JPS61212281A - 温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成方法 - Google Patents
温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成方法Info
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- JPS61212281A JPS61212281A JP60053753A JP5375385A JPS61212281A JP S61212281 A JPS61212281 A JP S61212281A JP 60053753 A JP60053753 A JP 60053753A JP 5375385 A JP5375385 A JP 5375385A JP S61212281 A JPS61212281 A JP S61212281A
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- laver
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- cultured
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
- C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
- C12N5/14—Plant cells
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- Cultivation Of Seaweed (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上皇且■光立
本発明は、細胞融合の手法を利用して、海苔の養殖漁期
を延長し得る、温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔を
作成する方法に関する。
を延長し得る、温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔を
作成する方法に関する。
従未互侠徽皿！量
日本の沿岸における海苔の養殖は、１）月から３月頃ま
での冬場に行なわれているが、これは、海苔が一般の海
藻同様この時期に良く繁茂し、それ以後は衰退、消滅す
るに至るという海苔本来の生育上の特性に基づくもので
あって、この特性は漁場である海水の温度に大きく依存
していることに因る。
での冬場に行なわれているが、これは、海苔が一般の海
藻同様この時期に良く繁茂し、それ以後は衰退、消滅す
るに至るという海苔本来の生育上の特性に基づくもので
あって、この特性は漁場である海水の温度に大きく依存
していることに因る。
因に、今井丈夫監修「浅海完全養殖」 （改定版、昭和
５１年４月３０日）によると、一般に海苔の生育水温は
２〜２２℃であり、成長に好適な水温は発育段階で異な
り、幼芽で１８〜２０℃、葉体で１６〜６℃であって、
収量面からは８〜１０℃が好適とされる。すなわち、上
記生育水温から理解されるように、海苔養殖の期間は、
季節変化に伴なう海水塩の変化と海苔の生育及び成長の
温度条件を考慮するとき、必然的に冬場の４〜５ケ月間
に限定されるものであり、したがって、海苔の生産量も
自から制限されることになる。
５１年４月３０日）によると、一般に海苔の生育水温は
２〜２２℃であり、成長に好適な水温は発育段階で異な
り、幼芽で１８〜２０℃、葉体で１６〜６℃であって、
収量面からは８〜１０℃が好適とされる。すなわち、上
記生育水温から理解されるように、海苔養殖の期間は、
季節変化に伴なう海水塩の変化と海苔の生育及び成長の
温度条件を考慮するとき、必然的に冬場の４〜５ケ月間
に限定されるものであり、したがって、海苔の生産量も
自から制限されることになる。
発■が解決しようとする問題点
本発明者は、海苔養殖が漁場の水温に大きく依存してい
て養殖期間が冬場に限定されるため、海苔の年間におけ
る収量の制限が余儀なくされている現状に鑑み、その対
策について検討した結果、養殖に適さない天然品種の海
苔が養殖期を終えてもまだ生育していることに着目し、
該天然品種の海苔が温度耐性の形質を保有していること
を見出し、本発明者がさきに開発した海苔のプロトプラ
スト化の技術に基づき細胞融合の手法を利用して、上記
温度耐性の形質を養殖海苔に導入することにより、温度
耐性の強い品種の養殖海苔の作成に成功し、本発明をな
すに至った。
て養殖期間が冬場に限定されるため、海苔の年間におけ
る収量の制限が余儀なくされている現状に鑑み、その対
策について検討した結果、養殖に適さない天然品種の海
苔が養殖期を終えてもまだ生育していることに着目し、
該天然品種の海苔が温度耐性の形質を保有していること
を見出し、本発明者がさきに開発した海苔のプロトプラ
スト化の技術に基づき細胞融合の手法を利用して、上記
温度耐性の形質を養殖海苔に導入することにより、温度
耐性の強い品種の養殖海苔の作成に成功し、本発明をな
すに至った。
したがって、本発明は、従来よりも養殖期間を延長し得
る、温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成するた
めの方法を提供することを目的とする。
る、温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成するた
めの方法を提供することを目的とする。
以下本発明の詳細な説明する。
血里坐盪底
本発明の特徴は、温度耐性の強い天然のアマノリ品種の
プロトプラストを調製し、一方養殖海苔のプロトプラス
トを調製し、得られる両方のプロトプラストを細胞融合
させて細胞融合体を形成し、ついで該細胞融合体を育成
することにより、温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔
を作成することにある。
プロトプラストを調製し、一方養殖海苔のプロトプラス
トを調製し、得られる両方のプロトプラストを細胞融合
させて細胞融合体を形成し、ついで該細胞融合体を育成
することにより、温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔
を作成することにある。
ここでいう“温度耐性の強い天然のアマノリ品種”とは
、通称岩ノリと呼ばれる岩に付着して成育する野生上で
あって、マルバアマノリ、クロノリ等を例示し得る。
、通称岩ノリと呼ばれる岩に付着して成育する野生上で
あって、マルバアマノリ、クロノリ等を例示し得る。
。 を °するための
本発明において、温度耐性の強い新些い品種の養殖海苔
を作成するのに用いる、温度耐性の強い上記例示したよ
うな天然のアマノリ品種は、一般に養殖海苔と同様な黒
茶色乃至黒色を呈するが、それらの葉型はマル葉型乃至
それに近く、密殖性であって成長速度が遅く、ある程度
の大きさまでしか成長しないため、養殖には用いられな
い。しかし、天然のアマノリ品種の海苔は、在来の養殖
海苔に比べて温度耐性が非常に強いという特性を有する
ものである。
を作成するのに用いる、温度耐性の強い上記例示したよ
うな天然のアマノリ品種は、一般に養殖海苔と同様な黒
茶色乃至黒色を呈するが、それらの葉型はマル葉型乃至
それに近く、密殖性であって成長速度が遅く、ある程度
の大きさまでしか成長しないため、養殖には用いられな
い。しかし、天然のアマノリ品種の海苔は、在来の養殖
海苔に比べて温度耐性が非常に強いという特性を有する
ものである。
次に、上記天然品種の海苔の温度耐性を、養殖海苔との
対比において実験した結果を示す。
対比において実験した結果を示す。
なお、養殖海苔には、現在養殖に用いられている多種類
の品種の海苔のうち汎用されているアサクサノリとスサ
ビノリを試料として用いた。
の品種の海苔のうち汎用されているアサクサノリとスサ
ビノリを試料として用いた。
” のＦＩ １生についての
実験方法：
試料として各品種の海苔葉体（葉長１０〜３０＋＋ｍ程
度）の５枚宛を、２１容丸型フラスコに人工海水（Ａｓ
ｐ、１２） １．５１とともに入れ、温度３０℃、自然
光の条件下に通気培養し、経口的に生細胞率を調べた。
度）の５枚宛を、２１容丸型フラスコに人工海水（Ａｓ
ｐ、１２） １．５１とともに入れ、温度３０℃、自然
光の条件下に通気培養し、経口的に生細胞率を調べた。
生細胞率は顕微鏡下１００倍の１０視野の平均値で示し
た。
た。
結果は表１に示すとおりである。
表１にみられるとおり、３０℃の温度条件下での天然品
種の海苔の生細胞率の減少は、養殖海苔に比べて非常に
遅く、したがって、天然品種の海苔の温度耐性が強いこ
とがわかる。
種の海苔の生細胞率の減少は、養殖海苔に比べて非常に
遅く、したがって、天然品種の海苔の温度耐性が強いこ
とがわかる。
本発明では、上述したような天然品種の海苔が本来保有
する温度耐性の強い形質を、細胞融合の手法を利用して
養殖海苔に導入するものであって、そのためにまずこれ
らの海苔のプロトプラストを調製する。
する温度耐性の強い形質を、細胞融合の手法を利用して
養殖海苔に導入するものであって、そのためにまずこれ
らの海苔のプロトプラストを調製する。
上記各海苔のプロトプラストの調製は、本発明者がさき
に開発した方法（特願昭５８−１４９３７８号又は特願
昭５９−２２４１５号）を適用して行ない得る。
に開発した方法（特願昭５８−１４９３７８号又は特願
昭５９−２２４１５号）を適用して行ない得る。
これらの方法の概要を説明すると、前者の方法は、シュ
ードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｑｏｎａｓ）に属する難消
化性多糖類（マンナン、キシラン及びボルフイラン）の
加水分解能を有する微生物（シュードモナスＳＰ！１ｈ
ＰＴ−５，微工研条寄１）ｈＢＰ−３３０）を、海苔も
しくは海苔由来の多糖類（海苔を熱水抽出して可溶性成
分を除去して得られる、主としてマンナンもしくはキシ
ランのような多糖類から成る残渣又は該残渣を更に精製
処理して多糖類含量を高めたもの）を誘導物質とて含む
培地中で培養して得られる培養液を遠心分離し、その上
澄液を酵素液として用いて海苔葉体を処理することから
成る。上記酵Ｓ液にはマンナン加水分解酵素とキシラン
加水分解酵素が含まれているので該酵素液を海苔葉体に
作用させるとマンナン加水分解酵素が海苔の表面に存在
する顆粒状のマンナンに作用して葉体に大きく切断部を
形成し、それによりキシラン加水分解酵素により細胞壁
を形成しているミクロフィブリル形態のキシランが作用
され易くなって、葉体の細胞壁が分解除去されてプロト
プラスト化されるようになる。また、上記酵素液にはボ
ルフイラン分解酵素も含まれているので、海苔葉体の細
胞光間物質としてのボルフイランにも作用して分解する
のでプロトプラスト化が−そう促進される。
ードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｑｏｎａｓ）に属する難消
化性多糖類（マンナン、キシラン及びボルフイラン）の
加水分解能を有する微生物（シュードモナスＳＰ！１ｈ
ＰＴ−５，微工研条寄１）ｈＢＰ−３３０）を、海苔も
しくは海苔由来の多糖類（海苔を熱水抽出して可溶性成
分を除去して得られる、主としてマンナンもしくはキシ
ランのような多糖類から成る残渣又は該残渣を更に精製
処理して多糖類含量を高めたもの）を誘導物質とて含む
培地中で培養して得られる培養液を遠心分離し、その上
澄液を酵素液として用いて海苔葉体を処理することから
成る。上記酵Ｓ液にはマンナン加水分解酵素とキシラン
加水分解酵素が含まれているので該酵素液を海苔葉体に
作用させるとマンナン加水分解酵素が海苔の表面に存在
する顆粒状のマンナンに作用して葉体に大きく切断部を
形成し、それによりキシラン加水分解酵素により細胞壁
を形成しているミクロフィブリル形態のキシランが作用
され易くなって、葉体の細胞壁が分解除去されてプロト
プラスト化されるようになる。また、上記酵素液にはボ
ルフイラン分解酵素も含まれているので、海苔葉体の細
胞光間物質としてのボルフイランにも作用して分解する
のでプロトプラスト化が−そう促進される。
なお、上記プロトプラスト化に際して、海苔葉体を予め
パパインのようなプロテアーゼで処理するか、又は上記
酵素液と並行的にプロテアーゼを作用させると、更に効
果的である。
パパインのようなプロテアーゼで処理するか、又は上記
酵素液と並行的にプロテアーゼを作用させると、更に効
果的である。
又、後者の方法は、海苔葉体を予めプロテアーゼ処理し
た後、β−１，３〜キシラナーゼとβ−１，４−マンナ
ナーゼで処理するか、或はβ−１，３−キシラナーゼと
β−１，４−マンナナーゼ及びポルフイラナーゼとで処
理することから成るものであって、非常に短時間で、し
かも健全な海苔葉体のプロトプラストを開裂し得る。
た後、β−１，３〜キシラナーゼとβ−１，４−マンナ
ナーゼで処理するか、或はβ−１，３−キシラナーゼと
β−１，４−マンナナーゼ及びポルフイラナーゼとで処
理することから成るものであって、非常に短時間で、し
かも健全な海苔葉体のプロトプラストを開裂し得る。
本発明においては、上述した方法により天然品種である
マルバアマノリのプロトプラストを調製し、一方養殖海
苔であるアサクサノリ並びにスサビノリのプロトプラス
トを同じく調製し、マルバアマノリのプロトプラストと
、アサクサノリもしくはスサビノリの各プロトプラスト
とを細胞融合させる。この細胞融合は公知の手法を適用
して行なうとよく、上記各２種のプロトプラストを混合
して形成させた沈澱にポリエチレングリコール溶液と
Ｈｉｇｈ−ｐＨ−Ｃａ溶液を加えて放置した後、これに
培養液（例えば人工海水Ａｓｐ、 １２又はＰｒｏｖａ
ｓ。
マルバアマノリのプロトプラストを調製し、一方養殖海
苔であるアサクサノリ並びにスサビノリのプロトプラス
トを同じく調製し、マルバアマノリのプロトプラストと
、アサクサノリもしくはスサビノリの各プロトプラスト
とを細胞融合させる。この細胞融合は公知の手法を適用
して行なうとよく、上記各２種のプロトプラストを混合
して形成させた沈澱にポリエチレングリコール溶液と
Ｈｉｇｈ−ｐＨ−Ｃａ溶液を加えて放置した後、これに
培養液（例えば人工海水Ａｓｐ、 １２又はＰｒｏｖａ
ｓ。
１ｉの栄養添加海水）を加えて培養を行なって融合体を
形成する。なお、培養は１５℃の温度で６０００Ｌｕχ
の照度で明朗９時間、時期１５時間の条件下で行なうと
よい。
形成する。なお、培養は１５℃の温度で６０００Ｌｕχ
の照度で明朗９時間、時期１５時間の条件下で行なうと
よい。
上述のようにして得られた細胞融合体（融合細胞）につ
いて下記の手順により識別（選抜）を行なう。この識別
は、ＡとＢの２種のプロトプラストを細胞融合させた場
合、２種の細胞の融合体（Ａ″ＸＢ）のほかに、同種の
細胞の融合体（ＢＸＢ及びＡＸＡ）及び融合しない細胞
が混在しているので、これらから２種の細胞の融合体（
ＡＸＢ）を選抜するために行なうものである。なお、上
記識別のための方法としては両者の細胞の形質マーカー
について行なうとよく、それには下記のようにして品種
組合わせ別により行ない得るが、これに限るものでない
。
いて下記の手順により識別（選抜）を行なう。この識別
は、ＡとＢの２種のプロトプラストを細胞融合させた場
合、２種の細胞の融合体（Ａ″ＸＢ）のほかに、同種の
細胞の融合体（ＢＸＢ及びＡＸＡ）及び融合しない細胞
が混在しているので、これらから２種の細胞の融合体（
ＡＸＢ）を選抜するために行なうものである。なお、上
記識別のための方法としては両者の細胞の形質マーカー
について行なうとよく、それには下記のようにして品種
組合わせ別により行ない得るが、これに限るものでない
。
例えば、アサクサノリとマルバアマノリの各プロトプラ
ストを細胞融合させて得られた融合体の選抜は、アサク
サノリの葉体が細葉型であるのに対し、マルバアマノリ
はマル葉型であり、又、単胞子の放出時期がアサクサノ
リでは０．２〜ＩＩＩＩＩＷの葉径のときであるのに対
し、マルバアマノリでは０．５〜２３ｍｍの葉径のとき
である両者の相違点を利用して行なう。すなわち、上記
細胞融合体について細葉型であって、１０ｍｍ程度の葉
径時に単胞子を放出するものを選抜するとよい。また、
直接的な選抜方法として、前述したように両者の温度耐
性が著しく異なる点を利用して、上記細胞融合体を、海
苔の養殖温度より高い温度下（例えば３０℃）で培養し
、適当な日数が経過した時点で生細胞率が高い細葉型の
ものを選抜してもよい。
ストを細胞融合させて得られた融合体の選抜は、アサク
サノリの葉体が細葉型であるのに対し、マルバアマノリ
はマル葉型であり、又、単胞子の放出時期がアサクサノ
リでは０．２〜ＩＩＩＩＩＷの葉径のときであるのに対
し、マルバアマノリでは０．５〜２３ｍｍの葉径のとき
である両者の相違点を利用して行なう。すなわち、上記
細胞融合体について細葉型であって、１０ｍｍ程度の葉
径時に単胞子を放出するものを選抜するとよい。また、
直接的な選抜方法として、前述したように両者の温度耐
性が著しく異なる点を利用して、上記細胞融合体を、海
苔の養殖温度より高い温度下（例えば３０℃）で培養し
、適当な日数が経過した時点で生細胞率が高い細葉型の
ものを選抜してもよい。
叙上のようにして得られる養殖海苔と天然品種の海苔の
各プロトプラストの細胞融合体は、天然品種の海苔が保
有する温度耐性の形質が導入されているので、該誘導体
を育成することにより、温度耐性の強い新しい品種の養
殖海苔を作成することが可能となる。したがって、本発
明によると、上記品種の養殖海苔を用いることにより、
養殖期間を延長し得るようになる。
各プロトプラストの細胞融合体は、天然品種の海苔が保
有する温度耐性の形質が導入されているので、該誘導体
を育成することにより、温度耐性の強い新しい品種の養
殖海苔を作成することが可能となる。したがって、本発
明によると、上記品種の養殖海苔を用いることにより、
養殖期間を延長し得るようになる。
Ｕの−Ｕと六果
以下に実施例を示して本発明及びその効果を具体的に説
明する。なお、本実施例は、養殖海苔として代表的なア
サクサノリと、天然品種として代表的なマルバアマノリ
を用いて温度耐性の強い品種の養殖海苔の作成の態様に
ついて例示したものであって本発明はこれに限定される
ものではない。
明する。なお、本実施例は、養殖海苔として代表的なア
サクサノリと、天然品種として代表的なマルバアマノリ
を用いて温度耐性の強い品種の養殖海苔の作成の態様に
ついて例示したものであって本発明はこれに限定される
ものではない。
尖施桝
アサクサノリとマルバアマノリの各プロトプラストのｍ
製： アサクサノリ並びにマルバアマノリの各葉体の１０枚（
葉径１０〜２０１）１Ｉ＋）宛をＬ型試験管にそれぞれ
収容し、アサクサノリ葉体では０．２％濃度のパパイン
溶液（Ｍ／１５ トリス塩酸緩衝液、ｐＨ７，４）１０
ｍ４を加え、２０℃で振盪下（１００ストローク／分）
に５分間処理し、マルバアマノリ葉体では１％濃度の上
記パパイン溶液を１０ＩＩＩ！を加え、同様な条件下で
１０分間処理した。
製： アサクサノリ並びにマルバアマノリの各葉体の１０枚（
葉径１０〜２０１）１Ｉ＋）宛をＬ型試験管にそれぞれ
収容し、アサクサノリ葉体では０．２％濃度のパパイン
溶液（Ｍ／１５ トリス塩酸緩衝液、ｐＨ７，４）１０
ｍ４を加え、２０℃で振盪下（１００ストローク／分）
に５分間処理し、マルバアマノリ葉体では１％濃度の上
記パパイン溶液を１０ＩＩＩ！を加え、同様な条件下で
１０分間処理した。
ついで、得られた各葉体を海水で十分洗浄した後、別の
し型試験管に収容し、その各々に予めシュードモナス（
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）ｓｐ、 ＮａＰＴ−５（微工
研条寄ＮａＢＰ−３３０）をスサビノリ粉末を基質とす
る培地中で培養して得られた酵素液（０，７５Ｍマンニ
トール添加）１０ｎｊ！宛を加え、２０℃で振盪下（７
０ストロ一ク／分）に６０分間反応させて、プロトプラ
スト化を行なった。
し型試験管に収容し、その各々に予めシュードモナス（
Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）ｓｐ、 ＮａＰＴ−５（微工
研条寄ＮａＢＰ−３３０）をスサビノリ粉末を基質とす
る培地中で培養して得られた酵素液（０，７５Ｍマンニ
トール添加）１０ｎｊ！宛を加え、２０℃で振盪下（７
０ストロ一ク／分）に６０分間反応させて、プロトプラ
スト化を行なった。
このようにして得られた各酵素処理混合物を４０μメツ
シユのナイロン製網で濾過し、濾液を遠心分離（１５０
０ｒｐｍ、５分間）して上澄液を除去し、残渣を適量の
下記組成の人工海水（Ｐｒｏｖａｓｏｌｉの栄養添加海
水）を加え、それぞれのプロトプラスト懸濁液を調製し
た。
シユのナイロン製網で濾過し、濾液を遠心分離（１５０
０ｒｐｍ、５分間）して上澄液を除去し、残渣を適量の
下記組成の人工海水（Ｐｒｏｖａｓｏｌｉの栄養添加海
水）を加え、それぞれのプロトプラスト懸濁液を調製し
た。
人工海水の組成：
濾過海水１００１）１）に対し、下記栄養剤２ＩＩｌｌ
を添加して調製したもの。
を添加して調製したもの。
蒸留水 １００ ｍ１ＮａＮＯ３３
５０ｍｇ Ｎａ２−グリセロリン酸 ５０ ｎａｇＦｅ（ａ
ｓ ＥＤＴＡ；ｌ：１モル） ２．ｓｍｇＨｐ
Ｈ金属混液 ２５ｍＡ ビタミンＢＩ２ １０ μｇチアミン
０．５ｍｇビオチン
５μｇ ” ＴＲｌ５”（Ｓｉｇｍａ Ｃｏ、） ５００
ｍｇｐＨ７，８ ＊１ｐ［金属混液組成 蒸留水 １００ ｍβＮａ２−ＥＤ
ＴＡ １００ ｍｇＦｅ（ａ
ｓ Ｃ１”−） １ ｍｇＢ
（８３ＢＯヨ ）２０ ｍｇ Ｍｎ（ａｓ Ｃ１−） ４
ｍｇＺｎ（ａｓ Ｃ１−） ５０
０ ｐｇＣｏ（ａｓ Ｃ１−）
１００ ｐｇ籟１）αμｍ針１戊 上述のようにして調製したアサクサノリとマルバアマノ
リの各プロトプラストを混合し、このプロトプラスト混
合液のＯ，Ｌｍｌ （約１０６個）をパスツールピペッ
トでベトリ皿内に滴下し、５〜ＩＯ分間放置してプロト
プラストをガラス表面に沈澱させた。この沈澱に下記組
成のポリエチレングリコール溶液の０．２ｍ ｌを加え
て１０分間放置した後、さらに下記組成のＨｉｇｈ ｐ
Ｈ−Ｃａ熔溶液０．５ｍＪを加えて５分間放置した。
５０ｍｇ Ｎａ２−グリセロリン酸 ５０ ｎａｇＦｅ（ａ
ｓ ＥＤＴＡ；ｌ：１モル） ２．ｓｍｇＨｐ
Ｈ金属混液 ２５ｍＡ ビタミンＢＩ２ １０ μｇチアミン
０．５ｍｇビオチン
５μｇ ” ＴＲｌ５”（Ｓｉｇｍａ Ｃｏ、） ５００
ｍｇｐＨ７，８ ＊１ｐ［金属混液組成 蒸留水 １００ ｍβＮａ２−ＥＤ
ＴＡ １００ ｍｇＦｅ（ａ
ｓ Ｃ１”−） １ ｍｇＢ
（８３ＢＯヨ ）２０ ｍｇ Ｍｎ（ａｓ Ｃ１−） ４
ｍｇＺｎ（ａｓ Ｃ１−） ５０
０ ｐｇＣｏ（ａｓ Ｃ１−）
１００ ｐｇ籟１）αμｍ針１戊 上述のようにして調製したアサクサノリとマルバアマノ
リの各プロトプラストを混合し、このプロトプラスト混
合液のＯ，Ｌｍｌ （約１０６個）をパスツールピペッ
トでベトリ皿内に滴下し、５〜ＩＯ分間放置してプロト
プラストをガラス表面に沈澱させた。この沈澱に下記組
成のポリエチレングリコール溶液の０．２ｍ ｌを加え
て１０分間放置した後、さらに下記組成のＨｉｇｈ ｐ
Ｈ−Ｃａ熔溶液０．５ｍＪを加えて５分間放置した。
ポリエチレングリコール（ＭＷ ６，０００）の５４％
水溶液にＣａＣｌ２２Ｈ２０１０，５ｍＭ 、ＫｔＰ０
４・Ｈ２Ｏ０，７ｍＭおよびグルコースＯ，ＩＭを添加
する。
水溶液にＣａＣｌ２２Ｈ２０１０，５ｍＭ 、ＫｔＰ０
４・Ｈ２Ｏ０，７ｍＭおよびグルコースＯ，ＩＭを添加
する。
旧ｈＨ−Ｃａ庁・°の組
■ ＣａＣｌ２２＋１２０を１００ｍＭおよびグルコー
スを０．４Ｍの各濃度に蒸留水に溶解する。
スを０．４Ｍの各濃度に蒸留水に溶解する。
■ １００ｍＭ ＮａＯＨ−グリシンバッファー（ｐＨ
１０，５）にグルコースを０．４Ｍの濃度に溶解する。
１０，５）にグルコースを０．４Ｍの濃度に溶解する。
上記■と■の溶液を使用前にｌ：ｌの割合に混合する。
次に、上述のように放置したものに、下記に示す人工海
水（Ｐｒｏｖａｓｏｌｉの栄養添加海水）から成る培養
液０．３ｍｌを加え、５分後その０．３ｍｌをペトリ皿
から吸い上げ、さらにそれに上記培養液を５分後その０
．３ｍ４を吸い上げる操作を５回繰返して行なった後、
新たに上記培養液を加えて培養を行なった。培養は１５
℃の温度で６．０ＯＯＬｕｘ照度下で明朗９時間（晴朗
１５時間）で行なった。
水（Ｐｒｏｖａｓｏｌｉの栄養添加海水）から成る培養
液０．３ｍｌを加え、５分後その０．３ｍｌをペトリ皿
から吸い上げ、さらにそれに上記培養液を５分後その０
．３ｍ４を吸い上げる操作を５回繰返して行なった後、
新たに上記培養液を加えて培養を行なった。培養は１５
℃の温度で６．０ＯＯＬｕｘ照度下で明朗９時間（晴朗
１５時間）で行なった。
迩１考Ｉｄ（阪区抜
約１０１葉長稈度に育った時、細葉型のみ１葉体づつマ
イクロプレートに入れ、人工海水（Ｐｒｏｖａｓ。
イクロプレートに入れ、人工海水（Ｐｒｏｖａｓ。
１）の栄養添加海水）を各５１Ｉ１）入れ、単胞子放出
処理（上述の培養条件で温度のみを１５℃から２０℃に
変える）をし、単胞子の放出のあったものだけを選抜し
その単胞子を上述の培養条件にて培養、育成して成葉を
得た。
処理（上述の培養条件で温度のみを１５℃から２０℃に
変える）をし、単胞子の放出のあったものだけを選抜し
その単胞子を上述の培養条件にて培養、育成して成葉を
得た。
次に、上述のようにして得られた成葉についての温度耐
性を前記本文記載の実験方法に準拠して実験してその判
定を行なった。結果は表２に示すとおりである。
性を前記本文記載の実験方法に準拠して実験してその判
定を行なった。結果は表２に示すとおりである。
なお、比較として細胞融合の処理を行なわないアサクサ
ノリ及びマルバアマノリの成葉についても同様の実験を
行ない、その結果を併せて表２に示した。
ノリ及びマルバアマノリの成葉についても同様の実験を
行ない、その結果を併せて表２に示した。
表２にみられるように、本発明に従がって得られる細胞
融合体から成る海苔の成葉の温度耐性は養殖品種である
アサクサノリの成葉より明らかに強いことがわかる。
融合体から成る海苔の成葉の温度耐性は養殖品種である
アサクサノリの成葉より明らかに強いことがわかる。
Claims (3)
- （１）温度耐性の強い天然のアマノリ品種のプロトプラ
ストを調製し、一方養殖海苔のプロトプラストを調製し
、得られる両方のプロトプラストを細胞融合させて細胞
融合体を形成し、ついで該細胞融合体を育成することを
特徴とする温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成
方法。 - （２）天然のアマノリ品種がマルバアマノリである特許
請求の範囲第（１）項記載の方法。 - （３）養殖海苔がアサクサノリもしくはスサビノリであ
る特許請求の範囲第（１）項記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60053753A JPS61212281A (ja) | 1985-03-18 | 1985-03-18 | 温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60053753A JPS61212281A (ja) | 1985-03-18 | 1985-03-18 | 温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61212281A true JPS61212281A (ja) | 1986-09-20 |
| JPH031955B2 JPH031955B2 (ja) | 1991-01-11 |
Family
ID=12951567
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60053753A Granted JPS61212281A (ja) | 1985-03-18 | 1985-03-18 | 温度耐性の強い新しい品種の養殖海苔の作成方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61212281A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999029160A1 (en) * | 1997-12-12 | 1999-06-17 | Northeastern University | STRAIN MANIPULATION AND IMPROVEMENT IN THE EDIBLE SEAWEED $i(PORPHYRA) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS611386A (ja) * | 1984-06-14 | 1986-01-07 | Koasa Shoji Kk | 海苔の細胞融合による形質転換方法 |
| JPS619291A (ja) * | 1984-06-25 | 1986-01-16 | Koasa Shoji Kk | 海苔の細胞融合による細胞質融合体の選抜方法 |
-
1985
- 1985-03-18 JP JP60053753A patent/JPS61212281A/ja active Granted
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS611386A (ja) * | 1984-06-14 | 1986-01-07 | Koasa Shoji Kk | 海苔の細胞融合による形質転換方法 |
| JPS619291A (ja) * | 1984-06-25 | 1986-01-16 | Koasa Shoji Kk | 海苔の細胞融合による細胞質融合体の選抜方法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999029160A1 (en) * | 1997-12-12 | 1999-06-17 | Northeastern University | STRAIN MANIPULATION AND IMPROVEMENT IN THE EDIBLE SEAWEED $i(PORPHYRA) |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH031955B2 (ja) | 1991-01-11 |
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