JPH11509850A - ドラスタチン１５の製法及びその中間体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 式（I）[式中、Ａ及びＲ¹〜Ｒ³は前記の意味を有する]のペンタペプチドの製法を記載しており、この製法は、式（II）[式中、Ｒ¹及びＲ²は前記の意味を有する]のプロリンアミドから出発して段階的にペンタペプチドを製造し、そうして得られたペプチドから場合により基−ＮＲ¹Ｒ²を加水分解により離脱させることよりなる。

Description

【発明の詳細な説明】 ドラスタチン１５の製法及びその中間体 本発明は、特殊なペンタペプチドの新規製法及び該方法を実施する際に生ずる 新規の中間体に関する。 ドラスタチン１５であるアメフラシ Dolabella auricularia(G.R.Pettit et a l.,J.Org.Chem.54(1989),6005)から単離されるペプチド系作用物質及び国際公開 ＷＯ／９３−２３４２４号明細書中に記載されている構造的に類似の合成ペプチ ドは非常に有望な新規の作用物質であり、そのうちのいくつかは、臨床試験中で ある。天然資源からの単離が問題外であるために（アメフラシ１６００ｋｇから ６．２ｍｇ）、関心は、作用物質を工業的規模で十分な量と純度で入手可能にす る適当な合成方法に向かっている。 ２つの方法がドラスタチン１５の製造のために記載されている：G.R.Pettit e t al.の優れた合成（J.Am.Chem.Soc.113(1991)、6692及びTetorahedron50(1994) 、12097）はドラスタチン１５をプロリンメチルエステルヒドロクロリドから出 発して製造する（式１）。 しかしながら、上記の方法は、次の欠点を有している： １． 出発化合物のプロリンメチルエステルヒドロクロリドは、非常に高い吸 湿性を有する化合物である。これは湿気の厳密な排除下に製造せねばならず、さ もなければ微結晶物質は部分的なエステル加水分解を 伴って分解する。これは工業的製造を難しくしている。 ２． ジペプチドVIIIは環化してジケトピペラジンXIIIになる傾向を有する： この環化反応は、実験室ではわずかな収率の損失をもたらすだけであるが、工 業的規模での大量の物質の製造ではかなりの障害となる。 ３． VIII、IX及びXの製造の際に、メチルエステルがそれぞれ使用される。 これらの行程で必要な水性後処理で、これらのエステルのカルボン酸への部分的 なけん化が生ずる。この副反応も、規模の拡大に重要役割を有し、それというの も、生成物が水と接触している時間は反応規模が拡大すれば増加するためである 。 ４． 単離の際及び最終生成物の製造の際の２回水と接触するデプシペプチド 成分XIIも加水分解過敏性である。工業的方法の長引く滞留時間はこの場合にも 生成物の損失をもたらす。 ドラスタチン１５の第２の製法をPoncet et.al．（Tetrahedron 48，20，4115 -4112）が記載しており、その製法は、プロリンのｔ−ブチルエステルから出発 す る（式２）。 プロリン−ｔ−ブチルエステルの塩酸塩は式１で使用されるメチルエステルよ りも低い吸湿性を有する。ジペプチドXVは、メチルエステルXIIIよりもジケトピ ペラジンを形成する傾向がやや少ない。高価で製造に経費のかかる成分XXを後続 の合成行程で使用するので、少量のこれらの化合物が使用される。 poncetの方法（式２）の欠点は、ｔ−ブチルエステルは製造する際にメチルエ ステルよりもかなり経費を 必要とすることである。同様に、これらのエステルをトリフルオロ酢酸を用いて 分離するのに経費がかかり、その際、燃焼性で爆発性のガス及びフッ素含有で廃 棄困難な沈殿物が生ずる。 加えてXIX及びXXのドラスタチン１５への結合後に、更にＺ−基を２つのメチ ル基で置換しなければならない（式３）。これらの操作の際に、後続の合成行程 で更に２０％の有用な物質が失われる。 Pettit及びPoncetの方法は、構造的にドラスタチン１５に類似している国際公 開ＷＯ９３／２３４２４号明細書の数多くの作用物質の製造のためにも使用する ことができる。例えば、テトラペプチド酸XIをプロリンベンジルアミドと結合さ せて国際公開ＷＯ９３／２３４２４号明細書の作用物質第２３４番にすることが できる（式４）。 同様の方法で、式２ペンタペプチド酸XIXをジペプチドと反応させて、ヘプタ ペプチドXXIIにし、次いでこれから国際公開ＷＯ９３／２３４２４号明細書の作 用物質第１番を製造することができる（式５）。 XIX及びXIを介しての作用物質の製造の際に前記の問題が、ペプチド合成の収 率及び工業的実施性を損なう。 さて、前記の作用物質の入手を容易にし、更に天然物質ドラスタチン１５の合 成を簡単にする新規の方法を発見した。 本発明の目的は、式I [式中、ＡはＯＨ又はＮＲ¹Ｒ²−基であり、その際、Ｒ¹及びＲ²は、それぞれ独 立して水素、Ｃ₁〜Ｃ₇−ア ルキル、１、２、又は３個の置換基（それぞれ独立してＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、Ｃ Ｆ₃、ニトロ、ハロゲン）を有するフェニル又は３個までの置換基（それぞれ独 立してＣ₁〜Ｃ₆−アルキル、ＣＦ₃、ニトロ、ハロゲン）を有するベンジルを表 し、 Ｒ³はエチル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル又は１−メチルプロピ ルであり、 Ｒ⁴はエチル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル又は１−メチルプロピ ルであり、かつ Ｒ⁵はエチル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル又は１−メチルプロピ ルである]のペンタペプチドの製法であり、この製法は、式II： [式中、Ｒ¹及びＲ²は前記の意味を表す]のプロリンアミドを式III： [式中、Ｒ¹及びＲ²は前記の意味を表す]のジペプチドに変え、これを式IV： [式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は前記の意味を表す]のトリペプチドに変え、これを式V ： [式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴は前記の意味を表す]のテトラペプチドに変え、か つこれを、式Iのペンタペプチドに変えて、こうして得られたペンタペプチドIを プロリルエンドペプチダーゼ（ＰＥＰ）を用いて加水分解してペンタペプチドカ ルボン酸VI： にする。 この方法は、式IIのプロリンアミドから出発して、 それから、ペプチドIII、IV及びVを介して作用物質Iに達することを特徴とする 。 化合物II、III、IV、V及びIは遊離塩基として使用することができる。これら の化合物と種々の酸との塩を使用するのが有利な場合が多い。 酸としては例えば、ＨＣｌ、ＨＢｒ、Ｈ₃ＰＯ₄、Ｈ₂ＳＯ₄、マロン酸、シュウ 酸、フマル酸、マレイン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸がこれに該 当する。 化合物I及びVIは国際公開ＷＯ９３／２３４２４号明細書から公知である。こ れらは有用なペプチド作用物質であり、かつ更に、天然物質ドラスタチン１５の ような別の作用物質にすることができる。このためには、VIを慣用の方法により 活性化し、かつPoncet etal(Tetrahedron 48．4115-4122，1992)により記載され たように成分XXと反応させる。 国際公開ＷＯ９３／２３４２４号明細書のそのほかの作用物質は、VI及びアミ ノ酸もしくはペプチドから ペプチド結合の慣用の方法により得られる。 前記の化合物及び殊に天然物質ドラスタチン１５の新規製法の利点は次の点に ある： 出発化合物は、その結晶塩酸塩の形でも吸湿性ではない容易に入手可能なプロ リンアミドである。 ジペプチドの製造の際に、ジケトピペラジンが生じる危険はほんの僅かな程度 にすぎない。Pettitの方法の場合にもPoncetの合成方法の場合にも、特に工業的 合成の比較的長い滞留時間ではジケトピペラジンの形成を伴ってしまう。 新規の方法の経過ではすべての結合行程で、末端カルボキシル基はアミドとし て非常に有効に保護され、かつプロリルエンドペプチド（ＰＥＰ）を用いて高特 異的にかつ簡単に分離される。これに対してpettitにより使用されたメチルエス テルは部分的に分離され、一方で、Poncetにより使用されるｔ−ブチルエステル は工業的に製造するのが難しく、かつ分離の際に問題が生ずる。 成文XXを新規の方法では、最後の合成行程で初めて必要とするので、多大な経 費をかけてのみ実施しうるPoncetの方法の場合に比べてこれらはより少なくて済 む。 本発明の方法で、ドラスタチン１５が良好に得られるだけでなく、国際公開Ｗ Ｏ９３／２３４２４号明細書中に挙げられている数多くの作用物質の非常に合理 的な合成も可能である。前記の特許出願は、固相合成を介する非新形成(antineo plastische)ペプチドの製造を記載している。この方法は、工業的規模での製造 にはほとんど適していない。 次の例で本発明の方法を詳述する。 構造IIのプロリンアミドを式XXIのプロリン誘導体から製造する[式中、Ａはメ トキシカルボニル又はピバロイルのような活性化物質であり、かつＰは保護基、 例えばｔ−ブトキシ（ＢＯＣ）又はベンジルオキシカルボニル（Ｚ）である]。 例１：プロリンベンジルアミド−ヒドロクロリド ＣＨ₂Ｃｌ₂１ｌ中のＺ−プロリン９９．７ｇ及びトリエチルアミン５８ｍｌの 溶液に、−１０℃〜１５℃で塩化ピバリン酸４８．２ｇを添加した。−１０℃で ４５分間後撹拌し、次いで、−１０℃で０．５時間かけてＣＨ₂Ｃｌ₂５００ｍｌ 中のベンジルアミン４２．８ｇを添加した。室温で１時間後撹拌した。ＣＨ₂Ｃ ｌ₂溶液を引き続き、水５００ｍｌで２回、１０％ＮａＨＣＯ₃−水溶液５００ｍ ｌで２回、水５００ｍｌで２回、５％クエン酸水溶液５００ｍｌで２回及び水５ ００ｍｌで２回洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥させ、 かつ蒸発濃縮させた。残留物１２０ｇが残留し、これを酢酸エステル２００ｍｌ 中で後処理した。酢酸エステル溶液にｎ−ヘプタン１．２１を添加し、１時間撹 拌し、吸引濾過し、かつ真空中５０℃で乾燥させた。このように得られたＺ−プ ロリンベンジルアミド（１１０ｇ、融点９３〜９４℃）をメタノール１．５ｌ中 に溶かした。Ｐｄ／Ｃ（１０％）０．５ｇの添加の後に、水素を導入した。この 溶液にＨ₂０．５ｌを室温で１．５時間かけて吸収させた。触媒の濾別及び蒸発 の後に、更に精製することなく使用することができた黄色油状物４．６ｇが残留 した。高純度生成物がプロリンベンジルアミド−ヒドロクロリドの沈殿により取 得された。これに、イソプロパノール４００ｍｌ中のプロリンベンジルアミド４ ．１ｇを溶かした。イソプロパノール中のＨＣｌ飽和溶液６３ｍｌを添加し、生 じた懸濁液を０℃〜−５℃で２時間撹拌し、吸引濾過し、かつイソプロパノール ２５０ｍｌで２回洗浄した。残留物を、真空中５０℃で乾燥させた。プロリンベ ンジルアミド−ヒドロクロリド４ｇ、[α]²⁰ _D＝−４５℃が得られた。 プロリンアミドII及び好適なプロリン誘導体からペプチド結合に慣用の方法で 構造IIIのジペプチドを製造した。 例２：Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＮＨＢｚＸＨＣｌ ＣＨ₂Ｃｌ₂２ｌ中のＺ−プロリン２４９ｇ及びトリ エチルアミン２０２．４ｇの溶液に−５℃〜−１０℃で２０分かけて塩化ピバリ ン酸１２０．６ｇを滴加した。−５５℃で６０分攪拌し、引き続き−５℃〜−１ ０℃で３０分かけてメタノール３００ｍｌ中のプロリンベンジルアミド−ヒドロ クロリド２４６ｇの溶液を添加した。０℃未満で１時間、かつ室温で１５時間攪 拌した。溶液をＨ₂Ｏ１ｌ、１０％酢酸１ｌ、Ｈ₂Ｏ１ｌ、１０％ＮａＯＨ１ｌ及 びＨ₂Ｏ１ｌで洗浄した。有機相を蒸発濃縮させた。残留物をメタノール１ｌ中 に入れ、かつ環流に１時間加熱した。メタノールをイソプロパノール２．５ｌと 取り替えた。Ｐｄ／Ｃ（５％）３０ｇを添加した後に、４時間飽和するまで水素 を導入した。ＨＣｌの飽和イソプロパノール溶液１２０ｍｌの添加の後に、触媒 を濾別した。母液を濃縮し、かつ残留物にイソプロパノール４００ｌを添加した 。結晶化の開始後に、メチル−ｔ−ブチルエーテル２ｌを添加した。室温で１５ 時間撹拌し、吸引濾過し、メチル−ｔ−ブチルエーテルで洗浄し、かつ真空下に 乾燥させた。収量：２７７ｇ（８１．３％、融点１８５．５〜１８７℃、[α]²⁰ _D ＝−９６℃）。 ペプチド結合に慣用の方法で、ジペプチドIII及び好適なＮ−メチルアミノ酸 の誘導体（例えばＮ−メチルバリン、Ｎ−メチルロイシン、Ｎ−メチルイソロイ シン、Ｎ−メチル−ｔ−ロイシン）から構造IVのトリペプチドを製造した。 例３：ＭｅＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＮＨＢｚ×ＨＣｌ Ｚ−Ｍｅ−Ｖａｌ１９９．５ｇ及びＰｒｏ−Ｐｒｏ−ＮＨＢｚ×ＨＣｌ２５３ ｇ及びジイソプロピルエチルアミン４１７ｇの溶液に−５℃〜−１０℃で４０分 かけて、酢酸エステル中のプロパンリン酸無水物の５０％溶液６３６ｇを滴加し た。室温で１５時間撹拌し、水１ｌを添加し、かつ有機相を１０％酢酸７５０ｍ ｌ、水７５０ｍｌ、１０％ＮａＯＨ７５０ｍｌ及び水７５０ｍｌで洗浄した。有 機相を濃縮し、かつ残留物をイソプロパノール２．５ｌに添加した。Ｐｄ／Ｃ（ ５％）９０ｇの添加の後に８時間Ｈ₂を導入した。触媒の濾別の後に蒸発させた 。残留物をイソプロパノール８００ｍｌ中に溶かし、ＨＣｌのイソプロパノール 溶液１００ｍｌを添加し、かつ４５℃で種入れをした。メチル−ｔ−ブチルエー テル２ｌの添加の後に、室温で一晩攪拌し、吸引濾過し、イソプロパノールで洗 浄し、かつ乾燥させた。収量３１３ｇ（９２．５％）、融点２４３〜２４４℃、 [α]²⁰ _D＝−１４１℃。 トリペプチドIV及び好適なアミノ酸の誘導体バリン、α−アミノ酪酸、ロイシ ン、ｔ−ロイシン及びイソロイシンから構造Vのテトラペプチドを製造した。 例４：Ｖａｌ−ＭｅＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＮＨＢｚ×ＨＣｌ ＣＨ₂Ｃｌ₂１．５ｌ中のＺ−バリン１８８．５ｇ及 びトリエチルアミン１５１．２ｇの溶液に−５℃〜−１０℃で２０分かけて、塩 化ピバリン酸９４．５ｇを滴加した。−５〜−１０℃での９０分の撹拌の後に、 −５℃〜−１０℃で４０分かけて、ＭｅＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＮＨＢｚ×Ｈ Ｃｌ３３７．５ｇを滴加した。室温で１５時間撹拌し、水７５０ｍｌを添加し、 有機相を１０％酢酸７５０ｍｌ、水７５０ｍｌ、１０ＮａＯＨ７５０ｍｌで洗浄 した。有機相を濃縮した。残留物をメタノール２ｌ中に溶かし、環流に１時間加 熱した。Ｐｄ／Ｃ（５％）３０ｇの添加の後に水６０ｍｌ中でスラリー状にし、 飽和まで（２．５時間）水素を導入した。触媒の濾別の後に、濃縮乾固させた。 残留物にイソプロパノール６００ｍｌを添加し、ＨＣｌの３０％イソプロパノー ル溶液１２０ｍｌで酸性にした。種入れの後に、室温で１５時間撹拌した。結晶 液にメチル−ｔ−ブチルエーテル２ｌを添加した。２時間の攪拌の後に吸引濾過 し、イソプロパノールで洗浄し、かつ乾燥させた。３０６ｇ（収率７４．１％） が得られた；融点２０５〜２０８（５℃）、[α]²⁰ _D＝−１７９．５℃。 テトラペプチド及びアミノ酸の好適な誘導体バリン、アミノイソ酪酸、ロイシ ン、ｔ−ロイシン及びイソロイシンから構造Ｖのペンタペプチドを製造した。末 端メチル基をカップリングによりペンタペプチドに導入することができた。場合 により、Ｎ，Ｎ−ジメチル バリン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−アミノイソ酪酸、Ｎ，Ｎ−ジメチルロイシン、Ｎ， Ｎ−ジメチル−ｔ−ロイシン及びＮ，Ｎ−ジメチルイソロイシンの好適な誘導体 も使用することができた。 例５：Ｍｅ₂Ｖａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＶａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＮＨＢｚ×ＨＣ ｌ（国際公開ＷＯ９３／２３４２４号明細書の第２３４番の作用物質） ＣＨ₂Ｃｌ₂１００ｍｌ中のＮ，Ｎ−ジメチルバリン８．７ｇ、Ｖａｌ−ＭｅＶ ａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＮＨＢｚ×ＨＣｌ２７．４ｇ及びトリエチルアミン２１ ．６ｇに酢酸エステル中のプロパンリン酸無水物の５０％溶液４２．４ｇを０〜 −６℃で２０分かけて滴加した。冷却下に１時間、かつ室温で一晩撹拌した。有 機相を水５０ｍｌで洗浄し、かつ濃縮した。残留物をイソプロパノール５０ｍｌ 中に溶かし、かつＨＣｌの３０％イソプロパノール溶液１０ｍｌで酸性にした。 種入れし、６０℃でメチル−ｔ−ブチルエーテル１５０ｍｌを添加し、一晩撹拌 し、吸引濾過し、イソプロパノールで洗浄し、かつ乾燥させた。２９．９ｇ（収 率８８．３％）が得られた；[α]²⁰ _D＝−１８０．３℃。 ペンタペプチドアミドＶからプロリルエンドペプチターゼを用いての加水分解 によりペンタペプチド酸ＶＩを取得した（T.Yoshimoto et al.，J.Biol．Chem., 255，4786(1980)，J.Biochem．110，873(1991)）。 特に好適な置換基はこの場合ベンジルアミドである。アルキルアミドも加水分解 することができるが、かなり緩慢に反応する。 ペンタペプチドカルボン酸ＶＩａ＝Ｍｅ２Ｖａｌ−Ｖａｌ−ＭｅＶａｌ−Ｐｒ ｏ−ＰｒｏＯＨは、天然物質ドラスタチン１５の好適な前駆物質である。これの ためには、ＶＩａをヒドロキシ酸アミドXXとカップリングさせる。XXの好適な合 成は、J.Poncet et al(Tetrahedron 48(20)4115-4122)が記載している。 例６：ドラスタチン１５の製造 塩化メチル１５０ｍｌ中のＶＩａ６ｇ、ＸＸ３．０ｇ、ＤＭＡＰ₊２．０ｇ及 びトリエチルアミン２．０ｇの溶液に、０℃で塩化メチレン２０ｍｌ中のイソプ ロペニルクロロホルミエート２．４ｇの溶液を添加した。０℃で１５分、かつ室 温で４時間撹拌した。水、５％ＮａＨＣＯ₃−水溶液及び水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄ 上で乾燥させ、かつ濃縮させた。残留物をヘキサン／酢酸エステル中に溶かし 、かつシリカゲルを介してクロマトグラフィー処理した。収量５．８ｇ；非晶質 固体。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＵ，ＢＧ ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＨＵ，ＩＬ，ＪＰ，ＫＲ， ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＳＧ，ＳＫ，ＴＲ，ＵＡ，Ｕ Ｓ (72)発明者 エルンスト ブッシュマン ドイツ連邦共和国 Ｄ−67069 ルートヴ ィッヒスハーフェン ゲオルク−ルートヴ ィヒ−クレープス−シュトラーセ 10 (72)発明者 アンドレアス ハウプト アメリカ合衆国 01581 マサチューセッ ツ ウエストボロウ ローズウッド プレ イス ２ (72)発明者 ベルント ヤンセン ドイツ連邦共和国 Ｄ−67063 ルートヴ ィッヒスハーフェン ロイシュナーシュト ラーセ 18アー (72)発明者 カール ウルリッヒ ドイツ連邦共和国 Ｄ−67061 ルートヴ ィッヒスハーフェン グリューナーシュト ラーセ ７ (72)発明者 アンドレアス クリング ドイツ連邦共和国 Ｄ−68239 マンハイ ム リーゲラー ヴェーク 14 (72)発明者 シュテファン ミュラー ドイツ連邦共和国 Ｄ−67354 レーマー ベルク フィートリフトシュトラーセ 105 (72)発明者 クルト リッター ドイツ連邦共和国 Ｄ−69115 ハイデル ベルク アルベルト−マイス−シュトラー セ 12 (72)発明者 トーマス ツィールケ ドイツ連邦共和国 Ｄ−67459 ベール− イッゲルハイム アカツィエンシュトラー セ 12

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．式I [式中、ＡはＯＨ又はＮＲ¹Ｒ²−基であり、その際、Ｒ¹及びＲ²は、それぞれ独 立して水素、Ｃ₁〜Ｃ₇−アルキル、３個までの置換基（それぞれ独立してアルキ ル、ＣＦ₃、ニトロ、ハロゲン）を有するフェニル又は３個までの置換基（それ ぞれ独立してアルキル、ＣＦ₃、ニトロ、ハロゲン）を有するベンジルを表し、 Ｒ³はエチル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル又は１−メチルプロピ ルであり、 Ｒ⁴はエチル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル又は１−メチルプロピ ルであり、かつ Ｒ⁵はエチル、イソプロピル、イソブチル、ｔ−ブチル又は１−メチルプロピ ルである]のペンタペプチドの製法において、式II： [式中、Ｒ¹及びＲ²は前記の意味を表す]のプロリンア ミドを式III： [式中、Ｒ¹及びＲ²は前記の意味を表す]のジペプチドに変え、これを式IV： [式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は前記の意味を表す]のトリペプチドに変え、これを式V ： [式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴は前記の意味を表す]のテトラペプチドに変え、か つこれを、式Iのペンタペプチドに変えて、こうして得られたペンタペプチドＩ を必要に応じてプロリンエンドペプチダーゼ（ＰＥＰ ）を用いて加水分解してペンタペプチドカルボン酸VI： にすることを特徴とする、式Iのペンタペプチドの製法。 ２．式II、III、IV、V及びIの物質をその塩の形で使用する、請求項１記載の 方法。 ３．式中のＲ¹、Ｒ²、Ｒ³及びＲ⁴が前記の意味を有する式IV及びVで表される ペプチド作用物質を製造するための前駆物質。 ４．式中のＲ³、Ｒ⁴及びＲ⁵がメチル基である式VIの化合物をドラスタチン１ ５の製造のために使用すること。