JPH1171323A - 新規なホスホグリコリピド抗生物質分解物およびその製造方法 - Google Patents
新規なホスホグリコリピド抗生物質分解物およびその製造方法Info
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- JPH1171323A JPH1171323A JP10135487A JP13548798A JPH1171323A JP H1171323 A JPH1171323 A JP H1171323A JP 10135487 A JP10135487 A JP 10135487A JP 13548798 A JP13548798 A JP 13548798A JP H1171323 A JPH1171323 A JP H1171323A
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- C12R2001/07—Bacillus
Abstract
(57)【要約】
【課題】 抗菌剤またはその合成中間体として有用なホ
スホグリコリピド抗生物質分解物を提供することを目的
とする。 【解決手段】 ホスホグリコリピド抗生物質をバチルス
属に属する菌株ＤＳＭ４６７５またはそれから得られた
粗抽出物とインキュベートすることにより、式（II） 【化１】 （式中、Ｒ1は水素であり、そしてＲ2は直鎖または分枝
鎖の飽和または不飽和の（Ｃ5〜Ｃ55）−アルキル基で
ある）で表される化合物が得られる。この分解は、それ
自体抗菌剤として、あるいは抗菌剤の合成中間体として
有用である。
スホグリコリピド抗生物質分解物を提供することを目的
とする。 【解決手段】 ホスホグリコリピド抗生物質をバチルス
属に属する菌株ＤＳＭ４６７５またはそれから得られた
粗抽出物とインキュベートすることにより、式（II） 【化１】 （式中、Ｒ1は水素であり、そしてＲ2は直鎖または分枝
鎖の飽和または不飽和の（Ｃ5〜Ｃ55）−アルキル基で
ある）で表される化合物が得られる。この分解は、それ
自体抗菌剤として、あるいは抗菌剤の合成中間体として
有用である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、新規なホスホグリ
コリピド抗生物質分解物およびその製造方法に関する。
本発明の分解物は、抗菌剤またはその中間体として有用
である。
コリピド抗生物質分解物およびその製造方法に関する。
本発明の分解物は、抗菌剤またはその中間体として有用
である。
【０００２】
【従来の技術およびその問題点】モエノマイシンＡ（図
式参照）は家畜栄養物に用いられているフラボマイシン
(R)の主成分である。他の公知のホスホグリコリピド抗
生物質のようにそれは細菌細胞壁のペプチドグリカン骨
格の生合成を阻害する。より精密な調査により大腸菌の
ペニシリン−結合タンパク質１ｂのグリコシル転移反応
がこれらの物質によって阻害されることが示された〔Hu
ber G., Antibiotics, V-1, 135〜153頁(1979年)〕。今
までのところ、ホスホグリコリピド抗生物質の特定の酵
素によるまたは微生物による分解における試みは成功し
ていない。
式参照）は家畜栄養物に用いられているフラボマイシン
(R)の主成分である。他の公知のホスホグリコリピド抗
生物質のようにそれは細菌細胞壁のペプチドグリカン骨
格の生合成を阻害する。より精密な調査により大腸菌の
ペニシリン−結合タンパク質１ｂのグリコシル転移反応
がこれらの物質によって阻害されることが示された〔Hu
ber G., Antibiotics, V-1, 135〜153頁(1979年)〕。今
までのところ、ホスホグリコリピド抗生物質の特定の酵
素によるまたは微生物による分解における試みは成功し
ていない。
【０００３】
【課題を解決するための手段】予想外なことに今般ホス
ホグリコリピド抗生物質を開裂して所定の末端生成物と
することのできる新規なバチルス種がストレプトミセス
ガーナエンシス（Streptomyces ghanaensis）を用いる
フラボマイシンの製造のための汚染醗酵槽から単離され
た。これらの末端生成物は抗生作用活性を有し、または
新規なトランスグリコシラーゼ阻害剤の合成における基
礎単位として使用することができる。
ホグリコリピド抗生物質を開裂して所定の末端生成物と
することのできる新規なバチルス種がストレプトミセス
ガーナエンシス（Streptomyces ghanaensis）を用いる
フラボマイシンの製造のための汚染醗酵槽から単離され
た。これらの末端生成物は抗生作用活性を有し、または
新規なトランスグリコシラーゼ阻害剤の合成における基
礎単位として使用することができる。
【０００４】すなわち、本発明は １．バチルス種ＤＳＭ ４６７５その変異体および突然
変異体、 ２．式（Ｉ）
変異体、 ２．式（Ｉ）
【化２】 で表されるモエノマイシンＡの開裂生成物、
【０００５】３．一般式
【化３】 （式中、Ｒ1は水素またはホスホノ基〔−ＰＯ(ＯＨ)2〕
であり、そしてＲ2は分枝鎖または非分枝鎖の飽和また
は不飽和の（Ｃ5〜Ｃ55）−アルキル基である）で表さ
れるホスホグリコリピド抗生物質の開裂生成物、 ４．その助けによりホスホグリコリピド抗生物質がホス
ホグリコシド結合で開裂され、または３に記載の開裂生
成物がモノホスフェートエステル結合で開裂される酵
素、
であり、そしてＲ2は分枝鎖または非分枝鎖の飽和また
は不飽和の（Ｃ5〜Ｃ55）−アルキル基である）で表さ
れるホスホグリコリピド抗生物質の開裂生成物、 ４．その助けによりホスホグリコリピド抗生物質がホス
ホグリコシド結合で開裂され、または３に記載の開裂生
成物がモノホスフェートエステル結合で開裂される酵
素、
【０００６】５．ホスホグリコリピド抗生物質をバチル
ス種ＤＳＭ ４６７５とともにインキュベートすること
からなる、２および３に記載の分解生成物の製造方法、
および ６．２および３に記載の物質のトランスグリコシラーゼ
阻害剤の合成における構築単位として、または抗生作用
活性を有する物質としての使用に関する。本発明を以後
詳細に特に好ましい実施態様につてい述べる。さらに特
許請求の範囲において定義づける。バチルス種は１９８
８年６月２３日西ドイツのブラウンシュヴァイクにおけ
るDeutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellku
lturen GmbH（German Microorganism and Cell Culture
Collection）でブダペスト条約の規定に基づいて番号
ＤＳＭ ４６７５とともに供託された。該菌株の特徴は
下記のものでありうる。
ス種ＤＳＭ ４６７５とともにインキュベートすること
からなる、２および３に記載の分解生成物の製造方法、
および ６．２および３に記載の物質のトランスグリコシラーゼ
阻害剤の合成における構築単位として、または抗生作用
活性を有する物質としての使用に関する。本発明を以後
詳細に特に好ましい実施態様につてい述べる。さらに特
許請求の範囲において定義づける。バチルス種は１９８
８年６月２３日西ドイツのブラウンシュヴァイクにおけ
るDeutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellku
lturen GmbH（German Microorganism and Cell Culture
Collection）でブダペスト条約の規定に基づいて番号
ＤＳＭ ４６７５とともに供託された。該菌株の特徴は
下記のものでありうる。
【０００７】１．バチルス種ＤＳＭ ４６７５の分類特
性 Ａ） 形態学 ・ 運動性の桿状体；５μmまでの長さ；幾らかは短鎖 ・ 末端胞子（terminal spore）；膨張した胞子嚢 ・ グラム陽性
性 Ａ） 形態学 ・ 運動性の桿状体；５μmまでの長さ；幾らかは短鎖 ・ 末端胞子（terminal spore）；膨張した胞子嚢 ・ グラム陽性
【０００８】Ｂ） 各種培地における成長（２８℃；４
８時間） １．抗生物質培地３（Difco） ・ １〜２mm径の粗い浅裂のコロニー ２．ルリアブイョン（バクトトリプトン１０ｇ／ｌ；バ
クトイースト５ｇ／ｌ；ＮａＣｌ ５ｇ／ｌ） ・ ２〜３mm径の滑らかで光沢のある円いコロニー；不
透明 ３．栄養ブロス（Difco） ・ 不規則な縁を有する白色で光沢のあるコロニー ４．クリステンセン尿素寒天（Difco） ・ 成長陽性 ５．マッコンキー寒天（Difco） ・ 成長陽性 ６．ＢＲＯＬＡＣ寒天（ラクトース）（Difco） ・ 成長陽性 ７．シモンズ クエン酸塩寒天（Difco） ・ 成長陽性 ８．ペプトン／肉エキス培地（Difco）中７または１０
％ＮａＣｌの存在下では成長しない。
８時間） １．抗生物質培地３（Difco） ・ １〜２mm径の粗い浅裂のコロニー ２．ルリアブイョン（バクトトリプトン１０ｇ／ｌ；バ
クトイースト５ｇ／ｌ；ＮａＣｌ ５ｇ／ｌ） ・ ２〜３mm径の滑らかで光沢のある円いコロニー；不
透明 ３．栄養ブロス（Difco） ・ 不規則な縁を有する白色で光沢のあるコロニー ４．クリステンセン尿素寒天（Difco） ・ 成長陽性 ５．マッコンキー寒天（Difco） ・ 成長陽性 ６．ＢＲＯＬＡＣ寒天（ラクトース）（Difco） ・ 成長陽性 ７．シモンズ クエン酸塩寒天（Difco） ・ 成長陽性 ８．ペプトン／肉エキス培地（Difco）中７または１０
％ＮａＣｌの存在下では成長しない。
【０００９】Ｃ） 生理学的特性
【表１】
【００１０】Ｄ） 炭水化物の醗酵
【表２】
【００１１】分類特性を考慮し、「Bergey's Manual of
Systematic Bacteriology」（第２巻、Williams & Wil
kins発行、ボルティモア、１９８６年）によれば該菌株
はバチルス属と指定できる。その種を決定するためにBa
cillus macerans, circulans, lentus, alcalophilus,
stearothermophilus, licheniformis, polymyxaおよびf
astidiosusのタイプカルチャーの平行比較実験を行っ
た。すべての比較菌株はバチルス種ＤＳＭ ４６７５と
明確に異なった性質を示した。これらの菌株は何れもホ
スホグリコリピド抗生物質、特にモエノマイシンＡを分
解することができなかった。このことから菌株ＤＳＭ
４６７５は新しい種であることが結論づけられる。
Systematic Bacteriology」（第２巻、Williams & Wil
kins発行、ボルティモア、１９８６年）によれば該菌株
はバチルス属と指定できる。その種を決定するためにBa
cillus macerans, circulans, lentus, alcalophilus,
stearothermophilus, licheniformis, polymyxaおよびf
astidiosusのタイプカルチャーの平行比較実験を行っ
た。すべての比較菌株はバチルス種ＤＳＭ ４６７５と
明確に異なった性質を示した。これらの菌株は何れもホ
スホグリコリピド抗生物質、特にモエノマイシンＡを分
解することができなかった。このことから菌株ＤＳＭ
４６７５は新しい種であることが結論づけられる。
【００１２】本発明は各場合において、さらに知られて
いるように自然に発生し、または物理的動因、例えば紫
外線またはＸ線のような照射線もしくは化学的突然変異
誘発物質、例えばエチルメタンスルホネート（ＥＭ
Ｓ）、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニ
ジン（ＭＮＮＧ）または２−ヒドロキシ−４−メトキシ
−ベンゾフェノン（ＭＯＢ）を用いて処理することによ
り発生する突然変異体および変異体に関する。
いるように自然に発生し、または物理的動因、例えば紫
外線またはＸ線のような照射線もしくは化学的突然変異
誘発物質、例えばエチルメタンスルホネート（ＥＭ
Ｓ）、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニ
ジン（ＭＮＮＧ）または２−ヒドロキシ−４−メトキシ
−ベンゾフェノン（ＭＯＢ）を用いて処理することによ
り発生する突然変異体および変異体に関する。
【００１３】バチルス種ＤＳＭ ４６７５の好気性醗酵
用炭素源として好適で好ましいものは同化できる炭水化
物およびグルコース、ラクトースまたはマンニトールの
ような糖アルコール、並びに麦芽エキスのような炭水化
物含有天然産物である。好適で好ましい窒素含有栄養物
はアミノ酸、ペプチドおよびタンパク質並びにその分解
生成物、例えばペプトンまたはトリプトンさらに肉エキ
ス、例えばトウモロコシ、豆、大豆またはワタの粉砕さ
れた種子、アルコール製造の際の蒸留残留物、ミートミ
ールまたはイーストエキス並びにアンモニウム塩および
硝酸塩である。栄養物溶液はさらに付加的な無機塩とし
て、例えばアルカリ金属またはアルカリ土類金属、鉄、
亜鉛およびマンガンの塩化物、炭酸塩、硫酸塩またはリ
ン酸塩を含有してもよい。
用炭素源として好適で好ましいものは同化できる炭水化
物およびグルコース、ラクトースまたはマンニトールの
ような糖アルコール、並びに麦芽エキスのような炭水化
物含有天然産物である。好適で好ましい窒素含有栄養物
はアミノ酸、ペプチドおよびタンパク質並びにその分解
生成物、例えばペプトンまたはトリプトンさらに肉エキ
ス、例えばトウモロコシ、豆、大豆またはワタの粉砕さ
れた種子、アルコール製造の際の蒸留残留物、ミートミ
ールまたはイーストエキス並びにアンモニウム塩および
硝酸塩である。栄養物溶液はさらに付加的な無機塩とし
て、例えばアルカリ金属またはアルカリ土類金属、鉄、
亜鉛およびマンガンの塩化物、炭酸塩、硫酸塩またはリ
ン酸塩を含有してもよい。
【００１４】本発明の微生物の成長および分解反応に必
要な酵素の生成は、特に炭素および窒素源としてコーン
スターチ、大豆ミール、スクロース、グリセロール、ペ
プトンおよび／またはコーンスチープを含有する栄養培
地において良好である。醗酵は好気的に行われ、すなわ
ち、例えば振盪フラスコまたは醗酵槽中空気または酸素
を取り入れて振盪または撹拌しながら液内で培養する。
醗酵はおよそ室温から５０℃の範囲の温度、好ましくは
約３５〜３７℃で行うことができる。培養時間は一般に
２４〜４８時間である。
要な酵素の生成は、特に炭素および窒素源としてコーン
スターチ、大豆ミール、スクロース、グリセロール、ペ
プトンおよび／またはコーンスチープを含有する栄養培
地において良好である。醗酵は好気的に行われ、すなわ
ち、例えば振盪フラスコまたは醗酵槽中空気または酸素
を取り入れて振盪または撹拌しながら液内で培養する。
醗酵はおよそ室温から５０℃の範囲の温度、好ましくは
約３５〜３７℃で行うことができる。培養時間は一般に
２４〜４８時間である。
【００１５】このようにして得られたバチルスＤＳＭ
４６７５の培養物またはその調製物は、ホスホグリコリ
ピド抗生物質を開裂させるのに使用することができる。
これらのものには特にモエノマイシン群の抗生物質、例
えばホリマイシン1)、プラジノマイシン2)、ジウマイシ
ン（マカルボマイシン）3)、エサンコマイシン、プレノ
マイシンおよびタイコマイシンそして相応して官能化さ
れたホスホグリセリン酸を有する他の構造的に関連のあ
る物質が包含される。1) S. Takahashiら、Tetrahedron Lett. 1983, 4992) F.L. Weisenbornら、Nature 213, 1092 (1967)3) S. Takahashiら、J. Antibiot. 26, 542 (1973)
４６７５の培養物またはその調製物は、ホスホグリコリ
ピド抗生物質を開裂させるのに使用することができる。
これらのものには特にモエノマイシン群の抗生物質、例
えばホリマイシン1)、プラジノマイシン2)、ジウマイシ
ン（マカルボマイシン）3)、エサンコマイシン、プレノ
マイシンおよびタイコマイシンそして相応して官能化さ
れたホスホグリセリン酸を有する他の構造的に関連のあ
る物質が包含される。1) S. Takahashiら、Tetrahedron Lett. 1983, 4992) F.L. Weisenbornら、Nature 213, 1092 (1967)3) S. Takahashiら、J. Antibiot. 26, 542 (1973)
【００１６】酸素は特に好ましく、モエノマイシン例え
ばフラボマイシンを分解するのに用いられる。
ばフラボマイシンを分解するのに用いられる。
【００１７】バチルス細胞を用いた場合、後者を例えば
セチルトリメチルアンモニウム塩を用いて浸透化するこ
とが有利である。同様にバチルス細胞からのタンパク質
単離物または例えば塩析またはクロマトグラフィーによ
り部分的に濃縮された酵素抽出物またはもちろん精製さ
れた酵素を用いることができる。さらに酵素および細胞
を自由または固定化形態で使用することができる。酵素
分解を例としてモエノマイシンＡを用いて次の図式で説
明する。
セチルトリメチルアンモニウム塩を用いて浸透化するこ
とが有利である。同様にバチルス細胞からのタンパク質
単離物または例えば塩析またはクロマトグラフィーによ
り部分的に濃縮された酵素抽出物またはもちろん精製さ
れた酵素を用いることができる。さらに酵素および細胞
を自由または固定化形態で使用することができる。酵素
分解を例としてモエノマイシンＡを用いて次の図式で説
明する。
【００１８】
【化４】
【００１９】この図式より開裂生成物を製造するために
は２つの酵素が必要であることが明らかである。本発明
者らがモエノマイシナーゼと呼んでいる酵素がホスホグ
リコシド結合を開裂するのに必要とされる。モエノマイ
シナーゼはバチルス種ＤＳＭ４６７５の細胞質膜に随伴
され、それ自体既知の酵素分離法により微生物から得ら
れる。モエノマイシナーゼの最適なpH値は約８.０〜８.
５、特に８.２〜８.３である。酵素の最適な温度は４５
〜５５℃、特に４９〜５１℃である。モエノマイシナー
ゼのＫm値はモエノマイシンＡについて４〜１０ミリモ
ルである。２つの開裂生成物が得られる。開裂生成物I
はホスホグリコリピド抗生物質の糖成分からなる。一般
式（II）
は２つの酵素が必要であることが明らかである。本発明
者らがモエノマイシナーゼと呼んでいる酵素がホスホグ
リコシド結合を開裂するのに必要とされる。モエノマイ
シナーゼはバチルス種ＤＳＭ４６７５の細胞質膜に随伴
され、それ自体既知の酵素分離法により微生物から得ら
れる。モエノマイシナーゼの最適なpH値は約８.０〜８.
５、特に８.２〜８.３である。酵素の最適な温度は４５
〜５５℃、特に４９〜５１℃である。モエノマイシナー
ゼのＫm値はモエノマイシンＡについて４〜１０ミリモ
ルである。２つの開裂生成物が得られる。開裂生成物I
はホスホグリコリピド抗生物質の糖成分からなる。一般
式（II）
【００２０】
【化５】 （式中、Ｒ1はホスホノ基であり、Ｒ2は（Ｃ5〜Ｃ55）
−アルキル基、好ましくは（Ｃ10〜Ｃ30）−アルキル
基、特に（Ｃ20〜Ｃ25）−アルキル基（各々は分枝鎖ま
たは非分枝鎖の飽和または不飽和の好ましくは分枝鎖で
不飽和の基でありうる）である）で表される開裂生成物
もまた得られる。
−アルキル基、好ましくは（Ｃ10〜Ｃ30）−アルキル
基、特に（Ｃ20〜Ｃ25）−アルキル基（各々は分枝鎖ま
たは非分枝鎖の飽和または不飽和の好ましくは分枝鎖で
不飽和の基でありうる）である）で表される開裂生成物
もまた得られる。
【００２１】モエノマイシンは好ましく基質として用い
られ、従ってその結果得られる開裂生成物は化合物ＭＣ
並びに化合物ＭＢおよびＭＡに相当する物質である（反
応式図を参照）。別の醗酵がモエノマイシナーゼを用い
てのインキュベーションにより得られる一般式（II）
（式中Ｒ1は水素である）のホスホグリセリン酸リピド
の脱ホスホリル化のために必要であり、同じく本発明の
微生物から得ることができる。本発明においてこの酵素
をＭＢアーゼと呼ぶ。ＭＢアーゼは同様にしてそれ自体
既知の方法によりこの微生物から分離することができ
る。例えば、細胞を超音波で分裂し、その結果得られた
粗抽出物を硫酸アンモニウム分別（２５〜５５％飽和）
または超遠心分離の何れかによりさらに濃縮する。次い
でこれを透析する。モエノマイシナーゼおよびＭＢアー
ゼを最後にクロマトグラフィーにより分離する。
られ、従ってその結果得られる開裂生成物は化合物ＭＣ
並びに化合物ＭＢおよびＭＡに相当する物質である（反
応式図を参照）。別の醗酵がモエノマイシナーゼを用い
てのインキュベーションにより得られる一般式（II）
（式中Ｒ1は水素である）のホスホグリセリン酸リピド
の脱ホスホリル化のために必要であり、同じく本発明の
微生物から得ることができる。本発明においてこの酵素
をＭＢアーゼと呼ぶ。ＭＢアーゼは同様にしてそれ自体
既知の方法によりこの微生物から分離することができ
る。例えば、細胞を超音波で分裂し、その結果得られた
粗抽出物を硫酸アンモニウム分別（２５〜５５％飽和）
または超遠心分離の何れかによりさらに濃縮する。次い
でこれを透析する。モエノマイシナーゼおよびＭＢアー
ゼを最後にクロマトグラフィーにより分離する。
【００２２】ＭＢアーゼは３７℃より高い温度で、並び
にpHがpH５より低い酸性pH範囲内である時だんだん不活
性化される。モエノマイシンおよびホスホグリコリピド
抗生物質の開裂は上述したように全細胞または酵素単離
物を用いて行うことができる。反応は一般にpH約５.５
〜８.５、好ましくはpH７〜８で水性媒体中行われる。
反応時間は一般に５〜４８時間、好ましくは約２４時間
である。反応温度は４〜６０℃、好ましくは３０〜３７
℃である。基質濃度は０.１〜５％、好ましくは１〜２
％の範囲内がよい。
にpHがpH５より低い酸性pH範囲内である時だんだん不活
性化される。モエノマイシンおよびホスホグリコリピド
抗生物質の開裂は上述したように全細胞または酵素単離
物を用いて行うことができる。反応は一般にpH約５.５
〜８.５、好ましくはpH７〜８で水性媒体中行われる。
反応時間は一般に５〜４８時間、好ましくは約２４時間
である。反応温度は４〜６０℃、好ましくは３０〜３７
℃である。基質濃度は０.１〜５％、好ましくは１〜２
％の範囲内がよい。
【００２３】反応を上述よりも高いまたは低い温度また
はpH値で行うこともできる。しかしながらその場合モエ
ノマイシナーゼはより活性が低い。モエノマイシンＡか
ら得られる反応生成物は図に描かれている物質ＭＢおよ
びＭＣである。生成物ＭＡはＭＢをＭＢアーゼを用いて
３０〜３７℃、好ましくは３５〜３７℃で、そしてpH
５.５〜８.５、好ましくはpH６〜８で約２４時間にわた
ってインキュベーションすることにより得られる。該反
応生成物は抗生物質（例えばＭＢ）としてまたはトラン
スグリコシラーゼ阻害剤の合成における基礎単位（例え
ばＭＡおよびＭＣ）として使用することができる。
はpH値で行うこともできる。しかしながらその場合モエ
ノマイシナーゼはより活性が低い。モエノマイシンＡか
ら得られる反応生成物は図に描かれている物質ＭＢおよ
びＭＣである。生成物ＭＡはＭＢをＭＢアーゼを用いて
３０〜３７℃、好ましくは３５〜３７℃で、そしてpH
５.５〜８.５、好ましくはpH６〜８で約２４時間にわた
ってインキュベーションすることにより得られる。該反
応生成物は抗生物質（例えばＭＢ）としてまたはトラン
スグリコシラーゼ阻害剤の合成における基礎単位（例え
ばＭＡおよびＭＣ）として使用することができる。
【００２４】
【発明の実施の態様】本発明を実施例により更に詳細に
説明する。特に記載がなければパーセント値は重量に基
づくものである。
説明する。特に記載がなければパーセント値は重量に基
づくものである。
【００２５】
実施例１ バチルス種ＤＳＭ ４６７５菌株の維持 バチルス種ＤＳＭ ４６７５を下記の固形栄養培地（培
地１）上で維持する：
地１）上で維持する：
【表３】 培地を試験管に振り分け、１２１℃で３０分間滅菌し、
次いで冷却し培養物を植え付け、そして３７℃で２〜３
日インキュベートする。成長培養物を洗い出して下記の
モエノマイシン含有主培養物（培地２）のための接種物
を得る。
次いで冷却し培養物を植え付け、そして３７℃で２〜３
日インキュベートする。成長培養物を洗い出して下記の
モエノマイシン含有主培養物（培地２）のための接種物
を得る。
【００２６】
【表４】 それぞれこの培地を３０ml含有する３００mlのエルレン
マイヤーフラスコに植え付け、次いで３７℃、１９０rp
mで８〜４８時間インキュベートする。培養濾液の薄層
クロマトグラフィー分析は化合物ＭＡ、ＭＢおよびＭＣ
がモエノマイシンの開裂生成物として検出可能であり、
そして反応終了近く用いたモエノマイシンが完全に消滅
することを示す。
マイヤーフラスコに植え付け、次いで３７℃、１９０rp
mで８〜４８時間インキュベートする。培養濾液の薄層
クロマトグラフィー分析は化合物ＭＡ、ＭＢおよびＭＣ
がモエノマイシンの開裂生成物として検出可能であり、
そして反応終了近く用いたモエノマイシンが完全に消滅
することを示す。
【００２７】実施例２ 細胞を含有しない抽出物の製造 細胞を含有しない抽出物を製造するためにバチルス種Ｄ
ＳＭ ４６７５を醗酵槽中で培養する。このため寒天プ
レートの細胞を洗い出して前培養物（２リットルのエル
レンマイヤーフラスコ中、フラボマイシンを含まない５
００mlの培地２）のための１０mlの接種物を得、次いで
これを３７℃、１９０rpmで２４時間インキュベートす
る。９リットルの培地３を含む１２リットルの実験室用
醗酵槽が主培養段階で使用される：
ＳＭ ４６７５を醗酵槽中で培養する。このため寒天プ
レートの細胞を洗い出して前培養物（２リットルのエル
レンマイヤーフラスコ中、フラボマイシンを含まない５
００mlの培地２）のための１０mlの接種物を得、次いで
これを３７℃、１９０rpmで２４時間インキュベートす
る。９リットルの培地３を含む１２リットルの実験室用
醗酵槽が主培養段階で使用される：
【表５】
【００２８】これに５００mlの前培養物を植え付け、次
いで３７℃、３００rpmそして０.５vvmの曝気速度で２
４時間インキュベートする。成長培養物を遠心分離し、
細胞ペーストをリン酸カリウム緩衝剤（pH７.０）５０m
M（１ｇの湿潤細胞＋２mlの緩衝剤）中で再懸濁する。
次いで細胞を超音波すなわちFrench Press(R)またはDyn
o Mill(R)を用いて分裂し、その結果得られたる粗抽出
物を転換のために使用する。１００μlの粗抽出物、１
２mgのモエノマイシンおよび９００μlのリン酸カリウ
ム緩衝剤（pH８.０）５０mMを含有する試験混合物にお
いて７〜２４時間内３７℃で５０％の用いられた基質の
分解が行われる。見い出された反応生成物はＭＡ、ＭＢ
およびＭＣである。
いで３７℃、３００rpmそして０.５vvmの曝気速度で２
４時間インキュベートする。成長培養物を遠心分離し、
細胞ペーストをリン酸カリウム緩衝剤（pH７.０）５０m
M（１ｇの湿潤細胞＋２mlの緩衝剤）中で再懸濁する。
次いで細胞を超音波すなわちFrench Press(R)またはDyn
o Mill(R)を用いて分裂し、その結果得られたる粗抽出
物を転換のために使用する。１００μlの粗抽出物、１
２mgのモエノマイシンおよび９００μlのリン酸カリウ
ム緩衝剤（pH８.０）５０mMを含有する試験混合物にお
いて７〜２４時間内３７℃で５０％の用いられた基質の
分解が行われる。見い出された反応生成物はＭＡ、ＭＢ
およびＭＣである。
【００２９】実施例３ モエノマイシンＡの調製用転換 調製用転換はリン酸カリウム緩衝剤（pH８.０）５０m
M、８００mlの粗酵素抽出物および１００ｇのモエノマ
イシンＡを含有する１２リットルの醗酵槽中、３７℃、
１００rpmで行われる。転換過程はＴＬＣで追跡する。
全体の反応混合物を８〜４８時間後凍結乾燥する。モエ
ノマイシン分解は一般に４０〜６０％である（ＴＬＣで
のＵＶ分析）。その結果得られた反応生成物はＭＡ、Ｍ
ＢおよびＭＣである。
M、８００mlの粗酵素抽出物および１００ｇのモエノマ
イシンＡを含有する１２リットルの醗酵槽中、３７℃、
１００rpmで行われる。転換過程はＴＬＣで追跡する。
全体の反応混合物を８〜４８時間後凍結乾燥する。モエ
ノマイシン分解は一般に４０〜６０％である（ＴＬＣで
のＵＶ分析）。その結果得られた反応生成物はＭＡ、Ｍ
ＢおよびＭＣである。
【００３０】実施例４ 分解生成物の製造 酵素転換からの凍結乾燥混合物１００ｇを２リットルの
水に溶解し、そして各々２リットルの酢酸エチルを用い
て２回抽出した。この場合完全な相分離とするために遠
心分離が必要である。合一した有機抽出物を硫酸ナトリ
ウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。０.４
ｇ（０.４％）の暗い褐色の油状物が得られ、モリブデ
ートリン酸／硫酸セリウム（IV）発色剤（以下、ＰＭＳ
試薬と省略する）でスプレーしたシリカゲル（Merck ６
０ Ｆ２５４アルミニウムＴＬＣシート）上ｎ−ブタノ
ール／酢酸／水＝３／１／２系での薄層クロマトグラフ
ィーによりその主成分がＭＡであることがわかった（Rf
値＝０.８５）。残留の水性相を次いで各回２リットル
のｎ−ブタノールで２回抽出した。再び相を分離させる
ために遠心分離が必要であった。次いで合一したブタノ
ール相をできるだけ濃縮しそして残留物を少しの水に溶
解性し最終的に凍結乾燥した。７.４ｇ（７.４％）の黄
色粉末が得られ、薄層クロマトグラフィー（上述の条件
および同じ検出を用いる）による分析から主成分がＭＢ
であることがわかった（Rf＝０.５２）。このようにし
て非極性物質の除去された水性相を凍結乾燥した。これ
から得られる残留物の量は７６.９ｇであった（総量が
８５％での７６.９％）。薄層クロマトグラフィーによ
りこの淡黄色の粉末はＭＣ（Rf＝０.１）と称する極性
の主物質、残留するモエノマイシンＡおよび副生成物か
ら成ることがわかった。このようにして得られる成分Ｍ
Ａ、ＭＢおよびＭＣから成る粗生成物をさらに下記のよ
うにして精製した。
水に溶解し、そして各々２リットルの酢酸エチルを用い
て２回抽出した。この場合完全な相分離とするために遠
心分離が必要である。合一した有機抽出物を硫酸ナトリ
ウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。０.４
ｇ（０.４％）の暗い褐色の油状物が得られ、モリブデ
ートリン酸／硫酸セリウム（IV）発色剤（以下、ＰＭＳ
試薬と省略する）でスプレーしたシリカゲル（Merck ６
０ Ｆ２５４アルミニウムＴＬＣシート）上ｎ−ブタノ
ール／酢酸／水＝３／１／２系での薄層クロマトグラフ
ィーによりその主成分がＭＡであることがわかった（Rf
値＝０.８５）。残留の水性相を次いで各回２リットル
のｎ−ブタノールで２回抽出した。再び相を分離させる
ために遠心分離が必要であった。次いで合一したブタノ
ール相をできるだけ濃縮しそして残留物を少しの水に溶
解性し最終的に凍結乾燥した。７.４ｇ（７.４％）の黄
色粉末が得られ、薄層クロマトグラフィー（上述の条件
および同じ検出を用いる）による分析から主成分がＭＢ
であることがわかった（Rf＝０.５２）。このようにし
て非極性物質の除去された水性相を凍結乾燥した。これ
から得られる残留物の量は７６.９ｇであった（総量が
８５％での７６.９％）。薄層クロマトグラフィーによ
りこの淡黄色の粉末はＭＣ（Rf＝０.１）と称する極性
の主物質、残留するモエノマイシンＡおよび副生成物か
ら成ることがわかった。このようにして得られる成分Ｍ
Ａ、ＭＢおよびＭＣから成る粗生成物をさらに下記のよ
うにして精製した。
【００３１】実施例５ ａ） 分解生成物ＭＡの精製 ４００mgのＭＡ粗生成物をpH７.５に調整した１２０ｇ
のシリカゲル（Merck 60、１５〜４０mcm）上のクロマ
トグラフィーに付した（カラム物質をこの目的のために
下記のようにして前処理した：シリカゲルを５００mlの
２Ｎ ＨＣｌ中１時間撹拌し、次いで吸引しながら濾去
しそして洗浄して中性とした。次に１ＮＮａＯＨを用い
てpHを７.５に調整しそして最後に２リットルの水およ
び５００mlのメタノールを用いての洗浄を行った。この
ようにして前処理した物質を乾燥しそして一晩１２０℃
で活性化した）。クロロホルム／エタノール＝１／１を
溶離剤として用いた。物質を３mlの溶媒混合物中カラム
に充填しそして各々２.５mlの２１６個のフラクション
を集めた。ＴＬＣ分析（実施例１と同じＴＬＣプレート
および検出、カラム溶離剤と同じ溶媒系）を用いて、フ
ラクション１１５〜１７５を合一し、硫酸ナトリウム上
乾燥しそして最後に蒸発乾固した。２７mgの分光学的に
純粋なＭＡが得られた。
のシリカゲル（Merck 60、１５〜４０mcm）上のクロマ
トグラフィーに付した（カラム物質をこの目的のために
下記のようにして前処理した：シリカゲルを５００mlの
２Ｎ ＨＣｌ中１時間撹拌し、次いで吸引しながら濾去
しそして洗浄して中性とした。次に１ＮＮａＯＨを用い
てpHを７.５に調整しそして最後に２リットルの水およ
び５００mlのメタノールを用いての洗浄を行った。この
ようにして前処理した物質を乾燥しそして一晩１２０℃
で活性化した）。クロロホルム／エタノール＝１／１を
溶離剤として用いた。物質を３mlの溶媒混合物中カラム
に充填しそして各々２.５mlの２１６個のフラクション
を集めた。ＴＬＣ分析（実施例１と同じＴＬＣプレート
および検出、カラム溶離剤と同じ溶媒系）を用いて、フ
ラクション１１５〜１７５を合一し、硫酸ナトリウム上
乾燥しそして最後に蒸発乾固した。２７mgの分光学的に
純粋なＭＡが得られた。
【００３２】ｂ） 分解生成物ＭＢの精製 抽出により得られる３.１ｇのＭＢ−含有粗生成物を実
施例２で説明した方法を用いてpH７.５に調整した５０
０ｇのシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。中
圧クロマトグラフィーシステム（ＭＰＬＣ）を用いて、
クロロホルム／エタノール／水＝４／７／１.５を流速
１０ml／分および圧力２〜５バールで溶離剤するために
用いた。最初の６００mlの流出の後各々１０mlの２２０
個のフラクションを集め、ＴＬＣに基づいて合一した。
ＭＢを含有する混合されたフラクションの他のフラクシ
ョン９０〜１７０を蒸発させ水に溶解性しそして凍結乾
燥した後１.２８ｇの純粋なＭＢが得られた。
施例２で説明した方法を用いてpH７.５に調整した５０
０ｇのシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。中
圧クロマトグラフィーシステム（ＭＰＬＣ）を用いて、
クロロホルム／エタノール／水＝４／７／１.５を流速
１０ml／分および圧力２〜５バールで溶離剤するために
用いた。最初の６００mlの流出の後各々１０mlの２２０
個のフラクションを集め、ＴＬＣに基づいて合一した。
ＭＢを含有する混合されたフラクションの他のフラクシ
ョン９０〜１７０を蒸発させ水に溶解性しそして凍結乾
燥した後１.２８ｇの純粋なＭＢが得られた。
【００３３】ｃ） 分解生成物のＭＣの精製 抽出物の水性相からの２.２ｇの極性粗生成物を同様に
圧力下でのクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）に付した。
pHが７.５のシリカゲル５００ｇを用い（実施例２の方
法）、そして溶離剤として酢酸エチル／ｉ−プロパノー
ル／水＝４／５／５を用いた。充填する量を１５ｇのシ
リカゲルとともにメタノール中で懸濁し溶媒を留去しそ
してこのようにして処理した保持体をプレカラムに導入
し、次いで２〜４バールの圧力下５ml／分の流速で溶離
した。最初の９４０mlの流出の後各々１０mlの２５０個
のフラクションを分別した。フラクションをＰＭＳ発色
剤を用いる酢酸エチル／ｉ−プロパノール／水＝１／１
／１系での薄層クロマトグラフィーおよび２５４nmでの
ＵＶ吸収の検出により試験を行い、そして合一した。混
合されたフラクションの他にフラクション１２０〜１９
０を濃縮して水性相とし次いで凍結乾燥して１.３ｇの
純粋なＭＣを得、これを分光分析した。
圧力下でのクロマトグラフィー（ＭＰＬＣ）に付した。
pHが７.５のシリカゲル５００ｇを用い（実施例２の方
法）、そして溶離剤として酢酸エチル／ｉ−プロパノー
ル／水＝４／５／５を用いた。充填する量を１５ｇのシ
リカゲルとともにメタノール中で懸濁し溶媒を留去しそ
してこのようにして処理した保持体をプレカラムに導入
し、次いで２〜４バールの圧力下５ml／分の流速で溶離
した。最初の９４０mlの流出の後各々１０mlの２５０個
のフラクションを分別した。フラクションをＰＭＳ発色
剤を用いる酢酸エチル／ｉ−プロパノール／水＝１／１
／１系での薄層クロマトグラフィーおよび２５４nmでの
ＵＶ吸収の検出により試験を行い、そして合一した。混
合されたフラクションの他にフラクション１２０〜１９
０を濃縮して水性相とし次いで凍結乾燥して１.３ｇの
純粋なＭＣを得、これを分光分析した。
【００３４】実施例６ モエノマイシンＡから酵素分解により得られる生成物Ｍ
ＡおよびＭＢの構造の解明（構造の番号は後記の反応式
図に関連する） ＭＡについての推定構造は１ａであった。１ａの13Ｃ
ＮＭＲスペクトルに基づいて、この構造が指定される。
１ａとジアゾメタンの反応によりメチルエステル１ｂが
得られ、これは1Ｈ ＮＭＲおよびＥＩマススペクトルに
より同定される。13Ｃ ＮＭＲおよびＦＡＢマススペク
トルに基づいてＭＢの推定構造は２であった。２の水素
添加によりデカヒドロ誘導体３ａが生成し、これをジア
ゾメタンと反応させることにより３ｂを与えるがこれは
以前にすでに別のルートでモエノマイシンＡから得られ
たものである。２（ＭＢ）を酵素によって１ａ（ＭＡ）
に転換することができたということは提唱した構造に矛
盾がないことを支持するものである。
ＡおよびＭＢの構造の解明（構造の番号は後記の反応式
図に関連する） ＭＡについての推定構造は１ａであった。１ａの13Ｃ
ＮＭＲスペクトルに基づいて、この構造が指定される。
１ａとジアゾメタンの反応によりメチルエステル１ｂが
得られ、これは1Ｈ ＮＭＲおよびＥＩマススペクトルに
より同定される。13Ｃ ＮＭＲおよびＦＡＢマススペク
トルに基づいてＭＢの推定構造は２であった。２の水素
添加によりデカヒドロ誘導体３ａが生成し、これをジア
ゾメタンと反応させることにより３ｂを与えるがこれは
以前にすでに別のルートでモエノマイシンＡから得られ
たものである。２（ＭＢ）を酵素によって１ａ（ＭＡ）
に転換することができたということは提唱した構造に矛
盾がないことを支持するものである。
【００３５】実験の説明 １ａ： 13C NMR（100.6MHz，CD3OD）：モエノシノール
部分：δ＝67.5（C-1）、123.5（C-2）、141.6および14
1.8（C-3およびC-7）、32.3および32.5（C-4およびC-
5）、126.7（C-6）、35.9（C-8）、40.9（C-9）、30.7
（C-10）、151.1（C-11）、33.4（C-12）、122.7（C-1
3）、137.3（C-14）、36.4（C-15）、27.7（C-16）、12
5.3（C-17）、132.2（C-18）、25.9（C-19）、17.8（C-
20）、16.1（C-21）、109.2（C-22）、27.3（C-23およ
びC-14）、23.8（C-25）。グリセリン酸部分：δ＝175.
9（C-1）、80.6（C-2）、64.1（C-3）。C28H46O4（446.
6）
部分：δ＝67.5（C-1）、123.5（C-2）、141.6および14
1.8（C-3およびC-7）、32.3および32.5（C-4およびC-
5）、126.7（C-6）、35.9（C-8）、40.9（C-9）、30.7
（C-10）、151.1（C-11）、33.4（C-12）、122.7（C-1
3）、137.3（C-14）、36.4（C-15）、27.7（C-16）、12
5.3（C-17）、132.2（C-18）、25.9（C-19）、17.8（C-
20）、16.1（C-21）、109.2（C-22）、27.3（C-23およ
びC-14）、23.8（C-25）。グリセリン酸部分：δ＝175.
9（C-1）、80.6（C-2）、64.1（C-3）。C28H46O4（446.
6）
【００３６】１ｂ： １ａを(R)Dowex 50（Ｈ+ 型）を
用いて水溶液中でＨ+ 型に転換した。１ａ（Ｈ+ 型、１
８.５mg、０.０４ミリモル）をメタノール（３ml）に溶
解し、そして０℃で過剰のエーテル性ジアゾメタン溶液
を加えた。反応混合物を０℃で２時間そして２０℃で１
２時間維持し、次いで蒸発乾固した。カラムクロマトグ
ラフィー（５ｇのＳｉＯ2、石油エーテル／酢酸エチル
２：１）により１ｂ（３mg）が得られた。1 H NMR（80MHz, CDCl3）：δ＝0.96（s, 6H, CH3-23お
よびCH3-24）、 1.61（s, 6H）、1.68（s, 3H）、1.73
（s, 3H） （4×CH3）、 1.90〜2.12（アリールHs）、2.
62（ブロード d, J=7Hz, CH2-12）、 3.78（s, OCH3）、
3.60〜4.30（OCH2およびOCHシグナル）、4.62(ブロード
s, CH2-22）、4.87〜5.47（オレフィン性Hs）。-C29H48
O4（460.7）、MS：m／z (％)＝460（0.03）、271（1
0）、230（19）、199（68）、43（100）
用いて水溶液中でＨ+ 型に転換した。１ａ（Ｈ+ 型、１
８.５mg、０.０４ミリモル）をメタノール（３ml）に溶
解し、そして０℃で過剰のエーテル性ジアゾメタン溶液
を加えた。反応混合物を０℃で２時間そして２０℃で１
２時間維持し、次いで蒸発乾固した。カラムクロマトグ
ラフィー（５ｇのＳｉＯ2、石油エーテル／酢酸エチル
２：１）により１ｂ（３mg）が得られた。1 H NMR（80MHz, CDCl3）：δ＝0.96（s, 6H, CH3-23お
よびCH3-24）、 1.61（s, 6H）、1.68（s, 3H）、1.73
（s, 3H） （4×CH3）、 1.90〜2.12（アリールHs）、2.
62（ブロード d, J=7Hz, CH2-12）、 3.78（s, OCH3）、
3.60〜4.30（OCH2およびOCHシグナル）、4.62(ブロード
s, CH2-22）、4.87〜5.47（オレフィン性Hs）。-C29H48
O4（460.7）、MS：m／z (％)＝460（0.03）、271（1
0）、230（19）、199（68）、43（100）
【００３７】２： 13C NMR（100.6MHz，D2O）：モエノ
シノール部分：δ＝68.6（C-1）、124.5（C-2）、142.9
（C-3）、34.6（C-4）、34.0（C-5，C-10）、128.1（C-
6）、143.6（C-7）、37.8（C-8）、44.1（C-9）、151.4
（C-11）、37.2（C-12）、123.5（C-13）、138.3（C-1
4）、42.2（C-15）、29.1（C-16）、126.9（C-17）、13
3.1（C-18）、28.0（C-19）、19.9（C-20）、18.2（C-2
1）、111.2（C-22）、29.7（C-23，C-24）、25.9（C-2
5）。グリセリン酸部分：δ＝179.0（C-1）、81.8（C-
2）、68.6（C-3）。-C28H47O7P（526.7）、FAB-MS（マ
トリックス：DMSO／グリセロール）：m／z＝615（M-3H
＋4Na)+、593（M-2H＋3Na)+、571（M-H＋2Na)+、492、 2
67、 231、 185、 165、143、 115
シノール部分：δ＝68.6（C-1）、124.5（C-2）、142.9
（C-3）、34.6（C-4）、34.0（C-5，C-10）、128.1（C-
6）、143.6（C-7）、37.8（C-8）、44.1（C-9）、151.4
（C-11）、37.2（C-12）、123.5（C-13）、138.3（C-1
4）、42.2（C-15）、29.1（C-16）、126.9（C-17）、13
3.1（C-18）、28.0（C-19）、19.9（C-20）、18.2（C-2
1）、111.2（C-22）、29.7（C-23，C-24）、25.9（C-2
5）。グリセリン酸部分：δ＝179.0（C-1）、81.8（C-
2）、68.6（C-3）。-C28H47O7P（526.7）、FAB-MS（マ
トリックス：DMSO／グリセロール）：m／z＝615（M-3H
＋4Na)+、593（M-2H＋3Na)+、571（M-H＋2Na)+、492、 2
67、 231、 185、 165、143、 115
【００３８】３ａ： ２（１４.９mg、２８.３マイクロ
モル）およびＰｔＯ2（４mg）を通常の条件下Ｈ2雰囲気
下でメタノール（３ml）および酢酸（５０μl）中３日
間撹拌した。触媒を濾去し次いで蒸発させることにより
３ａ（１３.５mg）が得られた。 -C28H57O7P（536.7）、FAB-MS（マトリックス：DMSO／
グリセロール）：m／z＝625（M-3H＋4Na)+、603（M-2H
＋3Na)+、581（M-H＋2Na)+、558（M-H＋Na)+、514、 50
0、 498、 432、404、 362、 340、 293、 288、 266、 186、 16
4、 142、 115、 93
モル）およびＰｔＯ2（４mg）を通常の条件下Ｈ2雰囲気
下でメタノール（３ml）および酢酸（５０μl）中３日
間撹拌した。触媒を濾去し次いで蒸発させることにより
３ａ（１３.５mg）が得られた。 -C28H57O7P（536.7）、FAB-MS（マトリックス：DMSO／
グリセロール）：m／z＝625（M-3H＋4Na)+、603（M-2H
＋3Na)+、581（M-H＋2Na)+、558（M-H＋Na)+、514、 50
0、 498、 432、404、 362、 340、 293、 288、 266、 186、 16
4、 142、 115、 93
【００３９】３ｂ： すべての酸性基を遊離させるため
に３ａをイオン交換体（Dowex 50、Ｈ+ 型）を用いて水
溶液中処理した。樹脂を濾去し、次いで溶液を凍結乾燥
した。このようにして処理した試料８.５mg（１５.９マ
イクロモル）をメタノール（２ml）中溶解した。過剰の
エーテル性ジアゾメタン溶液を０℃で加えた。混合物を
０℃で２時間そして２０℃で１２時間放置した。蒸発さ
せてカラムクロマトグラフィー（５ｇのＳｉＯ2、石油
エーテル／酢酸エチル １：１）により３ｂ（４.０mg）
が得られた。1 H NMR（80 20MHz, CDCl3）：δ＝3.75（s, OCH3および
2d, 3JH,P＝10および12Hz, P(OCH3)2）、 3.20〜4.40（O
CH2およびOCH 多重線）、-C13H63O7P（578.8）、MS：m
／z (％)＝563（0.1、 M-CH3）、519（1、 M-COOCH3）、4
52（1、 M-(CH3O) 2P(O)OH）、381（3、 M-C14H29、25パー
ヒドロモエノシノール部分のC-8およびC-9の間の結合の
分裂）、229（8，a）、212（6，b）、127（20）、57（1
00）
に３ａをイオン交換体（Dowex 50、Ｈ+ 型）を用いて水
溶液中処理した。樹脂を濾去し、次いで溶液を凍結乾燥
した。このようにして処理した試料８.５mg（１５.９マ
イクロモル）をメタノール（２ml）中溶解した。過剰の
エーテル性ジアゾメタン溶液を０℃で加えた。混合物を
０℃で２時間そして２０℃で１２時間放置した。蒸発さ
せてカラムクロマトグラフィー（５ｇのＳｉＯ2、石油
エーテル／酢酸エチル １：１）により３ｂ（４.０mg）
が得られた。1 H NMR（80 20MHz, CDCl3）：δ＝3.75（s, OCH3および
2d, 3JH,P＝10および12Hz, P(OCH3)2）、 3.20〜4.40（O
CH2およびOCH 多重線）、-C13H63O7P（578.8）、MS：m
／z (％)＝563（0.1、 M-CH3）、519（1、 M-COOCH3）、4
52（1、 M-(CH3O) 2P(O)OH）、381（3、 M-C14H29、25パー
ヒドロモエノシノール部分のC-8およびC-9の間の結合の
分裂）、229（8，a）、212（6，b）、127（20）、57（1
00）
【００４０】
【化６】
【００４１】実施例７ 開裂生成物の抗生作用活性 抗菌活性を決定するためにMueller-Hinton寒天を用いて
寒天希釈試験を行った。（Antibiotics in Laboratory
Medicine, V. Lorian, Ed., Baltimore (1986年）１〜1
0頁）。
寒天希釈試験を行った。（Antibiotics in Laboratory
Medicine, V. Lorian, Ed., Baltimore (1986年）１〜1
0頁）。
【００４２】
【表６】
【００４３】実施例８ トランスグリコシラーゼアッセイ 開裂生成物によるペプチドグリカン−糖鎖の重合の阻害
は、E. coli K12の細胞膜からのリピド中間体を用いるI
zakiが開示したアッセイ（J. Biol. Chem. 243、3180〜
3192（1968年））により行われた。このことよりモエノ
マイシンＡ（２０μｇ／ml）がトランスグリコシラーゼ
反応を５２.７％阻害し、そして開裂生成物ＭＢがこの
酵素を３２.９％阻害することがわかった。
は、E. coli K12の細胞膜からのリピド中間体を用いるI
zakiが開示したアッセイ（J. Biol. Chem. 243、3180〜
3192（1968年））により行われた。このことよりモエノ
マイシンＡ（２０μｇ／ml）がトランスグリコシラーゼ
反応を５２.７％阻害し、そして開裂生成物ＭＢがこの
酵素を３２.９％阻害することがわかった。
フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ // Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｎ 1/20 Ａ Ｃ１２Ｐ 9/00 Ｃ１２Ｐ 9/00 (Ｃ１２Ｐ 7/42 Ｃ１２Ｒ 1:07） (Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:07） (Ｃ１２Ｐ 9/00 Ｃ１２Ｒ 1:07） (72)発明者 ゲールハルト・ザイベルト ドイツ連邦共和国デー−6100ダルムシユタ ツト．グレーザーヴエーク21 (72)発明者 アーロイス・トウムルカ ドイツ連邦共和国デー−6240ケーニヒシユ タイン／タウヌス．ハイナーベルクヴエー ク21 (72)発明者 ペーター・ヴエルツエル ドイツ連邦共和国デー−4630ボーフム．ク ローネンシユトラーセ10 (72)発明者 クルト・ホーベルト ドイツ連邦共和国デー−4630ボーフム．プ フアラー−ハルベ−シユトラーセ９
Claims (5)
- 【請求項１】 式（II） 【化１】 （式中、Ｒ1は水素であり、そしてＲ2は直鎖または分枝
鎖の飽和または不飽和の（Ｃ5〜Ｃ55）−アルキル基で
ある）で表される化合物。 - 【請求項２】 アルキル基が炭素原子１０〜３０の鎖長
を有する請求項１記載の化合物。 - 【請求項３】 アルキル基が炭素原子２０〜２５の鎖長
を有する請求項１または２記載の化合物。 - 【請求項４】 ホスホグリコリピド抗生物質をバチルス
属に属する菌株ＤＳＭ ４６７５またはそれから得られ
た粗抽出物とインキュベートすることからなる請求項１
記載の式（II）の化合物の製造方法。 - 【請求項５】 インキュベーションがpH５.５〜８.５で
行われる請求項４記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3828337 | 1988-08-20 | ||
| DE3828337:9 | 1988-08-20 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1171323A true JPH1171323A (ja) | 1999-03-16 |
Family
ID=6361268
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1211531A Expired - Lifetime JP2863557B2 (ja) | 1988-08-20 | 1989-08-18 | 新規なモエノマイシン分解微生物および分解方法 |
| JP10135487A Pending JPH1171323A (ja) | 1988-08-20 | 1998-05-18 | 新規なホスホグリコリピド抗生物質分解物およびその製造方法 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1211531A Expired - Lifetime JP2863557B2 (ja) | 1988-08-20 | 1989-08-18 | 新規なモエノマイシン分解微生物および分解方法 |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
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| JP (2) | JP2863557B2 (ja) |
| KR (1) | KR900003361A (ja) |
| AT (1) | ATE134641T1 (ja) |
| AU (2) | AU619034B2 (ja) |
| DE (1) | DE58909610D1 (ja) |
| DK (1) | DK407789A (ja) |
| ES (1) | ES2085855T3 (ja) |
| FI (1) | FI893878A (ja) |
| GR (1) | GR3019332T3 (ja) |
| IL (1) | IL91354A0 (ja) |
| NO (1) | NO893327L (ja) |
| NZ (1) | NZ230352A (ja) |
| PH (1) | PH26511A (ja) |
| PT (1) | PT91469B (ja) |
| ZA (1) | ZA896310B (ja) |
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|---|---|---|---|---|
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| US5316929A (en) * | 1991-03-08 | 1994-05-31 | Hoechst Aktiengesellschaft | Process for the preparation of MA |
| DE59208669D1 (de) * | 1991-03-08 | 1997-08-14 | Hoechst Ag | Verfahren zur Herstellung von MA |
| EP0652205A3 (de) * | 1993-11-04 | 1995-08-30 | Hoechst Ag | Moenomycin-Abbauprodukte mit hydroxylierter oder oxidierter Lipidseitenkette und Moenomycin-Analoga, ein Verfahren zur Herstellung und die Verwendung dieser Verbindungen. |
| DE19709897A1 (de) * | 1997-03-11 | 1998-09-17 | Hoechst Ag | Wismutsalze von Antibiotika der Moenomycin-Gruppe, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung und solche Salze enthaltende Arzneimittel |
| EP0872556A3 (de) * | 1997-04-17 | 2000-06-14 | Hoechst Aktiengesellschaft | Verfahren zur Herstellung von Moenomycin A |
| EP1069130B1 (en) * | 1999-07-15 | 2004-08-11 | Hoechst Marion Roussel | Moenomycin A Derivatives, their preparation, and use as antibacterial products |
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| DE3467171D1 (en) * | 1983-05-21 | 1987-12-10 | Hoechst Ag | Moenomycin-a derivatives, their preparation and their use as antibiotics |
| ATE134641T1 (de) * | 1988-08-20 | 1996-03-15 | Hoechst Ag | Neuer mikroorganismus zum abbau von moenomycinen, verfahren zum abbau sowie die verwendung der abbauprodukte |
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- 1989-08-18 AU AU39985/89A patent/AU619034B2/en not_active Ceased
- 1989-08-18 NO NO89893327A patent/NO893327L/no unknown
-
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- 1991-12-02 AU AU88353/91A patent/AU635452B2/en not_active Ceased
-
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- 1996-03-15 GR GR960400720T patent/GR3019332T3/el unknown
-
1998
- 1998-05-18 JP JP10135487A patent/JPH1171323A/ja active Pending
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