JPS5835117A - 新規生理活性物質ｎｓｈ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規生理活性物質（以下、ＮＳＨと記す）、
その製法及び該物質を有効成分として含有する医薬に関
する。

本発明者は、ワクシニア・ウィルスを接種し、発痘させ
た各種動物組織、培養細胞若しくは培養組織より抽出し
た物質について研究していたところ、新規生理活性物質
ＮＳＨを得ることに成功した。

ＮＳＨは各種のストレス、例えばウィルス、細菌、算虫
、リケッチア等の生物学的ストレス、酸素欠乏、薬物（
ＡＣＴＨ、コルチゾン等）等の化学的ストレス、寒冷、
騒音、放射線等の物理的ストレス、恐怖、不安、焦繰感
等の精神的ストレス等によって惹き起こされる生体機能
損傷時に生ずる神経系、内分泌系、免疫系等の歪みを！
１節し修復する生体恒常性維持機構に作用し、生体の自
然治癒力を高め、生体機能を正常化する作用を有する。

後述するように、ＮＳＨは、抗ストレス、鎮静、抗潰瘍
、鎮痛等の薬剤として有用であるばかりでなく、広く各
種ストレスや自律神経失調に伴う各種疾患に適用でき、
又、他の薬剤と併用することにより該薬剤の副作用を軽
減し、相乗効果を期待することができる。

本発明生理活性物質ＮＳＨは、以下の工程で製造するこ
とができる。

本発明において、発痘組織とはワタシニア・ウィルスの
各種接種方法又は培養方法にて得たウィルス感染培養組
織、培養細胞及び各種動物のウィルス感染炎症組織又は
猜化鶏卵の漿尿膿等である。

（ａ）無菌的に採取した発痘組織を磨砕し、その１〜５
倍量のフェノール水を加え乳状とした後、濾過又は遠心
分離する。

（ｂ）前記液体を等電点付近のｐＨに調整して加熱し、
除蛋白した後ザイツ濾過板を用いて濾過する。さらに、
濾液を弱アルカリ性として煮沸した後、濾過する。

（ｅ）塩酸、硫酸、臭化水素酸等の鉱酸で酸性とした後
、活性炭に吸着させる。このとき、好ましくは５〜２０
％の活性炭を使用する。

（ｄ）前記吸着剤にアルカリ性水溶液を加え、とくにｐ
Ｈを１０〜１２として加温下溶出し、溶出液を減圧下に
１発乾固又は凍結乾燥することにより目的物を得る。

さらに、所望により、前記方法によって得られた本発明
物質を限外濾過、ゲル濾過、透析等の手段を用いて、分
子量による分画を行なって精製することができる。

以下は、本発明ＮＳＨの抽出法の実施例である。

実施例１゜ 健康な成熟家兎の皮膚にワタシニア・ウィルスを接種し
発痘させた後、発痘した皮膚を無菌的に剥出し、これを
細切した後フェノール水を加え、ホモゲナイザーで磨砕
し乳状とする。次いでこれを遠心濾過し、得られた濾液
を塩酸でｐＨ４，８−５，５とし、流通蒸気で１００℃
に加熱し濾過する。濾液をさらにザイッ瀘過板を用いて
濾過した後、水酸化ナトリウムでｐＨ９とし、さらに１
００℃に加熱した後濾過する。濾液を塩酸でｐ）Ｉ４．
１とし、活性炭７．５％を加え４時間攪拌した後濾過す
る。この活性炭に水を加え、水酸化ナトリウムでｐＨ１
０，９とし、６０℃で１．５時間攪拌した後濾過する。

濾液を塩酸でｐＨ６，６とし、減圧下に乾固する。

発痘皮膚１　ｋｇからの収量は４〜６ｇであった。

実施例２゜ 実施例１と同様にして除蛋白を行なって得られた抽出液
を、塩酸でｐＨ３，８とし、活性炭１５％を加え５時間
攪拌した後濾過する。この活性炭にｐ　Ｈ１１，５の水
酸化ナトリウム水溶液を加え、４５℃で３時間攪拌した
後濾過する。濾液を中和して、限外濾過を行って分子量
１０００以下の分画を得、これを減圧乾固する。

発痘皮膚１ｋｇからの収量は４〜５．５ｇであった。

前記方法によって得られた本発明生理活性物質ＮＳＨは
、以下の物理化学的性質を有する。

性　状：淡黄褐色無定形の吸湿性粉末 溶解性：水、メタノール、アセトンに可溶、ベンゼン、
エーテルに不溶 ｐＨニア、０〜８．０ 分子量：１０００以下 紫外部吸収：λｍａｘ２６５〜２７５ｎｍ呈色反応ニア
ミノ酸、糖、リン・・・陽性蛋白質、フェノール・・・
陰性 構　成：総窒素　　　　・・・１．７〜７．０％アミノ
態窒素　　・・・０．５〜２．０％紫外部吸収物質・・
・０．８〜３．５％糖　　　　　　　　　・　・　・０
．１　〜０．６　％次に、本発明生理活性物質ＮＳＨの
薬理作用について述べる。

１、急性毒性試験 ５Ｄ−ＪＣＬ系雌雄ラット、ｄｄＹ系雌雄マウス及び日
本内色種雌雄ウサギをそれぞれ一群１０匹とし、本発明
物質の各種投与経路における急性毒性試験を行った。結
果を第１表に示す。

第１表 ■、薬理試験 以下の動物実験に用いられた５ＡＲＴストレス動物は、
喜多等の方法〔日薬理誌、　７１．１９５−２１０（１
９７０）　）に従って飼育した。即ち、マウス（又↓嘘
うット）を毎日午前１０時〜午後５時の間は１時間毎に
８℃と４℃（又は−３℃）を交替させ、午後５時〜翌午
前ｌＯ時の間は４℃（又は−３℃）と０う温度条件で４
〜５日間飼育した。

該方法によって飼育した５ＡＲＴストレス動物番嘘強度
のストレス状態を示し、体重減少、心拍数増加、ＱＲ３
時間の延長、血圧降下等の循環系の異常、皮膚電気抵抗
値の低下、摘出小腸のＡｃｈ反応性低下。

１鷹閾値の低下がみられるなど、環境の変化によって惹
起される人間の自律神経失調症様状態をあられす動物モ
デルとみることができる。

ｎｉ抗ストレス作用 （１，１）体重減少抑制作用 一群１５匹のマウスを５ＡＲＴストレス条件下で飼育し
、Ｎ５Ｈ２０■／ｋｇ／日腹腔内投与群と非投与群の体
重変化を比較した。なお、正常環境条件下で飼育したマ
ウスの体重変化も同時に測定した。結果を第２表に示す
。

第２表 （１，２）呼吸数、心拍数の増加、ＰＱ待時間短縮及び
ＱＲ３時間の延長に対する作用 一群１０匹のマウスに５ＡＲＴストレスを５日間負荷し
、呼吸数、心拍数、ＰＱ待時間びＱＲ３時間に対するＮ
ＳＨの効果を調べた。ＮＳＨを２０　ｍｇ　／　ｋｇ　
／８腹腔内投与すると、第３表に示すとおり、５ＡＲＴ
ストレスによって惹き起こされる呼吸数、心拍数の増加
、ＰＱ待時間短縮及びＱＲ３時間の延長を有意に抑制し
た。

第３表 （１，３）摘出腸管アセチルコリン（Ａｃｈ）感受性異
常の正常化作用 ５ＡＲＴストレス負荷マウス及び拘束水浸ストレス負荷
マウ′ス（１８時時間給後金網で拘束し、１５℃の水浴
中口剣状突起まで浸け３時間放置した。）の摘出腸管の
Ａ　ｃ　ｈ　（１０−”　ｇ／ｍ　１）感受性の変化に
対するＮＳＨの効果を調べた。ＮＳＨの投与は、５ＡＲ
Ｔストレス群についてはストレス負荷期間中１００１１
［ｒ／−を毎日１回腹腔内に投与し、拘束水浸ストレス
群ては絶食開始前及びストレス開始前の２回１００■／
ｋｇを腹腔内に投与した。

第４表に示すように、ＮＳＨは前記ストレス負荷により
低下及び大造したＡｃｈ感受性を共に正常化した。

第４表 （２）抗潰瘍作用 （２，１）拘束水浸ストレス潰瘍 一群ｌＯ匹のウィスター系雄性ラットをＵ時間給食させ
た後、拘束水浸スジレス（２５℃、２０時間）を負荷し
て、胃粘膜における潰瘍係数をアダミ等の方法（Ａｄａ
ｍｉ、Ｅ、ｅｔ　　ａｌ、、Ａｒｃｈ、Ｉｎｔ。

Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎ、　１４７．１１３（１９６４
））を一部改変した方法で求め、対照（生理食塩水）に
対する潰瘍抑制率を算出した。ＮＳＨはストレス負荷前
に１回、又は５日間連続投与した。結果を第５表に示す
。

第５表 （２，２）ヒスタミン潰瘍 一１１１１０〜２０匹の雄性アルピノ・モルモットを２
４時時間量し、０．１％ヒスタミン・ジホスフェ−）０
．２５ｍ１　／　ｋｇを３０分間隔で８回筋肉内に投与
し、最終投与３０分後に十二指腸を摘出し潰瘍部の面積
を測定すると共に、胃液量、ｐＨ１酸度及び総酸度を測
定した。

ＮＳＨは、ヒスタミン・ジホスフェート処置前に５日間
連続投与した。結果を第６表及び第７表に示す。

第６表 第７表 第７表（つづき） （３）鎮痛作用 ＩＩ、Ｉ下のｔｘ痛ｇ験に用いた５ＡＲＴストレスマウ
スは、ストレスを４日間負荷したものを用いた。

（３，１）酢酸法 ０．７％酢酸加生理食塩水をマウスに０．１　ｒ＋ａ／
　１０　ｇ腹腔内投与し、投与１５分後から１５分間に
発現するライジング回数を測定した。効果判定は、ＮＳ
Ｈな皮下投与したマウスのライジング回数が、対照群の
５０％以下に減少した場合を効果ありとし、そのマウス
の割合で示した。結果を第８表に示す。

第８表 （３，２）尾圧法 ランダール・セリ７ト式圧刺激測定装置を用いて、マウ
ス尾根部に刺激を加え、逃避反応を示すまで加圧を増加
させた。Ｎ５Ｈａ腔内投与後３０．６０．９０及び１２
０分後の加圧重量の平均値を投与前の値で除しこの値を
鎮痛係数として表わした。結果を第９表に示す。

第９表 以上の薬理試験の結果から明らかなように、本発明ＮＳ
Ｈは、その毒性が極めて低く、かつ幅広い薬理作用、特
に各種ストレスに起因する生体機能の異常を調節、修復
し、生体恒常性維持に有用な生体機能調整物質である。

従って、ＮＳＨは鎮静、抗潰瘍、鎮痛を目的とする薬剤
として有用であるばかりでなく、広く抗ストレス剤、自
律神経調節剤などの生体損傷時の修復剤として適用しろ
る。

ＮＳＨの適用疾患を例示すれば、以下のごとくである。

胃・十二指腸潰瘍、動脈硬化、心筋梗塞、高血圧。

糖尿病、メニエール病、下垂体機能不全、副腎皮質機能
不全、種々の精神身体的異常等のストレス起因性疾患、
神経症、頭痛、めまい、疲労感、不眠、食欲不振、便秘
、下痢、不定愁訴等の自律神経失調症、神経痛、腰痛、
頚肩腕症候群等の有痛性疾患、その他気管支喘息、アレ
ルギー性鼻炎、奪麻疹、湿疹等のアレルギー性疾患、各
種免疫不全症、悪性腫瘍、肝障害、造血機能障害など。

ＮＳＨはこれら疾患に対し、予防剤、治療剤又は治療補
助剤として、単独で若しくは他の薬剤と組み合わせて使
用することができる。さらに、ＮＳＨは他の薬剤と併用
した場合には、他剤の副作用低減、用量低減及び効果の
増大なども期待できる。

本発明物質を活性成分として含有する薬剤は、例えば錠
剤、カプセル、顆粒剤、注射剤、液剤、半開、軟膏剤、
エアゾール剤の形態とすることができる。

錠剤、カプセル、顆粒剤を製造するために、例えばデン
プン、乳糖、マンニトール等の賦形剤、微結晶セルロー
ス、メチルセルロース、その他のセルロース銹導体、ア
ラビアゴム、ゼラチン、ポリエチレン、ポリビニルアル
コール、ポリビニルピロリドン等の結合剤、グリセロー
ル等の湿潤剤、カルボキンメチルセルロース、微結晶セ
ルロース、ポリエチレングリコール等の崩壊剤、セチル
アルフール、グリセリン、脂防酸エステル類等の界面活
性剤、タルク。

ステアリン酸マグネンウム、カルシウム、固体ポリエチ
レングリコール等の滑沢剤、その他被覆剤、着色剤、矯
味矯臭剤などを用いることができる注射剤を製造するた
めに、注射用蒸留水、生理食塩水、５−２０％ブドウ糖
注射液、注射用植物油、エタノール、プロピレングリコ
ール、ポリエチレングリコール類等の溶剤、ピロ亜硫酸
ナトリウム、硫化水素ナトリウム、ｌ−アスコルビン酸
、チオグリコール酸、クエン酸塩、酢酸塩、リン酸塩等
の安定剤、塩酸プロカイン、ブドウ糖等の無痛化剤、そ
の他等張化剤、溶解補助剤、保存剤、懸濁化剤、乳化剤
等を用いることができる。注射用組成物は無菌の溶液、
懸濁液、乳濁液若しくは用時溶剤に熔解して用いる剤型
とすることができる。

軟膏剤には、脂肪油、パラフィン、ラノリン、ワセリン
、グリコール類、グリセリン、高級アルフール、その他
適当な基剤を用いて、また半開には、カカオ脂、マクロ
ゴール、グリセロゼラチン、ラノリン脂等の基剤を用い
て製剤することができ、適宜界面活性剤、保存剤を添加
してもよい。

さらに、液体若しくは微小粉体の形で、適当な噴射剤と
共にエアゾール剤とすることもでき、所望により、湿潤
剤、分散剤等の助剤を添加する。

本発明物質の１日投与量はＩＰｇ／ｋｇ乃至１０■／−
が一般的であるが、疾患、症状の程度により適宜変更す
ることができる。

本発明物質を活性成分として含有する薬剤の処方例を以
下に示すが、これ等に限定されるものではない。

処方例１．　（全重量１５０■の錠剤）Ｎ　Ｓ　Ｈ１０
■ 乳糖　　　　　　　　　　　　　　８０〃結晶セルロー
ス　　　　　　　　怒〃 カルボキンメチルセルロース　　３０〃ステアリン酸マ
グネンウム　　　５〃 計１５０■ 処方例２．　（充填物重量２００■のカプセル）Ｎ　Ｓ
　Ｈ２０■ 乳糖　　　　　　　　　　　　　１２５〃バレイン日デ
ンプン　　　　　　４０〃ステアリン酸マグネシウム　
　　５〃 タルク　　　　　　　　　　　　ｌＯ〃計２００■ 処方例３．　（容量１．、ｌｌの注射用アンプル）ＮＳ
Ｈ１■ 注射用蒸留水　　　　　　　　　適量 計　　１　ｍｌ 処方例４．　（全量２ｇの半開） Ｎ　Ｓ　Ｈ２０■ カカオ脂　　　　　　　　　　１９８０〃計　　２ｇ 代理人　弁理士　村山佐武部

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）発痘組織より抽出した新規生理活性物質Ｎ５Ｈ０ （２）発痘組織を磨砕し、これにフェノール水を加えて
   抽出し、等重点付近のｐＨに調整した後加熱、濾過して
   除蛋白を行い、これを酸性条件下５〜２０％の活性炭に
   吸着させた後、アルカリ性水溶液でｐＨを１０〜１２に
   して加温下溶出することを特徴とする新規生理活性物質
   ＮＳＨの製法。 （３）ＮＳＨを有効成分として含有する生体機能調整剤
   。 （４）抗ストレス剤である特許請求の範囲第（３）項記
   載の生体機Ｗ＠調整剤。 （５）自律神ｇ調整剤である特許請求の範囲第（３）項
   記載の生体機能調整剤。 （６→鎮静剤である特許請求の範囲第（３）項記載の生
   体機能調整剤。 （７）抗潰瘍剤である特許請求の範囲第（３）項記載の
   生体ＷＡ能調整剤。 （８）鎮痛剤である特許請求の範囲第（３）項記載の生
   体ｍｓ調整剤。