JPS60156619A - 脳虚血治療用医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は一般的にはオピオイドペプチドによる虚血の治
療法、特にダイノルフィンの脳の虚血後の神経学上の欠
乏症の逆転及び延命における用途に関する。

多くの伝染性の病気は医学により抑制又は除去されてい
るけれども、心臓病、卒中（５ｔｒｏｋｅ　）及び癌。

ような慢性。病気ゆ主ヶお因とヵっそｕｈ。

卒中により死に至らない場合には、しばしば重度の身体
に害者になってしまう。卒中の死亡率は１、米国におい
ては１０００人当９２Å以上である。日本人□は、１心
臓病による死の発生率が最も低い人種の−であるが、１
′卒中、による死の発生率は最も高い人種の−である。

卒中の治療には種々の化合物が有用であるとさ□れ□て
いる。庭とえば、アスピリンが一時篩な虚血、又は軽い
卒串、及び卒中に”よ云死あ危１険′を減少させうると
考えられている。１９８１年３月１７日に発行された頼
明者二コラウ（Ｎ１ｃｏ、１ａｏｕ　）　、らによる、
米国特許第４．２５４８８３号には、プロスタサイクリ
″；似、物が本讐性高血圧に伴う血管の収縮及び脳卒中
に有用であ、ると開示１されている。１９８２年１２月
２１日に発行さ、れた発−考スキュ／ｆう（シｋｕｂａ
ｌｌａ）らによる米国特許第４，５６４，９５１号には
、プロスタサイクリｙ類がとりわけ脳卒中の治療に有用
な性質を有すると開示されている。１９８３年７月１９
日に発行された発明者クラゴウ（Ｃｒｉｉｇｏｅ’　）
による米国特許第４，５９４，５８５号には、虚血卒中
（ｉｓｃｈｅｍｉｃ・ｔｒｏｋｅ）　Ｋよる□浮腫の抑
制に有用で：本る：とされているベンゾ７ラニルオキシ
酢酸及び竺炎轡ステロイドの使用が開示されている。

近年、脳の虚血後二次的に発生する神経学上の欠損症を
モルヒネは悪化させるのに対し、オピアトアンタゴニス
ト（ｏｐｉａｔｅ’　ａｎｔａｇｏｎｌｓｔ）ナロキソ
ンが逆転しうろことが報告された。パスキン（Ｂａｓｋ
ｉｎ）及び□ホソブチ（Ｈｏｓｏｂｕｃｈｉ）によるラ
ンセット（ｔａｎｅｓｔ）第２９　（１９８１年）第２
７２頁乃至第２７５員の１ナロキソン・リバーサル・オ
ブ・イスキーミック・ニューロロジック・デフイジツト
・イン・ｆｆ／・（Ｎａｌｏｘｏｎｅ　ｒｅｖｅｒｓａ
ｌ　ｏｆ　ｉｓｃｈａｅｍｉｃ　ｎｅｕｒｏｌｏＱｉｃ
ａｌａａｆｉｃｌｔｓ　ｉｎ　ｍａｎ）”参照。アレチ
′ネズミの一方の頚動脈結紮により生じた神経学上の欠
損症がナロキソンの腹膜内投与により逆転しうろことも
報告されている。ホラブチ（ＨｏｓｏｂｕｃｈｉＪらに
よるサイエンス（８ｃｉ６ｎｃｅ）　ｒＡ　２１５巻１
１９８２年）第６９頁乃至第７１頁の６リパーサ゛ル・
オブ・インデユースト・イスキーミック・ニューロロジ
ック・デフイジツト・イン・ゲルビルズパノ４イ・ザ・
オビアト・アンタゴニ哀ト・ナロキソン（Ｒｅｖｅｒｓ
ａｌ　ｏｆｉｎｄｕｃｅｄ　１８ｃｈｅｍｉｃ　ｎｅｕ
ｒｏ１６ｇｉｃｄｅｆｉｃｉｔ　ｉｎ　ｇｅｒｂｉｌｓ
ｂｙ　’ｔｈｅ　ｏｐｉａｔｅ　ａｎｉａｇｏｎｔ８ｔ
ｎｉ１ｏｚｏｎ＝）”８照。□しかしながら、レビイ（
Ｌｅｖｙ　）らはナロキソンによる治療ではアレチネズ
ミの一時的な頚動脈閉塞を受けた神経機能を回復させた
り梗塞症の大きさを変えたりできないと報告し゛た（ア
ブストラクツ・オブ・ザ・１２ス・アニュアル・ミーテ
ィング・オブ・□ザ・ソサイアテイ・フォア・ニューロ
サインニス（Ａｂｓｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　１２
ｔｈ　Ａｎｎｕａｌ　Ｍｅｅｔｉｎｇｏｆ　ｔｈｅ　５
ｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ　）
　２１４２４８頁（１９８２年）の１フエイリユアー　
オヴ　ナロキソン　ツウ　リミット・クリニカル　オア
　モルホロジカル　プレイン　ダメージ　イン　ゲルビ
ルズ□　ウィズ　ユニラテラル　カロチド　アーテリイ
　オフルージョン（Ｆａｉｌｕｒｅ　ｏｆ　ｎａｌｏｘ
ｏｎｅ　ｔ。

１１ｍ１ｔ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｏｒ　ｍｏｒｐｈｏｌ
ｏｇｉｃａｌ　ｂｒａｉｎ　ｄａｍａｇｅｉｎ　’ｇｅ
ｒｂ１１ｓ　ｖｒｉｔｈ　ｕｎｉｉａｔｅｒａｌ　ｃａ
ｒｏｔｉｄ　ａｒｔｅｒｙ’　”　ｏｃｃｌｕ”５ｉｏ
ｎ）”参照。同様に、ホラディ（Ｈｏｌａｄａｙ）及び
ダマ□）　（Ｄ’ＡＩｎａｔｃｌ）もナロキソンがアレ
チネズミの数種の卒゛中において生存にも神経学上の機
能に・・も有利な影響を及はさないと報告し・た（ライ
フ・サイエンス（Ｌ４’ｆｅ　８ｃｉｅｎｃｅ　）：Ｍ
’３１’巻（１９８２年少第３８５頁乃至第５９２頁の
１ナロキソン　オアエイーアールエイチ　フエイルズ　
ツウ　インプルーブ　ニューロロジック　デフイシツツ
　インゲルビル　モデルズ　オブ　１ストローク’　（
Ｎａｌｏｍｎｅｏｒ　ＴＲＨｆａｉｌｓ　ｔｏ　ｉｍｐ
ｒｏｖｅ　ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃ　ｄｅｆｉｃｉｔｓｉ
ｎ　ｇｅｒｂｉｌ　ｍｏｄｅｌｓ　ｏｆ　’５ｔｒｏｋ
ｅ’　）　”参照。）急性又は非急性の脳の虚血のよう
な虚血患者の治療法を提供することが本発明の目的であ
る。

本発明の一面においては、脳の虚血患者の治療法が患者
に治療宇土有効量のオピオイド（ｏｐｉｏｉｄ）はプチ
ドを投与することを含む。好ましくは更に次いで患者に
投与する。ダイノルフィン（１〜１６）及びダイノルフ
ィン（１〜１０）アミドが特に好ましいオピオイドペプ
チドである。急性の病巣の脳の虚血患者に本発明を実施
すれば、延命に有用であり、脳の虚血により生じた神経
学上の欠陥を部分的に逆転させるのに有用であるとされ
ている。

中枢神経系内のオビアト受容体の発見以来、内因性のオ
ビアト配位子（Ｏｐｉａｔｅ　ｌｉｇａｎｄｓ　）健康
状態でも病気でも中枢神経系の機能に含まれているとさ
れている。研究においては主として痛刺激の知覚の駒部
におけるこれらの物質の役割が注目されているが、それ
らは脳下垂体の作用、発作による機能異常及び精神病も
関係している。

オピオイドはプチドは血液循環系に見い出される。たぶ
ん脳下垂体内（イムラ（Ｉｍｕｒａ）らによるアン・レ
ブ・フィシオル（Ａｎｎ　Ｒｅｖ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ　
）第４３巻（１９８１年）第２６５員乃至第２７８頁参
照）、副腎髄質内（ビベロス（Ｖｉｖｅｒｏｓ）らによ
るアドブ・バイオケム・サイコ７アーマコル（Ａｄｖ、
　Ｂｉｏｃｈｅｍ。

Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌ）第２２巻（１９８０
年）第１９１頁乃至第２０４頁参照）、心臓内（ラング
（Ｌａｎｇ　）らによるライン・サイ（Ｌｌｆｅ　Ｓｃ
ｉ、）　第３２巻（１９８３年）第６９９貞乃至第４０
６頁参照）、及び腸内（エル−７’　（Ｒｌｄｅ）　ラ
にヨるニューロサイエンス（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ
）第１巻（１９７６年）第３４９頁乃至第３５７頁、ボ
ラック（Ｐａ　ｌａｋ　）らによるランセット（Ｌａｎ
ｃｅｔ）第１巻（１９７７年）第９７２頁乃至第９７４
頁参照、アルメツツ（ＡｌｕｍｅｔｓＪらによるヒスト
ケム（Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ）　第５６巻（１９７８年）
＠１８７ＪＴ乃至第１９６頁参照）にオピオイドペプチ
ド源がめる。

有力な理論とは、オピオイド薬剤の大部分の作用は中枢
神経系内（すなわち、脳又はを髄の内部）に存するとい
うものである。しかしながら、内因性のオピオイドペプ
チドが心臓の速度及び血圧に影響を及はす刺激に対する
末梢神経の感受性を良好な状態にすると思われる証拠が
見出され、通常の条件下で循環するオピオイドペプチド
がこれらの内因性物質に対する自律神経系の末梢サイト
の感受性を制御するように作用するとされている。

内因性のオピオイドペプチド、は３つのグループに分け
られる。すなわち、β−エンドルフィン及びある柚の関
連化合物：最小のオピオイドはプテドである工ンケンア
リン；及びダイノルフィン、α−ネオダイノルフィン及
びそれらの関連−？ゾチドである。３つのグループのう
ち、β−エンドルフィンが縦もモルヒネ様の効果に衝接
に関連していると思われる。このはプチドを脳室内に投
与すると長期治療後には耐檗性及び芽体仏存性で痛覚を
喪失してしまう。更に、モルヒネとの関係において交叉
耐性及び交刃依存性が観察される。これに対し、天然の
エンケファリン類であるロイシン−（１６ｕ）　及ヒメ
チオニ７−（ｓｅｔ）エンケファリンは脳室内に投与さ
れた場合非常に弱い痛覚喪失があるか全く痛覚喪失を示
さないかであると報告されている。

、ダイノルフィンは最初脳下垂体から単離された。

最初の１６のＮ−末端アミノ酸の序列（ｓｅｑｕｅｎｃ
ｅ　）が決定された。このフラグメントは合成され、そ
の性質は天然化合物の完全１７アミノ酸序列の性質と共
に研究された。ダイノルフィンの最初ノ１３のアミノ酸
、すなわちダイノルフィン（１〜１６）は以下の序列を
有する。

チロシン−グリシン−グリシン−フェニルアラニン−ロ
イシン−１２３４５ １ルギニンーアルギニンーインロイシンーアルギエンー
プロリンー６　７　８　９　１０ リジン−ロイシン−リジン １１　１２　１５ Ｎ−末端はロイシン−エンケファリン（これらのアミノ
酸は１〜５）を含み、Ｃ末端伸長（Ｃ−ｔｅｒｍｉｍｌ
θｘｔｅｎｔｉｏｎ）と結合している（これらのアミノ
酸は６〜１３ン。ロイシン−エンケファリンを含むこと
は活性の為の生物学□的１自動指向装置”として必要で
あるとされており、ロイシン−エンケファリンから延長
された長ネはその効力の限界であるとされている。

ダイノルフィンはハッカネズミにおいてはほとんど又は
全く痛ｖ喪失を示さない。この効力を欠いていることは
もともと脳内でダイノルフィンが迅速に分解するためで
あやのに対し、痛覚喪失を示すのに十分な時間その壕ま
にしておけばダイノルフィンはその他の余地宇土の効果
を示すことが示された。かくして、１９８２年１１月３
０日に発行されたロー（ＬｏｈＪらによる米国特ｆＦｊ
ｉｇ４，５６１，５５３号には、ダイノルフィン社モル
ヒネ及びβ−エンドルフィンの双方への痛覚喪失応答を
妨げる、すなわち応答に対抗するけれども、耐薬性のあ
る動物においては逆の効果を示すことが開示されている
。すなわちダイノルフィンは、モルヒネに対して耐性の
ある動物においてはモルヒネ及びβ−エンドルフィンの
双方の痛覚喪失効果を可能にする。

カくシてダイノルフィンは古典的なアゴニストド近年、
ダイノルフィン（１〜１ｏ）アミドは耐薬性の動物にお
いては痛覚喪失効果ｔ−’　＝ｒ能としないが、耐薬性
のない動物においては麻酔性の痛覚贋失には拮抗しない
（ダイノルフィン（１〜１７）　及ヒダイノルフィン（
１〜１３）は反対するのだが】ことエンス（Ｌｉｆｅ　
５ｃｉｅｎｃｅｓ）　Ｍ　３１巻（１９８２年）第１８
１７頁乃至第１８８２頁参照。

ダイノルフィンのような膚ビオイドはブテドの生体内に
おける。オピオイドの特性に対し、ナロキン／（１７−
アリル−４−５α−エポキシ−３，１４−ジヒドロキシ
モルフィナン−６−オン）は”古典的な”麻薬拮抗剤と
して作用する。その他の非イプチド麻薬にはナルトレキ
ンン、ナロルフイン、ジブレノルフィン、ラバレルファ
ン、ベンタゾシン、メタゾシン、シクラゾシン、及びエ
タゾシンが含まれる。

本発明はアヘン＠　’プチドの投与により脳の虚血患者
を治療する方法を提供する。本発明による適するオピオ
イドペプチドには、ダイノルライン、ダイノルフィン類
似物、及びダ４ノルフィンアミ本発明の実施に好ましい
オピオイドペプチドは、チロシン−グリシン−グリシン
−フェニルアラニン−ロイシン−アルギニン−アルギニ
ン−晶８−ＡＡ？　−ＡＡｌｏ−（ＡＡｌｌ）ｗなるア
ミノ酸序列を有するポリペプチドであり、式中のＡＡ８
はチロシン、インロ□イシン、ロイシン又はリジン、Ａ
Ａ９はアルギニン又はプロリン、ＡＡＩＧはプロリン又
はリジン、ＡＡｌｌはリジン、リジン−ロイシン又はリ
ジン−ロイシン−リジンであり、Ｗは０又は１であシ、
ポリペプチドは酸又はアミド化された形である。本発明
の実施に特に好ましい２つの態様はダイノルフィン（１
〜１６）及びダイノルフィン（１〜１０）アミドである
。

本発明の実施に適するダイノルフィン及びダイノルフィ
ン関連はプチドの製造は、ダイノルフィン（１〜１０）
′アミドの製造を下記に説明しである実施例日メように
してはプチド合成に公知な方法及び装置による。

実施例　１ ダイノルフィン（１〜１　ｏ　）、　−ＮＥ２は、Ｂｏ
ｃ−Ｐｒｏ−ＢＨＡ（ベンジルヒドリルアミン）樹脂の
固体担体上で合成した（樹脂４．５　、ｇ当り２ミリモ
ル）。はニンシュラ（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ）手動同相に
プチド合成機に関　□するメリフィールド（１４ｅｒｒ
ｉｆｉｅｌｄ　）法を用い、対応するＢｏＣを保しした
アミノ酸をＢｏＣ−Ｐｒｏ−ＢＨＡ樹脂上にそれぞれ添
加した。すなわちＡｒｇ（Ｔｏｓ）、１１ｅ％Ａｒｇ（
Ｔｏｓ）、Ａｒｇ（Ｔｏｓ）、Ｌｅｕ、　Ｐｈｅ、　Ｇ
ｌｙ、　Ｇｌｙ、及びＴｙｒ　（０−Ｂｒ−Ｚ）である
。ＢＯＣを保麟したアミノ酸を各□々５，０モル過剰に
用いた。半定址的ニンヒドリン試験によりカップリング
反応め結果を調べた。Ｂｏｃを保護したアミノ酸をＢｏ
ｃ−Ｐｒｏ−ＢＨＡ樹脂にカップリングさせるのに以下
の工程を用いた。

１）塩化メチレン（５Ｘ１００ｄ）による洗浄２）１％
のインドールを含むＴＦＡの５５１を塩化メチレン浴液
（ＩＸｌｏｏｄ）による予備洗浄３）１チのインドール
を含む’Ｉ’ＦＡの５３チｃｎ２ｃｚ２溶液（ＩＸ１０
０謂０による脱保映、２０分４）　塩化メチレン（ＩＸ
１００＊／）による洗浄５）　エタノール（ＩＸｌｏｏ
−）＆こよる洗浄６）塩化メチレン（２Ｘ１００ｄ）に
よる洗浄７）トリエチルアミンの１０−塩化メチレン溶
液（ＩＸ１００ｍ／）による予備洗浄８）トリエチルア
ミンの１ｏｔｌｂ塩化メチレン溶液（ＩＸｌｏｏ−３に
よる中和、１０分９７　＊化メチレン（３Ｘ１００ｍ／
）Ｋよる洗浄１０）保験したアミノＭ　（５，０モル過
剰）をＤＭＦ　（１ｏ−）及び塩化メチレン（５０ｍ）
に溶かしたものを添加した １１）　ＤＣＣの塩化メチレン溶液（０，５モル濃度、
２０−）を添加し、反応時間を６時間以下とした１２）
　塩化メチレン（３Ｘ１００ｍ＋／）による洗沖得られ
た保護されたＢｏｃ−Ｔｙ’ｒ　（０−Ｂｒ−Ｚ）　−
Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ　（Ｔｏｅ　
）　−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ　）　−Ｉ　ｌｅ−Ａｒｇ　（
Ｔｏｓ　）−Ｐｒｏ−ＢＨＡ樹脂をＴＦＡの５３チ塩化
メチレン溶液、塩化メチレン及びメタノール溶液でそれ
ぞれ十分洗浄した。真空中で一晩乾燥した後、ペプチド
樹脂をアニソール（樹脂１ｇ当シ３−）の存在Ｔｏ℃で
１時間フッ化水素（樹脂１．ｇ当り５０ｄ）で分解した
。真空中で反応混合物を乾燥し、無水エーテルで洗浄し
た。所望のペプチドを１０％の酢酸中に溶解させ、樹脂
を濾過した。ｐ液を凍結乾燥させると粗ダイノルフィン
（１〜１０）−Ｎ）１２が得られた。このペプチドを、
溶離液としてｎ−ＢｕＯＨ：ピリジン：Ｈ２０（１１：
５：５）の混合液を用いた分配クロマトグラフィー及び
ＣＭイオン又換クロマトグラフィーによりｎ製し、純粋
なダイノルフィン（１〜１Ｑ）−Ｎｌ２を得た。

本発明による脳の虚血の治療に影響を及ばず因子には、
用量、投与法、及び治療期間が含まれるとされている。

しかしながら、本発明の実施中血圧を調節して　゛も心
臓血液搏出斂、全身の血圧又は脳の血流には全く変化が
なかったので、血圧は本発明による脳の虚血の治療に影
Ｖを及はす因子ではないと思われる。

、本発明による急性の脳の虚血患者の治療においては、
適ヤのオピオイドペプチドをまず投薬し。

次いで好ましくは次回鎚の投与を継続する。

最初の投与蓋は患者の体重１輪当り約１．０μＩ乃至約
１０〜、更に好ましくは１００μＩであり、租（々の、
公知の方法、たとえに静脈注射により投与しうる。継続
する賛の投与も神々の公知の方法、たとえば注射又はジ
メチルスルフオキシド又はアゾン（ネルソンラボラトリ
ーズ（Ｎｅ１ｓｏｎ　Ｌａｂｒｒａｔｏｒｉｅｓ）より
入手できる）のような担体桑剤と結合し子局１５１適用
により投与される。しかしながら、継続する投与は患者
が生命の危険があるかぎり、すなわち患者の状独が安定
化するまで十分に連続的に１時間当９約０．０１乃至約
１００μｇの割合で投与し続けることが好′ましい。た
とえに、連続注入は挿入されたミニポンプの使用又は静
脈注射を利用してもよい。患者の状態が安定化した場合
に社、投薬状を似々に減少させるか、―定（ｔｉｔｒａ
ｔｅＪする・投与法に応じて、オピオイドペプチドは食
塩水及び燐酸塩緩衝食塩水のような種々の生理学的に容
認可能なキャリヤーと配合でき、グルコース、マンニト
ール等の生理学的に容認可能な賦形剤を含んでもよい。

以下の実験の方法、物質及び結果は本発明を説明するた
めに記載する。しかしながら、本発明の範囲内のその他
の面、利点及び変更は本発明が関係する当業者には明ら
かであろう。

実　験 乱数表に基づいて、成熟したオスネコを６つのグループ
に分け、それぞれのグループを１）食塩水（１２匹）、
２）ナロキソン（１３匹）、３）ナルトレキソン（１０
匹）、４）ジブレノルフィン（１３匹）、５）ダイノル
フィン（１〜１３Ｊ　（１０匹′〕、及び６）ダイノル
フィン（１〜１０）アミド（５匹）で治療した。ネコは
、５０■のケタミンを筋肉内に投与すると落ちついた。

ハロタン、−酸化二１も及び酸素の混合物をマスクによ
り投与すると麻酔がかかった。

次いで気管を挿入したがネコには自然に１）？吸させ九
。次いで巨万単位のハニシリンＧを筋肉内に投与し、ネ
コを立体規則性装置内に置いた。オープライエン（０’
Ｂｒ１ｅｎ）及びワルツ（Ｗａ　ｌ　ｔ　Ｚ　）により
最初に記述された技術をネコにおいて用い、右の中程の
脳動脈０ＪＣＡ）の経眼窩式閉基（ｔｒａｎｓｏｒｂｉ
ｔａｌｏｃｃｌｕｓｉｏｎ）　ｑ行った。（ストローク
（５ｔｒｏｋｅ　）第４巻（１９７３年）の第２０１頁
乃至第２０６頁記載の１トランスオービタル・アブ□ロ
ーチ・フォア・オフルーディング・ザ・ミドル・セレプ
ラル・アーテリー・ウィズアウト・クラニークトミー（
Ｔｒａｎｓｏｒｂｉｔａｌ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｆｏｒ
　ｏｃｃｌｕｄｉｎｇ　ｔｈｅｍｉｄｄｌｅ　ｃｅｒｅ
ｂｒａｌ　ａｒｔｅｒｙ　ｖｒｉｔｈｏｕｔ　ｃｒａｎ
ｉｅｃｔｏｍｙど参照）。

無歯的技術を用い眼窩上の領域を切開し、眼窩の最高部
に沿って骨膜下平面を解剖した。眼球を切開し、内容物
を除去した。毛様体の動脈及び目の血管（ｏｐｈｔｈａ
ｌｍｉｃ　ｖｅｓｓｅｌｓ）を外科的顕微鏡で拡大して
二極性凝固鉗子状器官で縦向させた。眼窩の解剖を完全
に行うために直線及び曲線用の微小はさみｔ−使用し、
眼窩の内容物を排泄した。目の支柱（ｓｔｌｒｕｔＪを
除去するために微小外科的ドリルを使用し、目の孔を拡
・大した。硬膜を切開すると頚動脈の分枝が露出した。

クモ膜を切開し、内部頚□動脈、中脳、稜部連絡（Ｐｏ
ｓｔｅｒｉｏｒ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ）及び前
部脳動脈が解放された。レンズ核巌状体動脈近位のＭＣ
Ａのセグメントを二極性の鉗子状器官で凝固させ、微小
はさみで横切断（ｔｒａｎｓｅｃｔ　）　した。眼窩に
歯科用セメントを注いで満たし、　０８Ｆの漏出を防い
だ。傷を縫合して閉じ、コロイジンを噴霧して処置した
。

腰部の中心線を小さく切開し、一定量の薬剤を投与する
ように設けられた浸透圧ポンプの後方部に皮下ポケット
を創った。２ンニン、ゲスチッチ（ｒｕｎｎｉｎｇ　５
ｔｉｔｃｈ）　ｆ使ってこの切口をゆるく縫合した。ネ
コをめざめさせｌＭＣＡｍ塞後６時間後に調べた。実験
方法を知らない２人により独立して神経学上の機能を評
価させた。

盲目の研究においては、ネコの腹膜内に以下の溶液の１
つを注入した。すなわち、無−の標準食塩水（ｎｏｒｍ
ａｌ　５ａｌｉｎｅ）　２　ｄ、１０１１１ｙ／ｂのａ
ｍのナロキソンを蕪−の標準食塩水に溶かした溶液２−
１５０・０μＩ／ｋｇの濃度のジブレノルフィンを無菌
の標準食塩水に溶かした溶液２−１１０＋ｙ／に９の濃
度のナルトレキソンを無菌の標準食塩水に溶かした溶液
２−１１０＃Ｖ／！Ｉ４０Ｍ度のダインにフイ：／（１
〜１３）を無菌の標準食塩水に溶かした溶液２−１又は
１０■／Ｋｇのｍ度のダイノルフィン（１〜１０）アミ
ドを無菌の標準食塩水に溶かした溶液２−である・。第
二の神経学上の評価Ｆｉ２０分後に実施した。

次いでネコの筋肉内に５０ｑのケタミンを投与して落ち
つかせ、無菌技術を用いて浸透圧ポンプアルツア（ＡＬ
ＺＡ）コーポレーション、バロ・アルド（Ｐａｌｏ　Ａ
ｌｔｏ）、（Ａより入手しうる）を腰部に予め創った皮
下ポケット内に挿入し、１０μｔ／時間の食塩水、１０
０μＩＡＲｒ間のジブレノルフィン、５ｘｑ／に４／時
間のナロキソン、１　ｍｙ／Ｋｙ／時間のナルトレキソ
ン、５０μＮ／ＩＩ＠間のダイノルフィン（１〜１３）
又＃′ｉ５０・μｙ／時間のダイノルフィン（１〜１０
）アミドを投与した。この場合も、研究者にはいかなる
投与がなされているか知らされなかった。

ネコが生きている限シ、７日間まで毎日神経学上の評価
を実施した。百方単位のペニシリンＧを毎日筋両内に投
薬し、毎日の分泌液の十分な保持が備わった十分な乳酸
塩化リンゲル溶液・を皮下注射した。ネコが食べたり飲
んだりしはじめると、皮下注射を一時中断した。ネコが
死んだ場合に祉頭蓋骨□局蔀切除を行ない、脳を除去し
、ｇＩＡ頂部の切開が椀神経交叉までなされた。７日後
生き残っているネコを殺した。

頭頂部を２．５．５−　トリフェニルテラゾリウムクロ
ライド（ＴＴＣ）の２％溶液中で２５分培養させた。

ＴＴＣは急性の心筋梗塞の存在及び程度を調べるた　゛
屹゛に汰く使用されており、急性の脳梗塞もあざやかに
示す。Ｔ’ｌ’Ｃと住育しうる組織との反応生成物紘深
仏欅□色のホルシザ□・ンで正常の灰色の物質を着鈍す
る。正常の白は物質はそれはと着色されない。

梗塞された組織は着色しない。

ｉ色□した脳のカラースライドを作った。実験方法″を
知らされていない神経病♀有がスライドの吠写曽′から
影４１１１ｔ受妙九脳半□球の全体及び梗塞鉦の領域を
追跡した。計数計を用い、影響を受けた全脳半球に関す
る梗塞組織の百分率を各々のネコについて両方の区分で
調べ梗塞の大きさを決定した。

以下の第１表は各グループの死亡率を脳動脈閉塞後の時
間のＩＩＡ数として示す。

第１表 食塩水　１００％　０ｑｂＯ％　０％ ジブレノルフィン　８４　８　８　Ｄ ナロキソン　５４　１５　０　３１ ナルトレキノン　４０　１０　１０　４０（１〜１３） 前述の第１表のデータから判るように、対照群すなわち
食塩水グループのネコは全て２４時間以内に死んだ。ジ
ブレノルフィンの投薬は延命に＃よとんと影響を及はさ
なかった。ナロキソン及びナルトレキソンは延命効果が
あった。ダイノルフィン（１〜１６）が全てのグループ
のうち最も延命効果があった。グイノルフィン（１〜１
０）アミドの死亡率はナロキソン、ナルトレキソン及び
ダイノルフィン（１〜１３）の場合より延命効果がない
ように思われるけれども、生存条件は高度な質を□示し
臨床的には全く重要でめった。

梗塞の大きさはいかなる投与治療によっても改良されず
、全てのグループの結果は実質的に同じであった。すな
わち、グループ間に梗塞の大きさの統計上の有意差はな
かった。

本発明は特定の実施例に関して記載したけれども、更に
応用が可能であることは理解されよう。

そして、仁の出願は一般に本発明の原理に従い、本発明
の関係する業界で公知又は公用の実施で生ずるような、
前述のような本質的な特徴に応用しうるような、また本
発明の範：囲及び特許請求の範題の限界内のような本開
示からの試みを含む本発明の応用・用途又は適応を網羅
スる９もりである・第１頁の続き ［相］発　明　者　カンシー・エムφリー　アメリアン
ス ０発　明　者　ホラス・エイチ・ロー　アメリント− ［相］発　明　者　ジョー−カン・チャン　アメリイス
・ ■出願人　ジョー−カン・チャン　アメリイス拳 力合衆国カリフォルニア州サン・フランシスコ、フトン
・アベニュー　１８３０ 力合衆国カリフォルニア州サン・フランシスコ、メサ８ 力合衆国カリフォルニア州サン・カーロス、カーテコー
ト　９０ 力合衆国カリフォルニア州サン・カーロス、カーテコー
ト　９０ 手続補正用 １　事件の表示 昭和５９年特ｒ１願第２７０５２６号 ２　発明の名称 脳の山面を治療する方法 ３　補正をする者 小イ′１との関係　特ｒ１出願人 氏　名　ヨシオ・ホラブチ 氏　名　カンシー・エム・り一 氏　名　小ラス・エイチ・〇− 氏　名　ジョー−カン・ヂャン ４代理人

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　患者に有効量のオピオイドペプチド（ｏｐｉｏｉ
   ｄｐｅｐｔｉｄｅ　）を投与する事を含む脳虚血患者の
   治療法。 ２、　オピオイドペプチドがチロシン−グリシン−グリ
   シン−フェニルアラニン−ロイシン−アルギニン−アル
   ギニン−ＡＡ８−　ＡＡ９−　ＡＡＩＯ−（ＡＡｌｌ）
   ｖなるアミノ酸序列を有し、ＡＡ８はチロシン、インロ
   イシン、ロイシン又はリジン、ＡＡ９はアルギニン又は
   プロリン、ＡＡｌ　０はプロリン又はリジン、ＡＡｌｌ
   はリジン、リジン−ロイシン又はリジン−ロイシン−リ
   ジンでありＷは０又は１であり。 上記オピオイドペプチドは酸又紘アミド化された形であ
   る特許請求の範囲第１項の方法。 ３、　オピオイドペプチド鉱ダイノルフィン（１−１３
   ）（ｄｙｎｏｒｐｈｉｎ（１−１５目又はダイノルフイ
   ／（１−１０）アミドである特許請求の範囲第１項の方
   法。 ４、　患者の体重の１キログラム当り約１マイクログラ
   ムから約１０ミリグラムまでの初回量を投与する事を含
   、む有効量である特許請求の範囲第１項又鉱第３項の方
   法。 ５、患者に次回量のオピオイドはプチドを投与スる事を
   含む有効量である特許請求の範囲第４項の方法。 ６、　少くとも数回の次回量が十分悼連続的に投与され
   る特許請求の範囲第５項の方法。 ｌ　脳の虚血に続いて、ダイノルフィンの酸又はアミド
   化された形の初回量を患者の体重１キログラム当り約１
   ．０マイクログラムから約１０ミリグラムまで患者に投
   与し、次にダイノルフィンの次回量を上記患者に投与す
   る事を含む急性の病巣脳虚血患者の延命方法。 ８゜次回量を十分に連続的に投与する特許請求の範囲第
   ７項の方法。 ９　少くとも何回かの次回量は１時間当り約０．０１マ
   イクログラムから約１００マイクログラムの間の割合で
   注入投与される特許請求の範囲＃１７項の方法。 ・リ　・　：・ １０、ダイノルフィンはチロシン−グリシン−グリシン
   −フェニルアラ手、イーロイシン−７′□ｋｄ４．二　
   。 ンーアルギニンーＡＡ８−　ＡＡ９−　ＡＡ１’　−（
   ＡＡｌ　１　）ｖなるア暑ノ酸序列を有し、ＡＡＢ□は
   チロシン、イソロイシン、ロイシン又はリジン、　ＡＡ
   ９はアルギニン又はプロリン、ＡＡ１’ｉｊプロリン又
   はリジン、ＡＡｌｌはリジン、リジン−ロイシン又はリ
   ジン−ロイシン−リジンでありＷは０又は１である特許
   請求の範囲第７項の方法。