JPS5947202A - 補酵素Ｑ↓１↓０のメチル化−β−シクロデキストリン包接体及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、補酵素ＱＩｏ　（以下、Ｃ０ＱＩＯと略−す
）のへブタキス（２，６−ジー０−メチル）−β−シク
ロデキストリン（以下、ＤＭ−β−ＣｙＤと略す）包接
体及びその製造方法並びにＣ０ＱＩＯの従来知られてい
る薬効薬理作用の増強又は新たな薬効薬理作用の発現に
関するものである。

Ｃ０ＱＩＯは、細胞内ミトコンドリアにおける酸化的り
ん酸化に関与し、細胞呼吸を賦活し、それと共役的にＡ
ＴＰの産生を高め、生体各組織の活性化に重要な役割を
果していることが確認されている。

このＣｏＱ＋ｏは、現在医薬品として経口投与の形で用
いられ、人間等の動物の体内に吸収された場合、心筋の
活動を活発にするため、狭心症の治療等を目的とした循
環系改善剤として実用化されている。しかしながら、実
際上、臨床的には、「基礎治療施行中の軽度及び中程度
のうつ血性心不全時の浮腫、肺うっ血、肝腫服及び狭心
症状ｊと比較的初期の段階で尚且つ軽度の疾患に用いら
れているのが現状である。このことは、Ｃ０ＱＩＯが水
に不溶性であるため、消化管からの吸収が極めで悪く、
治療上有効な血中濃度に達しないことに起因する。事実
、健康男子３名にＣｏＱ＋ｏ結晶を各々３００ｍｇ宛経
口投与した際の血中濃度は投与２時間後で、３．４μ９
／　ｘｌの最高値に到達するに過ぎない［応用薬理６（
４）、６９５〜７０６　（１９８２）　］。このＪ：う
に、臨床用量（１回１０ｍｇ、１日３０ｍｇ　）に比し
、はるかに大量投与しているにも拘らず、最高血中濃度
が低く、また最高血中濃度に到達する時間が遅いことは
、うつ血性心不全という緊急な疾患の場合、極めて不都
合なことである。また、Ｃ。

Ｑｌａを液剤として用いる場合、成る種の界面活性剤に
Ｊ：すＣ０ＱＩＯは可溶化されるが、界面活性剤は生体
膜に損傷を！ｊえるため、副作用が現われ、やはり不都
合である。

本発明は、水に不溶性のＣｏＱ＋ａをＤＭ−β−ＣｙＤ
で包接して可溶化することにより、従来のＣ０ＱＩＯの
上述の問題点を解決したものである。ＣｏＱ＋ｅを、Ｄ
Ｍ−β−ＣｙＤで包接、可溶化して注射剤や経口用剤の
形にして投与した場合、従来のＣ３Ｑｔｎ製剤に比し、
最高血中濃度の発現は当然早くなり、また最高血中濃度
は当然高くなることが考えられる。更に、界面活性剤添
加によって生ずる副作用を避けることができる。

医薬品として用いられるＣ０ＱＩ［ｌは、その製造方法
の観点から、極めて高価であり、その吸収率の改善或い
は注射剤等の投与経路の選択により、その投与量を少な
くすることは、重要な経湾問題である。

このような観点から、吸収率の改善を試みたＣ０ＱＩＯ
製剤が公開されている（特開昭５４−９２６１６　、特
開昭５７−７５９１６）。しかし、これらの技術では、
使用上の制限があったりして、吸収の飛躍的な増大が見
られず、従って充分に満足できるものではない。

一方、不溶性化合物の可溶化法の一つとして、シクロデ
キストリンによる包接化が提案されており、又、キノン
類の包接化についても既に知られている［Ｃｈｅｍ、　
　Ｂｅｒ、９２．３７８　　（１９５７）　］が、その
可溶化効宋については、期待し得る治［１１！度まで達
していない。

本発明は、以−にの実情に鑑みてなしたもので、ＣＩＩ
ＱＩＱをＤＭ−β−ＣｙＤで包接、可溶化した場合、β
−シクロｆキストリンのそれに比較して数１０倍以上も
可溶性が増大し、注射剤として、その治療効果が期待で
きることを発見した。

更に、このＣｏＱ＋ｏ包接体を液剤或いは固形製剤とし
て経口投与した場合、その吸収率が飛躍的に上昇し、従
ってＣｏＱ＋ｏのバイオアベイラビリティが高まり、治
療に有利に使用できることが分った。

さて、ＣｏＱ＋ｏが、ＤＭ−β−ＣｙＤにより包接され
ていることは、示差走査熱量（ＤＳＣ）の測定から明白
である。

即ち、後述の実施例１と同様にして製造したＣｏＱ＋ｏ
のＤＭ−β−ＣＶＤ包接体の水溶液を実施例２と同様に
して凍結乾燥して得た粉末（ＣｏＱ＋ｏ含ｆＭ　１．７
５％）は、第１図ニ示スヨうに、１６１６に発熱ピーク
を有しく不可逆的で５− ある）、Ｃ０ＱＩＯとＤＭ−β−ＣｙＤどの混合物（Ｃ
ｏＱ＋ｏ含量１．６９％）及び、ＤＭ−β−ＣｙＤには
、第２図及び第３図に示すようにそれがないことから、
前記発熱ピークは包接体特有のものであり、包接されて
いたＣｏＱ＋ｏが解離した結果、エネルギーを放出した
ものと解釈される。

近年、細胞レベルの実験において、ミトコンドリア機能
に対して多大の関心が払われ、中でもそのエネルギー産
生に及ぼずエンドトキシンの抑制作用が注目されておｅ
、エンド１ヘキシンの直接作用によるものか、或いはシ
ョックに伴う低酸素症によるものかは十分には解明され
ていない。

これらの抑制作用に対するＣ３ＱＩＯの予防効果又は賦
活作用は、従来の水に不溶性の　ｃ。

ＱＩＯでは、実験系を確立することが困難なため、確認
できなかった。本発明によりＣｏＱ＋ｏをＤＭ−β−Ｃ
ｙＤにより包接、水溶化することに成功したため、細胞
レベルでの実験系を確立６一 し、Ｃｏ　Ｑ　＋ｏのＤＭ−β−ＣｙＤ包接体水溶液に
よる細胞賦活作用を確認した。この基礎実験結果より、
従来化えられなかった新たな治療効果の発現、例えば、
脳代謝賦活作用、眼精疲労の改善効果、肝機能の改善効
果などが、本発明による注射剤、点眼剤又は経口用剤の
投与により期待できる。このように、本発明は、治療に
有効なＣｏＱ＋ｏの注射剤、経口用液剤及び固形製剤の
提供を目的とするものである。

本発明によると、ＣＱＱＩＧは、以下のようにして包接
、水溶化することができる。

即ち、ＤＭ−β−ＣｙＤを水に溶解し、遮光条件下で、
この溶液にＣ０ＱＩＯを少■づつ加えながら、超音波で
分散させた後、撹拌して溶解させる。この溶解操作は室
温でも、又、加温条件下、例えば３０〜４０℃でも行う
ことができる。

撹拌に要する時間は、２〜２４時間であるが、好ましく
は、４時間がよい。撹拌終了後の溶液は、メンブランフ
ィルタ−（ボアリーイズ０．２２μｍ）で濾過し、Ｃ０
ＱＩ＠のＤＭ−β−ＣｙＤ包妾体の水溶液を得る。この
ようにして製造されたＣ０ＣＪＩＯのＤＭ−β−ＣｙＤ
包接休の水溶体は、水を加えて右効濶度まで薄め、医薬
製剤に処方することができる。また、この包接体水溶液
を凍結乾燥して、粉末とし、保存することも可能である
。この粉末を用時水に溶解し、注射剤として使用するこ
とも出来るし、又、内服液としてもよい。この凍結乾燥
粉末を経口投与した時のＣ０ＱＩＯの吸収率（血中濃度
）は、Ｃ０ＱＩＯ単味のそれと比較して、飛躍的に上昇
した。

医薬用製剤としては、例えば、注射剤、内服液剤、粉剤
、細粒剤及び顆粒剤等があげられる。

製剤に際しては、通常の医薬用の試形剤、希釈剤、安定
剤、又所望のｔ）Ｈ調整剤、浸透圧調整剤を添加するこ
とができる。

ＣｏＱ＋ｏのＤＭ−β−ＣＶＤ包接体の急性毒性試験 急性毒性は、体重２０（１前後のＩＣＲ／Ｊ’ＣＬ（日
本タレア）系マウス６匹を１群として、実施例２により
製造したＣｏに）１０のＤＭ−β−ＣＶＤ包接体の粉末
を経口投与後７日間の死亡例を観察し、死亡数からＬＤ
、。を求めることにより試験した。

その結果、本発明のＣｏＱ＋ｏのＤＭ−β−ＣｙＤ包接
体は、１００／ｋｇという大量投与でも死亡するものは
なく、非常に安全性の高いことが判明した。

本発明の方法により製造されたＣｏＱ＋ｏのＤＭ−β−
ＣｙＤ包接体の水溶液は、光及び熱に対して安定である
。

以上述べたように、本発明は、水に不溶性のＣｏＱ＋ｅ
をＤＭ−β−ＣＶＤにより包接、水溶化したものであり
、その製造法は画期的であり、工業的製造法として優れ
ている。更に、このＣｏＱ＋ｏのＤＭ−β−ＣｙＤ包接
体は、水に可溶な粉末であるために、投与方法も多様と
なり適用範囲が広くなる。

次に、本発明を、以下の実験例及び実施例により説明す
る。

実験例１ ９− ＤＭ−β−ＣｙＤ水溶液に対するＣ０ＱＩＯの溶解度を
表１に示した。５％、１０％及び１５％の各ＤＭ−β−
ＣＶＤ水溶液１０′！Ｉｌに夫々ＣＯＱＩ０３０ｍｇを
少量づつ加えながら超音波で分散させた後、遮光して２
２℃の水浴中で４時間撹拌し、メンブランフィルタ−（
ポアサイズ０．２２μｍ）にて）濾過し、）戸液につい
て波長２７Ｓｎｔｌｌ付近における吸収の極大波長で吸
光度を測定して定量を行う。

表１ＣｏＱ＋ｏのＤＭ−β−ＣＶＤに対する溶解度（（
１／　１０ｈｆ、２２℃）実施例１ ＤＭ−β−ＣＶＤ１００（＋を蒸溜水１ｊにＦＪ解し、
ＣｏＱ＋ｏ１りを少量づつ加えながら、超音波で分散さ
せた後、遮光して２２℃の水浴中で４時間撹拌して溶解
し、メンブランフィルタ−（ボア１０− １ナイズ０．２２　ｔｔｍ　）にて）濾過し、０．１％
のＣ６ＱＩＯのＤＭ−β−ＣＶＤ包接体の水溶液を得る
。

実施例２ 実施例１で得た包接体の水溶液（約１１）を凍結乾燥し
、ＣｏＱ＋ｏのＤＭ−β−ＣｙＤ包接体の粉末約１００
ｇを得る。

実施例３ 実施例１で得た包接体水溶液を滅菌後、無菌的に１０１
１づつバイアル瓶に定量分注し、凍結乾燥する（　１０
ｍ（Ｉｃ　ｏ　０１Ｇ　／バイアル）。バイアル瓶内は
窒素置換し密栓保存する。

実施例４ 実施例１で得た包接体水溶液１００１！に塩化ナトリウ
ムｏ、６６ｇを加えて撹拌して溶解する。この溶液を濾
過、滅菌し、０．１％包接体の注射液を得る。

実施例５ 実施例３で得た包接体凍結乾燥末封入バイアル瓶中に、
注射用食塩水１０１！を注入、溶解後、注射用に使用す
る。

実施例６ 実施例２で１ｑた包接体の粉末５０部に、乳糖４８部、
ステアリン酸マグネシウム２部を均一に混合して散剤と
する。或いは、通常の乾式造粒法によって細粒状とし、
篩別して、細粒剤とする。

実施例７ 実施例２で得た包接体の粉末５０部に、澱粉１５部、乳
糖１２部、結晶セルローズ２０とメチルセルロー１３部
を均一に混合して捏和後、破砕造粒し、乾燥、篩別して
顆粒剤とする。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明のＣ３ＱＩＯのＤＭ−β−ＣＶＤ包接体
の示差走査熱量の測定結果を示す図、第２図はＣ０ＱＩ
ＯとＤＭ−β−ＣｙＤとの混合物の場合、第３図はＤＭ
−β−ＣＶＤの場合における夫々の示差走査熱量の測定
結果を示す図である。 Ｔ−続　　補　　正　　書 特許庁長官　　若　　杉　　和　　夫　　殿１、事件の
表示 ＋１ｒ’７　ｉｆｆ　５７年　特　ａ’Ｆ　　ＩＭ　　
’ｆ１４１５７９１２号２発明の名称 補酵素Ｑ、。のメチル化−β−シクロデキストリン包接
体及びその製造方法 ３補正をする者 特許出願人 東京都中央区日本橋小舟町１０番１１号ゼリア新薬工業
株式会社 ４代　理　人 東京都千代田区内神［ＩＥＴ目５番３号５補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄及び図面の簡単な説明の
欄、図面 ６補正の内容 （１）明細書の発明の詳細な説明の欄の補正（１）第５
頁第１９行〜第６頁ｖＪ７行におけるｒ　（Ｃ，Ｑ、ｏ
含量１．７５％）は、第１図に・・・・ものと解釈され
る。」 を ｒ　（Ｃ，Ｑ、、含量１．９６％）は、第１図に示すよ
うに、　１５ドＣに発熱点を有しく不可逆的である。）
、これに対してＣ，、Ｑ、。単独の場合、及び開、β−
ＣｙＤの凍結乾燥品にＣ１Ｑ＋ｏを加え乳鉢中で軽く混
合した場合は、夫々第２図及び第３図に示すように４８
°Ｃに吸熱点を有し、また参考例として示したＤＭ−β
−ＣｙＤ自体は第４図に示すように発熱点も吸熱点も有
していない。 これらをまとめると次の表１のようになる。 表　　１ 上記から明らかなように、Ｃ，Ｑ、。は４８°Ｃに融解
に基づく吸熱点を有し、またＣ、Ｑ、。とＤＭ−β−Ｃ
ｙＤの混合物でも４８℃にＣ，Ｑ、。の吸熱点が認めら
れるのに対し、本発明のＣ，Ｑ、。の開−β−ＣｙＤ包
接体ではその吸熱点が消失しており、このことからＣ，
Ｑ、。と開−β−ＣｙＤの相互作用即ち包接体形成が認
められる。」 と補正する。 〔２）第１０頁第２行及び第１０行における「表１」 を 「表２」 と夫々補正する。 （ＩＩ）明細書の図面の簡単な説明の欄の補正第１２頁
第１４行〜第１５行における ［第２図は・・・・第３図は」 を ［第２図はＣ６Ｑ、。単独の場合、第３図はＣ，Ｑ、。 とＤＭ−β−ＣＹＤとの混合物の場合、第４図は」 と補正する。 （ト）図面の補正 第１図、第２図、第３図を夫々添付図面の如く補正し、
新たに添付第４図を追加する。 ７、添付書類の目録

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）補酵素ＱＩＯのへブタキス（２，６−ジーＯ−メチ
   ル）−β−シクロデキストリン包接体。 ２）　補酵素ＱＩＯをヘプタキス（２，６−ジー〇−メ
   チル）−β−シクロデキストリンの水溶液に超音波を用
   いて分散後、撹拌溶解せしめることを特徴する補酵素Ｑ
   ＋ｏのへブタキス（２，６−ジー０−メチル）−β−シ
   クロデキストリン包接体の製造方法。 ３）水溶化した特許請求の範囲第１）項記載の包接体。 ４）　凍結乾燥した特許請求の範囲第１）項記載の包接
   体。