JPS59106294A - 発酵法によるｌ−イソロイシンの製法 - Google Patents
発酵法によるｌ−イソロイシンの製法Info
- Publication number
- JPS59106294A JPS59106294A JP21569582A JP21569582A JPS59106294A JP S59106294 A JPS59106294 A JP S59106294A JP 21569582 A JP21569582 A JP 21569582A JP 21569582 A JP21569582 A JP 21569582A JP S59106294 A JPS59106294 A JP S59106294A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- isoleucine
- medium
- fermentation
- accumulated
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によるＬ−イソロイシンの製法に関する
。
。
さらに詳しくはコリネバクテリウム属に属し、フロロピ
ルビン酸の生育阻害に対して感受性である微生物を用い
る発酵法によるＬ−イソロイシンの製法に関する。
ルビン酸の生育阻害に対して感受性である微生物を用い
る発酵法によるＬ−イソロイシンの製法に関する。
従来、発酵法によるＬ−イソロイシンの製造法の主たる
ものとしては、ミクロコツカス・グ（１） ルタミカムに属するスレオニン、メチオニン。
ものとしては、ミクロコツカス・グ（１） ルタミカムに属するスレオニン、メチオニン。
ホモセリンまたはロイシン要求株を用いる方法（特公昭
ａｓ−７ｏｓｘ）、ブレビバクテリウム・フラバムのα
−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性でかつプリンまた
はリジン要求性変異株を用いる方法（特開昭４９−８５
２８８）、α−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性で〇
−メチルスレオニン耐性の変異株を用いる方法（特開昭
４９−９３５８６）、ブレビバクテリウム属またはコリ
ネバクテリウム属のα−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸
耐性で同時にエチオニン、２−チアゾールアラニンおよ
び５−（２−アミノエチル）−Ｌ−システィンのうち少
なくとも１つの耐性の変異株を用いる方法（特開昭５Ｏ
−１０１５８２）、およびコリネバクテリウム属に属し
、インロイシンアナログに耐性でかつメチオニンまたは
リジン要求株の変異株を用いる方法Ｃ特願昭４９−１４
４５５２）、コリネバクテリウム属またはブレビバクテ
リウム属のビタミン−Ｐ耐性の変異株（特開昭５７（２
） −２６８７）を用いる方法等が知られているが、まだ満
足すべきものではない。
ａｓ−７ｏｓｘ）、ブレビバクテリウム・フラバムのα
−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性でかつプリンまた
はリジン要求性変異株を用いる方法（特開昭４９−８５
２８８）、α−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性で〇
−メチルスレオニン耐性の変異株を用いる方法（特開昭
４９−９３５８６）、ブレビバクテリウム属またはコリ
ネバクテリウム属のα−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸
耐性で同時にエチオニン、２−チアゾールアラニンおよ
び５−（２−アミノエチル）−Ｌ−システィンのうち少
なくとも１つの耐性の変異株を用いる方法（特開昭５Ｏ
−１０１５８２）、およびコリネバクテリウム属に属し
、インロイシンアナログに耐性でかつメチオニンまたは
リジン要求株の変異株を用いる方法Ｃ特願昭４９−１４
４５５２）、コリネバクテリウム属またはブレビバクテ
リウム属のビタミン−Ｐ耐性の変異株（特開昭５７（２
） −２６８７）を用いる方法等が知られているが、まだ満
足すべきものではない。
本発明者らは、より優れたＬ−インロイシン生産菌を誘
導すべく研究した結果、コリネバクテリウム属に属する
Ｌ−イソロイシン生産菌に、フロロピルビン酸感受性を
付与した結果、Ｌ−インロイシンの蓄積が著しく増加す
ることを見出し本発明を完成した。
導すべく研究した結果、コリネバクテリウム属に属する
Ｌ−イソロイシン生産菌に、フロロピルビン酸感受性を
付与した結果、Ｌ−インロイシンの蓄積が著しく増加す
ることを見出し本発明を完成した。
従来、フロロピルビン酸感受性の性質を有する微生物変
異株を用いるＬ−インロイシンの製法は全く知られてお
らず、本発明はかかる新規な知見にもとづいて完成され
たものである。
異株を用いるＬ−インロイシンの製法は全く知られてお
らず、本発明はかかる新規な知見にもとづいて完成され
たものである。
以下本発明の詳細な説明する。
本発明に使用する微生物変異株の代表例としては、コリ
ネバクテリウム・グルタミクムＡＣ−Ｈ−２をあげるこ
とができる。この変異株は、コリネバクテリウム・グル
タミクムの野生株ＦＲＲＭＰ−３２９５から、ＵＶ照射
およびＮＴＧ処理によって常法によシ誘導されたアルギ
ニン要求性−８−（２−アミノエチル）−Ｌ−シス（３
） ナイン耐性株ＦＥＢ−３９−２１を親株として誘導した
フロロピルビン酸感受性の変異株であり、フロロピルビ
ン酸感受性を有する点で親株であるＢＢ−３９−２１と
明らかに区別することができる。
ネバクテリウム・グルタミクムＡＣ−Ｈ−２をあげるこ
とができる。この変異株は、コリネバクテリウム・グル
タミクムの野生株ＦＲＲＭＰ−３２９５から、ＵＶ照射
およびＮＴＧ処理によって常法によシ誘導されたアルギ
ニン要求性−８−（２−アミノエチル）−Ｌ−シス（３
） ナイン耐性株ＦＥＢ−３９−２１を親株として誘導した
フロロピルビン酸感受性の変異株であり、フロロピルビ
ン酸感受性を有する点で親株であるＢＢ−３９−２１と
明らかに区別することができる。
以下に上記の７０口ビルビン酸感受性株の誘導方法の具
体例を示す。
体例を示す。
コリネバクテリウム・グルタミクムＳ Ｓ−３９−２１
（アルギニン要求性−８−（２−アミノエチル）−Ｌ−
システィン耐性変異株） （ＦＥＲｔｚｐ−６８３０）
を常法によりＮＴＧ処理（２５０ｆｉｆ／ｒｄ。
（アルギニン要求性−８−（２−アミノエチル）−Ｌ−
システィン耐性変異株） （ＦＥＲｔｚｐ−６８３０）
を常法によりＮＴＧ処理（２５０ｆｉｆ／ｒｄ。
３０℃で３０分間）した後、以下に示す最少寒天培地に
２０μｙ／ｆｔｒｌの７００ピルビン酸を添加した培地
で生育せず、かつ添加しない培地で生育できるコロニー
を分離した。見られた、フ四ロピルビン酸感受性株３０
株を、Ｌ−イソロイシンの生産試験（実施例の方法）に
かけ、親株よりＬ−イソロイシン生産性のすぐれた菌株
としてＡＣ−Ｔ（−２（アルギニン要求性、８−（２−
アミノエチル）−Ｌ−シスナイン耐性、（４） 電池組成ニゲルコースα５％、（冊４）２８０４０、１
５ ％ Ｉ ＫＨ，ＰＯ４０，１５％ Ｔ Ｋ２ＨＰ
Ｏ４０−０５％ ＊ＮｈＣ１Ｏ，０１％＋ ’ＭｆＦ３
０ａ ４Ｈ２００，０５％ ＋ ＣＦＬＣｌｚ ・２Ｈ
，０１μｆ／ｙｄ、 Ｍｎ（Ｊ、・４Ｈ，０７μｙＡｔ
、 ｐｅｓｏ４・７Ｉ（，０１０μに似、チアミン塩
酸塩０．１μに匂。
２０μｙ／ｆｔｒｌの７００ピルビン酸を添加した培地
で生育せず、かつ添加しない培地で生育できるコロニー
を分離した。見られた、フ四ロピルビン酸感受性株３０
株を、Ｌ−イソロイシンの生産試験（実施例の方法）に
かけ、親株よりＬ−イソロイシン生産性のすぐれた菌株
としてＡＣ−Ｔ（−２（アルギニン要求性、８−（２−
アミノエチル）−Ｌ−シスナイン耐性、（４） 電池組成ニゲルコースα５％、（冊４）２８０４０、１
５ ％ Ｉ ＫＨ，ＰＯ４０，１５％ Ｔ Ｋ２ＨＰ
Ｏ４０−０５％ ＊ＮｈＣ１Ｏ，０１％＋ ’ＭｆＦ３
０ａ ４Ｈ２００，０５％ ＋ ＣＦＬＣｌｚ ・２Ｈ
，０１μｆ／ｙｄ、 Ｍｎ（Ｊ、・４Ｈ，０７μｙＡｔ
、 ｐｅｓｏ４・７Ｉ（，０１０μに似、チアミン塩
酸塩０．１μに匂。
ビオチン０，０３μｆ／ｍｌ、アルギニン塩酸塩０．０
１俤、寒天１．５％（ｐＨ７，２）これらの微生物を用
いてＬ−インロイシンを生産せしめるＫは特に困難はな
く、炭素源、窒素源、無機塩類、生育因子等を含有する
通常の栄養培地を用いて常法によって行なうことができ
る。
１俤、寒天１．５％（ｐＨ７，２）これらの微生物を用
いてＬ−インロイシンを生産せしめるＫは特に困難はな
く、炭素源、窒素源、無機塩類、生育因子等を含有する
通常の栄養培地を用いて常法によって行なうことができ
る。
使用する炭素源としては、グルコース、シュークロース
、糖蜜、デンプン加水分解物などの糖類を酢酸９プロピ
オン酸、ギ酸、フマール酸。
、糖蜜、デンプン加水分解物などの糖類を酢酸９プロピ
オン酸、ギ酸、フマール酸。
リンゴ酸などの有機酸類、メタノール會エタノール、プ
ロパツール等のアルコール類、その他炭化水素類等が使
用できる。
ロパツール等のアルコール類、その他炭化水素類等が使
用できる。
窒素源としては、硫安、硝安、塩安、リン安。
尿素、アンモニアその他を使用できる。また、栄養要求
性を示す変異株の場合には、栄養物質を純標品として、
もしくはそれらを含有する天然栄養物の形で添加するこ
とができる。
性を示す変異株の場合には、栄養物質を純標品として、
もしくはそれらを含有する天然栄養物の形で添加するこ
とができる。
Ｌ−イソロイシンの発酵生産のための発酵条件としては
、通気培養がよく、発酵温度は２４〜３７℃、発酵日数
は２〜７日間である。発酵液のｐＨは５〜９の範囲内に
維持されるが、ｐＨ調整には無機あるいは有機の酸ある
いはアルカリ、さらには尿素、炭酸カルシウム、アンモ
ニアガス等を使用することができる。
、通気培養がよく、発酵温度は２４〜３７℃、発酵日数
は２〜７日間である。発酵液のｐＨは５〜９の範囲内に
維持されるが、ｐＨ調整には無機あるいは有機の酸ある
いはアルカリ、さらには尿素、炭酸カルシウム、アンモ
ニアガス等を使用することができる。
発酵液からのＬ−インロイシンの単離は、通常イオン交
換樹脂法、その他公知の方法を組合わせて行なわれる。
換樹脂法、その他公知の方法を組合わせて行なわれる。
以下に実施例を示す。
実施例１
コリネバクテリウム・グルタミクムＡＣ−Ｈ−２（アル
ギニン要求性、５−（２−アミノエチル）−Ｌ−システ
ィン耐性、フロロピルビン酸感受性株）を、２９ｄの種
培地（グルコース（６） ５チ、酵母エキス１チ、ペプトンｔ％、尿素０．３ ％
、 ＮａＣ／ ０．２５％、：ｙ−ｙｘティープリカー
０．５チ、ビオチン５０γＩＩ 、 ｐＨ７，２）を含
む３００ｄ容三角フラスコに接種し、２８℃で２４時間
、２１ Ｏｒｐｍのロータリーシェーカー上で振盪培養
した。この種培養液２ｄを、２０ゴの発酵培地を含む３
００ｄ容三角フラスコに接種して７２時間種培養と同様
の方法で培養した。培養終了液中のＬ−イソロイシンの
蓄積量は１９．６ ＃／−であった。対照とした親株の
５ｓ−ａｓ−ｚｘ（アルギニン要求性−８−（２−アミ
ノエチル）−Ｌ−システィン耐性株）のＬ−イソロイシ
ンの蓄積は１３．８ ｍｙ／ｍｊであった０ 発酵培地の組成は次のとおシ。
ギニン要求性、５−（２−アミノエチル）−Ｌ−システ
ィン耐性、フロロピルビン酸感受性株）を、２９ｄの種
培地（グルコース（６） ５チ、酵母エキス１チ、ペプトンｔ％、尿素０．３ ％
、 ＮａＣ／ ０．２５％、：ｙ−ｙｘティープリカー
０．５チ、ビオチン５０γＩＩ 、 ｐＨ７，２）を含
む３００ｄ容三角フラスコに接種し、２８℃で２４時間
、２１ Ｏｒｐｍのロータリーシェーカー上で振盪培養
した。この種培養液２ｄを、２０ゴの発酵培地を含む３
００ｄ容三角フラスコに接種して７２時間種培養と同様
の方法で培養した。培養終了液中のＬ−イソロイシンの
蓄積量は１９．６ ＃／−であった。対照とした親株の
５ｓ−ａｓ−ｚｘ（アルギニン要求性−８−（２−アミ
ノエチル）−Ｌ−システィン耐性株）のＬ−イソロイシ
ンの蓄積は１３．８ ｍｙ／ｍｊであった０ 発酵培地の組成は次のとおシ。
ｗｔ蜜＜ｙルコースとして）ｘｏｌ、コーンステイープ
リカー０．５チ、塩安２チ、尿素０．２％。
リカー０．５チ、塩安２チ、尿素０．２％。
ＫＨ，ＰＯ，０，２％ｌ ＭｆＦ３０４−７Ｈ，ＯＯ，
０５４１Ｆｅ５０．−７Ｈ，ＯＯ，００１％、 ＭｎＣ
ｇ、−４Ｈ，Ｏｏ、ｏ Ｏ１％ｔＣｕ８０４−ｓＨ，ｏ
ｏ、 ００１ ｆｌｙ ＊ ＣａＣｌ２−２ａ２ｏ
ｏ、ｏ Ｏｆ ’Ｉ）＋（）） ＺｎＳＯ４−７Ｈ２０Ｌｌ１ｇ／ｌ ＊ ＮｉＣ４１Ｎ
１Ｑ／ｌ ＋ モリブデン酸アンモン−４Ｈ，０１１１
１Ｆ／Ａ’ Ｉ ｃｏｃ１２−６Ｈ，ｏ １ｍＱ／ｌ
Ｉ ハフ ） ｆン酸カルシウムｔ ｏ １９／Ｊ
ｙニコチンｐ ｔ ｍｙ力、ビオチン５ｏγＩ１．アル
ギニン塩酸塩０．０５％（ｐＨ７，４） 特許出願人 （１０２）協和醗酵工業株式会社（８）
０５４１Ｆｅ５０．−７Ｈ，ＯＯ，００１％、 ＭｎＣ
ｇ、−４Ｈ，Ｏｏ、ｏ Ｏ１％ｔＣｕ８０４−ｓＨ，ｏ
ｏ、 ００１ ｆｌｙ ＊ ＣａＣｌ２−２ａ２ｏ
ｏ、ｏ Ｏｆ ’Ｉ）＋（）） ＺｎＳＯ４−７Ｈ２０Ｌｌ１ｇ／ｌ ＊ ＮｉＣ４１Ｎ
１Ｑ／ｌ ＋ モリブデン酸アンモン−４Ｈ，０１１１
１Ｆ／Ａ’ Ｉ ｃｏｃ１２−６Ｈ，ｏ １ｍＱ／ｌ
Ｉ ハフ ） ｆン酸カルシウムｔ ｏ １９／Ｊ
ｙニコチンｐ ｔ ｍｙ力、ビオチン５ｏγＩ１．アル
ギニン塩酸塩０．０５％（ｐＨ７，４） 特許出願人 （１０２）協和醗酵工業株式会社（８）
Claims (1)
- コリネバクテリウム属に属し、フロロピルビン酸感受性
を有し、かつＬ−イソロイシン生産性を有する微生物を
培地に培養し、培養物中にＬ−イソロイシンを生成蓄積
せしめ、該培養物よｆｉＬ−インロイシンを採取するこ
とを特徴とする発酵法によるＬ−イソロイシンの製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21569582A JPS59106294A (ja) | 1982-12-09 | 1982-12-09 | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP21569582A JPS59106294A (ja) | 1982-12-09 | 1982-12-09 | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59106294A true JPS59106294A (ja) | 1984-06-19 |
| JPH0160236B2 JPH0160236B2 (ja) | 1989-12-21 |
Family
ID=16676620
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP21569582A Granted JPS59106294A (ja) | 1982-12-09 | 1982-12-09 | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59106294A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0248238A2 (de) * | 1986-06-06 | 1987-12-09 | Degussa Aktiengesellschaft | Verfahren zur fermentativen Herstellung von L-Isoleucin aus D,L-alpha-Hydroxybutyrat |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0351446U (ja) * | 1989-09-26 | 1991-05-20 | ||
| JPH0373958U (ja) * | 1989-11-22 | 1991-07-25 |
-
1982
- 1982-12-09 JP JP21569582A patent/JPS59106294A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0248238A2 (de) * | 1986-06-06 | 1987-12-09 | Degussa Aktiengesellschaft | Verfahren zur fermentativen Herstellung von L-Isoleucin aus D,L-alpha-Hydroxybutyrat |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0160236B2 (ja) | 1989-12-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1162499A (en) | Process for fermentative production of amino acids | |
| US3707441A (en) | Method of producing l-lysine by fermentation | |
| US4169763A (en) | Process for the production of L-lysine by fermentation | |
| JPS6236673B2 (ja) | ||
| KR950005133B1 (ko) | L-발린의 제조방법 | |
| JPS6257315B2 (ja) | ||
| JPH0555113B2 (ja) | ||
| JPS6115696A (ja) | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法 | |
| JP2578492B2 (ja) | 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法 | |
| US3763008A (en) | Process for producing ribosides of heterocyclic organic bases by fermentation | |
| JP3006929B2 (ja) | 発酵法によるｌ−バリンの製造法 | |
| EP0054311B1 (en) | Process for producing l-glutamic acid | |
| JPS59106294A (ja) | 発酵法によるｌ−イソロイシンの製法 | |
| KR920007402B1 (ko) | L-리신의 제조방법 | |
| JPS6224074B2 (ja) | ||
| JP2578474B2 (ja) | Ｌ−グルタミン酸の製造法 | |
| JP3006939B2 (ja) | Ｌ−リジンの製造法 | |
| US4421853A (en) | Fermentative preparation of L-leucine | |
| JPH0644871B2 (ja) | 発酵法によるｌ−ロイシンの製造法 | |
| RU2099424C1 (ru) | Способ получения l-лизина посредством культивирования штамма бактерий | |
| KR910008636B1 (ko) | L-아르기닌의 제조방법 | |
| US5362636A (en) | Process for producing L-lysine by fermentation with a bacteria having selenalysine resistance | |
| US4421854A (en) | Fermentative preparation of L-leucine | |
| EP0098122B1 (en) | Processes for producing l-proline by fermentation | |
| JPH055476B2 (ja) |