JPS60149394A - 酵素阻害物質７′−デスオキシグリゼオ−ル酸及びその塩類の製法 - Google Patents
酵素阻害物質７′−デスオキシグリゼオ−ル酸及びその塩類の製法Info
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- JPS60149394A JPS60149394A JP59006580A JP658084A JPS60149394A JP S60149394 A JPS60149394 A JP S60149394A JP 59006580 A JP59006580 A JP 59006580A JP 658084 A JP658084 A JP 658084A JP S60149394 A JPS60149394 A JP S60149394A
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- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はストレプトマイセス属微生物の生産する新規な
３′、５″−サイクリックアデノシンモノホスフェート
ホスホジェステラーゼ（ｃＡＭＰＰＤ刊）阻害物′べの
製法に関する。
３′、５″−サイクリックアデノシンモノホスフェート
ホスホジェステラーゼ（ｃＡＭＰＰＤ刊）阻害物′べの
製法に関する。
３’、５’−サイクリックアデノシンモノホスフェート
（ｃＡＭＰ）はＯＡＭＰ合成酵素（アデニル酸サイクラ
ーゼ）とｃＡＭＰ分解酵素〔ホスホジェステラーゼ（ｐ
１〕ｇ）］のバランスの上に、動物組織（Ｊｕ器）に広
く分布し各種ホルモン作用のセカンド−メツセンジャー
として作用し、生理、生化学的に１１を要な役割を演じ
ている。虹に細胞の分裂、増殖、分化、・心臓収縮、造
血、中枢神経系への作用、免疫反応、インスリン、ヒス
タミンの放出などに関与していることが知られている。
（ｃＡＭＰ）はＯＡＭＰ合成酵素（アデニル酸サイクラ
ーゼ）とｃＡＭＰ分解酵素〔ホスホジェステラーゼ（ｐ
１〕ｇ）］のバランスの上に、動物組織（Ｊｕ器）に広
く分布し各種ホルモン作用のセカンド−メツセンジャー
として作用し、生理、生化学的に１１を要な役割を演じ
ている。虹に細胞の分裂、増殖、分化、・心臓収縮、造
血、中枢神経系への作用、免疫反応、インスリン、ヒス
タミンの放出などに関与していることが知られている。
ｃＡＭＰはこのように多岐にわたる生理作用を有するも
のであるが、このｃＡＭＰを分解する酵素（ＣＡＭＰ
ｐＤＥｌ ）の阻害物質は細胞内のｃＡＭＰのレベルを
上昇させるので心血管用剤、抗喘息剤、平滑筋弛緩剤、
精神神経用削、抗炎症剤、癌治療剤、抗糖尿病剤などに
なりつると期待される。
のであるが、このｃＡＭＰを分解する酵素（ＣＡＭＰ
ｐＤＥｌ ）の阻害物質は細胞内のｃＡＭＰのレベルを
上昇させるので心血管用剤、抗喘息剤、平滑筋弛緩剤、
精神神経用削、抗炎症剤、癌治療剤、抗糖尿病剤などに
なりつると期待される。
本発明者らは、放１腺菌ストレプトマイセス・グリゼオ
オーランティアカスＡ ４３８９４ （Ｓ ｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓｇｒｉｓｅｏａｕｒａｎｆ；ｉａ（！ｕｅ
〕Ｔｌｓ ４３８９４ （−５ＡＮＫ ６３４ Ｔ９
） 〕 株を水浴性培地に培養すると培養液中にグリゼ
オール酸（特開昭５６−６８６９５号参照）と共に他の
ｃＡＭＰ ＰＤＥ 阻害物質が生成蓄積されてくること
を見出した。この阻害物質が従来知られＣいるｃＡＭＰ
ＰＤＥ 阻害物質と異なった新規な阻害物質であるこ
とｆ：認め、このｑ勿ｒ（を７１−デスオキ／グリゼオ
ール酸（７’ −１）ｅｓｏｘ、ｙ ｇｒｉｅｅｏｌｉ
ｃａｃｉｄ ）と命名した。
オーランティアカスＡ ４３８９４ （Ｓ ｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓｇｒｉｓｅｏａｕｒａｎｆ；ｉａ（！ｕｅ
〕Ｔｌｓ ４３８９４ （−５ＡＮＫ ６３４ Ｔ９
） 〕 株を水浴性培地に培養すると培養液中にグリゼ
オール酸（特開昭５６−６８６９５号参照）と共に他の
ｃＡＭＰ ＰＤＥ 阻害物質が生成蓄積されてくること
を見出した。この阻害物質が従来知られＣいるｃＡＭＰ
ＰＤＥ 阻害物質と異なった新規な阻害物質であるこ
とｆ：認め、このｑ勿ｒ（を７１−デスオキ／グリゼオ
ール酸（７’ −１）ｅｓｏｘ、ｙ ｇｒｉｅｅｏｌｉ
ｃａｃｉｄ ）と命名した。
ｒ′−デスオキ／グリゼオール酸は下式を有する。
Ｔ１−デスオキシグリゼオール酸の生産菌である放線菌
ストレグトマイセス・グリゼオオーランティアカス、［
４３８９４株についての菌学的性質は既に特開昭５６＝
６８６９５号に記載されている。
ストレグトマイセス・グリゼオオーランティアカス、［
４３８９４株についての菌学的性質は既に特開昭５６＝
６８６９５号に記載されている。
そして、本菌株は工業技術院微生物工業技術研究所に微
生物受託番号第５２２３号として寄託されている。
生物受託番号第５２２３号として寄託されている。
以上 ７＋−デスオキシグリゼオール酸の生産菌につい
て説明したが、放線菌の諸性質は一定したものでｔまな
（、自然的、人工的に容易に変化することは周知の通り
であり５本発明で使用し得る菌株はストレグトマイセス
属に属する。
て説明したが、放線菌の諸性質は一定したものでｔまな
（、自然的、人工的に容易に変化することは周知の通り
であり５本発明で使用し得る菌株はストレグトマイセス
属に属する。
Ｔ′−デスオキシグリゼオール酸を生産する菌株すべて
を包含するものである。
を包含するものである。
次に、ｒ″−デスオキシグリゼオール酸の製法について
詳述する。
詳述する。
１、Ｉｆ、４３Ｂ９４株の培養
本面の培養においては、１ｌｔＩ常の放１線菌の培養法
が一般に用いられる。培養のための栄養源としては、各
種のものが用いら７しるが、炭素源としては、液糖ｓ
ｉｌ’ｉ粉、グルコース、マニトール、フラクトース、
ガラクトース、ラムノースなどが単独または組合せて用
いられる。窒素源としては無機及び有機のものが用いら
れるが、塩化アンモニウム、 （＋ｉｌｆ酸アンモニウ
ム、尿素、硝酸アンモニウム、硝酸ソーダなど、また天
然窒素源のベグトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母
、生酵１ヒ、コーンステイープリカー、大豆粉、きな粉
、カザミノ酸、ソリュプル・ベジタブル・プロティン等
が単独または組合せで使用することも出来る。その他食
塩、塩化カリ、炭酸カルシウム、塩化マグネシウム、燐
酸塩など無機塩類を加える他、本菌の生育や７°−デス
オキシグリゼオール酸の生産を促進する有機物または無
機物を添加することをさまたげない。
が一般に用いられる。培養のための栄養源としては、各
種のものが用いら７しるが、炭素源としては、液糖ｓ
ｉｌ’ｉ粉、グルコース、マニトール、フラクトース、
ガラクトース、ラムノースなどが単独または組合せて用
いられる。窒素源としては無機及び有機のものが用いら
れるが、塩化アンモニウム、 （＋ｉｌｆ酸アンモニウ
ム、尿素、硝酸アンモニウム、硝酸ソーダなど、また天
然窒素源のベグトン、肉エキス、酵母エキス、乾燥酵母
、生酵１ヒ、コーンステイープリカー、大豆粉、きな粉
、カザミノ酸、ソリュプル・ベジタブル・プロティン等
が単独または組合せで使用することも出来る。その他食
塩、塩化カリ、炭酸カルシウム、塩化マグネシウム、燐
酸塩など無機塩類を加える他、本菌の生育や７°−デス
オキシグリゼオール酸の生産を促進する有機物または無
機物を添加することをさまたげない。
特に ７＋−デスオキシグリゼオール酸はカルボキシル
基を２個、アミノ基を１個分子内に有するので塩を形成
する。従って、例えば産生培地に食塩、塩化カリ、炭酸
カルシウム、塩化マグネシウムなどの無機ＪＭ類を添加
することにより、ナトリウム塩、カリウム塩などのアル
カリ金’ｔｓ ｌ！ 、カルシウム塩、マグネシウム塩
などのアルカリ土類金属塩として得られる。または、得
られた７１−デスオキシグリゼオール酸を常法により化
学的に処理することによっても塩として得られる。
基を２個、アミノ基を１個分子内に有するので塩を形成
する。従って、例えば産生培地に食塩、塩化カリ、炭酸
カルシウム、塩化マグネシウムなどの無機ＪＭ類を添加
することにより、ナトリウム塩、カリウム塩などのアル
カリ金’ｔｓ ｌ！ 、カルシウム塩、マグネシウム塩
などのアルカリ土類金属塩として得られる。または、得
られた７１−デスオキシグリゼオール酸を常法により化
学的に処理することによっても塩として得られる。
培養法としては、往復振盪、回転振盪液体培養法、固体
培養法、１時に深部攪拌培養法が最も適している。培養
温度は２０〜３５℃、ｐＨは中性付近で培養するのが望
ましい。液体培養で通常４８時間乃至１２０時間培養を
行うと７’−デスオキシグリゼオール酸もしくはその塩
が培養液中に生成蓄積される。培養の進行に従って培養
液中に生産される１°−デスオキシグリゼオール酸もし
くはその塩は下ｉ己の試験例記載の方法により？１１υ
定する。深部液体培養終了時の培養液の示す１）ｌｉ害
活性はＴＯ〜８５慢を示す。
培養法、１時に深部攪拌培養法が最も適している。培養
温度は２０〜３５℃、ｐＨは中性付近で培養するのが望
ましい。液体培養で通常４８時間乃至１２０時間培養を
行うと７’−デスオキシグリゼオール酸もしくはその塩
が培養液中に生成蓄積される。培養の進行に従って培養
液中に生産される１°−デスオキシグリゼオール酸もし
くはその塩は下ｉ己の試験例記載の方法により？１１υ
定する。深部液体培養終了時の培養液の示す１）ｌｉ害
活性はＴＯ〜８５慢を示す。
２．１′−デスオキシグリゼオール酸およびその塩の単
離・精製 γ１−デスオキシグリゼオール酸は酸性、水浴性物質で
ある。従って培養Ｐ液からの本物質の単ｎＷ−梢製には
水溶性の微生物代謝生産物をその培養液から単離する／
こめに一般に用いられる分離・精製の方法が利用可能で
ある。
離・精製 γ１−デスオキシグリゼオール酸は酸性、水浴性物質で
ある。従って培養Ｐ液からの本物質の単ｎＷ−梢製には
水溶性の微生物代謝生産物をその培養液から単離する／
こめに一般に用いられる分離・精製の方法が利用可能で
ある。
深部培養法の鴨合には、次のように行うのが好ましい。
すなわちＳ 合の菌糸体を１！Ｉ５過土たは遠心分離し
、そのフィルターケーキを水で十分洗い、その洗液とｆ
液を合わせる。この合併液をＹ古性炭または他の吸着剤
、イオン交換樹脂で処理することによってγ′−デスオ
キシグリゼオール酸およびそのＪＸを吸着させる。
、そのフィルターケーキを水で十分洗い、その洗液とｆ
液を合わせる。この合併液をＹ古性炭または他の吸着剤
、イオン交換樹脂で処理することによってγ′−デスオ
キシグリゼオール酸およびそのＪＸを吸着させる。
この吸着は、バッチ方式によって行うことができるし、
または、吸着塔に連続的に貫流することによっても行う
ことができる。バッチ方式においては、そのｐ液に活性
炭吸着剤０．１〜０．６重量／芥量多、好゛ましくは０
３５〜０．４０重量／容鍛褒を加え、こうして得られた
混合物を３０〜６０分攪拌する。
または、吸着塔に連続的に貫流することによっても行う
ことができる。バッチ方式においては、そのｐ液に活性
炭吸着剤０．１〜０．６重量／芥量多、好゛ましくは０
３５〜０．４０重量／容鍛褒を加え、こうして得られた
混合物を３０〜６０分攪拌する。
その活性炭吸着剤を含水アセトンまたは含水低級アルカ
ノールで浴離し、この溶離液を減圧下で濃縮することに
より濃縮物全得る。
ノールで浴離し、この溶離液を減圧下で濃縮することに
より濃縮物全得る。
更にイオン交換樹脂カラム、活性炭カラム、ダイヤイオ
ンカラム、セファデックスカラムで精製を行い、純粋な
Ｔｏ−デスオキシグリゼオール酸およびその塩を得るこ
とが出来る。
ンカラム、セファデックスカラムで精製を行い、純粋な
Ｔｏ−デスオキシグリゼオール酸およびその塩を得るこ
とが出来る。
３、Ｔｏ−デスオキシグリゼオール酸の塩類の別製法
以上の如くして得られた１′−デスオキシグリゼオール
酸は、化学的常法により塩に変換することができる。例
えばｒｌ−デスオキシグリゼオール酸を少量の水または
水と酢酸エチルのような含水有機溶剤に懸濁し、次いで
ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属、カルシウム
、マグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物、炭
酸塩、重炭酸塩などと室温付近で接触させてｐＨ７〜１
０に調整する０次いで析出した沈ｌ殿をろ取することに
よって得られる。得られた粗塩類は例えばカラムクロマ
トグラフィーなどに付して精製することにより純品とし
て得られる。
酸は、化学的常法により塩に変換することができる。例
えばｒｌ−デスオキシグリゼオール酸を少量の水または
水と酢酸エチルのような含水有機溶剤に懸濁し、次いで
ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属、カルシウム
、マグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物、炭
酸塩、重炭酸塩などと室温付近で接触させてｐＨ７〜１
０に調整する０次いで析出した沈ｌ殿をろ取することに
よって得られる。得られた粗塩類は例えばカラムクロマ
トグラフィーなどに付して精製することにより純品とし
て得られる。
次に実施例をあげて本発明を説明するが培養法、分離・
精製法はこれに限定されるものでは々い。
精製法はこれに限定されるものでは々い。
実施例 １． ７’−デスオキシグリゼΔ・−ル酸グル
コース５％、大豆粉１％、イーストエキス０．１％、ポ
リペプトン０４％、ミートエキス０．４％、食塩０．２
５％、炭酸カルシウム０５チ（ｐＨ７，０）の組成をも
つ培地３０１を作ｐ、３０１ジヤー２基に１５７づつ分
注、１２１℃、３０分加圧殺菌した。
コース５％、大豆粉１％、イーストエキス０．１％、ポ
リペプトン０４％、ミートエキス０．４％、食塩０．２
５％、炭酸カルシウム０５チ（ｐＨ７，０）の組成をも
つ培地３０１を作ｐ、３０１ジヤー２基に１５７づつ分
注、１２１℃、３０分加圧殺菌した。
冷却後同一培地で２８℃、７２時間、回転振盪培養機に
て前培養した／ｌ６４３８９４菌培浴液１５Ｇ ｍｌづ
つ（１チ、フラスコ２本）全接種し、２８℃、 ７２時
間５通気［１： １．回転数２００ ｒｐｍで培養を行
った。２基分の０ヨ液ｚａｚ（ｐａｓ、ｓ）はダイヤイ
オンＨＰ２０ （三菱化成工業０株）社ｊ＃）を通過さ
せカーボン吸％ｆｔ ％水洗後６０チアセトンで溶出し
た。アセトンを留去、水層はａＲａ後、史に凍結乾燥し
て粗粉末１２０１＋１９が得られた。次いで小楓の蒸溜
水に浴かし、ダウエックス１×４（ダウケミカル社製、
Ｃｌ−型）へ吸着、食塩濃度をかえてグリゼオール酸と
Ｔ“−デスオキシグリゼオール酸の混合物をｆ（ｊ出し
た後、セファデックスＬＨ−２０（ファルマシア社製）
によるカラムクロマトグラフィーを行い１“−デスオキ
シグリゼオール酸を水を用いて俗用した。グリゼオール
酸を含む分＋＋？ｊｉが先に溶出１−た。次いで得られ
た目的物質を含む分画をｐＨ２，５にＩＮＨｏ、６で調
整し、ダイヤイオンＨＰ２０に吸着、水洗後、６０％ア
セトンで溶出ｌ−た。アセトンを留去後、水層を凍結乾
燥して？’−テスオキシグリゼオール酸がシリカゲル薄
ノークロマトグラフィー（メルク社製、Ａｒｔ、５７１
５）上、単一のスポット標品（遊離型）で２１１・ψ得
られた。
て前培養した／ｌ６４３８９４菌培浴液１５Ｇ ｍｌづ
つ（１チ、フラスコ２本）全接種し、２８℃、 ７２時
間５通気［１： １．回転数２００ ｒｐｍで培養を行
った。２基分の０ヨ液ｚａｚ（ｐａｓ、ｓ）はダイヤイ
オンＨＰ２０ （三菱化成工業０株）社ｊ＃）を通過さ
せカーボン吸％ｆｔ ％水洗後６０チアセトンで溶出し
た。アセトンを留去、水層はａＲａ後、史に凍結乾燥し
て粗粉末１２０１＋１９が得られた。次いで小楓の蒸溜
水に浴かし、ダウエックス１×４（ダウケミカル社製、
Ｃｌ−型）へ吸着、食塩濃度をかえてグリゼオール酸と
Ｔ“−デスオキシグリゼオール酸の混合物をｆ（ｊ出し
た後、セファデックスＬＨ−２０（ファルマシア社製）
によるカラムクロマトグラフィーを行い１“−デスオキ
シグリゼオール酸を水を用いて俗用した。グリゼオール
酸を含む分＋＋？ｊｉが先に溶出１−た。次いで得られ
た目的物質を含む分画をｐＨ２，５にＩＮＨｏ、６で調
整し、ダイヤイオンＨＰ２０に吸着、水洗後、６０％ア
セトンで溶出ｌ−た。アセトンを留去後、水層を凍結乾
燥して？’−テスオキシグリゼオール酸がシリカゲル薄
ノークロマトグラフィー（メルク社製、Ａｒｔ、５７１
５）上、単一のスポット標品（遊離型）で２１１・ψ得
られた。
１１−デスオキシグリゼオール酸の物理恒数は次の通り
である。
である。
１）外覗；白色粉末
２）融点；１６０℃（褐変分解）
３）分子（ｉ ； ３６３ （ハイ・マススペクトルに
よる）４）分子式；０１４Ｈ１３Ｎ５°７ ５）旋光度； 〔α］”＝＋１３．２Ｑ（Ｃ−１，１，
ジメチルスルホキイド） ｏ、ｏｉＮｌ−Ｍ酸水浴液および０．０ＩＮ水酸化ナト
リウム水浴液中で測定した紫外部吸収スペクトルを第１
図に示す。
よる）４）分子式；０１４Ｈ１３Ｎ５°７ ５）旋光度； 〔α］”＝＋１３．２Ｑ（Ｃ−１，１，
ジメチルスルホキイド） ｏ、ｏｉＮｌ−Ｍ酸水浴液および０．０ＩＮ水酸化ナト
リウム水浴液中で測定した紫外部吸収スペクトルを第１
図に示す。
γ）赤外部吸収スペクトル；νＫＢｒ 、、 １ａｘ
ＫＢｒペレット中で測定した赤外部吸収スペクトルを第
２図に示す。
２図に示す。
８）１Ｈ核磁気共鳴スペクトル；δ： ｐｐｍｄ６−ジ
メチルスルホキシド中、９０ＭＨ２で測定した核磁気共
鳴スペクトルを第３図に示す。
メチルスルホキシド中、９０ＭＨ２で測定した核磁気共
鳴スペクトルを第３図に示す。
実施例 ２．７°−デスオキシグリゼオール酸ナトリウ
ム塩 グルコース５％、大豆粉１％、イーストエキス０．１％
、ポリペプトン０４％、ミートエキス０．４％、食塩０
．２５慢（ｐＨ７，０）の組成をもつ培地を作り、３０
１ジャー２：ａ：に１５１づつ分注、実施例１にＮＯ載
したと同じ条件で培養を行なった。
ム塩 グルコース５％、大豆粉１％、イーストエキス０．１％
、ポリペプトン０４％、ミートエキス０．４％、食塩０
．２５慢（ｐＨ７，０）の組成をもつ培地を作り、３０
１ジャー２：ａ：に１５１づつ分注、実施例１にＮＯ載
したと同じ条件で培養を行なった。
２ 、ｌ、Ｑ分の培養Ｐ故２７．５１はダイヤイオンＴ
（Ｐ２Ｏを通過させた鎌、カーボンカラムに吸着、水洗
後６０％アセトンで溶出した。アセトンを留去Ｃ水層を
濃縮後、さらに凍結乾燥して粗粉末１３０１ψが得られ
た。ついでセファデックスＬＨ−２０（ファルマシア社
製）によるカラムクロマトグラフィーを行い目的物を水
を用いて溶出した。
（Ｐ２Ｏを通過させた鎌、カーボンカラムに吸着、水洗
後６０％アセトンで溶出した。アセトンを留去Ｃ水層を
濃縮後、さらに凍結乾燥して粗粉末１３０１ψが得られ
た。ついでセファデックスＬＨ−２０（ファルマシア社
製）によるカラムクロマトグラフィーを行い目的物を水
を用いて溶出した。
グリゼオール酸を含む分画が先に浴出した。グリゼオー
ル酸の含まれていない浴出液′ｆＩ：ａ縮後４℃にて一
週間静置して生じた沈ｌ殿物を遠心して集め凍結乾燥し
て ７１−デスオキシグリゼオール酸ナトリウム塩が３
．１１夕得られた。
ル酸の含まれていない浴出液′ｆＩ：ａ縮後４℃にて一
週間静置して生じた沈ｌ殿物を遠心して集め凍結乾燥し
て ７１−デスオキシグリゼオール酸ナトリウム塩が３
．１１夕得られた。
７’−デスオキシグリゼオール酸ナトリウム塩の物理恒
数は次の通りである。
数は次の通りである。
１）外観；白色粉末
２）融点；１９０℃（褐変分解）
３）分子式；０１４Ｈ１１Ｎ５°７ Ｎ ａ ２４）元
素分析値（％！ ２水塩として）；計算値 ０．３７．
９２ Ｈ，４，３９Ｎ、１５．８０測定値 Ｃ！、 ３
７．００ Ｈ，３，４９Ｎ、 １５．３３、 ＫＢｒ
−１ ５）赤外部吸収スペクトル、シｍａｘＣｒｒＬＫＢｒペ
レット中で測定した赤外部吸収スペクトルを第４図に示
す。
素分析値（％！ ２水塩として）；計算値 ０．３７．
９２ Ｈ，４，３９Ｎ、１５．８０測定値 Ｃ！、 ３
７．００ Ｈ，３，４９Ｎ、 １５．３３、 ＫＢｒ
−１ ５）赤外部吸収スペクトル、シｍａｘＣｒｒＬＫＢｒペ
レット中で測定した赤外部吸収スペクトルを第４図に示
す。
６）１Ｈ核磁気共鳴スペクトル；δ： ｐｐｍ重水中、
９０ＭＨｚで測定した核磁気共鳴スペクトルを第５図に
示す。
９０ＭＨｚで測定した核磁気共鳴スペクトルを第５図に
示す。
実施例３． ｒ’−デスオキシグリゼオール酸実施例１
に記載したと同じ培地で６０ｏｌタンク（内容３ｏｏｔ
）を用いて行った以外は実施例１と全く同様に行った
。培養４８時間目の培養戸液５μｌの示す阻害活性は７
６％であった。培養ｐ液２８０１から実施例１と同様の
方法で目的物の分離・精製を行ないシリカゲル薄層クロ
マトグラフィー上、単一の７’−デスオキシグリゼオー
ル酸（遊離型） ４１ ｌｎ９が得られた。
に記載したと同じ培地で６０ｏｌタンク（内容３ｏｏｔ
）を用いて行った以外は実施例１と全く同様に行った
。培養４８時間目の培養戸液５μｌの示す阻害活性は７
６％であった。培養ｐ液２８０１から実施例１と同様の
方法で目的物の分離・精製を行ないシリカゲル薄層クロ
マトグラフィー上、単一の７’−デスオキシグリゼオー
ル酸（遊離型） ４１ ｌｎ９が得られた。
得られたＩ“−デスオキシグリゼオール酸の物理恒数は
実施例１で得たものと同じであった。
実施例１で得たものと同じであった。
実施例 ４． ７’７デスオキシグリゼオール酸ナトリ
ウム塩 実施列２に記載したと同じ方法で培養、分離・精製を行
ない、得られたγ１−デスオキシグリゼオール酸４０１
ψを小量の水に懸濁した。１Ｎ ＮａＯＨを用いてｐＨ
１０に調整し、ついでセファデックスＬＨ−２０カラム
クロマトグラフィーを行い凍結乾燥すると１１−デスオ
キシグリゼオール酸ナトリウム塩３８ ＩＱが得られた
。
ウム塩 実施列２に記載したと同じ方法で培養、分離・精製を行
ない、得られたγ１−デスオキシグリゼオール酸４０１
ψを小量の水に懸濁した。１Ｎ ＮａＯＨを用いてｐＨ
１０に調整し、ついでセファデックスＬＨ−２０カラム
クロマトグラフィーを行い凍結乾燥すると１１−デスオ
キシグリゼオール酸ナトリウム塩３８ ＩＱが得られた
。
得られたγ１−デスオキシグリゼオール酸ナトリウム塩
の物理恒数は実施例２で得たものと同じであった。
の物理恒数は実施例２で得たものと同じであった。
試験例 酵素阻害活性
１、酵素阻害活性測定法
ｃＡＭＰ ＰＤＥ はラット脳由来の粗酵素液を用い、
阻害活性測定法はアンネ・リース・ビチャード、ワイ・
ニー・チュン著［ジャーナル・オブ・バイオロジカル・
ケミストリー」２５１巻５１２６〜５７３７頁（ｉ９７
６年）に記載の方法を一部改変して実施した。即ち１４
０でラベルしたｃＡＭＰを基質とし、微生物培養戸液２
〜５μｔ、蛇４液２０μｔ、粗酵素〆浅４０μ！を０２
Ｍトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）中で混合し、３０
℃、２０分間反応させる。反応終了後、反応液をＩＮ脂
アンバーライトエＲＰ〜５８で処理し、残存するアテノ
シンの放射活性量からｃＡＭＰ ＰＤＥ 阻害活性を１
０−０分率で算出した。
阻害活性測定法はアンネ・リース・ビチャード、ワイ・
ニー・チュン著［ジャーナル・オブ・バイオロジカル・
ケミストリー」２５１巻５１２６〜５７３７頁（ｉ９７
６年）に記載の方法を一部改変して実施した。即ち１４
０でラベルしたｃＡＭＰを基質とし、微生物培養戸液２
〜５μｔ、蛇４液２０μｔ、粗酵素〆浅４０μ！を０２
Ｍトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８，０）中で混合し、３０
℃、２０分間反応させる。反応終了後、反応液をＩＮ脂
アンバーライトエＲＰ〜５８で処理し、残存するアテノ
シンの放射活性量からｃＡＭＰ ＰＤＥ 阻害活性を１
０−０分率で算出した。
２．１′−デスオキシグリゼオール酸のｃＡＭＰＰｌ）
Ｅに対する阻害活性を５０チ：・ＩＪ害匝（■５０）で
示すと第１表の通りである。
Ｅに対する阻害活性を５０チ：・ＩＪ害匝（■５０）で
示すと第１表の通りである。
第１表 ｃＡＭＰ ＰＤＥに対する阻害活性（工、。値
）第１表に示した如く、１１−デスオキシグリゼオール
酸はラット脳由来のｃＡＭＰ ＰＩＫＫ に対して強い
阻害活性をもっていることがわかる。公知の本峙素の阻
害物質であるパバベリンはラット脳由来のａＡＭＰ Ｐ
ＤＦｉに対して工、。値が３５μＭであるのと比較して
本物質は約２０倍頚い阻害活性を示している。
）第１表に示した如く、１１−デスオキシグリゼオール
酸はラット脳由来のｃＡＭＰ ＰＩＫＫ に対して強い
阻害活性をもっていることがわかる。公知の本峙素の阻
害物質であるパバベリンはラット脳由来のａＡＭＰ Ｐ
ＤＦｉに対して工、。値が３５μＭであるのと比較して
本物質は約２０倍頚い阻害活性を示している。
第１図はＴＩ−デスオキシグリゼオール酸の紫外部吸収
スペクトル、第２図は同物質の光外部吸収スペクトル、
第３図は同物質の核磁気共鳴スペクトルを示す。第４図
は１１−デスオキシグリゼオール酸ナトリウム塩の光外
部吸収スペクトル、第５図は同物質の核磁気共鳴スペク
トルを示す。 特許出願人 三共株式会社 代理人弁理士 樫 山 庄 治 手続補正書（自発） 昭和５９年３月ｄ乙日 １、事件の表示 昭和５９年特許願第６５８０ 号 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 〒１０３東京都中央区日本橋本町３丁目１番地の
６名称 （１８５）三共株式会社 代表者 取締役社長 河村喜典 ４、代理人 居所 〒１４０東京部品川区広町１丁目２番５８号三共
株式会社内 ５、補正によシ増加する発明の数 なし６、補正の対象
明細書の発明の詳細な説明の欄１、 明細書第４負１
行の 」 ２ 同賀ｌ＋更Ｓ劣１つ １犬勇乞令゛１λ」と【於、令′１３」と計、正−１さ
。 弘よ 手続補正書（自発） 昭和５９年４月ノ８日 １、事件の表示 昭和５９年特許願第６５８０ 号 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 〒１０３東京都中央区日本橋本町３丁目１番地の
６名称 （１８５）三共株式会社 代表者 取締役社長 河村喜典 ４、代理人 居所 〒１４０東京部品川区広町１丁目２番５８号三共
株式会社内 ５、補正により増加する発明の数 なし１、 明細書第
４頁１行の 「 」を 「 以上
スペクトル、第２図は同物質の光外部吸収スペクトル、
第３図は同物質の核磁気共鳴スペクトルを示す。第４図
は１１−デスオキシグリゼオール酸ナトリウム塩の光外
部吸収スペクトル、第５図は同物質の核磁気共鳴スペク
トルを示す。 特許出願人 三共株式会社 代理人弁理士 樫 山 庄 治 手続補正書（自発） 昭和５９年３月ｄ乙日 １、事件の表示 昭和５９年特許願第６５８０ 号 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 〒１０３東京都中央区日本橋本町３丁目１番地の
６名称 （１８５）三共株式会社 代表者 取締役社長 河村喜典 ４、代理人 居所 〒１４０東京部品川区広町１丁目２番５８号三共
株式会社内 ５、補正によシ増加する発明の数 なし６、補正の対象
明細書の発明の詳細な説明の欄１、 明細書第４負１
行の 」 ２ 同賀ｌ＋更Ｓ劣１つ １犬勇乞令゛１λ」と【於、令′１３」と計、正−１さ
。 弘よ 手続補正書（自発） 昭和５９年４月ノ８日 １、事件の表示 昭和５９年特許願第６５８０ 号 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 住所 〒１０３東京都中央区日本橋本町３丁目１番地の
６名称 （１８５）三共株式会社 代表者 取締役社長 河村喜典 ４、代理人 居所 〒１４０東京部品川区広町１丁目２番５８号三共
株式会社内 ５、補正により増加する発明の数 なし１、 明細書第
４頁１行の 「 」を 「 以上
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 ストレプトマイセスＪ％ Ｋ ｒＡするＴＩ−デ
スオキシグリゼオール酸もしくはその塩の生産菌を培養
して、その培養物より７１−デスオキシグリゼオール酸
もしくはその塩を単ｎｆすることを特徴とするγ１−デ
スオキシグリゼオール酸もしくはその塩の製法。 ２．７１−デスオキシグリゼオール酸もしくはその塩の
生産菌がストレプトマイセス・グリゼオオ゛−ランティ
アカス７１６４３８９４ （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｇｒｉｓｅｏａｕｒａｎｔｉａｃｕｓ Ａ ４３８９４
）である４寺許５青求の範囲第１項記載の製法。 ３ ストレプトマイセス桐に属するＴ１−デスオキシグ
リゼオール酸生産菌を培養して、その培養物より７′−
デスオキシグリゼオール酸を単離し、次いで塩形成物質
と接触させてｐａｒ〜１０に調整することを特徴とする
γ°−デスオキシグリゼオール酸の塩類の製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59006580A JPS60149394A (ja) | 1984-01-18 | 1984-01-18 | 酵素阻害物質７′−デスオキシグリゼオ−ル酸及びその塩類の製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59006580A JPS60149394A (ja) | 1984-01-18 | 1984-01-18 | 酵素阻害物質７′−デスオキシグリゼオ−ル酸及びその塩類の製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60149394A true JPS60149394A (ja) | 1985-08-06 |
| JPH0429356B2 JPH0429356B2 (ja) | 1992-05-18 |
Family
ID=11642262
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59006580A Granted JPS60149394A (ja) | 1984-01-18 | 1984-01-18 | 酵素阻害物質７′−デスオキシグリゼオ−ル酸及びその塩類の製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60149394A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4971972A (en) * | 1989-03-23 | 1990-11-20 | Schering Corporation | Phosphodiesterase inhibitors having an optionally substituted purine derivative portion and a benzo- or cyclopenta-furan portion |
| US5091431A (en) * | 1988-02-08 | 1992-02-25 | Schering Corporation | Phosphodiesterase inhibitors |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010101170A1 (ja) | 2009-03-05 | 2010-09-10 | 株式会社村田製作所 | フィルムコンデンサ用誘電体樹脂組成物およびその製造方法、ならびにフィルムコンデンサ |
-
1984
- 1984-01-18 JP JP59006580A patent/JPS60149394A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5091431A (en) * | 1988-02-08 | 1992-02-25 | Schering Corporation | Phosphodiesterase inhibitors |
| US4971972A (en) * | 1989-03-23 | 1990-11-20 | Schering Corporation | Phosphodiesterase inhibitors having an optionally substituted purine derivative portion and a benzo- or cyclopenta-furan portion |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0429356B2 (ja) | 1992-05-18 |
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