JPS5953424A - 抗腫瘍剤 - Google Patents
抗腫瘍剤Info
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- JPS5953424A JPS5953424A JP57162121A JP16212182A JPS5953424A JP S5953424 A JPS5953424 A JP S5953424A JP 57162121 A JP57162121 A JP 57162121A JP 16212182 A JP16212182 A JP 16212182A JP S5953424 A JPS5953424 A JP S5953424A
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- polysaccharide
- methylglucose
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- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、杭１匝瘍剤に関するものであり、更に詳しく
は、担子菌類由来の多糖を含む抗腫瘍剤に関するもので
ある。
は、担子菌類由来の多糖を含む抗腫瘍剤に関するもので
ある。
近年、担子菌類由来の抗腫瘍に１物質が数多く報告され
ている。これらの多くは多糖類又は多糖を主体とする化
合物である。たとえば、カワラタケよりのクレスチン、
シイタケよりのレンチナン、スエヒロタケよりのシゾフ
イランは特に有名である。
ている。これらの多くは多糖類又は多糖を主体とする化
合物である。たとえば、カワラタケよりのクレスチン、
シイタケよりのレンチナン、スエヒロタケよりのシゾフ
イランは特に有名である。
レンチナン及びシゾフィランは、β−１，３−グルカン
を主鎖とし、１．６−結合でグルコースが分岐している
と云われている。クレスチンは糖を主体とする糖蛋白質
でその糖部分はα−又はβ−１，４結合を主鎖とし、３
又は６位で分岐したグル力／とされている。
を主鎖とし、１．６−結合でグルコースが分岐している
と云われている。クレスチンは糖を主体とする糖蛋白質
でその糖部分はα−又はβ−１，４結合を主鎖とし、３
又は６位で分岐したグル力／とされている。
また、同様な多糖でブクリヨウより希アルカリ抽出され
ろパヒマンは、一部β−１．６結合を含むβ−１，３グ
ルカンでグルコースの分岐を有するとされている。しか
し、パヒマン自体には抗腫瘍性が認められず、その分岐
を切断したパヒマランには抗腫瘍性が認められるｈ云う
（千原吾部著［癌と免疫増強」、１９６０年講談社発行
）。
ろパヒマンは、一部β−１．６結合を含むβ−１，３グ
ルカンでグルコースの分岐を有するとされている。しか
し、パヒマン自体には抗腫瘍性が認められず、その分岐
を切断したパヒマランには抗腫瘍性が認められるｈ云う
（千原吾部著［癌と免疫増強」、１９６０年講談社発行
）。
これらのことは、これらの多糖の立体的又は化学的構造
がそれらの由来により微妙に異なるためであると推定さ
れろ。この意味で多糖の構造と抗胛胛性との関係は、ま
だ必ずしも明確ではない。
がそれらの由来により微妙に異なるためであると推定さ
れろ。この意味で多糖の構造と抗胛胛性との関係は、ま
だ必ずしも明確ではない。
一方、ペスタロチアｆｊｉ Ｋ ＷＱする微化物の産生
ずる多糖はβ−１，３−グルカンの主鎖にβ−１，６−
結合でＤ−グルコピラノシル基及びＤ−グルコピラノシ
ル−Ｄ−グルコピラノシル基の側鎖の付いた構造である
とされているが、その側鎖の数は極めて多く、主鎖１０
０個当り約５５ないし約７５個であるとされている（特
開昭５６−３４７０２号公報）。
ずる多糖はβ−１，３−グルカンの主鎖にβ−１，６−
結合でＤ−グルコピラノシル基及びＤ−グルコピラノシ
ル−Ｄ−グルコピラノシル基の側鎖の付いた構造である
とされているが、その側鎖の数は極めて多く、主鎖１０
０個当り約５５ないし約７５個であるとされている（特
開昭５６−３４７０２号公報）。
フクロタケＦｆ４に属する担子菌、キヌオオフクリタケ
、オオフクロタケ及びシロフクロタケからは水、低級ア
ルコール、低級ケトン又はエーテル等の溶媒による抽出
で抗腫ＪＩＳ性の多糖が得られることが知られている（
特開昭５７−３８７２３号公報）。
、オオフクロタケ及びシロフクロタケからは水、低級ア
ルコール、低級ケトン又はエーテル等の溶媒による抽出
で抗腫ＪＩＳ性の多糖が得られることが知られている（
特開昭５７−３８７２３号公報）。
しかしその構造、物性等は全く知られていない。
本発明は、有効成分として本質的に式
％式％（１）
で表わされる第１のくり返えし単位、式で表わされる第
２のくり返えし単位及び式で表わされる第３のくり返え
しＱｉＴｅ（各式中、Ｇハはグルコピラノシル基を、「
シ字は結合位面を表わす）からなり、第１（式（１））
、第２（式（■））及び第５（式（Ｉ））の各くり返え
し単位の個数の和１００個当り、平均で第３（式（Ｉ）
）のくり返えし単位の］１＾１数が約４ないし約１２飼
で、第２（式（Ｉυ）及び第３（式（Ｉ））のくり返え
し単位の個数の和が同じく約１６ないし約２３個である
多糖類を含む抗腫瘍剤を提供するものである。
２のくり返えし単位及び式で表わされる第３のくり返え
しＱｉＴｅ（各式中、Ｇハはグルコピラノシル基を、「
シ字は結合位面を表わす）からなり、第１（式（１））
、第２（式（■））及び第５（式（Ｉ））の各くり返え
し単位の個数の和１００個当り、平均で第３（式（Ｉ）
）のくり返えし単位の］１＾１数が約４ないし約１２飼
で、第２（式（Ｉυ）及び第３（式（Ｉ））のくり返え
し単位の個数の和が同じく約１６ないし約２３個である
多糖類を含む抗腫瘍剤を提供するものである。
本発明の抗＋１’ｌｊ瘍剤の有効成分である多糖類の物
理的、化学的性質は以下の辿りである６＋１１ 溶解
性 アルカリ水溶液及びジメチルスルホキシドに可溶で、メ
タノール、エタノール、ｎ−ブタノール、アセトン、ベ
ンゼン、トルエン＋ 酢酸エチル、プロピレングリコー
ル、ピリジン等に実質的に不溶である。
理的、化学的性質は以下の辿りである６＋１１ 溶解
性 アルカリ水溶液及びジメチルスルホキシドに可溶で、メ
タノール、エタノール、ｎ−ブタノール、アセトン、ベ
ンゼン、トルエン＋ 酢酸エチル、プロピレングリコー
ル、ピリジン等に実質的に不溶である。
乾燥した本発明の多糖類は水に離溶性であるが、超音波
処理などの操作を加えろことにより、水に可溶化でとる
。
処理などの操作を加えろことにより、水に可溶化でとる
。
塩類水溶液にはわずかに溶ける。アルカリ水溶液に溶解
したのち中和すると溶解したままで残る。
したのち中和すると溶解したままで残る。
（２）旋光度
本発明の多１唐類の０．５規定水酸化す） ＩＪウム水
溶液（０５％）中での比旋光彦は、 〔α〕聞：約−１２゜ である。
溶液（０５％）中での比旋光彦は、 〔α〕聞：約−１２゜ である。
注意深（充分に乾燥すると、Ｏｎ Ｈ２ｎ Ｏｎから計
算される値に近い値を与えるが、通常食間の水分を含有
し、 Ｃ：４３〜４５％ Ｈ： ｓ ６〜＆４％ Ｎ：定・肝限界以下 稈度の値を与える。ハロゲン及び硫黄は検出されない。
算される値に近い値を与えるが、通常食間の水分を含有
し、 Ｃ：４３〜４５％ Ｈ： ｓ ６〜＆４％ Ｎ：定・肝限界以下 稈度の値を与える。ハロゲン及び硫黄は検出されない。
（４）赤外線吸収分析
ＫＢｒ錠剤法による赤外線吸収スペクトルを第１図に示
す。
す。
８９６ｃｍ−’における吸収はＤ−グルコース残１１〜
のβ−結合に特有なものである。
のβ−結合に特有なものである。
ＩＱＩ Ｏ” −ＮＭＲ分析
６１．４
にピークを示す。
（６１発色反応
アンスロン反応 二陽性
ニンヒドリン反応 ：陰性
ディシュのカルバソー西反応 ： 陰性（７１分子情
濃度［Ｌ１モル／／、ｐＨａ６のトリス塙酸塩緩（ギｉ
液を移動相とするゲル濾過高速液体クロマトグラフィに
おいて分子州約３０万ないし約８０分の分画中に溶出す
る。
液を移動相とするゲル濾過高速液体クロマトグラフィに
おいて分子州約３０万ないし約８０分の分画中に溶出す
る。
＋８１ Ｌｍ 化セチルピリジニウムとの反応水溶液
中用化セチルヒリジニウムと沈殿を生成しない。
中用化セチルヒリジニウムと沈殿を生成しない。
（９）構成糖類
本発明の多糖類を１規定硫酸水溶液中、１００℃で加水
分解した後、ペーパークロマトグラフィにより、及びア
ルジトールアセテートに訪導後、ガスクロマトグラフィ
により同定するとグルコースのみが検出される。
分解した後、ペーパークロマトグラフィにより、及びア
ルジトールアセテートに訪導後、ガスクロマトグラフィ
により同定するとグルコースのみが検出される。
（ＩＩＮ 結合構成
メチル化分析により、モル比で
２、４４．６−チトラーＯ−メチルグルコース２、４．
６− ）ジ−０−メチルグルコース約五７ないし約５．
０ ２．４４−トリー〇−メチルグルコース約０．３０ない
し約［＋５５ 及び ２．４−ジー０−メチルグルコース 約［１７ないし約１．３ を与える。
６− ）ジ−０−メチルグルコース約五７ないし約５．
０ ２．４４−トリー〇−メチルグルコース約０．３０ない
し約［＋５５ 及び ２．４−ジー０−メチルグルコース 約［１７ないし約１．３ を与える。
エキソ型のβ−１，３グルカナーゼを用いて酵素分解す
ると、グルコースとゲンチオビオースを生成する。
ると、グルコースとゲンチオビオースを生成する。
また、メタ過ヨウ素ナトリウムで充分に酸化し、水素化
ホウ素す） ＩＪウムで還元後、緩和な条Ｖト、例えば
、α１ないし０．２１’ｌｌ定何１酸で、８０ないし１
００℃、１〜２時間程度加水分解すると側鎖に相当する
グルコース基の除去された直鉛状β−１，３グルカンが
得られる、１このものはメチル化分析で２．４．６−
）リー０−メチルグルコースと痕跡にの２．４４．６−
テトラ−０−メチルグルコースな与える。この直鎖状β
−１，３−′グルカンをエキソ型β−１，６−グルカナ
ーゼでｒ１￥力分解するとグルコースのみが生成する。
ホウ素す） ＩＪウムで還元後、緩和な条Ｖト、例えば
、α１ないし０．２１’ｌｌ定何１酸で、８０ないし１
００℃、１〜２時間程度加水分解すると側鎖に相当する
グルコース基の除去された直鉛状β−１，３グルカンが
得られる、１このものはメチル化分析で２．４．６−
）リー０−メチルグルコースと痕跡にの２．４４．６−
テトラ−０−メチルグルコースな与える。この直鎖状β
−１，３−′グルカンをエキソ型β−１，６−グルカナ
ーゼでｒ１￥力分解するとグルコースのみが生成する。
従って、この多糖類の主鎖は実質上β−１．３−結合の
グルコース残基のみからなる。
グルコース残基のみからなる。
これらのことからこの多糖類は、連続したβ−１，３−
グルコシド結合の主鎖よりなり、β−１，３−結合のグ
ルコース結合４〜６飼に１８Ｍの割合で、その６位にβ
−結合で主として単独のグルコース残基よりなる側鎖を
有するが、側鎖約３ （＋ｌ！ｉＩのうち１個はβ−１
，６−結合した２個のグルコース残基からなるものと認
められる。それ故、この多糖類の基本（〃Ｃ造は６１丁
述の一般式のくり返えし単位からなるということができ
る。
グルコシド結合の主鎖よりなり、β−１，３−結合のグ
ルコース結合４〜６飼に１８Ｍの割合で、その６位にβ
−結合で主として単独のグルコース残基よりなる側鎖を
有するが、側鎖約３ （＋ｌ！ｉＩのうち１個はβ−１
，６−結合した２個のグルコース残基からなるものと認
められる。それ故、この多糖類の基本（〃Ｃ造は６１丁
述の一般式のくり返えし単位からなるということができ
る。
これらのことからこの多糖類は、公知のスクレログルカ
ン、シゾフィラン及びキクラゲ子実体からイｎられる分
枝型β−１，５−グルカンよりも枝分れの頻度が少ｆｒ
、 （、かつ分枝中にわずかのβ−１゜６−結合で２個
以上連続したグルコース残基からなる分枝をもつ多情で
ある。
ン、シゾフィラン及びキクラゲ子実体からイｎられる分
枝型β−１，５−グルカンよりも枝分れの頻度が少ｆｒ
、 （、かつ分枝中にわずかのβ−１゜６−結合で２個
以上連続したグルコース残基からなる分枝をもつ多情で
ある。
また、ベスタロチア属の微生Ｉ吻のＮ生ずる多（１、＋
１と化べると枝分れの頻度が著しく小さい。
１と化べると枝分れの頻度が著しく小さい。
この多＄７．！ｉ ４Ｊｉは水で抽１１１されないから
特開昭５７−３８７２５号公報で開示された多糖とは別
の物質である。
特開昭５７−３８７２５号公報で開示された多糖とは別
の物質である。
本発明の抗腫瘍剤で用いる多Ｋｌ、１ＩＨ２は、フクロ
タケ屈に属する担子菌ｑ旦す１ｙｉθｌｌａ■↓９ａ−
９明入特にフクロタケをアルカリ水溶液で抽出すること
により容易に調製す４）ことができる。原料として用い
ろフクロタケは、その子実体及び菌糸体のいずれであっ
てもよい。そしてこれらは、生の状ｔ７ＩＨであっても
乾燥品であってもよい。抽出に序）たり原料をあらかじ
めｌ１ｎｎ断することは抽出効率をあげるために子「効
である。
タケ屈に属する担子菌ｑ旦す１ｙｉθｌｌａ■↓９ａ−
９明入特にフクロタケをアルカリ水溶液で抽出すること
により容易に調製す４）ことができる。原料として用い
ろフクロタケは、その子実体及び菌糸体のいずれであっ
てもよい。そしてこれらは、生の状ｔ７ＩＨであっても
乾燥品であってもよい。抽出に序）たり原料をあらかじ
めｌ１ｎｎ断することは抽出効率をあげるために子「効
である。
抽出に用いるアルカ゛り水溶液としては、例えば水１１
８化すトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ全屈水酸
化物を用いることができる。特に水酸化ナトリウム水溶
液が便利である。
８化すトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ全屈水酸
化物を用いることができる。特に水酸化ナトリウム水溶
液が便利である。
用いるアルカリの節度は特に限定的て°はないが、約［
１１月宝ないし約５１ＬＬ定の範囲内で用いるのが好ま
しい。抽出に用いるアルカリ水溶液の駁は、通常１回の
抽出当り、原料乾燥重用の約５ないし約１００倍Ｎｔ’
Ｅ ｌｅｔである。この甲は少なすぎれば抽出効率が
悪く、多すぎれば後処理がｍ１倒である。
１１月宝ないし約５１ＬＬ定の範囲内で用いるのが好ま
しい。抽出に用いるアルカリ水溶液の駁は、通常１回の
抽出当り、原料乾燥重用の約５ないし約１００倍Ｎｔ’
Ｅ ｌｅｔである。この甲は少なすぎれば抽出効率が
悪く、多すぎれば後処理がｍ１倒である。
この抽出工程においては、多糖の分解又は過酸化等の変
性を防ぐため、ゆ素等の不活性ガスの雰囲気下で抽出を
行うことが好ましい。またさらに、水素化ホウ素ナトリ
ウム等の還元剤の存在下で行ってもよい。
性を防ぐため、ゆ素等の不活性ガスの雰囲気下で抽出を
行うことが好ましい。またさらに、水素化ホウ素ナトリ
ウム等の還元剤の存在下で行ってもよい。
抽ＩＨｒＭＫ度には格別の限定はないが、約３０°Ｃ以
下が望ましい。さらに高活配、例えばつｉマ］常の熱ア
ルカリ抽出の湿度条件である６０ないし８０℃程度で抽
出すると、さらに多くの分岐を有する多糖類が抽出され
るからである。抽出ト■作はくり返えし行ってもよい。
下が望ましい。さらに高活配、例えばつｉマ］常の熱ア
ルカリ抽出の湿度条件である６０ないし８０℃程度で抽
出すると、さらに多くの分岐を有する多糖類が抽出され
るからである。抽出ト■作はくり返えし行ってもよい。
本発明の抗腫ノら１削の多糖類の原料であるフクロタケ
も自己の生命を維持するための多くの成分をそのｒｉ１
体内に含んでいる。従ってアルカリ水溶液でそのまま抽
出すればｆ１１！々の夾雑物が目的の多糖類中に含まれ
てしまう。この抽出液から目的の多糖類を精製すること
は可能ではあるが、煩肩１な工程を必要とする。本発明
の抗１４１瘍剤で用いる多糖類は、水、アルコール等の
溶Ｉ１１．トでは抽出されないので、アルカリ水溶液で
抽出する工程に先立ち、水、熱水、緩衝水溶液、アルコ
ール又はこれらを１１１合せた溶媒により、これらの夾
や（１物を除去しておくことが好ましい。なお、この様
な１・ｆ１作によりアルカリ水溶液抽出の際、夾雑物と
なる蛋白中ｌ。
も自己の生命を維持するための多くの成分をそのｒｉ１
体内に含んでいる。従ってアルカリ水溶液でそのまま抽
出すればｆ１１！々の夾雑物が目的の多糖類中に含まれ
てしまう。この抽出液から目的の多糖類を精製すること
は可能ではあるが、煩肩１な工程を必要とする。本発明
の抗１４１瘍剤で用いる多糖類は、水、アルコール等の
溶Ｉ１１．トでは抽出されないので、アルカリ水溶液で
抽出する工程に先立ち、水、熱水、緩衝水溶液、アルコ
ール又はこれらを１１１合せた溶媒により、これらの夾
や（１物を除去しておくことが好ましい。なお、この様
な１・ｆ１作によりアルカリ水溶液抽出の際、夾雑物と
なる蛋白中ｌ。
マンガノラクトン、グリコーゲン様多ＩＷｉ等を予めか
なりの程度除去することができろ。この様にして抽出を
行ったアルカリ水溶液は’ ”＋４１’、ｉ；、酢酸等
の酸で中和する。通常、この状態では目的の多糖は、結
晶溶液中に溶解している。ついでこの？Ｙｊ液に塩化セ
チルピリジニウムなどの第四級アンモニウム塩を加えて
夾雑する酸性物質を不溶性沈殿として４１１出させる。
なりの程度除去することができろ。この様にして抽出を
行ったアルカリ水溶液は’ ”＋４１’、ｉ；、酢酸等
の酸で中和する。通常、この状態では目的の多糖は、結
晶溶液中に溶解している。ついでこの？Ｙｊ液に塩化セ
チルピリジニウムなどの第四級アンモニウム塩を加えて
夾雑する酸性物質を不溶性沈殿として４１１出させる。
この化１１没は耐過、遠心分＋＋ａｔ等の通常の分離手
段により除去する。こうして得た上清液をそのまま又は
濃縮後、水で透析し、透析液を乾燥することにより目的
の多糖）：１１を得ろことができろ。第四級アンモニウ
ム塩による処理で得た上清液をそのまま又は濃縮した後
、これにアルコール。
段により除去する。こうして得た上清液をそのまま又は
濃縮後、水で透析し、透析液を乾燥することにより目的
の多糖）：１１を得ろことができろ。第四級アンモニウ
ム塩による処理で得た上清液をそのまま又は濃縮した後
、これにアルコール。
ナセトンなどの沈殿剤を加え、得られた沈殿を所望によ
り水に対して透析し、乾燥して目的の多糖ｆ１”１を固
体としてイｎてもよい。その際の乾燥方法としては、減
Ｆ″Ｆ乾燥、凍結乾燥、噴霧乾燥等の適当な乾燥手段を
用いろことができろ。
り水に対して透析し、乾燥して目的の多糖ｆ１”１を固
体としてイｎてもよい。その際の乾燥方法としては、減
Ｆ″Ｆ乾燥、凍結乾燥、噴霧乾燥等の適当な乾燥手段を
用いろことができろ。
本発明の抗１沖瘍剤はこうして？１＋られろ多糖ｇ１を
慣用の処方で含んでよい。例えば、必要に応じて助剤を
含有する生理食塩水に溶解して調製することができろ。
慣用の処方で含んでよい。例えば、必要に応じて助剤を
含有する生理食塩水に溶解して調製することができろ。
本発明の抗腫瘍剤は、レンチナン、シゾフイラン等の免
疫賦活剤と四桶、例えば静脈内に容易に投与することが
できる。他の抗１１ｉ）ｉ瘍剤と併用することもできる
。
疫賦活剤と四桶、例えば静脈内に容易に投与することが
できる。他の抗１１ｉ）ｉ瘍剤と併用することもできる
。
原料調製例１
風乾したフクロタケ子実体１００ｆをｐＨ１口のＥｌ
Ｉ Ｍ ＋７ン酸塩緩種１液１１に一夜漬した後、ミキ
サー及びホモジナイザーで破砕した。さらＫこれに同じ
リン酸塩緩衝液２１を加えて４時１１１目Ｗ拌し、遠心
分離した。得られた固形分を同じリンｌｌＰ塩緩衝液３
１に入れホモジナイザーで分散させた後、４時１１旧・
９を拌し、遠心分離し沈殿を得た。この沈殿を３１の水
に分散させ、オートクレーブ中、１２０℃で６０分間加
熱した。冷却後遠心分離して沈殿を得た。この熱水抽出
処Ｔ１１をさらに４回くり返えし、水溶性画分をほぼ完
全に抽出除去した。
Ｉ Ｍ ＋７ン酸塩緩種１液１１に一夜漬した後、ミキ
サー及びホモジナイザーで破砕した。さらＫこれに同じ
リン酸塩緩衝液２１を加えて４時１１１目Ｗ拌し、遠心
分離した。得られた固形分を同じリンｌｌＰ塩緩衝液３
１に入れホモジナイザーで分散させた後、４時１１旧・
９を拌し、遠心分離し沈殿を得た。この沈殿を３１の水
に分散させ、オートクレーブ中、１２０℃で６０分間加
熱した。冷却後遠心分離して沈殿を得た。この熱水抽出
処Ｔ１１をさらに４回くり返えし、水溶性画分をほぼ完
全に抽出除去した。
こうして得られた水不溶性画分を、 水素化ホウ素ナト
リウム５ノを溶解させた１規定水酸化ナトリウム水溶液
５１に分１１＋させた。窒素気流下に２５℃で４時間攪
拌した後遠心分１’！ＩＰ、した。
リウム５ノを溶解させた１規定水酸化ナトリウム水溶液
５１に分１１＋させた。窒素気流下に２５℃で４時間攪
拌した後遠心分１’！ＩＰ、した。
この沈殿−に対して１規定水酸化ナトリウム７に溶液に
よる抽出操作をくり返えした。
よる抽出操作をくり返えした。
雨水酸化ナトリウム抽出液を合併し、これを３ＮＩ塩酸
で中和し、ｐＨ６，５に調整した。
で中和し、ｐＨ６，５に調整した。
こうして得られた抽出液に塩化セチルピリジニウムミー
水溶液（１０％）を攪拌下に、その添加によって新たな
沈殿が生じなくなるまで滴下し、ツいで１０，０００Ｇ
で３０分１１ｆｌ Ｍｔ 心外Ｆｉｌｔヲ行イ、生じた
沈殿を除去した。この上清に等容のメタノールを加えて
悄拌し、多糖類を沈殿させた。このｒｔｆＩＤを蒸留水
５００ｍεに加えホモミキサーで分散後、流水中に５日
間透析した。透析内液を凍結乾燥し、目的物１五〇？を
得た。
水溶液（１０％）を攪拌下に、その添加によって新たな
沈殿が生じなくなるまで滴下し、ツいで１０，０００Ｇ
で３０分１１ｆｌ Ｍｔ 心外Ｆｉｌｔヲ行イ、生じた
沈殿を除去した。この上清に等容のメタノールを加えて
悄拌し、多糖類を沈殿させた。このｒｔｆＩＤを蒸留水
５００ｍεに加えホモミキサーで分散後、流水中に５日
間透析した。透析内液を凍結乾燥し、目的物１五〇？を
得た。
元素分析値
０：４４．０５％
Ｈ：６．０５ ％
Ｎ：定借限界以下
比旋光度
〔α）ｕｓ： １２゜
赤外吸１１’７スペクトル
第１図にＫ Ｂ ｒ ＠刑法による、フエリエ変換赤外
吸ｌ１ｌ（スペクトルを示す。
吸ｌ１ｌ（スペクトルを示す。
分子帯
口、ＩＭ、ｐＨａ６のトリス塩酸塩緩衝液を移ｎｔ））
相として、東洋曹達工業ｑ■すＧ５０ｏｏｐｗカラムを
用いたゲルＦＡ高速液体クロマトグラフィで分子■１約
６８万のリテンションタイムの（ｔ”’、 ＩＦ（に溶
出した。
相として、東洋曹達工業ｑ■すＧ５０ｏｏｐｗカラムを
用いたゲルＦＡ高速液体クロマトグラフィで分子■１約
６８万のリテンションタイムの（ｔ”’、 ＩＦ（に溶
出した。
□１ｍ−ＮＭＲ分析９発色反応及び塩化セチルピリジニ
ウムとの反応 前述した物理的、化学的性質と同じであった。
ウムとの反応 前述した物理的、化学的性質と同じであった。
構成糖及び結合様式
得られた多糖をメチル化し、さらに加水分解した。得ら
れたメチル（目”、’ｉをアルジトールアセテートに誘
導した。これをガスクロマトグラフィで分析した。（ｉ
） ｊ、れたメチル化糖のモル比は： ２、３．４．６−テトラ−０−メチルグルコース １２
、４．６− ）ジ−０−メチルグルコース ３７６
２．４４−）ジ−０−メチルグルコース ０．３３
２．４−ジー０−メチルグルコース １．０１
別にこの多糖をエキソ型β−１，５−グルカナーゼで酵
素分解した。グルコースとゲンチオビオースが４Ｎられ
た。
れたメチル（目”、’ｉをアルジトールアセテートに誘
導した。これをガスクロマトグラフィで分析した。（ｉ
） ｊ、れたメチル化糖のモル比は： ２、３．４．６−テトラ−０−メチルグルコース １２
、４．６− ）ジ−０−メチルグルコース ３７６
２．４４−）ジ−０−メチルグルコース ０．３３
２．４−ジー０−メチルグルコース １．０１
別にこの多糖をエキソ型β−１，５−グルカナーゼで酵
素分解した。グルコースとゲンチオビオースが４Ｎられ
た。
七〇モル比は前ニアｉ１モルに対して後者［１Ｌ１７７
モルであった。
モルであった。
さらに％ｓ この多糖をメタ過ヨウ素酸ナトリウムで充
分罠酸化し、水素化ホウ素ナトリウムで僅元した。これ
をさらにα１ （”ｉｆ、 ５’Ｆ−の硫酸中、１００
℃で２時間加水分解したところ、側鎖に相当するグルコ
ース基の除去された直鎖状のグルカンの沈殿が得られた
。この沈殿を同様にしてメチル化分析を行ったところ、
２，４．６−トリー 〇−メチルグルコースと痕跡量。
分罠酸化し、水素化ホウ素ナトリウムで僅元した。これ
をさらにα１ （”ｉｆ、 ５’Ｆ−の硫酸中、１００
℃で２時間加水分解したところ、側鎖に相当するグルコ
ース基の除去された直鎖状のグルカンの沈殿が得られた
。この沈殿を同様にしてメチル化分析を行ったところ、
２，４．６−トリー 〇−メチルグルコースと痕跡量。
の２．５．４．６−テトラ−０−メチルグルコースを与
えた。また、この沈殿をエキソ型β−１，３グルカナー
ゼで酵素分解したところ、グルコースのみが生成した。
えた。また、この沈殿をエキソ型β−１，３グルカナー
ゼで酵素分解したところ、グルコースのみが生成した。
従って、イ＋ｆられた多糖は前述した式（■）。
（ｎ）及び（ＩＩ）のくり返えし学位からなり、その個
数の比がこれらのくり返えしＱ１位の合計の個数１００
個当り、式（組のくり返えし単ｆ＼１７１１ａ、式（Ｉ
Ｉ）のくり１区えし単位とべ（ＩＩＩ）のくり退Ｊ、Ｌ
卑ＩＬヒ の個数の和は２１個であった。
数の比がこれらのくり返えしＱ１位の合計の個数１００
個当り、式（組のくり返えし単ｆ＼１７１１ａ、式（Ｉ
Ｉ）のくり１区えし単位とべ（ＩＩＩ）のくり退Ｊ、Ｌ
卑ＩＬヒ の個数の和は２１個であった。
風刺潤製例２
アルカリ水溶液抽出の前の工稈を１τ科潤隼す例１と同
様にして行った後、抽出？昌度を２０ ”Ｃに変えた以
外は原料調製（ｆｌｌ １と同様にしてアルカリ水溶液
抽出を行った。イ［１られた抽出液を”Ｖ ＩＩ？でｐ
Ｈ６，５にｈ！Ｍ整した後、原料Ｍ１．：Ｉ製例１と同
様にして１晃仕セチルピリジニウム水溶液（１０％）を
加え、生ずる沈殿を遠心分１’！ｆｔにより除去した。
様にして行った後、抽出？昌度を２０ ”Ｃに変えた以
外は原料調製（ｆｌｌ １と同様にしてアルカリ水溶液
抽出を行った。イ［１られた抽出液を”Ｖ ＩＩ？でｐ
Ｈ６，５にｈ！Ｍ整した後、原料Ｍ１．：Ｉ製例１と同
様にして１晃仕セチルピリジニウム水溶液（１０％）を
加え、生ずる沈殿を遠心分１’！ｆｔにより除去した。
上ｉ’ｒを２日間流水中に透４１ｒ した後、透析内液
を３ぎにまで４０℃で減用下にｐＨ４縮した。これに等
容のメタノールを加え、生じた沈Ｅ１仕を１０．０００
ｏで３０分間遠心分離した。この沈殿を５００ Ｔｎ
ｆ！のメタノールに顯え、約１時間かくはん遠心分ｐｉ
Ｌ 、沈殿をイ遣トた。このメタノールによる洗浄を
さらに２度くりどえしたのち、沈殿を減圧乾１：％ ｔ
、、［１的ｌ吻１０．５２を得た。
を３ぎにまで４０℃で減用下にｐＨ４縮した。これに等
容のメタノールを加え、生じた沈Ｅ１仕を１０．０００
ｏで３０分間遠心分離した。この沈殿を５００ Ｔｎ
ｆ！のメタノールに顯え、約１時間かくはん遠心分ｐｉ
Ｌ 、沈殿をイ遣トた。このメタノールによる洗浄を
さらに２度くりどえしたのち、沈殿を減圧乾１：％ ｔ
、、［１的ｌ吻１０．５２を得た。
こうして得た多糖について原ｆ４調製例１と回（壬にし
て分析を行った。
て分析を行った。
元素分析値
ｃ ： ４４．５１％
ＴＩ：＆１０％
Ｎ：定量限界以下
分子量
分子４約５５万の位置に溶出した。
メチル北壁のモル比：
２、３．４．６−テトラ−０−メチルグルコース １
２．４．６−）リーＯ−メチルグルコース ４，
２６２．３．４−トリー〇−メチルグルコース
１１３２２．４−ジー０−メチルグルコース
１．０１エキソ型β−１，５−グルカナーゼ消化で得
られたグルコースとゲンチオビオースとのモルｌ七： ｊ：０．１６０ くり返えし単位の割合 合計個数１００個当り式（１呻のくり返えし単位６個で
、式（ｎ）のくり返えし単位と式（坤のくり返えし単位
の個Ｉ？の和は１９個であった。
２．４．６−）リーＯ−メチルグルコース ４，
２６２．３．４−トリー〇−メチルグルコース
１１３２２．４−ジー０−メチルグルコース
１．０１エキソ型β−１，５−グルカナーゼ消化で得
られたグルコースとゲンチオビオースとのモルｌ七： ｊ：０．１６０ くり返えし単位の割合 合計個数１００個当り式（１呻のくり返えし単位６個で
、式（ｎ）のくり返えし単位と式（坤のくり返えし単位
の個Ｉ？の和は１９個であった。
その他の結果は原料：Ａ製例１で得た多糖の場合と実質
的に同一であった。
的に同一であった。
実施例１
原料調製例１で得た多糖を生１！１１食塩水圧溶解して
抗＋ｈｒｉ 瘍剤を調製し、ＩｃＲマウス群でザルロー
フ１８０個型肺瘍に対する効果を試験した。
抗＋ｈｒｉ 瘍剤を調製し、ＩｃＲマウス群でザルロー
フ１８０個型肺瘍に対する効果を試験した。
■ＯＲマウス１匹につキ、ザルコーマ１ Ｂ Ｏｆ（Ｉ
Ｊ。
Ｊ。
水癌細胞５×１０・個をそけい部課下に接神した。
実験群は６匹あてとした。癌細胞移植後、翌日より１０
日間、１日１回薬剤を腹腔内にＥｌ ｌ ｍｌずつ投与
した。試験群には本発明の抗腫瘍剤（Ｅｌ Ｉ ｍｅず
つ試験群に投与したとき第１表に示した投与６）になる
様に潤製したもの）を用い、対照群には生理食塩水のみ
を投与した。ル１！瘍移植後、３５日目上癌を摘出して
その１Ｉ−１７％を測定した。各群の肺ノ（“う抑制率
は次式によりｉ９−出した。
日間、１日１回薬剤を腹腔内にＥｌ ｌ ｍｌずつ投与
した。試験群には本発明の抗腫瘍剤（Ｅｌ Ｉ ｍｅず
つ試験群に投与したとき第１表に示した投与６）になる
様に潤製したもの）を用い、対照群には生理食塩水のみ
を投与した。ル１！瘍移植後、３５日目上癌を摘出して
その１Ｉ−１７％を測定した。各群の肺ノ（“う抑制率
は次式によりｉ９−出した。
結果を第１表に示す。
本発明のＦｔｎ、腫瘍剤の急性毒性（ＬＤ、。）は腹腔
内投与で１０ ｍ！？７Ｆ＜９吋舒以上であった。
内投与で１０ ｍ！？７Ｆ＜９吋舒以上であった。
第 １ 表
実施例２
原料調製例１で得た多糖に代えて原利潤デ！例２で得た
多糖を用いて実施例１をくり返えした。
多糖を用いて実施例１をくり返えした。
実施例１の場合とほぼ同様の結果が得られた。
第１図は、本発明の抗ル０瘍剤の原料として用いた多糖
類の赤外吸収スペクトルを示す図である。
類の赤外吸収スペクトルを示す図である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ＋１１ 有効成分として本質的に式 １式％］ で表わされる第１のくり返えし単位、式で表わされる第
２のくり返えし単位及び式で表わされる第３のくり返え
し単位（各式中、Ｇ／ｕはグルコピラノシル基を、また
数字は結合位置を表わす）からなり、第１．第２及び第
５の各くり返えし単位の和１００個当り、平均で第３の
くり返えし単位の１周ル゛Ｑが約４ないし約１２個で、
第２のくり返えし単位と第６のくり返えし単位の個オ（
ｆの和が同じく約１６ｔ「いし約２５飼である多糖イｒ
＋を含む抗腫瘍剤。 （２） 多糖類がフクロタケ由来の多糖類であるｌ特
許請求の範囲第１′ｆｎ記載の抗腫１＋＠剤。 （３）多糖類が、濃度０−１ モル／ ｌ ＋ ｐ Ｈ
ａ ６ノトリス塩酸塩緩衝液を移動相とするゲル濾過高
速液体クロマトグラフィにおいて分子ｈ１約３０万ない
し約８０万を与える多糖類である特許請求の範囲第１項
または第２頂君已載の抗１匝ｊ易剤。 （４）多糖類が、メチル化分析により、２．Ｓ、４．６
−テトラ−０−メチルグルコース、２，４．６−トリー
〇−メチルグルコース、 ２．５．４．− ）ジ−０−
メチルグルコース及び２．４．−ジー〇＝メチルグルコ
ースを２．５．４．６−チトラー〇−メチルグルコース
を１としたとき、モル比で２、４．６− ）リー０−メ
チルグルコース約３７ないし約５．０，２．へ４−トリ
ー〇−メチルグルコース約［１３０ないし約０．５５及
び２．４−ジー０−メチルグルコース約α７ないし約１
．５の割合で力える多糖類である特許請求の範囲第１項
ないし第３項のいずれかの項記載の抗Ｊｌｊｒｉ瘍剤。 （５） 多糖類が、アルカリ水溶液及びジメチルスル
ホキシドに可溶で、メタノール、エタノール、ｎ−ブタ
ノール、アセトン、プロピレングリコール、ベンゼン、
トルエンｌピリジン及び酢酸エチルに実質的に不溶な多
糖類である特許請求の範囲第１項ないし第４頂記載の抗
腫瘍剤。 （６） 多糖類が、フクロタケをアルカリ水溶液で抽
出して得た多糖類である特許請求の範囲第１］ｒｊｙ：
ｒ：いし第５項のいずれの項記載の抗１１ｉ１’ｔ Ｊ
ｒ。 剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57162121A JPS5953424A (ja) | 1982-09-20 | 1982-09-20 | 抗腫瘍剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP57162121A JPS5953424A (ja) | 1982-09-20 | 1982-09-20 | 抗腫瘍剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5953424A true JPS5953424A (ja) | 1984-03-28 |
| JPH0314289B2 JPH0314289B2 (ja) | 1991-02-26 |
Family
ID=15748432
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP57162121A Granted JPS5953424A (ja) | 1982-09-20 | 1982-09-20 | 抗腫瘍剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5953424A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62117951A (ja) * | 1985-11-15 | 1987-05-29 | 清水建設株式会社 | 特殊タイルの後付け工法 |
| JPS63103148A (ja) * | 1986-10-20 | 1988-05-07 | 日本軽金属株式会社 | 建物用壁パネル及びその製造方法 |
| JP2001323001A (ja) * | 2000-05-16 | 2001-11-20 | Asahi Denka Kogyo Kk | 免疫増強作用を有する低分子化βグルカン |
| CN105175562A (zh) * | 2015-08-11 | 2015-12-23 | 江苏农林职业技术学院 | 一种抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺 |
| CN110483661A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-22 | 江苏江南生物科技有限公司 | 一种草菇多糖及其制备方法和应用 |
-
1982
- 1982-09-20 JP JP57162121A patent/JPS5953424A/ja active Granted
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62117951A (ja) * | 1985-11-15 | 1987-05-29 | 清水建設株式会社 | 特殊タイルの後付け工法 |
| JPS63103148A (ja) * | 1986-10-20 | 1988-05-07 | 日本軽金属株式会社 | 建物用壁パネル及びその製造方法 |
| JP2001323001A (ja) * | 2000-05-16 | 2001-11-20 | Asahi Denka Kogyo Kk | 免疫増強作用を有する低分子化βグルカン |
| CN105175562A (zh) * | 2015-08-11 | 2015-12-23 | 江苏农林职业技术学院 | 一种抗氧化草菇多糖高效提取分离工艺 |
| CN110483661A (zh) * | 2019-08-21 | 2019-11-22 | 江苏江南生物科技有限公司 | 一种草菇多糖及其制备方法和应用 |
| CN110483661B (zh) * | 2019-08-21 | 2021-09-24 | 江苏江南生物科技有限公司 | 一种草菇多糖及其制备方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0314289B2 (ja) | 1991-02-26 |
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