JPS61120059A - 免疫反応測定方法 - Google Patents
免疫反応測定方法Info
- Publication number
- JPS61120059A JPS61120059A JP24053684A JP24053684A JPS61120059A JP S61120059 A JPS61120059 A JP S61120059A JP 24053684 A JP24053684 A JP 24053684A JP 24053684 A JP24053684 A JP 24053684A JP S61120059 A JPS61120059 A JP S61120059A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- antigen
- specimen
- turbidity
- reaction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（イ） 産業上の利用分野
本発明は、免疫反応による抗原抗体複合物の生成を、散
乱光強度又は透過光強度を測定することにより求める免
疫反応測定方法に関し、待に検体ブランクの適正な補正
ができる免疫反応測定方法に関する。また、本発明は、
検体ブランクの適正な補正力Ｃ′？：ｉさるネ７エロメ
トリー分析法に関する。
乱光強度又は透過光強度を測定することにより求める免
疫反応測定方法に関し、待に検体ブランクの適正な補正
ができる免疫反応測定方法に関する。また、本発明は、
検体ブランクの適正な補正力Ｃ′？：ｉさるネ７エロメ
トリー分析法に関する。
本発明の免疫反応測定方法は、蛋白質、薬物、血漿、ホ
ルモン等の測定に適し、薬学、生物化学、臨床分析等の
分野において広く使用されるものである。
ルモン等の測定に適し、薬学、生物化学、臨床分析等の
分野において広く使用されるものである。
（ロ） 従来技術
溶液内における抗原抗体反応により生成する抗原抗体複
合物は、その大きさが１ミクロン以下と極微細なもので
あるために、例えば、ネ７エロメトリー分析法では、こ
の生成した抗原抗体複合物の量を、それからの数置光強
度を測光して求めている。
合物は、その大きさが１ミクロン以下と極微細なもので
あるために、例えば、ネ７エロメトリー分析法では、こ
の生成した抗原抗体複合物の量を、それからの数置光強
度を測光して求めている。
ところで、尿、血清、体Ｕ等の検体についての抗原又は
抗体成分の定量を、抗原抗体反応による抗原抗体複合物
の生成ｌから求める場合、これからの敞８Ｌ光強度又は
透過光強度を測光する方法では、例えば、脂質の多い血
清などにみられるように、検体自体が濁っていると、こ
の濁り分が、検体と反応試薬との抗原抗体反応によって
生ｒ！Ｌする抗原抗体複合物と共に測光されてしまい誤
差となり、正確な値が得られないばかりでなく、ぼらつ
さが多くて侶頼できる分析値が得られない。
抗体成分の定量を、抗原抗体反応による抗原抗体複合物
の生成ｌから求める場合、これからの敞８Ｌ光強度又は
透過光強度を測光する方法では、例えば、脂質の多い血
清などにみられるように、検体自体が濁っていると、こ
の濁り分が、検体と反応試薬との抗原抗体反応によって
生ｒ！Ｌする抗原抗体複合物と共に測光されてしまい誤
差となり、正確な値が得られないばかりでなく、ぼらつ
さが多くて侶頼できる分析値が得られない。
そこで、従来では、検体自体の濁り分をＭ正するために
、試薬の代りに水を用い、水と検体を混合したときの飲
６し光強度又は透過光強度を測光して、その値を検体ブ
ランク値とし、検体と反応試薬を混合した場合の濁り測
定値から検体ブランク値を差し引いて、生成した抗原抗
体複合物を定量する方法がとられている。しかしながら
、このような濁り分を有する散乱光強度又は透過光強度
は、濁り分が多くなると多量散乱現象を伴うために、例
えば第１図に示されるように、巨的成分の濃度と濁りの
測定値の関係は、直線的に推移しない。
、試薬の代りに水を用い、水と検体を混合したときの飲
６し光強度又は透過光強度を測光して、その値を検体ブ
ランク値とし、検体と反応試薬を混合した場合の濁り測
定値から検体ブランク値を差し引いて、生成した抗原抗
体複合物を定量する方法がとられている。しかしながら
、このような濁り分を有する散乱光強度又は透過光強度
は、濁り分が多くなると多量散乱現象を伴うために、例
えば第１図に示されるように、巨的成分の濃度と濁りの
測定値の関係は、直線的に推移しない。
したがって、検体自体の濁りが測定値として加算される
量は、生成する抗原抗体複合物等の濁り分濃度が＾い程
小さくなるので、例えば、水と検体を混合したときの濁
りの測定値を検体ブランク値とすると、この検体ブラン
ク値は、濁り分濃度が極めて低いときの測定値であり、
濁り分濃度が高いと８、すなわち現実の検体自体の濁り
の測定値上り逝かに高い値である。したがって、この検
体ブランク値を測定値からその倭差し引いてしまうと、
測定値は却って低い値となって、生成する抗原抗体複合
物の食を正確に示すものでなくなる。
量は、生成する抗原抗体複合物等の濁り分濃度が＾い程
小さくなるので、例えば、水と検体を混合したときの濁
りの測定値を検体ブランク値とすると、この検体ブラン
ク値は、濁り分濃度が極めて低いときの測定値であり、
濁り分濃度が高いと８、すなわち現実の検体自体の濁り
の測定値上り逝かに高い値である。したがって、この検
体ブランク値を測定値からその倭差し引いてしまうと、
測定値は却って低い値となって、生成する抗原抗体複合
物の食を正確に示すものでなくなる。
このように、検体自体の濁りは、免疫反応により生成す
る抗原抗体複合物を飲６Ｌ光又は透過光を測光して定量
するときに、分析値の信頼性の上で問題であった。
る抗原抗体複合物を飲６Ｌ光又は透過光を測光して定量
するときに、分析値の信頼性の上で問題であった。
（ハ） 巳 的
本発明は、従来の免疫反応による抗原抗体複合物を飲６
Ｌ光又は透過光を測光して定量するν）わゆろ免疫反応
測定法における検体自体の濁りによる分析値の信頼性に
係る問題点を解消するものであり、検体自体の濁りを正
確に補正できる免疫反応測定方法を提供するものである
。
Ｌ光又は透過光を測光して定量するν）わゆろ免疫反応
測定法における検体自体の濁りによる分析値の信頼性に
係る問題点を解消するものであり、検体自体の濁りを正
確に補正できる免疫反応測定方法を提供するものである
。
（ニ） 構 成
本発明は、検体自体の濁りが測定値に加算される量は、
生成する抗原抗体複合ｅＩｌｌ等の濁り分濃度により相
違する点に注Ｉしてなされたものである。
生成する抗原抗体複合ｅＩｌｌ等の濁り分濃度により相
違する点に注Ｉしてなされたものである。
すなわち、本発明は、検体試料に反応試薬を混合し、混
合後の濁り分を測光により求める免疫反応測定方法にお
いで、測光後の混合液に、該検体試料と同一の検体を混
合し、この混合後の濁り分を測光により求めることを特
徴とする免疫反応測定方法にある。
合後の濁り分を測光により求める免疫反応測定方法にお
いで、測光後の混合液に、該検体試料と同一の検体を混
合し、この混合後の濁り分を測光により求めることを特
徴とする免疫反応測定方法にある。
本発明の免疫反応測定方法において、濁り分の測定は、
散乱光強度又は透過光強度のいずれを測光しでも行うこ
とができる。
散乱光強度又は透過光強度のいずれを測光しでも行うこ
とができる。
また、本発明におい、では、特に、測光後の混合液に検
体試料と同一の検体を混合し、この混合後の濁り分を求
めているが、これは、検体試料と同一の検体を混合する
前と混合した後の濁り分についての測光値の差が、検体
試料自体の濁りによるものとみられるからである。しか
も、この検体試料自体の濁りについての測光値は、エン
ドポイント法等の濁り分濃度の８１１Ｉ光時と殆んど同
一の条件下に測光されたものであるから、多重数６Ｌに
よる影響は相殺されて現われない。したがって、その測
光値は、測光時の検体ブランクとして扱うことができる
。この測光時における検体ブランクの測夙′ 光操作は、検体妻料と同一の検体を混合後運やかに行う
のが、生成する抗原抗体複合物の影響が現われないので
好ましν１．混合される検体の量は、検体試料の量と同
一とし、試薬量に対し十号少量のが、計算もし易いうえ
に、誤差も少くなるので好ましい。
体試料と同一の検体を混合し、この混合後の濁り分を求
めているが、これは、検体試料と同一の検体を混合する
前と混合した後の濁り分についての測光値の差が、検体
試料自体の濁りによるものとみられるからである。しか
も、この検体試料自体の濁りについての測光値は、エン
ドポイント法等の濁り分濃度の８１１Ｉ光時と殆んど同
一の条件下に測光されたものであるから、多重数６Ｌに
よる影響は相殺されて現われない。したがって、その測
光値は、測光時の検体ブランクとして扱うことができる
。この測光時における検体ブランクの測夙′ 光操作は、検体妻料と同一の検体を混合後運やかに行う
のが、生成する抗原抗体複合物の影響が現われないので
好ましν１．混合される検体の量は、検体試料の量と同
一とし、試薬量に対し十号少量のが、計算もし易いうえ
に、誤差も少くなるので好ましい。
以下、添付図面を参照して、本発明の芙施の態様につい
て説明するが、本発明の技術的範囲は、この説明により
何ら限定されるものではない。
て説明するが、本発明の技術的範囲は、この説明により
何ら限定されるものではない。
（ホ） 実施例
第２図は、抗原抗体反応系の反応開始後、すなわち検体
試料と試薬の混合後の時間経過に伴う飲６Ｌ光強度の変
化を示すグラフであり、横軸に経過時間をとり、縦紬に
測光値が目侵っである。
試料と試薬の混合後の時間経過に伴う飲６Ｌ光強度の変
化を示すグラフであり、横軸に経過時間をとり、縦紬に
測光値が目侵っである。
時刻ｔ０において、検体試料に反応試薬を混合すると、
抗原抗体反応により、抗原抗体複合物の生成が始まる。
抗原抗体反応により、抗原抗体複合物の生成が始まる。
この抗原抗体複合物の生成がほぼ完了した時刻１．で、
検体試料と反応試薬との抗原抗体反応のエンドポイント
を、該反応液の故６Ｌ光強度を測定して求める６その散
乱光強度の測定値をａとする。前記エンドポイントを測
定した後、直ちに、すなわち時刻ｔ２で、前記エンドポ
イントを測定した反応液に、検体試料と同一の検体を、
検体試料と同量だけ添加混合する。この検体の添加混合
後直ちに、すなわち時刻ｔ３で、該反応液の故８Ｌｆｆ
ｉｉ度を測定する。その散乱光強度の測定値をｂとｒる
。
検体試料と反応試薬との抗原抗体反応のエンドポイント
を、該反応液の故６Ｌ光強度を測定して求める６その散
乱光強度の測定値をａとする。前記エンドポイントを測
定した後、直ちに、すなわち時刻ｔ２で、前記エンドポ
イントを測定した反応液に、検体試料と同一の検体を、
検体試料と同量だけ添加混合する。この検体の添加混合
後直ちに、すなわち時刻ｔ３で、該反応液の故８Ｌｆｆ
ｉｉ度を測定する。その散乱光強度の測定値をｂとｒる
。
エンドポイント測定後の反応液に検体試料と同一の検体
を添加混合すると、再び抗原抗体反応が始まり、抗原抗
体複合物が生ｆＬするが、検体添加時刻ｔ２と散６Ｌ光
強度測定時刻ｔ３との間隔が短かいときは、抗原抗体複
合物の生成によろ濁りは無視することができる。
を添加混合すると、再び抗原抗体反応が始まり、抗原抗
体複合物が生ｆＬするが、検体添加時刻ｔ２と散６Ｌ光
強度測定時刻ｔ３との間隔が短かいときは、抗原抗体複
合物の生成によろ濁りは無視することができる。
また、検体量を反応試薬の量に比較して十分に少くして
おけば、エンドポイント測定後の検体添加による１ｌｆ
ｆｉ変化によろ希釈の影響は無視することができる。
おけば、エンドポイント測定後の検体添加による１ｌｆ
ｆｉ変化によろ希釈の影響は無視することができる。
そこで、検体自体の濁りは、検体添加による散乱光強度
の増加分（ｂ−ａ）により求めることができる。したが
って、検体ブランク（））−ａ）をエンドポイントの測
定値から差し引くことによって、すなわち、式１ａ
（ｂ ａ）ｔ”２ａ−ｂにより、検体ブランクを補正
したエンドポイントが得られる。
の増加分（ｂ−ａ）により求めることができる。したが
って、検体ブランク（））−ａ）をエンドポイントの測
定値から差し引くことによって、すなわち、式１ａ
（ｂ ａ）ｔ”２ａ−ｂにより、検体ブランクを補正
したエンドポイントが得られる。
（へ）効 果
本発明の免疫反応測定法は、測定後の試料液に検体試料
と同一の検体を混合し、この混合後の濁り分を測光によ
り求めることにより、検体自体の濁り分を、測光時の条
件下で求めることができるので、多重散乱により、濁り
分と測光値の関係が直線的でない場合でも、精度の高い
検体ブランクの補正が可能であり、しかも、本発明の免
疫反応測定法では、改めて検体ブランクを調製すること
もなく、喝、測定法のｔ艮において行えるので、測定上
の操作が簡単となる。
と同一の検体を混合し、この混合後の濁り分を測光によ
り求めることにより、検体自体の濁り分を、測光時の条
件下で求めることができるので、多重散乱により、濁り
分と測光値の関係が直線的でない場合でも、精度の高い
検体ブランクの補正が可能であり、しかも、本発明の免
疫反応測定法では、改めて検体ブランクを調製すること
もなく、喝、測定法のｔ艮において行えるので、測定上
の操作が簡単となる。
このような簡単な操作により、検体自体の濁りについて
、高い精度の補正ができることは、従来、脂質等により
信頼性の乏しい検体分析法を信頼性のある分析法として
有効ならしめろものであり、その与える影響は大さいも
のがある。
、高い精度の補正ができることは、従来、脂質等により
信頼性の乏しい検体分析法を信頼性のある分析法として
有効ならしめろものであり、その与える影響は大さいも
のがある。
第１図は、横軸にａ的成分濃度をと９、縦軸に測光値を
ぼ肇った、成分濃度と測光値の関係を示すグラフ、例え
ば検ｊ１Ｍ図であり、図中、１は検体自体に濁りがあろ
場合のグラフを示し、２は検体自体に濁りのない場合の
グラフを示す。 第２図は、検体試料に反応試薬を混合後の０間経乃に伴
う散乱光強度の変化を示すグラフであり、槙袖に経過時
間をとり、ｌ１１１１１＋に測光値が示されている。 ｔｏは、試薬と検体の混合、ｔｌは最初の測定時間、ｔ
２は検体の再添加時間、Ｌ３は２回目の測定時間、ｄは
最初の測定値、しは２回目の測定値である。 代 理 人
ぼ肇った、成分濃度と測光値の関係を示すグラフ、例え
ば検ｊ１Ｍ図であり、図中、１は検体自体に濁りがあろ
場合のグラフを示し、２は検体自体に濁りのない場合の
グラフを示す。 第２図は、検体試料に反応試薬を混合後の０間経乃に伴
う散乱光強度の変化を示すグラフであり、槙袖に経過時
間をとり、ｌ１１１１１＋に測光値が示されている。 ｔｏは、試薬と検体の混合、ｔｌは最初の測定時間、ｔ
２は検体の再添加時間、Ｌ３は２回目の測定時間、ｄは
最初の測定値、しは２回目の測定値である。 代 理 人
Claims (1)
- 検体試料に反応試薬を混合し、混合後の濁り分を測光に
より求める免疫反応測定方法において、測光後の混合液
に、該検体試料と同一の検体を混合し、この混合後の濁
り分を測光により求めることを特徴とする免疫反応測定
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24053684A JPS61120059A (ja) | 1984-11-16 | 1984-11-16 | 免疫反応測定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24053684A JPS61120059A (ja) | 1984-11-16 | 1984-11-16 | 免疫反応測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61120059A true JPS61120059A (ja) | 1986-06-07 |
Family
ID=17060990
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24053684A Pending JPS61120059A (ja) | 1984-11-16 | 1984-11-16 | 免疫反応測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61120059A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016020845A (ja) * | 2014-07-14 | 2016-02-04 | 株式会社東芝 | 自動分析装置 |
-
1984
- 1984-11-16 JP JP24053684A patent/JPS61120059A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016020845A (ja) * | 2014-07-14 | 2016-02-04 | 株式会社東芝 | 自動分析装置 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101201354B (zh) | 甲状腺素化学发光免疫分析定量测定试剂盒及制备方法 | |
| SE7812469L (sv) | Apparat och sett for kvantitativ bestemning av immunologiska reaktioner | |
| KR20160014007A (ko) | 면역 응집 측정법 | |
| JP2004294447A (ja) | リガンドの検出のための固相アッセイ | |
| Price et al. | Light scattering immunoassay | |
| CN109142753A (zh) | 鳞状上皮细胞癌抗原化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 | |
| JPS605899B2 (ja) | 免疫化学的定量法 | |
| CN106442355A (zh) | 心型脂肪酸结合蛋白的测定试剂及其制备方法 | |
| Jones et al. | Complexometric titration of calcium and magnesium by a semiautomated procedure | |
| US20110136261A1 (en) | Method of assaying complex and kit to be used therefor | |
| US3649198A (en) | Diagnostic method for the determination of uric acid in blood | |
| JPS61120059A (ja) | 免疫反応測定方法 | |
| CN115876995A (zh) | 一种免疫荧光层析动力学检测方法及系统 | |
| Gaikwad et al. | Use of stopped-flow fluorescence polarization immunoassay in drug determinations | |
| JPH01301165A (ja) | 免疫測定法 | |
| Stamp et al. | Performance of fluorescence polarisation immunoassay reagents for carbamazepine, phenytoin, phenobarbitone, primidone, and valproic acid on a Cobas Fara II analyser | |
| JPS61280568A (ja) | 体液成分の測定方法 | |
| PrIce et al. | Kinetic immunoturbidimetry of human choriomammotropin in serum. | |
| JP2595267B2 (ja) | 測光的評価を用いる物質の測定法 | |
| FI76216B (fi) | Bestaemningsfoerfarande foer antigen. | |
| JPH0658935A (ja) | 免疫学的測定方法及びその試薬 | |
| Lasky et al. | Enzyme immunoassays with the miniature centrifugal fast analyzer. | |
| JPH0682450A (ja) | 免疫学的測定試薬 | |
| JP2534067B2 (ja) | Ｃ反応性タンパクの定量法 | |
| JP2002048796A (ja) | 免疫学的反応性物質の存在を検出又は測定する方法 |