JPS61225657A - 被分析物を測定するための方法および試験装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はシグナル産生性システムの助けによシ生物親和
性のある結合体の複合体形成によシ惹起される凝集を評
価する方法に関する。本発明はさらに、本方法を実施す
るのく用いられる試験装置にも関する。

生物親和性のある結合体間の結合反応の主要な数は各個
々の結合体よシ大きい空間的拡がりを有する複合体を生
ずる。生物親和性のある結合対の結合体の１個が本来個
々であるかまたは分散しうる粒子にまたけ大きな、可溶
性の重合体分子に結合している場合に特にこの寸法変化
が著明である。結合反応前は単量体として存在する粒子
は結合反応によシニ量体またはオリゴマー集合体を形成
する。その例としては細菌凝集、インドナイト凝集、血
球凝集およびラテックス凝集があけられる。

同様な方法でハプテン、例えばペニシリン測定のための
ＰＣＴ　ＷＯ８３１０４３１４号記載のラテックス分集
抑制試験において免疫化学的に集合したおよび集合して
ないラテックス粒子間の分離が達成される。その場合感
作されたラテックスを注射器中でｏ　ニジリンを含有す
る試料と混合し、インキュベートしそして加圧下に予め
湿らせた濾過膜を通しそして集合してない部分を分光光
度計中で光散乱性質に基づき測定する。

この方法では使用者に要求される操作の多さ、例えば試
薬および試料の配置および混合、インキュベート時間の
正確な厳守、加圧濾過、ｒ液の捕集、集合したか萱たけ
集合してない粒子の割合の測定、が欠点と言える。相当
する操作上の骨折シと並んで、これに加え測定法の結果
を偽和する操作過誤の可能性も明らかに存在する。

特に集合した粒子および集合してない粒子の再生しうる
様式での濾過膜での分離は極度に困難である、何故なら
これは用いられる圧力の如何によシ濾過性に決定的に影
響する膜付近での粒子の富化を生ずるからである。濾過
経過の異なる時刻に異なる量の集合してない粒子が膜を
通過し、従って続（１ｌｊｉ定工程のための代表的な量
のＰ液の採取が困難である。

生物親和性相互作用により生成された粒子の凝集物がク
ロマトグラフィ一様式による自動的な濾過により分散さ
れた残留する粒子から分離されそして分散された粒子の
割合がシグナル産生性システム（以下ＳＰＳと略記する
）の助けにより検出される方法が見出された。この方法
はクロマトグラフィ一様式による自動的な濾過を可能に
する装置を利用して実施される。

本発明は生物親和性のある結合性質および同時にシグナ
ル産生性システム（ＳＰＹ）　ｔたは８ＰＢの一部を備
えた粒子の凝集によりまたは凝集抑制により、水浴液中
に存在する生物親和性のある結合性質を有する被分析物
゛の濃度を検出および測定するに当勺、 ａ）水溶液およびその中に分散された粒子を吸収しそし
て輸送する物質からなる装置を用いて凝集した粒子と凝
集してない粒子を分離し、そして ｂ）凝集してない粒子の分離された割合をそのＳＰＳに
より測定する、 ことからなる方法忙関する。

本方法において用いられる粒子は、それらに生物親和性
のある結合性質を付与する成分と丑んで、ＳＰＳの少く
とも１８Ｘ類の成分をも付加的に含有する。

本方法は水性分散液を吸収しそして輸送するが、しかし
ながら凝集物を留めおく物質を使用して、凝集された粒
子および分散された粒子のクロマトグラフィーの様式に
よる自動的な分離を可能にする装置を用いて実施される
。その際、被分析物を含有する浴液は供給ゾーンまたは
反応ゾーンとして形成された媒体の領域上に供給される
。薔分析物は反応ゾーン中に固体形で含有されるかまた
は分離ゾーン上に分散物として加えられた粒子と、およ
び場合により他の生物親和性のある結合システムの前記
された成分と反応する。生成した凝集物岐分離ゾーンと
して形成された媒体にまたは媒体の領域上にまたは中に
保持される。分散物として残留する粒子は液体と一緒に
分離ゾーンを移動しそして検出ゾーンとして形成された
領域中にゆき、そこでこれらはＳＰＳの全成分の相互作
用によシ評価しうるシグナルを生成する。

本発明はさらに凝集された部分および凝集されてない部
分が相互に分離されるところの凝集反応における粒子忙
より、水溶液中に存在する生物親和性のある結合性質を
有する被分析物のＳ度を検出および測定するための装置
であって、力）つ ａ）その装置が供給ゾーン、反応ゾーン、分離ゾーンお
よび検出ゾーンを包含し、 ｂ）すべてのゾーンが、水性液体を吸収および輸送する
物質からなり、 Ｃ）すべての前記したシー７が凝集していない粒子に対
して透過性であり、 ｄ）少くとも分離ゾーンが凝集された粒子にとって非透
過性であり、 ｅ）その装置が検出ゾーンにおいて評価しうるシグナル
を生成するシグナル産生性システムを含有する、 ことからなる装置にも関する。

この装置は相互に接触するかまたは接触されうる数個の
シート状構造物またはプレートからなることができ、そ
れらの表面が最小の拡がりで並置して、すなわちシート
状で接触するか、またはそれらの表面が最大の拡がシで
、すなわち層形状で接触して配置される。シート状およ
び層形状の配置の組み合せも同様に可能である。

プレートは支持体または担体により前記した配置で固定
されうる。プレートは水溶液およびその中に分散された
粒子を吸収しそして輸送する物質から成る。

装置が例えば３種のプレートから成る場合は、これは反
応ゾーン、分離ゾーンおよび検出ゾーンから形成され、
４ａのプレートから成る場合は供給ゾーンとしての付加
的なプレートから形成される。

その装置の集流態様の例を縦断面にて第１．２．６およ
び４図に示す。支持体または担体はＡで示されろ。これ
は何ら水溶液を吸収しな〜・物質で作られたシート状構
造物、プレー）または線条体からなる、第１図に示され
る装置では担体は透明なプレートである。第２．３およ
び４図に示される装置では担体は透明ではないが、陥凹
またはスリン）ａを備えている。Ｅは供給ゾーンとして
備えられたプレートを示し、Ｂは反応ゾーンとして備え
られたプレートを、Ｃは分離ゾーンとして備えられたプ
レートを、そしてＤは検出ゾーンとして備えられたプレ
ートを示す。第２または第３図記載の装置においては支
持体はそれぞれ角で相互に結合しておりそして使用に際
して重なり合って畳まれる２個の翼形線条体またはプレ
ートからなる。翼の一方はその上側にシート状配置です
なわち並置されて存在する供給ゾーンＥおよび反応ゾー
ンＢを包含し、もう一方の胤は層形状の配置でその下側
および上方の陥凹に達する分離ゾーンＣ１およびその上
側および下方の陥凹に達する、分離ゾーンＣと接触する
検出ゾーンＤを包含する。第２図および第３図は供給ゾ
ーンＥおよび反応ゾーンＢの大きさがそれぞれ異なるこ
と釦より区別される。

第４図は担体Ａの下面に供給ゾーンＥおよび反応ゾーン
Ｂシート状で韮負して配置された装置を示す。供給ゾー
ンには陥凹ａ′を通して試料供給および場合により他の
溶液の供給を受けうる。陥凹ａＫは分離ゾーンＣが入り
込みそしてその上に検出ゾーンＤが担体Ａの上面にあり
、分離ゾーンＣがその下面と接触して配置される。

供給ゾーンＥが存在する場合それＦｉ被分析物の溶液の
とり込みに用いられる。これは同時ＫＥＩＰＢの成分を
含有する溶液および／または凝集反応のための粒子の分
散液ならびに付加的な溶離剤のとり込みにも役立てられ
うる。

反応ゾーンＢけ生物親′！０性を有する結合システムの
すべての成分に関与して粒子の凝集形成または抑制釦用
いられるしまた何ら供給ゾーンＥが存在しない場合は場
合によシ粒子の分散液またＦｉ被分析物の溶液のとり込
みにも用いられる。これはまた粒子ならびに生物親和性
のある結合システムおよびＢＰＥの可溶性成分を乾燥形
態で含有しうる。

分離ゾーンｃＦｉ反応ゾーン中に生成する凝集した粒子
の分離に役立てられる。凝集物＃ｉ反応ゾーンと分離ゾ
ーンの界面に留めおかれるかまたは分離ゾーンにとり込
まれそして保持される。

このものは凝集してない粒子および被分析物の測定に必
要なすべて他の溶性成分にとっては透過性である。分離
ゾーンは繊維性または球状構造を有する物質、すなわち
異方性ならびに％方性多孔質構造を有する物質から調製
されうる。

検出ゾーンＤは生物取相性反応か行われたのちそこへ移
動した、分散されたままである粒子の吸収およびｓｐｓ
　Ｋよるその検出に役立てられる。このものは好ましく
は入射光線九対する高い反射率を有する物質から調製さ
れる。例えばシグナル生成体単位が発色団または発螢光
団である場合は、何らそれ以上８ＦＢ用成分は必要では
なく、検出は場合によ）比色に基づく視覚的評価により
または反射光度計または螢光計により行われる。シグナ
ル生成体単位が酵素であるところの、達成しうる感度ゆ
えに好ましい測定法の実施形においては検出ゾーンにお
いて分離ゾーンを通過するＳＰＳの割合の酵素活性が測
定される。これは酵素−基質＃液を検出ゾーンに添加す
ることくより行われうるが、しかしながら検出ゾーンＦ
ｉｅ素−基質反応のすべての成分を含有するのが好まし
い。ある棟の酵素、例えばベルオキシダーセにおいては
、検出ゾーンを、相互に吸収性の関係にありかつそれぞ
れに酵素基質反応の１糊類またはそれ以上の成分が他の
成分から分離されて組み込まれているＺａｌ類のゾーン
から調製することが試薬の安定性のゆえに必要でありう
る。

粒子としては親水性表面を有するラテックス特に西ドイ
ツ特許公開公報第３，１４５，０８２号に記載されるよ
うな核−外皮構造を有するものが好ましい。他の、水溶
液中に分散しうる粒子も同様に適当である。粒子には被
分析物に特異的な生物親和性を有する結合システムの成
分の少くとも１種類およびＳＰＳの成分の少くとも１種
類が結合している。生物親和性のある結合体およびＳＰ
Ｓの成分にとっては共有結合が好ましいが、しかしアビ
ジン／ストレプトアビジン−ビオチン−システムも粒子
へのＳＰＳの成分の結合に適当である。ＳＰＳのありう
る結合された成分はグルコースオキシダーセ、アルカリ
ホスファターゼ、はルオキシダーゼまたはβ−ガラクト
シダーゼのような酵素ならびに発色団または発螢光団で
ある。

被分析物の存在下に粒子の凝集にまたはその抑制に関連
する生物親和性のあるシステムの／ξミートナーたは成
分はそれが粒子に結合した結合体でない限り、装置に固
体形で保有されるかまたは溶液中にて前記した供給ゾー
ンまたは反応ゾーンに供給されうる可溶性成分である。

凝集は、例えば、 ａ）分散された粒子が被分析物の少くとも二官能性の生
物親和性結合体の１株類を含有し、そして ｂ）分散された粒子が被分析物または被分析物の結合性
誘導体を含有しそして被分析物の少くとも二官能性の結
合体の１＆類が存在する、場合に起る。

被分析物による凝集の阻止は、分散された粒子が被分析
物の少くとも二官能性の結合体の１種類を含有しそして
被分析物の少くとも二官能性の誘導体が存在する場合に
行われる。

本発明を以下の実施例により詳細に説明するが本発明は
それらに限定されるものではない。

実施例　１ ストレプトリジン−〇（以下５Ｌ−０と略記する）Ｋ対
する抗体を検出するための試験装置の製造１．１　　核
−外皮構造を有するラテックス粒子蛋白質の共有結合に
適するラテックス粒子の調製は、西ドイツ特許第３，１
４５，０８２号実施例２ｂに記載されるようにしてポリ
スチレン−ラテックス核を使用して行われる。スチレン
、メタクリル酸およびメタクリルアミド−アセトアルデ
ヒドジーｎ−ａンチルアセタールを用いるグラフト重合
により得られる核−外皮構造を有するラテックスは粒子
直径１６Ｑｎｍを有し、放出しうるアルデヒド基含量０
．０５ｍ当ｔ／ラテックスｇである。

１．２１−″・はルオキシダシル”　１，２．９．１０
−テトラアザ−３，８−ジオキソデカン ２５℃で２５０Ｕ／Ｑを有する凍結乾燥された西洋わさ
びはルオキシダーゼ（以下ＰＯＤと略記する）　（Ｂｏ
ｅｈｒｉｎｇｅｒ　Ｍａｎｎｈｅｉｍ社製品１純度等級
■、在荷番号１２１６０６）５１１１ＦをｐＨ６，０（
７）ｌ　１　モル／を燐酸水素ナトリウムである緩衝液
２−中に溶解させ、水中の５０ミリモル／ｌメタ過沃素
酸す）　ＩＪウムの新たに調製された溶液［１Ｌ５−を
加えそして室温で攪拌しながら光線を遮断して１０分間
インキュベートする。次に前記燐酸塩緩衝液で平衡にし
たセファデックスＧ−２５でゲルｆ過することにより反
応混合物から過沃素散塩を除去する。ペルオキシダーゼ
を含有するフラクション３−を１　ｇ／ｌの水素化硼素
シアツナ）　ＩＪウムの存在下に最終濃度ｌ１１１モル
／ｌのアジピン酸ジヒドラジドの溶液と室温で２時間イ
ンキュベートする。次にこの混合物を緩衝液を何回もと
り代えながら前記燐酸塩緩衝液で４℃で２日間透析する
。

１．３１−”ホスファターゼ”−１，２，９，１０−テ
トラアザ−３，８−ジオキソデカン 修生の腸から得られたアルカリホスファターゼの凍結乾
燥物２６１１ｉＪ　（顕結乾燥物ｊ　８ｇ当クシ１００
Ｕ３７℃で蛋白質１ｍｇ当シ約１３０００に相当、Ｂｏ
ａｈｒｉｎｇｅｒ　Ｍａｎｎｈｅｉｍ社製品１在荷番号
４０５６３９、純度等級１〕を実施例１．２と同様にし
てメタ過沃素酸ナトリウムおよびアジピン酸ジヒドラジ
ドと反応させるが、但し前記燐酸塩緩衝液がｐＨ７，Ｏ
Ｋ調整されそして透析が５０ミリモル／ｌの硼酸ナトリ
ウム、１０ミリモル／ｌの塩化マグネシウム、Ｑ、１モ
ル／ｌの塩化亜鉛からなり、水酸化す）　ＩＪウム溶液
を用いて−ａＯＫ調整された緩衝液を用いて行われるも
のとする。

１．４　　ラテックスへの１−″にルオキシダジル”−
１，２，９，１０−テトラアザ−３，８−ジオキソデカ
ンとストレプトリジン−〇の結合実施例１．１記戦の方
法により調製されたラテックスの１％ｗ／ｖ懸濁液１０
ＭｔにＩＮＨＯｔＱ、５ｍｊを加えそしてこの混合物を
室温で１５分間インキュベートする。次Ｋ　ＩＮ　Ｎａ
ＯＨ（Ｌ　４　ｍｌ、ｐＨ６，５の飽和燐酸水素ナトリ
ウム浴液１ｔＩｔ、α９％ＮａＯ２溶液８−１．−＊、
、２ルオキシダシル”−１，２，９，１０−テトラアザ
−３，８−ジオキソデカンの実施例１．２で得られた溶
液２００μｔおよび１ｇ　／　Ｌの水素化硼素シアノナ
トリウム溶液１ｇ１ｔを加えそしてこの混合物を室温で
３０分間インキュベートする。これに１０ｇ／ｌのスト
レプトリジン−〇水溶液α４−および商品名Ｔｗｅｅｎ
■２０の下に知られているポリオキシエチレンンルビタ
ンモノラウレート２００ｇ、／を水溶液０．５−を加え
室温で一夜インキユベートする。次に水酸化ナトリウム
溶液で−４５に調整した０、５モル／ｌのＬ−アスパラ
ギン酸溶液１−および１ｇ／を水素化硼素シアノナトリ
ウム溶液α５ｍを加える。これを室温で１時間インキュ
ベートしそして反応混合物を約５０．０００Ｘｇで遠心
分離する。残留物を−７，４の５０ミリモル／ｌトリス
／ＨＯ１溶液２〇−中に１ｇ／ｌのヒト血清アルブミン
を添加して再懸濁させる。遠心分離を反復したのち残留
物をヒト血清アルブミンを添加して…７．４のトリス／
ＨＣｔ浴液２〇−中にもう一度とりそして超音波を用い
てホモジナイズする。

１．５　　試験装参の製造 不活性の、水弁透過性プラスチック担体として厚さ２０
０μｍ１巾８ｃｌＬのポリエステルフィルムを用いる。

この苗土に双方の角から２備の距離で巾０．８儂の両面
粘着テープ（Ｂｅｉｅｒｓｄｏｒｆ社製品、ハンブルグ
）をとりつける。それによりフィルムのこの表面を前面
と規定する。一方の端から同じ距離でポリエステルフィ
ルムの裏側に両面粘着テープを備えつける。この、両面
が粘着テープでおおわれたフィルムの線条片に次に穴の
中心から穴の中心までα８ｃＲの間隔で直径０．５　（
１１１の丸いくぼみ穴をあけそして残留する粘着テープ
部分にハンブルグの５ａｒｔｏｒｉｕｓ　社製の細孔寸
法［１，２μｍ、Ｒｅ−５５型の膜フィルターのＱ、８
ｃＩＩＬ巾の線条片をポリエステルフィルム前面上に固
定する。この前面上の第２の粘着テープの中央方向に面
した側１１ＣＤａｇ８ｅｒの５ｃｈ１ｅ１ｃｈｅｒ＆　
８Ｃｈｕａ１１社製第１５０７号クロマトグラフィー紙
のＣＬ５ｃＨＬ巾の小片を固定し、これが反応ゾーンで
あり、そして予めエタノール中のα２Ｑ／ｄテトラメチ
ルベンジジンの溶液で含浸されそして貼付前に送風機を
用いて乾燥しである。裏側の粘着テープも、飽和Ｎａ２
ＨＰＯ４溶液を用いて−５．０に調整された５０ミリモ
ル／ｌクエン酸中の尿素−Ｈ２０２等モル付加物１０ミ
リモル／ｌの溶液で予め含浸しそして乾燥したａ５工巾
の第１５０７号紙片を同様に貼付する（検出ゾーン）。

バーバーカッターを用いフィルムを貼付された紙片に対
し直角に巾８１の小片に切断する。

１．６　　抗ストレプトリジン−〇　（ＡＳＬ−０）の
測定実施例１．５記載の試験ユニットをＡＳＬ−０の測
定に用いる。その際ストレプトリジン−０１すなわち連
鎖球菌抗原に対する抗体が検出される。

この目的には商品名ＢｅｒｉｇｌＯｂｉｎ”を有するＢ
ｅｈｒｉｎｇｗｅｒｋｅ社製のヒト免疫グ四プリン製剤
を燐酸塩緩衝された生理食塩溶液で希釈することにより
抗ストレプトリジン−〇含量を３００工Ｕ／ｄ、１５０
工Ｕ、肩、７５工Ｖ−等々に調整する。

そこからそれぞれ５０μｔを黒いガラスプレート上で、
ストレプトリジン−〇およびＰＯＤが結合されたラテッ
クスの１．４項記載の分散物５ＤＩＬＬと混合する。こ
の混合物を直ちに以下のように分割する。５０μｔを１
．５項記載の試験ユニットの反応ゾーンに移しそして残
）の５０μｔはガラスプレートを回転させて傾けること
によ９１分間ゆシ動かす。ガラスプレート上のラテック
スの凝集強度を慣用の方法で視認によシ０〜＋４に評価
する。試験装置に供給された部分は反応ゾ〒ン中で５分
間インキュベートし、次に線条片を畳みそしてそれ忙よ
り反応ゾーン、分離ゾーンおよび検出ゾーンが吸収性接
触される。検出ゾーン中に５分後に生成する青緑色を試
験片評価装置であるマールブルグのＢｅｈｒｉｎｇｗｅ
ｒｋｅ　ＡＧ社製Ｒａｐｉｍａｔ反射光度計を用いる反
射測光により測定する。

得られる結果を第１表にまとめる。

第　　１　　表 ３００　　　　　　　　　　　　＋＋＋　　　　　　　
　１４２１５０　　　　　　　　　　　　＋＋＋＋１３
８７５　　　　　　　　　　　　＋＋＋＋　　　　　　
　１３２３７．５　　　　　　　　　　　＋＋＋＋　　
　　　　　　１２９１８　　　　　　　　　　　　＋＋
＋＋　　　　　　　　１０６９　　　　　　　　　　　
　＋＋８６ ４．５　　　　　　　　　　　　　＋５０２．２５　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　２２実施例　２ ストレプトリジン−〇に対する抗体を測定するだめのラ
テックス粒子含有試験装置の調製およびその試験装置の
抗体測定への使用 はルオキシダーゼおよびストレプトリジン−〇が結合し
た１、４項でＦＡ製されたラテックスの分散物を用い、
ガラスプレート上メツシュ数２２５／２２の堅−パーワ
イヤークロス（ＲｅｕｔｌｉｎｇｅｎのＫｕｆｆｅｒｒ
ａｔｈ社製品）を２０　ａｔ　／ｃｔｎ２の量で含浸し
そして次に凍結乾燥する。両面性の、Ｑ、９ｃｍ巾の粘
着テープ（ハンプルグのＢｅ１ｅｒｓｄｏｒｆ　社’Ｊ
品）を用いて、１．５項記載の試験装置に凍結乾燥され
たラテックス含有ペーパーワイヤークロスの０．８ｃＩ
Ｌ巾線条片を反応ゾーンと同じ平面にとりつける。

この平面上に１．６項記載の抗ストレプトリジン−〇希
釈系列物各５０μｔずつを供給する。液体の前線が反応
ゾーンの末端に到達したのち、畳むことにより検出ゾー
ンと接触させる。検出ゾーン中に１５分後に生成する発
色を１．６項に記載した反射光度計を用いて評価する。

その結果を第２表に示す。

第　　２　　表 ３７．５　　　７８ ４．５　　　３１ ２．２５　　　２３

【図面の簡単な説明】

本発明の装置の実施−態様の例を断面図にて第１、第２
、第３および第４図に示す。 図面中Ａは支持体または担体を示し、そしてＥは供給ゾ
ーンを、Ｂは反応ゾーンを、Ｃは分熱ゾーンをそしてＤ
は検出ゾーンを示す。ａおよびａ′は陥凹またはスリッ
トを示す。 特許出願人　　ベーリングヴエルケ・アクチェンゲセル
シャフト 外２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）生物親和性のある結合性質および同時にシグナル産
   生性システム（ＳＰＳ）またはＳＰＳの一部を備えた粒
   子の凝集によりまたは凝集抑制により、水溶液中に存在
   する生物親和性のある結合性質を有する被分析物の濃度
   を検出および測定するに当り、 ａ）水溶液およびその中に分散された粒子を吸収しそし
   て輸送する物質からなる装置を用いて、凝集した粒子と
   凝集してない粒子を分離し、そして ｂ）凝集してない粒子の分離された割合をそのＳＰＳに
   より測定する、 ことからなる方法。 ２）被分析物の溶液を装置の供給ゾーンとして備えられ
   た領域に入れ、次にこの溶液が反応ゾーン、分離ゾーン
   および検出ゾーンとしてこの順序で備えられた領域に移
   動することからなる前記特許請求の範囲第１項記載の方
   法。 ３）ａ）被分析物が反応ゾーン中で生物親和性のある結
   合性質および同時にＳＰＳまたはＳＰＳの一部を備えた
   粒子の凝集をひき起すかまたは妨げ、 ｂ）凝集しなかつた粒子が分離ゾーンを通りそして検出
   ゾーンにゆき、そして ｃ）凝集しなかつた粒子を検出ゾーンにおいてＳＰＳに
   より検出および測定する、 ことからなる前記特許請求の範囲第２項記載の方法。 ４）水溶液中に分散された、生物親和性のある結合性質
   を有する粒子が、検出すべき成分を含有する溶液を供給
   ゾーンに供給する前の時点またはそれと一緒に反応ゾー
   ンに供給されることからなる前記特許請求の範囲第２項
   記載の方法。 ５）供給ゾーンまたは反応ゾーンに、またはこの両ゾー
   ンに分配された、生物親和性のある結合性質を有する粒
   子を乾燥した形態で含有する装置が用いられることから
   なる前記特許請求の範囲第２項記載の方法。 ６）検出ゾーンに移動する粒子と一緒になつて測定可能
   なシグナルを生成するＳＰＳの成分を検出ゾーン中に含
   有する装置が用いられることからなる前記特許請求の範
   囲第２項記載の方法。 ７）供給ゾーンおよび反応ゾーンが一つの領域にまとめ
   られている装置が用いられることからなる前記特許請求
   の範囲第２項記載の方法。 ８）凝集された部分および凝集されてない部分が相互に
   分離されるところの凝集反応における粒子を用いて、水
   溶液中に存在する生物親和性のある結合性質を有する被
   分析物の濃度を検出および測定するための装置であつて
   、かつ ａ）その装置が供給ゾーン、反応ゾーン、分離ゾーンお
   よび検出ゾーンを包含し、 ｂ）すべてのゾーンが、水性液体を吸収および輸送する
   物質からなり、 ｃ）すべての前記したゾーンが凝集していない粒子に対
   して透過性であり、 ｄ）少くとも分離ゾーンが凝集された粒子にとつて非透
   過性であり、 ｅ）その装置が検出ゾーンにおいて評価しうるシグナル
   を生成するシグナル産生性シス テムを含有する、 ことからなる装置。 ９）凝集しうる粒子を乾燥した形態で含有することから
   なる前記特許請求の範囲第８項記載の装置。 １０）ａ）被分析物の生物親和性のある結合体およびＳ
   ＰＳの成分の少くとも１種類が粒子に結合しているか、
   または ｂ）被分析物または被分析物の誘導体の予め定められた
   量およびＳＰＳの成分の少くとも１種類が粒子に結合し
   ており、被分析物の少くとも二官能性である結合体の１
   種類が供給ゾーンまたは反応ゾーン中に存在するか、ま
   たは ｃ）被分析物の生物親和性のある結合体およびＳＰＳの
   成分の少くとも１種類が粒子に結合しており、供給ゾー
   ンまたは反応ゾーンには少くとも二官能性である被分析
   物の誘導体が存在する、 ことからなる前記特許請求の範囲第８項記載の装置。 １１）ゾーンが最大の拡がりでそれらの表面と接触して
   おりそして供給ゾーン、反応ゾーン、分離ゾーンおよび
   検出ゾーンの順序で連続して配置されていることからな
   る前記特許請求の範囲第８項記載の装置。 １２）それらの末端がそれらの内部表面と接触し、重な
   り合つて畳まれうるように相接して固定された２個の翼
   状成分から成つており、一方の成分は最小の拡がりで表
   面と接触し合う供給ゾーンおよび反応ゾーンを並置して
   包含し、そしてもう一方の成分は分離ゾーンおよび検出
   ゾーンを最大の拡がりで表面と接触し合う重なり合つた
   配置で包含することからなる前記特許請求の範囲第８項
   記載の装置。 １３）重なり合つて畳まれた場合にそれぞれ最大の拡が
   りでそれらの表面と接触し合うように反応ゾーンと分離
   ゾーンが配置されることからなる前記特許請求の範囲第
   １０項記載の装置。 １４）供給ゾーンと反応ゾーンが並置され、それぞれ最
   小の拡がりでそれらの表面と接触し合つて配置されてお
   り、分離ゾーンは反応ゾーンの上にあつてそれぞれ最大
   の拡がりでその表面と接触し合つて存在しており、そし
   て検出ゾーンが分離ゾーンの上にあつてそれぞれ最大の
   拡がりでその表面と接触し合つて配置されていることか
   らなる前記特許請求の範囲第８項記載の装置。