JPS5832826A - 修飾ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ - Google Patents
修飾ス−パ−オキシドジスムタ−ゼInfo
- Publication number
- JPS5832826A JPS5832826A JP56130012A JP13001281A JPS5832826A JP S5832826 A JPS5832826 A JP S5832826A JP 56130012 A JP56130012 A JP 56130012A JP 13001281 A JP13001281 A JP 13001281A JP S5832826 A JPS5832826 A JP S5832826A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- superoxide dismutase
- inulin
- modified
- dismutase
- reaction
- Prior art date
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、抗炎症剤や放射線障害治療剤として期待でき
る、イヌリンで修飾されたスーパーオキシドジスムター
ゼＶこ関する。
る、イヌリンで修飾されたスーパーオキシドジスムター
ゼＶこ関する。
スーパーオキシドジスムターゼは、動物、植物、微生物
等の生物中広く分布しており、構造ｔこついても報告さ
れており（例えば、Ｄ、 Ｃ，Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ、
”５ｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ａｎｄ ５ｕｐｅｒｏｘ＋
ｄｅＤｉｓｍｕｔａｓｅｓ” 、 ２１５ 、 Ａｃａ
ｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、 １９７７年： Ｊ、 Ａ
ｂｅｒｎｅｔｈｙ ｅｔ ａｌ Ｊ、 Ｄｉａｌ、 Ｃ
ｈｅｍ、 ２４９゜７３３’ｌ、１９７４年；１）、
Ｂａｒｒａ、 Ｊ、 Ｖ、 Ｂａｎｎｊｓｔｅｒａｔ
ａｌ、ＦＥＢＳ Ｌｓｔｔ、１２０，５３．１９８０
年。
等の生物中広く分布しており、構造ｔこついても報告さ
れており（例えば、Ｄ、 Ｃ，Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ、
”５ｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ａｎｄ ５ｕｐｅｒｏｘ＋
ｄｅＤｉｓｍｕｔａｓｅｓ” 、 ２１５ 、 Ａｃａ
ｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、 １９７７年： Ｊ、 Ａ
ｂｅｒｎｅｔｈｙ ｅｔ ａｌ Ｊ、 Ｄｉａｌ、 Ｃ
ｈｅｍ、 ２４９゜７３３’ｌ、１９７４年；１）、
Ｂａｒｒａ、 Ｊ、 Ｖ、 Ｂａｎｎｊｓｔｅｒａｔ
ａｌ、ＦＥＢＳ Ｌｓｔｔ、１２０，５３．１９８０
年。
Ｗ、 Ｈ，Ｂａｎｎ１ｓｔｅｒ ｅｔ ａｌ ”５ｕｐ
ｅｒｏｘｉｄｅ ａｎｄＳｕｐｅｒｏｘｉｄｅ Ｄｉｓ
ｍｕｓｅｓ” ＋ １０７ ＋ Ａｃａｄｅｍｉｃ
Ｐｒｅ６≦！１９７７年参照。）、特に例えば、リュウ
マチや関節炎ｔこおける抗炎症剤として使用できること
が報ＩＭ、 Ｄ、 Ｍｅｎａｎｄｅｒ、 Ｃｕｒｒｅｎ
ｔ ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＲｅｓｅａｒｃｈ ＋１６
，７０６．１９７４年参照。）、開発されつつあり、ま
た放射線障害の治療ｔこも効果があると言われている。
ｅｒｏｘｉｄｅ ａｎｄＳｕｐｅｒｏｘｉｄｅ Ｄｉｓ
ｍｕｓｅｓ” ＋ １０７ ＋ Ａｃａｄｅｍｉｃ
Ｐｒｅ６≦！１９７７年参照。）、特に例えば、リュウ
マチや関節炎ｔこおける抗炎症剤として使用できること
が報ＩＭ、 Ｄ、 Ｍｅｎａｎｄｅｒ、 Ｃｕｒｒｅｎ
ｔ ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＲｅｓｅａｒｃｈ ＋１６
，７０６．１９７４年参照。）、開発されつつあり、ま
た放射線障害の治療ｔこも効果があると言われている。
しかしながら、スーパーオキシドジスムターゼを静脈投
ケーすると血中半減期がわずが６分であり、速やかｔこ
代謝される。そのため、静脈投与では効果が少ないとい
う点で筋肉注射を余儀なくしている。
ケーすると血中半減期がわずが６分であり、速やかｔこ
代謝される。そのため、静脈投与では効果が少ないとい
う点で筋肉注射を余儀なくしている。
上記静脈投与１こおける血中半減期の短かさを改善した
ものとして、フィコール（Ｊ、 Ｍ、 Ｍｃｌｏｒｄｅ
ｔ ａｌ、ＰｒＮＡＳ、７７．１１５９．４９８０年参
照。）、ポリエチレングリコール（Ｐ、 Ｓ、 Ｐｙａ
ｔｏｋ、 Ｆ、 Ｆ。
ものとして、フィコール（Ｊ、 Ｍ、 Ｍｃｌｏｒｄｅ
ｔ ａｌ、ＰｒＮＡＳ、７７．１１５９．４９８０年参
照。）、ポリエチレングリコール（Ｐ、 Ｓ、 Ｐｙａ
ｔｏｋ、 Ｆ、 Ｆ。
Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ、Ｒｅ５ｅａｒｃｈ Ｃ
ｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎＣｈｅｍｉｃａｌ
Ｐａｔｔ＋ｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
ｏｇｙ＋ ２９ ＋１１３、］’１８０年参照。）、
およびラットアルブミ７（Ｋ、Ｗｏｎｇ＋Ｍ、Ｊ、Ｐｏ
ｚｎａｎｓｋｙｅｔａｌ、Ａｇｅｎｔａｎｄ Ａｃｔｉ
ｏｎｓ、二＋ ２３１． ］’１８１１年参照。）
ｅこよる修飾体が知られているが、最初の二つは活性保
持率カス−パーオキシドジスムターゼに比べ５０％以下
と落ちてしまい、一方、ラットアルブミンの修飾体は抗
原性があり、実用上問題がある。
ｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎＣｈｅｍｉｃａｌ
Ｐａｔｔ＋ｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ
ｏｇｙ＋ ２９ ＋１１３、］’１８０年参照。）、
およびラットアルブミ７（Ｋ、Ｗｏｎｇ＋Ｍ、Ｊ、Ｐｏ
ｚｎａｎｓｋｙｅｔａｌ、Ａｇｅｎｔａｎｄ Ａｃｔｉ
ｏｎｓ、二＋ ２３１． ］’１８１１年参照。）
ｅこよる修飾体が知られているが、最初の二つは活性保
持率カス−パーオキシドジスムターゼに比べ５０％以下
と落ちてしまい、一方、ラットアルブミンの修飾体は抗
原性があり、実用上問題がある。
本発明は、静脈注射投与用製剤として安全性、抗原性お
よび活性保持率の」−で１−分満足のゆく修飾スーパー
オキシドジスムターゼを開発すへく鋭意研究した結果、
イヌリンで修飾されたスーパーオキシドジスムターゼの
製造？こ成功し、このイヌリン修飾体が」−記１］的を
達成できることを見出し、この発見１こ基づいて本発明
を完成するりこ至った。
よび活性保持率の」−で１−分満足のゆく修飾スーパー
オキシドジスムターゼを開発すへく鋭意研究した結果、
イヌリンで修飾されたスーパーオキシドジスムターゼの
製造？こ成功し、このイヌリン修飾体が」−記１］的を
達成できることを見出し、この発見１こ基づいて本発明
を完成するりこ至った。
本発明のイヌリン修飾スーパーオキシドジスムターゼの
製造ｅこ使用するスーパーオキシドジスムターゼは動物
（例えば、牛、人）、植物、微生物等の生物中ｔこ含ま
れているものはいずれも使用できる。一方、イヌリンは
分子量”４１０００〜６． ｎ １１０のものが好まし
く、また分校をイ）するものであっても何らさしつかえ
ない。
製造ｅこ使用するスーパーオキシドジスムターゼは動物
（例えば、牛、人）、植物、微生物等の生物中ｔこ含ま
れているものはいずれも使用できる。一方、イヌリンは
分子量”４１０００〜６． ｎ １１０のものが好まし
く、また分校をイ）するものであっても何らさしつかえ
ない。
イヌリンによって修飾する場合の結合剤は特？こ限定さ
れない。例えば臭化シアン等の縮合剤を用い、スーパー
オキシドジスムターゼのアミノ基とイヌリンの水酸基と
の間を結合させたり、あるいは塩化シアヌル、２ 、２
’−ジクロルベンジジン、ｐ ＋ ｐ’−ジフルオロ−
ｍ、ｍ’−９ニトロジフエニルスルホン、２，４−ジク
ロルニトロベンゼン等の化学結合剤ｅこより結合させて
）とよい。
れない。例えば臭化シアン等の縮合剤を用い、スーパー
オキシドジスムターゼのアミノ基とイヌリンの水酸基と
の間を結合させたり、あるいは塩化シアヌル、２ 、２
’−ジクロルベンジジン、ｐ ＋ ｐ’−ジフルオロ−
ｍ、ｍ’−９ニトロジフエニルスルホン、２，４−ジク
ロルニトロベンゼン等の化学結合剤ｅこより結合させて
）とよい。
７、−パーオキシドジスムターゼ１分子当り、イヌリン
２〜３０分子程度好ましくは５〜２０程度結合せしめる
とよい。
２〜３０分子程度好ましくは５〜２０程度結合せしめる
とよい。
４：た、スーパーオキシドジスムターゼとイヌリンをア
ミド結合を介１−で結合する方法、例えばイヌリンの水
酸基ｔこコハク酸等のポリカルボン酸を付加せしめ、こ
れらのカルボキシル基とスーパーオキシドジスムターゼ
のアミノ基を結合させる方法では、前記方法１こ較べ一
層修飾体の活性保持率が増加する。アミド結合を形成す
る方法としては、ジシクロへキシルカルボジイミド等の
縮合剤を用いる方法また、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミ
ド、ｐ−ニトロフェノール等の通常のペプチド合成にお
けるカルボン酸活性化剤ｅこより活性エステルとし、こ
れとスーパーオキシドジスムターゼを反応させアミド交
換することもできる。
ミド結合を介１−で結合する方法、例えばイヌリンの水
酸基ｔこコハク酸等のポリカルボン酸を付加せしめ、こ
れらのカルボキシル基とスーパーオキシドジスムターゼ
のアミノ基を結合させる方法では、前記方法１こ較べ一
層修飾体の活性保持率が増加する。アミド結合を形成す
る方法としては、ジシクロへキシルカルボジイミド等の
縮合剤を用いる方法また、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミ
ド、ｐ−ニトロフェノール等の通常のペプチド合成にお
けるカルボン酸活性化剤ｅこより活性エステルとし、こ
れとスーパーオキシドジスムターゼを反応させアミド交
換することもできる。
以下、実施例により説明する。
実施例１
イヌリン（平均分子量５０００）４ｆ（８，０Ｘ１０−
４モル）を５０罰の水に溶解し、これＶこ室／１ｌｌｔ
で水−アセトン混合溶媒（体積比１対２）２０肩／！に
溶解した１、３．５−）リクロロトリアジン１、Ｏｆ
（５，４Ｘ １０’−’モル）をｐＴ（８〜１日こ調整
しながら１５分間で滴下した。ｐ Ｈの調整は０、ＩＮ
水酸化ナトリウムを用いて行った。
４モル）を５０罰の水に溶解し、これＶこ室／１ｌｌｔ
で水−アセトン混合溶媒（体積比１対２）２０肩／！に
溶解した１、３．５−）リクロロトリアジン１、Ｏｆ
（５，４Ｘ １０’−’モル）をｐＴ（８〜１日こ調整
しながら１５分間で滴下した。ｐ Ｈの調整は０、ＩＮ
水酸化ナトリウムを用いて行った。
滴下終了後０．０５Ｎ塩酸を加えてｐ Ｔ−Ｔ値を３１
こ調整した。これにアセトン５００ｍ１を加え、析出し
た結晶を濾過し、アセトンで洗浄し、活性化イヌリン３
．２２を得た。
こ調整した。これにアセトン５００ｍ１を加え、析出し
た結晶を濾過し、アセトンで洗浄し、活性化イヌリン３
．２２を得た。
牛スーパーオキンドジスムターゼ（ングマ社製２２４０
単位／ ＩＡ９ ） ５０１Ｒ９（＋、５ Ｘ １ ｎ
−”モル） ５− を０．ＩＭホウ酸緩衝液（ｐＴ１９．２ ） ２０ ｍ
、ｅ＆こ溶解させた後、これｅこ」二記調製の活性化イ
ヌリン１．７９ （３，、Ｉ Ｘ ］ ０ ’モル）を
徐々に加えた後、攪拌下４Ｃで２４時間反応させた。
単位／ ＩＡ９ ） ５０１Ｒ９（＋、５ Ｘ １ ｎ
−”モル） ５− を０．ＩＭホウ酸緩衝液（ｐＴ１９．２ ） ２０ ｍ
、ｅ＆こ溶解させた後、これｅこ」二記調製の活性化イ
ヌリン１．７９ （３，、Ｉ Ｘ ］ ０ ’モル）を
徐々に加えた後、攪拌下４Ｃで２４時間反応させた。
反応終了後、分子量阻＋に３万のメンブレン？こより、
限外濾過を繰返した後、凍結乾燥して２１０ｍｇの修飾
スーパーオキシドジスムターゼを得た。
限外濾過を繰返した後、凍結乾燥して２１０ｍｇの修飾
スーパーオキシドジスムターゼを得た。
酵素１モル当りのイヌリン結合モル数は２ｏ、４、酵素
活性保持率は６４％であった。
活性保持率は６４％であった。
実施例２
牛スーパーオキンドジスムターゼ（シグマ社製２２４１
１単位／＋１１１７ ） ５０ｍｇ（１，５Ｘ Ｉ Ｏ
”モル）を０．１Ｍ＃、つ酸緩衝液（ｐＨ９，２） ２
０ｍ１ｋ：溶解させた後、実施例１ｅこ記載された方法
と同様の方法ｔこより調製された活性化イヌリン０．４
ｙ （ｓ、。
１単位／＋１１１７ ） ５０ｍｇ（１，５Ｘ Ｉ Ｏ
”モル）を０．１Ｍ＃、つ酸緩衝液（ｐＨ９，２） ２
０ｍ１ｋ：溶解させた後、実施例１ｅこ記載された方法
と同様の方法ｔこより調製された活性化イヌリン０．４
ｙ （ｓ、。
ＸＩＯ’モル）を徐々ｅこ加え、攪拌下に、４１？で８
時間反応を行った。
時間反応を行った。
反見：終了後、分子昂阻止３万のメンブレンにより限外
濾過を繰返した。凍結乾燥により１１０＋１１１７６− の修飾スーパーオキシドジスムターゼをｆｌｌだ。
濾過を繰返した。凍結乾燥により１１０＋１１１７６− の修飾スーパーオキシドジスムターゼをｆｌｌだ。
酵素１モル当りのイヌリン結合モル数け７．４、酵素活
性保持率は６５％であった。
性保持率は６５％であった。
実施例３
人界血球より精製した人スーパーオキンドジスムｐ−セ
（ンクーｖ社製、２ ｏ ｏ ｏ 、１＋−イ）シ／ｍ
ｇ）１００ｍｇ（３，ＯＸ １０ ’モル）を０．１Ｍ
ホウ酸緩’＄７７１ｋ ｔこ溶解し、実施例１で得た活
性化イヌリン０．６ｇ（１，２Ｘ１０’モル）を加えた
。攪拌下、−＋ｒで２４時間反応を行った。
（ンクーｖ社製、２ ｏ ｏ ｏ 、１＋−イ）シ／ｍ
ｇ）１００ｍｇ（３，ＯＸ １０ ’モル）を０．１Ｍ
ホウ酸緩’＄７７１ｋ ｔこ溶解し、実施例１で得た活
性化イヌリン０．６ｇ（１，２Ｘ１０’モル）を加えた
。攪拌下、−＋ｒで２４時間反応を行った。
反応液１こついて実施例１と同様ｉこ限外濾過を繰り返
し凍結乾燥ｔこより修飾スーパーオキシドジスムターゼ
１９０■を得た。
し凍結乾燥ｔこより修飾スーパーオキシドジスムターゼ
１９０■を得た。
酵素１モル当りイヌリン結合モル数は５．９、酵素活性
保持率は６０俤であった。
保持率は６０俤であった。
実施例４
モレキュラーシーブで脱水したピリジンＩＣ）Ｏｑｌ中
にイヌリン４．ｏｒ（ｓ、ｏｘｔｏ’モル）とブｌ（水
コハク酸３．２ ？ （３，２Ｘ ］ ０ ’モル）を
加え加熱し、穏かに還流させ、反応液が透明ｔこなるま
で０．５〜１時間程度反応を行った。反応後、室温しこ
冷却し、アセトン５ｎｏｍｅを加え析出した結晶を濾過
後アセトンてよく洗浄した後、乾燥した１、これを、Ｎ
’ 、 Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｏｍｌ中へ溶解さ
せ、これにＮ−ヒドロキンフ・・り酸イミド０．４１ｉ
ｆ（４，１ＩＸ１０ ’モル）とジシクロへキシル力ル
ボジイミＦｆ１．８４ Ｆ （４，ＯＸｌ ０ ’モル
）を加えた。攪拌下ｔこ、室温で一夜反応を行った。
にイヌリン４．ｏｒ（ｓ、ｏｘｔｏ’モル）とブｌ（水
コハク酸３．２ ？ （３，２Ｘ ］ ０ ’モル）を
加え加熱し、穏かに還流させ、反応液が透明ｔこなるま
で０．５〜１時間程度反応を行った。反応後、室温しこ
冷却し、アセトン５ｎｏｍｅを加え析出した結晶を濾過
後アセトンてよく洗浄した後、乾燥した１、これを、Ｎ
’ 、 Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｏｍｌ中へ溶解さ
せ、これにＮ−ヒドロキンフ・・り酸イミド０．４１ｉ
ｆ（４，１ＩＸ１０ ’モル）とジシクロへキシル力ル
ボジイミＦｆ１．８４ Ｆ （４，ＯＸｌ ０ ’モル
）を加えた。攪拌下ｔこ、室温で一夜反応を行った。
生成したジシクロヘキシル尿素を濾過した。濾液ｅこエ
チルエーテル６０ｆ１ｍｌ＋を加え生成した結晶を濾過
し３．４２の活性化イヌリンの結晶を得た。
チルエーテル６０ｆ１ｍｌ＋を加え生成した結晶を濾過
し３．４２の活性化イヌリンの結晶を得た。
活性化イヌリン８０Ｉ１１９（１，６×１０−５モル）
と牛スーパーオキシドジスムターゼ（シグマ社製）５０
１１１１７をホウ酸緩衝液２０ｍ１ｔこ溶解して、攪拌
下１、ｎ １時間反応を行った。
と牛スーパーオキシドジスムターゼ（シグマ社製）５０
１１１１７をホウ酸緩衝液２０ｍ１ｔこ溶解して、攪拌
下１、ｎ １時間反応を行った。
反応後、分子隈阻止３万のメンブレンにより限外濾過を
繰返し、凍結乾燥會こより８５■の修飾スーパーオキシ
ドジスムターゼを得た。
繰返し、凍結乾燥會こより８５■の修飾スーパーオキシ
ドジスムターゼを得た。
仁←辷止牙辻」ヰゴ１→」＝
酵素１モル当りイヌリン結合モル数１４．０、酵素活性
保持率は８５％であった。
保持率は８５％であった。
なお、前記実施例ｔこおいて製造した修飾体のイヌリン
の結合モル数の決定は次の二つの方法を併用して行った
。
の結合モル数の決定は次の二つの方法を併用して行った
。
ｉｌｌ 東洋曹達社製ＳＷ３０００分析用高速ゲル濾
過カラムによりその分子量を測定し、スーパーオキシド
ジスムターゼの分子量との比ｔこより、イヌリン結合数
を決定する。
過カラムによりその分子量を測定し、スーパーオキシド
ジスムターゼの分子量との比ｔこより、イヌリン結合数
を決定する。
＋２＋ 凍結乾燥で得られた修飾スーパーオキシドジ
スムターゼの重量を測定し、数Ｓ＋こなるようＶこ水溶
液とし、その６５０−７＋）Ｏｎｍ（牛スーパーオキシ
ドジスムターゼ６８１１ｎｍＪス一 ９− パーオキシドジスムターゼ６５５ｎｍ）の吸光度から含
まれる原料のスーパーオキシドジスムターゼの酸を決定
する（牛スーパーオキシドジスムクーゼ Ｅ＝３＋１０
、人スーパーオキシドジスムクーゼ Ｅ＝３５０）。以
上の如く得られた修飾体および非修飾体の重量比より結
合するイヌリンの！？１．を決定する。
スムターゼの重量を測定し、数Ｓ＋こなるようＶこ水溶
液とし、その６５０−７＋）Ｏｎｍ（牛スーパーオキシ
ドジスムターゼ６８１１ｎｍＪス一 ９− パーオキシドジスムターゼ６５５ｎｍ）の吸光度から含
まれる原料のスーパーオキシドジスムターゼの酸を決定
する（牛スーパーオキシドジスムクーゼ Ｅ＝３＋１０
、人スーパーオキシドジスムクーゼ Ｅ＝３５０）。以
上の如く得られた修飾体および非修飾体の重量比より結
合するイヌリンの！？１．を決定する。
また、活性保持率は次の如くして求めた。原料スーパー
オキシドジスムターゼおよび上記で得られた修飾スーパ
ーオキシドジスムターゼを適量の緩衝液ｅこ溶解し、そ
の酵素活性をＪ、 Ｍ、 Ｍｃｌｏｒｄらの方法（Ｊ、
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、 ２４４ 。
オキシドジスムターゼおよび上記で得られた修飾スーパ
ーオキシドジスムターゼを適量の緩衝液ｅこ溶解し、そ
の酵素活性をＪ、 Ｍ、 Ｍｃｌｏｒｄらの方法（Ｊ、
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、 ２４４ 。
６ ｔｌ ４９ 、 １９６９年）により測定し、また
、各々の酵素濃度を上記の紫外吸収法管こより決定し、
反応後の比活性の変化から活性保持率を決定した。
、各々の酵素濃度を上記の紫外吸収法管こより決定し、
反応後の比活性の変化から活性保持率を決定した。
次ｔこ、実施例１〜４の方法１こより調製した修飾スー
パーオキシドジスムターゼＶこついて血流内滞留時間の
測定を行った。
パーオキシドジスムターゼＶこついて血流内滞留時間の
測定を行った。
測定方法は、−試料ｔこつきラット（平均体重−１０−
２０２９）２匹を用いラットの体重１ｋｑ＆こり・１し
２０１１ｇ（修飾体ｔこついてはスーパーオキシドジス
ムターゼ含量として２０１１１ｇ、４■／匹）を生理食
塩水（ｏ、５ｍ１Ｖ／匹）に溶解し、尾静脈から注入し
、注入後５分、１０分、２０分、３０分、６０分、２時
間、４時間、８時間、２４時間、４８時間、経過後に０
．２ｍｌずつ採血し、遠心処理後血漿中のスーパーオキ
シドジスムターゼの酵素活性なＪ、 Ｍ、 Ｍｃｌｏｒ
ｄ らの方法（Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、。
２０１１ｇ（修飾体ｔこついてはスーパーオキシドジス
ムターゼ含量として２０１１１ｇ、４■／匹）を生理食
塩水（ｏ、５ｍ１Ｖ／匹）に溶解し、尾静脈から注入し
、注入後５分、１０分、２０分、３０分、６０分、２時
間、４時間、８時間、２４時間、４８時間、経過後に０
．２ｍｌずつ採血し、遠心処理後血漿中のスーパーオキ
シドジスムターゼの酵素活性なＪ、 Ｍ、 Ｍｃｌｏｒ
ｄ らの方法（Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、。
２４４、 Ａ２２ ６０４９−６１１５５ 、
１９６９ 年 ） ）１こよって測定した。
１９６９ 年 ） ）１こよって測定した。
時間１こ対する活性変化のグラフから修飾スーパーオキ
シドジスムターゼの血漿中からの１（減期を求めた。
シドジスムターゼの血漿中からの１（減期を求めた。
結果を次１こ示す。
□
Ｕ−１−、の結果から、原料スー・（−オキシドンスム
ターゼ１こ比較し、各イヌリン修飾スー／く−オキ・ン
ドジスムターゼは半減期が１００〜２００倍と増加１−
でいることがわかる。
ターゼ１こ比較し、各イヌリン修飾スー／く−オキ・ン
ドジスムターゼは半減期が１００〜２００倍と増加１−
でいることがわかる。
これｅこより、抗炎症作用の増強、放射線障害効果の増
強、持続等、医薬としての性質が著しく改良され、静脈
投与ｅこよっても十分効果を奏する。
強、持続等、医薬としての性質が著しく改良され、静脈
投与ｅこよっても十分効果を奏する。
特許出願人 味の素株式会社
Claims (1)
- イヌリンで修飾されたスーパーオキシドジスムターゼ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56130012A JPS5832826A (ja) | 1981-08-19 | 1981-08-19 | 修飾ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56130012A JPS5832826A (ja) | 1981-08-19 | 1981-08-19 | 修飾ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5832826A true JPS5832826A (ja) | 1983-02-25 |
| JPH0134032B2 JPH0134032B2 (ja) | 1989-07-17 |
Family
ID=15023964
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56130012A Granted JPS5832826A (ja) | 1981-08-19 | 1981-08-19 | 修飾ス−パ−オキシドジスムタ−ゼ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5832826A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011160758A (ja) * | 2010-02-12 | 2011-08-25 | Univ Of Fukui | 酵素安定化剤 |
-
1981
- 1981-08-19 JP JP56130012A patent/JPS5832826A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2011160758A (ja) * | 2010-02-12 | 2011-08-25 | Univ Of Fukui | 酵素安定化剤 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0134032B2 (ja) | 1989-07-17 |
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