JPS6041493A - 抗菌／抗腫瘍性化合物およびその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 不発１男は、（！Ｌ−１５７７ＡおよびＣ！Ｌ−１５７
７Ｂおよびこれらの同族体（ｃｏｎｇｅｎｅｒｓ　）と
称する抗腫瘍活性を示すυｒ規な硫黄含有抗饋性化合物
の複合体、これらの薬学的に許容し得る誘導体、これら
の化合物を夷造する方法およびこれらの化合物を生産で
きる放線菌の純化さ：ｌｔた単ト准体に関する。

更に詳しくは、抗菌性化合物の０Ｌ−１５７７Ｔす合体
を製造する方法は放線菌ＡＴＯＯ３９ろ６６の純化され
た４錘離体を使用する好気性醗酵法に関する。

本発明の一見地によれば、抗菌性複合体ＣＬ−１５７７
特に化合物０Ｌ−１５７７Ａ　、０Ｌ−１５７７Ｂおよ
びこれらの同族体を生殖できるＡ’ｌ“ＣＣろ９３６６
の同定特性をイ１する放線菌の純化された単面′Ｌ体が
４ノ、′供される。

本発明の他の見地においては、ｃＬ−１５７７ＦＦ合体
の実質的な、＋！：が生産されるまで同化性炭素および
窒素源に含イｊする培地中において好気゛性栄件下でＡ
ＴＣＣ３９３６３として同定された放線菌単離体を培養
しぞして次に複合体またはＣＬ−１５７７Ａおよび０Ｌ
−１５７７Ｂを単離することによってＣＬ−１５７７複
合体、０Ｌ−１５７７Ａ　、　０Ｌ−１５７７Ｂおよび
これらの同族体を生産する方法が提供される。

本発明の他の見地によれば、抗菌および抗腫癌性の両方
の性質を示す抗菌性化合物Ｃ！Ｌ−１５７７Ａ。

ＣＬ−１５７７Ｂおよびこれらの薬学的に許容し得る誘
導体が提供される。

本発明の他の見地においては、薬学的に許容し得る担体
と一緒にした少なくとも１錘の０Ｌ−１５７７Ａおよび
ＯＬ−１５７７Ｂおよびこれらの薬学的に許容し得る誘
導体そして場合によっては追加的な抗菌性および（また
は）抗腫瘍性化合物からなる薬学的組成物が提供される
。

本発明によれば、抗菌性化合物の０Ｌ−１５７７複合体
は０Ｌ−１５７７複合体（特に０Ｌ−１５７７Ａおよび
０Ｌ−１５７７Ｂ　）の実質的な量が形成されるまで人
工的条件下で放線菌の選択された年内ｉ体ｈＴｃｃ　３
９３６３に培養しそして次に化合物の１種またはそれ以
上を単離することによって生産される。

本発明の目的に対して適当した放線菌単離体は米国テネ
シー州で蒐集した土壌試料に見出される。この微生物は
燐酸カリウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウムおよび
硫酸第１鉄のような塩およびグリセロールおよびアスパ
ラギンのような炭素源を含有する適当な寒天平板培地を
使用して土壌試料から単離される。微生物を単離するた
めに土壌試料を寒天培地上にうすくのせる前に炭酸カル
シウムで予備処理しそしてうずくのせたらすぐに有利な
温度特に６６°Ｃで培養して土壌微生物を生育させる。

寒天平板技術によって土壌試料から単離されたｃｒ、−
１５７７複合体生産性微生物は、未同定の放線菌であり
そして１９８６年５月１５日にアメリカン・タイプ・カ
ルチャー・コレク／ヨンに寄託さノしそして該寄託（歳
関しこ２いてＡＴＣＣ３９３６３として永久培養菌コＶ
クゾヨンに保管されている。０Ｌ−１５７７Ａ、０Ｌ−
１５７７Ｂおよびこれらの同族体を生殖する培養ｇ４　
ＷＰ−４４４と称されるこの微生物はまた米国ミシガン
州アンアーｌｚ−在ワーナーランハート／パーク−ディ
ビス・カルチャー・コレク／ヨンに凍結乾燥管、冷却び
んおよび土壌管中の休止培養ｉｆ４として保管されて１
．／″する。

抗菌性および抗腫瘍性の両方の性質を示す化合物０Ｌ−
１５７７Ａ　、０Ｌ−１５７７Ｂおよびこれらの密接に
関連した同族体は、調節きれた条件下に好気。

性醗酵により単離体ＡＴＯＯ３９３６３によって生産さ
れる。醗酵培地は炭素、窒素、鉱物質および生長因子源
からなる。炭素源の例はグリセロールおよび種々な簡単
な糖例えばグルコース、マンノース、７ラクトース、キ
シロース、リボースまたは他の炭水化物含有化合物す１
］えはテキストリン、殿粉、玉蜀黍およびホエーである
。醗酵培地中の炭素源物質の普通の気は約０．１〜約１
０］ｆ量−に変化する。

醗酵培地中の窒素源は有機、無機または混合した有機−
無機物質である。このような物質の例は綿実粉、大豆粉
、玉蜀黍幼芽粉、コーンステイープリカー、ディスチラ
ーズ・ドライ・ソリュブルス、落花生粉、ペプトン化ミ
ルクおよび種々なアンモニウム塩である。

鉱物質および生長因子の添加はまた化合物の０Ｌ−１５
７７複合体の生産を助ける。醗酵培地鉱物質添加物の例
は塩化カリウム、塩化ナトリウム、硫酸第１鉄、炭酸カ
ルシウム、塩化第１コバルトおよび硫酸亜鉛を包含する
。生長因子源は植株な酵母およびミルク生成物を包含す
る。

化合物の０Ｌ−１５７７複合体を生産する好適な方法は
、液内培養醗酵による。本発す］のこの実施態碌によれ
ば、醗酵成分は溶液また懸濁液として製造しそして次に
混合物をオートクレーブまたは蒸気加熱によって殺菌す
る。水性培地のｐＨを好適には約ｐＨ４〜８０間に調整
しそして混合物を滅菌後約１６〜４５℃のｌＢＡ度に冷
却する。冷却した滅菌醗酵培地を微生物で接種しそして
七の後醗＃を通気および撹拌しながら実施する。

液内（深部）培養法においては、醗酵は振盪フラスコま
たは静置タンク醗酵器中で実施する。

振盪７ツスコにおいては、通気は培地と空気の混合をお
こすフラスコの攪拌によって達成される。静Ｗタンク醗
爾、器においては、攪拌はディスクタービン、羽根車、
開放タービンまたは船舶用プロば２の形態をとり得る羽
根車によって与えられる。通気は空気または酸素を撹拌
混合物に射出することによって達成される。

化合物のＣＬ−１５７７複合体の十分な生産は普通こζ
ムらの条件下約２〜１０日の期間後に達成される。

前述したことに代る他の実施態様においては、化合物の
ｃｈ−１５７７複合体はまた微生物の固体状独の醗酵に
よって主属することができる。

以下の例は当業者が本発明を実施、することができるよ
うにするために与えるものでありぞして単に本発明の例
示である。以下の例は本発明の範囲を限定するものとし
てみなされるべきでＱ、土ない。

（ＣＬ−１５７７複合体の醗酵生産３ 例　１ 寒天プレートからの単１ｉｉｔｌ後の本発明のストレゾ
トミセス宜ｌイ重の培養菌（ＡＴＯＯ５９３６３）をＣ
工Ｍ２３培地を使用した寒天斜面培養基に移しそして２
８℃で７〜１４日を台養する。

第１イ１叱 アミデツクス玉蜀黍殿粉　１．０％ Ｎ−Ｚアミン（型Ａ）　０．２％ 肉エキス（ディフコ）　０１条 ｂｙ母エキス（ディフコ）０．１％ 塩化コバルト５水化物　０．［ＪＯ２％寒　天　２０％ 例　２ 寒天斜面培ｉ（基からの微生物生艮物の一部を使用して
ＡＲＭ　１５５０種子培地５ｍｌを含有する１８ｍｍＸ
１５Ｑｍｍ種子管に接柿する。接種したｉ子を３６℃で
６日１３Ａムする。

第５表 ＡＲｌ、Ａ　１５５０利１子培地の処方パクトー酵母エ
キス（ディフコ）０．５％グルコース１水化物　０．１
％ ｉｉＪ溶性殿粉（ディノコ）２．４チ バクトートリプトン（ティフコ）０．５％パクトー肉エ
キス（デ゛・イフコ）　０６％炭酸カル／ウノ・０，２
襲 なお炭酸カルシウムの添加前にｐＨｆ　ＮａＯＨでＺ５
にに！ｌ＠する。

例　６ （ＩＪｊ子管からの微生物生長物の一部１　ｍｅを５Ｍ
−１６生産培地５０　ｍｌを含有する３００ｍｅの７２
ツフル伺振盪フラスコに移す。

第■表 シクトース（マリンクロット召ふ’ｈ％　）　１．０　
％７アルマメジア（トンイダース化製鴇）　０．６５チ
魚　粉（ザパタ・ヘイニー社製’ｒ＋＋）　０．３５％
トルラ酵ｆ＃（セント・レギ゛ス行ｊｌｊ品）　０．２
５チ接種したフラスコ内容物を振盪（１７０ｒｐｍ旋回
振外（バ行程５釧）しながら６３℃で４　Ｂ間培咬する
。５日の期間の後に醗酵液は黄褐色であり、菌糸は外観
が粒状でありそし７て醗酵液のｐＨは約６．４である。

この醗酵液の抗腫瘍活性度を、１：１００の稀釈率で組
織培養におけるＬ１２．１０マウス白血病Ｋ］（１胞生
長（（対【７て試験した。この試験技術は加ｒ’ｔ１１
氏他のｒｃａｎｃｅｒ　ＣｈｅｍツｔｈＧｒａｐｙ　Ｒ
ｎｐｏｒｔｓ、　Ｊｐ（”、　３部第３巻第２号（１９
７２年）に詳ａｌに記載されている。比較対照栄件下に
おけるこれらのπ１１胞の生長と比較して０〜６５％の
Ｌ　１２１０白血病細胞生長割合を与える醗酵液は活性
（０チはもつとも活性）であるとみなされる。例６の醗
酵液の観察された活性度は第■表に示される通りで；！
５る。

第■表 例３からの醗酵液の抗腫瘍活性度（ｒ、　１２１０マウ
ス白血病細胞に対して測定） ８ ＩＩ　１０　３１ 粗製醗酵液はまた寒天ディスク法を使用して種々な微生
物に対する抗腫瘍活性度について試験した。粗製醗酵液
はアルカリゲネス・ビスコラクチス（Ａｌｃａｌｉｇｅ
ｎｅｓ　ｖｉｓｃｏｌａｃｔｉｓ）　、バチルス・サブ
チリス（Ｂａｃｉ：Ｌｌｕｓ　ｅｕｂｔｉｌｉｓ）　、
ミクロコツカス・ルテウス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｅ　
１ｕｔｅｕｅ）、ブランハメラ・カタルハリス（Ｂｒａ
ｎｈａｍθ１ｌａｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）およびスタ
フイロコツカスーオーレウス（ＳｔａｐｈｙｌＯｃｏｃ
ｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）に対して活性であることが判っ
た。

例　４ 培養菌の懸濁液約１　ｍｌを含有する冷却びんを使用し
て２λのバッフル付振Ｍ１、フラスコに含有されている
１９Ｄ−０５種子培地６００ｍｅに接種する。

接種、したフラスコ内容物は１５０　ｒｐｍの旋回振盪
機上で６３℃で７６時間培養する。

第７表 Ｎ−Ｚ　ケース（フムコ・シェフイールド’４．ｋｊＪ
Ａ匍”　５”炭酸カルシウム　０２％ ７６時間後に、柚子フラスコの内容物ｉ　５Ｄ−０５種
子培地１６λを含有する３０に宕不銹鋼の醗酵器に滅菌
的に移す。接種した醗酵器の内容物を３０Ｏｒｐｍで撹
拌しながらそして１容量部／容鼠部／分の速度で空気を
導入しながら３６℃で２４時間培養する。

例　５ 例４からの微生物生長物を使用して２００ガロン（７５
７λ）容の不銹銅の醗酵器に含有されている′ＢＤ−０
５種子培地７５ガロン（２８４λ）に接押する。培地は
１２１℃で４０分蒸気加熱することに上って殺菌する。

醗酵器および内科物を６３℃に冷却しそして次に例４か
らの醗酵液約１６２を接種する。得られた混合物を１５
５　ｒｐｍでＪｒｔ拌しながらそして０，７５容量部／
容量１〜１５／分の速度で空気を導入しなから６７）℃
で約２０時間培養する。

例　６ 例５からの微生物生長物を使用して２０００ガロン（７
５７１℃）答の不銹錦の醗酵器に含有されている５ＩＡ
−１２１培地約１３００ガロン（４９２１λ）に接種す
る。培地は接不ｊ＋ｌ　ｌ再に１２１℃で４０分蒸気で
加熱することによって殺ｕ１する。殺菌後に醗酵器？よ
び内容物を６３℃に冷却し、接種しそして１２５　ｒｐ
ｍで撹拌しながらそして０．７５容最部／容景部／分の
速度で空気をｉｊ７．入し、ながら５日培養する。

５Ｍ−１２１培地は大豆粉、粉砕した黄色玉列黍、粉砕
した小麦、玉蜀黍グルテン粉、小麦粗粉、乾燥したミル
ク生成物、ＢＨΔで防腐し／ξ動物脂肪、粉砕した甜菜
パルプ、炭酸カルシウム、／ユクロース、脱水むらさき
うまごやし粉、燐酸二カルシウム、醸造乾燥酔Ｒ（ｂｒ
ｏｗＯｒｌｓ　ｄｒｙ　ｙｅａＳｔ入塩、ビタミンＢ１
２補助物、リボフラビン補助物、パントテン酸カルシウ
ム、ナイアシン、コリンクロシイド、メナジオンナトリ
ウムビサルファイト（ビタミンに活性源）１葉酸、ピリ
ドキシン塩１ン塩、ノ′アミン、アスコルビン酸、ビタ
ミンＡ補助物、Ｄ活性化動物ステロール（ビタミンＤ３
源）、ビタミンＥ補助物、炭酸鉄、硫酸鉄、沃素酸カル
／ラム、酸化第１マンガン、１１を化銅、炭酸コバルト
、酸化亜鉛からなる供給混合物の１．７５重゛］：チか
らなる。

Ｃ！Ｌ−１５７７ｔｉｔ合体の生産は醗酵ザイクル全通
してり、　１２１０マウス白血病細胞に対する試瑣内試
ｊ；１１およびミクロコツカス・ルテウスに対する抗微
生物活性によって監視する。更にｐＨおよび沈降襲のよ
りなｎ（酸パラメーターを醗酵す・イクルを通して記録
する。データは第■羞に示される通りである。

１１６時間の醗酵後に、醗酵液１１４０ガロン（４３１
５℃）を収穫しそして化合物のａＬ−１５７７複合体を
以下に記載するようにして単ＲＩＬする。

［（！Ｌ−１５７７複合体の化学的単離３例、７ 例６からの醗酵液のｐＨを６．２に調整しそして酢酸エ
チル３００１１と共に約２時間撹拌する。

混合物をセライ）５４５濾過助剤６８　Ｋ９で処理しそ
して次に７９ｃｒｎのプレートおよびフレーム圧Ｆ機を
通して濾過する。ｐ液を放１なせしめそして分離した下
部水性層を取出しそして更に酢酸エチル２０７０Ｑで抽
出する。有４ａ溶液を合しそして真空濃縮して２０μの
最終容量を得る。５℃で一夜放置することによって、約
９０［１ｍＡの下部層を分離する。この層はＣＬ−１５
７７複合体の微量のみを含有していることが判ったそし
てこれは捨てる。

約１９℃の上部層をセライト５４５ｆ過助剤を通してＩ
濾過して不溶軸物質感−除去しぞして次に水２．１２で
洗浄する。酢酸エチル溶液に撹拌しながら水／メタノー
ル（５０：５０　）混合物１５ｐ。

音訓、・也そして次に石油ニーデルＣ＃：；点６０〜６
０℃）４５℃を加える。得られｆＬ２相混合物を放置せ
しめそして上部有機層を除去しそして水／メタノール（
５０：５０）混冶ｌ吻１５ｐ、で２回抽出する。水１牛
メタノール抽出ｉ′疲をむしぞし′Ｃ真空蒸発器中でＪ
尉ｔして乙２の層ト）λにする１、λ・Ｘ光器の内壁上
に残った油状残留物を酢１５クエチル５℃に溶解する。

３μの（・τミ縮１１勿Ｊ：酢酸ニゲ゛ル１．５２で３
回抽出しそして４１１１シ１のＩ’ｍ　ｒ＋’ｔエチル
溶液を合しそして無水の硫酸ナトリウム約３　Ｋｆ上で
乾燥する。乾燥剤をｐ去しそして凸１ミ酸工、Ｆル６２
で洗浄する。Ｐ液および乾燥剤洗液をイ、）・シそして
得られた溶液を予めメタノールで洗浄しそしてｔｂｒｌ
エチルで乎衡化し１こ４Ｕμｍ１１のアミノプロピル−
シリカケ゛ル（′ｔブーリテイケム・・ｒンターナ／ヨ
ナル社製品）２．５〜を含有するクロマトグラフィーカ
ラム（内径１５ｃｒｎ）に通す。

溶離液のはじめの４μはＣＬ　１５７７複合体を含有し
ていないことが判った。この溶離液は捨てる。ノロマト
グンフイー力うム上に吸着した物質を匪戚エナル３６．
　Ｉ　Ｊｌｔの全容量で溶離し七して溶離液を敵紬しで
約６００ｍ１の容量にずり。溶離液中の少量の不俗性物
賀をσｉ去しそして１液ｒ石油エーテル（沸点６０〜６
（Ｊ℃）５にで処理１して０Ｌ−１５７７複合体１２．
７４Ｍを沈殿させ０゜この固体をメタノール３００ｍｇ
と共に丁シつぶしそし１不溶性物貝を一過によって除去
する。

ｐ液を水１３０ｒｎｌでうすめそして微量の不溶性物質
を１云しで”Ｆ７＆Ａ”と称号るＰ　ｉＲｆ：得る。

７　ｃｍ　（内径）の不銹鋼のクロマトダランイーカシ
ムに４０μｍの０１８−シリゲル（アナリテイケム・イ
ンターナショナル社製品）　１．９　Ｋ９を乾燥充填し
そし′Ｃ次にメタノール、メタノール／水（５０二５０
　）、メタノール／アセトニトリル１０．０５Ｍ酢酸ナ
トリウム（２０：１０ニア０）緩衝液（ｐＨ５，１）そ
して最後にメタノール／水（７５：２５）で順々に洗浄
する。Ｐ液Ａをこのカラムに充填しそしてメタノール／
水（７５：２５）１７μ次でメタノール１．６μで溶離
する。０Ｌ−１５７７Ａおよび０Ｌ−１５７７Ｂは最後
の１．３　Ｉｌ、のメタノール溶Ｓ液フラク７ヨンに集
めら些る。

メタノール７ラクシヨンを真箪濃縮して油状残留物を得
、これを酢酸エチル３０ｒｎｌにとる。

酢酸エチル溶液を石油エーテル（沸点３０〜６０℃）３
００ｍｌで処理してｌ：！Ｉ、−１５７７Ａおよび０Ｌ
−１５７７Ｂを含有する混合物６．４１を沈殿させる。

〔ＣＴＪ−１５７７Ａの化学的単離〕 例　８ 例７からの（１！Ｌ−１５７７Ａおよび０Ｌ−１５７７
Ｂの生成り勿（３，４ｒ）をメタノール４０−に溶）祥
する。得られた溶液を水１０ｍｇでうすめそして溶離剤
としてメタノール７０．０５Ｍ　ｈｓ　酸アンモニウム
（８０：２０）緩衝液（ｐｌＬ６．８　）を使用して１
）ＩＪ述した７ｃｒｎ（内径）の０１８−シリカゲルカ
ラム上でクロマトグラフィー処理する。流速は約２００
ｍｅ　７分に調節しそして溶離液は２５４　ｎｍにおけ
る３１セ外線吸収ｔ　Ｉ１１定することによって監視す
る。

はじめの主たる紫外吸収フラクションは２．５のに′値
で溶離され（１，１）そして「溶液Ａ」と称す。Ｋ′の
値は弐に’　−（Ｖｅ−Ｖｏ）／Ｖｑ　（式中、■０は
空隙容量２．０２でありそしてＶｅは極大紫外線吸収で
溶離した容量である）によって与えられる。

溶液Ａを真空濃縮して１００ｍｇの容量となしそして濃
縮物をクロロホルム４０ゴずつで２回連続して抽出する
。クロロホルム抽出液を合し、無水の硫酸ナトリウム上
で乾燥しそして濃縮して２５ｍ１の容量にする。石油エ
ーテル（沸点６０〜６０℃）３００＋＋＋ｅを添加して
ＣＡＬ−１５７７Ａと称する固１本生成物の沈殿とおこ
さする。

この物Ｊｔ　ｆメタノール／水（６５：３５）６ｍ／！
にｒｄ　Ｍ　Ｌそして溶離剤としてメタノール／アセト
ニトリル１０．［１５Ｍ酢酸アンモニウノ、（５５：２
０：２５）ｐ衝液（ｐＨ６，８）　ｔｌｌｉ用し？ＪＰ
ｒｅｐＰＡＫ−５００ｅ　０−１８カラムを備えたＰｒ
ｅｌ）　５００　ＬＣ装置鼠（ウオ・−ターズ・インス
トルメンツ社製品）を使用しで再り０妥トゲラフイー処
理する。

溶離液はその屈折率を測定することによって監視する。

ａＬ−１５７７Ａを含４１するフジク７ヨンはに’　＝
　４．５で溶離する。このフジクゾヨンをイ震縮して８
５７となしそしてクロロホルム３０ｒｎＩＶずつで６回
抽出し、これらの抽出液を合しそして無水硫酸ナトリウ
ム上で乾燥する。ｎ−ヘキサン２５０ｍ１を乾燥および
沖過した溶液に添加してＣＡＬ−１５７７Ａ　Ｏ，２４
２Ｆを沈殿させる。このものは高圧液体クロマトグラフ
ィー分析によって９５多純度であることが判った。

ＣＡＬ−１５７７Ａの化学的および物理的性質は第■表
に示す通りでありそしてこの化合物の紫外線、赤外線お
よび２００　ＭＨｚプロトン磁気共鳴スはクトルはそれ
ぞれ第１Ａ、ＩＢおよび１０図に示す通りである。

（０ｈ−１５７７Ｂの化学的単離３ 例　９ 例８に記載したクロマトグラフィーカラムから溶離する
第２の主要な紫外線吸収７ジクゾヨンは３．５のに′で
溶離され（２，Ｏｊｌ＋）そして「溶液Ｂ」と称する。

溶液Ｂを真空濃縮しセして註縮物をクロロホルム４０ｍ
ｇずつで２回連株的に抽出する。クロロホルム抽出液を
合し、無水の硫酸ナトリウム上で乾燥しそして濾過する
。乾燥した溶液を濃縮して２５　ｍｌとなしそして石油
エーテル（沸点６０〜６０℃）３００−を添加して０Ｌ
−１５７７Ｂ　０．４５６ｆを沈殿させる。

この物質の一部（０，４３ｒ　）をメタノール／水（６
５：３５　）３ｒｄに溶解しそして溶ｈｊＬ剤としてメ
タノール／アセトニトリル７０．０５Ｍ酢酸アンモニウ
ム（５５二２０：２５）緩丙液（ｐＨ６，８）を使用し
て例８に記載したカラム上でクロマトグラフィー処理す
る。溶離液はその屈折率を測定することによって監視す
る。ａｈ−１５７７１Ｌ　１．８！１のフラクション中
に′＝Ｚｓで溶離する。この溶液全濃縮して１００ｍ／
！となしそしてクロロホルム３５　ｍｅずつで６回抽出
する。クロロホルム抽出液を合し、乾燥しそして濃縮し
て２０ｍｅにする。

シクロヘキサン３００ｒｎ１．を添加してｅＬ−１５７
７Ｂ　Ｏ，３１Ｊ？を沈殿させる。このものは高圧成体
クロマトグラフィー分析によって９５％純度であること
か判った。

ｃＬ−１５７７Ｂの化学的および物理的性質は第■表に
示す通りでありそしてこの化合物の紫外線。

赤外線および２００　ＭＨｚプロトン磁気共鳴スペクト
ルはそれぞれ第２Ａ図、Ａ（ｒ　２Ｂおよび第２Ｃ図に
示す通りである。

例　１０ １２．７＋ｒｍの紙ディスクをａＬ−１５７７Ａまたは
０Ｌ−１５７７Ｂの５００１１１　／ｍｅ溶液で飽和さ
せ、それぞれの飽オ■しだ紙ディスクを特定の微生物で
接種した悲天培地を含有する生物試駐皿上にのせ、６７
℃で１６時間培差しそして得られた生長阻止帯域の直径
を測定−ｊ゛ることによって０Ｌ−１５７７ＡおよＵ：
ｃｒ、−１５７７Ｂの抗微生物活性度を評価する。これ
らの試、験に対するデータは第■表に示す通りである。

第■表 ０Ｌ−１５７７Ａおよび０Ｌ−１５７７Ｂの抗微生物活
１鍍ツメファシェンス アルカリゲネス・ビニ７　ＡＴＣＯ２１６９８ＴＳＡ　
３４　３１スラクチス ／号しルス・ラフ４介リス　ＰＤ　０４５５５　−＝ｒ
インン　２８　２７バチルス・サブチリス　ＰＤ　０４
５５５　ＡＭ−２１３２３３バｂルス・サブチリス　Ｐ
Ｄ　０４５５５　ＡＭ−２２３４２８ノもυレス・ラフ
へ升リス　ＰＤ　ＨＩ３　ＡＭ−１９２１２５ノ勺リレ
ス・火ゾチリス　ＰＤ　Ｍ２Ｓ　ΔＭ−１９６０３０エ
フエリヒフ・コリー　ＰＤ　０４５２／ｌ　ＡＭ−１８
１７２０工／エリヒア・コリー　ＡＴＣＣ２５９４７Ａ
ＩＡ−１８１７１７エ／エリヒア・コリー　ＰＤ　０４
８６３　ＡＭ−２３２３２２工／エリヒア・コリー　Ｐ
Ｄ　０４８６５　ＡＭ−２４２２２２ミクロコツカスリ
Ｗ　ＰＤ　０５０６４　ＰＡｓ　３０　２ｑ１ンス フエーカリス ツラロビス−７，＋ｉｚビダ　ＰＤ　Ｍ１３９０　１２
０　１７　１７＊ＡＴＣＣニフーＪメリカン・タイプ・
カルチャー・コレクションＰＤ　＝−ワンナーランバー
ト／パークデビス・カルチャー・コレクション 例　１１ マウスにおけるＢ１６色話癌に対するＯ：Ｌ−１５７７
Ａおよびｃｈ−１５７７Ｂの抗Ｉｌ！に瘍活性度を［Ｃ
ａｎｃｅｒＣｈｅｒｕＯｔｈｅｒａｐｙ　ｆ＜θｐｏｒ
ｔｓＪ第６部第６巻第り〜８７頁（１９７２年）に記載
されている試験を使用して評１曲し７た。これらの試１
安からのゲータは第■表に示す通りである。それぞれの
場合においてマウスは０日で腹腔内的に感染させそして
試１験の１日、５Ｂおよび９日に（！Ｌ−１５７７Ａお
よび１５７７Ｂの伏用介を与えた。データは′ｒ／ａ値
で示す。

第へ表 １０　毒性　２０６ ５　１９６　１６０ ２゜５　２０１　１７２ １．２５　１９１１１１　１ｉ 例　１２ マウスにおけるＰ　３８８１Ｊンパ性白血病に対するＣ
ＴＪ−１５７７Ａおよびｃｒ、−１５７７Ｂの抗腫瘍活
性度を［０ａｎｃｅｒ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐ７　Ｒ
ｅｐｃｒｔｓ　Ｊ　６Ｂ　３部第３巻第　１〜８　／　
頁　ＣＶ／７２’、β　ン　（ｆこ　ｆｉｒ：　”Ｋ砥
　さ　れ　て　しへ　る　；；入鋏を使用して計画した
。これらの試駆からのブ′−タは第Ｘ表に示す通りであ
る。マウスはＤ　Ｈに腹腔内的に感染しそして次に試、
ｌ倹の１８．５日および９日に０Ｌ−１５７７Ａ　ｒ、
−よひｅＬ−１５７７Ｂの１吏用量を与えた。

第Ｘ表 １６　毒性　− １０毒性 ８　１６３　− ５　−　１６０ ４　１９２　− ２．５　−　１７２ １．６　−　１４４ 抗菌性化合物０Ｌ−１５７７Ａおよび０Ｌ−１５７７Ｂ
およびこれらの同族体は、相容性の薬学的に許容し得る
担体と一緒にした薬学的組成物の形態で抗微生物および
抗腫瘍活性について使用することがで与る。これらの組
成物はまた他の抗微生物および（または）抗腫瘍剤を含
有することかでさる。組成°物は所望の投与方法に対し
て適当した任意の薬学的形態で製造することができる。

このような形態の例は錠剤、カプセル、ピル、粉剤およ
び顆粒のような経口投与用の固体形態、溶液、尾濁液、
シロップお℃びエリキサ−のような局処または経口投与
用の液体形態および滅菌溶１ｆダ、懸澗液またはエマル
ジョンのような非経口的投与に適した形態を包含する。

抗微生物剤として使用するためには、組成物の１種また
はそれ以上の活性成分の濃度が抑制されるべく要求され
る特定の微生物の般小阻１−ヒに対して必要な濃度を超
えるように組成物を投与する。

【図面の簡単な説明】

第１Ａ図、第１Ｂ図および第１ｃ図はＣＬ−１５７７Ａ
と称する化合物のそれぞれ紫外線スはクトル（メタノー
ル中）、赤外線スペクトル（ＫＢｒ　中）および２００
ＭＨｚプロトン磁気共鳴スペクトル（ＣＤＣｌ５中）で
あり、そして第２Ａ図、第２Ｂ図および第２ｃ図はＣＬ
−１５７７Ｂと称する化合物のそれぞれ紫外線スペクト
ル（メタノール中）、赤外線スペクトル（ＫＢｒ中）お
よび２００ＭＨｚプロトン磁気共鳴スはクトル（ＣＤＣ
ｌ３中）である。 ％許出願人　ワーナーーランバート・コン・ξ二−第１
頁の続き ｏＩｎｔ、ＣＩ、’　識別記号　庁内整理番号０発　明
　者　テイム・エイ・スミツ　アメリカ合衆国ミカ　ス
スティトスト１゜ ＠発明者　ショセフイノ・ヒー・　アメリカ合衆国ミタ
ナツク　ドライブ５２８４ シガン州（４８１０４）アンアーパー、サウ１−１−１
１１１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）化合物０Ｌ−１５７７Ａが （ａ）　１３５６ａ、ｍ、ｕ、の分子量（ＦＡＢ質量分
   光測定）、 （ｂ）　２１５ｎｍ（ａ＝２７．４）、２５２ｎｍ（ａ
   ＝２８．２）、２８２ｎｍ（ａ＝１６．７）および３１
   ８ｎｍ（ａ＝１１．６）で吸収極大を示すメタノール溶
   液中の紫外線吸収スはクト　ル　、 （Ｃ）　３４５ｆ］、２９７０．　２９３０　、１６９
   ０　、１６３０、１６１０．１６００、　１５２５　、
   １４６５．　１４５０．　１４１０．　１３７０．１３
   １０、１２５０．　１２１０．　１１５５　、１０７５
   　、１０２０．９９０．９０５．８８０．８５５．７９
   ５．７８０および７５０釧−１で主要吸収ピークを示す
   赤外線吸収スズクトル（臭化カリウムペレット）、 （ｄ）　１．１１　（二重線）’ｓ　１．３３　（二重
   線）、１．３５（二重線）、１．４１（二重線）、１．
   ５６（多重線）、１．９５　（二重線）、２．１２（多
   重線）、２．１６（単一線）、２２２釧多重線）、２３
   ０（多重線）、２．５２　（二重線の二重線）、２．５
   ３（単一＃）、ｚ７５（多［ｔｉｌ）、３．４２（単一
   線）。 ３．４〜４．２（多重線）、五８１（単−腺）、６．８
   ９（単一線）、３．９８　（単一線）、４．２１　（単
   一線）、４５７（二重線）、４．６７　（多垂線）、４
   ．９７　（二重線）、５．４０　（多重線）、５Ａ９（
   二重線）、５５０（多重線）、５．７０（二Ｍ　＃ｉ！
   　）、５．８．２　（二重線）、６．００　（二重線）
   、６．ｊ５（広い単一線）、６．２６　（単一￥＠）％
   　６．６０　（二重線の二重線）、Ｚ４９（単一・鍾）
   、８．６０（単一線）および１１．７１（単一線）、〔
   テトラメチル７ランからダウンフィールドしたｐ、ｐ、
   ｒｎ、：）でシグナルを示す２００　ＭＨｚプロトン磁
   気共鳴スペクトル（ＣＤＯｎ５）、 （ｅ）　旋光度〔α：］Ｄ＝　−１９８°（Ｃ１（０１
   ５中ｃ　１．２５）および ω）元素分析値０５３．２６％、Ｈ６，０４頒、Ｎ４８
   ２％および８８．９８頭 によって特徴づけられそして化合物０Ｌ−１５７７Ｂが （ａ）　２１５ｎｍ（ａ＝２６．８）、２５２ｎｍ（ａ
   ＝２６．５）、　２８２ｎｍ（ａ＝１６．１）および３
   ２５ｎｍ（ａ＝１１．９）で吸収極大を示すメタノール
   溶液中の紫外緑吸収スはり！・ル、 （ｂ）３４５０．２９７０．２９３０．１６９０．１６
   ６０．１６１０．１６００．１５２５．１４６５．１４
   ５０．１４１０．１３７０．１３１０、１２５０１１２
   １０．１１５５．１０７５．１０２０．９４５．９０５
   ．８８０．８５５．７９５．７８０および７５０ｆｆｌ
   −’で主要吸収ピークを示す赤外線吸収スペクトル（臭
   化カリウムペレット）、 （ｃ）　１．１１　（二重線）、１．１２（二重線）、
   １．２４（二重線）、１６５（二４ｉ　ｆ、宇）、１．
   ４１（二１Ｒ線）、１．４３　（単一１ｉ３１！　）、
   １．４６　（多重線）。 ２旧口　（多重線）、　２．１３（単−釉Ｊ）、　２１
   ４（多重１１産）、２．ろ１（多電ｌｉ、Ｊ１１）、２
   ．５２　（単一１）・“′Ａ）、２５６（多重線）、２
   ．７５　（多重性）、３．４２（単一線）、３．４〜４
   ．２（多却、線ン、　３．７９　（単一線）、３．８９
   　（単一線）、３．９９　（単一線）、４．１９　（単
   一線）、４．４９（多重１噸）、４．５６　（二重線）
   、４．６６　（二重縁）％　４．７７（多重れり、４．
   ９７Ｃ二隻行が）、５．３５　（広い単一線）、５．４
   ７　（多重線）、５．７２　（二Ｍ１り）、５．８３　
   （二重線）、５．９５　（二重線）、６．２１　（多重
   線）、６．２４（単一線）、６．５９　（二重線の二重
   線）、Ｚ６１（単一線）、８．６４　（単一線）、およ
   び１１．５８（単一線）〔テトラメチル７ランからダウ
   ンフィールドしたｐ、　ｐ、ｍ−３でシグナルを示す２
   ００　）Ａｓｚプロトン磁気磁気共鳴１９スペクトルＤ
   ＯＲｇ）、 （ｄ）　旋５’ｅ度〔Ｃす、ｐ＝　１８９６（ＣＨＣＱ
   ｓ　中ｃ　Ｏ，６３）　オよび （ｅ）　元素分析値Ｃ５４，８Ｌ％、Ｈ６，３３％、Ｎ
   　３．８６％、Ｓ　８．９６％ によって’ｉｌ　’Ｑづけられる０Ｌ−１５７７Ａ　オ
   よＯＣ！Ｌ、−１５７７Ｂ　［およびこれらの同族体〕
   と称する硫黄含有抗菌性化合物の複合体。 ２）　ｉ″８１１記特１’ｐ　請求の範囲第１項によっ
   て定−；′通されるような化合物０ＴＪ−１５７７Ａ　
   。 ６）前記特許請求の範囲第１項によって定ガ１されるよ
   うな化合物０Ｌ−１５７７Ｂ　。 ４）薬学的に許容し得る相体と一緒にした少なくとも１
   種の前記特許請求の範囲第１項におけるように特徴づけ
   られた化合物０Ｌ−１５７７Ａ。 訪導体からなる薬学的組成物。 ５）　ｃ丁、−１５７７複合体の実ム的な量が生産され
   るまで同化性の要素および紮素綜を含有する培養培地中
   で好気性条件下で単所り体ＡＴｅｅ−３９３６３として
   同定されたストンブトミセス菌株の百４株を培養しそし
   てその後肢複合体、ＣＬ−１５７７Ａ化合物またはＣ！
   Ｌ−１５７７Ｂ化合物を単ス１ｔすることからなるｃ！
   Ｌ−１’５７７抗菌性複合体特に（Ｌ−１５７７Ａ。 ａＬ−１５７７Ｂおよびこれらの同族体を生産する方法
   。 ６）菌株が同化性の炭紫および望素源を含イＪする培養
   培地中の好気性１１ｉ２酵下で抗菌性０Ｌ−１５７７複
   合体、ＯＬ−ｊ５７７Ａ化合物および０Ｌ−１５７７Ｂ
   化合物およびこれらの同族体を生産できるようなＡＴＯ
   Ｏ３９３６３の同定特性を有する放線菌の純化された単
   離体。