JPS5942651B2 - 抗炎症剤の製造方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗炎症剤の製造法、特に甘草から抗炎症作用を
強く発現し、かつ副作用を現わすグリチルリチンをほと
んど含まない抗炎症剤を製造する方法に関するものであ
る。

甘草は、古来より単独で又は漢方処方に数多く配合して
用いられている重要な生薬で、身体疼痛及び急迫症状を
緩解するのに応用され、その薬理作用として抗潰瘍作用
、抗炎症作用、鎮痙作用等が知られている。

一方、甘草にはグリチルリチン及びその関連化合物が含
有され、それらによる偽アルドステロン症等の副作用が
知られており、甘草を含有する製剤の使用に際しては問
題を有している。

また甘草の薬理作用のうち、抗炎症作用はその薬効発現
に重要な部分を占めているが、未だその本質は解明され
ていない。

本発明者は、甘草から副作用を現わすグリチルリチンを
除去し、抗炎症作用を発現する抗炎症剤を得ることを目
的に鋭意研究した結果、甘草を非極性溶剤で抽出した残
渣を親水性低級アルコールで抽出し、その抽出液の溶剤
を留去して得られる粗エキスを向流分配して抗炎症活性
のあるフラクションを採取し、溶剤を留去することによ
り上記目的が達成されることを知った。

本発明はこの知見に基づくもので、本発明は甘草を非極
性溶剤で抽出した残渣を親水性低級アルコールで抽出し
、その抽出液の溶剤を留去して得られる粗エキスを自流
分配して抗炎症活性のあるフラクションを採取し、溶剤
を留去することを特徴とする抗炎症剤の製造方法である
。

以下、本発明について詳細に説明する。

本発明では、先ず甘草を非極性溶剤、例えばベンゼン、
キシレン、トルエン、ｎ−ヘキサン、エーテル等の１種
又はこれらの混合物で抽出し、不要物を除いた残置を得
る。

この抽出には、低温抽出、加熱抽出、超音波抽出等いず
れの方法をも用いることができる。

この残渣に親水性低級アルコール、例えばメタノール、
エタノール、１ｓｏ−プ動々ノール等の１種又はこれら
の混合物を加えて抽出し、得られた抽出液から溶剤を留
去し粗エキスを得る。

この抽出には、低温抽出、加熱抽出、超音波抽出等いず
れの方法をも用いることができる。

この粗エキスを向流分配し、抗炎症試験により抗炎症活
性の強いフラクションを得、そのフラクションの溶剤を
留去して淡黄かつ色の粉末又は固型物、すなわち抗炎症
剤を得る。

この向流分配には、例えば水−ｎ−ブタノール、水−酢
酸−ｎ−ブタノール、水−ｎ−プロパノ−ルーｎ−ブタ
ノール、水−ピリジン−ｎ−ブタノール、水−メタノー
ルー酢酸エチル、水−ｎ−プロパノ−ルー酢酸エチル、
水−エタノール−１ｓｏ−アミルアルコール、水−アセ
トンー１ｓｏ−アミルアルコール等を用いることができ
る。

そしてこの向流分配は通常の向流分配の装置、操作等を
用いて行なうことができる。

抗炎症活性の強いフラクションを得るために用いる抗炎
症試験はいわゆるカラゲニン浮腫法による。

すなわち、Ｗｉｓｔｅｒ系ラットに薬物を投与し、３０
分後に起炎物質としてλ−カラゲニンを該ラットの足前
に注入し、この際の足容積の増加率（■１）を測定する
。

同様に薬物の代わりに０．９係生理食塩水を上記と同じ
ラットに投与後、λ−カラゲニンで起炎させたラットの
足容積の増加率（ＶＯ）を測定し、次式によってカラゲ
ニン浮腫抑制率を算出し、薬物の抗炎症活性とする。

この値が大きい程抗炎症活性が高いことになる。

カラゲニン浮腫抑制率−“°−“Ｘ １００ （％）ｖ
。

この他に、抗炎症活性は、抗炎症試験としてコツトンペ
レット法、アデュバント関節炎法等を用いて評価するこ
ともできる。

次に本発明で得られる抗炎症剤がグリチルリチンをほと
んど含まない抗炎症剤であることを実験例を示して説明
する。

実験例 甘草６００ｇを粉砕し、これにベンゼン３６００ｍ１を
加え、常温で常法により超音波抽出して残渣５９０ｇを
得た。

この残渣にメタノール３６００ＴＩｌｌを加え、常温で
常法により超音波抽出し、その抽出液を４０°Ｃで減圧
下に蒸発してメタノール粗エキス５０ｇを得た。

この粗エキスを水１０１００Ｏ，ｎ−ブタノール１０１
００Ｏの溶媒系で移行回数４の向流分配を行ない、■−
０〜ｒ＝４の５つのフラクションを得た。

これら各フラクションから４０℃で減圧下に溶剤を留去
して得た粉末について、上記したカラゲニン浮腫法によ
り抗炎症試験を行なってカラゲニン浮腫抑制率を調べた
ところ、第１表の結果が得られた。

また、上記の粉末について測定したグリチルリチン含量
の結果を第１表に示す。

なお、グリチルリチンの定量は以下のようにして行なっ
た。

試料約１．０ｇを精秤し、これに５０係エタノールを７
０ｍ１を加え、水浴上７５℃、３０分還流抽出する。

冷却後、遠心分離により抽出液を得る。残渣にさらに５
０％エタノール２０ｍ１！を加え攪拌し、遠心分離によ
り抽出液を得る。

この抽出液を先の抽出液と合わせ、５０％エタノールを
加えて全量１００ＴＬｌとする。

この溶液を高速液体クロマトグラフィー法を用い、絶対
検量線法によりグリチルリチン量を定量する。

用いた装置及び条件は以下の通りである。装 置 Ｕ
ＮＩＦＬＯＷ−２１１（日本分光製）検出ｉ ＵＶＩ
ＤＥＣ−１００（日本分子ｉｌｌ測定波長 ２５４ ｎ
ｍ 充填剤 Ｓ Ｃ−０２、４，６Ｘ２５０ｍｍ（日本分光
製）移動相 アセトニトリル：５％酢酸−５９：１００
さらに原料の甘草の水製エキス及びメタノール抽出して
得た粗エキスのカラゲニン浮腫抑制率およびグリチルリ
チン含量を測定した結果も第１表に示す。

第１表の結果から、ｒ−２のフラクションから得られる
粉末に強い抗炎症活性が認められ、そのグリチルリチン
含量は０．１ ｇというように非常に少ないものである
ことが認められる。

このｒ＝２のフラクションから得られた淡黄かつ色の粉
末の収量は２．８ｇであった。

本発明で得られる粉末又は固型物はそのまま又は製剤に
通常用いられる賦形剤、添加剤、助剤、防腐剤、着色剤
等を加えて散剤、顆粒剤、火剤、錠剤、カプセル剤など
の形で抗炎症剤として使用することができ、またこの粉
末又は固型物はそのまま又は溶解補助剤その他を加えて
水又はその他の溶剤に溶解し、必要に応じて沢過して液
剤の形で抗炎症剤として使用することができる。

次に本発明の実施例を示す。

実施例 １ 甘草６００ｇを粉砕し、ソックスレー抽出器に入れ、ｎ
−ヘキサン３０００ｄを加えて還流抽出し、この抽出液
を沖過して残渣５８６ｇを得る。

つぎにこの残渣をソックスレー抽出器に入れ、エタノー
ル３０００′ＩｒＬｌを加えて還流抽出し、この抽出液
を４０°Ｃで減圧下に蒸発して粗エキス５２ｇを得る。

このようにして得られたエキスをｎ−ブタノール１０１
００Ｏに溶解分散させ、これに水１０１００Ｏを加え、
常法により移行回数４の自流分配を行ない、ｒ−０〜ｒ
＝４の５つのフラクションを得る。

これらのフラクションについて上記したカラゲニン浮腫
法により抗炎症活性を調べたところ、ｒ＝２のフラクシ
ョンに強い抗炎症活性が認められ、カラゲニン浮腫抑制
率として１００ｍ９／ｋｇ投与で５０係の値が得られた
。

このフラクションから４０°Ｃで減圧下に溶剤を除去し
て粉末状の抗炎症剤３．（ｌを得た。

このもののグリチルリチンの含量は０．１ｇであった。

実施例 ２ 甘草６００ｇを粉砕し、これにベンゼン３６００ｍ１を
加えて超音波抽出器に入れ、常温で常法にしたがって超
音波抽出して得た抽出液を沖過して残渣５９０ｇを分離
する。

つぎにこの残渣にメタノール３６００ｍ１を加えて超音
波抽出器に入れ、常温で常法にしたがって超音波抽出し
、その抽出液を４０℃で減圧下に蒸発して５０．９の粗
エキスを得る。

このようにして得られたエキスをｎ−ブタノール１０１
００Ｏに溶解分散させ、それに０．ＩＮ酢酸１０１００
Ｏを加え、常法により移行回数７の向流分配を行ない、
ｒ−０〜ｒ＝７の８つのフラクションを得る。

これらのフラクションについて上記したカラゲニン浮腫
法により抗炎症活性を調べたところ、ｒ−４、およびｒ
＝ ５の２つのフラクションに強い抗炎症活性が認め
られ、カラゲニン浮腫抑制率として１００〜／ｋｇ投与
で、それぞれ５２％、および５７％の値が得られた。

これらのフラクションから４０℃で減圧下に溶剤を留去
して粉末状の抗炎症剤をそれぞれ１３ｇ、および１．１
ｇの収量で得た。

このもののグリチルリチンの含量はそれぞれ０．０６ｇ
、および０．０３．！；’であった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 甘草を非極性溶剤で抽出した残渣を親水性低級アル
   コールで抽出し、その抽出液の溶剤を留去して得られる
   粗エキスを向流分配して抗炎症活性のあるフラクション
   を採取し、溶剤を留去することを特徴とする抗炎症剤の
   製造方法。