JPS59205327A - ヒト膀胱及び尿管がんに対するモノクロ−ナル抗体及び方法 - Google Patents
ヒト膀胱及び尿管がんに対するモノクロ−ナル抗体及び方法Info
- Publication number
- JPS59205327A JPS59205327A JP59046965A JP4696584A JPS59205327A JP S59205327 A JPS59205327 A JP S59205327A JP 59046965 A JP59046965 A JP 59046965A JP 4696584 A JP4696584 A JP 4696584A JP S59205327 A JPS59205327 A JP S59205327A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- bladder
- monoclonal antibody
- cell
- human
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、国立がん研究所（Ｔｈｅ Ｎａｔｌｏｎａｌ
Ｃａｎｓｅｒ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ）により与えられた
ＣＡＯ８７４８及びＣＡ２１４５５の下での一部政府援
助でなされたものである。政府は本件発明についである
種の権利を有する。
Ｃａｎｓｅｒ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ）により与えられた
ＣＡＯ８７４８及びＣＡ２１４５５の下での一部政府援
助でなされたものである。政府は本件発明についである
種の権利を有する。
発明の背景
本発明は、ヒト膀胱細胞を認識するモノクローナル抗体
に関する。該モノクローナル抗体は、正常及びがん性膀
胱皮下細胞についての抗原作 ５− 成源（ｍａｋｅｒ ）を認識するものである。
に関する。該モノクローナル抗体は、正常及びがん性膀
胱皮下細胞についての抗原作 ５− 成源（ｍａｋｅｒ ）を認識するものである。
抗体特異性は、培養細胞との反応により、また正常成人
組織、胎児組織及び治療抵抗性（悪性）組織との反応に
より明らかにされて来ている。
組織、胎児組織及び治療抵抗性（悪性）組織との反応に
より明らかにされて来ている。
この抗体特異性會もってすれば、低度非−侵入性かん細
胞から正常細胞を、そして、高度侵入性がん細胞から低
度非−侵入性がん細胞を、それぞれ識別することができ
るので、かかるｍＡｂｓは膀胱がんの診断及び予後に有
用である。
胞から正常細胞を、そして、高度侵入性がん細胞から低
度非−侵入性がん細胞を、それぞれ識別することができ
るので、かかるｍＡｂｓは膀胱がんの診断及び予後に有
用である。
こうしたｍＡｂｓを用いての試験は、外科医をして膀胱
がんの場合の手術手順を決めることを可能にする。
がんの場合の手術手順を決めることを可能にする。
１９７５年、Ｋｏｈｌｅｒ ＆ ＭｉｌＬｓｔｅｌｎ
は、正確にして再現性のある特異性含有するほとんど
無制限量の生産を促すハイブリドーマ（融合細胞）を用
いてモノクローナル抗体（ｍＡｂｓ）の生産方法を発表
した。動物を腫瘍細胞又は他の抗原で免疫して得た通常
の抗血清は、特異性及び特性の異る無数の異る抗体を含
むところとなる。と ６− ころがハイブリドーマは、均一特性の単一抗体を生産す
るものである。前記のに二ｈｔｅｒ ＆Ｍｌｌｌｓｔｅ
ｉｎ の方法は、不死骨髄腫（ｒｒｌｙｅ Ｉ ｏｍ
ａ ）細胞と免疫した免疫動物のヒ臓細胞との隅台に基
いたものである。その方法によれは隅台細胞（ハイシリ
ドーマ）から、所望の特異性を有する抗体を生産するク
ローンが分取される。そして、ハイブリドーマ細胞は側
段制限なく培養できる（又は液体窒素に凍結保存できる
）ので、抗体の定常的供給は保証されるところとなる。
は、正確にして再現性のある特異性含有するほとんど
無制限量の生産を促すハイブリドーマ（融合細胞）を用
いてモノクローナル抗体（ｍＡｂｓ）の生産方法を発表
した。動物を腫瘍細胞又は他の抗原で免疫して得た通常
の抗血清は、特異性及び特性の異る無数の異る抗体を含
むところとなる。と ６− ころがハイブリドーマは、均一特性の単一抗体を生産す
るものである。前記のに二ｈｔｅｒ ＆Ｍｌｌｌｓｔｅ
ｉｎ の方法は、不死骨髄腫（ｒｒｌｙｅ Ｉ ｏｍ
ａ ）細胞と免疫した免疫動物のヒ臓細胞との隅台に基
いたものである。その方法によれは隅台細胞（ハイシリ
ドーマ）から、所望の特異性を有する抗体を生産するク
ローンが分取される。そして、ハイブリドーマ細胞は側
段制限なく培養できる（又は液体窒素に凍結保存できる
）ので、抗体の定常的供給は保証されるところとなる。
抗体は、抗原として知られる他の分子と結合し又それｆ
：ｕ 識する機能を有する。モノクローナル抗体は、性
質について非常に均一であり且つ唯一の抗原又は決定因
子として知られる抗原の部分全認識するところを除けば
、他の抗体と異るところはない。
：ｕ 識する機能を有する。モノクローナル抗体は、性
質について非常に均一であり且つ唯一の抗原又は決定因
子として知られる抗原の部分全認識するところを除けば
、他の抗体と異るところはない。
Ｎ１１胞の場合、認識される決定因子は、当該抗体と反
応するか又はその細胞中の抗体である。
応するか又はその細胞中の抗体である。
特定の抗体は、即ち反応を介して、特定種類の細胞をｇ
識するのは、こうした細胞抗原が故でおる。したがって
細胞抗原は、その細胞を同定するマーカー（ｍａｒｋｅ
ｒ ）たり得るものである。
識するのは、こうした細胞抗原が故でおる。したがって
細胞抗原は、その細胞を同定するマーカー（ｍａｒｋｅ
ｒ ）たり得るものである。
この抗原マーカーは、正常の細胞分化過程を観察し、与
えられた細胞システム中の異常性を見極めるのに利用で
きる。前記の細胞分化過程は、その細胞の表面抗原表現
型について変化全件い、明瞭な分化系統に属する細胞を
識別するか又は同じ分化系統に於ての異った段階で細胞
を識別する抗原が、それに相応する抗体を用いさえすれ
ば、観察される。分化抗原の最初の確認は、マウスのＴ
−細胞白血病の表面抗原の分析及び、抗原のＴＬ、Ｔｈ
ｙ−１及びＬｙｔシリーズの公知手段を介してもたらさ
れた。（Ｏｌｄ。
えられた細胞システム中の異常性を見極めるのに利用で
きる。前記の細胞分化過程は、その細胞の表面抗原表現
型について変化全件い、明瞭な分化系統に属する細胞を
識別するか又は同じ分化系統に於ての異った段階で細胞
を識別する抗原が、それに相応する抗体を用いさえすれ
ば、観察される。分化抗原の最初の確認は、マウスのＴ
−細胞白血病の表面抗原の分析及び、抗原のＴＬ、Ｔｈ
ｙ−１及びＬｙｔシリーズの公知手段を介してもたらさ
れた。（Ｏｌｄ。
Ｌｌｏｙｄ Ｊ、、 Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ
、 ４１．３６１−３７５ 、 Ｆｅｂｒｕａｒｙ １
９８１ ）こうしたＴ−細胞分化抗原の分析は、マウス
及びヒトの正常Ｔ−細胞及びＢ−細胞が容易に入手でき
るようになって非常に単純化され、且つそれと共に発展
している。〔米国特許第４．３６１，５４９−５５０号
、同第４，３６４，９３２−３７号及び同第４，３６３
，７９９号（ヒ）Ｔ−細胞抗原に対するｍＡｂに関する
）参照〕 他の系列に属する正常にして新生の細胞に露呈する分化
抗原については、はとんど知見がない。
、 ４１．３６１−３７５ 、 Ｆｅｂｒｕａｒｙ １
９８１ ）こうしたＴ−細胞分化抗原の分析は、マウス
及びヒトの正常Ｔ−細胞及びＢ−細胞が容易に入手でき
るようになって非常に単純化され、且つそれと共に発展
している。〔米国特許第４．３６１，５４９−５５０号
、同第４，３６４，９３２−３７号及び同第４，３６３
，７９９号（ヒ）Ｔ−細胞抗原に対するｍＡｂに関する
）参照〕 他の系列に属する正常にして新生の細胞に露呈する分化
抗原については、はとんど知見がない。
このことは、適切な正常細胞型の手頃な試料を入手する
のが困離であると同時にモノクローナル抗体に係る技術
が変化に富んだものであることに起因している。交雑細
胞系の調製は、接穂物の性質、細胞増殖条件、交雑条件
等の実験的要素により可能であったりなかったりする。
のが困離であると同時にモノクローナル抗体に係る技術
が変化に富んだものであることに起因している。交雑細
胞系の調製は、接穂物の性質、細胞増殖条件、交雑条件
等の実験的要素により可能であったりなかったりする。
したがって、成る釉の細胞についてハイブリドーマ調製
の可能性を予測することは、その細胞が他の細胞との間
で可能であったからといって、必ずしも可能ではない。
の可能性を予測することは、その細胞が他の細胞との間
で可能であったからといって、必ずしも可能ではない。
メラニン形成細胞（ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅｓ ）につい
ての表面抗原を同定することが、最近見い出された正常
皮膚のメラニン形成細胞を培養する技術により可能にな
った（ Ｅｌｓｉｎｇｅｒ、ｅｔ ａｌ、、Ｐｒｏｃ。
ての表面抗原を同定することが、最近見い出された正常
皮膚のメラニン形成細胞を培養する技術により可能にな
った（ Ｅｌｓｉｎｇｅｒ、ｅｔ ａｌ、、Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ、７９２０１８
（Ｍａｒｅｈ １９８２ ） −９− 米国特許出願５ｅｒｉａｌ Ｎｏ、 ４６９，８５４
）。この方法は、メラニン形成細胞分化抗原分析のため
の増殖細胞に新風全もたらすものである。同様に、メラ
ノーマ（黒色腫）由来の多数の細胞が今や株化されてい
て、それ等はメラノーマ表面抗原の分析を助長している
ところである。ｍＡｂｓの出現は、治療抵抗性のメラノ
〜マの表面抗原についての知見をいつそうに深めた。そ
して、メラノーマ及びメラニン色素細胞の双方について
の細胞マーカーが明らかにされ、メラノーマ及びメラニ
ン色素細胞の双方におけるそれぞれの発育段階で分化抗
原特性を認識するモノクローナル抗体を判別するパネル
が選択されている。
（Ｍａｒｅｈ １９８２ ） −９− 米国特許出願５ｅｒｉａｌ Ｎｏ、 ４６９，８５４
）。この方法は、メラニン形成細胞分化抗原分析のため
の増殖細胞に新風全もたらすものである。同様に、メラ
ノーマ（黒色腫）由来の多数の細胞が今や株化されてい
て、それ等はメラノーマ表面抗原の分析を助長している
ところである。ｍＡｂｓの出現は、治療抵抗性のメラノ
〜マの表面抗原についての知見をいつそうに深めた。そ
して、メラノーマ及びメラニン色素細胞の双方について
の細胞マーカーが明らかにされ、メラノーマ及びメラニ
ン色素細胞の双方におけるそれぞれの発育段階で分化抗
原特性を認識するモノクローナル抗体を判別するパネル
が選択されている。
これ等の分化抗原は、メラニン色素細胞とメラノーマを
区分し、それ等を特性サブ−セット（Ｃｈａｒａｃｔｅ
ｒｌｓｔｉｃ ５ｕｂ−８ｅｔｓ ）に型体系化するの
に使用できる〔Ｄｉｐｐｏｌｄ ｅｔ ａｌ、Ｐｒｏｃ
、Ｎａｔｌ。
区分し、それ等を特性サブ−セット（Ｃｈａｒａｃｔｅ
ｒｌｓｔｉｃ ５ｕｂ−８ｅｔｓ ）に型体系化するの
に使用できる〔Ｄｉｐｐｏｌｄ ｅｔ ａｌ、Ｐｒｏｃ
、Ｎａｔｌ。
Ａｃａｄ、 Ｓｃｉ、ＵＳＡ、 ７７ 、６１１４ （
１９８０）及びＨｏｕｇｈｔｏｎｅｔ ａｌ、、 Ｊ、
Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、、 １５６，１７５５（１９８２）−
米国特許出願５ｅｒｉａｌ ＮＯ，４４５，り６１ 〕
。メラ＝ｙ色素１０− 細胞及びメラノーマ細胞のサブ−セットによる免疫学的
検定が、かくして可能になった。
１９８０）及びＨｏｕｇｈｔｏｎｅｔ ａｌ、、 Ｊ、
Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、、 １５６，１７５５（１９８２）−
米国特許出願５ｅｒｉａｌ ＮＯ，４４５，り６１ 〕
。メラ＝ｙ色素１０− 細胞及びメラノーマ細胞のサブ−セットによる免疫学的
検定が、かくして可能になった。
ヒト星状細胞腫ｍＡｂｓは、Ｃａ１ｒｎｃｒｏｓｓ等に
より製造されている（ Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔｌ、 Ａｃ
ａｄ、 ＵＳＡ 、 ７９ 。
より製造されている（ Ｐｒｏｃ、 Ｎａｔｌ、 Ａｃ
ａｄ、 ＵＳＡ 、 ７９ 。
５６４１ （１９８２）−米国特許出願５ｏｒｉａｌ
Ｎｏ。
Ｎｏ。
４１３．８６１ ：］。
発明の概要
膀胱組織は、過剰量の尿を保持するについて膨張しなく
てはならない。膀胱及び尿管の上皮細胞は、尿路又は移
行性の上皮細胞といわれる特徴的な弾性を有する組織を
形成している。そしてこれ等の細胞は、がん性のものに
変ることができる。移行性細胞がんの第一の形態（ＴＣ
Ｃ）即ち乳頭腫は、局在する低−程度の非−侵入性腫瘍
でおる。外科治療に於ては、通常、尚該腫瘍が生命をお
びやかす侵入性であったり又は転移性であったりはしな
いので、当該腫瘍を局所切除するにとどめることができ
る。したがって膀胱全体を切除しないですむ。そして繰
返し治療も同様例して行われる。
てはならない。膀胱及び尿管の上皮細胞は、尿路又は移
行性の上皮細胞といわれる特徴的な弾性を有する組織を
形成している。そしてこれ等の細胞は、がん性のものに
変ることができる。移行性細胞がんの第一の形態（ＴＣ
Ｃ）即ち乳頭腫は、局在する低−程度の非−侵入性腫瘍
でおる。外科治療に於ては、通常、尚該腫瘍が生命をお
びやかす侵入性であったり又は転移性であったりはしな
いので、当該腫瘍を局所切除するにとどめることができ
る。したがって膀胱全体を切除しないですむ。そして繰
返し治療も同様例して行われる。
しかしながら、ＴＣＣの第２の形態は、攻撃性、侵入性
そして転移性のものである。これ等２つのＴＣＣがんを
合ぜてみると、初期膀胱がん（膀胱肉腫は依然他の形態
である。）の９５％を占めるところとなる。前記２つの
主たるＴＣＣ形態についていずれのものであるか、即ち
攻撃的々ものであるか又は非−侵入性のものであるかを
識別することは、それ等に対する予後が根本的に異るこ
とから重要である。現在葦でのところの膀胱組織学的方
法は必ずしも有効なものではない。
そして転移性のものである。これ等２つのＴＣＣがんを
合ぜてみると、初期膀胱がん（膀胱肉腫は依然他の形態
である。）の９５％を占めるところとなる。前記２つの
主たるＴＣＣ形態についていずれのものであるか、即ち
攻撃的々ものであるか又は非−侵入性のものであるかを
識別することは、それ等に対する予後が根本的に異るこ
とから重要である。現在葦でのところの膀胱組織学的方
法は必ずしも有効なものではない。
がん性膀胱細胞を認識する本発明の１２のｍＡｂｓのパ
ネルグループは、最初の相応する診断についての判定を
可能にするものである。又、前記パネルは、細胞につい
て正常のものと、がん性のものとを識別するものである
。更に前記・ぐネルは、一般的組織判定に使用するとと
もできる。
ネルグループは、最初の相応する診断についての判定を
可能にするものである。又、前記パネルは、細胞につい
て正常のものと、がん性のものとを識別するものである
。更に前記・ぐネルは、一般的組織判定に使用するとと
もできる。
正常又は異常組織及び／又は細胞試料は、組織型を決定
する本発明のモノクローナル抗体のそれぞれと接触させ
、当該技術分野に於て公知の抗原−抗体視覚化手段で反
応の正負を判定する。
する本発明のモノクローナル抗体のそれぞれと接触させ
、当該技術分野に於て公知の抗原−抗体視覚化手段で反
応の正負を判定する。
本発明は、２５−２４０ｋｄ（キロダルトン）の範囲の
分子量を有する膀胱グリコプロティンを認識するＴ１６
、ＪＰ１６５ 、Ｊ２３３ 、Ｔ２３ 。
分子量を有する膀胱グリコプロティンを認識するＴ１６
、ＪＰ１６５ 、Ｊ２３３ 、Ｔ２３ 。
Ｔｌ０Ｉ 、 Ｔ４３ 、 Ｔ８７ 、 Ｊ１４３ 、
Ｔ１３８ 、 Ｔ１１．Ｏ。
Ｔ１３８ 、 Ｔ１１．Ｏ。
０ｍ５及び０ｍ３７からなる群から選ばれるものであっ
て、ヒト膀胱がん細胞を認識するｍＡｂｓを生産するハ
イブリドーマ細胞系を包含する。本発明の他の抗原は、
したがって、ブリコリビイラド（ｇｌｙｃｏｌｌｐｌｄ
ｓ ）又はプロティン（ｐｒｏｔｅｉｎｓ ）でなけれ
ばならない。
て、ヒト膀胱がん細胞を認識するｍＡｂｓを生産するハ
イブリドーマ細胞系を包含する。本発明の他の抗原は、
したがって、ブリコリビイラド（ｇｌｙｃｏｌｌｐｌｄ
ｓ ）又はプロティン（ｐｒｏｔｅｉｎｓ ）でなけれ
ばならない。
詳細な説明
組織培養
ヒト膀胱がんの培養細胞は、Ｄｒ、 Ｊ、 Ｆｏｇｈ（
５ｌｏａｎ −Ｋｅｔｔｅｒｆｎｇ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔ
ｅ ） のコレクションから入手した。他の株化ヒト
細胞系の由来及び維持、及び正常皮屑線維芽細胞及び腎
臓上皮細胞は、既に報告されているところのもので１３
− ある（ Ｃａｒｏｙ ｅｔ ａｌ、 、 Ｐｒｏｃ、
Ｎａｔｌ、 Ａｃａｄ、 Ｓｅｔ、 。
５ｌｏａｎ −Ｋｅｔｔｅｒｆｎｇ Ｉｎ５ｔｉｔｕｔ
ｅ ） のコレクションから入手した。他の株化ヒト
細胞系の由来及び維持、及び正常皮屑線維芽細胞及び腎
臓上皮細胞は、既に報告されているところのもので１３
− ある（ Ｃａｒｏｙ ｅｔ ａｌ、 、 Ｐｒｏｃ、
Ｎａｔｌ、 Ａｃａｄ、 Ｓｅｔ、 。
Ｕ ８Ａ ＊ １ＬＬ３２７８−３２８２ （１９７６
） ； Ｖｅ ｄ ａ ｅ ｔ ａ １− ＋Ｊ、
Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、 、 １５（と５６４−５７９
（１９７９））。
） ； Ｖｅ ｄ ａ ｅ ｔ ａ １− ＋Ｊ、
Ｅｘｐ、 Ｍｅｄ、 、 １５（と５６４−５７９
（１９７９））。
血清学的操作
ウサギ抗−マウスＩｇ又はヒト〇−赤血球に結合してい
るヤギ抗−ｍｕ鎖（ａｎｔｉ−ｍｕ Ｃｈａｉｎ ）を
用いた細胞表面抗原の検出についてのＲｏａｓ４１ｔｉ
ｎｇ分析を先に報告されている方法により行ったＣ Ｄ
ｉｐｐｏｌｄ ａｔ ａｌ、、 ｐｒｏｅ、Ｎａｔｌ、
Ａｅａｄ。
るヤギ抗−ｍｕ鎖（ａｎｔｉ−ｍｕ Ｃｈａｉｎ ）を
用いた細胞表面抗原の検出についてのＲｏａｓ４１ｔｉ
ｎｇ分析を先に報告されている方法により行ったＣ Ｄ
ｉｐｐｏｌｄ ａｔ ａｌ、、 ｐｒｏｅ、Ｎａｔｌ、
Ａｅａｄ。
Ｓｅｔ、、ＵＳＡ、７７６１１４−６１１８（１９８０
） ）。吸収試験、抗原決定因子の熱安定性についての
評価及びＩｇサブクラスの０ｕｅｈｔｅｒｌｏｎｙ分析
を公知の方法により行った（ Ｃａ１ｒｎｃｒｏｓｓ
ｅｔ ａｌ、、ｐｒｏｃ。
） ）。吸収試験、抗原決定因子の熱安定性についての
評価及びＩｇサブクラスの０ｕｅｈｔｅｒｌｏｎｙ分析
を公知の方法により行った（ Ｃａ１ｒｎｃｒｏｓｓ
ｅｔ ａｌ、、ｐｒｏｃ。
Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｅｔ、、ＵＳＡ、７９５６４１
−５６４５（１９８２）；Ｃａｒｏｙ、前述〕。酵素−
関連免疫検定（ＥＬＩ ＳＡ）をゆ着性単層細胞か又は
固−相中プロチインを用いて行った（ Ｌｌｏｙｄ ｅ
ｔ ａＬ、 、 Ｉｍｍｕｎｏｇｏｎｅｔ 。
−５６４５（１９８２）；Ｃａｒｏｙ、前述〕。酵素−
関連免疫検定（ＥＬＩ ＳＡ）をゆ着性単層細胞か又は
固−相中プロチインを用いて行った（ Ｌｌｏｙｄ ｅ
ｔ ａＬ、 、 Ｉｍｍｕｎｏｇｏｎｅｔ 。
圧５３７−５４１ （１９８３） ）。血球凝集検定に
ついてはＡｎｇｅｒ ａｔ ａｌ、、Ｈｙｂｒｉｄｏｍ
ａ、 １１３９−１４６（１９８２）参照。
ついてはＡｎｇｅｒ ａｔ ａｌ、、Ｈｙｂｒｉｄｏｍ
ａ、 １１３９−１４６（１９８２）参照。
１４−
免疫
（ＢＡＬＢ／ｃ Ｘ Ｃ５７ＢＬ／６ ） ｆ’めすマ
ウスを、’ｌ’−２４，２５３−Ｊ 、又は４８６−Ｐ
及び２５３−Ｊ膀胱がん細胞のＩ Ｘ １０’細胞景を
腹腔内Ｃ１，ｐ−）接種により３−４週の間隔で３〜４
回免疫した。
ウスを、’ｌ’−２４，２５３−Ｊ 、又は４８６−Ｐ
及び２５３−Ｊ膀胱がん細胞のＩ Ｘ １０’細胞景を
腹腔内Ｃ１，ｐ−）接種により３−４週の間隔で３〜４
回免疫した。
ＯｍＡｂ１！９導（ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ）に当っては
、細胞懸濁液を膀胱乳頭腫から、機械的分散により調製
し、０．５ ％Ｎｏｎ１ｄｅｔＰ−４０（ＮＰ−４０）
緩衝液で抽出した。得られる前記乳頭腫の１ｏｏミクロ
グラムを腹腔内注射しＦｒｅｕｄ完全補助薬中のそれの
別の１ｏｏミクログラムを皮下注射した。
、細胞懸濁液を膀胱乳頭腫から、機械的分散により調製
し、０．５ ％Ｎｏｎ１ｄｅｔＰ−４０（ＮＰ−４０）
緩衝液で抽出した。得られる前記乳頭腫の１ｏｏミクロ
グラムを腹腔内注射しＦｒｅｕｄ完全補助薬中のそれの
別の１ｏｏミクログラムを皮下注射した。
４週間後、前記抽出物の更なるＺｏｏミクログラムを腹
腔内注射した。
腔内注射した。
マウス−モノクローナル抗体の銹導
最終の免疫後３〜４日してマウスを処置し、ひ臓細胞を
マウス骨髄腫ＭＯＰＣ−２１ＮＳ／１細胞と公知方法に
より融合した［ Ｃｏｔｅ ｅｔ ａｌ、、Ｐｒｏｃ。
マウス骨髄腫ＭＯＰＣ−２１ＮＳ／１細胞と公知方法に
より融合した［ Ｃｏｔｅ ｅｔ ａｌ、、Ｐｒｏｃ。
Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、 Ｓｅｔ、、ＵＳＡ 、 ８０２
０２６−２０３０（１９８３））。
０２６−２０３０（１９８３））。
クローンは最初に、培養がん細胞と正常腎臓皮下細胞の
パネル上でＥＬＩＳＡにより反応性形状によって選択さ
れた。ＯｍＡｂｉについての最初のスクリーニングｕ、
Ｆａｌｃｏｎ ３０４０マイクロテス）ＩＩ ゾ レ
ー ） （Ｆａｌｃｏｎ ＆ Ｌａｂｗａｒｅ
、 Ｄｉｖ、 ＦＢｅｃｔｏｎ 、 Ｄｉｃｋｉｎ
ｓｏｎ ＆ Ｃｏ、 、 ０ｘｎａｒｄ 、 ＣＡ）
［コンカナツマリンＡでゾレコートしたもの］（Ｍａｔ
ｔｅｓ ａｔ ａｌ、 、 Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、Ｍ
ｅｔｈ、 、 ６１ １４５（１９８３） ）のウェル
（ｗｅｌｌ）に加えられた乳頭腫細胞懸濁液についての
直接免疫けい光分析により行った。３〜４回のサブクロ
ーニング後、ハイブリドーマをｎｕ／ｎｕマウス（Ｓｗ
ｉｓｓ産）に皮下注射し、腫脹の次第に増元するマウス
の血清を培養細胞の血清学的及び生化学的分析に使用し
た。
パネル上でＥＬＩＳＡにより反応性形状によって選択さ
れた。ＯｍＡｂｉについての最初のスクリーニングｕ、
Ｆａｌｃｏｎ ３０４０マイクロテス）ＩＩ ゾ レ
ー ） （Ｆａｌｃｏｎ ＆ Ｌａｂｗａｒｅ
、 Ｄｉｖ、 ＦＢｅｃｔｏｎ 、 Ｄｉｃｋｉｎ
ｓｏｎ ＆ Ｃｏ、 、 ０ｘｎａｒｄ 、 ＣＡ）
［コンカナツマリンＡでゾレコートしたもの］（Ｍａｔ
ｔｅｓ ａｔ ａｌ、 、 Ｊ、 Ｉｍｍｕｎｏｌ、Ｍ
ｅｔｈ、 、 ６１ １４５（１９８３） ）のウェル
（ｗｅｌｌ）に加えられた乳頭腫細胞懸濁液についての
直接免疫けい光分析により行った。３〜４回のサブクロ
ーニング後、ハイブリドーマをｎｕ／ｎｕマウス（Ｓｗ
ｉｓｓ産）に皮下注射し、腫脹の次第に増元するマウス
の血清を培養細胞の血清学的及び生化学的分析に使用し
た。
組織の凍結区分（５ミクロン）を、３．７％ホルムアル
デヒド−りん酸−緩衝塩（ｐＢＳ）液中で固定し、洗滌
し、非希釈ハイシリドーマ培養物の上油を用いて１時間
培養した。スライド（５ｌｉｄｅｓ ）を洗滌し、フル
ロルスセイン結合された（ ｆｌｕｒｏｒｓｃａｉｎｃ
ｏｎｊｕｇａｔｅｄ）やぎ抗−マウスＩｇ（Ｃａｐｐｅ
ｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｏｓ、Ｃｏｅｈｒａｖｉｌｌ
ｅ、ＰＡ）の１：４０希釈物を用いて３０分間培養し、
再び洗滌し、ＰＢＳ中９０％クリセロールでウエットー
マウンテインクした。
デヒド−りん酸−緩衝塩（ｐＢＳ）液中で固定し、洗滌
し、非希釈ハイシリドーマ培養物の上油を用いて１時間
培養した。スライド（５ｌｉｄｅｓ ）を洗滌し、フル
ロルスセイン結合された（ ｆｌｕｒｏｒｓｃａｉｎｃ
ｏｎｊｕｇａｔｅｄ）やぎ抗−マウスＩｇ（Ｃａｐｐｅ
ｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｏｓ、Ｃｏｅｈｒａｖｉｌｌ
ｅ、ＰＡ）の１：４０希釈物を用いて３０分間培養し、
再び洗滌し、ＰＢＳ中９０％クリセロールでウエットー
マウンテインクした。
免疫沈降操作
〔３Ｈ〕グルコサミン又は（３５Ｓ）メチオニンの結合
、又は１２５工での表面ラベリング（Ｄｌｐｐｏｌｄｅ
ｔ ａｌ、前出； Ｃａ１ｒｎｃｒｏｓｓ 、前出）の
３つの手段の１つでラベル化した洗剤−溶解細胞抽出物
を用いて抗体を免疫沈降活性試験に付した。細胞のＮＰ
−４０溶解及びスタフィロコッカス アウレウス（Ｓ、
ａｕｒｅｕｓ） を用いる免疫沈降方法は既に発表さ
れているところでおる（ Ｄｉｐｐｏｌｄ。
、又は１２５工での表面ラベリング（Ｄｌｐｐｏｌｄｅ
ｔ ａｌ、前出； Ｃａ１ｒｎｃｒｏｓｓ 、前出）の
３つの手段の１つでラベル化した洗剤−溶解細胞抽出物
を用いて抗体を免疫沈降活性試験に付した。細胞のＮＰ
−４０溶解及びスタフィロコッカス アウレウス（Ｓ、
ａｕｒｅｕｓ） を用いる免疫沈降方法は既に発表さ
れているところでおる（ Ｄｉｐｐｏｌｄ。
前出； Ｃａｉｒｃｒｏｓｇ 、前出）。分子量は、減
圧条件下で定量した。
圧条件下で定量した。
本発明の好しい実施態様によれば、患者の尿中に入った
転移細胞をパネルのモノクローナル抗体のそれぞれで試
験する。該細胞又はそれ等の一部を、系列希釈した前記
モノクローナル抗体のそれぞれで試験するか又は個々に
接触せし１７− める。したがって、がんの検出は、最少の患者破壊で可
能であり、その際体液及び滲出物の使用が好しい。
転移細胞をパネルのモノクローナル抗体のそれぞれで試
験する。該細胞又はそれ等の一部を、系列希釈した前記
モノクローナル抗体のそれぞれで試験するか又は個々に
接触せし１７− める。したがって、がんの検出は、最少の患者破壊で可
能であり、その際体液及び滲出物の使用が好しい。
全くのところ、本発明は、当該モノクローナル抗体に対
する抗原マーカーを含有する細胞断片について被検人尿
試料試験を行うものであり、就中、その尿に入ったマー
カーについて同様に試験してもよい。
する抗原マーカーを含有する細胞断片について被検人尿
試料試験を行うものであり、就中、その尿に入ったマー
カーについて同様に試験してもよい。
本発明にあっては、けい光子ツクローナル抗体によりラ
ベル化した細胞マーカーを検出するについてフロー血球
流量測定法を用いることもできる。
ベル化した細胞マーカーを検出するについてフロー血球
流量測定法を用いることもできる。
本発明の前記モノクローナル抗体は、ヒトがん性膀胱皮
下細胞で免疫したマウス（又は他のは乳動物）のひ臓細
胞をマウス骨髄腫と融合しハイブリドーマを形成する改
良されたＫｏｈｌｅｒ−Ｍｉｌｉｓｔｅｉｎの方法によ
り調製した。血清学的スクリーニングにより、正常膀胱
及び／又はがん性膀胱についての分化抗原全認識する抗
体をこれ等のハイブリドーマを使用して見い出した。
下細胞で免疫したマウス（又は他のは乳動物）のひ臓細
胞をマウス骨髄腫と融合しハイブリドーマを形成する改
良されたＫｏｈｌｅｒ−Ｍｉｌｉｓｔｅｉｎの方法によ
り調製した。血清学的スクリーニングにより、正常膀胱
及び／又はがん性膀胱についての分化抗原全認識する抗
体をこれ等のハイブリドーマを使用して見い出した。
１８−
他の組織についても、それが正常であるにしろがん性の
ものであるにしろ、これ等のモノクローナル抗体のいく
つかにより同様に認識される。
ものであるにしろ、これ等のモノクローナル抗体のいく
つかにより同様に認識される。
これ等の分化抗原に基いて、分類体系即ちがん性膀胱組
織又は細胞と同様正常なそれ等の判別（ｔｙｐｉｎｇ）
は今や可能であり、これ等のマーカーに対するモノクロ
ーナル抗体を使用して分化又は侵入の各種段階での膀胱
の腫瘍の血清学的検定方法を開発した。これ等の検定方
法は、転移性皮下組織の膀胱腫瘍の早期診断に特に有効
に採用されるものである。注目すべきは、それ等方法に
よると、膀胱の高度侵入性がんから低度非−侵入性乳頭
腫全区別でき、そこにを）って乳頭腫の診断は、その肺
癌の外科的な局部切除の必要性全示唆し、一方侵入性が
んの診断はその膀胱の外科的切除の盛装性を示唆するも
のである。
織又は細胞と同様正常なそれ等の判別（ｔｙｐｉｎｇ）
は今や可能であり、これ等のマーカーに対するモノクロ
ーナル抗体を使用して分化又は侵入の各種段階での膀胱
の腫瘍の血清学的検定方法を開発した。これ等の検定方
法は、転移性皮下組織の膀胱腫瘍の早期診断に特に有効
に採用されるものである。注目すべきは、それ等方法に
よると、膀胱の高度侵入性がんから低度非−侵入性乳頭
腫全区別でき、そこにを）って乳頭腫の診断は、その肺
癌の外科的な局部切除の必要性全示唆し、一方侵入性が
んの診断はその膀胱の外科的切除の盛装性を示唆するも
のである。
そういうわけで、本発明のモノクローナル抗体のパネル
を用いれば、転移性細胞がんについての予後が先づもっ
て可能である。
を用いれば、転移性細胞がんについての予後が先づもっ
て可能である。
非−攻撃性乳頭腫に対する攻撃性ＴＣＣは、本発明の膀
胱外科処置に必要なところに付随する判断を介すれば識
別できる。
胱外科処置に必要なところに付随する判断を介すれば識
別できる。
上記のところは本発明の好しい実施態様のものである。
本発明の検定方法は、膀胱細胞を含有する組織を、膀胱
細胞抗原を認識する抗体、好しくは前記膀胱の抗原系の
１又はそれ以上の細胞抗原に対するモノクローナル抗体
と接触させ、前記モノクローナル抗体と前記抗原との間
の免役血清学的又は免疫病理学的抗原反応を観察するこ
とからなる。本発明の好しい態様に於ては、接触せしめ
る組織試料は尿管又は膀胱組織であり、前記の接触組織
の抗原反応は、免疫けい光、放射性ｍＡｂ 、プロティ
ンＡ又は抗−免疫グロブリンに結合したやぎ又はヒト赤
面細胞とのロゼツト形成、直接吸収等の公知手段により
観察される。
細胞抗原を認識する抗体、好しくは前記膀胱の抗原系の
１又はそれ以上の細胞抗原に対するモノクローナル抗体
と接触させ、前記モノクローナル抗体と前記抗原との間
の免役血清学的又は免疫病理学的抗原反応を観察するこ
とからなる。本発明の好しい態様に於ては、接触せしめ
る組織試料は尿管又は膀胱組織であり、前記の接触組織
の抗原反応は、免疫けい光、放射性ｍＡｂ 、プロティ
ンＡ又は抗−免疫グロブリンに結合したやぎ又はヒト赤
面細胞とのロゼツト形成、直接吸収等の公知手段により
観察される。
本発明の他の好しい実施態様に於ては、未知のヒト細胞
被検試料を、フローシトメトリー（ｆ ｌｏｗ ｃｙｔ
ｏｍｅｔｒｙ ）用の細胞ソーターを使用して上述の細
胞・ぞネル上のそれぞれのものとのｍＡｂ反応について
分析する。この方法に於ては、けい光性ｍＡｂと反応す
る細胞数がカウントできる。ｍＡｂ抗原を表徴する細胞
数をカウントするについて他の公知の観察手段が採用で
きる。
被検試料を、フローシトメトリー（ｆ ｌｏｗ ｃｙｔ
ｏｍｅｔｒｙ ）用の細胞ソーターを使用して上述の細
胞・ぞネル上のそれぞれのものとのｍＡｂ反応について
分析する。この方法に於ては、けい光性ｍＡｂと反応す
る細胞数がカウントできる。ｍＡｂ抗原を表徴する細胞
数をカウントするについて他の公知の観察手段が採用で
きる。
本発明の更に他の好しい実施態様に於ては、検定に付さ
れる組織全切取し、そのままか又は凍結後か、又は当該
技術分野に於て公知の方法により、Ｒラフイン中に埋め
込むかして、前述のモノクローナル抗体に接触させ、そ
の際の反応を前記と同様に観察する。
れる組織全切取し、そのままか又は凍結後か、又は当該
技術分野に於て公知の方法により、Ｒラフイン中に埋め
込むかして、前述のモノクローナル抗体に接触させ、そ
の際の反応を前記と同様に観察する。
本発明の更にまた他の好しい実施態様に於ては、検定に
付される組織は、一部分又は全体部の損傷のない完全体
からなるものであり、これ等に、放射性又は他のエネル
ギー発生要素全付加した抗体を投与し、がん性成路上皮
細胞の位置で放射能の局在具合を外部スキャンする。
付される組織は、一部分又は全体部の損傷のない完全体
からなるものであり、これ等に、放射性又は他のエネル
ギー発生要素全付加した抗体を投与し、がん性成路上皮
細胞の位置で放射能の局在具合を外部スキャンする。
本発明はまた、患者の膀胱腫瘍の治療を可能２１−
にするものであって、がん性の転移性上皮細胞の細胞抗
原、好しくけ細胞分化抗原、を患者に対しがん性細胞の
増大又は増殖を阻害する有効量投与する。この方法の好
しい実施態様に於ては、前記抗原に、がん細胞の破壊を
もたらす潜在的組織破壊剤を付加する。該組織破壊剤の
例としては、ワクチン、放射性核種、トキシン、起働質
を凝固せしめる補助賦活剤等を包含する化学的毒性剤、
化学的治療剤がある。
原、好しくけ細胞分化抗原、を患者に対しがん性細胞の
増大又は増殖を阻害する有効量投与する。この方法の好
しい実施態様に於ては、前記抗原に、がん細胞の破壊を
もたらす潜在的組織破壊剤を付加する。該組織破壊剤の
例としては、ワクチン、放射性核種、トキシン、起働質
を凝固せしめる補助賦活剤等を包含する化学的毒性剤、
化学的治療剤がある。
以下に実施例をあげて本願発明を更に詳しく説明するが
、それ等実施例は本発明の具体的内容の例示であって、
それ等実施例に本発明の範囲が限定されるものでは々い
。
、それ等実施例は本発明の具体的内容の例示であって、
それ等実施例に本発明の範囲が限定されるものでは々い
。
抗体例、及び認識される抗原例
以下Ｋ１１ｌｌ！載する例は、それ昏倒、とりわけここ
に記載するハイブリドーマ、モノクローナル抗体及び細
胞系についての実質的機能同等物については、それ等に
限定するというものではなく、本発明を例示的に説明す
るためのものである。
に記載するハイブリドーマ、モノクローナル抗体及び細
胞系についての実質的機能同等物については、それ等に
限定するというものではなく、本発明を例示的に説明す
るためのものである。
２２−
因みにｍＡｂについては、記述のｍＡｂと実質的に類似
するものが本明細書に記載の本発明の方法に従えば調製
することができる。
するものが本明細書に記載の本発明の方法に従えば調製
することができる。
このシリーズで産生ずる前述のマウス−モノクローナル
抗体は、２５３−Ｊ膀胱がん細胞（ＡｂＪ１４３及びＡ
ｂＪ２３３）でか又は４８６−ＰａＪｌｍ（ＡｂＪＰ１
６５）とのコンビネーションでの免疫物又はＴ２４細胞
（Ａｂｓ Ｔ１６ 、 Ｔ２３ 。
抗体は、２５３−Ｊ膀胱がん細胞（ＡｂＪ１４３及びＡ
ｂＪ２３３）でか又は４８６−ＰａＪｌｍ（ＡｂＪＰ１
６５）とのコンビネーションでの免疫物又はＴ２４細胞
（Ａｂｓ Ｔ１６ 、 Ｔ２３ 。
Ｔ４３ 、Ｔ８７ 、Ｔｌ０Ｉ 、Ｔｌｌ０ 、Ｔ１３
８ ）での免疫細胞から誘導した。Ｍａｂ ０ｍ５及
びＭａｂＯｍ３７は免疫細胞から誘導し、最初のスクリ
ーニングは未培養膀胱乳頭腫で行った。
８ ）での免疫細胞から誘導した。Ｍａｂ ０ｍ５及
びＭａｂＯｍ３７は免疫細胞から誘導し、最初のスクリ
ーニングは未培養膀胱乳頭腫で行った。
抗体特異性は、７５の株化ヒト細胞系、及び線維芽細胞
と腎臓皮下細胞の短−期培養物の、Ｒネル上での直接試
験及び／又は吸収試験（表■及びＩＡ、また表■参照）
と、５０の正常胎児及び成人組織（表■及びＨＡ参照）
及び４３の腫瘍標本（表■及び■Ａ参照）の免疫けい光
分析とにより判定した。これ等の抗体により検出される
抗原については、以下の例に示すようにして行われる免
疫沈降試験によりそれ等の特異性を明らかにした。
と腎臓皮下細胞の短−期培養物の、Ｒネル上での直接試
験及び／又は吸収試験（表■及びＩＡ、また表■参照）
と、５０の正常胎児及び成人組織（表■及びＨＡ参照）
及び４３の腫瘍標本（表■及び■Ａ参照）の免疫けい光
分析とにより判定した。これ等の抗体により検出される
抗原については、以下の例に示すようにして行われる免
疫沈降試験によりそれ等の特異性を明らかにした。
即ち、
オートラジオグラム（ａｕｔｏｒａｄｉｏｇｒａｍ ）
ｋ、膀胱がんの細胞表面抗原を検出するマウス−モノ
クローナル抗体により免疫沈降させたＴ−２４膀胱がん
細胞の溶解質（１ｙｓａｔｅｓ ）からの〔３Ｈ〕グル
コサミン−ラベル化グリコプロティンで作成し、ＮａＤ
ｏ ｄ Ｓｏ、／ポリアクリルアミド ゲル電気泳動に
より分析した。（細化試料使用）トラック（Ｔｒａｃｋ
ｓ ） ： ａ ｎ １１ ／ ｎ Ｌｌ マウス血清（コント
ロール）ｂ ＡｂＴ１３８ ｃ ＡｂＴ１６ ｄ ＡｂＴ８７ ｅ ＡｂＴ４３ ｆ Ａｂ Ｊ １４３ ｇ ＡｂＴｌｌｏ 分子量マーカー（キロダルトン）： ミオジン（２００）、β−ガラクトシダーゼ（１２０）
、ホスホリラーゼ（９８）、ラレ血清アルブミン（６８
）、卵アルブミン（４３）、コンカナバリンＡ（２６）
。
ｋ、膀胱がんの細胞表面抗原を検出するマウス−モノ
クローナル抗体により免疫沈降させたＴ−２４膀胱がん
細胞の溶解質（１ｙｓａｔｅｓ ）からの〔３Ｈ〕グル
コサミン−ラベル化グリコプロティンで作成し、ＮａＤ
ｏ ｄ Ｓｏ、／ポリアクリルアミド ゲル電気泳動に
より分析した。（細化試料使用）トラック（Ｔｒａｃｋ
ｓ ） ： ａ ｎ １１ ／ ｎ Ｌｌ マウス血清（コント
ロール）ｂ ＡｂＴ１３８ ｃ ＡｂＴ１６ ｄ ＡｂＴ８７ ｅ ＡｂＴ４３ ｆ Ａｂ Ｊ １４３ ｇ ＡｂＴｌｌｏ 分子量マーカー（キロダルトン）： ミオジン（２００）、β−ガラクトシダーゼ（１２０）
、ホスホリラーゼ（９８）、ラレ血清アルブミン（６８
）、卵アルブミン（４３）、コンカナバリンＡ（２６）
。
吸収分析は、表■に示したようにＭａ ｂ ＯＭ ５
。
。
’ｌ”１６及びＴ４３について行った。
以下は、モノクローナル抗体の尚該パネルにより明らか
にされた１１の抗原システムについての説明である。
にされた１１の抗原システムについての説明である。
いずれも、Ａ、Ｂ、Ｏ又はメイラミニダーゼ−処理０（
Ｔ−抗原）ヒト赤血球での血球凝集及び吸収試験による
か、又はｆｉｉ／製血液型クリコブロチイン（抗原、Ａ
、Ｂ、Ｈ，Ｉ、Ｌｅ”。
Ｔ−抗原）ヒト赤血球での血球凝集及び吸収試験による
か、又はｆｉｉ／製血液型クリコブロチイン（抗原、Ａ
、Ｂ、Ｈ，Ｉ、Ｌｅ”。
Ｌｅｂ、 Ｘ及びＹ）での固相ＥＬＩＳＡ検定により同
定したＡ 、 Ｂ 、 Ｈ／Ｉ又はルイス血液型抗原に
は関係しない。
定したＡ 、 Ｂ 、 Ｈ／Ｉ又はルイス血液型抗原に
は関係しない。
実施例１ ０ｍ５抗原系
ｍＡｂ Ｏｍ ５とｍＡｂ Ｏｎ ３７の反応性パター
ンは一致しており、このことは同一抗原の確認を示唆す
るものである。培養細胞における試験では、Ｏｍ＋だけ
の細胞型は１８の膀胱腫瘍のうちの４２５一 つ、ＳＫ−ＭＥＬ−２８およびＣＡＤＡＮ−２であった
。
ンは一致しており、このことは同一抗原の確認を示唆す
るものである。培養細胞における試験では、Ｏｍ＋だけ
の細胞型は１８の膀胱腫瘍のうちの４２５一 つ、ＳＫ−ＭＥＬ−２８およびＣＡＤＡＮ−２であった
。
正常胎児組織および正常成人組織（正常な尿路上皮を含
む）についての免疫螢光試験は０ｍ反応性を示さなかっ
た。しかしながら、１ｏの膀胱腫瘍のうちの４つはｍＡ
ｂ Ｏｍ ５と強く反応し、該０ｍ５＋腫瘍のそれぞれ
は乳頭状形態を有していた。ｍＡｂｏｍ５で検出された
抗原は熱−不安定（１００℃５分間）であり、プロナー
ゼ（Ｐｒｏｎａｓｅ ）又はトリプミン感受性であり、
このことは、蛋白質であることを示唆しているが、ｍＡ
ｂ Ｏｍ ５およびｍＡｂ Ｏｍ ３７のいずれも、〔
Ｈ〕グルコサミン、〔３５Ｓ〕メチオニン又は１２５Ｉ
でラベルされたＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞の抽出物または
免疫乳頭腫の 工でラベルされた抽出物から、検出し
うる成分を免疫沈降しなかった。
む）についての免疫螢光試験は０ｍ反応性を示さなかっ
た。しかしながら、１ｏの膀胱腫瘍のうちの４つはｍＡ
ｂ Ｏｍ ５と強く反応し、該０ｍ５＋腫瘍のそれぞれ
は乳頭状形態を有していた。ｍＡｂｏｍ５で検出された
抗原は熱−不安定（１００℃５分間）であり、プロナー
ゼ（Ｐｒｏｎａｓｅ ）又はトリプミン感受性であり、
このことは、蛋白質であることを示唆しているが、ｍＡ
ｂ Ｏｍ ５およびｍＡｂ Ｏｍ ３７のいずれも、〔
Ｈ〕グルコサミン、〔３５Ｓ〕メチオニン又は１２５Ｉ
でラベルされたＳＫ−ＭＥＬ−２８細胞の抽出物または
免疫乳頭腫の 工でラベルされた抽出物から、検出し
うる成分を免疫沈降しなかった。
Ｔ１６抗原系
ｍＡｂ Ｔ １６は、還元および非還元の両条件のもと
で、〔Ｈ〕グルコサミンでラベルされたＴ２４溶解物か
らＭｒ８４８，０００および４２，０００のグリコプロ
ティン複合体を免疫沈降した。こ２６− の抗原は、殆どの膀胱がん細胞および乳がん細胞によっ
て強く表置されたが、メラノーマ、星状細胞腫、又は腎
臓がん細胞によっては表置されなかった。これに反して
、９／１２正常腎臓からの上皮培養物はＴ１６４であっ
た。胎児組織および成人組織においては、Ｔ１６は腎臓
の遠心細管および集合細管（ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｔ
ｕｂｌｅｓ ）の上皮細胞、尿路上皮、前立腺、孔管、
および皮１角、子宮頸管外部および食道の重層上皮上に
検出された。培養細胞におけるＴ１６の表徴Ａターンと
一致して、膀胱および乳がん標本はＴ１６＋であった。
で、〔Ｈ〕グルコサミンでラベルされたＴ２４溶解物か
らＭｒ８４８，０００および４２，０００のグリコプロ
ティン複合体を免疫沈降した。こ２６− の抗原は、殆どの膀胱がん細胞および乳がん細胞によっ
て強く表置されたが、メラノーマ、星状細胞腫、又は腎
臓がん細胞によっては表置されなかった。これに反して
、９／１２正常腎臓からの上皮培養物はＴ１６４であっ
た。胎児組織および成人組織においては、Ｔ１６は腎臓
の遠心細管および集合細管（ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｇ ｔ
ｕｂｌｅｓ ）の上皮細胞、尿路上皮、前立腺、孔管、
および皮１角、子宮頸管外部および食道の重層上皮上に
検出された。培養細胞におけるＴ１６の表徴Ａターンと
一致して、膀胱および乳がん標本はＴ１６＋であった。
Ｔ８７抗原系
ｍＡｂ Ｔ ８７はＭｒ ６０，０００のグリコプロテ
ィンを免疫沈降した。Ｔ８７抗原は、はとんどの培養細
胞型によって表置された。泌尿管系の正常組織において
は、ｍＡｂ Ｔ ８７は重層上皮と反応しなかったが、
一方、乳腺房、子宮内膜、甲状腺、結腸および胎児胸腺
細胞とは反応した。腎臓がん以外のほとんどのヒトのが
んはＴ８７＋であった。神経外胚葉起源の腫瘍（メラノ
ーマ、星状細胞腫）は、これらの腫瘍の培養系がＴ８７
を強度に表置したにもかかわらず、Ｔ８７−であった。
ィンを免疫沈降した。Ｔ８７抗原は、はとんどの培養細
胞型によって表置された。泌尿管系の正常組織において
は、ｍＡｂ Ｔ ８７は重層上皮と反応しなかったが、
一方、乳腺房、子宮内膜、甲状腺、結腸および胎児胸腺
細胞とは反応した。腎臓がん以外のほとんどのヒトのが
んはＴ８７＋であった。神経外胚葉起源の腫瘍（メラノ
ーマ、星状細胞腫）は、これらの腫瘍の培養系がＴ８７
を強度に表置したにもかかわらず、Ｔ８７−であった。
Ｊ１４３抗原系
ｍＡｂ Ｊ １４３は１４０．１２０および３０ＫＤの
グリコプロティン複合体を確認した。すでに報告されて
いるモノクローナル抗体であるｍＡｂＡＪ２（： Ｍａ
ｔｔｅｓ ｅｔａｌ、 、 Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ （発
表済）〕 もまた該複合体を検出する。Ｊ１４３はリン
パ芽細胞以外の実質的にすべての培養細胞上に強く表置
された。しかしカがら、Ｊ１４３の正常成人組織および
正常胎児組織における分布は、腎臓糸球、甲状小膝の基
礎膜、および尿路上皮、皮膚および食道の基底細胞層に
限定された。その他の上皮腫瘍と同じように、すべての
膀胱腫瘍はＪ１４３を表置した。ｍＡｂ ８７ におい
て見い出されるのと同様に、培養腎臓がん、メラノーマ
および星状細胞腫は５１４３を表置したが、一方、これ
らのがんの非培養標本は５１４３陰性であつた。
グリコプロティン複合体を確認した。すでに報告されて
いるモノクローナル抗体であるｍＡｂＡＪ２（： Ｍａ
ｔｔｅｓ ｅｔａｌ、 、 Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ （発
表済）〕 もまた該複合体を検出する。Ｊ１４３はリン
パ芽細胞以外の実質的にすべての培養細胞上に強く表置
された。しかしカがら、Ｊ１４３の正常成人組織および
正常胎児組織における分布は、腎臓糸球、甲状小膝の基
礎膜、および尿路上皮、皮膚および食道の基底細胞層に
限定された。その他の上皮腫瘍と同じように、すべての
膀胱腫瘍はＪ１４３を表置した。ｍＡｂ ８７ におい
て見い出されるのと同様に、培養腎臓がん、メラノーマ
および星状細胞腫は５１４３を表置したが、一方、これ
らのがんの非培養標本は５１４３陰性であつた。
Ｔ４３抗原系
ｍＡｂ Ｔ ４３はＭｒ ８５，０００のグリコプロテ
ィンを免疫沈降した。Ｔ４３は腺維芽細胞以外のほとん
どの培養細胞型に広く分布した。正常ｍ織においては、
Ｔ４３は、腎臓の隣接細管と、皮膚、子宮頸管外部およ
び食道の基底細胞層にのみ見い出された。成人又は胎児
の正常尿路上皮はＴ４３陰性であった。膀胱腫瘍および
腎臓腫瘍のサブセットはＴ４３＋であった。乳がん、肺
がんおよび結腸がんの表現型がＴ４３＋であるのに対し
、これらの臓器の良性腫瘍はＴ４３陰性であった。
ィンを免疫沈降した。Ｔ４３は腺維芽細胞以外のほとん
どの培養細胞型に広く分布した。正常ｍ織においては、
Ｔ４３は、腎臓の隣接細管と、皮膚、子宮頸管外部およ
び食道の基底細胞層にのみ見い出された。成人又は胎児
の正常尿路上皮はＴ４３陰性であった。膀胱腫瘍および
腎臓腫瘍のサブセットはＴ４３＋であった。乳がん、肺
がんおよび結腸がんの表現型がＴ４３＋であるのに対し
、これらの臓器の良性腫瘍はＴ４３陰性であった。
該抗原は培養細胞型の限られたいくつかによって表置さ
れた。正常組織の場合、Ｔ２３は尿路上皮またはその他
の上皮細胞上に検出されなかったが、星状細胞上、メラ
ニン色素細胞上、腺維芽細胞上、平滑筋上、軟骨上、お
よび末梢血管、肺臓、リッツ１１節および胸腺髄の成熟
’ｌ’ ＩＪ２９− ンパ球上に見い出された。ｒｎＡｂＴ２３ は、膀胱
がんおよび腎臓がんのサブセットを認識し、また、いく
つかのその他の腫瘍型と反応もした。
れた。正常組織の場合、Ｔ２３は尿路上皮またはその他
の上皮細胞上に検出されなかったが、星状細胞上、メラ
ニン色素細胞上、腺維芽細胞上、平滑筋上、軟骨上、お
よび末梢血管、肺臓、リッツ１１節および胸腺髄の成熟
’ｌ’ ＩＪ２９− ンパ球上に見い出された。ｒｎＡｂＴ２３ は、膀胱
がんおよび腎臓がんのサブセットを認識し、また、いく
つかのその他の腫瘍型と反応もした。
Ｔ２３は、神経代胚葉腫瘍標本により表置された、この
シリーズの中のただ１つの抗原である。
シリーズの中のただ１つの抗原である。
ｍＡｂ Ｔ ２３ は、〔３Ｈ〕グルコサミン、（３
５ｓ〕メチオニン又は１２５■でラベルされた細胞溶解
物から免疫沈降され得なかった熱−不安定決定因子を認
識した。
５ｓ〕メチオニン又は１２５■でラベルされた細胞溶解
物から免疫沈降され得なかった熱−不安定決定因子を認
識した。
Ｔ１３８抗原系
ｍＡｂ Ｔ １３８はＭｒ ２５，０００のグリコプロ
ティンを免疫沈降した。Ｔ１３８は一連の腫瘍細胞系お
よび培養腎臓上皮によって表置された。しかしながら、
正常成人組織または正常胎児組織においては、ｍＡｂＴ
１３８との反応は内皮細胞に限られていた。膀胱かん標
本のサブセットはＴ１３８を表置した。３３の非−膀胱
がん標本のうち、Ｔｉ２Ｂ表徴は、１つの肉腫、２つの
肺がんの細胞のサブ個体群（５ｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏ
ｎｓ ） 、および２つの乳腫瘍ののり胞領域の内股細
胞に限３０− られている。
ティンを免疫沈降した。Ｔ１３８は一連の腫瘍細胞系お
よび培養腎臓上皮によって表置された。しかしながら、
正常成人組織または正常胎児組織においては、ｍＡｂＴ
１３８との反応は内皮細胞に限られていた。膀胱かん標
本のサブセットはＴ１３８を表置した。３３の非−膀胱
がん標本のうち、Ｔｉ２Ｂ表徴は、１つの肉腫、２つの
肺がんの細胞のサブ個体群（５ｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏ
ｎｓ ） 、および２つの乳腫瘍ののり胞領域の内股細
胞に限３０− られている。
ｍＡｂ Ｔ １１０はＭｒ２４０，０００のグリコプロ
ティンを免疫沈降した。培養細胞はＴ１１０の低度な表
面表置を示した。しかしながら、各種の培養された正常
細胞および腫瘍性細胞に使用した培地は茜いレベルのＴ
１１０抗原を有していることが、同相免疫検定によって
証明された。
ティンを免疫沈降した。培養細胞はＴ１１０の低度な表
面表置を示した。しかしながら、各種の培養された正常
細胞および腫瘍性細胞に使用した培地は茜いレベルのＴ
１１０抗原を有していることが、同相免疫検定によって
証明された。
Ｔ１１０は、試験されたすべての正常および悪性組織の
細胞外基質において原腺維染色として検出された。Ａｂ
Ｔｌｌｏは精製ヒト細胞又は血しようフィブロネクチン
とは反応しないことが、直接結合または阻害検定によっ
て示された。
細胞外基質において原腺維染色として検出された。Ａｂ
Ｔｌｌｏは精製ヒト細胞又は血しようフィブロネクチン
とは反応しないことが、直接結合または阻害検定によっ
て示された。
ＪＰ１６５．Ｊ２３３およびＴ１０１抗原系ｍＡｂＪ２
３３およびＴ１０１は、熱−不安定決定因子を検出した
が、しかしこれらの抗原は放射線ラベルした細胞溶解物
を用いた免疫沈降試験で認識できなかった。しかしなが
ら、それらはそれらの培養細胞、ｅネルについての反応
性パターンにより識別される。ＪＰ１６５．Ｊ２３３ま
たはＴ１０１の表置は正常成人組織又は正常胎児組織に
おいて検出された。ＪＰ１６５ の表置は培養細胞およ
び腫瘍標本の試験において、膀胱がんおよび腎臓かんの
小さなサブセットに本質的に限定された。Ｊ２３３の培
養膀胱細胞系および培養腎臓がん細胞系上での表置に比
較して、Ｊ２３３の表置はこれらおよびその他の＆瘍型
の標本上には見い出されなかった。Ｔｌ０Ｉは培養細胞
上において、ＪＰ１６５およびＪ２３３よりもより広範
に分布していた。しかしながら、腫瘍標本については、
Ｔｌ０Ｉの表徴は膀胱かんのサブセット、各種腺腫およ
び乳がんに限られていた。
３３およびＴ１０１は、熱−不安定決定因子を検出した
が、しかしこれらの抗原は放射線ラベルした細胞溶解物
を用いた免疫沈降試験で認識できなかった。しかしなが
ら、それらはそれらの培養細胞、ｅネルについての反応
性パターンにより識別される。ＪＰ１６５．Ｊ２３３ま
たはＴ１０１の表置は正常成人組織又は正常胎児組織に
おいて検出された。ＪＰ１６５ の表置は培養細胞およ
び腫瘍標本の試験において、膀胱がんおよび腎臓かんの
小さなサブセットに本質的に限定された。Ｊ２３３の培
養膀胱細胞系および培養腎臓がん細胞系上での表置に比
較して、Ｊ２３３の表置はこれらおよびその他の＆瘍型
の標本上には見い出されなかった。Ｔｌ０Ｉは培養細胞
上において、ＪＰ１６５およびＪ２３３よりもより広範
に分布していた。しかしながら、腫瘍標本については、
Ｔｌ０Ｉの表徴は膀胱かんのサブセット、各種腺腫およ
び乳がんに限られていた。
本発明において便用するにつき選択されるモノクローナ
ル抗体は、乳頭肺膜抽出物あるいは２５３Ｊ′Ｊ３よび
Ｔ２４のごとき侵入移行性細胞がんの細胞培養物の細胞
全部によって免疫されたマウスの膵臓細胞から、当該技
術分野においてはよく知られているω合方手法によって
得られるものである。融合過程のためのＮ８／１メラノ
ーマ細胞に対する膵臓細胞の割合は２−５：１である。
ル抗体は、乳頭肺膜抽出物あるいは２５３Ｊ′Ｊ３よび
Ｔ２４のごとき侵入移行性細胞がんの細胞培養物の細胞
全部によって免疫されたマウスの膵臓細胞から、当該技
術分野においてはよく知られているω合方手法によって
得られるものである。融合過程のためのＮ８／１メラノ
ーマ細胞に対する膵臓細胞の割合は２−５：１である。
抗体Ｏｍ５又は０ｍ３７およびＪＰ１６５ を産出・す
るハイブリドーマはＨＡＴではなくてＨＴにおける２−
メルカプトエタノール中で培養された。
るハイブリドーマはＨＡＴではなくてＨＴにおける２−
メルカプトエタノール中で培養された。
すなわち、ＨＡＴはこれらの細胞系のその後のクローニ
ングに用いられた。（Ｈ＝ヒポキサチン。
ングに用いられた。（Ｈ＝ヒポキサチン。
Ａ＝アミノゾテリン、Ｔ＝チミジン） （Ｄｉｐｐｏｌ
ｄ 。
ｄ 。
上述〕
膀胱上皮細胞の％異的細胞抗原を確認することが見い出
されたモノクロナール抗体のグループは、膀胱パネルと
して選ばれる。このパネル及び確認された抗原系は、表
ｔ−Ｖに記載されている。ヒト移行性細胞がんの不均一
性はそこに記述されている。表のデーターは移行性細胞
が３３− んの不均一性を指摘し、明らかにしている。
されたモノクロナール抗体のグループは、膀胱パネルと
して選ばれる。このパネル及び確認された抗原系は、表
ｔ−Ｖに記載されている。ヒト移行性細胞がんの不均一
性はそこに記述されている。表のデーターは移行性細胞
が３３− んの不均一性を指摘し、明らかにしている。
ＴＣＣの１１の識別新規抗原系はこれらのｍｏｂｓによ
って明らかにされ、このことは１８の膀胱がん、５０以
上の非−膀胱がんおよび２０以上の正常ヒト細胞系につ
いての血清学的分析によって決定された（表１．ＩＡお
よびＨ）。免疫病理学的分析は正常成人組織及び正常胎
児組織の凍結区分（表■とＩＡ）および各種腫瘍の凍結
区分（表ＶとＩＶＡ）においてなされた。
って明らかにされ、このことは１８の膀胱がん、５０以
上の非−膀胱がんおよび２０以上の正常ヒト細胞系につ
いての血清学的分析によって決定された（表１．ＩＡお
よびＨ）。免疫病理学的分析は正常成人組織及び正常胎
児組織の凍結区分（表■とＩＡ）および各種腫瘍の凍結
区分（表ＶとＩＶＡ）においてなされた。
一般に０ｍ３７（又は０ｍ３５ ）は低度な乳頗状かん
および乳頭腫、例えば膀胱腫瘍のサブセット８認識する
。それらはＴＣＣの染色では不均一であって、正常尿路
上皮又は侵入ＴＣＣに対しては陰性である。更に、０ｍ
５および０ｍ３７のいずれも、いかなる正常成人組織又
は正常胎児ヒト組織と反応しない。０ｍ３７（又は０ｍ
５）は充分に分化されたＴｏｅ 、例えばヒトＴＣＣの
サブセラトラ認識する。０ｍ５は正常膀胱尿路上皮にお
いても、またいかなるその他の正常ヒト組織又は悪性ヒ
ト組織のいずれにおいても検出されなかった。
および乳頭腫、例えば膀胱腫瘍のサブセット８認識する
。それらはＴＣＣの染色では不均一であって、正常尿路
上皮又は侵入ＴＣＣに対しては陰性である。更に、０ｍ
５および０ｍ３７のいずれも、いかなる正常成人組織又
は正常胎児ヒト組織と反応しない。０ｍ３７（又は０ｍ
５）は充分に分化されたＴｏｅ 、例えばヒトＴＣＣの
サブセラトラ認識する。０ｍ５は正常膀胱尿路上皮にお
いても、またいかなるその他の正常ヒト組織又は悪性ヒ
ト組織のいずれにおいても検出されなかった。
３４−
しかしながらＴ４３はわずかに分化された侵入性ＴＣＣ
を認識し、乳頭腫および正常尿路上皮に対しては陰性で
あった。Ｔ４３は腎臓の隣接細管の正常組織、および食
道、皮膚および子宮頚内膜の基底上皮細胞と反応する。
を認識し、乳頭腫および正常尿路上皮に対しては陰性で
あった。Ｔ４３は腎臓の隣接細管の正常組織、および食
道、皮膚および子宮頚内膜の基底上皮細胞と反応する。
０ｍ３７ （又は０ｍ５）およびＴ４３はＴＯＯの相互
に排他的なサブセットを染色する。
に排他的なサブセットを染色する。
Ｔ１０１およびＪＰ１６５は、正常組織中では検出され
ないところの膀胱がんに対するマーカーのサブセットで
もある。Ｔ１６ 、 Ｔ４３ 、 Ｔ８７およびＪ１４
３ （多くの培養細胞上に表現する抗原）は、正常温尿
管系の特異的領域およびその他の正常細胞型および悪性
細胞型の特徴的範囲に見い出される。例えばＴ１６の表
置は皮膚、頚管外部および食道の多層化上皮に見られる
。Ｔ１３８抗原もまた正常組織系に共通した特徴である
が、該抗原の正常組織区分での表置は内皮細胞に限定さ
れている。これに反して、Ｔｌｌ０は培養細胞には殆ん
ど表示されないが、培養上澄液中では検出される。Ｔ１
１０の正常組織におけるこうした局在は、Ｔｌｌ０が細
胞外基質の複合体であることを説明している。このシリ
ーズのに体によって検出されたすべての決定因子は熱−
不安定であって、ＡＢＨ／Ｉ／ルイス型血液グループ抗
原とは関係していない。この抗体のうちの６つは放射腓
−ラベルされた細胞溶解物からグリコプロティンを免疫
沈降した。すなわち、ｍＡｂＴ１６（ＭｒＳ ４８，４
２ ＫＤ） 、 ｍＡｂＴ８７（Ｍｒ ６０ＫＤ） 。
ないところの膀胱がんに対するマーカーのサブセットで
もある。Ｔ１６ 、 Ｔ４３ 、 Ｔ８７およびＪ１４
３ （多くの培養細胞上に表現する抗原）は、正常温尿
管系の特異的領域およびその他の正常細胞型および悪性
細胞型の特徴的範囲に見い出される。例えばＴ１６の表
置は皮膚、頚管外部および食道の多層化上皮に見られる
。Ｔ１３８抗原もまた正常組織系に共通した特徴である
が、該抗原の正常組織区分での表置は内皮細胞に限定さ
れている。これに反して、Ｔｌｌ０は培養細胞には殆ん
ど表示されないが、培養上澄液中では検出される。Ｔ１
１０の正常組織におけるこうした局在は、Ｔｌｌ０が細
胞外基質の複合体であることを説明している。このシリ
ーズのに体によって検出されたすべての決定因子は熱−
不安定であって、ＡＢＨ／Ｉ／ルイス型血液グループ抗
原とは関係していない。この抗体のうちの６つは放射腓
−ラベルされた細胞溶解物からグリコプロティンを免疫
沈降した。すなわち、ｍＡｂＴ１６（ＭｒＳ ４８，４
２ ＫＤ） 、 ｍＡｂＴ８７（Ｍｒ ６０ＫＤ） 。
ｍＡｂ Ｔ４Ｂ（Ｍｒ ８５ＫＤ）、ｍＡｂ Ｊ１４３
（Ｍｒ １４０，１２０．３＋１ＫＤ）およびｍＡｂ
ＴＩＩＯ（Ｍｒ ２４１１ＫＤ）。
（Ｍｒ １４０，１２０．３＋１ＫＤ）およびｍＡｂ
ＴＩＩＯ（Ｍｒ ２４１１ＫＤ）。
モノクローナル抗体Ｔ２３． Ｊ２３３ 、 ＪＰ１６
！５およびＴ１１０は、高度膀胱かん細胞系のサブセッ
ト上に表置され、また可変的にその他のがん系に表置さ
れるが、生体外および組織区分のいずれの正常細胞にも
表置されないところの抗原を検出するが、組織区分のい
くつかの正常細胞（腺維芽細胞、ある型のリンパ球、メ
ラニン色素細胞および星状細胞）上に表置されるＴ２５
の場合はこの例外である。
！５およびＴ１１０は、高度膀胱かん細胞系のサブセッ
ト上に表置され、また可変的にその他のがん系に表置さ
れるが、生体外および組織区分のいずれの正常細胞にも
表置されないところの抗原を検出するが、組織区分のい
くつかの正常細胞（腺維芽細胞、ある型のリンパ球、メ
ラニン色素細胞および星状細胞）上に表置されるＴ２５
の場合はこの例外である。
Ｔ１６は、正常な尿路上皮上および、高麗に未分化なも
のを除く殆んどすべての移行性腫瘍系上に表置される、
４８ｋｄ−グリコプロティンを確認する。Ｔ８７． Ｊ
１４３およびＴ４３は、異なった臓器における分化分布
でほとんどすべての腫瘍細胞系上に現われるｉｐ複合体
を検出する。Ｔ１３８は内皮細胞およびいくつかの腫瘍
系に表置される２ ５ ｋｄ −ｒｐ抗原と反応し、Ｔ
ｌｌ０は、腫瘍細胞系および正常細胞系の培養物上澄液
中へ入ったプロティンを検出する。
のを除く殆んどすべての移行性腫瘍系上に表置される、
４８ｋｄ−グリコプロティンを確認する。Ｔ８７． Ｊ
１４３およびＴ４３は、異なった臓器における分化分布
でほとんどすべての腫瘍細胞系上に現われるｉｐ複合体
を検出する。Ｔ１３８は内皮細胞およびいくつかの腫瘍
系に表置される２ ５ ｋｄ −ｒｐ抗原と反応し、Ｔ
ｌｌ０は、腫瘍細胞系および正常細胞系の培養物上澄液
中へ入ったプロティンを検出する。
このグリコプロティン抗原の大きさの範囲は、おおよそ
２５ｋｄから約２４０ｋｄ首でである。ＪＰ１６５゜Ｊ
２３３．Ｔ４３．Ｔ８７．Ｊｌ ４３．Ｔｌ １０，０
ｍ５および０ｍ３７はγ１免疫グロゾリン分子であゆ、
これに対し、Ｔ１６はγ、Ｂ、’ｒｉｏｔはｈｌｍそし
てＴ２３トＴ１３８はｍμ免免疫グツゾリンある。
２５ｋｄから約２４０ｋｄ首でである。ＪＰ１６５゜Ｊ
２３３．Ｔ４３．Ｔ８７．Ｊｌ ４３．Ｔｌ １０，０
ｍ５および０ｍ３７はγ１免疫グロゾリン分子であゆ、
これに対し、Ｔ１６はγ、Ｂ、’ｒｉｏｔはｈｌｍそし
てＴ２３トＴ１３８はｍμ免免疫グツゾリンある。
Ｔｌ６．Ｔ８７およびＪ１４３ ｍＡｂは、分子量およ
び正常上皮細胞上での反応性によって識別されうるより
な２ｐ抗原を検出する。この３つ全部は正常上皮細胞と
反応するが％ ＪＩ４３は基底層の細胞とのみ反応する
。Ｊ１４３抗原は充分分化３７− されたＴＣＣの基底層およびより攻撃的ＴＣＣのすべて
の細胞において見い出された。
び正常上皮細胞上での反応性によって識別されうるより
な２ｐ抗原を検出する。この３つ全部は正常上皮細胞と
反応するが％ ＪＩ４３は基底層の細胞とのみ反応する
。Ｊ１４３抗原は充分分化３７− されたＴＣＣの基底層およびより攻撃的ＴＣＣのすべて
の細胞において見い出された。
Ｔ１６およびＴ８７抗原はすべてのＴＯＯ標本に見い出
されたが、いくつかのＴＣＣ標本の殆んど分化されてい
ない領域はＴ１６ （ＩＩＴＣ！０）およびＴ８７ （
ＩＩＩＴＣＯ）に対して陰性であった。転移性ＴＯＯは
０ｍ３７およびＴ１６に対して陰性であるが、Ｔ８７．
Ｊ１４３およびＴ４３に対しては陽性であった。
されたが、いくつかのＴＣＣ標本の殆んど分化されてい
ない領域はＴ１６ （ＩＩＴＣ！０）およびＴ８７ （
ＩＩＩＴＣＯ）に対して陰性であった。転移性ＴＯＯは
０ｍ３７およびＴ１６に対して陰性であるが、Ｔ８７．
Ｊ１４３およびＴ４３に対しては陽性であった。
膀胱の第１期肉腫の１つはＴ１６ 、 Ｔ８７．０ｍ３
７Ｊ１４３およびＴ４３に対する抗原に陰性であった。
７Ｊ１４３およびＴ４３に対する抗原に陰性であった。
このことはＴＯＣパネルの選択性を示唆するものである
。
。
表面抗原の変化は、分化の段階の違いに相応している。
だから、本発明の手法は、膀胱がんに相応した表面抗原
を明らかにするものである。
を明らかにするものである。
培養細胞系の標準パネルは、ヒトのがんの細胞表面抗原
に対するモノクローナル抗体の産出および分析を容易に
してきた。これらの細胞系は、広範な明瞭な分化系統か
らの細胞を意味し、３８− 免疫法ならびに血清学的研究および生化学的研究に比教
的均−な細胞個体群を提供するものである。モノクロー
ナル抗体を産出するための代替手段は、現在ではまだ広
く用いられていないものではあるが、培養細胞よりもむ
しろ新生組懺での直接免疫法である。いくつかの抗原は
生体外では細胞中に殆んど表置されず、もし分析を培養
組織個体群に限定すると、抗原の存在に気かつかないで
あろう。このことは０ｍ抗原を用いる場合に現われ、す
なわち０ｍ抗原は生体外では膀胱がん細胞によって弱く
しか表置されないが、乳頭状膀胱腫瘍の新生標本におい
ては充分に表置される。
に対するモノクローナル抗体の産出および分析を容易に
してきた。これらの細胞系は、広範な明瞭な分化系統か
らの細胞を意味し、３８− 免疫法ならびに血清学的研究および生化学的研究に比教
的均−な細胞個体群を提供するものである。モノクロー
ナル抗体を産出するための代替手段は、現在ではまだ広
く用いられていないものではあるが、培養細胞よりもむ
しろ新生組懺での直接免疫法である。いくつかの抗原は
生体外では細胞中に殆んど表置されず、もし分析を培養
組織個体群に限定すると、抗原の存在に気かつかないで
あろう。このことは０ｍ抗原を用いる場合に現われ、す
なわち０ｍ抗原は生体外では膀胱がん細胞によって弱く
しか表置されないが、乳頭状膀胱腫瘍の新生標本におい
ては充分に表置される。
モノクロナール抗体により確認された新規な抗体の数が
増すにつれて、その抗原を比較し分類するのに鳴動な手
法に対するニーズも増加するであろう。これは、培養細
胞パネル上の表示、正常および悪性組織上の表置パター
ン、生化学的特徴づけ、コード配列の染色体指定等を包
含する数多くの方法でなし得るものであり、そしてこの
極の情報が各々の抗原について役立つようになると、総
括的分類システムが可能であろう。
増すにつれて、その抗原を比較し分類するのに鳴動な手
法に対するニーズも増加するであろう。これは、培養細
胞パネル上の表示、正常および悪性組織上の表置パター
ン、生化学的特徴づけ、コード配列の染色体指定等を包
含する数多くの方法でなし得るものであり、そしてこの
極の情報が各々の抗原について役立つようになると、総
括的分類システムが可能であろう。
培養細胞・ぞネル上での広範な分布、中間的分布または
限定的分布を基にして抗原を識別することは有用である
。本研究において明らかにされた膀胱かんの１１の抗原
系については、腎臓および膀胱がん由来の細胞糸におい
て優位な表置を有しており、そのうちの４つは広範に分
布された抗原（Ｔ８７．Ｊ１４３．Ｔ４３およびＴ１３
８）を意味し、４つは中間的分布を有する抗原（Ｔ１６
゜Ｔ２３．Ｔｌ０ＩおよびＴｌｌ０）であり、残りの３
つは限定的分布を示すもの（０ｍ５．Ｊ２３３およびＪ
Ｐ１６５ ）である。これらの抗原の分析を正常および
腫瘍組織との反応にまで拡大すると、培養細胞内対非培
養細胞内における抗原の表徴を比軟することができ、細
胞パネルに表示されていない細胞型について研究するこ
とができる。
限定的分布を基にして抗原を識別することは有用である
。本研究において明らかにされた膀胱かんの１１の抗原
系については、腎臓および膀胱がん由来の細胞糸におい
て優位な表置を有しており、そのうちの４つは広範に分
布された抗原（Ｔ８７．Ｊ１４３．Ｔ４３およびＴ１３
８）を意味し、４つは中間的分布を有する抗原（Ｔ１６
゜Ｔ２３．Ｔｌ０ＩおよびＴｌｌ０）であり、残りの３
つは限定的分布を示すもの（０ｍ５．Ｊ２３３およびＪ
Ｐ１６５ ）である。これらの抗原の分析を正常および
腫瘍組織との反応にまで拡大すると、培養細胞内対非培
養細胞内における抗原の表徴を比軟することができ、細
胞パネルに表示されていない細胞型について研究するこ
とができる。
いくつかの抗原は、生体外と生体内の表置の間の比較的
直接的相互関係を示めしている。例えげＴ８７． Ｊ１
４３およびＴ４３は培養細胞に広範に表置され、それら
の表置の正常および悪性細胞型の範囲は平行している。
直接的相互関係を示めしている。例えげＴ８７． Ｊ１
４３およびＴ４３は培養細胞に広範に表置され、それら
の表置の正常および悪性細胞型の範囲は平行している。
もう一つの例はＪＰＩ６５であり、これは培養された膀
胱および腎臓がんに限定的分布を示し、この分布・ぞタ
ーンはＪＰ１６５の腫瘍標本における表置と類似してお
り、腫瘍標本における表置は腎臓と膀胱がんのサブセッ
トに限られている。膀胱、腎臓および乳がんにおけるＴ
１．６の表現型もまた培養細胞系と腫瘍標との間の良好
な一致を示している。
胱および腎臓がんに限定的分布を示し、この分布・ぞタ
ーンはＪＰ１６５の腫瘍標本における表置と類似してお
り、腫瘍標本における表置は腎臓と膀胱がんのサブセッ
トに限られている。膀胱、腎臓および乳がんにおけるＴ
１．６の表現型もまた培養細胞系と腫瘍標との間の良好
な一致を示している。
すなわち、膀胱および乳がんはＴ１６＋であり、腎臓が
んけＴ１６−である。
んけＴ１６−である。
培養細胞と組織区分における抗原表置間にはいくつかの
一致しないところがある。Ｔ１０１とＴ１３８は生体外
では多くの細胞型により表置される。正常な胎児および
成人組織においては、Ｔ１０１は検出できず、Ｔ１３８
の表置は内皮細胞に限定されている。腫瘍標本において
は、膀胱がんの場合を除いて、Ｔ１０】とＴ１３８の表
置け、培養細胞による結果から予想される以上にさら４
１− に限定されていた。（これと反対のパターン、例えば生
体外では限定された分布であり、生体内では広範な分布
であるようなものは、これまでには見い出されていない
。）加えて、数多くの例が見い出されており、腎臓がん
の場合には特に明白であって（例えばＪ１４３．Ｔ１３
Ｂを参照。）、この場合、培養がん細胞は抗原を表置し
たのに対し、それに相応する腫瘍型の標本は表置しなか
った。こうした一致し々いところの理由は、抗原表置に
増殖に関係しており、それ故に急速に増殖する培養細胞
においてはこれらの抗原のより亮度なレベルが予想され
るということで説明できる。
一致しないところがある。Ｔ１０１とＴ１３８は生体外
では多くの細胞型により表置される。正常な胎児および
成人組織においては、Ｔ１０１は検出できず、Ｔ１３８
の表置は内皮細胞に限定されている。腫瘍標本において
は、膀胱がんの場合を除いて、Ｔ１０】とＴ１３８の表
置け、培養細胞による結果から予想される以上にさら４
１− に限定されていた。（これと反対のパターン、例えば生
体外では限定された分布であり、生体内では広範な分布
であるようなものは、これまでには見い出されていない
。）加えて、数多くの例が見い出されており、腎臓がん
の場合には特に明白であって（例えばＪ１４３．Ｔ１３
Ｂを参照。）、この場合、培養がん細胞は抗原を表置し
たのに対し、それに相応する腫瘍型の標本は表置しなか
った。こうした一致し々いところの理由は、抗原表置に
増殖に関係しており、それ故に急速に増殖する培養細胞
においてはこれらの抗原のより亮度なレベルが予想され
るということで説明できる。
本研究で明らかにされた数多くの抗原は、生体外および
生体内での膀胱かんで見い出されたが、正常な膀胱尿路
上皮には検出されなかった。
生体内での膀胱かんで見い出されたが、正常な膀胱尿路
上皮には検出されなかった。
対抗する正常組織に関する明瞭な“腫瘍特異性″を示す
これらの例のほとんどの場合、その抗原は他の正常組織
には見出されている。しかしながら、生体外及び生体内
において膀胱かんで検４２− 出された２つの抗原、すなわち０ｍ５（０ｍ３７）とＪ
２３３が、正常な起源の培養細胞によって、または正常
な成人または胎児の組織によって表置されることはいま
までには見い出されてい々い。
これらの例のほとんどの場合、その抗原は他の正常組織
には見出されている。しかしながら、生体外及び生体内
において膀胱かんで検４２− 出された２つの抗原、すなわち０ｍ５（０ｍ３７）とＪ
２３３が、正常な起源の培養細胞によって、または正常
な成人または胎児の組織によって表置されることはいま
までには見い出されてい々い。
細胞表面抗原を検出するモノクローナル抗体においてし
ばしば見られることは、組織学的に類似した腫瘍型に由
来する細胞系の間に観察される不均一性である。造血性
腫瘍［Ｆｏｏｎ ｅｔ ａｌ、／。
ばしば見られることは、組織学的に類似した腫瘍型に由
来する細胞系の間に観察される不均一性である。造血性
腫瘍［Ｆｏｏｎ ｅｔ ａｌ、／。
Ｂｌｏｏｄ、 ６０１−１９（１９８２）〕およびメラ
ノーマ［Ｈｏｕｇｈｔｏｎｅｔａ４． Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍ
ｅｄ、 ］５６１７５５−１７６６（１９８２） ）
の場合であって、これがほとんど全体にわたって発見さ
れるものについては、腫傷の表面表現型の差異は、腫瘍
が分化の初期、中期および後期を通じて進行するが故に
、正常細胞の表面抗原において相応した差異をもたらす
ところとなる。腫瘍サブセットはこれらの表面マーカー
を基にして明らかにすることができ、腫瘍の生物学的挙
動に関係するこれらの表面マーカーは大きな興味のもた
れる点であるーこの研兜において産出されたモノクロー
ナル抗体については、膀胱がん系と膀胱がん標本もまた
、明瞭なサブセット中に配置することができる。
ノーマ［Ｈｏｕｇｈｔｏｎｅｔａ４． Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍ
ｅｄ、 ］５６１７５５−１７６６（１９８２） ）
の場合であって、これがほとんど全体にわたって発見さ
れるものについては、腫傷の表面表現型の差異は、腫瘍
が分化の初期、中期および後期を通じて進行するが故に
、正常細胞の表面抗原において相応した差異をもたらす
ところとなる。腫瘍サブセットはこれらの表面マーカー
を基にして明らかにすることができ、腫瘍の生物学的挙
動に関係するこれらの表面マーカーは大きな興味のもた
れる点であるーこの研兜において産出されたモノクロー
ナル抗体については、膀胱がん系と膀胱がん標本もまた
、明瞭なサブセット中に配置することができる。
蛸、在のところの解釈ば、０ｍ５と０ｍ３７け膀胱腫瘍
の低度な悪性を認識し、一方、Ｔ２３． Ｔ４３および
Ｔｌ３Ｂはより攻撃的腫瘍を特徴づけるということであ
る。こうして膀胱の悪性の分化診断のための方法が本発
明により可能になった。
の低度な悪性を認識し、一方、Ｔ２３． Ｔ４３および
Ｔｌ３Ｂはより攻撃的腫瘍を特徴づけるということであ
る。こうして膀胱の悪性の分化診断のための方法が本発
明により可能になった。
以下のハイプリドーマは、次のように２各ハイゾｌ 旨
によって産出されるｍＡｂに対応した符号をつけて、Ｓ
ｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｌｎｇ Ｉｎ５ｔｉｔｎｔｅ
ｆｏｒＣａｎｃｅｒ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 １２７５
Ｙｏｒｋ Ａｖｅｎｕｅ、 Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、 Ｎ、
Ｙ。
によって産出されるｍＡｂに対応した符号をつけて、Ｓ
ｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｌｎｇ Ｉｎ５ｔｉｔｎｔｅ
ｆｏｒＣａｎｃｅｒ Ｒｅ５ｅａｒｃｈ、 １２７５
Ｙｏｒｋ Ａｖｅｎｕｅ、 Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、 Ｎ、
Ｙ。
１００２］に寄託維持されている。
Ｔ１６．ＪＰ１６５．Ｊ２３３．Ｔ２３．Ｔｌ０Ｉ、Ｔ
４３゜Ｔ８７．Ｊ１４３．Ｔ１３８．Ｔｌｌ０，０ｍ３
７および０ｍ５上記ハイブリドーマ系は、上記Ｓ ｌｏ
ａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇの符号に対応して一以下に示
すＡＴＯＯ寄記査号もってＴｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｔｙｐｅ Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ、１
２３０Ｐａｒｋｌａｗｎ １）ｒｉｖｅ、 Ｒｏｃｋｖ
［ＩＩｅ、 Ｍａｒｙｌａｎｄ ２０８５２に寄託され
ている。
４３゜Ｔ８７．Ｊ１４３．Ｔ１３８．Ｔｌｌ０，０ｍ３
７および０ｍ５上記ハイブリドーマ系は、上記Ｓ ｌｏ
ａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇの符号に対応して一以下に示
すＡＴＯＯ寄記査号もってＴｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｔｙｐｅ Ｃｕ１ｔｕｒｅ Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ、１
２３０Ｐａｒｋｌａｗｎ １）ｒｉｖｅ、 Ｒｏｃｋｖ
［ＩＩｅ、 Ｍａｒｙｌａｎｄ ２０８５２に寄託され
ている。
Ｓｌｏａｎ−Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ 対応するＡＴＯ
Ｏ寄託ＪＰ１ｆｉ５ ＨＢ８２８
０Ｔ １６ ＨＢ８２７９Ｊ
２３３ ＨＢ８２７２Ｔ
２３ ＨＢ８２７］Ｔ １０
１ ＨＢ８２７３Ｔ ４３
ＨＢ８２７５Ｔ ８７
ＨＢ８２７４Ｊ １４３
ＨＢ８２７６Ｔ １３８ 、
ＨＢ８２７７Ｔ １１０
ＨＢ８２７８０ｍ３７１１Ｂ８２３３ ０ｍ ５ ＨＢ８２７０４
５− 表Ｉの股間 ラビット抗−マウスＩＰと結合したヒト血液細胞とのロ
ゼツト形成による、膀胱パネルモノクローナル抗体の、
各種組織の腫瘍細胞系との血清学的反応（Ｄ ： ｐｐ
ｏｌｄ ら、上述）０−反応なし ２＝抗体上澄液の１０，０００倍以下の希釈で反応 ３＝抗体上澄液の１０，０００倍以上の希釈で反応 上記試験による反応がない場合は、吸収試験を行なった
。抗体がロゼツト形成においては陰性であるが試験抗原
系において吸収があった場合は、次のように陽反応と見
なした。
Ｏ寄託ＪＰ１ｆｉ５ ＨＢ８２８
０Ｔ １６ ＨＢ８２７９Ｊ
２３３ ＨＢ８２７２Ｔ
２３ ＨＢ８２７］Ｔ １０
１ ＨＢ８２７３Ｔ ４３
ＨＢ８２７５Ｔ ８７
ＨＢ８２７４Ｊ １４３
ＨＢ８２７６Ｔ １３８ 、
ＨＢ８２７７Ｔ １１０
ＨＢ８２７８０ｍ３７１１Ｂ８２３３ ０ｍ ５ ＨＢ８２７０４
５− 表Ｉの股間 ラビット抗−マウスＩＰと結合したヒト血液細胞とのロ
ゼツト形成による、膀胱パネルモノクローナル抗体の、
各種組織の腫瘍細胞系との血清学的反応（Ｄ ： ｐｐ
ｏｌｄ ら、上述）０−反応なし ２＝抗体上澄液の１０，０００倍以下の希釈で反応 ３＝抗体上澄液の１０，０００倍以上の希釈で反応 上記試験による反応がない場合は、吸収試験を行なった
。抗体がロゼツト形成においては陰性であるが試験抗原
系において吸収があった場合は、次のように陽反応と見
なした。
１＝ロゼツト形成試験は陰性であるが、吸収試験による
反応はあり。
反応はあり。
例えば、ロゼツト形成試験が０のものはさらに吸収試験
を行かう。それ故、この表で０は吸収およびロゼツト形
成のいずれもにも反応なしな表わす。
を行かう。それ故、この表で０は吸収およびロゼツト形
成のいずれもにも反応なしな表わす。
５０−
２７０−
４９−
特開昭５９−２０５３２７ （１７）
ＯＯＣ・ ｂ
Ｏ■ ■ 〜 ■ ○ ［Ｆ］
０００ 〜 ｂ Φ ｂ
・ ８ Ｑ ラ ［有］ ［株］ ■■００
・［株］魯Ｏ 特開臼ｆｆ５９−２０５３２７ （１Ｂ）○ ○
ＯＣ ○ ○ ’Ｃ）’Ｃ１ ｌ ′Ｏ・ ・ ■ ｉＩ Ｏ・ ２７２− 場 １ ・ ・ ＊ｅ ’Ｃ１？：） ）′ＯΦ ○ −ｓ’ｏ ｂ ・ ＯＯ○ ○ 特開口Ｈ５９−２０５３２７（１９） ○ ○ ■ ｂ ○ −０−０ ００’ｏ −。
・［株］魯Ｏ 特開臼ｆｆ５９−２０５３２７ （１Ｂ）○ ○
ＯＣ ○ ○ ’Ｃ）’Ｃ１ ｌ ′Ｏ・ ・ ■ ｉＩ Ｏ・ ２７２− 場 １ ・ ・ ＊ｅ ’Ｃ１？：） ）′ＯΦ ○ −ｓ’ｏ ｂ ・ ＯＯ○ ○ 特開口Ｈ５９−２０５３２７（１９） ○ ○ ■ ｂ ○ −０−０ ００’ｏ −。
０ −０ −０
０ −Ｏ−Ｃ
○ ○ ■ ○
ｏ ｏ −ｏ 。
○ ’ｏ −ｃ
○ ０ ０ −０
ｏ ｏ ’Ｃ）−。
○ Ｏ○
○ Ｏｂ ｂ
○ ○ −００
凸 ４ｈ 偽ＩＪ
Ｗ −１Ｏ
Ｉａ 番 ００ ９ ０ ０ ■ ｂ ○ ８ ′０１ ♂ ・ ｅ ） １ ０ ＠ ） ○ ○ ）） Ｏ＠ ０ ０ ｂ Ｏ○ 二 円 賀 特開昭５９−２ｔ１５３２７ （２０）、１ 表Ｈの説明 膀胱パネルモノクローナル抗体の正常ヒト細胞系との面
清学的反応、ψが吸収試験のみを行なった場曾に反応が
ないことを示す以外は表１と同じ （以下余白） ５６− ２７６− 表１の説明 間接免疫蛍光による、凍結区分における胎児および成人
正常ヒト組織との、膀胱パネルモノクローナル抗体の免
疫病理学的反応−一反応なし ±＝組織内での不均一反応 ＋＝組織内での均−反応 例えば、不均一反応は、正常尿路上皮の基底上皮細胞と
のみ反応するｍＡｂＪ１４３に見い出される。
Ｗ −１Ｏ
Ｉａ 番 ００ ９ ０ ０ ■ ｂ ○ ８ ′０１ ♂ ・ ｅ ） １ ０ ＠ ） ○ ○ ）） Ｏ＠ ０ ０ ｂ Ｏ○ 二 円 賀 特開昭５９−２ｔ１５３２７ （２０）、１ 表Ｈの説明 膀胱パネルモノクローナル抗体の正常ヒト細胞系との面
清学的反応、ψが吸収試験のみを行なった場曾に反応が
ないことを示す以外は表１と同じ （以下余白） ５６− ２７６− 表１の説明 間接免疫蛍光による、凍結区分における胎児および成人
正常ヒト組織との、膀胱パネルモノクローナル抗体の免
疫病理学的反応−一反応なし ±＝組織内での不均一反応 ＋＝組織内での均−反応 例えば、不均一反応は、正常尿路上皮の基底上皮細胞と
のみ反応するｍＡｂＪ１４３に見い出される。
（以下余白）
６２−
２８２−
傘１４周胎児から入手した胎児組織
組織区分とのモノクローナル抗体の反応性は次のような
記号で表わす。
記号で表わす。
○、免疫蛍光なし；・、免疫蛍光あシ；Ｑ、１２蛍光の
不均一なノソターン ＋、基底細胞層についてのみ陽性 （以下余白） ６４− ２８４− ａ＝よく分化した鱗状がんの領域のみ ｂ−不均−反応一細胞のサブ個体群についてのみ陽性 Ｃ＝のり胞領域の内膜上でのみ陽性 ｄ ＝ Ｔ １１０モノクロ一ナル抗体はすべての腫瘍
の間質組織において、種々の強度で陽性であった。
不均一なノソターン ＋、基底細胞層についてのみ陽性 （以下余白） ６４− ２８４− ａ＝よく分化した鱗状がんの領域のみ ｂ−不均−反応一細胞のサブ個体群についてのみ陽性 Ｃ＝のり胞領域の内膜上でのみ陽性 ｄ ＝ Ｔ １１０モノクロ一ナル抗体はすべての腫瘍
の間質組織において、種々の強度で陽性であった。
表■の説明
間接免疫蛍光による、膀胱、ｅネルモノクローナル抗体
の、凍結区分のヒトがん組織との免疫病理学反応 ｍＡｂ ｓＯ下に記載された数は、間接免疫蛍光で陽反
応を示す与えられたタイプのヒト腫瘍標本の数を表わす
。試験腫瘍の数は、かっこ書きしである。
の、凍結区分のヒトがん組織との免疫病理学反応 ｍＡｂ ｓＯ下に記載された数は、間接免疫蛍光で陽反
応を示す与えられたタイプのヒト腫瘍標本の数を表わす
。試験腫瘍の数は、かっこ書きしである。
（以下余白）
６６−
傘すべての腫瘍標本の内皮細胞が賜性
十よく分化した鱗状がんの領域のみ
不均−反応一細胞のサブ個体群のみ
のう胞領域の内膜のみ
一；腫瘍細胞の免疫蛍光なし
表 ■
吸収分析
Ｔ１６ ０ｍ５ Ｔ４３”
８に−ＭＥＮ、−２３ ＄ ■Ｔ−２４０の
乳頭のり腫瘍 Φ ■ −正常膀胱
尿路上皮 の − −申Ｔ１６とＴ４３
はＴ−２４細胞上で試験した。
尿路上皮 の − −申Ｔ１６とＴ４３
はＴ−２４細胞上で試験した。
ψ傘Ｏｍ５はＳＫ−ＭＥＬ−２８上で試験した。
６８−
第１頁の続き
Ｃ１２Ｒ１／９１ ）
優先権主張 ＠１９８３年１２月３０日■米国（ＵＳ）
［有］５６７０６６ ０発 明 者 カルロス・コードンーカルドアメリカ合
衆国１００２１ニュー・ ヨークｅニュー・ヨーク・イー スト６７ストリート４３０番地 ０発 明 者 ライレット・エフ・ウィツトモア・ジュ
ニア アメリカ合衆国１００２１ニユー・ ヨーク・ニュー・ヨーク・イー スト６８ストリート３４５番地 ０発 明 者 マイロン・アール・メラメッドアメリカ
合衆国１０５８３ニュー・ ヨーク・スカースデール・エバ リー・ロード２５１番地 アメリカ合衆国１００２４ニユー・ ヨーク・ニュー−ヨーク−ウニ スト・エンド・アヴエニュ６００ 番地 ０発 明 者 ケネス・オー・ロイド アメリカ合衆国１０４７１ニユー・ ヨーク・ブロンクスｅヘンリー ・ハドソン・パークウェイ４５２５ 番地
［有］５６７０６６ ０発 明 者 カルロス・コードンーカルドアメリカ合
衆国１００２１ニュー・ ヨークｅニュー・ヨーク・イー スト６７ストリート４３０番地 ０発 明 者 ライレット・エフ・ウィツトモア・ジュ
ニア アメリカ合衆国１００２１ニユー・ ヨーク・ニュー・ヨーク・イー スト６８ストリート３４５番地 ０発 明 者 マイロン・アール・メラメッドアメリカ
合衆国１０５８３ニュー・ ヨーク・スカースデール・エバ リー・ロード２５１番地 アメリカ合衆国１００２４ニユー・ ヨーク・ニュー−ヨーク−ウニ スト・エンド・アヴエニュ６００ 番地 ０発 明 者 ケネス・オー・ロイド アメリカ合衆国１０４７１ニユー・ ヨーク・ブロンクスｅヘンリー ・ハドソン・パークウェイ４５２５ 番地
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、 ヒト膀胱移行性細胞を確認する、Ｔ１６゜Ｔ２３
、Ｊ２３２ 、ＪＰ１６５ 、Ｔｌ０Ｉ 、０ｍ３７
゜０ｍ５ 、Ｔ４３ 、Ｊ１４３ 、Ｔ８７ 、Ｔｌ３
Ｂ 、 およびＴ１１０からなる群から選ばれる２又
はそれ以上のモノクローナル抗体パネル。 ２、 グリコプロティン、グリコリピッド、およびプロ
ティンからなる群から選ばれるヒト膀胱移行性上皮抗原
を確認する特許請求の範囲第１項目記載のモノクローナ
ル抗体。 ３、 グリコプロティンの分子量がおおよそ２５−４０
ｋｄ、でおるような特許請求の範囲第２項目記載のモ
ノクローナル抗体。 ４、 その分子量が、４８ｋｄ 、 ８５ｋｄ 、 ６
０ｋｄ 。 ８０ｋｄ 、 ３０ｋｄ 、 １２０ｋｄ 、 ２５ｋ
ｄ 、 １４０ｋｄ 。 および２４０ ｋｄからなる群から選ばれるグリコゾロ
ティンである特許請求の範囲第３項目記載のモノクロー
ナル抗体。 ５、 ヒト膀胱移行性細胞を確認する、Ｔ１６゜Ｔ２３
、Ｊ１４３ 、Ｊ２３３ 、ＪＰ１６！５ 、Ｔｌ０
Ｉ 。 ０ｍ５ 、０ｍ３７ 、 Ｔ４３ 、 Ｔ８７ 、 Ｔ
１３８およびＴ１１０からなる群から選ばれるモノクロ
ーナル抗体産生で特徴づけられた、抗体産生ハイブリド
ーマ細胞系。 ６、 メラノーマ由来細胞株と、ヒト膀胱移行性１１Ｉ
ＩＩ胞がんまたはヒト乳頭腫の株化培養系で免疫された
晴乳動物由来牌臓細胞とを融合させることにより形成さ
れた特許請求の範囲第５項目記載のモノクローナル抗体
産生ハイブリドーマ細胞系。 ７、 メラノーマ由来細胞株を、ヒト膀胱移行型細胞が
んまたはヒト乳頭腫の株化培養系で免疫された唾乳動物
由来の膵臓細胞と融合させることからなる特許請求の範
囲第６項目記載のモノクローナル抗体産生ハイブリドー
マ細胞系の形成方法。 ８、 特許請求の範囲第７項目記載の方法で形成された
ハイブリドーマ細胞系。 ９ 特許請求の範囲第８項目記載のノ・イブリドーマ細
胞系から産生されたモノクローナル抗体。 １０、 ヒト膀胱細胞標本に、Ｔ１６ 、Ｔ２３ 、
Ｔ４３゜Ｊ２３３ 、ＪＰ１６５ 、Ｔｌ０Ｉ 、０ｍ
５．０ｍ３７ 。 Ｊ１４３ 、Ｔ８７ 、Ｔ１３８およびＴ１１０からな
る群から選ばれるモノクローナル抗体を接触させること
、および該抗体と反応する悪性膀胱細胞系を検出するこ
とからなる、正常および悪性ヒト膀胱細胞を分化する方
法。 １１、上記標本が、各々異なった上記モノクローナル抗
体の２またはそれ以上と別々に接触させられる特許請求
の範囲第１０項目記載の方法。 １２、 ヒト膀胱移行性細胞標本に、Ｔ１６ 、Ｔ２
３゜Ｔ４３ 、Ｊ２３３ 、ＪＰ１６５ 、Ｔｌ０Ｉ
、０ｍ５ 。 ０ｍ３７ 、Ｊ１４３ 、Ｔ８７ 、Ｔ１３８および’
ｒｌｌ。 からなる群から選ばれるモノクローナル抗体を接触させ
ること、および該抗体と反応する悪性移行性膀胱細胞を
検出することからなる、悪性ヒト膀胱移行性細胞の分化
診断方法。 １３、 検出方法が７０−サイトメトリー（血球計’
７４、ｃｙｔｏｍｅｒｔｙ ）である特許請求の範囲第
１２項目記載の方法。 １４、上記標本が、各々異なった上記モノクローナル抗
体の２またはそれ以上と別々に接解させられる特許請求
の範囲第１２項目記載の方法。 １５、 非−侵入腫脹が、０ｍ５，０ｍ３７およびＴ
４３からなる群から選ばれるモノクローナル抗体を用い
ることにより侵入移行性細胞かんがら識別される特許請
求の範囲第１２項目記載の方法。 １６、移行性細胞がんが、０ｍ３７ 、Ｔ１６ 、Ｔ８
７゜Ｊ１４３およびＴ４３からなる群から選ばれるモノ
クローナル抗体を用いることにより膀胱肉腫から識別さ
れる特許請求の範囲第１２項目記載の方法。 １７、 ヒト膀胱細胞と反応した特許請求の範囲第１
項目記載のモノクローナル抗体。 １８、 ヒト膀胱細胞抗原成分と反応した特許請求の
範囲第１項目記載のモノクローナル抗体。 １９、 ヒトの組織又は細胞に、特許請求の範囲第１
項目記載のモノクローナル抗体の各々を接触させること
、および陽性免疫学的応答を観察することからなるヒト
細胞を分類する方法。 ２０、 ヒト膀胱移行性細胞脱落抗原を確認するモノ
クローナル抗体。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US47422983A | 1983-03-11 | 1983-03-11 | |
| US474229 | 1983-03-11 | ||
| US567066 | 1983-12-30 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59205327A true JPS59205327A (ja) | 1984-11-20 |
Family
ID=23882686
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59046965A Pending JPS59205327A (ja) | 1983-03-11 | 1984-03-12 | ヒト膀胱及び尿管がんに対するモノクロ−ナル抗体及び方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59205327A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59188558A (ja) * | 1983-04-08 | 1984-10-25 | Kureha Chem Ind Co Ltd | ヒト膀胱癌の分類および同定用試薬 |
| JPS6144900A (ja) * | 1984-08-08 | 1986-03-04 | Green Cross Corp:The | モノクロ−ナル抗体及び癌抗原検出用試薬 |
| JPS61103837A (ja) * | 1984-10-26 | 1986-05-22 | Wakunaga Seiyaku Kk | 抗ヒト癌モノクロ−ナル抗体 |
| JPS61104783A (ja) * | 1985-09-10 | 1986-05-23 | Wakunaga Seiyaku Kk | 抗ヒト癌モノクロ−ナル抗体生産性ハイブリド−マ |
| JPS61180725A (ja) * | 1984-12-05 | 1986-08-13 | ザ・ソーク・インステチュート・フォー・バイオロジカル・スタディーズ | 乳ガン細胞表面抗原に特異的なモノクロ−ナル抗体 |
| JPS61189299A (ja) * | 1985-02-15 | 1986-08-22 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | モノクローナル抗体を含む肝疾患診断剤 |
| JPS6321562A (ja) * | 1986-07-15 | 1988-01-29 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 抗ヒト胃癌単クロ−ン性抗体ａｍｃ−４６２ |
| JPS6357596A (ja) * | 1986-08-29 | 1988-03-12 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | モノクロ−ナル抗体、その製法およびそれからなる肝疾患診断剤 |
-
1984
- 1984-03-12 JP JP59046965A patent/JPS59205327A/ja active Pending
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| J.NATL.CANCER INST=1981 * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59188558A (ja) * | 1983-04-08 | 1984-10-25 | Kureha Chem Ind Co Ltd | ヒト膀胱癌の分類および同定用試薬 |
| JPS6144900A (ja) * | 1984-08-08 | 1986-03-04 | Green Cross Corp:The | モノクロ−ナル抗体及び癌抗原検出用試薬 |
| JPH0429358B2 (ja) * | 1984-08-08 | 1992-05-18 | ||
| JPS61103837A (ja) * | 1984-10-26 | 1986-05-22 | Wakunaga Seiyaku Kk | 抗ヒト癌モノクロ−ナル抗体 |
| JPS61180725A (ja) * | 1984-12-05 | 1986-08-13 | ザ・ソーク・インステチュート・フォー・バイオロジカル・スタディーズ | 乳ガン細胞表面抗原に特異的なモノクロ−ナル抗体 |
| JPS61189299A (ja) * | 1985-02-15 | 1986-08-22 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | モノクローナル抗体を含む肝疾患診断剤 |
| JPH0623763B2 (ja) * | 1985-02-15 | 1994-03-30 | 日清製粉株式会社 | モノクローナル抗体を含む肝疾患診断剤 |
| JPS61104783A (ja) * | 1985-09-10 | 1986-05-23 | Wakunaga Seiyaku Kk | 抗ヒト癌モノクロ−ナル抗体生産性ハイブリド−マ |
| JPS6321562A (ja) * | 1986-07-15 | 1988-01-29 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | 抗ヒト胃癌単クロ−ン性抗体ａｍｃ−４６２ |
| JPS6357596A (ja) * | 1986-08-29 | 1988-03-12 | Nisshin Flour Milling Co Ltd | モノクロ−ナル抗体、その製法およびそれからなる肝疾患診断剤 |
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