JPS59103669A

JPS59103669A - 白血球分離フイルタ−

Info

Publication number: JPS59103669A
Application number: JP58219591A
Authority: JP
Inventors: 徹黒田; 良則竹中; 津田　信明
Original assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd; Asahi Kasei Kogyo KK
Current assignee: Asahi Kasei Corp; Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1983-11-24
Filing date: 1983-11-24
Publication date: 1984-06-15
Also published as: JPS6328412B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、血液、体液またはこれらを処理して得られる
血球浮遊液から白血球、リンパ球を選択的に捕捉、採取
するための白血球の分離フィルターに関するものである
。

近年、血液学、免疫学の進歩に伴ない、血液の成分輸血
、白血球の機能検査、白血球の表面抗原の検査、リンパ
球のサプボビ゛ニレージョンの比率測定等を行ない、各
種疾患の治療、診断等に応用されている。さらにヘルパ
ーＴ細胞やサプレッサーＴ細胞などのサブセットに分類
、分離する試みなどが広く各地の病院、研究機関で行な
われ始めている。

こ、のような目的に使用可能な従来の白血球、リンパ球
の捕捉・採取技術としては、赤血球凝集剤を用いる方法
、遠心分離法、繊維への粘着力を利用する方法等がある
。

さらに詳しく述べると、赤血球凝集剤を用いる方法は血
液にデキストランやヒドロキシエチルスターチなどの赤
血球凝集剤を加え、一定時間放置後に白血球に富んだ上
清を得る方法であり、遠心分離方法は血液を遠心分離し
て白血球に富むバッフイーコートを採取する方法、比重
１．０７７の液体に血液を重層後、遠心分離を行ない、
リンパ球層を回収する密度勾配遠心分離方法等である。

繊維への粘着力を利用する既知の方法は、繊維に単球・
顆粒球を付着させ、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水
等によシ付着した血球を回収する方法、凝集剤や遠心分
離器の使用により白血球に富む分画を得、その後この白
血球分画をナイロン、ガラスウール等の繊維を詰めたカ
ラムに入れ、３７Ｃに保温し５０分位放置した後リンパ
球を回収する方法である。

しかし、これらの方法は、採取した白血球、リンパ球分
画に赤血球、血小板の混入が多いという大き女欠点を持
っていた。赤血球、血小板の混入が多いと、白血球、リ
ンパ球を用いた各種検査に対して測定誤差の大きな原因
となり、また、混入年が多過ぎると検査不能に陥ること
もしばしば起こり、大きな問題であった。

個々の方法につｂて述べると、赤血球凝集剤を用いる方
法では、赤血球が白血球の数倍から十数倍混入し、血小
板になると白血球の数十倍も混入する。遠心分離法のう
ち、バッフイーコートを使用する方法では、赤血球、血
小板の混入は白血球の数倍から士数倍あり、密度勾配遠
心分離法では、血小板はリンパ球の数倍以上ある。赤血
球はリンパ球の１／１０以下にできるが、患者血液等一
部の赤血球の比重が小さくなっている場合には、赤血球
がリンパ球の数倍から士数倍になってしまうことが多か
った。また、操作が煩雑であり、かつ分離するのに長時
間を要するため、得られた白血球がダメージを受け、白
血球の機能低下および生存率の低下がみられることが多
い。繊維への血球の粘着力を利用する従来の方法では、
赤血球、血小板共リンパ球、顆粒球の数倍から士数倍に
なってしまうことが多かった。

本発明者らは上述の問題に着目し、白血球、リンパ球を
捕捉、採取する方法において、採取された白血球、リン
パ球に対してその他の成分の赤血球、血小板の混入を非
常に少なくする仁とを目的に鋭意研究した結果、水に対
し０　、３　ｍＱ／ｍｉｎ　−ｃｒ＆から１．０■／１
ｔｒｊｒ　−ｄｔの溶解速度で溶解する物質を繊維状物
質表面にコートした白血球分離材を容器に納めた分離フ
ィルターを使用すると、上記目的が達成されることを見
出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、繊維状物質表面に水に対し０．３
　ｍｇ／ｍｉｎ　−ｃｒ／ｌから１．ｏ　ｍｙ／１ｍ、
ｃｒ／ｌｏ溶解速度テ溶解する物質をコートした白血球
分離材が容器に納められてなることを特徴とする白血球
分離フィルターである。

以下、本発明の構成について詳細に説明する。

本発明の繊、錐状物質とは、平均直径に比べて長さが非
常に長いものを言い、平均直径（Ｄ）とは、そのもの＼
重さをｘｆ、長さをＹ　Ｃｍ　％密度をρｆ／ｃｆＩｔ
繊維状物質の平均直径は、特に限定されないが、白血球
を効率よく捕捉するためには、平均直径が１０μｍより
小さいものが好ましく、さらに捕捉された白血球を回収
することまで考えると、平均直径が７〜１０μｍの本の
が好ましい。繊維状物質の素材としては、白血球に害を
与えず、水に対し　Ｏ，３ｍｑ／ｗｉｔｒ　−ｄｌ　カ
ら１　、　ＯＩｎ９／１ｍｌ　−ｄ　Ｏ溶解速度で溶解
する物質がコートされる物質であれば特に限定されない
が、たとえばポリアクリロニトリル、ポリエステル、ポ
リアミド、セルロースアセテート、キュプラアンモニウ
ム法レーヨン等の合成繊維、半合成繊維、再生人造繊維
、綿等の天然繊維等が挙げられる。

本発明において、上記繊維状物質の表面にコーティング
する物質は、水に対しｏ、５ｍｇ７騙・ｄから１、　Ｏ
ｍｔ２／ｖｔｊｒ　−ｃｒ／ｌの溶解速度で溶解する物
質であることが必要である。

こ＼で言う溶解速度とは、以下に述べる測定方法によっ
て得られる数値であると定義する。

測定には、第１図ないし第３図に示される容器Ｑｌを使
用するが、第１図は該容器の正面図、第２図は側面図、
第３図は平面図である。この容器α場は、内径が縦（イ
）３０１１１１．横（ロ）６１朋、深さくう１５Ｉｍで
あり、両側面の中央、内底から畠さくニ）５　ＩＩＩの
ところに内径（ホ）２露諷の流水管（イ）が取り付けら
れている。

該容器の内側底面に被測定物質の被膜（表面積１８ｊｄ
）を形成する。被測定物質は、２００＃ｌ１９使用し、
均質な被膜を作る。

この被膜の形成方法は特に限定されないが、たとえば１
０９７ｄｉの濃度に調製された被測定物質の水溶液２−
を帥記容器に入れ、底面全体に広げ、蓋を外した状態で
５７０のふ卵器中で充分乾燥することによって形成する
ことができる。この場合、被膜が割れ易い物質について
は、室温で乾燥する等、条件をマイルドにし、均質な被
膜を作るようにする。

次に定面に被膜を形成した容器を第４図に示される装置
にセットする。図中、ＣＤは底面に被膜を形成した容器
、■は水の入ったビーカー、（ハ）はポンプ、（２荀は
振とり機を表わす。

まず、容器（２１１中にビーカー＠よＦ）５０Ｃの水を
ポンプ（瀾によって５−／−の流量で送り、容器Ｑυか
ら溶出してきた被測定物質をサンプリングし、経過時間
に対する溶出量を測定する。この際、容器Ｑυは水平に
保ち、振とう器Ｑ４によって常に振とうしておく。振と
うの方法は、水平運動であって水の流れの方向け）に対
して１秒当り３ｃｍの１往復動作（ｙ　＝　１，５　ｃ
ｏｓ２＋ｒ　ｔ　［画］、ｔは時間［−））、流れに対
して垂直方向（Ｘ）に対して１秒当り２副の２往復動作
（ｘ　＝　−ｓｌｎ　４　＊　ｔ　［ｔＭ〕、ｔは時間
〔式〕）が同時に与えられる８の字運動を行なわせた。

容器ＱＢから溶出した被測定物質は、たとえば４分毎（
２〇−毎）にサンプリングし、その時間に対する溶出パ
ターンを描く。

このようにして描いた被測定物質の溶解ノくターンは、
第５図のようになシ、曲線ａは溶解速度の速いものであ
って、ｂ％Ｃの順に溶解速度は遅くなっている。本発明
においては、この溶解パターンのうち、直線性の良い部
分を選び、溶出時間が８分の時点での一定表面積（１８
，３ｍ）を本つ被測定物質の溶出量から物質の溶解速度
を定義した。

すなわち、（溶解速度）＝（溶出時間が８分の時の物質
の溶出量〜）÷（８順Ｘ１’８ｊｄ）（ダ／順・ｄ〕（
たソし、測定方法は前記した方法による）と定義する。

上記のような溶解速度において、水に対し０．３ｍｙ／
ｙｍ　・ｃｌから１．　ｏ　ｍｙ７ｗｔｓ・ｄで溶解す
る物質（以下、赤血球付着阻止物質と呼ぶ）によって、
赤血球や血小板の白血球分離材への付着を抑制する効果
が得られるのであるが、その理由は、繊維状物質表面上
の該物質が徐々に流出しているために、赤血球や血小板
が繊維状物質に付着し難くなるためと考えられる。

溶解速度が０．３■／ｒｍ　−ｃｔｌｌよりも遅い物質
では、繊維状物質から流出する量が微量すぎて上記効果
が乏しく、溶解速度が１．０　ｍｙ／ｙｎｉｙｒ　−ａ
ｆｔより本早い物質でけ、繊維状物質からすぐに流出し
てしまうために、繊維状物質が未コートの状態となって
しまう。

水に対する溶解速度が１．０η／ｒｔｒｉｓ・ｄよシ早
い物質でも、繊維状物質表面に大量にコートしたシ、分
離する血液が少量であったシ、流速を速くしたり、温度
を下けたシすれば、赤血球や血小板を白血球分離材に粘
着するのを防ぐことができる。すなわち、赤血球や血小
板が白血球分離材と接触する間だけ繊維状物質表面にコ
ートした物質が血液中に溶は出していれば、赤血球や血
小板は繊維状物質表面に粘着し難くなるからである。し
かし、実際には繊維状物質表面のコート物質の厚みには
限度があること、また血液の流速を上げる場合には白血
球が洩れ易くなル、白血球の回収率が悪くなること等か
ら、赤血球付着阻止物質の溶解速度は１　、　Ｏｐｎｇ
／ｍ　−ａｄ以下が必要である。

また溶解速度が０．５ＩｎＪｇ／ｍ・ｄより遅い物質で
も、流速を上げたり、物理的な振動を与えたり、温度を
上げたりして繊維状物質表面上のコート物質を血液中に
溶は出し易い状態にしてやれば、赤血球や血小板が白血
球分離材に付着し難くなる。しかし、実際には流速を上
げたり、物理的な振動を与えると、白血球が洩れ易くな
って白血球回収率が下がり、また、温度を過剰に上げる
と血液が変性してしまうため、溶解速度はｏ　、　３ｍ
ｇ７ｍｍ　−ｉ以上が必要である。

繊維状物質にコートするための赤血球付着阻止物質の素
材としては、白血球に対して害を与えないものであれば
特に限定されないが、たとえばゼラチン、カゼイン、ポ
リビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリメチ
ルエーテル等が挙げられる。特にゼラチン、カゼイン等
の蛋白質は、白血球に悪影響を与え難いという点で優れ
ている。

繊維状物質に赤血球付着阻止物質をコートする方法は、
特に限定されないが、たとえば白血球分離操作を行なう
直前に、赤血球付着阻止物質の等張溶液を該繊維状物質
表面に接触させることＫよってコートすることができる
。すなわち、繊維状物質表面への赤血球付着阻止物質の
付着量は、少なくとも単分子層以上あればよく、必ずし
も吸着していなくてもよい。該付着量は、血液量、洗浄
量、流速等の使用条件によシ適宜選定する。また、あら
かじめ繊維状物質表面に赤血球付着阻止物質を付着させ
、乾燥しておいたものを使用することもできる。たｙし
、白血球分離材と血液澹襞触する際には、繊維状物質表
面上のコート物質がウェット状態になっている方が好ま
しい。

本発明の白血球分離フィルターは、上記白血球分離材が
容器に納められてなるものである。この場合、白血球分
離材は充分はぐされた状態であることが好ましい。容器
の中に入れる白血球分離材の嵩密度は、乾燥した状態で
ｏ、ｏ　ａ　ｙ　７７以上０．４ｆ／ａｔ以下が好まし
い。嵩密度が低すぎると白血球を充分捕捉することがで
きなくなり、収率が悪くなる。また、嵩密度が高過ぎる
と白血球の捕捉は十分されるが、回収率が悪くなったり
、赤血球が残シ易くなったシする弊害がでてくる。特に
好ましい嵩密度の範囲は０．０４　ｆ／ＣｒＡ以上、Ｑ
、２５　ｆ／ａｌｌ以下である。

本発明の白血球分離フィルターは、たとえば第６図のよ
うに構成される。すなわち、白血球分離材（１）が液体
の入口（２）、出口（３）を持った耐水容器（４）に収
められて構成される。メツシュ（５）　、　＋６１は、
白血球分離材（１＋が容器（４）の外に洩れ出すのを防
ぐためにある。

次に、本発明の白血球分離フィルターを用いて白血球を
分離する方法について、例を挙げて説明する。第７図の
例において、（力は本発明の白血球分離フィルターであ
シ、この白血球分離フィルター（７）内の白血球分離材
は、繊維状物質に赤血球付着阻止物質をコートし、乾燥
状態にしであるものを用いた場合として説明すれば、先
ず、ポンプ（８）により、容器（９）内の生理的溶液Ｏ
ｌを白血球分離フィルター（７）に送り、白血球分離フ
ィルター（力内の白血球分離材表面をウェット状態にす
る。次に、導入口Ｑｌ）を容器Ｑ暖に入れ替え、血液量
を白血球分離フィルター（力に送る。この白血球分離フ
ィルター（力において白血球が選択的に捕捉され、血漿
、赤血球、血小板は殆んど捕捉されずに白血球分離フィ
ルター（力を通過し、容器Ｑ４）に送られる。さらに導
入口Ｕυを容器（９）Ｋ戻し、生理的溶液（ＩＩ’ｆｉ
＝白血球分離フィルター（７）に流すことにより、血漿
、赤血球、血小板は洗い流され、白血球分離フィルター
（力内には血漿、赤血球は殆んど残留せず、血小板も僅
かしか残らない。すなわち、ｔ１ソ純粋に白血球だけが
捕捉されている。なお、図中０９は白血球分離フィルタ
ーの出口である。

次に、第８図の例は、白血球の表面抗原を測定する場合
や、リンパ球の亜分画を測定する際に必要なリンパ球の
みを採取するための装置であり、単球、顆粒球は前もっ
て単球、顆粒球の分離フィルターαｅによって捕捉され
て取り除かれ、リンパ球が白血球分離フィルター（力に
はソ純粋に捕捉される。図中、αＤは容器、Ｑｌはシリ
コンゴム、（ハ）は白血球分離フィルター（力の入口で
ある。

このように簡便に純粋に白血球だけがフィルターに捕捉
できる技術は今までになく、本発明の白血球分離フィル
ターを用いることによって始めて可能になった。この後
、物理的衝撃等を与えながら白血球分離フィルター（力
内に捕捉されている血球を回収すると、収率良く白血球
が回収され、白血球に対する赤血球、血小板の混入率は
非常に低い。

一般に、繊維を詰めたフィルターを用いて白血球を分離
しようとするとき、血液を流し、その後、生理的溶液で
フィルターを洗浄することによって、かなり多くの赤血
球を洗い流すことができる。しかし、もともと血液中に
は、赤血球が白血球の１０００倍位含まれているため、
フィルター内に残る赤血球は少量であっても、白血球の
数倍から数十倍のオーダーになってしまう。本発明の白
血球分離フィルターによれば、白血球分離フィルター内
に残存する赤血球は、白血球の数分の−から数十分の一
以下まで減らすことができる。これは、赤血球付着阻止
物質が適当な溶解速度を持っているため、繊維状物質表
面から赤血球付着阻止物質が常にわずかずつ流出し、変
形能の大きい赤血球は繊維状物質表面に付着し難くなる
からである。

一方、白血球は変形能が小さく粘着能も高いため、繊維
状物質のクロスした部分や繊維状物質表面に捕捉される
ものと考えられる。

次に、赤血球付着阻止物質の水に対する溶解速度と白血
球分離における混入赤血球との関係について述べる。

第９図は水に対する溶解速度と混入赤血球濃度との関係
を示すグラフである。実験は以下に述べる方法で行なっ
た。

実験に用いた物質はゼラチン、カゼイン、ポリビニルア
ルコール、ポリビニルピロリドン、ポリメチルビニルエ
ーテル、糖等で、分子量の違うものや繊維状物質にコー
トした後、架橋して用いたものもある。繊維状物質とし
ては、平均直径が８．２μｍのポリアクリロニトリル繊
維を用い、これをよく開繊して直径１０龍、長さ２５攬
讃の容器に０．２６　ｆ詰めてフィルターとした。各種
物質のコート方法は、各種物質の３．５％等張溶液（粘
度が高くなり過ぎる物質については２，５９４等張溶液
）を作り、この溶液をフィルターに５−／−の流速で５
分間循還することによって行なった。

白血球分離操作は、上記のフィルターに３７Ｕの血液を
５ｍ、１ｄ／Ｎ１Ｉｔの流速で流し、次に生理食塩水２
０−を５−／ｉの流速で流し、赤血球を洗浄した。その
後、２−の生理食塩水を急速に流し、フィルター内に捕
捉されていた白血球を回収し念。この回収液中の赤血球
濃度を混入赤血球濃度として縦軸にとり、前記した方法
で測定した物質の溶解速度を横軸にとつ友のが第９図の
グラフである。

なお、第９図において、Ａはゼラチン（水に不溶化）、
ｎはポリビニルアルコール（重合度１２００）、Ｃはゼ
ラチン（分子量１１万）、Ｄはポリメチルビニルエーテ
ル、Ｅはゼラチン（分子量６万）またはポリビニルピロ
リドン（分子量３６万）またはカゼイン、Ｆはポリビニ
ルアルコール（重合度５００）、Ｇはゼラチン（分子量
３万）％Ｈは糖、ゼラチン（分子量４〜７千）−％　Ｉ
はポリビニルピロリドン（分子量４万）を用いたものを
示す。

第９図から明らかなように、水に対する溶解速度力０．
３　ｔｒｔｇ／ｍ　・ａｔから１．Ｏ＃Ｉ９／ｍ−ｄノ
範囲にある物質をコートした場合に限って、混入赤血球
濃度が１０００／μを以下になることがわかる。安定的
に１０００／μを以下にするため罠は、溶解速度が０．
４　ｔｎｇ／ｒｍ　−ａｄから０　、９　ｍｙ／１ｍ　
−Ｃ１ｌ　（Ｄ範囲の物質を用いるのが好ましい。同じ
物質、たとえばポリビニルピロリドン、ゼラチン等でも
分子量の違いや架橋することによって、水に対する溶解
速度が速すぎた力、遅すぎたりすると、混入赤血球減少
の効果が薄れることがわかる。

以下、実施例を挙げて説明する。

実施例において用いた血液は、健康な人から採取した血
液１−に対して５単位のヘパリンを加えたヘパリン加血
液であり、赤血球数は４１０万／μｔから４８０万／μ
ｔ、白血球数は５０００／μｔから８５００／μｔ（リ
ンパ球が２５〜４５チ）、血小板数は１３万／μｔから
３２万／μｔの範囲に入っているものを用い友。

実施例１第７図に示す実験装置を用いて白血球の分離実験を行な
った。直径１０１ｍ、長さ２５１の容器に平均直径８．
２μｍのポリアクリロニトリル繊維を０．２６　ｆ詰め
、これに５．５ｆ／ｄｉに調製した水に対する溶解速度
が０　、６１　ｍ９７Ｍ−ｃｒ／ｌのポリビニルアルコ
ール（重合度５００）の生理食塩水溶液を充填して白血
球分離フィルター（力とした。これに人のヘパリン加血
液３−をポンプ（８）により１ゴ／馴の流速で流し、次
に生理食塩水を５　ｔｎｔ　／　ｒａｉｎの流速で２０
−流し、赤血球を洗い流した。この後、白血球分離フィ
ルター（７）の出口α９に生理食塩水２−を入れた注射
器を取シ付け、白血球分離フィルター（７）内に捕捉さ
れている白血球を勢いよく流出させた。得られ九回収液
を検査したところ、白血球は４２％回収され、混入した
赤血球は白血球に対して１／８、濃度にして４００／μ
ｔであった。

比較例１ポリビニルアルコールの生理食塩水溶液を充填しなかっ
たこと以外は、実施例１と同様に実験した。その結果、
白血球’Ｂａａｑｂ回収されたが赤血球は白血球の７．
６倍、濃度にして２５０００／μｔもあった。

実施例２３．５１／ｄｉにＩｔ１４製した水に対する溶解速度が
０．６１〜／ｍ１ｔｔ−ａｔのポリビニルアルコールの
代ワリに％ｓ、ｓｒ／ｄｔに調製した水に対する溶解速
度が０．６２〜／馴・ｄのゼラチン（分子量６万）を用
いた以外は、実施例１と同様に実験した。その結果、白
血球は３８−回収され、混入した赤血球は白血球に対し
て１／２９、濃度で１００／μｔであった。

比較例２５．５ｆ／μに調製した水に対する溶解速度が０．６１
１ｒＱ／−・−のポリビニルアルコールの（ｌに、５．
５ｔ／ｄｅＫ、調製した水に対する溶解速度が０．６２
〜／−・−のゼラチン（分子量６万）を酵素により分解
し、水に対する溶解速度を１．１　ｓ　ｍｇ７ｗｔｉｔ
ｔ−ｃｒｔ（分子量４千〜７千）Ｋしたものを使用した
以外は、実施例１と同様に実験した。その結果、白血球
は４０チ回収されたが、混入した赤血球Ｆｉａ倍、濃度
で２４０００／μｔであった。

実施例３５．５９７ｄｌに調製した水に対する溶解速度が０．６
１ｍｆ／ｒｍ・ｄのポリビニルアルコールの代わりに、
Ｓ、５９７ｄｔＫ調製した水に対する溶解速度が０、Ｓ
　７　ｆＲｇ／ｍ−ｃｎのポリメチルビニルエーテルを
用いた以外は、実施例１と同様に実験した。その結果、
白血球は４０チ回収され、混入した赤血球は白血球に対
して１１５、濃度で７００／μｔでおった。

実施例４第８図に示した実験装置を用いてリンパ球の採取実験を
行なった。白血球の分離フィルター（７）として内径１
０龍、長さ２６ｍ１Ａの容器の中に白血球分離材０．５
０　ｆ詰めた本のを用いた。白血球分離材は平均直径７
．８μｍの綿状のポリアクリロニトリル繊維をｙｙｌｄ
ｔＫ醐Ｂしたカゼイン水溶液にディップし、その後遠心
して余分のカゼイン金線き開繊、真空乾燥して作った。

このカゼインの水に対する溶解速には０　、４５　ｍｙ
／ｒｒｒｍ　−ｃｌ　ｆ　Ｉ）　ツｆｃ。単球、顆粒球
の分離フィルター（１６１としては内径１０１１１１゜
長さ７５１ｆｆｌｌｌの容器に平均直径が２０．８μｍ
のボリアＳＦ″＃ｊ！Ｍ　Ｏ，８８ｆを綿状にして詰め
たものを用いた。

まず生理食塩水０Ｑをポンプ（８）Ｋより単球・顆粒球
の４ｍ捉ラフイルターＥｌおよび白血球の分離フィルタ
ー（７）に充填し、その後、導入口０υを容器＋１３に
移し３７Ｃに保温した人ヘパリン加血液０３）を１−７
分の流速で５ｍｌ、単球・顆粒球の捕捉フィルター叫に
送った。次に、導入口を容器αηに移し、シリコンオイ
ル四を１−７分の流速で流し、単球・顆粒球の捕捉フィ
ルター内ｌ内に残留している血液を白血球分離フィルタ
ー（７）に送り出した。その後、単球・顆粒球の捕捉フ
ィルターｔｔｅを取り外し、白血球の分離フィルター（
７）の入口（１１から生理食塩水（１呻を２０ｍ、５ｄ
／分の流速で送り、白血球の分離フィルター（７）を洗
浄した。次に白血球の分離フィルター（７）を外し、白
血球分離フィルター（７）の入口ａ１に生理食塩水２−
を入れた注射器を取り付け、フィルター内の白血球を勢
いよく流出させた。得られた回収液を検査したところ、
リンパ球は１８チ回収され、リンパ球に対する混入赤血
球は１１５、濃度で１８０／μｔであった。

実施例５実施例４と同じ実験装置で７１７ｄｌに調製したカゼイ
ンの代わシに、５．５　ｆ　／ｄｌＫ調製したポリビニ
ルアルコールを使用した以外は、実施例４と同様に実験
した。本実験で使用したポリビニルアルコールの水に対
する溶解速度は０，７　ｙ　ｍｇ７ｖｒｍ−ａｒｔであ
った。この実験の結果、リンパ球は１６％回収され、リ
ンパ球に対する混入赤血球は１／４、濃度で２００／μ
ｔであった。

実施例６第７図に示す実験装置を用いて内径１８＃１１１１長さ
１００龍の容器に平均直径８．５μｍのポリエステル系
合成繊維３．３２を綿状にして詰め、これに、２９７ｄ
ｌＫＷＡＭしたポリビニルピロリドンの生理食塩水溶液
を充填し、白血球分離フィルターとした。ポリビニルピ
ロリドンの水に対する溶解速度はｏ、５Ｉｎ９／＝・ｄ
であった。この白血球分離フィルターに人ヘパリン加血
液１００−を５−７分の流速で流し、次に生理食塩水を
１０ゴ／分の流速で２００１ｄ流して赤血球を洗い流し
た。この後、血漿を含む生理的溶液１００−を１０−７
分の流速で流してフィルターに物理的外力を加えながら
フィルター内の白血球を回収した。回収した液を検査し
たところ、白血球が５４係回収され、混入した赤血球は
白血球に対して１／１３、濃度で２００／μｔであった
。

実施例７繊維状物質として、平均直径が１３．５μｍのポリエス
テル系合成繊維６ｆを使用した以外は、実施例６と同じ
条件で実験した。その結果、白血球の回収率は４０係で
あシ、混入した赤血球は白血球に対して２１５、濃度で
８００／μｔであった。

以上述べたように本発明の白血球分離フィルターによれ
ば、血球浮遊液から白血球を採取するに桶り、採取した
白血球に対して混入する赤血球を大幅に減らすことが可
能となシ、また血小板についても少なくすることができ
るようになった。また、操作方法も簡便であシ、操作時
間も短いので白血球に与える影響も少なかった。このよ
うにして得られた白血球は、各種臨床検査の信頼性を充
分に高めた。

【図面の簡単な説明】

第１図は物質の溶解速度を測定する際に用いる容器の正
面図、第２図は核容器の側面図、第５図は該容器の平面
図、第４図は物質の溶解速度を測定する際に用いる実験
装置を示す図、第５図は代表的な物質の溶解速度を示す
グラフ、第６図は本発明の白血球の分離材を容器に詰め
て構成した白血球分離フィルターを示す断面模式図、第
７図は本発明の白血球分離フィルターを使用して白血球
分離法を行なう際に用いる装置の一例を示す説明図、第
８図は該装置の他の一例を示す説明図、第９図は物質の
溶解速度とその物質を繊維状物質にコートして、白血球
分離操作を行なったときの混入赤血球ａ度との関係を示
すグラフである。１・・・・・・白血球の分離材　２・・・・・・入口　
５・・・・・・出口４・・・・・・容器　５，６・・・
・・・メツシュ　７・・・・・・白血球分離フィルター
　８・・・・・・ポンプ　？、１１．１２，１４゜１７
・・・・・・容器　１０・・・・・・生理的溶液　１１
・・・・・・導入口１３・・・・・・血液　１５・・・
・・・出口　１６・・・・・・単球・顆粒球の分離フィ
ルター　１８・・・・・・シリコンオイル１９・・・−
・・入口第１図　　　　　　　第２図１９第３図第４図１第５１溶、ｆ、時間［ｍ１ｎｌ第８図＋１：ｌ　　　　　１５　　　　１（Ｊ第９図

Claims

【特許請求の範囲】

（１）繊維状物質表面に水に対し０　、５　ｍ９　／　
ｍｍ　−ｃｒｌｌ　カら１．０　ｍｙ／ｍ１ｔｔ　−ｃ
ｒｌｌの溶解速度で溶解する物質をコートした白血球分
離材が容器に納められてなることを特徴とする白血球分
離フィルター。
（２）水に対し０　、３　ｍｇ／ｍｉｎ　−ｃｒｌから
１　、’Ｏｍｑ／ｒｎｉｑ　−ｃｒｌｌ　ｃ７）溶解速
度で溶解する物質がゼラチンおよび／またはカゼインで
ある特許請求の範囲第１項記載の白血球分離フィルター
。
（３）繊維状物質の平均直径が１０μｍ以下である特許
請求の範囲第１項または第２項記載の白血球分離フィル
ター。