JPS59146595A - Ｓ−アデノシル−ｌ−ホモシステインの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、微生物の菌体または副体処理物″？ｆ：１孝
索源として用いるアデノシンとホモシステ・インからＳ
−アデノシル−Ｌ−ホモシスティンを効率良（酵素甘酸
して採取する方法に関する。

Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシスゲイン（以下、Ｓ　Ａ　
Ｈと略称する）は、生体内に１砧いてＳ−アゾンシルメ
チオニン（以下、Ｓ　Ａ　Ｍと略称する）が関与するメ
チル基供与反応で生じる爪４゛な生理活性物質である。

而し７て、近時、かＤ・るＢ　Ａ　’ＨにＡ静剤、ｉＩ
Ｉ居眠誘発剤などとしての効果が見い出されており、そ
の大量生産が期待されている。

従来、ＯＡＨの製造方法としてはザツカロマイセス属ま
たはキャンデイダ属の酵母から抽出する方法〔例えばア
ーカイブズ・オブ・バイオケミストリー・アンド・バイ
オンイジックス（Ａｒｃｈ。

Ｂｉｏｃｈｏｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ　）　６９　、５７５
　（＋　９６２　）　］　。

Ｓ　Ａ　１Ｔｉかもの酵素的脱メチル法〔例えばジャー
ナル々オブ◆バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ。

Ｂｉｏｌ、、Ｃｂｏｍ）２４０　、２５１２（１９６５
）　）、ＳＡＭからの化学的脱メチル法〔例えば特公昭
４５−３ン５３（Ｓ−号〕などが知られている。しかし
ながら、これらの方法はいずれも非常に経費がかかり、
工業的製造法とは言い姉い。

’−’−方、アゾンシンとホモシスディンをザッカロマ
イセス属またはキャンデイダ属酵母の函体抽出物の存在
］；に酵素合成する方法（例えばアーカイブス・オブ・
バイオケミストリー・アンド−バイオフィジックス（Ａ
ｒｃｈ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙす６９．５７５
（１９６２））も知られているが、この方法ＶＣ使用可
能な微生物の種類は未だ限定されており、他の有用な微
生物の探索が期待されていた。

本発明者らは以上のような実状に鑑み、５ＡＩ（の酔素
的什成法に関して神々検討を加えた結果、特定な微生物
を用いる場合には解体抽出物の形態に限定されることな
（、菌体磨砕物であっても、さらには生菌体や乾燥菌体
の形態であっても効率よ＜　ＳＡＨを廿成しうることを
見い出し本発明を完成するに到った。

か（して本発明によれば、アゾンシンとホモシスディン
を、アニルバクター（Ａｅｒｏｂａｃｔ６ｒ）ＪｉＪ、
アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｉ）属
、ミク「Ｊコツカス（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ）　Ｊｉ
、コリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｏｒｉｕ
ｍ）属、アゾトバクタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）
属、７レビバクテリウム（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎｅ、ｓ　
）属、ロドシュー　トモナス（ＲｈＯｄｏｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ）　属、シュートモナスリーラ狸升駅Ｐザ）
属、アルカＩＪ　ケネス（品３す」旦テフラボバクテリ
ウム（Ｆｌａｖｏｂａ、ｃｔｅｒｉｕｍ）属、セルロモ
ナス（Ｃｅｌｌｕｌｏｍｏｎａｅ　）　ｋｇ、アゾトバ
クタ−（ＡＺＯ’ｔＯｂａＣｔｅｒ）属に属するＨ菌類
、グロタミノバクタ−（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂａｃｔｅ
ｒ）属、サツカロマイコブシス（８ａｃｃｈａｒｏ＋ｎ
ｙｃｏｐｓｊ、ｓ）属、シゾザツ力ロマイセス（Ｓｃｈ
ｉｚｏｓａ、ｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　）属、ビヒア（
Ｐｉｃｈｊ、ａ）属、ハンセヌラ（ＨａｎｓＯｎｕｌａ
　）属、シワニオマイセス（Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃ
ｅｓ）属、デバリオマイセス（Ｄｏｂａ、ｒｙｏｍｙｃ
ｅｓ　）属、ザツカロマイコテス（Ｓａｃｃｈａ、ｒｏ
ｍｙｃｏｄｅｓ）属、ハンゼニアスボラ（Ｈａｎｅｓｎ
ｉａ、５ｐｏｒａ）属、リボマイセス（Ｌｉｐｏコ１１
ｙＣＱ　８　）属、スポロボロマイセス（Ｓ■）ｏｒｏ
ｂｏｌｏｍｙｃｅｓ）属、クルイベロマイセス（Ｋｌ−
ｕｙｖｏｒｏｍｙｃｅｅ）　、＠、クリプトコツカス（
ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属、トルログシス（Ｔｏｒ
ｕｌｏｐｓｉｓ）属、り０エケラ（Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ
）属、ウイケルハミア（Ｗｉｃｋｅｒｈａｍｉａ）　籾
、トルラ（Ｔｏｒｕｌａ）属、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏ
ｔｏｒｕｌａ）　属、トリコスポロンＱ　　（ＴｒｉＣ
ｈｏｓｐｏｒｏｎ）属、オースボリデイウム（♀２ジ慴
μ迭杷巴）属、ｏｆロア　イセス（’Ｉｂ票−一へ豊）
楓に属する酵母類：ムコール（Ｍｕｃｏｒ）属、す′ノ
ブス（Ｒｈｉｚｏｐｕ、ｓ）属、アブシディア（Ａｂｓ
ｉｄｉａ）　Ｍ、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ　）属、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）
属、モナスカス（Ｍｏｎａｅ　ｃｕｓ　）属、ノイロス
ポラ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ　）属、オウレオノくシブ
イウム（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｎｎ）属、フザリウ
ム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属、ジベレラ（Ｇｉｂｂｅｒｅ
ｌ−’ｌａ）属、アルスロバクタ（ＡｒｔｈｒｏｃＬｅ
ｒｍａ）属、スボロスリツクス（Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ
）属、ベルチシリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）属
、グリオクラブ１ウム（Ｇｌｉｏｃ’ｌａａｉｕｍ）属
、トリコフィトン（Ｔｒｉｃｈ古と費）属、ンイトフト
ラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）属、エラロチラム（Ｅ
ｕｒｏｔｉｕｍ）属、シリンドロカルポンプイア（Ｎｏ
ｃａｒａｉａ）属、ストレプトベルチシリジウム（Ｅ３
ｔｒｏｐｔｏｓｐｏｒａｎ、ｇｉｕｍ）属、ξクロエロ
ボスボリ゛Ｔ　（Ｍｉｃｒｏｅｌｌｏｂｏｓｐｏｒｉａ
）属に属する放線菌類；またはグロエオフイラム（Ｇｌ
ｏｅｏｐｈｙ’］、１ｕｍ）属、シゾフィラム（Ｓｈｉ
ｚｏｐｈｙｌｌｕｍ）属、トラメテス（Ｔｒａｍｅｔｅ
Ｆ３）属、ラエチボラス（Ｌａｅｔｉｐｏｒｕｓ　）属
、レンチヌス（Ｌｅｎｔｉｎｕｃ＋）属、リオフイラム
（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ）属、ピクノボラス（Ｐｙｃｎ
ｏｐｏｒｕｇ）属、レビスタ（Ｌｅｐｉｓｔａ）属に属
する担子菌類に属し、かつアゾンシンとホモシスティン
からＳＡＨを合成する能力を有する微生物の菌体または
菌体処理物の存在下に水性媒体中で接触させて反応せし
め、Ｓ　Ａ　Ｈを合成して採取することを特徴とすしＳ
　Ａ　１１の製造法が提供される。

本発明ＶＣ１６いて酵素源として用いられる微生物は、
上記の属に属し菌体または菌体処理物の形態でアデノシ
ンとホモシスティンからＳＡＭを合成できる能力を有す
るものであればいずれでもよく、その具体例としては、
アエロバクタ−φクロアカニ（Ａｅｒｏｂａｃｔｅｒ　
ｃｌｏａｃａｅ）■ＡＭ　　１２２１、アグロハクテリ
ウムーチュメファシエンス （Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎ
ｓＣ工ＦＯ１５２６５、ミクロコツカス・ルテウ２（Ｍ
倶五票％濃−一見ヒ凹）ＩＦＯ３３５３、コリネバクデ
リウムーファシアンス　（Ｃｏｒｙｎｅｂａ、ｃｔｅｒ
ｉｕｍ　　ｆａｅｃｉａｎｓ）Ｉ　Ｆ　Ｏ１２０７７、
アルスロバクタ−・グロビフオルミス（Ａｒｑｈｔβｂ
ａ　ｃ、ｔ　ｅ　ｒ（＜ｌｏ　ｂｉｆ　ｏｒｍｉｓ戸Ｆ
Ｏ１２１５７、ブレピノ（クテリｉｏｄｉｎｕｍ）エフ
０　３５５８、キザントモナスー＊−’ｔ’ンベストリ
ス（Ｘｓ、ｎｔｈｏｍｏｎａｓ　ｅａｍｐｅｓｔｒｉｌ
ｌｌ）■ＡＭ１６７１、ロドシュードモナス・スフェロ
イデス（ＲｈＯａＯｐｎ　ｅ　ｕａ　Ｏｍ　Ｏｎａ　Ｂ
　ｓｐｈ　３１７０　ｘｄｃｉ　Ｃ３）■ＦＯ＋２２０
５、シュードモナスーグチダ（弘豊仰−−ｙソｐｕｔｉ
ｄａ）工ＦＯ１２９９６、シュードモナスＯダキュネ（
Ｐｏｅｕａｏｍｏｎａｅ　ｃｉａｃｕｎｈａｅ）■’Ｆ
Ｏ１２０４８、シュードモナス拳エルギノーサ（ＰＳｅ
ｌｌ、６．０ｍ０ｎａ［’１ａ、ｅ　ｒ　ｕ　ｇｊ、ｎ
　ＯＳ　ａ　）工ＦＯ３４４５、アルカリケネスーフエ
カリス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ）
■７０１２６６９、’アルカリゲネス拳フエカリスエＦ
Ｏ１３１１１、アルカリゲネス−ユウトロフス（Ａｌｃ
ａ’ｌｉｇｅｎｅＩ３ｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）■ＡＭ　　
１２３０５、アシネトバクタ−・カルコアセチカス （Ａｃｉｎｏｔｏｂａｃｔｅｒ　ｃａｌｃｏａｃｅｔｉ
ｃｕｓ）ＩＦＯ１２５５２、フラボバクテリウム・ガン
ゲネスｆｌａｖｉｇｅｎａ）Ｉ　ＦＯ５７５３、アン゛
トノ（クターψビネランデイ−（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅ
ｒ　ｖｉｎｅｌａｎ＋ｌｉ土）工ＦＯ１２０１Ｂ、プロ
タミノノ；クター　・ルノく−（Ｐｒｏｔａｍｉｎｏｂ
ａｃｔｅｒ　ｒｕ’ｂｅｒ）　Ｉ　Ｐ　０３７０８など
の細菌類、ザツカロマイコゾシス・フイフ゛リゲラ（Ｓ
ａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓ　ｆｉｂｕＴＬｉｇｅ
ｒａ）　Ｉ　Ｆ　００’１０３、シゾサツ力ロマイセス
・ボンベ０４５９、ハンゼヌラ中シルビコラ（Ｈａｎｓ
ｅｎｕｌａｓｉｌｖｉｃｏｌａ）工Ｆ０　０８０７、シ
ワニオマイセスス・ギヤスデリ−（Ｄｏｂａｒｙｏｍｙ
ｃｅｓ　ｃａｑｔｅｌｌ−：１．ｉ）工ｙＯ１３５９、
サツカロマイコデス拳ルドウイギ　−（Ｓａ、ｃｃｈａ
、ｒｏｍｙｃｏｄｅｅ　　　１ｕｄＷ１ｇ　コ−］、）
　　１　Ｆ　００７９Ｂ、ハンゼニアスボラ＠バルバイ
エンシスエＦＯ０６７３、スポロポロマイセス砦ホルサ
チカス（Ｓｐｏｒｏｂｏｌｏｍｙｃｅｓ　ｈｏｌｓａｔ
ｉｃｕｓ）　Ｉ　Ｆ　０１０３４、タルイベロマイセス
争サーモトレランス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｏｓ　ｔ
ｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ）　Ｉ　Ｆ　００６６２、
クリフトコツカスＱネオフオルマンス（Ｏｒｙｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓ　ｎｓｏｆｏｒｍａ、ｎｓ）工ＦＯ０４１０
゜トルロプシス−キャンディグ（ＴｏｒｕｌｏｐｅｉＬ
３ｃａｎｄ、１ｄａ）　Ｉ　Ｆ　Ｏ０３８０，クロエケ
ラφアビキュラタ（Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ、　ａｐｊ、ｃ
ｕｌａｔａ、）　Ｉ　Ｆ　Ｏ０１５１、ライケル２・・
ミア・フルオレッセンス（Ｗｉ狸！ニー門ａｆ、１ｕｏ
ｖｅｓｃｅｎｓ）　Ｉ　Ｆ　Ｏ１１１６、トルラ・デー
マチ０６８９、トリコスポロン番りタノイム（Ｔｒｉｃ
ｈｏｓｐｏｒｏｎｃｕｔｎｎｅｕｍ）　Ｉ　Ｆ　Ｏ１１
９８、オースポリｉイウムーマルガリチフエラム（Ｏｏ
ｓｐｏｒｉｃｉｉｕｍ＋１１ａ　ｒ　ｇ　ａ　ｒ　ｊ、
　ｊ　ｉ　ｆ　ｅ　１”　ｕｍ　）１ＦＯ１２［］８、
ロデロマイ土ス・エロンシスボラス（ＬｏｄｄＯｒｏｔ
ｑｙｃｅｓｅｌｏｎｇｉｒ；ｐｏｒｕ、ｒ＋）　Ｉ　ｌ
ｉｊ”　０　１６７６、などの１皆母類：ムＪ　　）Ｉ
−・スフチリスシムス（Ｍｕｃｏｒブンティア・コリム
ビフエラ（Ａｂｅｉｄｉａｃｏｒｙｍｂｉｆｏｒａ）工
ＦＯ４００９、アスペルギルス１１テレウス（Ａｓｐｅ
ｒｇｉコｌｈｓ　ｔθｌ’ｒθｕｓ）１Ｆ０６５　ＩＩ
　６、ペニシリウム―エクスバンヤム９２０３、モナス
カス―十ロルベセンス（Ｍｏｎａ、５ｃｕｅｓｅｒｏｒ
ｕｂｔつｌ１ｃｅｎｓ）ＩＦＯ４４８７、ノイ「コスボ
ラークラツサ（ＮｅｕｒＯｃｐｏｒａ　ｃｒａ【Ｎａａ
）工ＦＯ６０６７、オウｖオバシテイウム・プルランス
（Ａｚｒｅｏｂａ０１ｄｉｕｍｐｕｉｌｕコ−ａｎり工
ＦＣ６４０５，フザリウム拳りル′モラ”智と２枳−Ｐ
−二狸偲叶す）ＩＦＯ５９０２・ＩＰｏ、６６０５、ア
ルスロテルマ１゛アンシナタム（Ａｒｔｂｒｏｄｅｒｍ
ａ、　ｕｎｃｉｎａｔｕｍ）　工Ｆ　０　７８６５、ス
ホロスリツクスψシエンギ−（Ｓ　ｐ　Ｏｒ　Ｏｔｂ　
ｒ　Ｌ　Ｘ５ｃｈｅｎｃｋｉｉ）　Ｉ　Ｐ　０　５９　
Ｂ　５、ベルチシリウｌ、　ｍアルホーアトラム（Ｖｅ
ｒｔｉｃｉ’ｌ−’］、ｉｕｍ　ａｌｂｏ−ａｔｒｕｍ
）工ＦＯ５９２２、グリオクラディウム・テリクエセン
ス（Ｇｌｉｏｃｌａａｉｕｍ　ｄｅＨ，ｑｕｅｓｃｅｎ
ｓ）工Ｉｉ”　０６６１７、トリコフィトン・ノンタグ
ロフイテス（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ　ｍｅｎｔａｇ
ｒｏｌ、＋ｈｙｔｏｓ）　Ｉ　Ｆ　０５８０９、フイト
フトラーインノエスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｂｏｒａ
　　１ｎｆｅｅｔａｎＳ）　■ｐ１ｏ９１７５、シリン
ドロカルボン０デストラクメンス（Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃ
ａｒｐｏｎ　ｄｅＬ３ｔｒｕｃｔａｎｅ）Ｉ　Ｆ　Ｏ５
９ゾ８などの糸状菌類：ストレプトマイセス・ノ・イグ
ロスコピカス（Ｓｔｒｏｐｔｏｎｎｙｃｅｓ　ｈｙｇｒ
ｏ＋’ｃｏｐｉｃｕｓ）ＩＩｉ’０　３１９２．ストレ
プトマイセス呻グリセオｐｈｌｅｉ）１Ｆ０　３１５Ｂ
、ノカルディアゆアス方ロイデス（Ｎｏｃａｒｃｌｉａ
　ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）工ＦＯ３４２４、ストレプト
ベルチシリウム・ケンタケンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒ
ｔｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｋｅｎｔｕｃｈｅｎｅｅ）工Ｆ０
１２８８０、ｓクロモノスポラφコエルレア（Ｍｉｃｒ
ｏｍｏｎｏ８ｐｏｒａ　ｃｏｅｒｕｌｅａ）　Ｔ　ＦＯ
１３５０４、ミクロポリスポジ会アンジオスポラ （ＩＭ：ｉ　ｃ　ｒ　Ｏｌ、）Ｏ：ｔｙ　Ｇ　ｐｏｌ”
ａ　ａｎｇｌ　Ｏ５ｐｏｒ　ａ　）工ＦＯ１５１５５、
ストレグトスポランジウム・ロセウム （Ｓｔｒｅｐｔｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ　ｒｏｓｅｕ、
ｍ）　Ｉ　ＦＯ３７７６、ミクロエロボスボリア・ビオ
ラセア （Ｍｊ、ｃｒｏｅ　コー１０１）ＯＲｐＯｒｌａ　　Ｖ
ＩＯコａｃｅａ）　　Ｉ　　ＦＯ１２５１７などの放線
菌類およびグロエオフイラノ、・トラベニＦＯ６５０４
、トラメテス−ギボサ（Ｔｒａｍｅｔｅｓｇｉｂｂｏｓ
ａ）ＩＦＯ４９１６、ラコニチボラス會ザルフレウス（
Ｌａｅｔｉｐｏｒｕｓ　５ｕｌｐｈｕｒｅｕｅ）工ＦＯ
６４９７、レンチヌス争ニドデス（Ｌｏｎｔｊｎｕｓｅ
ｄｏｔｉｅｓ　）　Ｉ　Ｆ　Ｏ８３４０，リオフイラム
Φデカスデス（７，、ｚｐｐｈ７１↓ｕｎ、＋　−延ｔ
２　ｃ　ａ　ｅ　ｔ−門）丁Ｆ　０　６０１　’６１　
。

ビクノボラス・コシネウス（Ｖηヅ盟思）ｒｌＨＦＣＯ
ＣＣｌｎｅｕＨ−Ｎ）　工Ｆ○　９／６８、レビスタＯ
ヌダ（シリ尤−リ（＞　ｐｕｄ、ａ−）丁ＦＯ３［１’
１３９などの土Ｓ子称１知が挙げられる−　リニたこ、
７しらの−ｍの天然及び入子「変異菌であってもＳ　Ａ
　）ｉ合成能を有゛するかぎり四＆ｔに使用することが
できる。

本発明におけるＳ　Ａ　ｉ（の合流：方法は倣生“吻の
固体まプ、二は、その処用３！吻の形態でｒ′１４体内
Ｇｉｆ累の作用を利用１−るものであるが、このＩｉＹ
素は１）必生物で通鹿の方法で培昔することによりＮ！
ＪＡ祭することができる。微生物を」名義１−る琳地は
、ｈ（素従よ、塗≦慮源、無ｔメミ塩、有１・幾微匠栄
旌源を含有する；ｌ￥ｉ當の培地でよく、鉦十画のイ虫
類に応じて鰭宜×択Ｉ７て使用−３“ｈばよい３．また
ｊ右養方法は連當液体培地で行）、（われるが、固体表
面培養によ−ってもイｊうことかできる。培路条↑１は
１ｉＫ生物の瞳顛に応じて適宜ガ？択すＪ］−は良（、
温度１５〜８０’Ｃ：、ｒＩ（３〜１２の範［））］が
ｆｌｌいられるが、一般的には温＞Ｈ３１２０〜４５℃
、ＰＨ４〜９の１ｊｌｏ、　［７（→−Ｃ１［）〜１２
ｎｗ”；間培養−すれば良い。

培養中ＶＣは通気面４゛１ミを行って微生物の生育を促
進させることもできる。

本発明におけるＳ　、Ａ　Ｈの合成反応には、前ｄ１シ
のように二］、で培養した微生物が菌体または菌体処理
物の形態で使用される。ｆｌｌえば、ｉ紋生物の培養液
中の菌体をそのまます！用してもＳ　Ａ　Ｈの合成反応
は進ｔ＋−するが、培養液中の成分が障害になる場合−
“シ■坏ｆｉｉを多（１更用したい世、七゛には培養液
から分に江し、た菌体を（月いることが好ましい６、図
体は生菌体の土まて・光分に１史用１」的を達するが、
貯蔵あるいは取扱いの便宜から風乾臼体、凍結免許菌体
、アヤトン［１１体などＣ／）ような軒燥畠体として用
いることもて゛きて）、７＋た［４′１体そのものでは
なく、菌体Ｄｆ砕物や計！；１体１１」、出物のよ５１
’、（画体処理物の状態で使用−づ−４・ことも川面で
ある。史Ｋｍ１体または菌体処理物を′帛仄に従って固
定化して使用することもできる。

本発明にも（・するＳＡＨ付成台底は酵素反応基質であ
るアゾンシンとホモシスティンとを微生Ｑ？Ｊ菌体また
はＭ体処坤物の一０′７在下に水性媒体中で接触させる
ことによって行なわれる。反応！で供されるホモシステ
ィンはＬ体、ＤＬ体のいずｉｔであっ°Ｃも使用するこ
とができる。士だ反応の条件は適宜選ｉ／＜ずればよく
、基質濃度と］〜てアデノシンを１１ノ８′！、′１以
上、好ましくば１１〕〜５０１］ｍＭ、　　ホモシステ
ィンＭｋａを１　ｍＭ以上、好ましくば１０−５００　
ｍＭと１−ればよい。

なお、不発明にゴロげるポモシスデ、インｔ（る用ｈ１
÷は反応糸同においてホモシスディンを供給する物質（
例えばホモシスチン、ホモシスフ′１゛ンチオラクトン
など）をも含むものとし２て巧１身さＪするーベきで）
、る。

反応における糸の１ツ■＋は４〜１２、好まし−７りは
６〜１０に保てばよく、　ＰＨの１；１・’ｌ　Ｊ３は
通常の方法、たとえばリン酸カリウムバッファー、トリ
スバッノアー、塩化アンモニウムバッファー、クリシン
・くツフ゛アーなどによって訴整すれはよい。

Ｊヌ応温度は、反Ｌｃ−がよく進行い仔累粘性、基質お
よび生成物に影響のない温度であれはよ（、通常は１５
〜６０℃、好ましくは２０〜５０　℃である。

反応時間は基質のＳＡＨへの転化率が増大するよ５　（
ｒＣ設定すればよ（、バッチ式の場合、通常ｏ、　ｉ〜
４８時１￥（ｊ好土１．＜は０５〜５６時間である。そ
の（ｊｉｂ、目的に応じて水性媒体中にアセトン、エタ
ノールの如き拘機温媒や各棟の界面活性剤を添加して反
応を行わせることもできる。

かくしてＳＡ、Ｈを含有する反応液が得「〕れるが、該
反応欣から：３　Ａ　’［（を採取する方法は公知の方
法（／（７よｈげよい１．その分離法としては、例えば
Ｓ　ＡＨ含有液を強酸性カチオン交換樹脂に接触させて
Ｓ　Ａ　Ｈをｊｌ！ｉ！、／材さぜた後、硫酸で浴出さ
せ、浴出液にリンタングステン酸を加えてＳ　Ａ　Ｈを
沈殿させる方法、ＳＡＨ含有液を活性炭に接触させて（
３ＡＨを吸治させた後、エタノール／水／崗アンモニア
水（１〕υ８５０：１）で溶出させ、溶出液を減圧上濃
縮して碇動物のＰＨを酢酸で７に調節した後、ｓ　Ａ　
）１を０℃で晶出させる方法／工どが例示される。

以−トに実施例ｆｃ挙げて本発明をさらに具体的に説明
−ゴーる。ただＬ本発明はこれらの例のみに限定される
ものではない。

なお、実施例におけるＳ　Ａ　Ｈの定量は次のようにし
て行った。−ｒなわち、反応終了後、反応液を直ちに０
〜５℃に冷却し、過塩素酸を添加して反応を停止した。

次いで遠心分離にて不溶物を除去したのち、得られた上
澄液にリン酸カリウムバッファー（Ｐ　Ｈ７，０）を添
加して、生成した過塩素酸カリウムを遠心分離により除
去した。かくｌ−て得られた上澄液の所定量を採取して
高速液体クロマトグラフィー（日立製作所後、６５Ｂ　
　５０型、カラム二〇０８ｍ０Ｃ１ｌ　５　ＣＡＢ　、
　Ｄｅｔｅｃｔｅｒ　：　ＵＶ　２６０ｎｍ）を用いる
ことによりＳＡＨの定量を実施した。

実施例１ グルコース１！？／ｄ−ｌ、ヘゲｌ−ン１．５　、！／
　／ｄＪ　、　ｌ’？ＬｆｉＬエキス０．５ｇ／ｄ１　
、　Ｋ２ＨＰＯ４０，５１／ｄｌ　、　ＮａＣ１１１２
ｇ／ｃＪ、！２　、　Ｍｇ５Ｏ４１Ｉ７Ｈ２００，０２
１／ｄｌ　、寒天２ｇ／ｄ１からなる寒天斜面培地（Ｐ
Ｈ７，０）で２８℃、２４時間培養した第１表記載のａ
菌の１白金耳を、グルコース１１１／ｃＬｉ、ベグトン
１５ｇ／ａ、ｚ、酵旬エキス０．３１／ｄｌ　、　Ｋ２
ＨＰＯ４０，３１／ｄＪ　、　Ｎ　ａｃｔ　Ｏ，２ｊｔ
／ｅＬｌ　。

ＭｇＳＯ４１１７Ｈ２００，０２１７ｄＩ！からなり、
Ｐ　Ｈ７，０に調整、加熱滅菌した液体培地１０ｒｎｌ
に植菌し、２８℃で４０時間振尉培養を行なった３、遠
心分離にて集菌し、０，１Ｍリン酸カリウムバッファ＝
（ＰＨ８，０）で洗浄した後、菌体をアデノシン１０ｍ
にＤＬ・ホモシスティン１０ｍＭ、　　リン酸カリウノ
、バッファー（ＰＨ８，０）１００ｍＭ　からなる基質
溶液１罰に愁濁し、５０℃で１時間振盪（−て反応させ
た。結果を第１表に示す１ 第　　１　　表 アニロバクター−クロアカニ　　　　　　　エＡＭ　　
１２２１　　：　　ｏ、ｓｏ　　ｉキサントモナス・キ
ャンペストリス　　　　ＩＡＭ　　１６７１　　１　０
．１＋　　１０ドシユーへドモナス−スフェロイデス　
　　エＦＯ１２２０３□　０．８７　１アルカリゲネス
拳フエカリス　　　　　　　エＦＯ１２６６９１０，９
５１アルカリゲネス争ユウトロフス　　　　　　　エｈ
ｒｘ　　１２３０５１　０．５９　　：アルカリゲネス
リエカリス　　　　　　　エＦ０１３１０１　　！３．
８９　１シユードモナスリ゛キユネ　　　　　　　　エ
ＦＯ１２０４８０，６６１シュート′−４モナス・エル
ギノーザ　　　　　　エＦＯ５４４ｂ　　ｌ　　ｉ、　
９７　１実施例２ グルコース５ｇ／ｄ１．ペプトン０．５　＆／ｃｌ　／
ｌ！　、酵母エキス０．１１７ｄｌ　、　ＫＨ２Ｉ）０
４０．２　ｆ！／ｅＬｌ　、　Ｋ２ＨＰＯ４［１１ｇ／
ｅＬｌ　、　Ｍｇ５Ｏ４ＩＩ７Ｈ２００，０２ｇ　／ｄ
ｚ　、寒天２１／／ｄ１からなる尽天斜面培地（ｒｎ６
．０）で２８℃、４８時間培養した第２表記載の酵母菌
体の１白金耳を、グルコース’６ｆｌ／ｄｌ、ベントン
０−５．１？／１６１．酵刊エギス０．１　ｇ／ｄ、、
ｌ　、　ＫＨ２ＰＯ４０，，２、！？／６．ｌ　、　Ｋ
２ＨＰＯ４０，１ｇ／ｄ、ｉ　、　ＭｇＳＯ４・７Ｈ２
００，０１／ｄＡからなりＰＨ６，５に調整、加熱滅菌
した液体培地１０ｍ／（に植菌し、２８℃で４１〕時ｊ
＋ｊ」振盪培養を行なった。遠心分離に“（集菌し、０
１１Ｖｉリン酸カリウムノくツファー（ｒｘｌｓ、ｏ）
で次、浄した後、菌体をアデノシン１０ｍ１４、ＤＬＬ
＋ボモシステイン１０ｍＭ、リン酸カリウムバッファー
（ＰＨ８，０）１００ｍＭからなる基質ｋｉ液ｌ　ｒｎ
、ｌに懸濁し、６０℃で２時間振盪して反応させた。結
果を第２表に示す。

第　　２　　表 シゾツツカロマイセス・ボンベ　　　　　　ｘｐ゛ｏ　
　ｏｓｔｒ６１　　ｏ、６ｏ　　ｉスポロボロマイセス
・ポルサチカス　　　　：［：ＦＯ１ｏｓ４１　　　Ｕ
、６［＋　　１シワニオマイセス塾オシデンタリス　　
　　エＦＯ０３７１０，１４１↓ デバリオマイセス・キャステリー　　　　　ＩＩｉ’Ｏ
Ｌ５５９　　　０．０３　１ザツカロマイコデス・ルド
ウイギー　　　　■上！０　０７９Ｂ　　　　０．口１
１一・ンゼニア、スホラ・パルバイエンシス　　　エＦ
Ｏ０ｉ１５　　　０．ｉｌ　　！１ リポマイ士スφリボ７ｘ−ＩＦＯ０６７５）　　０．０
８　　ｊトルログシス争キャンディダ　　　　　　　　
ＩＦＯ０３８０□　　０２９　：′実施例６ 実施例２と同じ方法で培養したのち、ｆ温にて集菌し生
理食塩水で洗浄した第３表記載の糸状預の菌体を用い、
反応時間を変えること以外は実施例２と同様に反応させ
た。Ｓ　Ａ　Ｈ収量を第６表に示した。

実施例４ 酵母エキスｆ１２ｊ？／ｄ、ｉ　、　５ｏｌｕｂｌｅ　
５ｔａｒｃｈ　１　ｇ／ａ７．寒天２ｉ／ｄｚからなる
寒天斜面培地（ＰＨ７，２）で２８℃、４８時間培養し
た第４表記載の放線菌の菌体の１白金耳を、ペプトン１
　ｇ／ｄ、ｌ　、肉エキス０．５　ｙ７ａ、ｚ　、　５
’ｉ母エキス０．１　ｉｌｄｌ　、　Ｎ’ａＣ７；　ｏ
、ｓ　ｆｊ／ａＺからなり、ＰＨ７，１に調整、加熱滅
菌した液体培地１０幅に植菌し、２８℃で４０時間、振
愈垢養を行なった。次いで実施例１と同じ方法で得た菌
体を用い反応時間が２１寺間であること以外は実施例１
と同じ反応条件で反応させた５、結果を第４衣に示す。

実施例５ グルコース２　ｉ７ｄ、ｇ　、酵母エキスＯ，ソ／ｄｌ
、ベグトン０．３１７ｄｌ　、　ＫＨ２ＰＯ４０，１１
／ｄｌ　、　ｌＬｐ；８０４瞭７Ｈ２００，０５ど／ｄ
ｚ　＋寒天２１／ｃＪ、ｌからなる寒天斜面培地（ｐｎ
ｓ、ｏ）で２８℃、９６時間培養した第５表に示′１″
担子菌の菌体１白金耳をグルコース２ｇ／ｃ３Ｊ、酵母
エキス０．６１１／ｒ３．ｌ、ペプトン０．３１１／ｄ
７’、　ＫＨ２ＰＯ４［１，１＆／ｄ１　、　ｈ（ｇＳ
Ｏ４ａ７Ｈ２００，０！Ｍ／ａＺからなりＰ　Ｈ５，０
に調整、加熱滅菌した叡体培地１０ｍｚに植菌し、２８
℃で９０時間、振盪培養を・行なった。ｆ１過にて集菌
し、生理食塩水で洗浄した人々の菌体を用い、反応時間
が４５時間であること以外は実施例１と同じ反応条件で
反応させムニ。Ｓ　Ａ　）ｉ収量を楽５表に示した。

第　　５　　表 実施例６ 実施例１と同じ条件の寒天斜面培地で培養したアルカリ
ゲネス・フェカリスＩＦＯ１２６６９の１白金井を実施
例１と同じ組成の液体培地５東に植菌し７．２８℃で２
４時間振９ｒし前培養を行なった。

次にこの前培哀液５屑ｌを、２１！坂１−〕フラスコに
入れた前ｊ−？′Ｓ妄と同じ組成の加熱滅菌し、た培地
５００ｒｎ、１．に植菌し、２８℃で４０時間振盪し本
培養を行った。本培養終了後、生理食塩水で一回洗浄し
、次に遠心分離にて集菌した。集菌した菌体は通風下約
１５時間室温にて乾燥し、た後、更に五酸化リンを入れ
た減圧デシケータ−中、５℃で１日乾燥した。次にこの
乾燥菌体を乳鉢で粉末状にすりつぶし、１１」び減圧デ
シケータ−中で乾燥することにより、乾燥菌体を調製し
た３、アデノシン２ｍＭ。

ＤＬ−ボモシスデイン４ｍＭ、リン酸カリウムバッファ
＝（ＰＨ６，５）５０ｍＭからなる基質溶液１成に上記
乾燥菌体ｓ　ｏ　ＩＲｙを加え、６７℃で１時間振盪し
２て汐応させた。ＳＡＨの収究−は１９７μｍ　ｏｌｄ
ｌｍｌであった１、 夾施抄１１−７ 実施例６と同じ方法で調整した第６表に示す各菌株の乾
燥菌佳人々５Ｃ］”’４７をアデノシン１０ｍＭ。

ＤＬ−ホモシスディン１０ｍＭ、リン酸カリウムバッフ
ァー（ＰＨ８，０）１００ｍＭからなる基質溶液１ｄに
加え、３７℃で２時間振附して反応させた。

Ｓ　Ａ　Ｈの収おを第６表に示した。

実施例８ 実施例２と１ｉ３Ｊじ条件の寒天斜面培地で片Ｘ縦した
シソサッカ「コマイセス拳ボンベＩＦＯ０３５８＆−”
１１日金斗を実施例２と同じ組成の液体培地５罰に４１
１１−し、２８℃で４０時間振盪し前培養を行なった。

次にこの前培養液５ｍＡを、２／？板目フラスコ（（入
れた前培養と同じ組成の加熱滅菌した培地５００ｍ１　
Ｋ　’４ｆｊ萌し２８℃で４θ時間振鶴し本培養終了後
、ｃつだ。培養終了後は実施例６と同じ方法で乾燥１１
１体を調整し、￥施％ｊ　６と同じ反応条Ｆトで反しさ
せた。ＦＥ　Ａ　Ｈの収貨は１．８３　μｒｎｏｌ／ｃ
ｄｌであった。

実施例９ 第７表に示″ｇ″糸状菌のＷＳＩ株を用いること及び１
過にて集菌すること以外は実施例６と同様ＫＳＡＨｒ、
１合成した。その結果を第７衣に示し７た。

第　７　表 【雄ｉり’ｊ）１０ 実施９１６と１ＴｈＪじ方υじｅ　ＮＭ整したシュード
モナス・ンーチダＩＦＯ１２９９６の乾燥菌体５０ｍ、
ｆｆをリン酸力す１ツムバツフアー（ＰＨ８，０）１０
０ｍＭ及び第８表に示づ一２利１類の基質を含む基質溶
液１　ｍｔに加え、６７℃で所定時［１（１で反応さぜ
た。ＳＡ’ｋｌの収量を第８表に示した３、 第　８　　表 この結果から、Ｌ−ホモシスディンに代えてり、Ｌ−ホ
モシスティンを使用しても、またＴ、　−またはＤ　、
　Ｌ−ホモシスチンを用いることによっても良好な結果
が得られることがわかる。

実施例１１ 液体培地における振尉培養時間が２０時間であること及
び液体培地量が５ｍｌであること以外は実ｊｆ！ｊｆｌ
Ｊ１と同じ条件で培養したシュードモナス・グチダニＦ
Ｏ１２９９６の培養液５ｍｌを、　２ｆ坂ロフラスコに
入れた実施例１と同じ液体培地組成の加熱滅菌（〜だ培
地５００＋＋＋ｊｌに植菌し、２８℃で４０時間振盪し
本培養を行なった。培養終了後、遠心分離にて集菌し、
Ｄ、１Ｍリン酸カリウムバッファー（１）Ｈ８，０）で
洗伊（〜だ菌体をジチオスレイトール１０ｎ＋ＭＱ含有
する０、１Ｍリン酸カリウムバッファー（ＰＨ８，０）
　１０ｍｌに懸濁した。次に水冷下に１９ＫＨｚの蛇脩
波にて６分間処理をした。この処理物全癲心分射にかけ
ることにより上清液を取得した。この上栖゛液０．５　
ｍｌ　ｆアブフッ２２０ｍＭ。

Ｉ）　Ｌ−ホモシスティン２０ｍＭ、　　リン酸カリウ
ムバッファー（ＰＨ８，０）Ｉ　ＤＯｍＭからなる基質
溶液０．５　ｒｕｅに添加し、６７゛Ｃで２時間反応さ
せた。

Ｓ　Ａ　Ｈの収１餡よ２７０μｌｌ］Ｏ１ΔＵであった
。

実施例１２ 実施例６と同じ方法で調整したシュードモナス・グチダ
ＩＦ□０　　＋２９９６の乾燥菌体２００τを１０ｍＭ
リン酸カリウムバッファー（ＰＨ７，０）　２ｍ１Ｋ加
えて賑７９すし、水冷したのち、アクリルアミド３７５
　ｍｇ　、　Ｎ、Ｎ’−メチレンビスアクリルアミド２
ｏ”ｙ、ｓ％のＮ、Ｎ、Ｎ’、Ｎ’−テトラメチルエチ
レンジアミン水′＃；液０．２５　ｍｌを加えて浴解さ
せ、減圧にして酸素を追い出した後、２．５％の過硫酸
アンモニウム水溶液０．２５ＴＬｌを加えて水冷下に静
置した。１時間後、生成した菌体含有ゲルを細か（粉砕
し、１０ｍＭリン酸カリウムバッファー（ＰＨ７、０）
で洗浄し１、菌体固定化物を調整した。この固定化物１
．７５　、？をアデノシン２０ｍＭ、ＤＬ−ホモシステ
ィン２０ｍＭ、リン酸カリウムバッファー（ＰＨ８，０
）　１０　［］ｍＭからなる基質％’ｋｔｊＡｍｚに加
え３０℃で１４時１ｉｊｊ反応さぜたり、５ＡＩ（の収
量は２、２５　μｒｎｏｌ、Ａｎｔｊであった。。

実施例１６ 実施例６と同じ方法で調整したシュードモナス・グチダ
ニＦＯ１２９９６の乾ｉ架固体２００”ｐをアデノシン
２００ｙｒ、Ｍ、ＤＬ−ホモシスティン２ＤＯｍＭ　、
　ＮＨ４０ｊ！　　ＮＨ４ＯＨバッファー（ＰＨ９，５
）１００ｍＭからなる基質溶液４　ｍｌ　Ｋ　ｉｉ　＄
ｊ　Ｌ、６５Ｇで３００時間反応せたところ、反応液中
に６９４１ｍｏｌ　（１５１”’７）のＳＡＨが台底さ
れた。その後、水冷下に６０％過塩素酸水浴液０４η＋
ｌを添加して反応を停止した後、遠心分前により菌体残
洸などの不溶物を除去し、た。次いで１μもれた上清液
に１　Ｍ　ＫＨＣＯ，水浴液を添加しＰ　Ｈ６，０に調
整し、生成した過塙素酸カリウムの沈殿を遠心分離にて
除去した。かく（〜て得られた上清液を強酸性陽イオン
交換樹脂ダウエックス５０Ｘ８（Ｈ型カフム）に通液し
たのちカラムを０．０２５［有］チオジクリコール水浴
故およびｏ、　ｏ　２５％チオジグリコール含有２Ｎ（
１１２−〇洗浄したのち、０ｕ２５％チオジグリゴール
含有６Ｎ硫酸で浴出される部分を集めて、これに２０％
リンタングステン酸水溶液を添加し、生成した沈殿物を
遠心分前にて集めて耐水で洗浄したのち、５倍容量のア
セ１〜ン／水（５０１５０Ｖ／ｖ）ｉ〆こ浴解し１、イ
ンアミルアルコール／エーテル（１／１・Ｖ／Ｖ　）で
１＋１１出した後、得られた水層にＢＩｌｌＣ０５を加
えてＰＨ１３，９に調整し、生成【〜だＢａＳＯ４を２
！−１過にて除去し、上清液を凍結乾燥したところ、白
色固体物９３２”２が得られた。シリカゲル薄層クロマ
トグラフィー、商速孜体クロマトグラフィー、ベーパー
クロマトグラフィー、赤外吸収スペクトル、比旋光度を
廁矩したところ、この白色固体物はＳＡＨであることが
確認された。

実施例１４ 実施例６と同じ方法で調整したシュードモナス・グヂダ
Ｉ：Ｅｌ’０　１２９９６（７）乾燥菌体４ｏｏ”ｙを
アデノシン２υＯｍＭ　、　ＴＪ−ホモシスチン１１］
０１７］Ｍ。

ＮＨ４０Ｊ　−ＮＨ４０Ｈバツフアー（ＰＨ９，０）　
１００ｍＭからなる基質溶ｇｓ石に愁淘し、６５℃で２
５時間反応させたところ、反応液中に６３１μｍｏＪ（
２４！＋”！　）のＳＡＨが合成された。その後、実施
例１５と同様に処理、精製したところ、ＳＡＨの白色固
体１４９”ｙが得られた。

特πＰ出願人　　日本ゼオン株式会社

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、　アエロバクタ−属、アク′ロバクデリウム属、ミ
   クロコツカス属、コリネバクテリウム属、アルスロバク
   タ−ん東ブレビバクテリウム属、りＹコモバクテリウノ
   、属、キザントモナス属、ロドシュー　トモナス属、シ
   ュードモナス属、アルカリ土類金属、アシネトバクタ−
   属、フラホバクデリウム属、セルロモナス属、アゾトバ
   クタ−属、フ”ロタミノバクター属、サツ力ローンイコ
   フ゛シス属、シンーリツ力ロマイセス属、ビヒア属、ハ
   ンゼヌラ属、シワニオマイセス属、デバリオマイセス属
   、ザツカロマイコテス属、ノ〜ンゼニアスボラ属、リポ
   マイセス属、スポロボロマイセスｌｉｉ　、クルイベロ
   マイセス属、クリットコツカスＮ、トルｌコフシス属、
   クロエケラ属、ウイケルハミア属、トルラ属、ロドトル
   ラ属、トリコスポロン属、オースボリデイウム属、ロデ
   ロマイセス属、ムコール属、リゾゲス属、アブシティア
   属、アスペルギルス属、ペニシリウム属、モナスカス属
   、ノイロスポラ属、オウレオバシディウム属、フザリウ
   ム属、ジベレラ属、アルスロデルマ属、スボロスリック
   ス属、ベルチシリウム属、グリオクラディウム属、トリ
   コフィトン属、フィトフトラ属、エラロチラム属、シリ
   ンドロカルボン属、ストレグトマイセス属、マイコバク
   ゾリウム属、ノカルディア属、ストレフ川・ベルチシリ
   ウム属、ミクロモノスポラ属、ミクロホリスボラ属、ス
   トレグトスポランジウム属、ミクｒＸｚエロボスポリア
   属、グロエオフイラム属、シゾフィラム属、ｌ・ラメナ
   ス属、ラエチボラス属、レンチヌス属、リオフイラム属
   、ビク、ノボラス属、レビスタ属に属し、ア゛ケノシン
   とホモシスティンよりＳ〜アデノシル−Ｌ−ボモシステ
   インを台底する能力を有する微生物の菌体または菌体処
   理物の存在下に、アデノシンとホモシスティンを水性媒
   体中で接触させて反応せしめ、Ｓ−アテノシルーＬ−ホ
   モシス方インを合成して採取することを特徴とするＦＥ
   −アデノシル−Ｌ−ホモシスディンの製造法。 ２　微生物の菌体が生菌体または乾燥菌体である特許請
   求の範囲第１項記載の製造法。 ６、微生物の菌体処理物が菌体磨砕物または菌体抽出物
   である特許請求の範囲第１項記載の製哉法。