JPS5976046A - スパガリン−１１−ｏ−アルキル誘導体およびその関連化合物並びにそれらの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は制癌性物質である次の一般式ｆＩ）（式中Ｒ１
は水素原子または水酸基を有していてもよい炭素数１な
いし４のアルキル基またはＣＨ−を示し、ｎは４，５４
たは６の整数を示す。

原子以外の基を示す。）で表わされるスパガリン−１１
−０−アルキル誘導体およびその関連化合物およびそれ
ら塩、並びにそれらの製造法に関する。

本発明者らは、先にバチルス属に属する菌株バチルス・
ラテロスボルスＢ　Ｍ　Ｇ　１６２−　；ｌ　＋”２（
微工研菌寄第５２３０号）の培養によって取Ｖ４）した
スパガリンが各種の動物移植癌に対して優れた制癌効果
を有することを発見した（ザ・ジャーナル・オブ・アン
チビオチフス、３４巻、１６１９頁、１９８１年）。こ
のスパガリンの化学構造式は次式 ｓｌ で表わされる（１５８）−１−アミノ−１９−グアニジ
ノ−１１，１５−ジヒドロキシ−４，９゜１２−トリア
ザノナデカン−１０，１３−ジオンである（ザ・ジャー
ナル・オブ・アンチビオチフス、３４巻、１６２２頁、
１９８１年）。この化合物は、また（８１−７−グアニ
ジノ−３−ヒドロキシヘプタンアミドとグリオキシルス
ペルミジン ーナル・オプ・アンチビオチフス、３４巻、１６２５頁
、１９８１年）。

本発明者らは、スパガリンの誘導体及びその関連化合物
につき鋭意研究をした結果、前記一般式（Ｉｌの化合物
が優れた制癌作用を有し、特にＲ１が水素原子以外の基
を示す場合、化合物の安定性の点でも優れていることを
見い出し、本発明を完成した。

本発明の一般式（Ｉｌ （式中Ｙ，］”ｔ”およびｎは前記に同じ）で表わされ
る化合物はいずれも１１位に不斉炭素を有し、１１位の
エピマーが存在する。すなわち、１１位の立体配位に基
く旋光性が左旋性を示すエピマー〔以下←）を表わす〕
と右旋性を示すエピマー〔以下（」Ｊ．で表わす〕が存
在する。本発明化合物において、特に記載しない場合に
は、二つのエピマーの約１：１の混合体〔以下、必要場
合には１５位にも不斉炭素を有し、１５位が（８１　ノ
エピマーと四のエピマーが存在する。本発明化合物にお
いて特に記載しない場合には（８１体と（５）体の約１
：１の混合体である。

本発明の代表的化合物の理化学的性質および生物学的性
質は次の通りである。

（１）理化学的性質 本発明により得られる制癌性物質であるスす。これらの
化合物は遊離塩基の状態では不　５− 安定なため、通常の方法により酸を加えて任意の酸付加
塩とすることが好ましい。付加する酸としては、塩酸、
リン酸、ホウ酸などの無機酸または酢酸、クエン酸、酒
石酸、グルタル酸などの有機酸が用いられる。

これらの化合物の塩酸塩はいずれも白色吸湿性の粉末で
、明確な融点を測定できない。

代表的化合物の塩酸塩の分子式と元素分析値を第２表に
、また赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠として測定）お
よびプロトンＮＭＲスペクトル（重メタノール中ＴＭＳ
を基準物質として測定）を第３表に示す。

また、１１−０−アルキル誘導体はスパガリンと比較し
て、化学的安定性において優れている。スパガリンは中
性〜アルカリ性条件下で不安定であるが、１１−〇ーア
ルキル誘導体はｐＩ−■９〜１０でも極めて安定である
。

これらの化合物の化学的安定性を６０℃、４時間保温し
た時の残存率６）で測定した結果を、スパガリンの場合
と比較して、第４表に６一 示す。なお残存率の測定は、高速液体クロマトグラフィ
＝（Ｉ７ＴＰＬＣ）を用いて行った。

カラムはヌクレオシル■５０１８を使用し、溶Ｎａ１（
ＰＯ＜　（ｐＴ−１３）　（６：　９４　）を用いたが
、本発明化合物の場合にはアセトニトリル−０，００５
Ｍペンタンスルホン酸すｌ−ＩＪ　ラム＋０．０１　Ｍ
Ｎａｌ−ＩＰＯ４（ｐＴ−１３）ノ混合溶媒ヲＪ１１　
イ、化合物の種類により混合比を変えて使用した。

例えば化合物ｒｋ１３の場合は混合比（７：９３）の溶
媒を用いた。

本発明化合物の代表的なもののエピマーの比旋光度を第
５表に示す。

第１表 　９− 第２表 −１０＝ 第３表 −１１〜 第４表　残存率（％） 第５表 Ｉ３− １２− （２）生物学的性質 本発明の前記一般式（Ｉｌの化合物は、いずれも著明な
制癌作用を有し、下記のように試験管内における癌細胞
に対して顕著な増殖阻害効果を示し、また癌の移植をう
けたマウスに対しても顕著な延命効果を示す。捷たこの
化合物の毒性はいずれも比較的弱く、優れた制癌剤とし
て使用されうるものである。

１）試験管内における癌細胞に対する増殖阻害効果 マウス白血病Ｌ　１２１０細胞　１０万個を移植した後
４日間飼育したＤＢＡ／２マウスから、腹水を無菌的に
採取し、生理的食塩水で３回洗浄して得られるＬ１２１
０細胞を１０％牛脂児血清および５μＭ２−メルカプト
エタノールを添加した１１，２Ｍ１１６４０培養液に懸
濁し、０．９　ｍ１３当りＬ１２１０細胞５万個となる
ように希釈した。

マイクログレートにこの細胞浮遊液０．９　ｍｌと試料
を含む培養液０．１　ｍｌを入れ、炭酸ガ１４− スインキュベーター中で３７°Ｃで培養しカニ。

４８　時間後にコールタ−カウンターを用いて細胞数を
測定し、増殖阻害度〔（１−Ｔ／Ｃ）×１００−（１−
試料含有培養の増殖細胞数／対照培養の増殖細胞数）ｘ
１ｏｏ’ｌを求めた。また、種々の試ｔ１濃度の増Ｍｌ
’１ｌｉＩＬ害度から５０％増殖阻害に要する濃度を１
′）出した。

本発明の代表的化合物の塩ｅ塩の１・ １２１０細胞に対する増殖阻害は第６表の通りであった
。

第６表 ＊　被験化合物の濃度（ｍＣｇ／ｍｌ　）１５− ２）マウス移植癌に対する治療効果 １群４〜８匹の雄性Ｂｌ）Ｆ、系マウス（５週令）にマ
ウス白血病Ｌ　］　２１０細胞１０万個を腹腔内に接種
し、続いてその当日より１日１回６日間連続で、生理的
食塩水に溶解した試料を腹腔内に投与し、３０日間飼育
観察して延命率〔Ｔ／Ｃ×１００−（処理群の平均生存
日数／無処理群の平均生存日数）ＸＩＯｏ、１を求めた
。

本発明の代表的化合物の塩酸塩のマウス白血病Ｌ　１２
１’　Ｏに対する治療効果は第７表の通りであった。

１７− １６− １８− ３）毒性 本発明の化合物はいずれも比較的低毒性であり、捷だ、
いずれの化合物も連続投与による毒性の蓄積性が小さい
ことが特徴的である。

次に本発明における代表的化合物をマウス腹腔内［１回
投与した場合の５０％致死量（ＬＤ、。）、およびマウ
ス腹腔内に単位体重当り一定量を１日１回６日間連続投
与した場合の最大耐量を総投与量で表わしたもの、を第
８表に示した。

１９− 第８表 ＊　１回投力における５０％致死量 材　マウス単位体重当り一定量を１日１回６日間連続投
与した時に致死しない総投与量の最大値２１− ２０− 以」二から明らかなように（Ｉ１式で表わされる本発明
化合物は、制癌剤として有用性を有する化合物である。

本発明化合物のうち、具体的に示したＲ１が水素原子、
炭素数１ないし４のアルキル基（ヒドロキシル基で置換
されていてもよい）およびベンジル基で、ｎが４．５ま
たは６の整数を示す場合の化合物は、いずれもマウス白
血病Ｌ］２１０細胞に対し、優れた増殖抑制効果を示し
ている。

これらの化合物の中で、特にＲ１が水素原子または炭素
数１ないし２のアルキル基（ヒドロキシル基で置換され
ていてもよい）、特に炭素数１、ｎが４または６である
化合物は、癌を移植されたマウスに対し優れた治療効果
を示している。さらに、その中で化合物の安定性の点で
も優れているのは、Ｒ１がメチル基（炭素数１のアルキ
ル基）の化合物であり、化合物番号７．１３は最も好ま
しい化合物である。

次に本発明化合物の製造法について説明する。

（１）　　捷ず次の一般式（ＩＤ ２２− Ｈ２ＮＣＮＨ（ＣＨ２）ｎ　　Ｙ　　ＣＯＮＨ２晶　　
　　　　　　　　　（Ｉｌｌ （式中Ｙ、ｎは前記に同じ）で表わされるω−グアニジ
ノ脂肪酸アミドまたはその塩と次式（ｍ） Ｈｇ〉ＣＨＣＯＮＨ（ＣＨ２）４　ＮＨ（ＣＨ２）ｓＮ
Ｈ２（’ｌ’）で表わされるＮ−（４，−（３−アミノ
プロピル）アミノブチル：］　−２，２−ジヒドロキシ
エタンアミドまたはその塩を、触媒の存在下捷たは不在
下、縮合させて、次の一般式（トＩ）Ｈ２ＮＣＮＨ（Ｃ
Ｈ２）ｎ−ｙ−ＣＯＮＩ（ＣＨＣＯＮＨ（ＣＨ２）４Ｎ
Ｈ（ＣＴ＆）３ＮＴＴ２　（、、。

ＩＩ　　　　　　　　　　　　　　＋ ＮＨＯＨ （式中Ｙ　、　ｎは前記に同じ）で表わされる化合物ま
たはその塩を得る。

−ＣＨ２−で、口が５または６の化合物およびＹが−Ｃ
Ｉ−１＝ＣＩ−Ｔ−で、ｎが４．５または６の化合物は
新規化合物であり、優れた制癌効果を有し、本発明の化
合物に含まれるものである。

また、この一般式（Ｉａ）の化合物の１１〜位のヒドロ
キシ基をアルキル化することにより本発明化合物の一般
式（ＩＩおけるＲ１がアルキル基またはベンジル基であ
る化合物を得ることができる。

本発明者らは、先にザ・ジャーナル拳オプ拳アンチビオ
チクス、３４巻、１６２５頁、１９８１年に詳述したよ
うに、次式 で表わされる（８１−７−グアニジノ−３−ヒドロキシ
ヘプタ／アミドと（ｍ）式の化合物を縮合するに当って
、それらの有するグアニジノ基、アミノ基、水酸基など
の官能基を特定の保護基で保護することなく反応できる
ことを見い出した。従って、本発明における１式と（Ｉ
ＩＩ）式の化合物の縮合は、上記反応を適用して行った
。すなわち、本反応は脱水縮合反応であるので通常は無
水溶媒中での反応が好ましいが、（１１式の化合物と（
ｍ）式の化合物は通常酸付加塩として取り扱われるので
、その溶解性から微量の水を添加して行った。添加する
水の量は（ｍ式の化合物と（Ｈｌ）式の化合物を均一に
溶解する最小量でよく、（１１１式の化合物１モルに対
し、４−４０モルの範囲で使用される。（ｍ式および（
Ｈｌ式の化合物は通常酸付加塩として取り扱われるので
、特［酸を添加する必要はないが、収率上酸触媒を加え
る方が好ましい。酸触媒としては、塩酸、硫酸、リン酸
、ホウ酸などの無機酸や、酢酸、クエン酸、酒石酸、コ
ハク酸、グルタル酸、アジピン酸などの有機酸が使用さ
れるが、グルタル酸などのジカルボン酸の使用が好まし
い。

使用される酸の量は、１式の化合物１モルに対し、０〜
１０モルの割合で、重重しくは０．５〜４モルの割合で
ある。反応温度は室温〜８０℃で行われ、好ましくは４
０〜６０℃であり、反応時間は温度に応じて任意に選択
できるが好収率を得るためには１〜２日が好ましい。

前記の一般式ｌ ２５− （式中Ｙ、ｎは前記に同じ）で表わされるω−グアニジ
ノ脂肪酸アミドは公知の反応を利用し種々の方法で合成
することができる。

すなわち次の一般式（ｎａ） （式中口は前記に同じ）で表わされるω−グアニジノ−
β−ヒドロキシ脂肪酸アミドは、例えば次の一般式（Ｉ
Ｖ） Ｒ２Ｎ　（ＣＲ２）ｎ　Ｃ００Ｈ（ＩＶ）（式中ｎは前
記に同じ）で表わされるω−アミノ脂肪酸のアミノ基を
保護した後、炭素２個を増炭し、β−ヒドロキシカルボ
ン酸誘導体とする一連の公知の反応を行いβ−ヒドロキ
シ脂肪酸アミドとし、続いてアミン保護基を除去後、ア
ミン基をグアニジノ基に変換することにより合成するこ
とが出来る。

その１例について、更に詳しく述べると、＝２６一 （■）式の化合物のアミン基をペンジルオギシ力ルボニ
ル基なとのアミノ保護基で保護した後、そのカルボン酸
を酸イミダゾライトなどのカルボン酸反応性誘導体に変
換し、次いで次式 で表ワされるモノエチルマロン酸のマグネシウムエルレ
ートと縮合させ、次の一般式ＭＸ＝ＮＨ（ＣＨ２）ｎ　
ＣＯＣＨ２Ｃ０ＯＥｔ　　　　　（Ｖ）（式中Ｘはアミ
ン保護基を示し、ｎは前記に同じ）で表わされるβ−ケ
トエステルとし、続いて通常の方法でケトンのカルボニ
ル基ヲ還元してβ−ヒドロキシエステルとした後、アン
モニアで処理してアミド化し、次にアミノ保護基を除去
し、生成するアミン基をグアニジノ基に変換することに
よって、所望の一般式（Ｈａ）で表わされるω−グアニ
ジノ−β−ヒドロキシ脂肪酸アミドを合成することがで
きる。

（■ａ）式の中でｎ　＝　４の化合物はスパガリンを酸
もしくはアルカリで加水分解して得られル（ｓ＋　−７
−グアニジノ−３−ヒドロキシヘプタンアミドを利用す
ることもできる。

（印式の化合物のうち、Ｙが−ＣＩ−ｉ＝ｃＩ−Ｉ−の
場合、すなわち次の一般式（Ｗ）） （式中ｎは前記に同じ）で表わされるω−グアニジノ−
α、β−不飽和脂肪酸アミドは、先に合成法を述べた次
の一般式（ＩＩａ）（式中ａは前記に同じ）で表わされ
るω−グアニジノ−β−ヒドロキシ脂肪酸アミドを脱水
反応に付すことにより合成するのが有利である。脱水反
応としては、β−ヒドロキシ脂肪酸アミドを脱水する通
常の方法を用いることができるが、中性条件下緩和な条
件で進行する脱水方法、例えば、塩化銅（２価）の存在
下、ジシクロへキシルカルボジイミドを作用させる方法
が重重しい。溶媒としては、（，１Ｔａ）の化合物は通
常酸付加塩として取り扱われるので、その溶解性により
、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドを用いるのが好ましい
。反応温度は通常室温〜１００℃であり、反応時間は温
度により異なるが通常数時間〜数日であるがジシクロへ
キシルカルボジイミドを過剰に用いることにより短縮で
きる。

捷だ次式（ｍ） 〉ＣＨＣＯＮＨ（ＣＨ２）４ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ２（
亜Ｏ で表わされるＮ−（４−（３−アミノプロピル）アミノ
ブチル］　−２，２−ジヒドロキシエタンアミドは、ス
パガリンを酸もしくはアルカリで加水分解して得ること
ができる（ザ・ジャーナル・オプ・アンチビオチフス、
３４巻、１６２２頁、１９８１年）。捷だ合成により得
ることもできる（ザ・ジャーナル・オブ・アンチビオチ
フス、３４巻、ｌ　６２５頁、２９− １９８１年）。

（２）次に下記一般式（Ｉａ） （式中ｎおよびＹは前記と同じ） で表わされる化合物のアルキル化について説明する。

アルキル化は、一般式（Ｉａ）の化合物に、炭素数１な
いし４の１価寸たは２価の脂肪族アルコール、ペンジル
アルコールマタハ炭素数１ないし４のジアゾパラフィン
を反応させることにより行われ、得られる化合物は下記
一般式（ＩＩ）） （式中Ｒ２は水酸基を有してもよい炭素数１ないし４の
アルキル基捷たはベンジル基を示しＹおよびｎは前記と
同じ）で示される。

一般式（Ｉａ）の化合物と前記アルコールとの反応は通
常酸触媒の存在下に行わる。反応にあたって一般式（Ｔ
ａ）の化合物のグアニジノ基−３〇− およびアミン基は保護する必要はないが、保護して行っ
ても差し支えない。

用いられるアルコールは下記一般式（ｖｌ）Ｉｔ”　−
０１−１（Ｖｌ） （式中■（・２は前記と同じ）で表わされ、■体的には
、メタノール、エタノール、グロバノール、ブタノール
などの低級アルコール類、エチレングリコール、グロピ
レングリコールなどのグリコール類、丑たはベンジルア
ルコールなどが使用される。

反応は不活性溶媒中で行ってもよいが、前記（Ｖｌ）式
のアルコール中で行うのが好′？に＋、、い。

酸触媒としては、塩酸、硫酸などの無機酸、酢酸、パラ
トルエンスルホン酸などの有機酸捷たは陽イオン交換樹
脂などが使用される。

反応温度は０°Ｃ〜１００℃通常室温〜８０℃で重重し
くは室温であり、反応時間は温度によって異り、１時間
ないし１０口間で、々ｒ１しくは１〜２日である。

（Ｉａ）式の化合物の（■）式のアルコールｖＣ苅する
溶解性が悪い場合には、一般式（Ｉａ）の化合物のアミ
ノ基及びイミノ基を保護基で保護してから反応させるこ
とが収率上重重しい。

保護基については、例えば公知の文献〔ジェー・エフ・
ダブリューｅマコミー（Ｊ、Ｆ、Ｗ。

Ｍｃｏｍｉｅ　）編のＰｒｏｌｅｃｌｉｖｅ　ｇｒｏｕ
ｐｓ　ｉｎ　ＯｖｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｉｎ
　Ｐｌｅｎｕｒｎ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎ、　Ｙ、、　１９
７３年〕を参照することができ、ペプチン合成に常用さ
れているアミノ保護基を使用することができる。例えば
、ベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオ
キシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル
、Ｌ−ブトキシカルボニル、トリクロロエトキシカルボ
ニル、イソボルニルオキシカルボニルなどの一価の保護
基捷たは、フタロイル、スクシニルなどの二価の保護基
などが用いられるが保護基の導入方法、除去方法の容易
なベンジルオキシカルボニルやｐ−メトキシベンジルオ
キシカルボニルなどのアラルキルオキシカルボニル基が
重重しい。これらの保護基の導入は公知の方法、例えば
、活性エステル法を用いることが有利である。一般にこ
の方法では一般式（Ｉａ）の化合物の有するグアニジノ
基には反応しない。

一般式（Ｉａ）の化合物にジアゾパラフィンを反応させ
、１１位のヒドロキシル基をアルキル化する方法は次の
ようにして行うことができる。

通常、捷ず一般式（Ｉａ）の化合物のアミノ基およびイ
ミノ基を上記の保護基で保護し、次いでこの化合物を、
塩化メチレンテトラヒドロフラン等の不活性有機溶媒中
で、−２０℃〜２０°Ｃ１通常は一１０°〜１０℃好壕
しくは一３℃〜３℃で１〜１５時間、通常２〜８時間、
ジアゾパラフィンと反応させることによりアルキル化を
行うことができる。

この反応は、触媒を必ずしも必要としないが触媒として
、三フッ化ホウ素、塩化アルミニウム、ホウフッ化水素
酸、二酸化セレンなどのルイス酸触媒の存在下で反応は
促進され３３− る。

使用される炭素数１ないし４のジアゾパラフィンとして
は、例えばジアゾメタン、ジアゾエタン、ジアゾプロパ
ンまたはシアシブクンなどをあげることができる。

これらのジアゾパラフィンは公知の方法〔例えば、 Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｆｆ、　］　６
５　（１９４３）（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎ
ｓ、　Ｉｎｃ、）Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ
　ｒｒｒ、　ｌ　Ｉ　９　（１９５５）（Ｊｏｈｎ　Ｗ
ｉｌｅｙ　　＆；　５ｏｎｓ、Ｉｎｃ、）Ｊｏｕｒｎａ
ｌ　ｏｆ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、　１
３．７６３（１９４８）Ｏｒｇａｎｉｃ　’５ｙｎｔｈ
ｅｓｉｓ　ＴＶ、２５０　（１９６３）（Ｊｏｌｌｎ　
Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ、　Ｉｎｃ、）Ｃｈｅｍｉｓ
ｈｅ　Ｂｅｒｉｃｈｔｅ　９４．　２５４７　（１９６
１）Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉもｃ
ｓｅａｒｃｈ　２８　Ｂ、　６８３　（１９５０）Ｏｒ
ｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ、ｍ、２４４　（１９
５５）（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ、　Ｉｎ
ｃ、）Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　５ｏ
ｃｉｅｔｙ　ｌ　９３５．　２８６　　］ニヨって、対
応するＮ−ニトロソアルキル尿素、Ｎ−ニトロソアルキ
ルウレタン、Ｎ−二３４− トロソアルキルスルホンアミド、Ｎ−ニトロソアルキル
−Ｎ′−二トログアニジンなどから合成される。

このジアゾパラフィンを用いる方法は、一般式（Ｉａ）
の化合物の１１位の立体配置を変えることなく、１１位
の水酸基にアルキル基を導入できるもので、例えばＨの
旋光性を有する一般式（Ｉａ）の化合物を用いると、対
応するＨ体の一般式（Ｉｂ）の化合物が得られ、（１）
体または、（」１体と（−１体の１１位のエピマー混合
体（（１１体）を用いればそれぞれ（１）体重たは←目
体が得られる。

水酸基を有することになるが、」二記いずれの場合も反
応性の相違により選択的Ｋ１１位の水酸基にアルキル基
を導入することができる。

１１位のアルコキシ化された化合物がアミノ基およびイ
ミノ基に保護基を有する場合には常法により除去するこ
とにより、一般式（Ｉｂ）の化合物とすることができる
。

例えば、保護基がアラルキルオキシカルボニル基であれ
ば、常法により常圧で接触還元を行うことにより達成さ
れる。溶媒としてはメタノール、エタノール、ジオキサ
ンまたは水などの単独または混合溶媒が好ましく、触媒
としてパラジウム、白金などが使用されつる。丑だ塩酸
、酢酸などの酸を加えることにより、反応が促進されう
る。

本発明の一般式（ＩＩの化合物のうち、Ｙが（式中ｎ、
Ｒ’は前記に同じ、但し、ｎが４を示すときＲ１は水素
原子以外の基を示す）で表わされる化合物において、１
５位が（８１または（Ｒ１のいずれかの一方であり、１
１位のエピマーの混合物の場合、クロマト的手段を用い
、両エピマー〔Ｈ体および（−１−１体〕に分離するこ
とができる。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ　Ｌ　
Ｃ）を用いるのが重重しく、実施するに当り、カラム充
填剤としては、例えばヌクレオシ／譚Ｃｌ８（Ｍ、ナー
ゲル社製）を用い、溶出液としては、例えば、アセトニ
トリル−ペンタンスルホ、ン酸ナトリウムーリン酸緩衝
液の混合溶液を用いると良好な結果を得ることができる
。

以上述べてきたように、ジアゾパラフィンを用いた１１
位の水酸基のアルキル化によりおよびＨＰ　Ｔ、　Ｃで
分離して得た光学活性な次の一般式Ｑｄ） （式中日およびＲ２は前記と同じ）で表わされる化合物
を、必要に応じてアミノ基およびイミノ基を前記保護基
で保護したのち、１５位の水酸基を脱水することにより
、光学活性な次の一般式（Ｉｅ） ３７− （式中ｎ　、　Ｒ２は前記に同じ）で表わされる化合物
に誘導することができる。

脱水反応として、例えばジシクロへキシルカルボジイミ
ドを塩化銅（１価もしくは２価）の存在下、作用させる
公知の脱水反応 （Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　
Ｃｈｅｍｉｃａｌ　５ｏｃｉｅｔｙ。

４．０．３２４．５（１９６８）］は、中性条件下、緩
和な条件で、行えるので重重しい方法である。

この場合、ジシクロへキシルカルボジイミドを過剰に用
いる方が反応時間を短縮できる。

溶媒は、原料化合物の溶解性より、例えば、Ｎ、Ｎ−ジ
メチルホルムアミドが好ましく、反応温度は通常室温〜
１００℃であり、反応時間は、温度により異るが、通常
数時間〜数日である。

（ＩＩ））式の化合物においてＲ２がベンジル基ヲ示す
化合物は、接触還元に附し脱ベンジル化することはより
、１１位の立体を保持した寸ｉ　（Ｉａ）式の化合物に
変換することができる。

この場合、アラルキルオキシカルボニル基を３８− 脱保護できる常圧接触還元では、反応が遅く例えば、酢
酸水溶液中、散気圧〜数１０気圧の加圧下で接触還元を
行うことにより、反応時間が短縮され好結果を得ること
ができる。

次に参考例および実施例により本発明を具体的に説明す
る。

実施例１．１−アミノ−２０−グアニジノ−１１゜１５
−ジヒドロキシ−４，９，１２−１−リアザエイコザン
ー１０．１３−ジオン （化合物番号１）の合成 ８−グアニジノ−３−ヒドロキシオクタンアミド塩酸塩
１５０ｍ９（０，５９ミリモル）、Ｎ−〔４−（３−ア
ミノプロピル）アミノブチル］−２．２−ジヒドロキシ
エタンアミドニ塩酸塩２０８ｍ９（０，７１ミリモル）
、グルタル酸７８ｍ９（０，５４）ミリモル）と水０．
１　ｍｌを混合し、６０℃で１日間加温した。反応後、
水５　ｍｌを加え、ＣＭ−セファデックスＣ−２５、Ｎ
ａ型（１５０ｍｌ）のカラムにかけ、水１１とＩ　ＭＮ
ａ　ｃｌ　１　、、ｇによるグラジェント溶出を行った
（１７ｇ分画）。分画８２−９４を合せ、濃縮乾固して
得た残渣をメタノール５　ｍｌで３回抽出した。抽出液
をセファデックスＬＨ−２０（１５０ｍｌ）のカラムに
かけ、メタノールで溶出し脱塩した（４１分画）。分画
１７−２４を合し、濃縮乾固して、白色粉末状の１−ア
ミノ−２０−グアニジノ−１１，１５−ジヒドロキシ−
４゜９．１２−）ジアザエ４コサン−１０，１３−ジオ
ン三塩酸塩を１２０．１ｍ９得た。収率３８．６％。

実施例２．　１−アミノ−２１−グアニジノ−１１゜１
５−ジヒドロキシ−４，９，１２−）リアザヘンエイコ
サン−１０，１３−ジオ／（化合物番号２）の合成 ９−グアニジノ−３−ヒドロキシノナンアミド塩酸塩３
２５．８ｍｇ（１，２３ミリモル）、Ｎ−〔４−（３−
アミノプロピル）アミノブチル〕−２，２−ジヒドロキ
シエタンアミドニ塩酸塩４２８．１１ｎ９（１，４７ミ
リモル）、グルタル酸１６１．４ｒｎｇ（１，２３ｍｇ
）と水０．３　ｍｌを混合し、６０℃で１日間加温した
。反応後、実施例１に準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−
２５、セファデックスＬＨ−２０を用いて精製し、白色
粉末状の１−アミノ−２１−グアニジノ−１１，１５−
ジヒドロキシ−４，９，１２〜トリアザヘンエイコサン
−１０，１３−ジオン三塩酸塩を２２０．８ｍ９を得た
。収率３３４％。

実施例３．１−アミノ−１９−グアニジノ−１１−ヒド
ロキシ−４，９，１２−）ジアザ−１４−ノナデセン−
１０，１３−ジオン（化合物番号６）の合成 ７−グアニジノ−２−ヘプテンアミド塩酸塩２３４．５
ｍ９（１，０６ミリモル）、Ｎ−（４−（３−アミノプ
ロピル）アミノブチル）　−２，２−ジヒドロキシエタ
ンアミドニ塩酸塩３７２．３ｍｇ（１２７ミリモル）、
グルタル酸］　４．０．４．ｍｇ　（］、、　０６ミリ
モル）と水０．２　ｍｌを混合し、６０　’Ｃ，で１日
間加温した。

反応後、実施例ＩＫ準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−２
５、セファデックスＬＨ−２０を用いて精製し、白色粉
末状の１−１９−グアニジノ−１１−ヒドロキシ−４，
，９，１２−）ジアザ−１４−ノナデセン−１０，１３
−ジオン三塩酸塩を２４４．６ｍ９得た。収率４６５％
。

４１一 実施例４１−アミノ−２０−グアニジノ−１１−ヒドロ
キシ−４，、９，１２−トリアザ−１４−エイコセン−
１０，１３−ジオン（化合物番号１０）の合成 ８−グアニジノ−２−オクテンアミド塩酸塩２０２．４
ｍｇ（０，８６ミリモル）、Ｎ−（４−（３−アミノプ
ロピル）アミノブチル］　−２，２−ジヒドロキシエタ
ンアミドニ塩酸塩３０２．４ｍｇ（１，０４Ｓ９モル）
、クルタル酸１１３．９〜（０，８６ミリモル）と水０
．２　ｍｌを混合し、６０℃で１日間加温した。

反応後、実施例Ｉに準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−２
５、セファデックスＬＨ−２０を用いて精製し、白色粉
末状の１−アミノ−２０−グアニジノ−１１−ヒドロキ
シ−４，９，１２−）リアザー１４−エイコセン−１０
，１３−ジオン三塩酸塩を１２８．３■得た。収率２９
．２％。

実施例５．１−アミノ−２１−グアニジノ−１１−ヒト
ロキシー４，９．１２−）リアザー１４−ヘンエイコセ
ン−１０，１３−ジオン（化合物番号１１）の合成 ４２− ９−グアニジノ−２−ノネンアミド塩酸塩２０６．２ｍ
ｇ（０，８４ミ　リモル）、Ｎ−（４−（３−アミノプ
ロピル）アミノプチルコー２．２−ジヒドロキシエタン
アミドニ塩酸塩２９１．．０ｍ９（１，００ミリモル）
、グルタル酸１０９．６ｍｇ（０゜８４ミリモル）と水
０．２　ｍｌを混合し、６０℃で１日間加温した。

反応後、実施例１に準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−２
５、セファデックスＬ　Ｉ（−２０を用いて精製し、白
色粉末状の１−アミノ−２１−グアニジノ−１１−ヒド
ロキシ−４，９，１２−）リアザー１４−ヘンエイコセ
ン−１０，１３−ジオン三基ｅ塩を１３５．０ｍ９得た
。収率３１．１％。

実施例６１−アミノ−２１−グアニジ／−１５−ヒドロ
キシ−１１−メトキシ−４，９゜１２−　）　！Ｊアザ
ヘンエイコ”ｊ−７−１０゜１３−ジオン（化合物番号
３）の合成 １−アミノ−２１−グアニジノ−１１，１５−ジヒドロ
キシ−４，９，１２−）リアザヘンエイコザン−１０，
１３−ジオン三塩酸塩５２．０ｍ！ｌ、＋（０，１０ミ
リモル）を無水メタノール１　ｍｌに溶かし、２Ｎ−塩
酸−メタノール０．１　ｍｌを加え、室温で１晩攪拌し
た。反応液に水５　ｍｌを加え、　ｐＨを６に調整した
後濃縮乾固して得た残渣を実施例１に準じ、ＣＭ−セフ
ァデックスＣ＝２５、セファデックスＬ　Ｉ（−２０を
用いて精製し、白色粉末状の１−アミノ−２１−グアニ
ジノ−１５−ヒドロキシ−１１−メトキシ−４，９，１
２−）リアザヘンエイコサン＝１０．１３−ジオン三塩
酸塩を４１，１〜得た。収率７４１％０ 実施例７．１−アミノ−１９−グアニジノ−１１−メト
キシ−４，９，１２−）リアブー１４−ノナデセン−１
０，１３−ジオン（化合物番号７）の合成 １−アミノ−１つ一グアニジノー１１−ヒドロキシー４
，９．１２−）リアブー１４−ノナデセン−１０，１３
−ジオン三塩酸塩５０．３ｍ９（０，１０ミリモル）を
無水メタノール１　ｍｌに溶かし、２Ｎ−塩酸−メタノ
ールＯ，１ｍｌを加え、室温で一晩攪拌した。

反応液に水５　ｍｌを加え、ｐＨを６に調整した後、濃
縮乾固して得た残渣を実施例１に準じ、ＣＭ−セファデ
ックスＣ−２５，セファデックスＬｌｌ−２０を用いて
精製し、白色粉末状の１−アミノ−１９−グアニジノ−
１１−メトキシ−４，９，＋２−トリアザ−１４−ノナ
デセン−１０，１３−ジオン三塩酸塩を３７．２〜得た
。収率７２．４％０実施例８．１−アミノー２Ｉ−グア
ニジノ−１１−（２−ヒドロキシ）エトキシ−１５ −ヒドロキシ−４，９，１２−）リアザヘンエイコサン
−１０，１３−ジオン（化合物番号４）の合成 １−アミノ−２１−グアニジノ−１１，１５−ジヒドロ
キシ−４，９，１２−）リアザヘンエイコザン−１０，
１３−ジオン三塩酸塩５３．０ｍ９（０，１０ミリモル
）をエチレングリコール２　ｍｌに溶かし、塩化水素ガ
スを飽和したエチレングリコール（１，２ｍｌを加え、
室温で１日間攪拌した。水５　ｍｌ、を加え、　ｐｌＴ
を６に調整した後、実施例１に準じＣＭ−セファデック
スＣ−２５、セファデックスＬ　Ｈ−２０ヲ用いて精製
し、白色粉末状の１−アミノ−２１−゛グアニジノ−１
１−（２−ヒドロキシ）エトキシ４５− −１５−ヒドロキシ−４，９，１２−）リアザヘンエイ
コサン−１０，１３−ジオン三塩酸塩を４２．５　ｍ９
得た。収率７２．６％。

実施例９．１−アミノ−２１−グアニジノ−１１−（２
−ヒドロキシ）エトキシ−４，９゜１２−トリアザ−１
４−ヘンエイコセ ン−１０，１３−ジオン（化合物番号 １２）の合成 １−アミノ−２１−グアニジノ−１１−ヒドロキシ−４
，９，１２−）リアザー１４−ヘンエイコセｙ−１０，
１３−ジオン三塩酸塩５２．１ｍｇ（０，１０ミリモル
）をエチレングリコール２ｍ１Ｋ溶かし、塩化水素ガス
を飽和したエチレングリコール０．２　ｍｌを加え、室
温で１日間攪拌した。水５　ｍｌを加え、ρＩ−１を６
に調整した後、実施例１に準じ、ＣＭ−セファデックス
Ｃ−２５，セファデックスＬＨ−２０を用いて精製し、
白色粉末状の１−アミノ−２１−グアニジノ−１１−（
２−ヒドロキシ）エトキシ−４，９，１２−）ジアザ−
１４−ペンエイコセン−１０，１３−ジオン三塩酸塩４
３．１　ｍ９得た。収率４６− ７３６％。

”１％ｍ例１０．　１−アミノ−１１−ペンジルメーキ
シ＝２１−グアニジノ−１５−ヒドロ キシ−４，、９，］　２−　）リアザヘンエイコサン−
１０，１３−ジオン（化合物 番号５）の合成 １−アミノ−２１−グアニジノ−１１，１５−ジヒドロ
キシ−４，９，１２−）ＩＪアザヘンエイコヤーン−１
０，１３−ジオン三塩酸塩５４．０ｍｇ（０，１０ミ１
ノモル）にベンジルアルコール３伍ｌ！ト塩化水素カス
を飽和したベンジルアルコール 温で１日間攪拌した。反応液を水１０ｍｔで２回抽出し
、水層のｐＨな６に調整した後、減圧濃縮して得た残渣
を実施例１に準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−２５、セ
ファデックスＬ　Ｉ−Ｉ　−　２　０をノ月いてｎｌＡ
し、白色粉末状の１−アミノ−１１−ベンジルオキシ−
２１−グアニジノ−１５−ヒドロキシ−４．９．１２−
）リアザヘンエイコサン−１０，１３−ジオン三塩酸塩
を４　４．　７　ｍ９得た。収率７０８％０実施例１１
．’ｌ−アミノ−１１−ベンジルオキシ−１９−グアニ
ジノ−４．９．１２−トリアザ−１４−ノナデセン−１
　０。

１３−ジオン（化合物番号９）の合 成 １−アミノ−１９−グアニジノ−１１−ヒドロキシ−４
，９．１２−トリアザ−１４−ノナデセン−１０、１３
−ジオン三塩酸塩５　０．０ｍｇ（　０．１　０ミリモ
ル）にベンジルアルコール３　ｒｎｌｌと塩化水素ガス
を飽和したベンジルアルコール０．　３　ｍｌを加え、
室温で１日間攪拌した。反応液を水１０ｍｌ！で２回抽
出し、水層のｐＬＩを６に調整した後、減圧濃縮して得
た残渣を実施例１に準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−２
５、セファデックスＬＨ−２０を用いて精製し、白色粉
末状の１−アミノ−１１−ベンジルオキシ−１９−グア
ニジノ−４．９．１２−）ジアザ−１４−ノナデセ／−
　１　０．　１　３−ジオン三塩酸塩を４１．７ｍ！？
得た。収率７１．３％。

実施例１２．　１−アミノ−１１−ブトキシ−１９−グ
アニジノ−４．９．１２−）ジアザ−１４−ノナデセン
−１０．１３−ジ オン（化合物番号８）の合成 １−アミノ−１９−グアニジノ−１１−ヒドロキシ−４
．９．１２−）リアブー１４−ノナデセン−１０、１３
−ジオン三塩酸塩４　９．２ｍｇ（　０．１　０ミリモ
ル）にｎ−ブタノール５　ｍｌと塩化水素ガスを飽和し
たｎ−ブタノール０．　５　ｍａｌを加え、室温で２日
間攪拌した。０−ブタノール可溶部を濃縮乾固して得た
残渣を、実施例ＩＮ準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−２
５、セファデックスＬ　Ｈ　−　２　０を用いて精製し
、白色粉末状の１−アミノ−１１−ブ）・キシ−１９−
グアニジノ−４．９．１２−１−リアブー１４−ノナデ
セン−１０．１３−ジオン三塩酸塩を３、　０．　１　
ｍｇ得た。収率５４７％。

実施例１３．１１−ｏ−メチルスパガリン（化合物１３
）の合成 Ｈ−スパガリン三塩酸塩１．８５’（３．５１ミリモル
）を無水メタノール３５ｍｌに溶かし、２Ｎ−塩酸−メ
タノール３．　５　ｍｌを加え、室温で１５時間攪拌し
た。反応液を濃縮乾固して得た残渣を水３〇４９− ｍｌＥＫ溶かし、ＣＭ−セフ７デツクス■Ｃ−２５（Ｎ
ａ型、６　０　０　ｍｌ．　）のカラムにかけ、水から
ＩＭＮａＣＩ（各３１）によるグラジェント溶出を行っ
た（１７１ずつ分画）。分画２０８−２３０を合して濃
縮乾固し、１０ｍｌのメタノールで３回抽出した。

この抽出液をセファデックスＬＨ　−　２’　Ｏ　（　
３’Ｏ　Ｏｍｌ　）のカラムにかけ、メタノールで溶出
し脱塩した（７１ずつ分画）。分画１９−３３を合して
濃縮乾固し白色粉末状の１１−〇ーメチルスノくガリン
三塩酸塩のエピマーの混合物を１．５２８’ｉ得た（収
率８２％）。

実施例１４．１１−ｏ−エチルスノくガリン（化合物１
４）の合成 スパガリン三塩酸塩（Ｈ−スノくガリン：（＋ｌースパ
ガリン品１　：　１　）　４　８４ｍｇ（　０．９４ミ
リモル）に無水エタノール２０ｒｒｔｌと２Ｎ−塩酸−
エタノール２　ｍｌを加え、室温で２日間攪拌した。反
応液を濃縮乾固して得た残渣を水１０ｍｌに溶かしＩＮ
−ＮａＯＩ−Ｔでｐｔｌ　４に調整した後、実施例１に
準じ、ＣＭ−セファデックスＣ−２５（Ｎａ型）および
セファデックスＬＨ−２０を用いて精製し、白色粉末状
の１１−０−エチルスパガリン三塩酸塩のエピマーの混
合物を３５５．６ｍｇ得た（収率７０％）。

実施例１５．１ｌ−ｏ−ｎ−ブチルスパガリン（化合物
１５）の合成 Ｈ−スパガリン三塩酸塩４９３ｍ９（０，９６ミリモル
）にｎ−ブタノール３０ｍ１と塩化水素ガス飽和のロー
ブタノール３　ｍｌを加え、室温で２日間攪拌した。ロ
ーブタノール可溶部を濃縮乾固して得た残渣を水１０ｍ
１に溶かし、Ｉ　Ｎ　−Ｎａ　０Ｉ−１でｐＴ＝１４．
　Ｋ調整した後、実施例１に準じ、ＣＭ−セファデック
スＣ−２５（Ｎａ型）およびセファデックスＬ　Ｉ−Ｔ
−２０を用いて精製し、白色粉末状の１ｌ−ｏ−ｎ−ブ
チルスパガリン三塩酸塩のエピマーの混合物を］Ｉ４．
７ｍｇ得た（収率２１％）。

実施例１６．　１ｌ−ｏ−（２−ヒドロキシ）エチルス
パガリン（化合物１６）の合成 −一スパガリン三塩酸塩２．８８１５．６１ミリモル）
をエチレングリコール１００　ｍｌに溶かし、塩化水素
ガス飽和のエチレングリコール１０ｍｅを加え、室温で
１日間攪拌した。水２００　ｍｌを加え、１　Ｎ　−Ｎ
ａ　０Ｔ−１でｐ）（４に調整した後、実施例１に準じ
ＣＭ−セファデックスＣ−２５（Ｎａ型）およびセファ
デックスＬ　Ｉ−１−２０を用いて精製し、白色粉末状
の１ｌ−０−（２−ヒドロキシ）エチルスパガリンのエ
ピマーの混合物を２．７１得た（収率７３％）。

実ｍ例１７．　１１−０−ベンジルスパガリン（化合物
１７）の合成 一一スバガリン三塩酸塩２．３６　ｐ（４，６０ミリモ
ル）に、ベンジルアルコール９０　ｍｌと塩化水素ガス
飽和のベンジルアルコール９　ｍｌを加え、室温で一晩
攪拌した。反応液を水３５０　ｍｌで１回抽出し水層を
Ｉ　Ｎ　−Ｎａ　ＯＨでｐＨを６．０に調整した後、濃
カラムにかけ、０．５ＭＮａＣ１，０，４ＭＮａ　Ｃ１
、水を各１、５　ｆｆｌ用い順次溶出した。水溶出部を
濃縮乾固して得た残渣を実施例１に準じ、セファデック
ス■ＪＩ■−２０を用いて脱塩し、白色粉末状の１１−
０−ベンジルスパガリン三塩酸塩のエピマーの混合物を
１．９２　ｐ得た（収率６９％）。

実施例１８．　　ｌ’１−ｏ−メチルスパガリンの分離
実施例１３で得られた１ｌ−ｏ−メチルスパガリン三塩
酸塩のエピマーの混合物を分離するためにＨＰＬＣを用
いた。ＨＰ　Ｌ　ＣとしてはＣ１８逆相充填剤ヌクレオ
シル３ｏ　Ｃｐｓ　（Ｍ、ナーゲル社製）を充填した２
ｍｙＩ×２５Ｃｒｎのカラムを用いた。分離は以下の条
件で実施した。

流速：］Ｏｍｌ／ｍｉｎ 圧カニ３Ｑｋｙ／ｃｙ 溶媒ニア七トニトリル：０．０ＩＮペンタンスルホン酸
Ｎａ　＋０．０１　ＭＮａ２ＨＰＯ４（ｐＨ３）　＝９
　：　９１ 負荷：６Ｉｎｇ 検出：ＵＶ２０５ｎｍ ＨＰ　Ｌ　ＣではＵＶ吸収を示すピークとしてまず（−
］−１１−ｏ−メチルスパガリンが、ついで（＋１−１
１−〇−メチルスパガリンが溶出した。１２回の分取に
より得られた各ピークを集めて実施例１３に５３− 準じＣＭ−セファデックス■Ｃ−２５（Ｎａ型）および
セファデックスＬＨ−２０で精製し、Ｈ−１１−ｏ−メ
チルスパガリン三塩酸塩の白色粉末状を３２、９　ｍｇ
、および（−Ｈ−１１−ｏ−メチルスパガリン三塩酸塩
の白色粉末を２４．５　ｍｇ得た。

実施例１９．１ｌ−ｏ−エチルスパガリンの分離実施例
１４で得られた１１−０−エチルスパガリン三塩酸塩の
エピマーの混合物を分離するために■旧）ＬＣを用いた
。方法は実施例１８と同様の方法で行い分離条件の溶媒
のみを変えた。

溶媒ニアセトニトリル：Ｏ，０１Ｍペンタンスルホン酸
Ｎａ　＋　０．　ＯＩ　ＭＮａ２　ＨＰ　Ｏａ　（ｐＨ
３）　＝１０．５　：　８９．５ ６回の分取により、　（−］−Ｉ１１−　ｏ−エチルス
パガリン三塩酸塩の白色粉末を１１ｍｇおよび（−Ｈ−
１１−〇−エチルスパガリン三塩酸塩の白色粉末を１４
５ｍｇ得た。

実施例２０．１ｌ−ｏ−ｎ−ブチルスパガリンの分離 実施例１５で得られた１ｌ−Ｏ−プチルスパガ＝５４− リンの二塩酸塩のエピマーの混合物を分離するためにＨ
Ｐ　Ｌ　Ｃを用いた。方法は実施例１８と同様の方法で
行い分離条件の溶媒のみを変えた。

溶媒ニアセトニトリル＝００１Ｍペンタンスルホン酸Ｎ
ａ　＋０．０１　ＭＮａ２１１ＰＯ，（ｐＨ３）　−１
４，５：　　８５．５ ６回の分取により、（−１−１１−ｏ　−ｎ−ブチルス
パガリン三塩酸塩の白色粉末を１５ｍ９および（１）＝
１１−ｏ−ｎ−ブチルスパガリン三塩酸塩の白色粉末を
１６ｍ９得た。

実１ｍ例２１．　１１−　ｏ−ベンジルスパガリンの分
離 実施例１７で得られた１ｌ−Ｏ−ベンジルスパガリン三
塩酸塩のエピマーの混合物を分離するためにＨＰＬＣを
用いた。方法は実施例１８と同様の方法で行い、分離条
件の溶媒のみを変えた。

溶媒ニアセトニトリル：０．０１Ｍペンタンスルホン酸
Ｎａ　十０．０１　ＭＮａ２　Ｉ−ＴＰ　０４　（ｐＨ
３）　−１６：８４ ９回の分取により、←ｌ−１１−ｏ−ベンジルスパガリ
ン三塩酸塩の白色粉末を２１．２ｍｇ、および（＋−１
１−ｏ−ベンジルスパガリン三塩酸塩の白色粉末を１８
．８ｍ９得た。

実施例２２．　１ｌ−ｏ−（２−ヒドロキシ）エチルス
パガリンの分離 実施例１６で得られた１ｌ−ｏ−（２−ヒドロキシ）エ
チルスパガリン三塩酸塩のエピマーの混合物を分離する
ためにＩ−Ｉ　Ｐ　Ｌ　Ｃを用いた。方法は実施例１８
と同様の方法で行い、分離条件の溶媒及び負荷量のみを
変えた。

溶媒ニアセトニトリル：０．ＯＩＭペンタンスルホン酸
Ｎａ＋　０．０１　ＭＮａ２ＨＰＯ，（ｐＨ３）　＝　
７　：３ 負荷：２０ｒｖ ６回の分取により（−１−１１−０−（２−ヒドロキシ
）エチルスパガリン三塩酸塩の白色粉末を２，３〜、お
よび田ｌ−１１−０−（２−ヒドロキシ）エチルスパガ
リン三塩酸塩の白色粉末を２．５ｍｇ得た。

実施ｆＪ２３．　　（−１−１１−Ｑ−メチルスパガリ
ンの合成 （イ）＠−１−Ｎ、４−ビス（ベンジルオキシカルボニ
ル）スパガリン Ｈ−スパガリン三塩酸塩２．３　Ｐ　（４，４８ミリモ
ル）をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド１１ｍ１と水１１
ｍ１の混合液に溶かし、水冷下トリエチルアミン１．２
５ｍＡ！（８，９６ミリモル）を加え、さらにＮ−ベン
ジルオキシカルボニルオキシコノ−り酸イミド２．２４
　ｆＦ（８，９７ミリモル）をＮ、Ｎ−ジメチルホルム
アミド１１ｍ１に溶かした溶液を加え、５℃で１５時間
攪拌した。反応液を減圧濃縮して得た残渣を０．５　Ｍ
Ｎａ　Ｃ１］　Ｏｍｌにとかし、０、５　ＭＮａ　Ｃ１
で平衡化したダイヤイオンＩ−Ｉ　Ｐ　−２０（４００
ｍｌ）のカラムにかけ、０．５　ＭＮａ　Ｃ１１、、ｅ
、水１１で洗浄後、メタノールで溶出した（１５ｙ−ず
つ分画）。分画２１−３０を合して濃縮乾固し、白色粉
末状のＨ−１−Ｎ、４−ビス−（ベンジルオキシカルボ
ニル）スパガリン塩酸塩２．８７９−を得た（収率８２
％）。

＠ｔ−１１°　（Ｃ１，水）。プロトンＮＭＴ（（重メ
タノール中測定）δ：１．３〜２．０　（ＣＪ−１゜×
６）、５７− ２、３８　（Ｃｌ−ｌ２）、　２．９〜３．４　（ＮＣ
Ｈ２ｘ　５　）　、　　４．　ｏ（ＣＨ）５．０４　（
ＣＨ２）、　５．０７　（ＣＨ２）、　５．５６　（Ｏ
Ｈ）、　７．３０（ＣａＨｓ　Ｘ　２　）。

（口ｌ　　（−１−１−Ｎ、４−ビス−（ベンジルオキ
シカルボニル）−１１−ｏ−メチルスパガリン：前項（
イ）で得られたＨ−１−Ｎ、４−ビス−（ベンジルオキ
シカルボニル）スパガリン塩酸塩３７８ｍｇ（０，４８
４ミリモル）を塩化メチレン１２ｍ１に溶かし、水冷下
、３７ツ化ホウ素−エーテル錯塩０．１　ｍｌを塩化メ
チレン４　ｍｌに溶かした溶液２．４４ｍ１（０，４８
４ミリモル）を加えた。

ついでジアゾメタンの塩化メチレン溶液を３０分から１
時間間隔にｌ　ｍｌずつ合計９　ｍｌ加えた。

（ジアゾメタンの塩化メチレン溶液は次のようにして調
製した。４０％ＫＯＨ溶液３０ｍ１と塩化メチレン１０
０ｍＪを混ぜ、水で４０℃に冷却しながら徐々にＮ−ニ
トロソメチル尿素１０１を添加した。有機層を分取し、
水層をもう一度塩化メチレン１０ｍ１で抽出し、粒状の
ＫＯＨを加えて５℃で３時間脱水した。）反応開始後、
５８− ３時聞手で攪拌を止め、希酢酸数滴を加え、減圧濃縮し
、残渣を５０％メタノール水３　ｍｅにとかし、ダイヤ
イオンＩ−ＩＰ−２０（１００ｒａｌ）にかけ、１０％
メタノール水３００　ｍｅで溶出後、メタノールで溶出
した。（］、、　５　ｍｌｌずつ分画）分画２５−２８
を減圧濃縮して白色粉末のＨ−１−Ｎ、４−ビス−（ベ
ンジルオキシカルボニル）−１１−ｏ−メチルスパガリ
ン塩酸塩と未反応のＨ７１−Ｎ、４−ビス−（ベンジル
オキシカルボニル）スパガリン塩酸塩の混合物を２６２
．４ｍｇ得た（重量回収率６９２％）。

この混合物の組成比をＩ−ＩＰＬＣ（カラム：ヌクレオ
シル５Ｃ１８，４，ＯＸ　ｌ　５０ｍｍ、溶出液：アセ
ト　ニ　ト　　リ　ル　：　　　０．０　　１　　Ｍ　
　（Ｎｌ−１４）ｄＩＰ０４　　＝　　１　　：　　　
１　、流速：　０．８　ｍｌｌ　ｍｉｎ　）で分析した
結果、Ｈ−１−Ｎ、４−ビス−（ベンジルオキシカルボ
ニル）−１１−０−メチルスパガリン塩酸塩（保持時間
１０、４７　ｍ１ｎ）　：　Ｈ−１−Ｎ、４−ビス−（
ベンジルオキシカルボニル）スパガリン塩酸塩（保持時
間７．７４　ｍｉｎ　）は４７：５０であった。

この混合物７８．５　ｍ９をシリカゲル６０カラム（メ
ルク社製）　３０　ｍｌにかげ、１０％メクノールーク
ロロホルムで溶出し、ＨＰＬＣ（条件は前記の通り）で
、保持時間１０．４７ｍ１ｌにＵＶ吸収を示す分画を集
め、減圧濃縮して、白色粉末の（−１−１−Ｎ、４−ビ
ス−（ベンジルオキシカルボニル）−１１−ｏ−メチル
スパガリン塩酸塩２８、６　ｍ９を得た。

＠、ｊ５−１４．４°（Ｃ１，メタノール）。プロトン
ＮＭＲ（重メタノール中測定）δ：１．３〜２．０（Ｃ
Ｈ２Ｘ　６　）　、　２．４２　（ＣＩ−１２）、　２
．９〜３．４（ＮＣＨ２ｘ５　）　、　３．３７　（Ｏ
ＣＩ−１３）、　４．０　（ＣＨ）、　５．０３　（Ｃ
Ｈ２）。

５．０８　（ＣＩ−１２）、　５．３４　（ＣＩ（）、
　７．２９　（Ｃ６Ｈ５Ｘ、２）。

Ｃ４（−１−１，１−ｏ−メチルスパガリン前項仲）で
得られた（−１−１−Ｎ、４−ビス−（ベンジルオキシ
カルボニル）　−１１，−ｏ−メチルスパガリン塩酸塩
と（−］−］１−Ｎ、４−ビスーベンジルオキシカルボ
ニル）スパガリン塩酸塩の４７：５０の混合物１３０ｍ
９をエタノール５ｍＡ。

水５　ｍｌ、ｌＮ−ＨＣｌ　０．３６　ｍ１３ｔ７）混
液に溶かし、１０％パラジウム炭素５０〜を加え、水素
気流中で室温４時間攪拌した。触媒を沖去し、ｐ液を濃
縮乾固した。これを水３ｍｌに溶かし、Ｃ，Ｍ−セファ
デックスＣ−２５［ｇＮａ型］１５０ｍＪのカラムニか
け、水とＩ　ＭＮａ　ｃ＋　（各９００ｍ１）によるグ
ラジェント溶出を行った。（１７グずつ分画）分画７６
−８１を合し濃縮乾固し、実施例１に準じ、セファデッ
クスＬ　Ｈ−２０を用いて脱塩し、白色粉末の（−１−
１１−ｏ−メチルスパガリン三塩酸塩を２５．４１ｎ９
得た（収率５１％）。

＠も’−２７．１°（ＣＩ、Ｈ２Ｏ） ＣＭ−セファデックスの溶出分画８３−８６より、同様
に脱塩処理して白色粉末のＨ−スパガリン三塩酸塩を２
４．５　ｍ９回収した（回収率５２％）。

実施例２　Ｌ　　Ｈ−１１−ｏ−エチルスパガリンの合
成 実施例２３の（イ）項で得られた＠−１−Ｎ、４−ビス
ー（ベンジルオキシカルボニル）スパガリン塩酸塩３５
２ｍｇ（０，４５１ミリモル）を用い、実施６１− 例２３の（ロ）項と同様の方法で、ジアゾエタンの塩化
メチレン溶液を作用し、　（−１−１−Ｎ、４−ビス−
（ベンジルオキシカルボニル）−１１−ｏ−エチルスパ
ガリン塩酸塩と未反応の（−１−１−Ｎ、４−ビス−（
ベンジルオキシカルボニル）スパガリン塩酸塩の混合物
を２１７．０ｍ９得た。これを実施例２３の０１項と同
様の方法で反応し、白色粉末の（−）−１１−ｏ−エチ
ルスパガリン三基酸塩ヲ４１．７■得た（全収率１７．
１％）。

＠へ５−２４．８°（ＣＩ、Ｉ＝１２０）参考例１、８
−グアニジノ−３−ヒドロキシオクタンアミドの合成 ａ）８−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ケトオ
クタン酸エチルエステルの合成 ６−アミンへキサン酸６．５６ｐ（５０ミリモル）を２
　Ｎ　−ＮａＯＨ２５ｍｌに溶かし、エチルエーテル５
　ｍｌを加え、水冷下、攪拌しながらベンジルオキシカ
ルボニルクロリド１０ｍ１３と２Ｎ−Ｎａ　ＯＨ３７，
５ｍｌを３０分かげて滴下した。滴下後、室温にもどし
、２時間攪拌を続けた後、反＝６２＝ 応液をエチルエーテル２０　ｍｌで２回洗浄した。

水層な濃塩酸で酸性にし、酢酸エチル５０　ｍｅで３回
抽出した。抽出液を合せ、飽和食塩水で洗浄後、無水硫
酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を留去して、６−ペンジル
オキジカルボニルアミノヘギザン酸を１２．１６Ｐ得た
。収率９２％ｏｈｉｌｌ！点１２７〜８°ｃ。

６−ペンジルオキジカルポニルアミノー＼ギザン酸２．
６５７（１０ミリモル）と市販の１．１’−カルボニル
ジイミダゾール１．６２７（１０ミリモル）を無水テト
ラヒドロフラン２５ｍｅに溶かし、室温で１５分間攪拌
した。反応液にモノエチルマロン酸のマグネシウムエル
レートの白色粉末６、］　８　Ｐ　（４，０ミリモル）
（モノエチルマロン酸５．２８＠とマグネシウム９７２
　ｍｙより調製）を無水テトラヒドロフラン５０ｍ１Ｋ
懸ｌ蜀させた液を加え、室温で２時間攪拌した。反応液
にＩ　Ｎ　−ＨＣＩ　５０　ｍ１１！を加え、１０分間
攪拌した後、クロロホルム５０ｍ１で３回抽１１１シた
。クロロホルム層をＩ　Ｎ　−ＨＣＩ、飽和炭酸水素す
トリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥し、溶媒を留去した。得られた残渣をシ
リカゲル６０（メルク社製）１００ｇ−のカラムにかけ
、クロロホルムで溶出した（２０１分画）。分画４３−
１０５を合して濃縮乾固し、８−ベンジルオキシカルボ
ニルアミノ−３−ケトオクタン酸エチルエステルを２、
３５　ｑ−得た。収率７０％。プロトンＮＭＲスペクト
ル（重クロロホルム中測定）δ：１．２７（（Ｊ−Ｉａ
　）　、　ｉ、　１〜１．９　（ＣＨ２Ｘ　３）　、　
　２．５２　（ＣＨ２）。

３．１７（ＮＣＩ−Ｉ、、）、　３．４０（ＣＨ２）、
　４．１８（ＣＩ−１２）。

５．０５　（Ｎ４−１）、　５．０９　（ＣＨ２）、　
７．３２　（Ｃ６Ｈ５）。

赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠と−して測定）３３６
０．２９２０，１７３０．１７１０．１５２０゜１２４
０ｃｍ　。

１））　　８−グアニジノ−３−ヒドロキシオクタンア
ミドの合成 前項ａ）で得られた８−ベンジルオキシカルボニルアミ
ノ−３−ケトオクタン酸エチル２．０１ｇ−（６ミリモ
ル）をエタノール２０　ｍｌ！に溶かし室温で攪拌しな
がら、水素化ホウ素すトリウム２２７ｍｇ（６ミリモル
）を少しずつ加えた。

３０分間攪拌した後、酢酸を数滴加え、反応液を水１０
０　ｍｌ中にあけ、クロロホルム５０ｍｅで３回抽出し
た。クロロホルム層を合せ、ｌＮ−ＨＣｌ、飽和炭酸水
素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄した後、無
水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し、８−ベン
ジルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシオクタン
酸エチルエステルを２．００グ・得た。収率９９％。

融点４７〜５０℃。

８−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ
オクタン酸エチルエステル１．６９Ｐ（５ミリモル）を
アンモニアガスを飽和したメタノール４０ｍ１Ｋ溶かし
、室温で３日間攪拌した。反応液を濃縮乾固して得た残
渣をエタノールから結晶化し、８−ベンジルオキシカル
ボニルアミノ−３−ヒドロキシオクタンアミドを１．１
８５’得た。収率７２５％。融点１００〜ＩＱＣ８ ６５− ８−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ
オクタンアミド１．０４ｊｉ’（３，２ミリモル）をメ
タノール２０ｍ１に溶かし、ｌＮ−ＨＣｌ　３．２　ｍ
ｌと１０％パラジウム−炭素２００ｍ９を加え、水素気
流中、室温で３時間攪拌した。

触媒を戸去し、Ｐ液を濃縮乾固して、８−アミノ−３−
ヒドロキシオクタンアミド塩酸塩を６７０　ｍ９得た。

８−アミノ−３−ヒドロキシオクタンアミド塩酸ｔｉ６
７０ｍ９をＩ　Ｎ　−Ｎａ　ＯＨ８ｍｌに溶かし、Ｓ−
メチルイソチオウレア硫酸塩６６８ｍ９（２，４ミリモ
ル）を加え、室温で一晩攪拌した。

反応液をｌＮ−ＨＣｌでｐＨを６に調整し、濃縮乾固し
て得た残渣をＩ　Ｍ　−ＮａＣｌ　５ｍｌに溶かし、ダ
イヤイ；Ｊ　ｙ　Ｉ−Ｉ　Ｐ　−２０（三菱化成製）　
１６０　ｍｌＯカラムにかけ、Ｉ　Ｍ　−ＮａＣｌ　４
００ｍｌ、　０．８　Ｍ−ＮａＣ１４００ｍｌ、０．６
　Ｍ−ＮａＣ１８００ｍｌと順次溶出した（１５１分画
）。分画４１−８７を合して濃縮乾固して得た残渣をメ
タノール１０’ｍｌで３回抽出した。メタノール抽出液
をセファデ６６− ックスＬＨ−２０（スウェーデンのファルマシア製）　
３００　ｍｌのカラムにかけ、メタノールで溶出し、脱
塩した（７ｍ１分画）。分画２５−３５を合して濃縮乾
固し、８−グアニジノ−３−ヒドロキシオクタンアミド
塩酸塩を６８７ｍｇ得た。収率８５％。プロトンＮＭＲ
スペクトル（重メタノール中測定）δ：１．４〜１．８
　（Ｃ，ＩＴ２Ｘ４　）、　２．３６　（ＣＨ２）、　
３．２０　（ＮＣＨ２）、　３．９５（ＣＨ）。赤外線
吸収スペクトル（ＫＨ２錠として測定）３３５０．３１
７０，２９３０．１Ｇ５５゜１４００．１１７５／７Ｆ
１　。

参考例２．９−グアニジノー３−ヒドロキシノナンアミ
ドの合成 ７−アミンへブタン酸２．５６Ｐを原料として用い、参
考例１の８−グアニジノ−３−ヒドロキシオクタンアミ
ドの合成と同様に行い、９−グアニジノ−３−ヒドロキ
シノナンアミド塩酸塩８９２〜を得た。プロトンＮ　Ｍ
　Ｒスペクトル（重メタノール中測定）δ：１．２〜１
．９　（ＣＨ２Ｘ　５　）　、　２．３５（ＣＨ２）、
　３．１９　（ＮＣＨ２）、　３．９２　（ＣＩ−Ｔ）
。赤外線吸収スペクトル（ＫＨ２錠として測定）３３５
０゜３１８０．２９４０，１６６０．１４００．］　１
７５ｃｒｎ０参考例３７−グアニジノ−２−ヘプテンア
ミドの合成 ７−グアニジノ−３−ヒドロキシヘプタンアミド塩酸塩
９５５ｍ９（４ミリモル）をＮ、Ｎ−ジメチルホルムア
ミド２０　ｍｌに溶かし、ジシクロへキシルカルボジイ
ミド２．４８７（１２ミリモル）と塩化銅（２価）　４
０　ｍ９を加え、室温で２日間攪拌した。析出している
ＤＣ−尿素を沖去し、Ｐ液を減圧濃縮して得た残渣を水
１０ｍ１に溶かし、酢酸エチル１０ｍ１で２回洗浄した
。水層を濃縮乾固して得た残渣を水５　ｍｌに溶かし、
ＣＭ−セファデックスＣ−２５、Ｎａ　型（スウェーデ
ン・ファルマシア製）５０ｍｌＯカラムにかけ、水１５
０　ｍｌ、続いて０．５　ＭＮａＣｌ　２００ｍｌで溶
出した（１０ｆ／−分画）。

分画１７−３０を合して、濃縮乾固し、残渣をメタノー
ル５　ｍｌで３回抽出した。メタノール抽出液をセファ
デックスＬＨ−２０（１５０ｍｌ＞のカラムにかけ、メ
タノールで溶出し脱塩した（５１分画）。分画９−１６
を合し、濃縮乾固して、７−ゲアニジノー２−へブテン
アミド塩酸塩を７りＯｍｇ得た。収率８９．５％。融点
１６２−８℃０プロトンＮＭＲスペクトル（重メタノー
ル中ｉ＋ｌｌＩ　定）δ：　１．４〜１．８　（ＣＩ−
Ｔ２ｘ２　）、　２．２７　（Ｃ１１２）、　３．２０
（ＮＣＲ２）、　５．９８　（ＣＩ−Ｉ）、　６．８０
　（Ｃ１１）。赤外線吸収スペクトル（ＫＨ２錠として
測定）３３７０，３］５０゜２９２０．１６６０，１６
２０．１５９０，１４１５゜１３９５．１３７０ｍ−８ 参考例４．　　Ｂ−グアニジノ−２−オクテンアミドの
合成 ８−グアニジノ−３−ヒドロキシオクタンアミド塩酸塩
２７０ｍｇを用いて、参考例３の７−グアニジノ−２−
ヘプテンアミドの合成と同様にして８−グアニジノ−２
−オクテンアミド塩酸塩を２１８ｍｇ得た。収率８６％
。融点１６３−５℃。

プロトンＮＭＲ，スペクトル（重メタノール中測定）δ
：１．４〜１．９　（ＣＨ２Ｘ　３　）、　２．２５　
（ＣＨ２）、　３．１９（ＮＣＨ２）、　５．９４　（
ＣＨ）、　６．７９　（ＣＨ）。赤外線吸収スペクトル
（ＫＨ２錠として測定）３４００，３］２０゜６９− ２９２０、　１６６０．　１６３０．　１４００ｃｒｎ
　。

参考例５．　９−グアニジノ−２−ノネンアミドの合成 ９−グアニジノ−３−ヒドロキシノナンアミド塩酸塩３
６１１ｎｇを用いて、参考例３の７−グアニジノ−２−
ヘプテンアミドの合成と同様にして、９−グアニジノ−
２−ノネンアミド塩酸塩を２５３ｍ９得た。収率７５％
。融点１３２−５°Ｃ０プロトンＮＭＲスペクトル（重
メタノール中測定）δ：１．２〜１．９　（ＣＨ２Ｘ　
４．　）、　２．２３　（ＣＨ２）、　３．２０２９４
０．１６６０．１６２０，１４２０ｃ１ｎ−”。

特許出願人　財団法人　微生物化学研究会７０−

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （］）一般式（Ｉｌ （式中１％＋は水素原子または水酸基を有していてもよ
   い炭素数１ないし４のアルキル基、は−ＣＦＩ＝（Ｊ（
   −を示し、ｎは４，５または６の整数Ｒ１は水素原子以
   外の基を示す。）で表わされルスバガリンー１１−０−
   アルギル誘導体およびその関連化合物並びにその塩 （２）一般式（Ｉａ） 示し、ｎは４，５または６の整数を示す）で表わされる
   化合物またはその塩のアミノ基およびイミノ基を必要に
   応じて保護し、次いで炭素数１ないし４の１価または２
   価の脂肪族アルコール捷りはベンジルアルコールモシク
   ハ炭素数１ないし４のジアゾパラフィンを反応させ、保
   護基がある場合には保護基を除去することを特徴とする
   一般式（ＩＩ）　）（式中Ｒ２は水酸基を有していても
   よい炭素数１ないし４のアルキル基またはベンジル基し
   、ｎは４．５または６の整数を示す）で表わされる化合
   物またはその塩の製造法。