JPS586448B2 - ステビアノ バイヨウホウ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はステビアの培養法に関し、特に栄養培地で無菌
的に培養することを特徴とするステビアの培養法に関す
る。

ステビア（Ｓｔｅｖｉａ ｒｅｂａｕｄｉａｎａ Ｂｅ
ｒｔｏｎｉ）は、甘味度が砂糖の約３００倍でしかも人
体に吸収されない極めて有意義な天然甘味物質、ステビ
オサイドを主に葉に含有する植物体であるが、既に原産
地パラグアイには少なく需要に見合う絶対量が不足して
いる。

この供給量を増加させるため最近日本国内でもその栽培
が手がけられているが、ステビアは寒冷、特に霜に弱く
しかも不稔種子が多いため国内での計画栽培は困難を極
めている。

本発明者らはこの困難を解決しステビアの計画栽培法を
確立すべく研究を重ねた結果、本発明になるステビアの
培養法を見い出すに至ったものである。

即ち本発明のステビアの培養法はステビア植物を成長点
を含むように切断したものを、殺菌し、炭素源を含むｐ
Ｈ ６． ０〜８．０の滅菌した培地に入れ、温度３０
℃前後で無菌的に培養することを特徴とするステビアの
培養法であって、ステビア植物がｐＨ ５． ５以下及
びｐＨ ８． ５以上及び温度２２℃以下及び３８℃以
上では非常に生育が悪く、枯れ死するものが出てくるの
で葉の収量が悪くなることおよび成長点が無い部位を培
養しても成長は行われないことに留意したものであって
、殺菌したステビアを滅菌した栄養培地で培養すること
によりステビアの成長を速め、以って、ステビアの計画
生産と増収を行うものである。

本発明に使用される栄養培地には、ギャンボーグ（ Ｇ
ａｍｂｏｒｇ ）氏培地、ムラシゲ・スコーグ（Ｍｕ
ｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓ ｋｏｏｇ ）氏培地、ヘラー
（Ｈｅｌｌｅｒ）氏培地、春日井試液等一般に植物組織
培養や水耕栽培に使用される無機成分の培地に、ビタミ
ン、アミノ酸、酵母エキス、カサミノ酸、ペプトン等の
有機物、オーキシン類、サイトカイニン類、ジベレリン
等の植物ホルモンを添加したものが使用されるが、ステ
ビアの移植前ｔこあらかじめオートクレープ等で殺菌し
て無菌的にしておくことが必要である。

又、この栄養培地にはステビアの培養初期において、ク
ルコース、シュクロース等の糖、ソルビット、マルチト
ール等のアルコールなどの炭素源を添加する必要がある
が、光照射下ではステビアの成育ｋこ従い炭酸同化作用
が盛んになるので炭素源の供給は不用となる。

このような栄養培地に移植されるステビアは、茎に本葉
が２枚以上付くか先端部に成長点が付くようステビアの
植物体を適当な大きさに切断し殺菌して無菌的にしたも
のでなければならない。

殺菌は例えば７０％エタノールに浸漬後滅菌水で洗浄す
ることによって行う。

上述のように滅菌された栄養培地に殺菌されたステビア
の植物体を移植し無菌的にステビアの培養を行うのであ
るが、ステビアの成長をさらに促進させるためには、培
養温度をステビアの生育温度範囲中３０℃前後に保持す
ることが最適であり、培地のｐＨは６．０〜７．５にす
るのが好ましい。

光条件も、明所、暗所いずれでも成育するが光を照射し
た方が植物の炭酸同化作用を促進するためステビアの成
長が良くなると共に甘味成分ステビオサイドの含有量が
高くなるので有利である。

又、液体培地で培養を行う場合は振盪でも静地でも良く
生育する。

このような条件でステビアの培養を行うと、２〜３日目
頃より葉のつけ根からは腋芽が、生育先端部では先端部
がそれぞれ急速に生長し、その後分枝して約２週間で数
十倍に成育する。

ステビアは移植時にも成長が著しくなった時点でも水耕
栽培のようには発根することなく成育を続け、成育につ
れ前述の如く炭素源の補給は不用となり、無機成分を補
給することによって更に成育を続ける。

培養された植物体は官能的にも甘味を有し、ガスクロマ
トグラフィーや薄膜クロマトグラフイーによってステビ
オサイドの存在が確認された。

以下、実施例を示し、本発明を具体的に説明する。

実施例 Ｉ 表ｌのＧａｍｂｏｒｇ氏培地を３００ｒＩＬｌの三角コ
ルベンに２０ｍｌ分注しオートクレープで殺菌を行いあ
らかじめ無菌的に培養したステビアを本葉が２枚つくよ
う約２ｃｍに切断して７０％エタノールで殺菌した後滅
菌水で洗浄し、コルベン毎に各１本移植した。

３０゜Ｃの温度、植物栽培用螢光灯２ ５ ０ ０ ｌ
ｕｘを終日照射、７０〜８０ｒｐｒｒＶ／ｍＩｎで振温
培養したところ３日目より葉のつけ根から茎が成長しは
じめ１０日目には茎長約６ｃｆｒＬの茎が２本成長した
。

ここで古い培地を捨て新たにグルコースを含まない表ｌ
のＱａｍｂ ｏ ｒ ｇ氏培地を無菌的に２０ＴｒＬｌ
加え培養を続けたところ、更に分枝生長し２０日目には
茎数１５本、茎長約６〜８ｃＩｒＬｌこ成長した成長過
程中発根はなかった。

得られたステビアの官能検査を行ったところ通常栽培と
同様の甘味を有し、薄層クロマトグラフイーによってス
テビオサイドの存在が確認された。

実施例 ■ 実施例Ｉで得られたステビアを本葉が４〜６枚つくよう
に約４ｃｆｒＬに無菌的に切断し、表ＩのＧａｍｂ ｏ
ｒ ｇ氏培地、Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓｋｏｏｇ
氏培地を２０ＴＬｌ分注し殺菌を行った３００ｒＩｌｌ
三角コルベンに各５本移植し、実施例Ｉと同様に培養を
行った。

３日目より移植植物体１本につき３〜６本の茎が成長し
はじめ各コルベン内の茎数は■０数本から２０数本にな
った。

７日目にグルコースヲ含まない同培地を各コルベンに加
え培養を続けたところ１５日目でコルベンいっぱいに成
長したが、発根はなかった。

得られたステビアを検査したところ実施例Ｉと同様で、
Ｇａｍｂｏｒｇ氏培地、Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓｋ
ｏｏｇ氏培地との成長、甘味度の差異はなかった。

実施例 ■ 以下に本発明の方法と従来法との比較表を示す。

この表はステビオサイド収量を比較するために行われた
本発明の方法と従来法（サシ木による露地栽培）との比
較結果を示すものであって、比較試験ではステビア植物
を葉が６枚つくような試料に切断し、検体数は３６本と
し、Ｇａｍｂｏｒｇ培地、Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ ＆ Ｓ
ｋｏｇ培地による培養は実施例ｉｔこもとづいて行い
、Ｇａｍｂｏｒｇ培地とＭｕｒａｓｈｉｇｅ＆Ｓｋｏｇ
培地との混合培地は実施例■にもとづいて行った。

各培地【こよる培養終点は、培地を１回交換後ステビア
植物が３００ｄユルベン中｛こいつぽいになり、かつリ
ンがほぼ消費された時点を終点とした。

ステビオサイドの抽出、定量は、各検体のステビア植物
から葉のみを収獲し、メタノールで４時間抽出後５％硫
酸メタノールで１５分間加水分解したものを、ガスクロ
マトグラフィーで定量した。

表■から知られるように、本発明方法によるステビアの
培養は、■日当りのステビオサイド総収量（３６検体分
）が従来法の約１．２〜１．６倍となり、非常に有利な
ステビア培養方法であることが明らかである。

以上の実施例からも明らかなように本発明によれば、自
然栽培のように自然条件に左右されずにステビオサイド
の原料であるステアピアを安定供給できると共に、無菌
的に培養することによってステビアの生長を著しく速め
ることができるからステビアの供給を短期間で計画的に
行うことができ、さらに、培養中に発根現象がないから
ステビオサイドが主に含有される葉の生長に培地栄養を
有効に利用できる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ ステビア植物を成長点を含むように切断したものを
   殺菌し、炭素源を含むｐＨ６．０〜８．０の滅菌した培
   地に入れ、温度３０℃前後で無菌的に培養することを特
   徴とするステビアの培養法。