JPS58141780A - 嫌気性細菌の培養方法 - Google Patents
嫌気性細菌の培養方法Info
- Publication number
- JPS58141780A JPS58141780A JP2547182A JP2547182A JPS58141780A JP S58141780 A JPS58141780 A JP S58141780A JP 2547182 A JP2547182 A JP 2547182A JP 2547182 A JP2547182 A JP 2547182A JP S58141780 A JPS58141780 A JP S58141780A
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- Japan
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- oxygen
- carbon dioxide
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- anaerobic bacteria
- dioxide gas
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は嫌気性細菌の培養方法に関するものである。細
菌は酸素の要求度から １）個性好気性菌 の通気嫌気
性菌 ３）偏性嫌気性菌に分けられ、このうち偏性嫌気
性菌の中にはボツリヌス菌、ウェルシュ菌等の食中毒菌
も多く近年、嫌気性細菌の培養方法が注目されてきてい
る。
菌は酸素の要求度から １）個性好気性菌 の通気嫌気
性菌 ３）偏性嫌気性菌に分けられ、このうち偏性嫌気
性菌の中にはボツリヌス菌、ウェルシュ菌等の食中毒菌
も多く近年、嫌気性細菌の培養方法が注目されてきてい
る。
しかしながら、従来嫌気性細菌の培養には特別の器具、
装置を必要とし、かつ操作にはかなりの熟練を必要とさ
れていた。
装置を必要とし、かつ操作にはかなりの熟練を必要とさ
れていた。
従来までの方法にはり重層法 ｌ）高層固形培地培養法
０！！気置換法 約化学的酸素吸収法■還元剤等を培
地に加える方法 荀生物学的方法等があるが、これらは
いずれも嫌気雰囲気を作るためには操作が煩雑であった
０ 最も一般的に行なわれている方法はわのうちガスパック
法で原理は化学的方法によりＨ２ガス及び炭酸ガスを発
生させ、Ｐｄ金属触媒を用いてＨ２と答器内の０２とを
反応させ嫌気状態を作り出すものであるＯしかしながら
、この方法では ■可燃性のＨ２ガスの発生を伴い、酸
素除去後も数十％のＨ２ガスが残存し危険であること
■触媒の温度が１００℃以上の高温に達する点 ■触媒
の再生が必要であること ■経済性に劣る点 等の問題
点が指摘されていた。
０！！気置換法 約化学的酸素吸収法■還元剤等を培
地に加える方法 荀生物学的方法等があるが、これらは
いずれも嫌気雰囲気を作るためには操作が煩雑であった
０ 最も一般的に行なわれている方法はわのうちガスパック
法で原理は化学的方法によりＨ２ガス及び炭酸ガスを発
生させ、Ｐｄ金属触媒を用いてＨ２と答器内の０２とを
反応させ嫌気状態を作り出すものであるＯしかしながら
、この方法では ■可燃性のＨ２ガスの発生を伴い、酸
素除去後も数十％のＨ２ガスが残存し危険であること
■触媒の温度が１００℃以上の高温に達する点 ■触媒
の再生が必要であること ■経済性に劣る点 等の問題
点が指摘されていた。
本発明はこれらの欠点を克服したものである。
すなわち本発明は、嫌気性細菌を接種した培地を （ａ
ｔアスコルビン酸、エリソルビン酸、又はこれらの塩、
又はそれらとアルカリ性物質を有効成分とする組成物を
通気性包材に密封包装してなる密封包装体および ０）
）炭酸ガスを実質的に発生せず酸素を吸収する脱酸素剤
包装体・と共に実質的に非通気性の包材または気密容器
内に密封して嫌気性細菌を培養する方法であって、密封
系内の歳素濃度を１０時間以内に１％以下好ましくは０
．１％以下にし、かつ密封系内における炭酸ガスの濃度
が５〜３０％になるよう酸素を吸収し、炭酸ガスを発生
するように（ａｔと（ｂｌを調製して組合わせ、密封後
１０時間以内に酸素濃度を１％以下好ましくは０．１％
以下にし、酸素濃度１％以下好ましくは０．１％以下、
炭酸ガス濃度５〜６０％好ましくは８〜２０％で保持す
る嫌気性細菌の培養方法である。
ｔアスコルビン酸、エリソルビン酸、又はこれらの塩、
又はそれらとアルカリ性物質を有効成分とする組成物を
通気性包材に密封包装してなる密封包装体および ０）
）炭酸ガスを実質的に発生せず酸素を吸収する脱酸素剤
包装体・と共に実質的に非通気性の包材または気密容器
内に密封して嫌気性細菌を培養する方法であって、密封
系内の歳素濃度を１０時間以内に１％以下好ましくは０
．１％以下にし、かつ密封系内における炭酸ガスの濃度
が５〜３０％になるよう酸素を吸収し、炭酸ガスを発生
するように（ａｔと（ｂｌを調製して組合わせ、密封後
１０時間以内に酸素濃度を１％以下好ましくは０．１％
以下にし、酸素濃度１％以下好ましくは０．１％以下、
炭酸ガス濃度５〜６０％好ましくは８〜２０％で保持す
る嫌気性細菌の培養方法である。
本発明においては密封系内の酸素濃度を１０時間以内に
１％以下にすることが必須であり、この条件が満足され
ない場合には嫌気性細菌は死滅する。また炭酸ガス濃度
を５〜３０％、好ましくは８〜２０％にすることが必要
であり、炭酸ガス濃度が５％よりも低い場合には嫌気性
細菌の培養は実質的に困難である。又、臀殴ガス濃度が
３０％よりも高い場合には、密封容器に圧がかかるか、
袋の場合にはふくらんで、破袋する等の危険性があり、
実用的ではない。
１％以下にすることが必須であり、この条件が満足され
ない場合には嫌気性細菌は死滅する。また炭酸ガス濃度
を５〜３０％、好ましくは８〜２０％にすることが必要
であり、炭酸ガス濃度が５％よりも低い場合には嫌気性
細菌の培養は実質的に困難である。又、臀殴ガス濃度が
３０％よりも高い場合には、密封容器に圧がかかるか、
袋の場合にはふくらんで、破袋する等の危険性があり、
実用的ではない。
本発明において用いられる包装体（，１１は酸素をａ収
し炭酸ガスを発生するものである。包装体（ａｌで用い
られ′るアスコルビン駿又はエリソルビン険の塩として
は例えばアルカリ金属、アルカリ土類金属の塩があげら
れ、アルカリ性物質としてはアルカリ金属の水酸化物、
炭酸塩、重炭酸塩、アルカリ土類金属の水酸化物があげ
られる０包装体（，１１の組成物にはさらに各種粉末又
は微粒状フィラー（例えば粉末活性炭、タルク、アバタ
ラガスクレー、酸化チタン、酸化鉄粉、ホワイトカーボ
ン、ゼオライト、アルミナ）などの添加物を含めること
ができ、これらの添加によっても酸素吸収能、炭酸ガス
発生能を調節することができる。
し炭酸ガスを発生するものである。包装体（ａｌで用い
られ′るアスコルビン駿又はエリソルビン険の塩として
は例えばアルカリ金属、アルカリ土類金属の塩があげら
れ、アルカリ性物質としてはアルカリ金属の水酸化物、
炭酸塩、重炭酸塩、アルカリ土類金属の水酸化物があげ
られる０包装体（，１１の組成物にはさらに各種粉末又
は微粒状フィラー（例えば粉末活性炭、タルク、アバタ
ラガスクレー、酸化チタン、酸化鉄粉、ホワイトカーボ
ン、ゼオライト、アルミナ）などの添加物を含めること
ができ、これらの添加によっても酸素吸収能、炭酸ガス
発生能を調節することができる。
本発明においてはさらに包装体（ｂｌが用いられるが、
この包装体は脱酸素剤組成物を通気性包材で密封包装し
たものである。脱酸素剤組成物は炭酸ガスを実質的に発
生せず酸素を吸収し固定する還元剤であり、例えば亜硫
酸塩、亜硫酸水素塩、チオ硫酸塩、亜ニチオン酸塩、ヒ
ドロキノン、カテコール、レゾルシン、ピロガロール、
没食子酸、ロンガリット、ソルボース、グルコース、リ
グニン、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキ
シアニソール、鉄粉および第一鉄塩（炭酸塩を除く）か
らなる群から選ばれる少なくとも一穐を有効成分とする
ものがあげられる。それらのなかでも鉄粉および電解質
を含むものが好ましい。脱酸素剤組成物には水や各種粉
末又は微粒状フィラーなどの添加物を含めることができ
、これらの添加によっても酸素吸収能を調節することが
できる。
この包装体は脱酸素剤組成物を通気性包材で密封包装し
たものである。脱酸素剤組成物は炭酸ガスを実質的に発
生せず酸素を吸収し固定する還元剤であり、例えば亜硫
酸塩、亜硫酸水素塩、チオ硫酸塩、亜ニチオン酸塩、ヒ
ドロキノン、カテコール、レゾルシン、ピロガロール、
没食子酸、ロンガリット、ソルボース、グルコース、リ
グニン、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキ
シアニソール、鉄粉および第一鉄塩（炭酸塩を除く）か
らなる群から選ばれる少なくとも一穐を有効成分とする
ものがあげられる。それらのなかでも鉄粉および電解質
を含むものが好ましい。脱酸素剤組成物には水や各種粉
末又は微粒状フィラーなどの添加物を含めることができ
、これらの添加によっても酸素吸収能を調節することが
できる。
包装体（ａ）、（ｂｌは通気性包材に包装したものであ
るが、ここで用いられる通気性包材としては嫌気性培養
のために必要な酸素吸収速度を考慮してガーレ一式透気
度−（Ｊ ｌ５−Ｐ−８１１７、シリンダーの重さ ５
７０ｆ）が通常１０００ｓｅｃより大きいもの、特に１
００ ｓｅｃより大きな通気性を有するものが好ましい
。例えば有孔プラスチックフィルムを紙などとラミネー
トしたもの、又はいわゆふマイクロポーラスフィルムも
しくはそれを他の通気性シートとラミネートしたものな
どかあシられる〇 本発明においては包装体−１、（ｂｌ中の組成物の成分
−組成は包装体（ａｌ、（ｂｌを組合わせたものが、密
封系内の酸素濃度を１０時間以内に１％以下好ましくは
０．１％以下にすることができ、かつ炭酸ガス濃度を５
〜３０％にしつるよう調製される。包装体（ａｌ、ｆｂ
ｌは組合わせて用いたときに、密封系内の酸素量の１〜
２０倍の酸素を吸収する能力を有し、かつ密封系内にお
ける酸素吸収量に対する炭酸ガス発生量が０．２〜０゜
７になるよう調製するのが好ましい。
るが、ここで用いられる通気性包材としては嫌気性培養
のために必要な酸素吸収速度を考慮してガーレ一式透気
度−（Ｊ ｌ５−Ｐ−８１１７、シリンダーの重さ ５
７０ｆ）が通常１０００ｓｅｃより大きいもの、特に１
００ ｓｅｃより大きな通気性を有するものが好ましい
。例えば有孔プラスチックフィルムを紙などとラミネー
トしたもの、又はいわゆふマイクロポーラスフィルムも
しくはそれを他の通気性シートとラミネートしたものな
どかあシられる〇 本発明においては包装体−１、（ｂｌ中の組成物の成分
−組成は包装体（ａｌ、（ｂｌを組合わせたものが、密
封系内の酸素濃度を１０時間以内に１％以下好ましくは
０．１％以下にすることができ、かつ炭酸ガス濃度を５
〜３０％にしつるよう調製される。包装体（ａｌ、ｆｂ
ｌは組合わせて用いたときに、密封系内の酸素量の１〜
２０倍の酸素を吸収する能力を有し、かつ密封系内にお
ける酸素吸収量に対する炭酸ガス発生量が０．２〜０゜
７になるよう調製するのが好ましい。
本発明で使用する密封容器は通常、成木透気度が５００
ＤＣ７ｍ” ・２４ ｈｒ＊ａｔｏｍ 以下、好まし
くは１００ ｃｃ／ ｍ’ ＠２４ ｈｒ＊ａｔｏｍ
以下の材質で作られたものであり、完全に密封可能であ
わば、その形態にかかわらず使用可能である。
ＤＣ７ｍ” ・２４ ｈｒ＊ａｔｏｍ 以下、好まし
くは１００ ｃｃ／ ｍ’ ＠２４ ｈｒ＊ａｔｏｍ
以下の材質で作られたものであり、完全に密封可能であ
わば、その形態にかかわらず使用可能である。
例えば本発明で用いる最も簡単な容器は各種塩化ビニリ
デンコートフィルム（ＫＯＰ、ＫＯＮ。
デンコートフィルム（ＫＯＰ、ＫＯＮ。
ＫＰＥＴ等）、ビニロン等で例示される実質的に非通気
性の透明の包材で作られた袋であり、嫌気性菌の接種さ
れた培地を包装体（ａｌ、 （ｂｌと共に封入し、ヒー
トシール、又は封止材により封止することにより密封で
きる０なおこのような透明フィルムを用いることによっ
て培養中の嫌気性菌の生育状況を観察することが可能で
ある０培養源度は通常２０〜４０℃である。
性の透明の包材で作られた袋であり、嫌気性菌の接種さ
れた培地を包装体（ａｌ、 （ｂｌと共に封入し、ヒー
トシール、又は封止材により封止することにより密封で
きる０なおこのような透明フィルムを用いることによっ
て培養中の嫌気性菌の生育状況を観察することが可能で
ある０培養源度は通常２０〜４０℃である。
本発明によれば触媒や特殊な器具、装置を必要とせず、
包装体（ａｌ、（ｂｌを嫌気性細菌を接種した培地と共
に非通気性包材または気密容器に封入、密封することに
より、きわめて簡単に嫌気性細菌を培養することができ
るＯ 以下に実施例をあげて説明するＯ 実施例 Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ を
ＧＡＭブイヨンで２４時間嫌気培養した培養液の希釈液
０．１１をＧＡＭ寒天培地に混合しシャーレに入れた。
包装体（ａｌ、（ｂｌを嫌気性細菌を接種した培地と共
に非通気性包材または気密容器に封入、密封することに
より、きわめて簡単に嫌気性細菌を培養することができ
るＯ 以下に実施例をあげて説明するＯ 実施例 Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ を
ＧＡＭブイヨンで２４時間嫌気培養した培養液の希釈液
０．１１をＧＡＭ寒天培地に混合しシャーレに入れた。
このシャーレとＬ−７スコルビン酸 ２１、重炭酸ナト
リウム ４ノ、水散化カルシウム０．２？、粉末活性炭
２１、水 １．２−を紙に有孔ポリエチレンフィルム
にラミネートした通気性包材で包装した炭讃ガスを発生
する脱酸素剤及び同じ通気性包材で、ピロカテコール２
ノと水 ４継、粉末活性炭 ａｔｓ水酸化カルシウム
０．２１を包装した脱酸素剤とを塩化ビニリデンをコー
トした延伸ポリプロピレンポリエチレンの積層フィルム
からなる透明な袋に入れ、ヒートシールを行なった。袋
内の炭酸ガスの濃度は６％になり、密封後３時間以内に
酸素の濃度は０．１％以下になった０ ３７℃で４８時間培養伊、コロニー数を測定した。
リウム ４ノ、水散化カルシウム０．２？、粉末活性炭
２１、水 １．２−を紙に有孔ポリエチレンフィルム
にラミネートした通気性包材で包装した炭讃ガスを発生
する脱酸素剤及び同じ通気性包材で、ピロカテコール２
ノと水 ４継、粉末活性炭 ａｔｓ水酸化カルシウム
０．２１を包装した脱酸素剤とを塩化ビニリデンをコー
トした延伸ポリプロピレンポリエチレンの積層フィルム
からなる透明な袋に入れ、ヒートシールを行なった。袋
内の炭酸ガスの濃度は６％になり、密封後３時間以内に
酸素の濃度は０．１％以下になった０ ３７℃で４８時間培養伊、コロニー数を測定した。
また比較例１として同試料を大気中で培養した場合及び
比較例２として炭酸ガスが存在しない嫌気性状態で培養
した場合の例を示した。
比較例２として炭酸ガスが存在しない嫌気性状態で培養
した場合の例を示した。
秦 １０６希釈＄０．１−中の生菌数
Claims (1)
- 嫌気性細菌を接種した培地を 偽１７スコルビン酸、エ
リソルビン酸、又はそれらの塩、又はそれらとアルカリ
性物質を有効成分とする組成物を通気性包材に密封包装
してなる密封包装体および 卸炭酸ガスを実質的に発生
せず酸素を吸収する脱酸素剤包装体 と共に実質的ζこ
非通気性の包材または気密容器Ｐ’３ｉＣ密封して嫌気
性細−を培養する方法であって、密封系内の酸素濃度を
１０時間以内に１％以下にし、かつ密封系内における炭
酸ガスの濃度が５〜３０％になるよう酸素を吸収し、炭
酸ガスを発生するように偽）と（ｂｌを調製して組合わ
せ、密封後１０時間以内に酸素濃度を１％以下にし、酸
素濃度１％以下、炭酸ガス濃度５〜５０％で保持する嫌
気性細菌の培養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2547182A JPS58141780A (ja) | 1982-02-19 | 1982-02-19 | 嫌気性細菌の培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2547182A JPS58141780A (ja) | 1982-02-19 | 1982-02-19 | 嫌気性細菌の培養方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58141780A true JPS58141780A (ja) | 1983-08-23 |
Family
ID=12166947
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2547182A Pending JPS58141780A (ja) | 1982-02-19 | 1982-02-19 | 嫌気性細菌の培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58141780A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63137643A (ja) * | 1986-11-27 | 1988-06-09 | Toshiyuki Ota | 食品の保存法 |
| EP0798373A3 (en) * | 1996-03-26 | 1999-07-21 | Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. | Gas concentration adjusting agent, gas concentration adjusting method, and gas concentration adjusting system |
| EP0869172A3 (en) * | 1997-04-01 | 1999-07-21 | Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. | Atmosphere regulator and method for culturing anaerobic bacteria |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS54105288A (en) * | 1978-01-31 | 1979-08-18 | Toppan Printing Co Ltd | Culturing of anaerobic bacteria |
| JPS5856679A (ja) * | 1981-09-30 | 1983-04-04 | Meito Kk | 嫌気性菌培養方法及び雰囲気調整剤 |
-
1982
- 1982-02-19 JP JP2547182A patent/JPS58141780A/ja active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS54105288A (en) * | 1978-01-31 | 1979-08-18 | Toppan Printing Co Ltd | Culturing of anaerobic bacteria |
| JPS5856679A (ja) * | 1981-09-30 | 1983-04-04 | Meito Kk | 嫌気性菌培養方法及び雰囲気調整剤 |
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| JPS63137643A (ja) * | 1986-11-27 | 1988-06-09 | Toshiyuki Ota | 食品の保存法 |
| JPH0352938B2 (ja) * | 1986-11-27 | 1991-08-13 | Toshuki Oota | |
| EP0798373A3 (en) * | 1996-03-26 | 1999-07-21 | Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. | Gas concentration adjusting agent, gas concentration adjusting method, and gas concentration adjusting system |
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