特許請求の範囲第１〜５項のいずれか
１項記載の方法。 ７）工程ｂ）における溶離が非イオン系界面活性剤の水
溶液を用いて行われることからなる前記特許請求の範囲
第１〜５項のいずれか１項記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19853511011 DE3511011A1 (de) | 1985-03-27 | 1985-03-27 | Verfahren zur isolierung und reinigung von (alpha)-interferonen |
| DE3511011.2 | 1985-03-27 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61227795A true JPS61227795A (ja) | 1986-10-09 |
Family
ID=6266415
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61066118A Pending JPS61227795A (ja) | 1985-03-27 | 1986-03-26 | α‐インターフエロンの単離および精製法 |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4845032A (ja) |
| EP (1) | EP0196146A3 (ja) |
| JP (1) | JPS61227795A (ja) |
| AU (1) | AU586474B2 (ja) |
| DE (1) | DE3511011A1 (ja) |
| DK (1) | DK142386A (ja) |
| ES (1) | ES8704186A1 (ja) |
| FI (1) | FI861270A (ja) |
| GR (1) | GR860793B (ja) |
| HU (1) | HUT40681A (ja) |
| IL (1) | IL78258A0 (ja) |
| NZ (1) | NZ215585A (ja) |
| PT (1) | PT82271B (ja) |
| ZA (1) | ZA862251B (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK580789D0 (da) * | 1989-11-20 | 1989-11-20 | Novo Nordisk As | Fremgangsmaade til oprensning af polypeptider |
| AU648214B2 (en) * | 1991-12-31 | 1994-04-14 | Lucky Limited | Recombinant gene coding for human alpha interferon and expression vector thereof, etc. |
| US20030190307A1 (en) * | 1996-12-24 | 2003-10-09 | Biogen, Inc. | Stable liquid interferon formulations |
| GB0319601D0 (en) | 2003-08-20 | 2003-09-24 | Sandoz Ag | Production process |
| US20110034678A1 (en) * | 2009-03-13 | 2011-02-10 | Aerovance, Inc. | Methods of renaturation of recombinant proteins |
| MX2012008893A (es) | 2010-02-01 | 2013-02-27 | Digna Biotech Sl | Procedimiento para la produccion de interferon alfa 5. |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4405601A (en) * | 1981-05-21 | 1983-09-20 | Cancer Research Center | Extraction and purification of biologically active lymphokines |
| IT1167610B (it) * | 1982-01-19 | 1987-05-13 | Cetus Corp | Interfreron ibrido multiclasse, composizione farmaceutica che lo contiene e procedimento di produzione |
| US4485038A (en) * | 1982-10-19 | 1984-11-27 | Health Research (Roswell Park Division) | Method for the production and purification of human leukocyte interferon |
| GR79124B (ja) * | 1982-12-22 | 1984-10-02 | Genentech Inc | |
| IL71951A0 (en) * | 1983-06-01 | 1984-09-30 | Hoffmann La Roche | Polypeptides having interferon activity,their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| US4476049A (en) * | 1983-09-20 | 1984-10-09 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method for the extraction of immune interferon |
-
1985
- 1985-03-27 DE DE19853511011 patent/DE3511011A1/de not_active Withdrawn
-
1986
- 1986-03-19 EP EP86200565A patent/EP0196146A3/de not_active Withdrawn
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