JPH02231078A - ヒアルロン酸修飾スーパーオキシドジスムターゼ - Google Patents
ヒアルロン酸修飾スーパーオキシドジスムターゼInfo
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、生体内の酸素分子から発生したスーパーオキ
シド（０；）による組織障害の治療に有用ナヒアルロン
酸で修飾されたスーパーオキシドジスムターゼ（以下、
ＳＯＤと略す）に関するものである． 〔従来技術の説明〕 スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）は、下弐に示
す不均化反応によってスーパーオキシド（０；）を消失
させる作用を持つ酵素である。
シド（０；）による組織障害の治療に有用ナヒアルロン
酸で修飾されたスーパーオキシドジスムターゼ（以下、
ＳＯＤと略す）に関するものである． 〔従来技術の説明〕 スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）は、下弐に示
す不均化反応によってスーパーオキシド（０；）を消失
させる作用を持つ酵素である。
ＳＯＤ
２ｏ２＋２Ｈ＋−一一→ Ｏｔ＋Ｈ２０■従って、ＳＯ
Ｄは、生体内で酸素分子から発生したＯ；による組織障
害、例えば、変形性関節炎、慢性関節リウマチ、放射線
照射による障害、紫外線による障害、未熟児酸素網膜症
、白内障、アドリアマイシンなどの制癌剤の副作用、虚
血部分への血流再開に伴う障害などに対する有効な治療
薬として注目されている． このようにＳＯＤが医薬として有望であるにもかかわら
ず、ＳＯＤの血流内半減期が非常に短い（約５分）ため
に、その薬理活性が充分に発揮されない場合が多い． ＳＯＤの血流内半減期が非常に短い原因としては、その
分子量（３２，０００）が腎糸球体の濾過限界値（分子
量で約５０，０００）よりも小さいために血中から速や
かに消失し、尿中に排泄されることが考えられている． 従って、ＳＯＤの薬理活性を充分に発揮させるために、
ポリエチレングリコール（Ｐｙａｔｏｋ，Ｐ．Ｓ．ｅｔ
ａｌ．ＨＲｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａ
ｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐａｔ
ｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏ
ｇｙ，２９，１１３ （１９８０））、ラットアルブ
ミン（Ｗｏｎｇ，Ｋ，ｅｔ ａｌ．；Ａｇｅｎｔ
ａｎｄ Ａｃｔｉｏｎｓ，上Ｌ２３１ （１９８０）
）、フイコール（ＭｃＣｏｒｄ，Ｊ．Ｍ，ｅｔ ａｌ
，；Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ Ｎａｔｉｏｎ
ａｌ Ａｃａｄｅｍｙｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕ
，Ｓ，Ａ．，７７．１１５９ （１９８０））、ポリア
ルキレングリコール（特開昭６１−２４９３８８）やイ
ヌリン（特開昭５８−３２８２６）などを用いてＳＯＤ
を巨大分子化させ、ＳＯＤの血中半減期を増加させる試
みがなされている． ところで、巨大分子化したＳＯＤを通常の静脈投与剤と
して使用する場合には、その血中半減期が長くなるのみ
ならず、その酵素活性保持率が高く、かつ医薬としての
安全性が高いことが望ましい． しかしながら、これらの巨大分子化ＳＯＤには、酵素活
性保持率、血中半減期の長さ、抗原性および医薬として
の安全性に対して十分には満足できないという問題があ
る。
Ｄは、生体内で酸素分子から発生したＯ；による組織障
害、例えば、変形性関節炎、慢性関節リウマチ、放射線
照射による障害、紫外線による障害、未熟児酸素網膜症
、白内障、アドリアマイシンなどの制癌剤の副作用、虚
血部分への血流再開に伴う障害などに対する有効な治療
薬として注目されている． このようにＳＯＤが医薬として有望であるにもかかわら
ず、ＳＯＤの血流内半減期が非常に短い（約５分）ため
に、その薬理活性が充分に発揮されない場合が多い． ＳＯＤの血流内半減期が非常に短い原因としては、その
分子量（３２，０００）が腎糸球体の濾過限界値（分子
量で約５０，０００）よりも小さいために血中から速や
かに消失し、尿中に排泄されることが考えられている． 従って、ＳＯＤの薬理活性を充分に発揮させるために、
ポリエチレングリコール（Ｐｙａｔｏｋ，Ｐ．Ｓ．ｅｔ
ａｌ．ＨＲｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａ
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ｇｙ，２９，１１３ （１９８０））、ラットアルブ
ミン（Ｗｏｎｇ，Ｋ，ｅｔ ａｌ．；Ａｇｅｎｔ
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ａｌ Ａｃａｄｅｍｙｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｕ
，Ｓ，Ａ．，７７．１１５９ （１９８０））、ポリア
ルキレングリコール（特開昭６１−２４９３８８）やイ
ヌリン（特開昭５８−３２８２６）などを用いてＳＯＤ
を巨大分子化させ、ＳＯＤの血中半減期を増加させる試
みがなされている． ところで、巨大分子化したＳＯＤを通常の静脈投与剤と
して使用する場合には、その血中半減期が長くなるのみ
ならず、その酵素活性保持率が高く、かつ医薬としての
安全性が高いことが望ましい． しかしながら、これらの巨大分子化ＳＯＤには、酵素活
性保持率、血中半減期の長さ、抗原性および医薬として
の安全性に対して十分には満足できないという問題があ
る。
本発明の目的は、生体内の酸素分子から発生した０７に
よる組織障害め治療に有用なＳＯＤと医薬として安全性
が確認されているヒアルロン酸とを結合させることによ
って得られた修飾ＳＯＤ（以下、ｒ修飾ＳＯＤＪと略す
）を提供するものである． 〔問題点を解決するための手段〕 本発明者らは、前記の問題点を解決するために鋭意研究
した結果、本発明の『修飾ＳＯＤＪは、ＳＯＤ修飾に伴
うＳＯＤ活性の低下は殆ど認められず、また、ｒ修飾Ｓ
ＯＤＪの血中半減期も顕著に長くなることを見出し、本
発明を完成するに至った． 即ち、本発明は、ヒアルロン酸で修飾されたＳＯＤに関
するものである． 以下、本発明について詳しく説明する．本発明の『修飾
ＳＯＤ，は、ＳＯＤと多糖類であるヒアルロン酸とを化
学的に結合させて得られたものであり、約９０％の酵素
活性保持率と約１５時間の血中半減期を示すものである
．本発明のｒ修飾ＳＯＤＪの作製に用いるＳＯＤとして
は、ウシ、ヒトなどの動物、ホウレン草などの植物、及
びセラチアなどの微生物に由来するものを挙げることが
できるが、ヒトに対する抗原性を考慮した医薬のｔ修飾
ＳＯＤＪとしては、ヒ｝ＳＯＤを用いることが好ましい
。
よる組織障害め治療に有用なＳＯＤと医薬として安全性
が確認されているヒアルロン酸とを結合させることによ
って得られた修飾ＳＯＤ（以下、ｒ修飾ＳＯＤＪと略す
）を提供するものである． 〔問題点を解決するための手段〕 本発明者らは、前記の問題点を解決するために鋭意研究
した結果、本発明の『修飾ＳＯＤＪは、ＳＯＤ修飾に伴
うＳＯＤ活性の低下は殆ど認められず、また、ｒ修飾Ｓ
ＯＤＪの血中半減期も顕著に長くなることを見出し、本
発明を完成するに至った． 即ち、本発明は、ヒアルロン酸で修飾されたＳＯＤに関
するものである． 以下、本発明について詳しく説明する．本発明の『修飾
ＳＯＤ，は、ＳＯＤと多糖類であるヒアルロン酸とを化
学的に結合させて得られたものであり、約９０％の酵素
活性保持率と約１５時間の血中半減期を示すものである
．本発明のｒ修飾ＳＯＤＪの作製に用いるＳＯＤとして
は、ウシ、ヒトなどの動物、ホウレン草などの植物、及
びセラチアなどの微生物に由来するものを挙げることが
できるが、ヒトに対する抗原性を考慮した医薬のｔ修飾
ＳＯＤＪとしては、ヒ｝ＳＯＤを用いることが好ましい
。
そのようなヒトＳＯＤとしては、ヒト赤血球、胎盤など
のＳＯＤを用いることもできるが、近年、遺伝子工学技
術を応用して生産されたヒトＳＯＤ（例えば、特開昭６
１−１１１６９０など）を用いると、大量に安定した試
料を得られるのでさらに好ましい． 本発明のｒ修飾ＳＯＤＪの製造に用いるヒアルロン酸と
しては、分子量が４，０００〜６，０００のものが好ま
しい． 本発明のｒ修飾ＳＯＤＪの製造におけるＳＯＤとヒアル
ロン酸との結合割合は、１分子のＳＯＤ当たり１〜１０
分子がよ《、好ましくは３〜５分子がよい． 本発明の１修飾ＳＯＤＪは、ＳＯＤの官能基（例えば、
アミノ基またはカルボキシル基）とヒアルロン酸の官能
基（例えば、カルボキシル基、アミノ基または水酸基）
とを利用して、好ましくはｐ Ｈ ６． ０〜１０、さ
らに好まし《はｐ Ｈ ７． ０〜８．５で０．１〜ｌ
Ｏ％の濃度としたＳＯＤと活性化ヒアルロン酸を結合さ
せたものであり、例えば、■ヒアルロン酸の水酸基に塩
化シアヌルを反応させた後（これをそのトリアジン環を
介してＳＯＤのアミノ基に結合させることによってＳＯ
Ｄとヒアルロン酸とを結合させる方法 ■ヒアルロン酸のカルボキシル基をＮ−ヒドロキシコハ
ク酸とジシクロへキシル力ルポジイミドとを用いてエス
テルを導入し、これをＳＯＤのアミノ基に結合させるこ
とによってＳＯＤとヒアルロン酸とを結合させる方法 ■ヒアルロン酸の水酸基に無水コハク酸を用いてカルボ
キシル基を導入し、さらにそのカルボキシル基をＮ−ヒ
ドロキシコハク酸とジシクロへキシルカルボジイミドと
を用いてエステルを導入し、これをＳＯＤのアミノ基に
結合させることによってＳＯＤとヒアルロン酸とを結合
させる方法などの方法で作製することができる。
のＳＯＤを用いることもできるが、近年、遺伝子工学技
術を応用して生産されたヒトＳＯＤ（例えば、特開昭６
１−１１１６９０など）を用いると、大量に安定した試
料を得られるのでさらに好ましい． 本発明のｒ修飾ＳＯＤＪの製造に用いるヒアルロン酸と
しては、分子量が４，０００〜６，０００のものが好ま
しい． 本発明のｒ修飾ＳＯＤＪの製造におけるＳＯＤとヒアル
ロン酸との結合割合は、１分子のＳＯＤ当たり１〜１０
分子がよ《、好ましくは３〜５分子がよい． 本発明の１修飾ＳＯＤＪは、ＳＯＤの官能基（例えば、
アミノ基またはカルボキシル基）とヒアルロン酸の官能
基（例えば、カルボキシル基、アミノ基または水酸基）
とを利用して、好ましくはｐ Ｈ ６． ０〜１０、さ
らに好まし《はｐ Ｈ ７． ０〜８．５で０．１〜ｌ
Ｏ％の濃度としたＳＯＤと活性化ヒアルロン酸を結合さ
せたものであり、例えば、■ヒアルロン酸の水酸基に塩
化シアヌルを反応させた後（これをそのトリアジン環を
介してＳＯＤのアミノ基に結合させることによってＳＯ
Ｄとヒアルロン酸とを結合させる方法 ■ヒアルロン酸のカルボキシル基をＮ−ヒドロキシコハ
ク酸とジシクロへキシル力ルポジイミドとを用いてエス
テルを導入し、これをＳＯＤのアミノ基に結合させるこ
とによってＳＯＤとヒアルロン酸とを結合させる方法 ■ヒアルロン酸の水酸基に無水コハク酸を用いてカルボ
キシル基を導入し、さらにそのカルボキシル基をＮ−ヒ
ドロキシコハク酸とジシクロへキシルカルボジイミドと
を用いてエステルを導入し、これをＳＯＤのアミノ基に
結合させることによってＳＯＤとヒアルロン酸とを結合
させる方法などの方法で作製することができる。
このようにして、ヒアルロン酸とＳＯＤとを結合するこ
とによって得られるｒ修飾ＳＯＤＪは、８９％の酵素活
性保持率を有するものである．〔実施例〕 以下、本発明を実施例によって具体的に説明する．なお
、これらの実施例は、本発明を例示するためのものであ
って、本発明の範囲を限定するものではない． 本発明の実施例に示したｒ修飾ＳＯＤＪの活性保持率は
、大柳の示した方法（Ｏｙａｎａｇｕｉ，Ｙ．；Ａｎａ
ｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１４２
，２９０−２９６ （１９８４）〕に準じてヒアルロン
酸の修飾前後におけるＳＯＤの比活性を求め、その変化
から求めた．また、ヒアルロン酸がＳＯＤ １分子当た
り何分子結合するかは、分析用の高速ゲル濾過力ラムで
ある３ ０ ０ ０ ＰＷおよび５０００ＰＷ（いづれ
も、東ソー社製）を用いてｒ修飾ＳＯＤＪの分子量を測
定し、その分子量とＳＯＤの分子量とを比較することに
よって決定した。
とによって得られるｒ修飾ＳＯＤＪは、８９％の酵素活
性保持率を有するものである．〔実施例〕 以下、本発明を実施例によって具体的に説明する．なお
、これらの実施例は、本発明を例示するためのものであ
って、本発明の範囲を限定するものではない． 本発明の実施例に示したｒ修飾ＳＯＤＪの活性保持率は
、大柳の示した方法（Ｏｙａｎａｇｕｉ，Ｙ．；Ａｎａ
ｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１４２
，２９０−２９６ （１９８４）〕に準じてヒアルロン
酸の修飾前後におけるＳＯＤの比活性を求め、その変化
から求めた．また、ヒアルロン酸がＳＯＤ １分子当た
り何分子結合するかは、分析用の高速ゲル濾過力ラムで
ある３ ０ ０ ０ ＰＷおよび５０００ＰＷ（いづれ
も、東ソー社製）を用いてｒ修飾ＳＯＤＪの分子量を測
定し、その分子量とＳＯＤの分子量とを比較することに
よって決定した。
実施例１
１００ｍｇのヒアルロン酸（生化学工業社製のブタ皮か
ら抽出された多ｌＪ！Ｒ。分子量は４〜６万。
ら抽出された多ｌＪ！Ｒ。分子量は４〜６万。
）を２ｍｌの水に溶解し、これに室温で塩化シアヌル液
〔１ｍ２の水−アセトン溶液（１対２の混合体積比）に
塩化シアヌル１０ｍｇ溶解．〕を０．ＩＮの水酸化ナト
リウムを用いてｐ Ｈ ９． ５±１．０に調整しなが
ら１０分間で滴下した後、０． ０ ５ Ｎの塩酸を加
えてｐＨを３以下に調整し、さらに、その１０倍容量の
アセトンを加えて生じた沈澱を濾過分取し、それをアセ
トンで洗浄することによって６０ｍｇの活性化ヒアルロ
ン酸を得た。
〔１ｍ２の水−アセトン溶液（１対２の混合体積比）に
塩化シアヌル１０ｍｇ溶解．〕を０．ＩＮの水酸化ナト
リウムを用いてｐ Ｈ ９． ５±１．０に調整しなが
ら１０分間で滴下した後、０． ０ ５ Ｎの塩酸を加
えてｐＨを３以下に調整し、さらに、その１０倍容量の
アセトンを加えて生じた沈澱を濾過分取し、それをアセ
トンで洗浄することによって６０ｍｇの活性化ヒアルロ
ン酸を得た。
このようにして得られた５ ０ｍｇの活性化ヒアルロン
酸を、ヒトＣｕ．Ｚｎ−ＳＯＤ溶液〔特開昭６１−１１
１６９０号に示されたヒトＣｕ，Ｚｎ−ＳＯＤ生産菌Ｅ
．ｃｏｌｉ Ｗ３１１０ （ｐＵＢＥ２）で生産し、
精製して得られた５ｍｇを２ｍｌの０．１Ｍホウ酸緩衝
液（ｐＨ９．２）に溶解．〕に徐々に加えて４゜Ｃで穏
やかに１２時間攪拌した．その後、水に対して透析し、
さらに凍結乾燥することによて２５ｍｇの１修飾ＳＯＤ
Ｊを得た。
酸を、ヒトＣｕ．Ｚｎ−ＳＯＤ溶液〔特開昭６１−１１
１６９０号に示されたヒトＣｕ，Ｚｎ−ＳＯＤ生産菌Ｅ
．ｃｏｌｉ Ｗ３１１０ （ｐＵＢＥ２）で生産し、
精製して得られた５ｍｇを２ｍｌの０．１Ｍホウ酸緩衝
液（ｐＨ９．２）に溶解．〕に徐々に加えて４゜Ｃで穏
やかに１２時間攪拌した．その後、水に対して透析し、
さらに凍結乾燥することによて２５ｍｇの１修飾ＳＯＤ
Ｊを得た。
ヒアルロン酸はＳＯＤ１分子当たり約４分子結合してお
り、その酵素活性保持率は８９％であった． 実施例２ ウイスタ一系ラット（♂、体重は２５０±３０ｇ）の２
匹に、生理食塩水に溶解した実施例１、ｒ修飾ＳＯＤＪ
溶液を、１匹当たりＳＯＤの蛋白質量として０． ６
ｍ ｇづつ総頚静脈へ注入した．注入から、２分、５分
、１５分、３０分、６０分、９０分、１２０分、１５０
分、１８０分経過時に０． ４ ｍ ｊ！づつ採血し、
その血漿中のＳＯＤ量を前記の大柳のＳＯＤ活性測定法
で測定した．ｒ修飾ＳＯＤＪの血流内半減期を求めるた
めに、これらの血漿中のＳＯＤの相対活性を時間に対し
てプロットした結果、その半減期は、約１５時間であっ
た． 比較例１ 未修飾のＳＯＤの血流内半減期を求めるために、実施例
２の場合と同様にして、ウイスタ一系ラット（♂、体重
は２５０±３０ｇ）を用いて血漿中のＳＯＤの相対活性
及び相対濃度を時間に対してプロットした結果、その半
減期は、相対活性及び相対濃度のいずれの場合において
も約５分であった． 〔発明の効果〕 本発明の酵素活性保持率が高く、かつ血流内半減期が改
善されたｒ修飾ＳＯＤＪは、静脈投与剤としてのＳＯＤ
の薬理効果を高めるものである．特許出願人 宇部興
産株式会社
り、その酵素活性保持率は８９％であった． 実施例２ ウイスタ一系ラット（♂、体重は２５０±３０ｇ）の２
匹に、生理食塩水に溶解した実施例１、ｒ修飾ＳＯＤＪ
溶液を、１匹当たりＳＯＤの蛋白質量として０． ６
ｍ ｇづつ総頚静脈へ注入した．注入から、２分、５分
、１５分、３０分、６０分、９０分、１２０分、１５０
分、１８０分経過時に０． ４ ｍ ｊ！づつ採血し、
その血漿中のＳＯＤ量を前記の大柳のＳＯＤ活性測定法
で測定した．ｒ修飾ＳＯＤＪの血流内半減期を求めるた
めに、これらの血漿中のＳＯＤの相対活性を時間に対し
てプロットした結果、その半減期は、約１５時間であっ
た． 比較例１ 未修飾のＳＯＤの血流内半減期を求めるために、実施例
２の場合と同様にして、ウイスタ一系ラット（♂、体重
は２５０±３０ｇ）を用いて血漿中のＳＯＤの相対活性
及び相対濃度を時間に対してプロットした結果、その半
減期は、相対活性及び相対濃度のいずれの場合において
も約５分であった． 〔発明の効果〕 本発明の酵素活性保持率が高く、かつ血流内半減期が改
善されたｒ修飾ＳＯＤＪは、静脈投与剤としてのＳＯＤ
の薬理効果を高めるものである．特許出願人 宇部興
産株式会社
Claims (1)
- ヒアルロン酸で修飾されたスーパーオキシドジスムター
ゼ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1050007A JPH02231078A (ja) | 1989-03-03 | 1989-03-03 | ヒアルロン酸修飾スーパーオキシドジスムターゼ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1050007A JPH02231078A (ja) | 1989-03-03 | 1989-03-03 | ヒアルロン酸修飾スーパーオキシドジスムターゼ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02231078A true JPH02231078A (ja) | 1990-09-13 |
Family
ID=12846941
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1050007A Pending JPH02231078A (ja) | 1989-03-03 | 1989-03-03 | ヒアルロン酸修飾スーパーオキシドジスムターゼ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH02231078A (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992006714A1 (en) * | 1990-10-18 | 1992-04-30 | Shiseido Co., Ltd. | Combination of hyaluronic acid with medicinal ingredient and production thereof |
| US5238837A (en) * | 1991-02-05 | 1993-08-24 | Kuraray Co., Ltd. | Superoxide dismutase derivatives |
| US5733891A (en) * | 1990-10-18 | 1998-03-31 | Shiseido Co., Ltd. | Compound for medicinal ingredient and hyaluronic acid and process for producing the same |
| US5834273A (en) * | 1991-03-28 | 1998-11-10 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Heat-stable and water soluble modified enzymes |
| JP2001081103A (ja) * | 1999-09-13 | 2001-03-27 | Denki Kagaku Kogyo Kk | ヒアルロン酸結合薬剤 |
| WO2003105858A1 (en) * | 2002-06-14 | 2003-12-24 | Centerpulse Biologics, Inc. | Hyaluronic acid-associated superoxide dismutase mimics and their use in the treatment of joint pain |
| EP1577313A1 (en) * | 1999-05-27 | 2005-09-21 | Monsanto Company | Biomaterials modified with superoxide dismutase mimics |
| WO2006116452A1 (en) * | 2005-04-22 | 2006-11-02 | Molecular Regenix, Llc | Nutritional composition comprising hyaluronic acid and superoxide dismutase and methods of making and using same |
| US7445641B1 (en) | 1999-05-27 | 2008-11-04 | Pharmacia Corporation | Biomaterials modified with superoxide dismutase mimics |
-
1989
- 1989-03-03 JP JP1050007A patent/JPH02231078A/ja active Pending
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1992006714A1 (en) * | 1990-10-18 | 1992-04-30 | Shiseido Co., Ltd. | Combination of hyaluronic acid with medicinal ingredient and production thereof |
| AU652784B2 (en) * | 1990-10-18 | 1994-09-08 | Shiseido Company Ltd. | Combination of hyaluronic acid with medicinal ingredient and production thereof |
| US5733891A (en) * | 1990-10-18 | 1998-03-31 | Shiseido Co., Ltd. | Compound for medicinal ingredient and hyaluronic acid and process for producing the same |
| US5238837A (en) * | 1991-02-05 | 1993-08-24 | Kuraray Co., Ltd. | Superoxide dismutase derivatives |
| US5834273A (en) * | 1991-03-28 | 1998-11-10 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Heat-stable and water soluble modified enzymes |
| EP1577313A1 (en) * | 1999-05-27 | 2005-09-21 | Monsanto Company | Biomaterials modified with superoxide dismutase mimics |
| US7445641B1 (en) | 1999-05-27 | 2008-11-04 | Pharmacia Corporation | Biomaterials modified with superoxide dismutase mimics |
| JP2001081103A (ja) * | 1999-09-13 | 2001-03-27 | Denki Kagaku Kogyo Kk | ヒアルロン酸結合薬剤 |
| WO2003105858A1 (en) * | 2002-06-14 | 2003-12-24 | Centerpulse Biologics, Inc. | Hyaluronic acid-associated superoxide dismutase mimics and their use in the treatment of joint pain |
| WO2006116452A1 (en) * | 2005-04-22 | 2006-11-02 | Molecular Regenix, Llc | Nutritional composition comprising hyaluronic acid and superoxide dismutase and methods of making and using same |
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