JPS60994B2 - プレグナン系化合物の１７α―エステル類の製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は微生物によるプレグナン系化合物の１１８−ヒ
ドロキシ−１７Ｑ−低級脂肪酸ェステル類の製造法に関
する。

従来、プレグナン系化合物の１１８−ヒドロキシ−１７
Ｑ−脂肪酸ェステル類を得るには化学的合成法が行なわ
れていた。

この１７−脂肪酸ェステル類を得るには１つには、１１
６・１７Ｑ・２１−トリヒドロキシステロィドの１１８
位水酸基と２１位水酸基を異なった官能基で保護する必
要があるため、１１８・１７Ｑ・２１−トリヒドロキシ
ステロイドから目的物１７Ｑ−脂肪酸ェステル類を合成
するのに数工程要するし、さらにこの合成法では適当な
反応条件の選択が難しく、予期しない副反応が起り、目
的物の収率が低下するおそれがある。次に、ステロイド
１７は・２１一環状オルトェステルから目的物１７Ｑ−
脂肪酸ェステルの製造法であるが原料にはかならず、１
７Ｑ・２１ージヒドロキシステロィドを選ばなくてはな
らず、本発明方法で述べるような２１位がメチル体やハ
ロゲン体に応用することはできない。

また、前記環状オルトェステルの酸開裂に際して目的物
である１７Ｑ−脂肪酸ェステル以外にステロイド２１ー
モノェステルの生成がわずかながら見られ、最終的には
両者の分離が必要となる欠点がある。本発明者らは、プ
レグナン系化合物の１１８−ヒドロキシ−１７Ｑ−低級
脂肪酸ェステルを簡単にかつ高収量で得ることを種々検
討した結果、微生物を利用することにより本発明の目的
を達成することができた。

すなわち、本発明は、プレグナン系化合物の１１８・１
７Ｑ・２１−トリ低級脂肪酸ェステルまたは１１８・１
７ばージ低級脂肪酸ェステルに、前記ェステル化合物の
１１８位および／または２１位の低級脂肪酸ェステルを
ヒドロキシ化するノカルジア属放線菌に属する菌株を作
用させることを特徴とするプレグナン系化合物の１１８
ーヒドロキシー１７Ｑ−低級脂肪酸ェステルに関する。

本発明において、「低級脂肪酸」とは「炭素数が２〜５
の脂肪酸」を意味する。本発明に使われる微生物はプレ
グナン系化合物の１１８・２１位の各低級脂肪酸ェステ
ルに対して関与し、それら以外の部分に対しては関与し
ない。

そのため、本発明の原料として使われるブレグナン系化
合物の１１８・１７Ｑ・２１−トリ低級脂肪酸ェステル
または１１８・１７Ｑージ低級脂肪酸ェステルは、上記
の理由から容易に理解される通り、反応に関与しない部
分については特に限定を要するものでないが、代表的な
ものとして次の一般式で表わされる化合物があげられる
。一般式 式中Ｒ，は炭素数が２〜５の低級アルカノィル基を示し
、Ｒ２は炭素数が２〜５の低級アルカノィル基またはペ
ンゾィルを示し「Ｒ３は水素源子、ハロゲン原子、水酸
基またはェステル化された水酸基を示す。

Ｗ，およびＷ２は各々水素原子、ハロゲン原子、もしく
はメチル基を示しまたはＷ，とＷ２は各々が結合してい
る炭素原子と共にシクロプロパン環もしくは二重結合を
形成する。Ｙ，は水素原子、ハロゲン原子を示し、Ｙ２
は水素涼子、ハロゲン原子またはメチル基を示し、Ｙ３
は水素原子、メチル、メチレン、水酸基またはアセチル
オキシ基を示し、１８位もしくは１創立のメチル基はあ
ってもなくてもよい。また、一般式（１）のステロイド
構造は環ノル体もしくは環ホモ体であってもまたは各ケ
トン基のェノール体であっても差しつかえない。また、
一般式（１）に入らない置換基が存在していてもよい。
次に、本発明の一般式（１）の各基を具体的に説明する
。

炭素数が２〜５の低級アルカノィル基はたとえばアセチ
ル、プロピオニル、ブチリル、イソブチリル、バレリル
、イソバレ１′ルなどの道鎖または分枝状のものである
。

ハロゲン原子は塩素、臭素、フッ素またはヨウ素である
。ェステル化された水酸基のェステルの酸基としてはた
とえば酢酸、プロピオン酸、酪酸、ィソ酪酸、ｎ−吉草
酸、ィソ吉草酸など直鎖または分枝状の低級脂肪酸であ
る。本発明の原料として使われるプレグナン系化合物の
１１８・１７Ｑ・２１−トリ低級脂肪酸ェステルまたは
１１８・１７Ｑージ低級脂肪酸ェステルは、既知の方法
でたとえば、プレグナン系化合物に無水力ルボン酸とｐ
−トルェンスルホン酸の如き強酸を使ってまたはカルボ
ン酸と無水トリフルオル酢酸とを使って製造できる。

また前記強酸触媒の代りに炭酸カルシウムのような塩基
性個体触媒を用いても同様に本発明の原料を製造するこ
とができる。本発明に用いられるノカルジア属放線菌に
属する菌株は、プレグナン系化合物の１１８・１７Ｑ・
２１−トリ低級脂肪酸ェステルまたは１１８・１７Ｑー
ジ低級脂肪酸ェステルの１１８位および／または２１位
の低級脂肪酸ェステルをヒドロキシ化させることができ
る菌株であり、好ましいものとしてはたとえばノカルジ
ア属放線菌ＴＭ５１勿朱がある。

この繭株は土壌から分離、保存していたもので、バージ
ーズ・マニュアル。オブ・デイターミナテイフ・バクテ
リオロジ−（氏ｒ群ｙ′ｓＭａｎ雌ｌｏｆＤｅにｒｍｉ
雌ｔｊｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏ期）第８版（＠１９７
４年）に述べられているノカルジア属放線菌の中、形態
学的第３類に分類される菌株とみられる。なお、このＴ
Ｍ５１２株は、微生物の名称「ノカルジア属放線菌株Ｔ
Ｍ５１２」おつび微生物寄託番号「徴工研菌寄第３５８
０号（ＦＥＲＭ−ＰＮｏ．３５８０）」として工業技術
院微生物工業技術研究所に寄託されている。前記菌株Ｔ
Ｍ５１２は液体振濠培養では、その液は欄濁して細菌培
養液体様の外観を呈するが、寒天固形培地上では、長い
豊富な白色の気菌糸を生じやすく、ノカルジア属の中で
も比較的ストレブトミセスに近縁のものと考えられる。

文献上からすると菌株ＴＭ５１２の性状と類似する菌種
には、ノカルジア フオルミケ（ＮＭａｒｄｂｆｏｒｍ
ｉｃａｅ）１９５３｛ストレプトミセス グリセウス
サブスピシ−ズ フオルミクス（Ｓ．ｇｒｉｓｅｕｓｓ
肋ｓｐｅｃちｓｆｏｒｍｌｃ船）１９６９｝、ノカルジ
ア ギブソニ（Ｎ．ｇｂｓｏｎｉｉ）１９５３｛ストレ
プトミセス ギブソニ（Ｓ‐尊ｂｓ。ｎｉｉ）１９４８
｝、ノカルジア クロイシイ（Ｎ．ｋｍｏｉｓｈｉｉ）
１９５２などが知られている。またアクテイノマデユラ
ダソンヴイレイ ストレインＷ１８６ ルシユバリヱ
・エ・ルシユバリエ（Ａｃｔｉ肌ｍａｄｕｒａ ｄｅＳ
ＳｏｎＶｍｅｉ Ｓｔｒａｉｎ Ｗ１８６Ｌｅｃｈｅｖ
ａｌｉｅｒｅｔＬｅｃｈｅｖａｌｊｅｒ）１９６８ある
いはシユードノカルジア テルモフイラ ヘツセン（Ｐ
ｓｅｕｄｏｎｏｃａｒｄｉａｔｈｅｎｍｏｐｈｊｌａＨ
ｅｓｓｅｎ）１９５７などのノカルジア属とストレプト
ミセス属の中間に位置すると見なされている放線菌群に
も本菌株は類似している。

本発明に使用される／カルジア属放線菌株ＴＭ５１２の
菌学的性質は次の通りである。

１形態 胞子形成菌糸：単純分岐で直線状あるいは緩い不規則な
屈曲をもち、気菌糸は次第に分節して結局胞子鎖となる
。

胞子：電子顕微鏡による表面構造は平滑で有鞘、大きさ
平均０．３６×１．６山、形状はやや中大先細りでほぼ
円筒形、通常数十ないし百余個が連鎖している。

鞭毛胞子、胞子のう：何れも形成されない。

〔注〕本菌は寒天固形培地上では多くの場合分岐も屈曲
も少ない白色の気中菌糸を豊富に形成し、それらは間も
なく分岐点の前後を問わず分節化して全体が長大な胞子
鎖に変ずる。

液体培地を用し、振糧培養する場合は、外観上細菌培養
液の様に滴濁し、これを検鏡すると菌糸は一旦生長した
後次第に分断して数日以内に１０仏前後の分岐のある断
片に変じているのが観察される。

０ 各種培地上での生育状態 一般的な色調として、菌叢（気中菌糸）色は培地の種類
に関係なく白色であり、時に（培養４週頃から）部分的
に淡青色〜空色に着色することがある。

検鏡によればこの部分には緩い菌糸塊を形成しているこ
とが多い。生育（基生菌糸）色は微黄色である。拡散性
（溶性）色素を形成する場合は一般に黄色または青紫色
となる。３０℃で６週間まで観察 ｍ 生理的性質 ｔｌ｝ 生育温度：１７〜３７○の間で正常生育■ ゼ
ラチンの液化：陽性（グルコース・ベプトンゼラチン培
地上）｛３｝ スターチの加水分解：弱い陽性 （スターチ寒天塔地上） 【４）脱脂乳の凝固：疑陽性 【５ー 脱脂乳のべプトン化：陽性 ■ メラニン様色素の生成：疑陽性 （チロシン寒天培地およびべプトン・イースト鉄寒天塔
地上） ｛７ｉ 硫化水素の生成：陰性 Ｗ 各種炭素源での生育 （プラィダム・ゴトリープ寒天培地上） ｛１｝ Ｌーアラビノース 良 （十〜日）（２ｌ
Ｄ−キシロース やや良（十）ｔ３｝ Ｄ−グルコー
ス 極良 （一）■ フラクトース やや良（十
） ■ シュクロース やや良（十） ■ イノシトール 極良 （什） 【７１Ｌーラムノース 劣る （土） ‘８） ラフィノース やや良（十）‘９） ○凧
マンニツト 良 （十〜日）〔注〕（ ）内は生
育のＩＳＰ式※表示で記号の内容は次の通りである。

什 グルコースと同等あるいはそれ以上 ＋ グルコースより劣るが糖無添加より明らかに良い。

土 糖無添加よりわずかに良いが、グルコースより著し
く劣る。− Ｄーグルコースを指標として他を比較する
。

※ ｌｎｔｅｒｎａｔｉｏＭＩ Ｓｔｒｅｐｔｍｙｃｅ
ｓＰｒｏｊｅｃｔ本発明の原料であるプレグナン系化合
物の１１８・１７Ｑ・２１−トリ低級脂肪酸ェステル類
または１１８・１７はージ低級脂肪酸ェステル類をアセ
トン、酢酸エチルまたはアルコール類などの有機溶媒に
溶解し、この溶液を本発明方法に使用する菌の植付けと
同時に培地に入れるかあるいは菌の楯付後、菌が増殖し
た２日後に培地へ入れてもよい。

培養液に対する本発明の上言己原料の濃度は１０〜２０
０仏夕／似である。使用する培地はたとえば炭素源とし
てブドウ糖、果糖、乳糖、グリセリン、澱粉「大豆油な
どであり、窒素源としては肉エキス、ベプトン、きな粉
、コーンスチープリカー、綿実粕などを用いることがで
き、徴量成分としては各種ビタミン、金属塩類を添加す
ることができる。

これらの一連の操作は無菌的に行う。このようにして得
られた培養液は３０００に２日〜６日間振糧あるいは蝿
杵処理を行う。反応の終点は反応液の一部をとり、酢酸
エチル抽出した液の薄層クロマトグラフィーにより知る
ことができる。反応終了後、反応液は炉紙あるいは炉布
で炉過し、炉液に酢酸エチルを加えて振糧抽出する。こ
れを遠心分離などを利用して分離した酢酸エチル層を減
圧下に濃縮して粗生成物を得る。この粗生成物は再結晶
により目的物プレグナン系化合物の１１８−ヒドロキシ
−１７Ｑ−低級脂肪酸ェステルを得ることができるが、
さらに、分取薄層クロマトグラフィーかカラムクロマト
グラフィーに付せばより純度の高い目的物を収率良く集
めることができる。プレグナン系化合物の１１８・１７
・２１−トリ低級脂肪酸ェステルにノカルジア属放線菌
を作用させるとＬ１７Ｑ位の低級脂肪酸ェステルがおか
されることなく１１８・２１ージ低級脂肪酸ヱステルが
同時に除かれるので、目的物１７Ｑ−低級脂肪酸ェステ
ルをわずか一工程で高収率得ることができる。

原料に１１８・１７Ｑ山低級脂肪酸ェステル類を用いて
も前記同様の方法により１１３位の低級脂肪酸ェステル
が除かれて前記同様の効果がある。また、目的化合物を
製造するのに従来の化学的加水分解法では適当な反応条
件の選択が難しく、予期しない副反応が起り、目的物の
収率が低くなるおそれがあった。

本発明の方法はそのような欠点がなく一定状態で目的物
を製造できるという特徴がある。また、本発明で得られ
るプレグナン系化合物の１１８−ヒドロキシ−１７Ｑ−
低級脂肪酸ェステルは「臨床上著効を有する副腎皮質ホ
ルモン剤であり、リウマチの治療に有効である。

さらに抗炎症剤として経口、非経口および局所的に使用
される。特に局所的には各種の皮膚疾患すなわち皮膚炎
症、日焼け症、神経皮膚炎症、湿疹、虹門性器掻蛙症な
どに著効を示し、また、抗アレルギー炎症剤として端息
にも極めて有効である。このため、適当な稀釈剤に溶解
または分散して、水溶性クリーム、軟膏「 ローション
またはエアゾール組成物にするなどその応用「利用範囲
が広い。さらに、本発明目的化合物のうち２１位メチル
体は有用な黄体ホルモン剤であり、経口、非経口的に医
療に供することができる。本発明を一層良く理解できる
ように、次に参考例および実施例を記載する。

参考例 Ｉ Ｗａｋｓｍａ中著地の調製：イオン交換樹脂で精製
した水２そにグルコース２０夕、肉エキス１０夕、ベプ
トン１０夕、塩化ナトリウム１０夕を溶解し、ＩＮ−Ｎ
ａＯＨでｐＨ７．４に調製し、オートクレープ殺菌し、
培養液とした。

２ きな粉培地の調製：イオン交換樹脂で精製した水２
クモこ可溶性澱粉２０夕、グルコース２０夕、きな粉２
０夕、イースト・エキス１０夕、塩化ナトリウム５夕、
炭酸カルシウム４夕、金属無機塩（ＣｕＳ０４、ＭｎＣ
１２、ＺｎＳ０４、Ｍが０４）徴量を溶解し、ＩＮ−Ｎ
ａＯＨでｐＨ７．２に調製し、オートクレープ殺菌を行
って培養液とした。

実施例 １ ハイドロコーチゾン １７−アセテートの製法ゆ ハイ
ドロコーチゾン（０．６９）を氷酢酸（６泌）、無水酢
酸（６の【）、ｐートルェンスルホン酸（０．１２夕）
と共に２独特間室温にて放置する。

この混合物を水（２５の【）で稀釈し、１時間擬枠後ク
ロロホルム抽出し、抽出液を水希重炭酸水素ナトリウム
水溶液、再び水で洗浄し、芋硝乾燥後減圧下に濃縮した
。得られた残笹を分取薄層クロマトグラフィー〔（吸着
剤：シリカゲル、展開剤；ｎーヘキサン−クロロホルム
ーアセトン（４：３：３）〕に付すとハイドロコーチゾ
ン１１８・１７Ｑ・２１ートリアセテート０１５２夕が
無晶形として得られた。上記トリアセテートは上述の展
開剤でＲナ０．６を示し、赤外線吸収スペクトル（以下
ＩＲという）水酸基の吸収がないことを確かめた。また
核磁気共鳴スペクトル（以下Ｎ．Ｍ．Ｒという）で３個
のアセチル基に起因するシグナルが見られた。分子量測
定値：４斑（マススベクトル分析より）。

元素分析値：Ｃ幻日３６０８（分子量４８８．５６とし
て）計算値 ○ ６６．３７％ 日 ７．４３
％実測値 Ｃ ６６．５１％ 日７．３９
％次にこの化合物（０．５夕）をアセトン２５の上に溶
解した。

参考例で述べたＷａｋｓｍａｄ培養液２夕を５００舷フ
ラスコ２の剛こ１００の【ずつ分配し「 それぞれノカ
ルジア属放線菌株ＴＭ５１２を植付けしたものに上述の
ステロイド液をそれぞれ１．２５凧【づっ加え、３００
０で４日間振盤処理した。反応終了後、各フラスコの反
応液を炉遇し酢酸エチル抽出、遠０分離機にて酢酸エチ
ル層を分離させた。これを水洗し減圧下に濃縮して得ら
れた粗結晶を分取薄層クロマトグラフィーに付し、Ｒナ
値０．２５を示す生成物を集めた。これをアセトンより
再結晶した。ｍ．ｐ．２３４〜２３７０ 収量０．４３
夕【ｂ）ハイドロコーチゾン０．６夕を無水酢酸０．４
５の【無水ベンゼン６０の‘、ｐートルェンスルホン酸
２０双９の混合物に加え、５．虫時間還流した。

次いで冷後ベンゼン７０の‘で希釈する。溶液を希重炭
酸水素ナトリウム水溶液、次いで水で洗浄。Ｅ硝乾燥後
減圧下に濃縮乾固した。残簿を‘ａ）と同様な分敬薄層
クロマトグラフィーに付し、０．５５夕のハイドロコー
チゾン１１３・１７Ｑ・２１−トリアセテートを得た。
このトリアセテート０．４９を、アセトン４０机‘に溶
解し、２．０の【ずつ当該ＴＭ５１２菌の楠付されたき
な粉培養液（全量８００の‘）の２０Ｍづっ分配された
４０本の試験管にそれぞれ加えた。これを３０ｏ０５日
間振縄培養した。反応終了後炉過、酢酸エチル抽出、抽
出液を水洗後濃縮し、【ａ｝と同様に分取薄層クロマト
グラフィーに付したのち、生成物をアセトンより再結晶
した。ｍ．ｐ．２３４〜２３７０ 収量０．３０タ実施
例 ２ハイドロコーチゾン １７ープロピオネートの製
法｛ａ｝ ハイドロコーチゾン１夕をピリジン２０の‘
に溶解し、無水酢酸１４の‘を加え６０ｑ０４朝時間反
応させた。

反応終了後氷中に注入し、クロロホルム抽出した。抽出
液を水、希塩酸、水で洗浄し辛硝乾燥した。溶媒を減圧
留去し残燈をシリカゲルクロマトグラフイ−（アセトン
：へキサン）に付しハイドロコーチゾン１１８・２１−
ジアセテートを得、アセトン−へキサンより再結晶した
。ｍ．Ｐ．１８５〜１８７．５ｏｏ 収量０．８５タ次
いでこのジアセテート０．６夕を無水プロピオン酸０．
４５肌、無水ベンゼン３０の上、ｐートルェンスルホン
酸２０の９の混合物に加え６時間還流した。冷後「ベン
ゼン７０叫を加え、溶液を希重炭酸水素ナトリウム液「
次いで水で洗浄。Ｅ硝にて乾燥後減圧下濃縮。残澄を分
取薄層クロマトグラフィーに付し、無晶形のハイドロコ
ーチゾン１７Ｑ−プロピオネート １１８・２１−ジア
セテート０．５４夕を得た。このトリェステル体は、Ｉ
Ｒで水酸基の吸収がなく、ェステル基の吸収が認められ
た。

Ｎ．Ｍ．Ｒ．分析（溶媒ＣＤＣ１３）により、アセチル
基２個とプロピル基１個の存在が認められた。

分子量測定値：５０２（マススベクトル分析により）。
元素分析値：Ｃ滋日３８０８（分子量５０２．５８とし
て）計算値 Ｃ ６６．９１％ 日 ７．６２
％実測値 Ｃ ７０．０４％ 日７．６１％
このトリェステル体０．５夕をアセトン２５の‘に溶解
し、実施例１【ａ）と同様にＷａｋｓｍａｎ培養液中で
当該ＴＭ５１２菌と３０つ０４日間綾濠培養した。

実施例１‘ａ）と同様に処理してハイドロコーチゾン１
７−プロピオネート（ｍ．ｐ．１８８〜１９１℃、アセ
トン−へキサンより再結晶）を得た。収量０．４３夕【
ｂ’ハイドロコーチゾン１夕を無水プロピオン酸１０泌
、ｐ−トルェンスルホン酸０．１夕と共に７０〜８０こ
０で３時間加熱した。

のち氷水にあげ塩化メチレンで抽出した。抽出液を水「
希炭酸ソ−ダ液、次いで水で洗浄しＥ硝乾燥した。溶媒
を減圧下に濃縮して得られた残澄をシリカゲルを吸着剤
とする乾式カラムクロマトグラフィーに付し（展開剤ア
セトンーヘキサン）、無晶形のハイドロコーチゾン１１
８・１７Ｑ・２１ートリプロピオネート０．２８夕を得
た。このものは薄層クロマトグラフィーにて単一のスポ
ットを示し、ＩＲにて水酸基の吸収が認められないこと
を確かめた。ついで、このトリェステル０．５夕を実施
例１‘ａーと同じようにＷａＫｓｍａｎ培地中３０ｑｏ
で当該ＴＭ５１２菌で処理した。

この場合反応完了には５日間を要した。

反応液から実施例１‘ａ｝と同様に処理して得られた粗
生成物を上述のカラムクロマトグラフィーに付し、ハイ
ドロコーチゾン １７ープロピオネート（ｍ．ｐ．１８
６〜１９ぴ○）を得た。収量０。４タ実施例 ３ ハイドロコーチゾン １７−ブチレートの製法ハイドロ
コ−チゾン１１６・２１−ジアセテート（ｍ．ｐ．１８
５〜１８７．５ｏｏ）０．２５夕、無水酪酸１．９のと
、ｐ−トルェンスルホン酸０．０５夕、無水ベンゼン２
５泌の混合物を６時間煮沸した。

のち、反応混合物をメタノール２５の‘で薄めたのち、
氷水中に注入した。クロロホルム抽出し、抽出液を水、
希重炭酸水素ナトリウム液、水で洗浄、三硝にて乾燥し
た。ついで溶媒を減圧下にて蟹去し、得られる残澄を分
取薄層クロマトグラフィーに付し精製した。ハイドロコ
ーチゾン１１８・２１−ジアセテート−１７−ブチレー
ト（悪晶形）の収量は、０．２２夕であった。このもの
は薄層クロマトグラフィーで単一であり、ＩＲにて水酸
基のないことを確かめた。このトリェステルはＮＭ．Ｒ
分析（溶媒ＣＤＣ１３）によりアセチル基２個とブチル
基１個の存在が確認された。

分子量測定値：５１６（マススベクトル分析より）元素
分析値：Ｃ礎日４。

０８（分子量５１６．６１として）計算値 Ｃ ６７
．４２％ 日 ７．狐 ％実測値 ０ ６７．
２８％ 日 ７．７７ ％ハイドロコーチゾン１
１８０２１ージアセテート１７−ブチレート０．２夕を
アセトン１０の‘に溶解し、この０．５の‘ずつをそれ
ぞれ当該ＴＭ５１２菌の植付けの終ったＷａＫｓｍａｎ
培養液（全量４００の【）の２０肌ずつが分配されてい
る２０本の試験管に配分した。

これを３０００にて４日間振糧培養した。反応液を炉紙
澱適し、酢酸エチル抽出、抽出液を水で洗浄した。これ
をある程度減圧下にて濃縮してからシリカゲル薄層クロ
マト坂上に塗布し展開剤にアセトン・クロロホルム・シ
クロヘキサン（３：３：４）を用いて分取薄層クロマト
グラフィーを実施した。得られた生成物を酢酸エチルー
ヘキサン濠液より再結晶した。ｍ．ｐ．２０５〜２０７
０ 収量０．１７タ実施例 ４ハイドロコーチゾン １
７−ィソブチレートの製法ハイドロコーチゾン１１８・
２１ージアセテートｏ．２５夕、無水ィソ酪酸１．９の
‘、ｐートルェンスルホン酸０。

０５夕「無水ベンゼン２５肌の混合物を６時間煮沸した
。

のちし反応混合物をメタノール２５叫で薄め、氷水中へ
注入した。クロロホルム抽出し「抽出液を水「希重炭酸
水素ナトリウム液、水で洗浄、三硝にて乾燥した。つい
で溶媒を減圧下にて留去し、得られる残澄を分取薄層ク
ロマトグラフィーに付し精製した。ハイドロコーチゾン
１１８・２１−ジアセテート１７ーィソブチレート（無
晶形）の収量は０．２１夕であった。このものは薄層ク
ロマトグラフィーで単一であり、ＩＲにて水酸基の吸収
がなく、ェステル基の吸収が見られた。

Ｎ．Ｍ．Ｒ．分析（ＣＤＣ１３）によりアセチル基２個
とプチル基１個の存在が認められた。分子量測定値：５
１６（マススベクトル分析より）元素分析値：Ｃ囚日４
。

０８（分子量５１６．６１として）計算値 Ｃ６７．
４２％ 日 ７．８０％実測値 Ｃ６７．６５
％ 日７．７８％ハイドロコーチゾン１１３・２
１−ジアセテート１７−ィソブチレート０．２夕をアセ
トン１０柵に溶解し、この０．５のとずつをそれぞれ当
該ＴＭ５１２菌の植付けの終ったＷａｋｓｍａｎ培養液
（全量４００の‘）の２０必ずつが分配されている２０
本の試験管に配分した。

これを３０ｑＣにて４日間振顔培養した。反応液を炉紙
炉遇し、酢酸エチル抽出、抽出液を水で洗浄した。これ
をある程度減圧下にて濃縮してからシリカゲル薄層クロ
マト板上に塗布し分取簿層クロマトグラフィーを実施し
た。得られた生成物を酢酸エチルーヘキサン鷹液より再
結晶した。ｍ．Ｐ．２０２〜２０５午０、収量０．１７
夕。生成物は薄層クロマトグラフィーにて単一スポット
を示し、ＩＲにて水酸基の吸収と、Ｎ．Ｍ．Ｒにて、１
７ーイソブチル基に起因するシグナルが見られた。子量
測定値：４３２（マススベクトル分析より）元素分析値
：Ｃ偽日３６０６（分子量４３２．５４として）計算値
０６９．４２％ 日 ８．３９％実測値
Ｃ６９．５６％ 日８．４３％実施例 ５ハイド
ロコーチゾン １７ーイソバレレートの製法ハイドロコ
ーチゾン１１８・２１ージアセテートｏ．２５夕、無水
ィソ吉草酸２．０夕、ｐートルェンスルホン酸０．０６
夕、無水ベンゼン２６の‘の混合物を６時間煮沸した。

のち、反応混合物をノタノール２６偽で薄め、氷水中へ
注入した。クロロホルム抽出し、抽出液を水、希重炭酸
水素ナトリウム液、水で洗浄し、苧硝にて乾燥した。つ
いで溶媒を減圧下にて留去し、得られる残澄を分取薄層
クロマトグラフィーに付し精製した。ハイドロコーチゾ
ン１１８・２１−ジアセテート １７−イソバレレート
（無晶形）の収量は０．２２夕であった。生成物は薄層
クロマトグラフィーで単一であり、ＩＲにて水酸基の吸
収がなくェステル基の吸収が見られた。Ｎ．Ｍ．Ｒ分析
（ＣＤＣ１３）により、アセチル基２個とィソバレル基
１個の存在が認められた。元素分析値：Ｃの日４２０８
（分子量５３０．６４として）計算値 ○６７．９０
％ 日 ７．９８％実測値 ○６８．０２％
日８．０１％ハイドロコーチゾン１１３・２１ー
ジアセテート１７−ィソバレレート０．２夕をアセトン
１０叫に熔解し、この０．５の【ずつをそれぞれ当該Ｔ
Ｍ５１２菌の植付けの終ったＷａｋｓｍａｎ培養液（全
量４００の‘）の２０の‘ずつが分配されている２０本
の試験管に配分した。

これを３０℃にて４日間振糧培養した。以後、実施例４
と同様に処理し、得られた残澄を分取薄層クロマトグラ
フィーに付し、生成物をアセトン−へキサン濠液より再
結晶した。ｍ．ｐ．１９７〜２００℃ 収量０．１７夕
。この生成物は、薄層クロマトグラフィーにて単一スポ
ットを示し、ＩＲにてェステル基の吸収のほかに、水酸
基の吸収が現われた。

Ｎ．Ｍ．Ｒにて１７−ィソバレレート基に起因するシグ
ナルが見られた。分子量測定値：４４６（マススベクト
ル分析より）元素分析値：Ｃ離日３８０６（分子量４４
６．５６として）計算値 ０６９．９３％ 日
８．５８％実測値 Ｃ６９．３７％ 日８．５
５％実施例 ６デキサメサゾン １７−プロピオネート
の製法デキサメサゾン１夕をピリジン２０Ｍに溶かし、
無水酢酸１４の‘を加え、６０℃で４劉時間反応させた
。

のち、反応液を実施例２｛ａ｝に述べたハイドロコーチ
ゾン１１８’２１ージアセテートの製法の場合と同じよ
うに処理し、デキサメサゾン１１８・２１−ジアセテー
トを得た。ｍ．ｐ．１３５〜１３９ｑｏ：収量０．８６
夕。この化合物は薄層クロマトグラフィーで単一のスポ
ットを示し、ＩＲにて水酸基の吸収とＮＭＲにて１１３
・２１−ジアセチル基に起因する２本のシグナルが見ら
れた。分子量測定値：４７６（マススベクトル分析より
）元素分析値：Ｃ礎日３３０７Ｆ（分子量４７６．５３
として）計算値 Ｃ ６３．４３％ 日 ６．７７％
Ｆ ３．９８％実測値 Ｃ ６３．５０％ 日６．７
９％ Ｆ ３．７１％つぎに、この１１８・２１−ジェ
ステル０．３夕を無水プロピオン酸０．３夕、無水ベン
ゼン２０叫、ｐ−トルェンスルホン酸１２の９の混合物
に加え、反応混合物を８時間還流した。

つぎに溶液を冷やし、メタノール２の‘を加えて１時間
放置した。のち、氷水に反応液をあげ、塩化メチレンで
抽出した。抽出液を水洗、希重炭酸ナトリウム液、水で
洗浄し、苧硝にて乾燥した。塩化メチレンを減圧下にて
蟹去し、得られた粗生成物をシリカゲルを吸着剤とする
分取薄層クロマトグラフィー（展開剤）；アセトンーク
ロロホルムーヘキサン（３：３：４））で精製し「無晶
形のデキサメサゾン１１８・２１−ジアセテート １７
−プロピオネート０．２５夕を得た。この化合物はＩＲ
にて水酸基の吸収がなく、薄層クロマトグラフィーで単
一のスポットを示した。Ｎ．Ｍ．Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１
３）より、アセチル基２個とプロピル基１個の存在が確
認された。元素分析値：２９日幻０８Ｆ（分子量５３２
．５９として）計算値 ○ ６４．４５％ 日７．００
％ Ｆ ３．５６％実測値 ○ ６４．６７％ 日
７．１１％ Ｆ ３．４８％つぎにこの１１３・１７
・２１−トリヱステル０．２夕をアセトン１０叫に溶か
し「 この０．５似づつをあらかじめ当該ＴＭ５１２菌
の植付けの終了したきな粉培養液（全量４００の‘）の
２０の‘に分配された２０本の試験管にそれぞれ加えた
。

これを３０ｏ０５日間振濠培養した。反応終了後液をろ
過し、酢酸エチル抽出した。抽出液を水洗し、これをあ
る程度濃縮してから前述と同じく分取薄層クロマトグラ
フィーに付し生成物を得た。ｍ．Ｐ．２１８〜２２１０
０ 収量１．６タ実施例 ７ベータメサゾン １７ープ
ロピオネートの製法ベータメサゾン１夕を用いた、実施
例２‘ａｌｌこ述べたハイドロコーチゾン１１８・２１
ージアセテートの製法と同じような方法でベータメサゾ
ン１１８・２１ージアセテートｍ．ｐ．１２２〜１２５
℃（アセトンーェーテルより再結晶）０．８７夕を得た
。

ジェステルは、薄層クロマトグラフィーで単一スポット
を与えた。赤外線吸収スペクトルは、水酸基の吸収がな
く、ェステル基の存在が認められた。Ｎ．Ｍ．Ｒ分析（
溶媒ＣＤＣ１３）よりアセチル基２個の存在が確認され
た。分子量測定値：４７６（マススベクトル分析より）
元素分析値：Ｃ滋日３３０７Ｆ（分子量４７６．５３と
して）計算値 ０ ６３．４８％ 日 ６．７７％
Ｆ ３．９８％実測値 ０ ６３．５３％ 日６．７２
％ Ｆ ３．８５％ついでこの１１６・２１−ジアセ
テート０．６夕を無水プロピオン酸０．６羽‘、無水ベ
ンゼン４０肌、ｐ−トルェンスルホン酸１４の９と混合
し、混合物を６時間還流した。

つぎに溶液を冷やし、メタノール４０叫を加えて１時間
放置した。のち氷水に反応液をあげ、塩化メチレンで抽
出した。抽出液を水洗、希重炭酸ナトリウム液、水で洗
浄し、葦硝にて乾燥した。塩化メチレンを減圧下にて留
去し、得られた粗生成物をシリカゲルを用いた分取薄層
クロマトグラフィー（展開剤：アセトン・クロロホルム
・ヘキサン（３：３：４））で精製し、無晶形のベータ
メサゾン１１８・２１ージアセテートー１７−プロピオ
ネート０．５１夕を得た。この化合物のＩＲは水酸基の
吸収がなく、薄層クロマトグラフィーで単一のスポット
を示した。Ｎ。

Ｍ．Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１３）より、アセチル基２個と
プロピル基１個の存在が確認された。元素分析値：Ｃ凶
日３７０６Ｆ（分子量５３２．５９として）計算値 ○
６４．４５％ 日 ７．００％ Ｆ ３．５６％実
測値 ０ ６６．６１％ 日６．９７％ Ｆ ３．７
９％つぎに、この１１８・１７・２１ートリエステル０
．２夕をァセトン１０叫に溶かしたものを実施例６に述
べたデキサメサゾン１１３・１７・２１−トリエステル
を微生物で処理する方法と同様に微生物処理した。

この場合にＷａｋｓｍａｎ培地を用いた。反応液からの
生成物の分離、精製についても実施例６と同様に行ない
、目的物であるベータメサゾン １７ープロピオネート
ｍ．ｐ．２３２〜２３５００（アセトンにて再結晶）０
．１７夕を得た。実施例 ８ ベータメサゾン １７ーバレレートの製法ベータメサゾ
ン１９を用いて実施例７と同様な方法により、ベータメ
サゾン１１８・２１−ジアセテート（ｍ．ｐ．１２２〜
１２５午０）０．Ｅミタを得た。

このジァセテート０．６夕を無水青草Ｚ−Ｊ．６の上、
無水ベンゼン４０私、ｐートルェンスルホン酸１４の９
と混合し、混合物を８時間還流した。のち、実施例７と
同様に処理し、無晶形のベータメサゾン１１８１２１ー
ジアセテート １７ーバレレート０．４６夕を得た。こ
の化合物は薄層クロマトグラフィーで単一なスポットを
示し、ＩＲにて水酸基の吸収がなかった。Ｎ．Ｍ．Ｒ分
析（溶媒ＣＤＣ１３）より、アセチル基２個とバレレー
ト基１個の存在が確認された。元素分析値：Ｃ幻日４，
０８Ｆ（分子量５６０．６４として）計算値 ０ ６６
．４１％ 日７．３７％ Ｆ ３．３９％実測値 ○
６６．６３％ 日７−２９％ Ｆ ３．１８％つぎに
このトリェステル０．２夕を用いて実施例７と同じよう
にしてＷａｋＳｍａｎ培養液中で微生物と反応させ、の
ち同じような分離、精製法を用いて、目的物ベータメサ
ゾン １７ーバレレートｍ．ｐ．１８２〜１８４午０（
アセトンーヘキサンにて再結晶）０．１５５夕を得た。
実施例 ９ タ プレドニソロン １７−アセテートの製法プレドニ
ソロン１夕を、氷酢酸１０の【、無水酢酸１０の【、ｐ
ートルェソスルホン酸０．２夕と共に６０こ０にて１ｑ
時間加熱した。

のち、混合物を氷水中に注入し、クロロホルム抽出した
。抽出液を水、希炭０酸ナトリウム液、水で十分洗浄し
、芋硝乾燥後減圧下に濃縮した。得られた磯澄をシリカ
ゲルによる乾式クロマトグラフィー（展開剤：ベンゼン
−クロロホルム混液）に付した。薄層クロマトグラフィ
ーのチェックから単一スポットを示す鱒晶形タブレドニ
ソロン１１８・１７・２１ートリアセテート０．７７夕
を得た。この化合物はｍにて水酸基の吸収がなく、Ｎ．
Ｍ．Ｒにて３本のアセチル基のシグナルが現われた。分
子量測定値：４８６（マススベクトル分析より）０元素
分析値：Ｃ幻日３４０８（分子量４８６．５４として）
計算値 ○６６．６５％ 日 ７．０４％実測
値 Ｃ６６．７２％ 日 ７．０３％つぎに、
トリェステル０．５夕をアセトン２５のＺに溶かし、実
施例１‘ａ）の場合と同様にＷａｋｓｍａ吋培養液中で
微生物処理（３０ｑ０４日間）し、プレドニソロン １
７−アセテートｍ．ｐ．２４０〜２４が０（アセトン−
へキサンにて再結晶）０．４２夕を得た。

実施例 １０ハイドロコーチゾン １７−アセテート
２１−ブロミドの製法ハイドロコーチゾン ２１−ブロ
ミド（ｍ．ｐ．１９２〜１９４ご０）１．０夕をｐート
ルェンスルホン酸０．２夕の存在する氷酢酸ｌｏｗ‘と
無水酢酸１０地の混合液中へ加え、混合物を６０ｑ０３
時間加熱したのち一夜室温にて放置した。

これにメタノール１０の‘を加えて蝿梓後混合液氷水に
注入した。クロロホルム抽出し、抽出液を水、希炭酸ナ
トリウム液、水で洗浄、芝硝乾燥した。減圧下にクロロ
ホルムを留去し、得られた残澄を分取薄層クロマトグラ
フィーにて精製し、ｍ．ｐ．１７７〜１８０ｏ○（アセ
トンーヘキサン再結晶）のハイドロコーチゾン１１８１
１７Ｑ−ジアセテート ２１ｎブロミド０．８４夕を得
た。この化合物は薄層クロマトグラフィーで単一スポッ
トを示し、ＩＲにて水酸基の吸収がなかった。Ｎ．Ｍ．
Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１３）より、アセチル基２個の存在
が認められた。分子量測定値：５０９（マススベクトル
分析より）元素分析値：Ｃ２５４３０６Ｂｒ（分子量５
０９．４３として）計算値 ○ ５８．９４％ 日６．
５３％ Ｂｒ１５．６９％実測値 ○ ５９．０７％
日６．４８％ Ｂｒ１５．８５％ついでこの１１８
・１７Ｑ−ジアセテート０．５夕をァセトン２５机上に
溶解し、実施例１‘ａ’１こ示したようなＷａｋｓｍａ
ｄ培養液中で微生物と３０００４日間処理した。

実施例１【ａーと同じような操作精製法を行ない、ハイ
ドロコーチゾン １７ーアセテート ２１ーブロミドｍ
．ｐ．２０４〜２０５００（分解）（アセトンーヘキサ
ン再結晶）０．４１夕を得た。生成物は、薄層クロマト
グラフィーにて単一スポットを与え、ＩＲで水酸基の吸
収とェステル基の吸収を示した。

Ｎ．Ｍ．Ｒ分析（ＣＤＣ１３）よりアセチル基１個の存
在が確認された。 ４分子量測定値；４６
７（マススベクトル分析より）元素分析値：Ｃ２３は，
０５Ｂｒ（分子量４６７．４０として）計算値 Ｃ ５
９．１０％ 日６．６９％ Ｂｒ１７．１０％実測値
０ ５９．２７％ 日６．７１％ Ｂｒ１６．８９％
実施例 １１ハイドロコーチゾン １７ーブチレート
２１ークロリドの製法ハイドロコーチゾン ２１−クロ
リド（ｍ．ｐ．２３９〜２４〆○（分解））１．０夕を
ｐートルェンスルホン酸０．２夕を加えた無水酪酸１０
肌、トルヱン８０のとの混合液中で６時間煮沸した。

冷却後トルェン８０叫で薄め、氷水に注入した。トルェ
ン〜ベンゼン層を水、希炭酸ナトリウム液、水で洗浄し
、苧硝乾燥した。溶媒を減圧下にて留去し、得られる残
溝を分取薄層クロマトグラフィーで精製した。ハイドロ
コーチゾン１１８，１７Ｑージブチレート ２１−クロ
リド０．７９のま無晶形として得られたが、薄層クロマ
トグラフィーで単一スポットを示し、ＩＲにて水酸基の
吸収を与えず、ヱステル基の吸収が認められた。Ｎ．Ｍ
．Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１３）より、ブチル基２個の存在
が認められた。

元素分析値：Ｃ凶日４，０６ＣＩ（分子量５２１．０８
として）計算値 Ｃ ６６．８４％ 日 ７．９３％
ＣＺ ６．８０％実測値 Ｃ ６６．９７％ 日 ７
．９５％ ＣＺ ６．７１％上述の１１８４１７Ｑ−
ジブチレート−２１−クロリド０．５夕を用いて実施例
１【ａ｝と同様に行ない、Ｗａｋｓｍａｎ培養液中で３
０ｑ０４日間微生物で処理した。

反応液の後処理、生成物の分離・精製も実施例１‘ａ｝
と同様に行ない目的物のハイドロコーチゾン １７ーブ
チレート ２１−クロリドｍ．ｐ．１９２〜１９６ｑｏ
（アセトン−へキサンより再結晶）０．４５夕を得た。
生成物は薄層クロマトグラフィーにて単一スポットを示
し、ｍで水酸基の吸収とェステル基の吸収を示した。

Ｎ．Ｍ．Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１３）より、ブチル基１個
の存在が確認された。分子量測定値ミ４５０（マススベ
クトル分析より）元素分析値：Ｃ歯日３５０５ＣＩ（分
子量４５０．９９として）計算値 ０ ６６．５８％
日 ７．８２％ ＣＺ ７．８６％実測値 Ｃ ６６
．６２％ 日７．８８％ ＣＺ ７．７１％実施例 １
２ベータメサゾン １７−プロピオネート ２１−クロ
リドの製法ベータメサゾン ２１ークロリド（ｍ．ｐ．
２３１〜２３４００）１．０夕を、ベンゼン−塩化メチ
レン（４：１）８０の‘に加え、さらに無水プロピオン
酸１０瓜‘とｐ−トルェンスルホン酸０．１夕を加えて
、混合液を５時間煮沸した。

のち、塩化メチレン６０叫を加え薄め氷水に注入した。
塩化メチレン層を水洗、希炭酸ナトリウム液「水で十分
に洗浄し、苧硝乾燥した。減圧下に溶媒を蟹去し、得ら
れた残笹を分取薄層クロマトグラフィーにて精製した。
生成物は薄層クロマトグラフィーで単一のスポットを示
し、ＩＲにて水酸基の吸収がなく、ェステル基の吸収が
認められた。Ｎ．Ｍ．Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１３）より、
プロピル基２個の存在が認められた。

元素分析値；Ｃ２８日繁０６ＣＩＦ（分子量５２３．０
３として）計算値０６４．２９％日６．９４％ ＯＺ６
．７８％ Ｆ３．６３％実測値Ｃ６４．４１％日６．８
８％ ，ＣＺ６．５７％ Ｆ３．４８％ついで、この１
１８・１７Ｑ−ジプロピオネート２１ークロリド０．５
夕を用いて、実施例１蜘に述べたと同様な微生物反応（
Ｗａｋｓｍａｎ培養液中３０ｑ０４日間処理）を行なっ
た。

反応液からの生成物の分離、精製も実施例１｛ａ｝と同
じように行ない、生成物ベータメサゾン １７ープロピ
オネート ２１ークロリド０．４４夕（ｍ．ｐ．１９３
〜１９６ｑ○；アセトソ−へキサンにて再結晶）を得た
。生成物は薄層クロマトグラフィーで単一スポットを示
し「ＩＲにて水酸基の吸収とェステル基の吸収を示した
。

Ｎ．Ｍ．Ｒ分析（ＣＤＣ１３）よりプロピル基１個の存
在が認められた。分子量測定値：４６６（マススベクト
ル分析より）元素分析値：Ｃ２５日滋０５ＣＩＦ（分子
量４６６．９７として）計算値０６４．３０％日６．９
１％ ＯＺ７．５９％ Ｆ４．０７％実測値Ｃ６４．４
４％日６．８７％ ＣＺ７．７５％ 日３．９８％実施
例 １３フルオロメソロン １７ーブチレートの製法フ
ルオロメソロン（９Ｑーフルオロー６Ｑーメチル−１１
８・１７Ｑ一ジヒドロキシープレグナー１・４ージェン
ー３・２０−ジオン）０．５夕を無水酪酸５の‘に加え
「 これをさらに新しい炭酸カルシウム（ＣａＣ０３）
０．４夕を加えた。

この混合物を１５０℃１斑時間加熱した。冷却後、炭酸
カルシウムを炉過し、炉液を減圧下に濃縮した。得られ
た残澄をシリカゲル吸着剤とする分取薄層ク。マトグラ
フィー（展開剤：アセトンークロロホルムーへキサン（
３：３：４））に付し、Ｒナ０．６附近の生成物フルオ
ロメソロン１１８・１７Ｑージブチレートを魚晶形とし
て分離精製した。収量０．４３夕。この化合物は薄層ク
ロマトグラフィーで単一スポットを示し、ＩＲにて水酸
基の吸収を与えず、ェステル基の吸収を示した。Ｎ．Ｍ
．Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１３）より、ブチル基２個の存在
が認められた。

元素分析値：Ｃ粉日４・０６Ｆ（分子量５１６．６３と
して）計算値 Ｃ ６９．７４％日８．００％ Ｆ ３
．７８％実測値 Ｃ ６９．７７％日７．９５％ Ｆ
３．９１％つぎに、フルオロメソロン１１８・１７Ｑ−
ジブチレート０．２夕をアセトン１０机に溶解し、実施
例３の方法に従って微生物処理Ｗａｋｓｍａｎ培養液中
３０℃５日間）を行なった。

反応液からの生成物の分離、精製は実施例３と同様に行
ない、生成物フルオロメソロン １７ーブチレート（ｍ
．ｐ．１２９〜１３３。○：アセトンーェーテルにて再
結晶；薄層クロマトグラフィーは上述の展開剤にてＲナ
０．３を示す）０．１５夕を得た。生成物は薄層クロマ
トグラフィーにて単一スポットを示し、ｍで水酸基とェ
ステル基の吸収が認められた。

Ｎ．Ｍ．Ｒ分析（溶媒ＣＤＣ１３）より、ブチル基１個
の存在が確認された。分子量測定値：４４６（マススベ
クトル分析より）元素分析値：６日３５０５Ｆ（分子量
４４６．５４として）計算値 Ｃ ６９．９３％ 日
７．９０％ Ｆ ４．２５％実測値 Ｃ ７０．０５％
日７．８６％ Ｆ４．１１％実施例 １４９−フルオ
ロー１１８・１７ージヒドロキシブレグナ−４−エンー
３・２０ージオン・１７ーアセテート（フルロゲストン
・アセテート）の製法０ ９−フルオロー１１８・１７
ージヒドロキシプレグナー４ーェンー３・２０−ジオン
（フルロゲストン；ｍ．ｐ．２３２〜２３５ｑＣ）１．
０夕をｐ−トルエンスルホン酸０．２夕の存在する氷酢
酸１０の【と無水酢酸１０の‘の混合液中へ加え、混合
物を６０ｑ０３時間加熱したのち、一夜室温にて放置し
た。

こののち実施例１０と同様に処理して得た粗生成物を酢
酸エチルーヘキサン混液にて再結晶し、ｍ．ｐ．２４２
〜２４３ｑｏの９−フルオロ−１１８・１７−ジヒドロ
キシプレグナ一４−エン−３・２０−ジオン・１１・１
７ージアセテート０．８５夕を得た。このものは薄層ク
ロマトグラフィーで単一スポットを示し、ＩＲは水酸基
の吸収がなく、ェステル基の存在が認められた。

Ｎ．Ｍ．Ｒ．分析（溶媒ＣＤＣ１３）よりアセチル基２
個の存在が確認された。分子量測定値：４４８（マスス
ベクトル分析より）元素分析値：Ｃ蜜日３３０６Ｆ（分
子量４４８．５２として）計算値 ○ ６６．９４％
日 ７．４２％ Ｆ ４．２４％実測値 Ｃ ６７．０
２％日７．４０％ Ｆ ４．０１％ついでこの１１・１
７ージアセテート０．５夕をアセトン２５の‘に溶解し
、実施例１‘ａ｝に示したようなＷａｋｓｍａｎ培養液
中で微生物と３０℃４日間処理した。

実施例１【ａ）と同じような操作、精製法を行ない、９
ーフルオロ−１１８・１７ージヒドロキシプレグナー４
ーエン−３・２０−ジオン・１７−アセテート（フルロ
ゲストン・アセテート）（ｍ．ｐ．２６６〜２６がｏ；
酢酸エチル−へキサンより再結晶）０．４２夕を得た。
生成物は薄層クロマトグラフィーにて単一スポットを示
し、ＩＲは水酸基の吸収とェステル基の吸収を示した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ プレグナン系化合物の１１β・１７α・２１−トリ
   低級脂肪酸エステルまたは１１β・１７α−ジ低級脂肪
   酸エステルに、前記エステル化合物の１１β位および／
   または２１位の低級脂肪酸エステルをヒドロキシ化する
   ノカルジア属放線菌に属する菌株を作用させることを特
   徴とするプレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１
   ７α−低級脂肪酸エステルの製造法。 ２ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルがベータメサゾンの１７α−低級
   脂肪酸エステル−２１−ハライドである特許請求の範囲
   第１項に記載の製造法。 ３ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルがベータメサゾンの１７α−低級
   脂肪酸エステルである特許請求の範囲第１項に記載の製
   造法。 ４ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルがハイドロコーチゾンの１７α−
   低級脂肪酸エステル−２１−ハライドである特許請求の
   範囲第１項に記載の製造法。 ５ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルがハイドロコーチゾンの１７α−
   低級脂肪酸エステルである特許請求の範囲第１項に記載
   の製造法。 ６ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルがデキサメサゾンの１７α−低級
   脂肪酸エステルである特許請求の範囲第１項に記載の製
   造法。 ７ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルがプレドニソロンの１７α−低級
   脂肪酸エステルである特許請求の範囲第１項に記載の製
   造法。 ８ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルがフルオロメソロンの１７α−低
   級脂肪酸エステルである特許請求の範囲第１項に記載の
   製造法。 ９ プレグナン系化合物の１１β−ヒドロキシ−１７α
   −低級脂肪酸エステルが９−フルオロ−１１β・１７−
   ジヒドロキシプレグナ−４−エン−３・２０−ジオンの
   １７α−低級脂肪酸エステルである特許請求の範囲第１
   項に記載の製造法。 １０ ベータメサゾンの１７α−低級脂肪酸エステル−
   ２１−ハライドがベータメサゾン１７−プロピオネート
   ２１−クロリドである特許請求の範囲第２項に記載の製
   造法。 １１ ベータメサゾンの１７α−低級脂肪酸エステルが
   ベータメサゾン１７−バレレートである特許請求の範囲
   第３項に記載の製造法。 １２ ハイドロコーチゾンの１７α−低級脂肪酸エステ
   ル−２１−ハライドが、ハイドロコーチゾン１７−ブチ
   レート２１−クロリドである特許請求の範囲第４項に記
   載の製造法。 １３ ハイドロコーチゾンの１７α−低級脂肪酸エステ
   ルがハイドロコーチゾン１７−イソバレレートである特
   許請求の範囲第５項に記載の製造法。 １４ デキサメサゾンの１７α−低級脂肪酸エステルが
   デキサメサゾン１７−プロピオネートである特許請求の
   範囲第６項に記載の製造法。 １５ プレドニゾロンの１７α−低級脂肪酸エステルが
   プレドニソロン１７−アセテートである特許請求の範囲
   第７項に記載の製造法。 １６ フルオロメソロンの１７α−低級脂肪酸エステル
   がフルオロメソロン１７−ブチレートである特許請求の
   範囲第８項に記載の製造法。 １７ ９−フルオロ−１１β・１７−ジヒドロキシプレ
   グナ−４−エン−３・２０−ジオンの１７α−低級脂肪
   酸エステルが９−フルオロ−１１β・１７−ジヒドロキ
   シプレグナ−４−エン−３・２０−ジオン１７−アセテ
   ートである特許請求の範囲第９項に記載の製造法。