JPS6058081A - 新規抗生物質ｓｆ−２１９６物質，その製造法及び用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規抗生物質５Ｆ−２１９＜Ｓ物質、その製造
法及び用途に関する。

本発明者らは、ストレプトミセス九に組する１１４°定
の菌株を培養すると、各釉細菌及びカビｋｌ　’Ｊの一
部の微生物に対して強い発育阻止作用を示す物質が培養
物中に生産蓄積されることを見出し、その有効物質を採
取することに成功した。

さらに本発明者らは、この有効物質を単Ｐｒ１ｆ、第１
ｖ製し、その性質を検討した結果、既知の物質とは異な
る新抗生物質であることを見出し、この有効物質を５Ｆ
−２１９６物質と命名した。本発り」のＳＦ−（ＩＩ　
色及び性状；淡黄色の粉末で、酸にやや不安定である。

（２）融　点：２２０〜２７０６Ｃ（分解）で黒化する
。

（３１元素分析値：　Ｎ　１５．９４％、　０４３．６
８％。

ＩＩ　５．５５％、　０２７．９２％（差）。

（４）分子景二約１５００（バイオゲルＰ−４の分子篩
による）。

（５）紫外１！吸収スはクトル：λｍａｘ　ｎｍ　（Ｅ
’　”　）　：０ ２７３（０−７８）／Ｈ２０（第１図）。

（６）赤外線吸収スはクトル：　ＫＲｒ錠による吸収を
飼３２図に示す。

（７）浴ｊ作性：水によく溶り、クロロホルムにほとん
ど浴けない。

（８１呈色反応：ニンヒドリン反応陽性。

（９）　セルロース薄層クロマトダラムのＲｆ値（Ｉｌ
　ｕＯＨ：Ｍｅａｌ（：　Ｈ２Ｏ＝　４　：　１　：　
２　）　：　Ｏ−２１゜５Ｆ−２１９６物質の各種微生
物に対する抗菌スズクトルしペーパーディスク法（８１
０１））を次表に示す。

これら抗菌スはクトルから明らかなように、５Ｆ−２１
９６物質は特にカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ　ａｌｂｉｅ
ａｎｓ　）に対して強い抗菌作用を示す。また、抗コク
シジウム活性を有することも認められた。

５Ｆ−２１９６物質はこれらの理化学的性質及び生物学
的性質から、他の既知抗生物質と異なシ、新規な抗生物
質である。

新抗生物質８Ｆ−２１９６物質社、抗生物質５Ｆ−２１
９６物質を生産する能力を有するストレプトミセス桃の
菌株を培養し、その培養物中から５Ｆ−２１９６物質を
採取することによシ製造される。

本発明に使用される８Ｆ−２１９６物質生産菌の一例と
して静岡県伊豆半島河津浜の土壌よシ分離されたー放１
１ＪＩＥ４８Ｆ−２１９６株がある。本枕の菌学的性状
は下記のとおルである。

１、形態学的性質 気粕糸及び胞子の形成はスターチ寒天、オートミール寒
天、イースト麦芽寒天及びベネット寒天等の培地上で良
好である。気菌糸の分岐は単純分゛ＲＦ　−ＲＡ型であ
る。菌核、胞子嚢等の特殊構造は認められない。電子顕
微鏡による観察で、胞子の表面はイボ状の突起を有し、
胞子の形は長円形ないし卵円形で、大きさは０．７〜Ｄ
、９　ｘ　１．０〜１．５ミクロンであシ、通常１０個
以上連鎖する。

２、各稙培地上の生育状態 培養は２８°Ｃ１観察は１４〜２１日培養後に実施した
。なお表中気菌糸の色の記載の（）内に示す標準はコン
テイナー・コーポレーションオブアメリカ社製のカラー
ハーモニーマニュアルによった。

特開昭ＧＯ−５８０８１（３） ４生理学的性質 （１）生育温度範囲　：スターチ寒天において１５〜４
２°Ｃの温度範囲で生育 し、特に２５〜３５６Ｃの範 囲で良好に生育する。

（２）ゼラチンの液化　：陽性。

（３１スターチの加水分解：陽性。

（４）脱脂乳の凝固　：陰性。

脱脂乳のＲプトン化：陽性。

（５）硝酸塩の還元　；陰性。

（６）耐塩性　“＝１．５％ＮａＣ１添加培地でほとん
ど生育できない。

（カ　メラニン様色素の生成：陰性。

４、炭素源の利用性 （１１利用する糖　：Ｄ−グルコース （２）利用が疑わしい糖　：Ｌ−アラビノース、Ｄ−キ
シロ−ス ジトール、シュークロース ５、　ａｌ胞穂の組成 細胞壁組成成分中のジアミノビリメリン酸はＬＬ型であ
る。

以上の性状を要約すると、５Ｆ−２１９６株はストレプ
トミセス親に所属し、気菌糸端１−１：ＲＦないしＲＡ
型で、胞子表面はイボ状突起を有する。成熟した気菌糸
の色調はトレスナー及びパックス〔出り。

’ｌ’ｒｅｓｎｅｒ　ａｎｄ　Ｅ、Ｊ、Ｂａｃｋｓ　ニ
アブライド　マイクロバイオロジー（Ａｐｐｌｉｅｄ　
Ｍｉｅｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　）　、　１１巻。

５ｓｓｒｔ、　１９６３年〕のいわゆる“グレイ”（Ｇ
ｒａｙ）シリーズにＢＳ　ｔ、、裏面の生育色調はかつ
色ないし淡かつ色となる。メラニン様色素の生成は認め
られない。

以上の結果よシ、本発明者らＦｉＳＦ−２１９６株をｘ
　）　ｙプ）　ミセｘ−ｘｘビー（８ｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ　ｓｐ、）ＳＦ−２１９６と称することとした。

なお本菌株は１駕技術院微生物工業技術研究所に寄託さ
れておシ、その寄ｉ！１：香号は徴工研菌寄第７０２２
号である。

８Ｆ−２１９６株の性状は他のストレプトミセス幌ツク
ス線、放躬線及び薬品等を用いる人工的変異手段で変異
し得るものであル、いずれの変異株であっても５Ｆ−２
１９６物質の生産能を南する菌株はすべて本発明の方法
に使用することができる。

本発すｊの方法では前記菌株を通常の微生物が利用し得
る栄養物を含有する培地で培養する。栄養源としては従
来ストレプトミセｉ％の菌株の培地に利用されている公
知のものが使用できる。たとえは炭素源としてはグルコ
ース、グリセロール。

スターチ、デキストリン、水あめ、糖みつ及び大豆油等
を使用し有る。また窒素源としては大豆粉。

小麦胚芽、綿実かす、肉エキス、−！ニブトン、酵母エ
キス、コーンステイープリカー、６ｉ：ｒ＆アンモニウ
ム及び硝酸ナトリウム等を使用し得る。その他必要に応
じて炭酊カルシウム、塩化ナトリウム。

硫酸々グネシウム、塩化コバルト及び燐酸地勢の無機塩
類を添加するほか、菌の発育を助け、５Ｆ−２１９６物
質の生産を助長し、促進する有機及び無機物を適邑に添
加することができる。また必要に培養法としては公知で
ある一般の抗生物質における方法と同じく、好気的東件
下での液体培養法。

特に深部培養法が最も適している。培養に適当な温度は
２０〜３５１′Ｃであるが、多くの場＠２３〜６０″Ｃ
の範囲が望ましい。声は中性附近が適している。

５Ｆ−２１９６物質の培養生理は使用する培地や培養方
法によって異なるが、発酵槽を用いる深部培養法では通
常１〜３日間でその蓄積が最高に達する。

５Ｆ−２１９６物質は抗カビ活性も有するので、検定に
当ってはカンジダ・アルビカンスを検定菌とするペーパ
ーディスク・平板法を用いる。この検定法では５Ｆ−２
１９６物質が６．２５〜１００ｍＣｇ／−の溌＃範囲で
その対数と阻止円径との間に直線関係を示し、それぞれ
１２〜２６ＩＩＢの阻止臼（ｆａｉｎｔｚｏｎｅ）を与
える。

以下に８Ｆ−２１９（Ｓ物質の製造法の実施例を示すが
、ここに例示しない多くの変形又は修飾手段を用い得る
ことは勿論である。

実施例　１ 柚菌用培地（グルコース１．０％、殿粉１．０％。

ポリはプトン０，５チ、肉エキス０゜２％、酵母エキス
０．３％、大豆粉０．２％、炭酸カルシウム０．２％。

ｍ１７．０）２０−を１００−容三角フラスコに分注、
滅菌後、斜面培地から得たストレプトミセス・エスピー
・５Ｆ−２１９６株（９１，工研拍寄第７０２２号）の
胞子を含む菌体を１〜２白金耳接ｆ」シ、２８°Ｃで２
日間培養する。この種＠１．６−を上記８ｉ菌用培ｔｌ
ｋ８　ｏｍｔｔ５ｏ　ｏｒｎＩ！容三角フラスコに分注
Ｍｔ’Ｍしたものに接種し、２８°Ｃで２４時間振とう
培養する（フラスコ１０本使用）。伶られた種培養８０
０−を２０１の生育培地を含む３０／＝容ジャーファー
メンタ−２基に接種し、２８°Ｃにおいて通気撹拌しな
がら２５時間培養した。

生産培地の組成はつぎの通すである。水あめ２．５％、
殿粉０．５％、大豆粉２．０％、ザングレイン（サント
リー製）０．６％、酵母エキス０．１％。

硝酸ナトリウム０．１％、硫酸亜鉛０．０［］０３％、
塩化コバルト０．０００３％、シリコンＫＭ−６８・２
Ｆ（消泡剤、信越化学類）ｏ、ｏｉ％、　ＰＨ７，０（
誠拍前）。

培養終了後、１過助剤を加えて濾過し、培養８５液２５
ｔを得た。

実施例２ 実施例１で得られた培養ｒ液２５１（Ｈ６，２）を活性
炭のカラム２１に通し、有効成分を活性炭に吸着さぜた
。このカラムを水１．５ｔで洗滌したのち、５０％アセ
トン水で有効成分を溶出した。

活性区分を合併しく４．６ｔ）、減圧下で約５００ｍま
でａねした。得られた濃縮液５００−をダイアイオンＨ
Ｐ−２０（三菱化成製）のカラム２．５ｔに通したのち
水で展開した。有効成分は広範囲にわたって溶出される
が、最も活性の強い区分（約３ｔ）を減圧下に濃縮乾固
し、淡黄色の５Ｆ−２１９６物質和粉末７．５　ｆ　（
純塵約１５％）を得た。

得られた粗粉末７．５ｆのうち、５００■を少量の水に
溶解し、セファデックスＧ−１０（ファルマシア製）の
カラム（３，６ｘ　９０ｃｍ　）にかけ、水で展開し、
１５ｆずつ分取した。フラクションＡ　２ニー０〜２２
を濃縮乾固し、淡黄色粉末４５ηを得た。前述の粗粉末
の残、９７ｆもセファデックスＧ−１０にし処理し、合
計で６７０■の淡黄色粉末（純屁約８５％）を荀た。な
おここまでの減圧下での濃縮操作はすべて３５６Ｃ以下
で実施し、−１は６．０以下にならないようＩＮ−アン
モニア水を適宜加えた。

このようにして得られた淡黄色の粉末６７０　ｔｒｑの
うち２５０Ｉ！ｖを少量の水に溶解し、ダイアイオンＨ
Ｐ−２０（ファインタイプ）のカラム（２，５ｘ２９ｍ
）にのせ、水で展開し、５ｔずつ分取した。活性区分を
シリカゲル薄層（６０Ｆ−２５４、メルク製）に付し、
ｎ−ブタノール・メタノール・水（４・１・２）の溶媒
で展開したのち、マナスルランプでワンスポットを示す
区分（フラクションｊ≦１１５〜Ａ２２５）を合併し、
凍結乾燥することによシ、５Ｆ−２１９６物質の純品４
３ツを得た。

本発明の５Ｆ−２１９＜Ｓ物質を抗コクシジウム剤とし
て使用する場合は、そのまま直接経口投与するか、ある
いは飼料に添加して投与するのがよい。

飼料となシうるものとしては、例えは、配合飼料又は大
麦粉、小麦粉、裸麦粉、とうもろこし粉。

十王テ楯　＋１ｆ小白　害ｆａ会粕　ヰ　ｈ　φ、　ｅ
ｓｗ　＾　礒、　ｔｌれいしより１．かんしょ粉、その
他の殿粉類、とうふ粕、酵母、魚粉、醗酵残留物等を挙
げることができる。又、通常用いられている飼料添加物
、例えは各種ビタミン類、ミネラル類、防腐剤、酵素製
剤、たん白η、炭水化物、アミノ酸類、解熱剤。

鎮静剤、消炎剤、殺菌剤などに配合して用い−でもよい
。

有効成分の配合割合は家禽の種類、症状１退会等により
異なるが、約０．０３％〜０．０５％が適当である。試
験の結果では０．０５５％以上では体重の著しい減少が
みられるので適切でない。

木兄り」は後述の試験例に示されるごとく、家ｐ類のコ
クシジウム症に対しては極めて有効であフ侵れた抗コク
シジウム剤を提供するものである。

以下、本発明を試験例によって示すが、本発明は何らこ
れによって限定されるものではない。

試験例　１ 試駆方法二８日令の雄性白色レグホーン種のヒナを１群
１０羽用い、５群設けた。第１群〜第３群には８Ｆ−２
１９６純品粉末をそれぞれ０．０２５％。

０．０５５％及び０．０４５％の割合で均一に添加した
飼料を給与し、第４及び５群には薬剤無添加の飼料を給
与した。各飼料を給与開始の翌日に第１宕「、〜第４群
にはアイメリア・テネツ（Ｅｉｍｅｒｉａ　ｔｅｎｅ−
１１ａ　）の成熟オーシストを１別当、ｊ）　５　ｘ　
１０’個を経口的に感染せしめた。感染８日後に全群の
ヒナの体重を測定波剖検し、下記の基準に従って盲腸の
病変の強さを判定した。また体重については名群毎に増
加量をめ、非感染群の体重増加量を１００として各群の
体重増加率を９出した。なお盲腸病変の強さは角田らの
基準に従い判定した。

試駆結果：盲腸病変の程度と体重増加率を下ｈ「１の表
に要約して示した。すなわち５Ｆ−２１９６物価。

はヒナの飼料に０．０．３５％以上均一に添加して投与
したとき著明にコクシジウム症を抑圧し、がっ）Ｕ性的
な影響も示さなかった。

第３表 （盲腸病変の強さの項の数字はヒナの例数を示す）盲腸
病変：記号　病変の状態 −正常 十　＠バし −Ｈ−ｒｉｌ：度、出血点がある程度 冊−中程度、肥厚がみられるもの 補−ル度、病変がきわめて顕著なもの

【図面の簡単な説明】

第１図はＳＦ　−２１９６物質の水溶液の紫外部吸収ス
イクトルであシ第２図は５Ｆ−２１９６物質の臭化カリ
ウム錠中での赤外部吸収スはクトルである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　下記の特性を肩する新抗生物ＪＳＦ−２１９６物
   ＩＪｔ： （１）色及び性状：淡黄色の粉末で、酸にやや不安定で
   ある、 （２）元素分析値：Ｎ１５．９４％、　Ｃ４３，６８％
   。 Ｈ５，５５％。 （３１分子策：約１５００　（バイオゲルＰ−４の分子
   篩による）、 （４１融点：２２０〜２７０″Ｃ（分解）で点化、（５
   ）　紫外線吸収、Ｘ／−Ｅ’クトル：箱ａｘ　ｎｍ（Ｅ
   　；二）：２７３　（０，７８）／１１２０　（第１図
   ）、（６１赤外線吸収スはクトル：ＫＢｒ＠による吸収
   を第２図に示す、 （７）溶解性：水によく溶け、クロロホルムに（８１呈
   色反応：ニンヒドリン反応陽性。 ２、　ストレプトミセス８に屈する抗生物質５Ｆ−２１
   ９６物質生産菌を培養し、その培養物からＳＦ’−２１
   ９６物質を採取することを特徴とする５Ｆ−２１９６物
   質の製造法。 ３、　抗生物質ＳＦ　−２１９６物質を有効成分とする
   抗コクシジウム剤。