JPS6034980A - ビンブラスチンの抱合体およびその製法ならびにその治療における使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ビンブラスチンおよびその公知の誘導体の幾
つかと特に蛋白質との新規抱合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ
ｓ）およびそれらを得る方法ならびにそれらの抗腫瘍剤
としての使用に関する。本発明は、化学療法において活
性な幾つかの中１ｄｊ体及びそれらのアミン誘導体にも
関する。

ビンブラスチンおよびその誘導体の幾つか、特にビンク
リスチン（ｖｌｎｃｒｉｓｔｌｎｅ　）またはビンデシ
ン（ｖｉｎｄｅｓｉｎｅ　）は、蛋白質、例えばアルブ
ミンまたは種々の免疫グロブリンにすでにカップリング
されておシ、その結果、カップリング生成物または“抱
合体”と呼ばれる化合物が得られる。

下記の参考文献を特に参照することができる。Ｊ。

Ｄ、ティーン（Ｊ、Ｄ、　Ｔｅａｌｅ　）、ジャケリｙ
Ｍ、クラウ（Ｊａｃｑｕｅｌｌｎｅ　Ｍ、　ＣＩｏｕｇ
ｈ　）およびＶ、マーク（Ｖ、　Ｍａｒｋ　）、Ｂｒ、
Ｊ、Ｃ目ｎ、　Ｐｈａｒｍａｃ、　ＩＩ　、／乙ヲー／
７２、／　９７　？　；　Ｃ，Ｈ，Ｊ、フォード（Ｃ，
Ｈ，Ｊ。

Ｆｏｒｄ　）　、Ｃ，Ｅ−ニュ？　ン（Ｃ，Ｅ、　Ｎｅ
ｖｗｎａｎ　）、Ｊ、Ｒ，ジョ７ソｙ　（Ｊ、Ｒ，Ｊｏ
ｈｎｓｏｎ　）　、Ｃ，Ｓ、ウッドハウｘ　（Ｃ，Ｓ、
　Ｗｏｏｄｈｏｕｓｅ　）、Ｔ、Ａ、リーダー（Ｔ。

Ａ、　Ｒｅｅｄｅｒ　）、Ｇ、Ｆ、　＋＝コンラット　
Ｇ、Ｆ、　Ｒｏｗｌａｎｄ）。

Ｒ，Ｇ、シモンズ（Ｒ，Ｇ、　Ｓｉｍｍｏｎｄｓ　）、
Ｂｒ、Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ。

≠７．３３−ダコ、１９ｇ３；Ｍ、Ｊ、エンブレトン（
Ｍ、Ｊ、　Ｅｒｒｂｌｅｔｏｎ　）、Ｇ、Ｆ、　ローラ
ンド（Ｇ、Ｆ。

Ｒｏｗｌａｎｄ　）、Ｒ，Ｇ、シモンズ（Ｒ，Ｇ、　Ｓ
ｉｍｍｏｎｄｓ　）、ε、ヤコノズ（Ｅ、　Ｊａｃｏｂ
ｓ　）　、Ｃ，Ｈ，−ｑ−＝　スデン（Ｃ，Ｉ−１，Ｍ
ａｒｓｄｅｎ　）、Ｒ，Ｗ、／％＃ドウイｙ　（Ｒ，Ｗ
。

Ｂａｌｄｗｉｎ　）、Ｂｒ、Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ　、　
’Ｉ　７、ｔ１３−ｑｑ（１９ｇ３　）、Ｊ　、Ｒ，ジ
ョンソｙ　（Ｊ、Ｒ，Ｊｏｈｎｓｏｎ）、（：、Ｈ，Ｊ
、　７　、ｔ−ド（Ｃ，Ｈ，Ｊ、　Ｆｏｒｄ　）、Ｃ，
Ｅ、＝−＝−−マｙ　（Ｃ，Ｅ、　Ｎｅｖｖｎａｎ　）
、ｃ、ｓ、ウッド／％ウム（ｃ、ｓ。

Ｗｏｏｄｈｏｕｓｅ　）、Ｇ、Ｆ、　ローランド（Ｇ、
Ｆ、　Ｒｏｗｌａｎｄ）、Ｒ，Ｇ、シモンズ（Ｒ，Ｇ、
　Ｓｌｍｍｏｎｄｓ　）、Ｂｒ、Ｊ。

Ｃａｎｃｅｒ　、　’Ｉ　４ｔ　、ｌＩ　７．二（−ｔ
ｔｑｓ　、／９ｇ／　；　工　１ノリリー（Ｅｌｉ　Ｌ
ｉ１ｌｙ　）、ヨーロツ／ぐ特許出願公告第Ｓ６．３ユ
２．ユバ０７　、ｇ２　；　Ｒ，Ａ、コンラット。

（Ｒ，Ａ、　Ｃｏｎｒａｄ　）、Ｇ、Ｊ、クリチン（Ｇ
、Ｊ。

Ｃｕ１ｌｉｎａｎ　）、に、ガーゾｙ　（Ｋ、　Ｇｅｒ
ｚｏｎ　）、Ｇ、Ａ。

デフ　−（Ｇ、Ａ、　Ｐｏｏｒｅ　）、Ｊ、　Ｍｅｄ、
　Ｃｈｅｍ、　２２．３９／、　ｌデフ９゜ これらのビス−インドール誘導体のカップリングは、免
疫学的反応剤を開発する目的をもってだけではなく、特
により宿性で、より選択性でかつニジ低毒性の抗腫瘍物
質の製造の目的をもって実施された。

この最後の点に於て、蛋白質と他の抗腫瘍剤との数多（
の抱合体が現在研究されつつある。このことは、抗体と
りシン（ｒｉｃｉｎ　）の断片との抱合体またはアルブ
ミンとメントレキセート（ｍｅｔ　ｈｏ　ｔｒｅｘａｔ
ｅ　）との抱合体にあてはまる〔仏国特許出願第コ、’
１３７，２／３号、Ｃ，Ｍ、インダストリーズ（Ｃ，Ｍ
、　Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ　）　；お工びＢ、Ｃ，Ｆ。

チｚ　−（８，Ｃ，Ｆ＋Ｃｈｕ　）、ｓ、ｓ、ホーウェ
ル（Ｓ、Ｂ。

Ｈｏｗｅｌｌ　）、Ｊ、　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏ
ｇｙ　ａｎｄ　Ｅｘｐ。

Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｌｃｓ−１２／９Ｌ２１．３ｇ９−
３９３．１９ｇ１　）。

公知の抗腫瘍剤にカップリングさせたモノクローン抗体
、特にヒト起源のモノクローン抗体がよｋ　ｌ＆Ｗ　Ｏ
＋ｌ　Ｉｆ　哨針　＆　／７−１　！　ｍ　／７’ｌ　
−１−’　ｆｆ　Ｗ　−Ａ　４イ　１八　ヌ、さらに、
ビス−インドールアルカロイドとツブリン（ｔｕｂｕｌ
ｉｎ　）とのｌ：ｌ錯体の使用および評価がベルギー国
特許第ｇ左弘、θ５３号中に記載されている事実が参照
される。ある場合には、対応する遊離アルカロイドより
も低毒性およびよυ顕著な化学療法活性が得られている
。

本発明は、特に、ビンブラスチン骨格の炭素ｔのヒドロ
キシル基から誘導されるエステル基によってカップリン
グを行うことを特徴とする、ビンブラスチン抱合体また
はビンシラスチンの誘導体と蛋白質または蛋白質の断片
またはアミノ酸または単純アミンとの抱合体（ｃｏｎｊ
ｕｇａｔｅｓ）に関する。

４−ｏ−デアセチルビンシラスチンの誘導体は、例えば
、アミノ酸とＣ−３に於てカップリングされるビンデシ
ン、グー０−デアセチルビンブラスチンまたは４ｔ−ｏ
−デブセチルデオキシー弘′−ビンブラチンまたはアミ
ノ酸のビンブラスチン−２３−オイル誘導体であること
ができる。行に、本発明の化合物は下記の一般式に対応
する。

３１ Ｒ２ 上記一般式中、Ａは一〇〇〇Ｈ２−または−Ｃｏ（ＣＨ
２）、−ｃｏ−（コ＼テｎは／から左まで変わる）のよ
うな１腕”を示し、Ｒ１は随意に変性される蛋白質基を
示し、Ｒ２はメトキシ基またはアミノ基またはアミド型
の結合によって結合されかつエステル基が７〜６個の炭
素原子を含むα−アミノ酸エステル基を示し、Ｒ３はお
のおのの場合に２つの可能な立体配置に於ける水素原子
またはヒドロキシル基を示し、かつその無機酸または有
機酸との付加塩を含む。

アセテート型またはヘミスクシネート型またはへミグル
タレート型あるいは高級同族体型の腕は、本発明の化合
物を特徴づける活性を保持しながら、例えばアルキルま
たはアミノ基で置換され得ることは言うまでもない。

先行技術に於ては、結合は、ビス−インドール誘導体の
２３−ビスグラスチノイル官能に於けるアミド結合によ
って行われた。駕くべきことには、本発明者らは、結合
がＣ−ユ３ではな（Ｃ−４で行われるならば、抗腫瘍活
性をより良く保存することができることを発見した。

本発明の誘導体は、第１段階に於丁、クロロアセチル塩
化物または無水物、例えば無水クロロ酢酸または無水コ
ハク酸または無水グルタル酸または高級同族体を４−ｏ
−デアセチルビングラスチンまｉｕ＋−ｏ−デアセチル
ビンブラスチン−３−カルボキシアミド型の誘導体の１
つのＣ−＜＜に於けるヒドロキシルに縮合させることに
Ｌつて得られる。

か（して得られたグークロロアセテートまたはグーヘミ
スクシネートまたはグーへミグルタレート誘導体を、次
に、蛋白質またはアミノ酸または単純アミンと、これら
の化合物を可溶な溶媒中で縮合させる。このためには、
緩衝剤、例えば硼酸塩緩衝剤で適当なｐｉに保たれた水
／ジオキサン混合物を用いることができる。縮合は、ク
ロマトグラフィーまたは電気泳動で確かめられる。後者
の場合には、キャラクタリゼーションを容易にするため
に放射性（例えばトリチウム化した）ビングラスチンな
用いることができる。

ビンブラスチンのＣ−グに於けるクロロアセテートの製
造は、ｗ、ｗ、ハーグローｆ　（Ｗ、Ｗ。

）−１ａｒｇｒｏｖｅ　）がＬｌｏｙｄｉａ　２７　Ｉ
Ｑ、３グコ、／９１．’１に記載している。従って、塩
化メチレン中でのデアセチルビンブラスチンへのクロロ
酢酸無水物の作用によって該クロロアセテートを得るこ
とができる。

化学的な観点から、蛋白質との縮合は、蛋白質リシン（
１ｙｓｉｎｅ）のアミン基と、クロロアセテート官能の
活性化塩素あるいはヘミスクシネートまたはへミグルタ
レートから誘導される活性化エステル基との反応から生
じる、共有結合の生成によって説明することができる。

例えば、牛血清アルブミン１ｌｔ５Ｉ３個のりシンアミ
ン残基な含んでいる。

蛋白質１分子に対するビンブラスチンの分子数は操作条
件の関数として変化するが、一般に／〜３’ｌである。

活性化は、Ｎ−メチルピペリジンまたはへ一メチルモル
ホリンのようなアミン塩基の存在下で、クロロ［１１２
アルキル、好ましくはクロロ蟻酸エチルまたはクロロ蟻
酸イソノチルによる処理による通常の方法で行われる。

縮合は、活性化無水物を含む反応混合物で、その場（Ｉ
ｎ　５ｉｔｕ　）で行われる。しかし、はとんどの場合
、活性化無水物を単離することもできる。

得られた抱合体は、化学に於て、あるいは蛋白質抱合体
の場合には生化学に於て用いられる通常の方法で単離さ
れる。従って、蛋白質抱合体は、アセトンの添加によっ
て反応混合物から沈殿され、遠心分離され、洗浄され、
凍結乾燥され、グル濾過で精製される。もし適当であれ
ば、かくして得られた誘導体を、ある種の抱合蛋白質お
よび未抱合蛋白質の特徴である凝縮問題を避けることが
できるように、通常のスクシニル化反応にかけることが
できる。

有利に使用できる蛋白質は、特に、牛またはヒト血清ア
ルブミンまたはフェツイン（ｆｅｔｕｉｎ　）または免
疫グロブリンであり、後者は、適当であれば、モノクロ
ーン抗体技術によって得られる。

後者の場合、ヒトの腫瘍に対しである種の特異性を示す
ヒト起源のモノクローン抗体の使用が特に興味があるこ
とがわかった。

使用する蛋白質を処理して選択的に変性させることもで
きる。これらの変性は、治療に使用中、ある組織、例え
ば肝臓中に優先的に濃縮される蛋白質抱合体を得ること
を可能にする。かくして、ビンシラスチンの誘導体と蛋
白質との縮合の前に、後者をガラクトシル化することが
可能になる。ガラクトシル化（ｇａｌａｃｔｏｓｙｌａ
ｔｉｏｎ　）は、例えばＧ、ウイルンｙ　（Ｇ、　Ｗｉ
ｌｓｏｎ　）がザ９ジャーナル・、ｉ−ｆ　會バイオ’
ｆ　ミスドリー（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＢｌｏ
ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、２　！；　３　（７１、コθ７
０−２０７２．１９７ｇに記載した方法を適用すること
によって行われる。

本発明の化合物についてその抵腫瘍活性を示すために行
った生体（ｉｎ　ｖｌｔｒｏ）実験は、ｃ−＋に於ける
結合による抱合体の生成は結合がＣ−３に於て行われる
場合よシ有利であり得ることを示している。

ピンプラチンまたはその誘導体の炭素３によるカップリ
ングは、第１段階で、Ｃ−２３に於けるヒドラジド（カ
ル？ヒドラジド）の生成およびニトロソ化による対応す
る酸のヒドラゾエート（ｈｙｄｒａｚｏａｔｅ）の生成
によって通常の方法で行われる。かくして、このヒドラ
ゾエートを直接蛋白質にカップリングさせる。

しかし、この酸ヒドラゾエートを、同じく公知の方法で
、アミノ酸エステル、例えばメチルエステルと縮合させ
ることもできる。アミノ酸のエステル官能を、次に、ヒ
ドラジツリシス （ｈｙｄｒａｚｌｎｏｌｙｓｉｓ）およびニトロソ化ニ
カケルコとができる。アミノ酸−ビンブラスチンカツゾ
リング生成物の新規酸ヒドラゾエートを、次に、蛋白質
と縮合させる。この場合のアミノ酸は、蛋白質をビンブ
ラスチン分子へ結合させる結合を構成する。

ｃ−３またはＣ−ダに於てカップリングされた縮合誘導
体およびかくして得られる１Ｉ−ｏ−説アセチル化物の
例は、下記の型の化合物である。

ａ）　炭素ｃ−３を通してのカップリング：Ｃ−３／−
於てカッシリングされたビンブラスチンーフエツイｙ（
Ｆｅｔ−ＶＤＳ−Ｃ−３）、ｃ−３に於てカッシリング
されたビンブラスチン−スクイニル化フェツィｙ　（Ｆ
ｅｔ（Ｓ）−ＶＤＳ−Ｃ−３）、インロイシル−ビンブ
ラスチン下フェツイン（Ｆｅｔ　−、Ｉ　Ｉｅ−ＶＤＳ
−Ｃ−３）、トリ！トフイル−ピンプラスチンー牛血清
フルプミｙ　（ＢＳＡ　−Ｔｒｐｖ　−Ｃ−３）（実施
例／）、トリシトフィル−ビンブラスチン−スクシニル
化牛血清アルブミン（ＢＳＡ（Ｓ）　−Ｔｒｐｖ　−Ｃ
−３） ｂ）　炭素Ｃ−１ＩＶ通してのカップリング；ビンデシ
ン−〇−弘−クロロアセテート（実施例ツ）、ビンデシ
ン−〇−ケークロロアセテート＋牛血清アルプミｙ（Ｂ
ＳＡ−ＶＤＳ−Ｃ−’Ｉ　）　（実施例３ａ入ビンデシ
ン−〇−弘−クロロアセテート＋スクシニル化牛鹿清７
Ａ、ブミｙ　（ＢＳＡ（Ｓ）　−’　ＶＤＳ　−Ｃ−４
）（実施例、？ｂ）、ビンデシン−ｏ−４−クロロアセ
テート＋ヒト血情アルブミン（ＨＡ　−ＶＤＳ　−Ｃ−
４）（実施例！ａ）、ビンデシン−〇−弘−クロロアセ
テート＋ガラクトシル化ヒト血清アルブミｙ　（ＨＡｇ
ａｌ−ＶＤＳ−Ｃ−４Ｌ　）　（実施例１１ｂ）、ビン
デシン−０−７−クロロアセテート＋ピロリジン、エチ
ルビンブラスチン−Ｃ−３−（ソロイシネー）−０−４
−クロ日アセテート（実施例り）、エチルビンプラスチ
ノイル−２３−インロイシネートー〇−＋−クロロアセ
テート＋スクシニル化牛血清アルプミｙ（ＢＳＡ（Ｓ）
　−Ｖｌｌｅ−Ｃ−’Ｉ　）（実施例５）、ビンブラス
チン−０＝　Ｉｆ　−ヘミｙ。

クシネート＋ピロリジン（実施例６）、ピンデシノー０
−グーへミスクシネート＋牛血清アルッミ７　（ＢＳＡ
　−５ｕｃｃ　−ＶＤＳ　）　（実施例７）、ビンデシ
ン−ｏ−４−ヘミスクシネート＋ヒ）血？ｌｌ？アルプ
ミ／（ＨＡ　−５ｕｃｃ　−ＶＤＳ　）　（実施例ｇン
、ビンデシン−ｏ−４−ヘミスクシネート＋ガラクトシ
ル化眸ト血清アルブミン（ＨＡｇａｌ　−５ｕｃｃ　−
ＶＤＳ）Ｃ実１１１ｔ例？）、ビンデシン−〇−弘−ヘ
ミスクシネート＋非特異性免疫グロブリン（ＩｇＧ　）
　（ＩｇＧ−５ｕｃｃ　−ＶＤＳ）　（実施例１０）、
ビンデシン−ｏ−４−ヘミスクシネート＋ＩｇＧ抗乳脂
肪球（ａｎｔｉ　−ｍ１ｌｋ　ｆａｔ　ｇｌｏｂｕｌｅ
　）　（ＩｇＧ　−ａｎｔｉＭＦＧ）（ＩｇＧ　ａｎｔ
ｉ　ＭＦＧ　−５ｕｃｃ　−ＶＤＳ　）　（実施例／／
）、ビンｆ５スチンーｏ−１Ｉ−ヘミスクシネート＋ピ
ロリジン（実施例／２）、ビンシラスチン−〇−弘−ヘ
ミスクシネート＋エチルトリプトファネート（実ｍ例／
３）、エチルデオキシビンプラスチノイル−２３−トリ
ゾトファネー）−０−１ｉｔ−ヘミスクシネート＋ピロ
リジン（実施例／り）、エチルデオキシビンプラスチノ
イルーコ３−トリプトファネー）−０−１−ヘミスクシ
ネート＋牛血清アルブミン（８ＳＡ　−５ｕｃｃ　−Ｄ
ｅｏｘｙｖＴｒｐＥ　）（笑ｍ例１５）、デオキシビン
デシン−〇−弘−ヘミスクシネート＋エチルトリフ’ト
ファネート（実施例／乙）、エチルビンプラスチノイル
−２３−トリプトファネート−０−１Ｉ−ヘミスクシネ
ート＋ピロリジン（実施例／７）、ビンシラスチン−０
−４−へミグルタレート＋ピロリジン（実施例／ｇ）。

下記実施例は、本発明の化合物を与える製造方法を非限
定的に示す。

Ａ、炭素ｃ−３を通してのカップリング実施例／ トリブトフィル−ピンプラスチン−牛血清アルブミン（
ＢＳＡ−ＴｒｐＶ−Ｃ−３） ダーデアセチルーＶＢＬ３−Ｔ叩の放射性メチルニスグ
ル誘６体（，２３０ｑ、０．２１．ミリモル）を、研流
冷却器を備えたフラスコ中の無水ヒドラジン（７）／　
：　／　Ｉ　Ｖ／Ｖ）ｘタノール溶’Ｈ２，！；ｍｌ中
へ導入した。この溶成を、アルゴン下で、６０°０に於
てＳ時間お工び室温に於てｌ夜間攪拌した。混合物を冷
却し、脱イオン水５０ゴお工びＮａ（１を飽和溶液！；
０ｖａｌで希釈し、ＳＯ−ずつのＣＨ２α２で３回抽出
した。有機相を合わせ、ＳＯ−のＨ２Ｏ、／θθ−のＮ
ａＣｔ飽和溶液で引続き洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥
した。溶媒を蒸発させた後、２１７■（０・、υミリモ
ル）の７−ｒアセチル−ＶＢＬ、−Ｔｒｐモノヒドラジ
ドを単離し、精製せずに次の反応に用いた。

このダーデアセチルーＶＢＬ−Ｔｒｐモノヒドラジド（
０，２３ミリモルンを、Ｓ−のＭｅＯＨと／乙−の／Ｎ
Ｈｃｔとを含む溶液中に溶解した。この溶液を一１０℃
に冷却し、激しく攪拌しながら１１．ｌｖのＮａＮＯ２
を添加した。ｉｏ分後、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液で溶液
のｐｕを３．３に調節した。冷ＣＨ２α２で数回、迅速
にアジドを抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４上
で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮した。ＣＨ
，ｃｔ２を次第にジオキサンで置換した。

得られたアジドのジオキサン溶液を、希ＮａＵＨでｐＨ
９に調節しである０、　／　Ｎ　Ｎａ２ＨＰＯ，中のＢ
ＳＡＣ２６９ｗ）の溶液へ、等モル量で、部側した。

添加終了後、／ＮＮａＯＨでｐＨな９に調節した。この
混合物を室温で７２時間攪拌した。／θ０ｔｔｌの１０
％強度（ｓｔｒｅｎｇｔｈ）　ＮＨ，ＯＨを添加して７
時間攪拌することによって過剰のアジドを破壊した。６
容の冷アセトンを添加して蛋白質を沈殿させ、遠心分離
した〔セントリフニージュースインターナショナル（Ｃ
ｅｎｔｒｌｆｕｇｅｕｓｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａ
ｉｅ）、３０分、／、ｇ　００　ｒｐｍ　）。

残留物を冷アセトンでコ回洗浄し、凍結乾燥した。この
抱合体を、セファデックス（５ｅｐｈａｄｅｘ　）Ｇ２
ｊｔ上でクロマトグラフィーにより精製した。

抱合体を含む分画な合わせ、凍結乾燥するか、あるいは
ダイアフロー（１）ｉａｆｌｏ）メンプラン上での限外
濾過によって濃縮した。（ＢＳ八−Ｔｒｐｖ　−Ｃ−３
）の収量は２７０■であった。

ｓ、炭ｇｃ−ダを通してのカップリング実施例コ ビンデシン−ｏ−４−クロロアセテート０．９２ミリモ
ルのビンデシンと２５−のＣＨ２α２とり、／ミリモル
の無水クロロ酢酸とをフラスコ中へ入れた。この溶液を
、元の不在下で、ｌｌＩ時囲攪拌した。２Ｓ−のメタノ
ールを添加し、混合物を室温でユ時間攪拌した。溶媒を
真空中で蒸発させ、残留物を左ＯＯ−のＣｌ−１・（２
ｃ１２に溶解し、この溶液を、冷冷ＮＨ４ＯＨ水溶液で
洗浄した。有機相の蒸発後、残留物を、Ｉ／、２−の水
とユ、３３１１のシリカとを含むダ７−のメタノールに
溶解した。この混合物を室温で６時間攪拌した。シリカ
を濾過によって分離し、熱メタノールで数回洗浄した。

Ｆ液を真空中で濃縮し、希アンモニア溶液でアルカリ性
にし、ＣＨ２α２で抽出した。抽出液ｆｆ：合わせ、Ｎ
ａ２５（Ｊｔ上で乾燥し、蒸発乾固した。シリカカラム
上で、ＣＨ２α２：Ｓ％ＭｅＯ）Ｉの混合物で溶出する
ことによって精製を行った。収率：ｇｇ％。

ＩＲ：３弘７０．３０’ＩＯ，２９７０、コｇｇＯ１／
７ダ０．／１，９０．　／乙／！；、／！；１０、ｌＡ
；００．／１Ｉ３０、／２２５、／／ワ０、／θ１０．
７１１０ｃｍ　０ 質量スペクトル：ｇ３（７（Ｍ＋／）、１１１３．７９
乙、７７３．７５４’、２９７．２７’ｌ、２９３、７
０ｇ。

核磁気共鳴スペクトル：ｐｐｍｇ（／＋Ｘ　５ｓＮＨｉ
ｎｄ）、７．ｌＩｇＣ／Ｈ，ｄ　）、７．７−７．０　
（’ＩＨ，ｍ）　、６．９　（／Ｈ，ｄ）　、６．５（
／Ｈ，ｓ）　、乙−０５（／Ｈ，ｓ）　、５４（／ｌ−
Ｉ　Ｘ　ｍ）　、５．５（／Ｈ，ｍ）、３．２ｇ　（／
　）ｌ、　ｄ　）、ｌＡ、０　（，２Ｈ。

ＣＨ２α）、３．７　（３日、Ｓ、−Ｃｏ２ＣＨ３）、
３，５Ｓ（３Ｈ，Ｓ、　０ＣＨ３）１，１．ｇ　（３Ｈ
，ｓ、　ＮＣＨ，）、（Ａ９−０．６３　（ｇ　ＨＸｍ
　）。

実施例３ ａ）Ｏ−４１−デアセチル−ビンデシンのｃ−４に於け
るカッゾリンｌ”　（ＢＳＡ−ＶＤＳ−Ｃ−’Ｉ　）放
射性ｏ−１Ｉ−デアセチル−ビンデシンのＣ−ダに於け
るクロロアセテート（／、！；０ｒｒｑ）を５　ｍｌの
ジオキサンに溶解したものを、ｐＨ７，θの０．’Ａ　
Ｍ硼酸塩緩衝液Ｓ−中の２／ＡｒｒｑのＢＳＡＣ牛血清
アルゾミン、カルバイオケム（Ｃａｔ　８ｉｏｃｈｅｍ
　）　）の溶液に滴々添加した。この混合物を室温でダ
ｇ時間攪拌した６６容のアセトンを添加することによっ
て抱合体を沈殿させ、／、３００ｒｐｒｎで３θ分間遠
心分離した。沈殿をアセトンで一回洗浄し、同条件下で
遠心分離した。これら一回の洗浄後、沈殿を凍結乾燥し
、ｐ’ｉ１７．ｇの０．／　Ｍ　ＮＨ４ＨＣＯ３の溶液
で平衡にしたＧ−２！；ダル（３Ｘ　９０　ｃｍ　）上
で’ｎＨＬ、た。排除されたピーク（ｅｘｃｌｕｅｄ　
ｐｅａｋ）を回収し、凍結乾燥した。蛋白質含量は、ロ
ーリ−（Ｌｏｗｒｙ　）の技術で測定し、アルカロイド
含量は、放射能の測定によって概算した。得られた抱合
体はＢ５Ａ１モル当たり３５モルのビンデシンをｔんだ
。アガロースゲル上でのクロマトグラフィーは、放射能
が蛋白質に強固に結合していることを示した。

ｂ）　スクシニル化（ＢＳＡ（Ｓ）−ＶＤＳ−Ｃ−１Ｉ
）上記抱合体を１００ｎｉ／！；ｍｌ水の濃度で水中に
溶解し、０．１ＮＮａＯＨ溶液で溶液のｐｕを７にした
。

次に、５５ηの無水コハク酸を少量ずつ添加した。

０、／　ＩＮ　ＮａＯＨ（７）添加にヨッてｐｎを７に
保った。ｐＩＩが安定化した後、さらに！；３ｑの無水
コノ・り酸を添加した。溶液を室温で１時間攪拌し、０
℃に於て水で／夜間透析し、凍結乾燥した。蛋白質含量
およびアルカロイド含量を、ａ）記載の方法で概算した
。

実施例グ ａ）Ｏ−４１−７”アセチル−ビンデシンのＣ−弘に於
けるカップリング（ＨＡ−ＶＤＳ　−ＣＪ　）ａ耐性ｏ
−＋−デアセチル−ビンデシンのＣ−弘に於けるクロロ
アセオート（／ｌθ〜）を３−のジオキサンに溶解した
ものを、ｐＨ９，０の０．３’ＩＭ硼酸塩緩衝液２−中
の２００ｍｙのヒトアルブミン〔メリュークス（Ｍ６ｒ
ｉｅｕｘ　）　：ｌの溶液に滴々添加した。この混合物
を室温で２’１時間撹拌した。

６容のアセトンの添加によって抱合体を沈殿させ、／、
３θＯｒｐｍで３０分間遠心分離した。沈殿をアセトン
で２回洗浄し、同上の条件下で遠心分離した。これら一
回の洗浄後、沈殿を凍結乾燥し、ｐＨ７、ｇの０．　／
　Ｍ　ＮＨ，ＨＣＯ３溶液中で平衡にしたＧ−２！ｆグ
ル（３Ｘ　９０　ｃｍ　）上で濾過することによって精
製した。排除されたピークを回収し、凍結乾燥した。蛋
白質含量をロー＋）　−（ＬＯＷｒｙ　）技術で測定し
、アルカロイド含量を放射能の測定によって概算した。

得られた抱合体はＨＡ１モルモル当２．６モルのビンデ
シンを含んでいた。

ｂ）ｏ−１ｌ−デアセチル−ビンデシンのｃ−４に於け
るカップリング（ＨＡｇａｌ　−ＶＤＳ　−Ｃ−’Ｉ　
）１１射性１ｌ−ｏ−デアセチル−ビアデシンのＣ−グ
に於けるクロロアセテート（Ｓｌｍｉ）を２−のジオキ
サンに溶解したものを、／７艷のＰＢＳ（燐酸塩緩衝食
塩水）とｐｎワの／、７Ｎ硼酸塩３．弘−とに溶解した
ユＯθｙｙＨＡｇａｌの溶液に滴々添加した。この混合
物を室温で２’１時間攪拌した。６容のアセトンを添加
して抱合体を沈殿させ、混合物を／、３θθｒｐｍで３
０分間遠心分離した。

沈殿をアセトンでユ回洗浄し、同上の条件下で遠心分離
した。これらユ回の洗浄後、沈殿を凍結乾燥し、ｐＨ７
，ｇの０．　／　Ｍ　ＮＨ，ＨＣＯ２の溶液中で〒衡に
したＧ−２５ダル（３Ｘ　９０　ｃｍ　）上でＦ遇する
ことによって精製した。排除されたピークを回収し、凍
結乾燥した。蛋白質含量をローリ−（Ｌｏｗｒｙ　）技
術で測定し、アルカロイド含量を放射能の測定によって
概算した。得られた抱合体はＨＡｇａｌ　１モル当たｐ
ｏ、ｌＬｔモルのビンデシンを含んでいた。

実施例左 エチルＮ−（９−０−デアセチル−３−デカルビメトキ
シービンゾラスチン−２３−オイル）　−Ｌ−イソロイ
シネートの４−ｏ−クロロアセテート（ＢＳＡ（Ｓ）　
−Ｖｌｌｅ　−Ｃ−’！　）実施例ユの方法により、ビ
ンブラスチンの対応する誘導体から出発して（ベルギー
国特許第１ｆｌｆ９　、　／３乙参照）、エチルビンブ
ラスチン−Ｃ−３−インロイシネートー〇−＋−クロロ
アセテート誘導体をｇり％の収率で得た。

赤外スペクトル：３弘７０．３ダ１Ｏ１３０グ０．２９
７０．２ｇ１ｆＯ１／７１７θ、／乙ｇｏ、／乙／、５
−、／３；０θ、ｌグ乙０、／１Ｉ３０、／３００．１
２ユ！；、／１９０．１１５０．１０１０．７’ＩＯの
　。

質量スペクトル：　９’ｇｇ　（Ｍ＋／　７　）、９７
３（Ｍ＋ユ）、９３９．９／７．３９／、ユ３乙、１１
０ 核磁気共鳴スペクトル：　ｐｐｍワ０ｇ左（／　Ｈ＋　
Ｓ。

０）１）　、ざ、乙　（／）Ｉ、ｓ、Ｎ）Ｉ）　、７．
！；３（／Ｈ。

ｄ）、　？、ｌＩ　（／Ｈ，ｄ）、　７．．２−７．０
　（ｍ　、３Ｈ入乙、乙　！；　（／Ｈ、ｓ　）、ｉｓ
、／　（／Ｈ、ｓ　）、＆ｇＳ（／　Ｈ、ｍ　）、５．
５ｇ（／Ｈ，ｓ）、３．３２（／　Ｈ、ｍ　）、偉乙　
（／Ｈ，ｑ）、４．ｕ（２Ｈ。

ｍ）、弘、０　（２Ｈ）％　３．７ｇ　（３Ｈ、ｓ　）
、３．／Ｃ３ＨＩＳ）、コ、７　Ｃ３Ｈ、Ｓ　）、／、
コｇ（３Ｈ。

ｔ）、／、θ−０，ｆｆ（／ｌＩＨ，ｍ）。

実施例３記載の方法で、ＢＳＡ（Ｓ）　Ｖｌｌｅ　Ｃ−
グを得た。

実施例乙 ビンデシン−弘−〇−ヘミスクシネートーピロリジンア
ミド ビンデシンから出発し、実施例／２記載の方法と同様な
方法に従って、対応する抱合体゛を乙コ％の収率で得た
。

質量スペクトル（ＤＣｔ、イソブチン）：　９．２／（
Ｍ＋／ｌ）、９０７（Ｍン。

ＩＲ（ＣＨＣｔ３，４％）：３’１００．２９７５．２
ｇｇコ、　／　７３２、　／　乙ｑ３、　ｌ乙３２、ｌ
左θ３、／グルコ、ノ３ｇＯ，／２グアα　。

ＮＭＲ（３乙ＱＭＨｚ　、ＣＤＱ＋３）：　ｇ、０！；
　（／　Ｈ。

１−１／７）、５．ダ乙（／Ｈ，Ｈ１５）、３．７乙（
／Ｈ，Ｈ／７’ａ　）、　３１ｇ０（３Ｈ，０ＶＩｅ）
、３μ！（３Ｈ，ＯＭｅ）、３．’ｌ　５　（−Ｚ　Ｃ
Ｈ２ｔ　ｏリジン）、コ、ｇｇ　Ｃ３Ｈ、Ｎ−ＣＨ，、
）、０．９３（３Ｈ、ＣＨ３）、０．ｇ３（３Ｈ，ＣＨ
３）。

実施例７ ビアデシンのダー０に於けるヘミスクシネートの生成お
よび牛血清アルブミン（ＢＳＡ）とのカッシリング（Ｂ
ＳＡ　−５ｕｃｃ　−ＶＤＳ）０、　／　、２３ミリモ
ルのビンデシント０．／ｇ’１ミリモルのコハク酸無水
物と１Ｉｔｔｎｔの無水ＣＨ２α２とをフラスコに入れ
た。この溶液を、プｔから遮蔽しながら、室温で／ｌｌ
一時間攪拌した。この溶液を、次に水浴中に浸漬した。

ｏ、、：ｉｓｏミリモルのトリエチルアミンと０．２５
θミリモルのクロロ蟻酸エチルと３−のジオキサンとを
添加した。この混合物を７７２時間攪拌した。別の操作
で、ワ０ｑの８ＳＡの／７．３−の水中の溶ｉを調製し
、／　’７．３　ｍｌのジオキサンを部側した。ＩＮ水
酸化ナトリウム溶溶液ｐＨを３．５に調節した。この溶
液を５　’Ｏに冷却し７７２時間後、活性化エステルを
ＢＳＡ溶液に添加した。溶液を左°０に於てダ時間攪拌
し、その間、／　Ｎ　ＮａＯＨの添加によってｐＨをｆ
ｆ、５に保った。抱合物を沈殿させ、そのキャラクタリ
ゼーションを上述の方法で行った。モル比は約／ｇ：／
であり、６Ｍ／’アニジンの存在下に於けるセファロー
ス（５ｅｐｈａｒｏｓｅ　）　ｉｓ　Ｂ上でのクロマリ
グラフイー後も一尾のま＼であった。

実施例ｇ ビンデシン−弘−〇−ヘミスクシネートオよヒトアルブ
ミン（ＨＡ）とのカップリング（ＨＡ−５ｕｃｃ　−Ｖ
ＤＳ　） ０．２ｇミリモル（２１０Ｗ＞のビンデシンと１１．２
■（０，４Ｌミリモル）の無水コハク酸と６−の無水Ｃ
１」２α２　とをフラスコに入れた。この溶液を、元か
ら遮蔽しながら、室温で／１時間攪拌した。

溶媒を蒸発させ、残留物をグ、７−のジオキサンに溶解
した。この溶液を、次に、水浴中に浸漬し、３．５−の
ジオキサン中の０．５６ミリモルのトリエチルアミンと
３．３ｙｄのジオキサン中のｏ、ｓｂミリモルのクロロ
蟻酸イソブチルとを添加した。

この混合物を７時間攪拌した。別個の操作で、３ｇ−の
８２０中の２０　ｇＴｎ９のＨＡの溶液を調製し、２Ａ
ｔｒｔのジオキサンを部側した。ＩＮ水酸化ナトリウム
溶液でｐｉｌを３．５に調節した。この溶液をＳｏｏに
冷却した。７時間後、活性化エステルをヒトアルブミン
の溶液へ添加した。この溶液を５　℃で７７時間攪拌し
、その間、／ＮＮａＯＨの添加によってｐＨをｇ、左に
保った。抱合体の沈殿およびその精製を、上述のように
して行った。モル比１ｄ／３．ｇ：／であった。

実施例９ ビンデシン−を−〇−ヘミスクシネートおよびガラクト
モル化ヒトアルゾミン（ＨＡｇａｌ　）とのカップリン
グ（ＨＡｇａｌ　−５ｕｃｃ　−ＶＤＳ）０．１６ミリ
モル（／／９Ｗ）のビンデシンと０．２ｑミリモル（２
Ｓ■）のコハク酸無水物と３、弘コの無水ＣＨ２ｃｔ２
とをフラスコに入れた。この溶液を、元を遮蔽しながら
、室温で／ｌＩ時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物
をコ、７−のジオキサンに溶解した。この溶液を、次に
、水浴中に浸漬する。２−のジオキサン中のの３２ミリ
モルのクロロ蟻酸イソブチルとを添加し、混合物を７時
間攪拌した。

別個の操作で、ｉｑ、ｓ−のＨ，Ｏ中の／４’＃Ｔｎｇ
（ＤＨＡｇａｌの溶液を調製し、２Ｓ−のジオキサンを
簡加した。／Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨをｇ、Ｓに
調節し、溶液を５℃に冷却した。１時間後、活性化エス
テルをＨＡｇａｌの溶液へ添加した。溶液をＳｏｏで／
１時間攪拌し、この間、／Ｎ水酸化す）　ＩＪウム溶液
でｐｎをｇ、Ｓに保った。抱合体の沈殿を上述のように
して行った。モル比は、２／、ｆ／であった。

実施例／θ ビンデシン−グー〇−ヘミスクシネートおよび山のカッ
プリング（ＩｇＧ　−５ｕｃｃ　−ＶＤＳ　）０．０７
ミリモル（５０■）のビンデシンとθ、／ミリモルの無
水コハク酸とｌｄの無水ＣＨ２ｃｔ２とをフラスコに入
れた。この溶液を、元から遮蔽しながら、室温で７７時
間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残留物をｌ−のジオキサ
ン中に溶解し、この溶液を、次に、水浴中に浸漬した。

０．７４６９モルのトリエチルアミンとθ、／弘ミリモ
ルのクロロ蟻酸インブチルとを添加し、混合物を１時間
攪拌した。

別個の操作で、／；１．７−のＨ２Ｏ中の４４■のＩｇ
Ｇの溶液を調製し、１２．７−のジオキサンを部側した
。ＩＮ水酸化ナトリウム溶液でｐＨを３．Ｓに調節し、
溶液を５℃に冷却した。１時間後、活性化エステルをＩ
ｇＧの溶液へ添加した。溶液を５℃で／４’時間攪拌し
、その間、／　Ｎ　ＮａＯＨの添加によってｐＨをに、
３に保った。抱合体の沈殿およびそのｖｉ４製を上述の
ようにして行った。モル比は９二ｌであった。

実施例１／ ビンデシン−＋−０−ヘミスクシネートおよびポリフロ
ーン（ｐｏｌｙｃｌｎａｌ　）抗乳脂肪球免疫ダロゾリ
ｙ　（ＩｇＧ　−ａｎｔｉ−ＭＦＧ）とのカップリング
（ＩｇＧ　−ａｎｔｉ　−ＭＦＧ　−５ｕｃｃ　−ＶＤ
Ｓ　）０．０３５８９モルのｙＯｓ（２５ｑ）とＯ，Ｏ
Ｓミリモルのコハク酸無水物と／ｄの無水ＣＨ２ｃｔ２
とをフラスコに入れた。この溶液を、元から遮蔽しなが
ら、室温でｌ１１．時間攪拌した。溶媒を蒸発させ、残
留物を０．２　！；−のジオキサンに溶解した。

この溶液を、次に、水浴中に浸漬し、０．０７８９モル
のトリエチルアミンと０．０７ミリモルのクロロ蟻酸イ
ンジチルとを添加し、この混合物を７時間攪拌した。別
個の操作で１．２／、３−の＋２０中の２５岬のＩｇＧ
　−ａｎｔｉ　−ＭＦＧの溶液を調製し、ＩＮ水酸化す
）　ＩＪウム溶液でｐｌＩを１０．Ｓに調節した。

この溶液を５　’Ｏに冷却し、７時間後、活性化エステ
ルをＩｇＧ　−ａｎｔｌ、−ＭＦＧの溶液へ添加した。

この溶液を５　℃で／４！４！攪拌し、七の間、１ＮＩ
ＮａＯＨの添加によってｐ■をｇ、Ｓに保った。抱合体
を９％強度のＮａ（ｌｔに対して透析し、上述のように
セファデックス（５ｅｐｈａｄｅｘ　）　Ｇ　２５上で
精製した。モル比は／Ｓ：／であった。

実施例１２ ビンツラスチンー％−０−ヘミスクシネート−ピロリジ
ンアミド（ＤＡＶＬＢ−ピロリジノ）／Ｓ−の無水塩化
メチレン中の３００ｍ１（θ、４５／ミリモル）の＋−
０−デアセチル−ビンブラスチンの溶液へ９７．４　ｑ
　（０，９７ｂ　ミリモル）の無水コハク酸を添加した
。乙の溶液を室温で２０時間攪拌した後、水浴で０℃に
冷却し、ざ−の塩化メチＶ７中の／、３／、！；Ｆｌｖ
（／、３０３ミリモル）のトリエチルアミンの溶液２よ
びｇ−の塩化メチレン中の／　ｌＩ／、、２キ（／、３
θコミリモル）のクロロＩ儀識エチルの溶液を順次添加
した。この混合物を０℃で７時間３０分攪拌し、ｇｔｎ
ｌの塩化メチレン中に溶解したｑ２．３岬（／、３θλ
ミリモル）のピロリジンを添加した。この混合物を室温
へ戻し、一時間攪拌した。ＳＯ−の塩化メチレンと７θ
％強度炭酸ナトリウム水溶液ｇｏｔ！ｔとを添加し、混
合物を攪拌し、静置し、゛有機相を分離した。水相を塩
化メチレンで３回抽出した。有機相を合わせて、飽和Ｎ
ａｃｔ水溶液で洗い、ＭｇＳＯ４上で乾燥した。

蒸発後得られる残留物を５ｉ０２カラム上で、クロマト
グラフィーによって（塩化メチレン／メタノール（９２
７ｇ）にょシ溶出）ｎ製した。酢酸エチル／シクロヘキ
サン混合物中でつき砕いた（　ｔｒｉｔｕｒａｔｉｏｎ
　）後、かくして、３ｇ６キの純生成物が無定形粉末の
形で得られた。

収率：６ｔ％。

質量スペクトル＝Ｄα（イソブタン）：９３１゜（Ｍ＋
／弘）、９．２２（Ｍ）。

ＩＲ（ＣＨｃｔ、、５　％　）　：　３　’Ｉ　７　？
、３０／！；、２９　ｇＯ１２ｇｇ！；、／７１１１．
／４３ｋ。

１３θ５、ｌ’ｌ！；０，１２！；Ｏｏｎ　’。

核磁気共鳴スペクトル：（ＣＤα３　ａ　３１ｙ　ＯＭ
　Ｈｚ　。

１）ｌ）ｍ）　：　ｇ、ＯＪ（ＮＨ、／）ｌ　）　、　
７．５　３　（／Ｈ）、７、／乙（３Ｈ）、Ａ、Ａ　４
　（／　）ｌ　）、Ａ、／　０　（／　Ｈ）、左、ｇ、
ｔ（／Ｈ）および５．４’、！！−（／）ｌ）（Ｈ／４
ｔ。

Ｈ／！；　ン　、　左Ｊ／（／　Ｈ、ｔＨ７ン　、　３
．９！；（／Ｈ、Ｈ７り’ａ）　、３．７　ｇ　（３Ｈ
、ＯＭｅ）　、−−＋１１−翫−−一□□ム□−１翫□
□３．７０（／Ｈ，Ｈ２）、　３．グ３（７Ｈ）、　３
．／／（，２Ｈ、Ｈ５’ｂ＋Ｈ４’ｂ　）、コ、７ｇ（
２Ｈ。

Ｈ−２／　’ａ　＋　Ｈ＝２　／　’　ｂ　）　、−”
　’７０　（３，Ｈ＊　ＮＭｅ　）、２．４／（／＋−
＋、２／Ｈ）、ユ、２５（／Ｈ，Ｈ／７’）、／、ｑＯ
（２Ｈ，ＣＨ２−Ｃｏ）、／４（７（，２Ｈ。

ＣＨ３ＣＯ）、／、７３Ｃ２Ｈ，β−ピロリジン）、／
、２ｇＣ２Ｈ，同上）　、Ｉ−’Ｉ　５　（／　Ｈ、Ｈ
１５’ａ　）、／、３７Ｃ／Ｈ，Ｈ／’ｌ’ｂ　）、ｏ
、ｇ　乙　（３Ｈ，Ｃ）１３入（Ａｇｅ＜　３　Ｈ、Ｃ
Ｈ，）、０．７１　（／Ｈ、Ｈ／ｌ’）。

実施例１３ ビンブラスチン−弘−〇−ヘミスクシネート＋エチルト
リシトファネート ７−の無水塩化メチレン中の０．３　／　ＯｇＣＯ，’
１０３ミリモル）のり−Ｏ−ＯＪセチルビンシラスチン
の溶液に、ＳユＷＣＯ，！；２’ｌミリモル）の無水コ
ハク酸を添加した。この溶液を室温で／ｊ時間攪拌し、
０℃に冷却した。５−の塩化メチレン中のｇ　／　Ｗ　
（０，ｇ　Ｏ６４９モル）のトリエチルアミンの溶液お
よび５−の塩化メチレン中の？’７ｍ／７−１々、ｎ線
緬Ｔキルの婉舘に口斤紙自ｎｌ舟後、反応混合物を０℃
で１時間３０分攪拌した。

次に、７−の塩化メチレン中に溶解した１ｇ７ｑ（０，
ｇＯＡミリモル）のエチルＬ〒トリシトファネートを添
加した。この混合物を室温へ戻し、ｌ５時間攪拌した。

この溶液を、次に、実施例／、２のように処理した。得
られた残留物を、ｓｏ２カラム上でクロマトグラフィー
（溶出：エーテル／ＮＨ３飽和メタノール、？２：ｇ）
によって精製した。かくして、イソゾロ／ＩＰノール中
でつき砕いた後、３０！；ｔ＋ｖの純生成物が白色粉末
の形で得られた。収率ニアθ％。

質量スペクトル（Ｄα、イソブタン）：１０９り（Ｍ＋
／ｌ）、１０ｇ３（Ｍ）。

ＩＲ（ＣＨｃｔ３）　：　３４ｔ　Ａ　０１２９９５．
２９１．０゜、２ｇ７θ、／７３！；、／乙乙ワ、／６
／３、／３０２．１ｐｓｑ、／３３／、／コ３／、ｌ／
乙７、ｌθ１０ｃｍ二１゜ ＵＶ（メタノール、最大、ｌｏｇ　）　：ユ／４（グ１
ｇ７）、２乙、ｌｉ’　（’１．２７　）、２ｇｇ（３
，０／）。

Ｎ　Ｍ　Ｒ（３Ａ　ＯＭ　Ｈｚ　＋　ＣＤ　Ｃ１ａ　）
　’　ｇ　滓ｌＩ（／　ＨｌＮＨ）、　ｇ、Ｏｇｃ／Ｈ
，ＮＨ）、　７，３．２（２Ｈ）、７．３３　（／Ｈ）
、７．１０　（４Ｈ）、ｉＡＡ　（／Ｈ。

Ｈ９）、ｌ、、０乙（／Ｈ，Ｈ／、２）、り、ｇ４（／
Ｈ。

Ｈ／ｌ）、５．５θ　（／Ｈ，Ｈ／７）、！；、３ｇ（
／Ｈ，Ｈ１５）、’１．９／（／Ｈ）、　グ、ｌθ（２
Ｈ、ＣＨ２−０）、３．７６　（３日　、ＯＭｅ）、３
、？ｌ（３Ｈ，ＯＭｅ）、　３．１ｚ３（３Ｈ，０ＶＩ
ｅ）、３、／　３　（２Ｈ、Ｈ５’ｂ＋Ｈ乙／ｉ、）、
　ユ、ｇ　Ｏ（Ｈ，２／’　）、コ、Ａ　ｇ　（ＮＣＨ
，）、０．９θ（ＣＨ３，、？Ｈ）、０．７ｇ　（ＣＨ
，、、？Ｈ）、Ｏ，？ｌ（Ｈ／！’）。

実施例／１ エチル　Ｎ−（弘−０−デアセチル−４−ｏ−ヘミスク
シネート−デオキシ−ビングラスチン−２３−オイル）
トリプトファネートのピロリジンとのカップリング ２０−のジオキサン／トルエンＣｋＯ：３０）混合物中
の１１００ｎｉ（０，１１／９ミリモル）のエチルＮ−
（！−０−デアセチル−デオキシ−ビンプラスチン−２
３−オイル）−トリプトファネート（ベルイー１特許第
ｇｇ９．／３４号参照）および１０！；’ＩｆＣ１，Ｏ
ｇミリモル）の無水コハク酸の溶液を３時間還流させた
。溶媒を真空蒸留した後、残留物をコθ−の無水塩化メ
チレン中に溶解した。

０℃に冷却し、！；１ｎｔの塩化メチレン中のトリエチ
ルアミン（／２１．ｍｙ、／、、２！；ミリモル）の溶
液およびＳ−の塩化メチレン中のクロロ蟻酸エチル（７
３６■、／、２！；ミリモル）の溶液を順次添加した後
、混合物を１時間攪拌した。次に、Ｓ−の塩化エチレン
中のピロリジン（／　７　ｇｔｎｙ、２．３ミリモル）
の溶液を０℃に於て添加した。溶液が室温に戻った後、
ダ時間攪拌し、次に、左Ｏｄの塩化メチレンと３０−の
Ｓ％強度炭酸カリウム水溶液との間で分配した。相を分
離し、水相をコθ−ずつの塩化メチレンでコ回抽出し、
有機抽出液を合わせ、１ｌＯｔｘｔの水および１Ｉ０−
の飽和Ｎａα水溶液で順次洗浄し、硫酸マグネシウム上
で乾燥し、減圧下で蒸発させた。残留物を５１０２上で
のクロマトグラフィー（ＣＨ２（２２：ＣＨ３０８（９
５：　５　）による溶出ンお↓びエーテル中でのつき砕
きによ％　）。

核磁気共鳴スヘク）　ル（ＣＤＣ６ｒ５．３４　（１７
ＭＨｚ　）　ｂｓ＝幅広い一重線：９．２３（／Ｈ，ｂ
ｓ、ＮＨ）、７．９　！；　（Ｈ、ｂｓ　）、７．’ｌ
！；−７．１．左Ｃ３Ｈ、ｍ）、’７．３３（／Ｈ，ｍ
）、２θ３−７゜２／（乙Ｈ，ｍ）、４．１１４（／Ｈ
，ｓ）、６．０！；　（／、Ｈ、Ｓ　）、左、ｇ３（’
／　Ｈ、ｍ　）、！；、ｇ３Ｃ／Ｈ，Ｓ）、５．３３（
／Ｈ，ｍ）、５．０／（／Ｈ，ｍ）、り、／／（２Ｈ，
ｍ）、３．７６（３Ｈ，Ｓ）１，７．５　ｇ（３Ｈ，Ｓ
）、３．’ｌ−ｇ（’ｌ−Ｈ，Ｓ）１．２．７３（３Ｈ
，Ｓ）、　コ、乙５（／）１．５）、　コ、３θ（／Ｈ
，ｍ）、／、９３（，２Ｈ，ｍ）、７１ｇ５（２Ｈ，ｍ
）、／、２／（、？Ｈ，ｔ）、ｏ、ｇｇ（、？Ｈ，ｔ）
、０．７６（３Ｈ，ｔ）。

赤外ス’り）ル（ＣＨ（ｌｊ３，５％Ｖ：Ｖ）：　３１
１７０．３００３１．２９７３．２１＃／、／７３ユ、
／１．７９．Ｉｔ、１７．１５０／、／ダム０、／／ｇ
ｅｒｍ　。

実施例／、５− エチル　デオキシビンプラスチ／−２３−オイル−トリ
シトファネート−１Ｉ−ｏ−ヘミスクシネートおよび牛
血清アルブミン（８ＳＡ）とのカップリング（ＢＳＡ−
５ｕｃｃ　−Ｄｅｏｘｙ　−ＴｒｐＥ　）’ＡＯＯｖｒ
ｙ（０，ｌＩ／９ミリモル）のｄｅｏｘｙ　−Ｖ　−Ｔ
ｒ　ｐＥと／２ｂｌｆｌｌＣ１，２ｊｔミリモル）の無
水コハク酸とユθ−のトルエン：ジオキサン（／：／）
とをフラスコに入れた。この溶液を３時間還流させた。

溶媒を蒸発させ、残留物をコθ−のジオキサンに溶解し
た。この溶液を、次に、水浴中に浸漬し、／、２６ミリ
モル（／、）Ａ’り（７））す、Ｔ−ｆ　ルアミンと／
、２Ｓミリモルのクロロ蟻酸イソブチルと５−のジオキ
サンとを添加した。混合物を７時間攪拌した。

別個の操作で、乙５−のＨ２Ｃ中の３’ｌθ■の日ＳＡ
の溶液を調製し、２ｇ−のジオキサンを部側した。／Ｎ
水酸化ナトリウム溶液でｐｎをｇ、左にし、溶液をＳ′
Ｃに冷却した。１時間後、活性化エステルをＢＳＡの溶
液へ添加した。溶液を５℃に於て／１時間攪拌し、その
間、／ＮＮａＯＨの添加によってｐＨをｇＳに保った。

この溶液を３℃に冷却し、１時間後、活性化エステルを
ＢＳＡの溶液へ添加した。溶液を５℃で／１４間攪拌し
、その間、／　Ｎ　Ｎａｃｔの添加によッテｐＩＩ′？
：ｇ、５に保ツタ。

抱き体の沈殿およびその精製を上述のようにして行った
。

実施例／乙 ４ｔ−ｏ−デアセチル−＋−０−へミスクシ不一トーガ
オキシービンデシンのエチルトリット７アネートとのカ
ップリング 実施列／２記載の方法に従って、た譬しピロリジンの代
わりに等モル量のエチルＬ　−）　ＩＪシトファネート
を用いて、グア％所要化合物が得られた。

核磁気共鳴スペクトル（ｃｏｃｔ３．３　Ａ　０ｔＪＩ
　Ｈ２）：ｇ−４’！ｒｃ／Ｈ，ｂｓ）、＆θ、２（Ｚ
Ｈ，ｂｓ）、７、Ａ；０Ｃ２Ｈ、ｍ）、７．、？、２（
ＺＨ、ｍ）、７．２３−７．Ｏ乙（６Ｈｚ　ｍ）　、７
．０−２　（／　Ｈ、ｒｎ　）、４．３０　（／　Ｈ，
ｓ　）、乙、１０　（／）（、ｓ　）、Ａ；、１ｆ３（
ＺＨ，ｍ）、！、ＳＯ（ＺＨ，ｓ）、５．９　＆　（Ｚ
Ｈ。

ｍ）、５．３５（ＺＨ，’ｓ）、２．ｇ乙（３Ｈ，Ｓ）
、２、ｌ＝７　（ＺＨ、ｓ　）、２．’ｌ　乙　（’ｌ
　）（、ｍ　）　、／−３θ（、？Ｈ，ｔ）、（Ａ９０
　（’３Ｈ、ｔ　）、０．７　！；（３Ｈ，ｔ）。

赤外スペクトル（ＣＨα、１５％Ｖ：Ｖ）：　ａｅｇｏ
。

３４’００．３０１０，２９７１ｆＸ、２ｇｇ、２、／
７３２、／６７θ、／　Ｉ、／、Ｌ　／３θｓ１／　’
ｌ　Ａ　Ｏ−／　２９　ｇ　ｃｍ　”。

実施例／７ エチル　Ｎ−（４ｔ−Ｑ−デアセチル−グー〇−ヘミス
タシネートピンプラスチンー２３−オイル）−トリシト
ファネートのピロリジンとのカップリング 実施例１４記載の方法に従い、７ｏθキのエチルＮ−（
！−０−デアセチル−ビンブラスチン−，２３−オイル
）−トリシトファネートから出発して、５１０２上での
クロマトグラフィーおよびエタノール中でのつき砕きに
よる精製後１．Ｓ；’／ｇ’Ｖ（６ｔ％）の所望の化合
物を得た。

核磁気共鳴スペクト＃　＜　ｃｏｃｔ３．３６０ＭＨｚ
）　：ざ、０４Ｌ（ＺＨ，ｂｓ）、７．’１ｌｓ−１，
，ｂ、３　（３Ｈ、ｍ）、７．３３（ｌＨ，ｍｌ−９り
／）　−’７　／’ｌ　”Ｊ　／　／　ｍｌ　ｔ６．６
３（／　Ｈ＋　ｓ　）、ｌ、、Ｏｇ　（／　Ｈ、Ｓ　）
、５４３　（ＺＨ，ｍ）、　５４ｊ（ＺＨ，ｓ）、５．
３３Ｃ／Ｈ，ｓ）、３．θ乙（ＺＨ，ｓ）、１１、／３
（２Ｈ、ｍ）、　３．９６　（／　Ｈ、ｍ　）、３．７
６　（３Ｈ，Ｓ）、　３．１．／（３Ｈ，ｓ）、３、ｔ
　乙　（＜ＺＨ，ｍ）、３．’ＩＯ＜２Ｈ）、　２．ｇ
／Ｃ２Ｈ＊ｍ）、　、２．７３　（３Ｈ，ｓ）、　２．
４５（ＺＨ。

Ｓ　）、　’−ｇ　３　（ｍ　）、　／、、２θ　（ｔ
　、、３　Ｈ）、０．ｇ９（ｔ、３Ｈ）、０．７　／　
（ｔ　、　３　Ｈ）。

赤外スペクトル（ＣＨα８，５％、Ｖ：Ｖ）：３ダ７１
Ｉ、３００２、２９７７、　コＩｆｇ２、／７３０，１
６７ｇ１／乙／７、／ｓ００、／弘乙θ、／／７３ｃｍ
’Ｑ 実施例／ｇ ４−０−デアセチル−＜２−０−へミグルタレートービ
ンノラスチンのピロリジンとのカップリング２３ｙｄの
無水塩化メチレン中の弘−０−デアセチルビンブラスチ
ン（７００■、０．７７１８９モル）および無水グル゛
タル酸（ｌｉｔ！；ｍｙ、／、、２７ミリモル）の溶液
を、元から遮蔽しながら７０時間攪拌した。０℃に冷却
しかつ７−の塩化メチレン中のＮ−メチルピペリジン（
／乙３キ、４６７８９モル）の溶液および７ゴの塩化メ
チレン中のクロロ蟻酸イソブチル（ユ、２３　ｍ９、／
、４　ｌＩミリモル）の溶液を順次添加した後、混合物
を７時間攪拌した。次に、７−の塩化メチレン中のピロ
リジンＣ／９’ｌｎｉ、２．７３ミリモル）の溶液を添
加した。

溶液が室温へ戻った後、溶液を３時間攪拌した。

次に、この溶液を、乙０ゴの塩化メチレンと６０−の５
％強度炭酸カリウム水溶液との間で分配させた。相を分
離し、水相を３０ｍｔずつの塩化メチレンでコ回抽出し
た。有機抽出液を合わせ、水で洗いかつ飽和Ｎａα水溶
液で洗った後、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、減圧下で蒸発さ
せた。残留物を、５ＩＯ２上でのクロマトグラフィー（
溶出：ＣＨ２α２：ＣＨ３０Ｈ（９５：　３）　）およ
び酢酸エチル：へブタン混合物中でのつき砕きによって
精製した。収量：６０５■（７／％）の所要化合物。

核磁気共鳴スペクト／ｌ／　（ＣＤｃｔ３＋　３６θＭ
Ｈｚ）ニア、９！；Ｃ／Ｈ，ｂｓ）、７．１１！；（／
Ｈ，ｍ）、り、ｌ　乙　−７，０θ　（３Ｈ１ｍ　’）
　、　’乙、ｊ＆（／Ｈ，ｓ）。

乙、０．２（／Ｈ，ｓ）　、　５．７　６　（／　Ｈ、
ｍ　）　、！；、’Ｉ　（７（／Ｈ，ｓ）、５．．２０
（／Ｈ１ｍ）、３．ｇｇ（／Ｈ。

ｍ）、３．７／　（１，Ｈ、２ｓ　）、３Ｊ３　（３Ｈ
、Ｓ）。

３．３ｇ（４ｔＨ，ｍ）、　コ、乙２　（３Ｈ、Ｓ　）
、１．３ｇ（／　Ｈ、ｓ　）　、　／−９−２（’ｆ”
　＊　”　）、ｉ、ｇｇ（２Ｈ０ｍ）、ｏ、ｇｇ（３Ｈ
，ｔ）、０．７３（３Ｈ，ｔ）。

赤外スペクト／ｌ／　（ＣＨ（：１３．５％Ｖ：Ｖ）：
　３’１７３．３００３．２９７７．２ｇｇダ、／　７
３ｇ　ｘｌ乙コθ、１５００、／’Ｉｔ、０．／３０／
α　。

本発明の化合物を、Ｐ３ｇｇ白血病を腹腔内または静脈
内に導入しであるＢＤＦエマウスまたはＢＤＡ　マウス
について試験し、％ＩＬｓ（ｉ？を加寿命、生存時間の
増加）で抗腫瘍活性を測定した。

ビンデシンおよびエチルＮ−（４ｔ−０−デアセチル−
３−７’（メトキシカルボニル）−ビンブラスチン−２
３−オイル）−トリプトファネート〔ヨーロッパ特許出
願公告第’Ｉ／、９３３号、オムニケム（Ｏｎｎ　ｌｃ
ｈｅｍ　）参照〕および他のＣ−Ｑに於けるアミノ酸誘
導体をコニ／〜６：／の比でフェツインまたは牛血清ア
ルブミンと炭素ｃ−３を通してカップリングさせたもの
について実験を行った。かくして、これらの抱合体がＰ
３ｇｇＦｍ瘍に対してほとんど活性がないことがわかっ
た（表参照）。

抱合体は、腫瘍の注入と同じ方法で、腹腔内または静脈
内投与された。

これとは対照的に、ｃ−ｐに於てカッシリングさせであ
る同じ物質は、同様な試験に用いられたとき、驚＜程顕
著な活性を示した。７０％以上の生存時間の増加が観察
された。

本発明の蛋白質抱合体のすぐれた活性は、１０％の胎児
子牛血清を含むＲＰＭＩ培地中で試験管内でＬ　／１．
１０細胞についても示された。培養後、採用された方法
は細胞蛋白質含量の測定からなシ、ローリ−（Ｌｏｗｒ
ｙ　）技術を用いて計算を行った。

かくして、１０−！；０μｇ／−濃度のＢＳＡ（Ｓ）−
ｃ４−ｖｏｓで３日後、細胞増殖の抑制が見られたが、
未処理細胞培養では２．５倍に増加した。

ＬＪ６ｎｒ＝　−＋　Ｉｏｌ、ｉ；Ｅｉｎｈ’（、”ａ
ｎ／）−〇〇θイ因釧胸）を７３〜２／、７θθｎｇ　
ＶＤＳ／ｆｎｔの範囲の濃度のＨＡｇａｌ　−ＶＤＳ−
Ｃ−’ＩおよびＨＡｇａｌ　−ＶＤＳ−Ｃ−３の存在下
で、ｇ日間培養した。ｇ８後、ローリ−（Ｌｏｗｒｙ　
）技術で細胞蛋白質含量を概算した。結果は、細胞の３
０％を殺す薬品濃度が、ＨＡｇａｌ　−ＶＤＳ−Ｃ−、
？（Ｄ場合には／、０θＯｎｇ／ｍ１以上であるが、Ｈ
Ａｇａｌ　−ＶＤＳ−Ｃ−’ｌの場合には２　／　！；
　ｎｇ／−であることを示した。

）　塾　さ　か　さ　−　”ｓ＜ｅ’−ｒ’ｓ　ｅ−ｈ
ｈ’＞Ｃつ　ｔＳ−〜　ト　釣　遁　Ｃ）　尊　幕　ト
　豹　Ｃ）Ｑ　Ｑ　ＣＬ　Ｑ−ロ、ロ、　ロ、ロ、ロ、
　α　ロ、　α　ロ。

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（も　ゝ　ミ　ζ　ミ　均　ま　ζ　＄　勾　ミ孕　勺
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　＼　＼ 八　″　穐　な　ご α　〉〉〉〉 の 」 〉 く　ミ　Ｒ官　肯　需　：　′亀　實 かくして、本発明は、新規ビス−インドール化合物の工
業的、特に薬学的使用にも関する。

事実、本発明の化合物は、ヒトの治療に使用することが
できる特に有用な抗１ｍ瘍性な有していも特に、本発明
のビンブラスチン誘導体は白血病、膠原、リンノ々肉腫
あるいはいわゆる“充実性“腫瘍を含む他の悪性腫瘍の
治療に用いることができる。

ヒトの治療に於て、本発明の化合物は、かくして、ビン
ブラスチンまたはピンクリスチ／またはビンデシンによ
る治療から利益を得ることができるホジキン（Ｈｏｄｇ
ｋｉｎ’ｓ　）病および他の腫瘍の治療に用いられる。

治療に用いるため、本発明の化合物は、凍結乾燥形で適
当であれば、薬学的に受容可能な溶媒中の溶液で、好ま
しくは非経口的に投与される。好ましい付加塩は、塩酸
、燐酸、硫酸のような鉱酸あるいは酢酸、ゾロピオン酸
、コノ・り酸、酒石酸、シュウ酸、メタンスルホン酸ま
たはベンゼンスルホン酸のような有機酸の塩のような薬
学的に受容できる無毒の塩である。

生理的食塩水あるいは例えば燐酸塩で緩衝された他の食
塩水溶液が適当な溶媒である。

本発明の活性物質は、一般に、３θ〜から数ｇまでにわ
たる量で投与される。本発明の化合物は他の抗腫瘍剤と
組み合わせて使用することもできる。

第１頁の続き ■Ｉｎｔ、Ｃ１，’　識別記号　庁内整理番優先権主張
　０１９８′Ｒ，１２月２９日［相］ルクセンブルグ（
Ｌｌ＠発　明　者　カンデュクリ　シヴア　ベルギー国
プラサダ　ブシャナ　アンス　１１ ラオ ０発　明　者　ジャン　アルフレッド　ベルギー国アル
フオンス　アナ　デル　ピレ ール ０発　明　者　ジャン　ボール　ド　ベルギー国ジョン
シュ　ジョーモッ Ｊ）＠８５１６１ ヘ−１３３１ロジェール　リュー　クヮカムビヘー１３
０２ティオン　バルモン　アベニュー一ル　２５ べ−１３５０ワヴル　リュー　クリスチイアント　９４ 手続捕正書（方式）　５９．８．−９ 昭和　年　月　日 ！、事件の表示　昭和５９年特許Ｗ１第８８２４１号３
、？ｆｉ正をする者 事件との関係　出廓人 氏名（名称）　オ　ム　ニ　ケ　ム ４、代理人

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （ハ　ビンブラスチン骨格の炭素グのヒドロキシル基か
   ら誘導されるエステル基によってカップリングを行うこ
   とを特徴とする、ビンブラスチンまたはビンブラスチン
   の誘導体と蛋白質または蛋白質の断片またはアミノ酸ま
   たは単純アミンとの抱合体。 （２蛋白質または蛋白質の断片またはアミノ酸を、腕に
   より、活性化させることができる二官能性有機誘導体と
   ビンブラスチンのｇ導体との前縮合によってビンブラス
   チン型の化合物へカップリングさせることを特徴とする
   特許請求の範囲第１項記載の抱合体。 （３）　二官能化合物が塩化クロロアセチルまたは無水
   りｅ＋ｏ７セチル、無水コハク酸または無水グルタル酸
   であるＯとを特徴とする特許請求の範囲第コ項記載の抱
   合体。 〃）式 〔上記式中、Ａは一〇〇ＣＨ２−または＝Ｇｏ　（ＣＨ
   ２バーｃｏ−に＼でｎは１から３まで変わる）のような
   “腕”であシ、Ｒｏ　は随意に変性された蛋白質基を示
   し、Ｒ２はメトキシ基またはアミン基またはアミド型の
   結合で結合されておシかつエステル基が７〜６個の炭素
   原子を含むα−アミノ酸エステル基を示し、Ｒ３Ｆｉお
   のおの場合にユつの可能な立体配置に於ける水素原子ま
   たはヒドロキシル基を示し、かつその無機酸または有機
   酸との付加塩を含む〕の特許請求の範囲第１項記載の抱
   合体。 （ｊ　蛋白質または蛋白質の断片を、ビンブラスチンま
   たはピンデシンまたはアミノ酸エステルのビンブラスチ
   ン−２３−オイル誘導体のｃ　−４に於けるヒドロキシ
   ル基に、エステル結合によってカップリングさせる、抱
   合化合物からなる特許請求の範囲第１項〜第ｑ項のいず
   れか１項記載の抱合体。 （６）蛋白質基がフェツインまたはアルジミンから誘導
   される、特許請求の範囲第を項記載の抱合体。 （７）蛋白質基が免疫グロブリンから誘導される、特許
   請求の範囲第弘項記載の抱合体。 ぼ）蛋白質基がモノクローン抗体から誘導される、特許
   請求の範囲第弘項記載の抱合体。 （９）　アミノ酸エステルがエチルトリプトファネート
   であることを特徴とする特許請求の範囲第を項記載の抱
   合体。 （１０）アミノ酸エステルがエチルインロイシネートで
   あることを特徴とする特許請求の範囲第弘項記載の抱合
   体。 （／／）　Ｒ２がメトキシ基またはアミノ基を示すこと
   を特徴とする特許請求の範囲第ダ項記載の抱合体。 （１２）　アミン基がＮＲ４Ｒ５基またはアミン官能に
   よって結合されたアミノ酸エステルであり、かつＲ４お
   よびＲ５が７〜３個の炭素原子を含むアルキル基、ある
   いは−緒に３〜Ｓ個の炭素原子を含むアルカンジイル基
   を示すことを特徴とする特許請求の範囲第を項記載の抱
   合体。 （／３）第１段階に於て、クロロアセチル塩化物または
   無水物を、弘−０−デアセチルビンプラステンまたはグ
   ー０−デアセチルビンブラスチン−３−カルボキサミド
   型の誘導体の１つのＣ−ダに於けるヒドロキシルに縮合
   させる工程と、かくして得られた生成物を、蛋白質また
   はアミノ酸またはアミンと、これらの化合物が可溶であ
   る溶媒中でさらに縮合させる工程とからなる特許請求の
   範囲８１項〜第１２項のいずれが７項記載の抱合体の製
   造法。 （／ｌＩ）　第１段階に於て、無水クロロ酢酸または無
   水コハク酸または無水グルタル酸からなる群から選ばれ
   る無水物を用いる、特許請求の範囲第１３項記載の製造
   法。 （／Ｓ）　溶媒が適当に緩衝された水−ジオキサン混合
   物である、特許請求の範囲第７３項記載の製造法。 （／幻　かくして得られた抱合生成物を反応媒質から沈
   殿によって単離しかつさらに遠心分離し、洗浄し、凍結
   乾燥しかっダル濾過によって精製しかつ必要に応じて通
   常のスクシニル化反応にかける、特許請求の範囲第７３
   項記載の製造法。 （１７）選択的に変性されるように処理されている蛋白
   質を用いる、特許請求の範囲第１３項記載の製造法。 ＜１ｇ）　モノクーロン抗体技術で得られた牛またはヒ
   ト血清アルジミンまたはフェツインまたは免疫グロブリ
   ン、好ましくはヒト起源の・モノクローン抗体である蛋
   白質を用いる、特許請求の範囲第１３項記載の方法。 （／９）かくして得られた抱合体を薬学的に受容できる
   希釈剤または担体と混合することによって製剤が得られ
   る、特許請求の範囲第７３項記載の方法。 （Ｊ）　製剤である、特許請求の範囲第７９項記載の方
   法で得られる生成物。 （２／）　活性化合物が凍結乾燥彫工で含まれる、特許
   請求の範囲第２０項記載の生成物。 （２２）活性化合物が緩衝された溶媒中の溶液中にある
   、特許請求の範囲第２０項記載の生成物。 （２３）　本文中で実施例のいずれかに関して実質的に
   記載した抱合体。 （２ｔ）本文中で実施例のいずれかに関して実質的に記
   載した製剤組成物。 （Ｓ）　本文中で実施例のいずれかに関して実質的に記
   載した、特許請求の範囲第１項〜第１２項のいずれかに
   記載の化合物の製造法。