JPH11500134A - 個体に投与する薬学製剤のためのコンジュゲート - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 コンジュゲートは、活性物質および金属化合物に対する結合部位を有する化合物からなる。また、かかるコンジュゲートの調製方法およびその使用も開示される。

Description

【発明の詳細な説明】 個体に投与する薬学製剤のためのコンジュゲート 本発明は、個体に投与する薬学製剤のためのコンジュゲート、かかるコンジュ ゲートの製造方法およびその使用に関する。 長期にわたって、個体に投与する薬学製剤、すなわち、患者の治療コースに正 確に適用するそれらの投与量に対する大きな要求があった。この必要性は、特に 、化学療法剤を使用する際に求められる。前記を達成するために多くの試みがな されてきた。しかしながら、該試みは、現在までほとんど成功を示していない。 したがって、本発明の目的は、個体に投与する薬学製剤の実現性を提供するこ とにある。 本発明によれば、このことは、活性物質および金属化合物に対する結合部位を 有する化合物を含有するコンジュゲートにより達成される。 「活性物質」という用語は、特に、腫瘍疾患、感染性疾患、皮膚疾患および／ または免疫系疾患等の疾患を治療および／または診断するために使用可能ないか なる種類の物質も含む。 かかる物質の例は、例えば、抗生物質、抗ウイルス剤、抗原生動物剤および細 胞増殖抑制剤等の化学療法剤である。抗生物質の例は、スルホンアミド類、７− クロロテトラサイクリン等のテトラサイクリン類、フシジン酸、ならびにキノロ ン類、アンフォテリシン、イソニアジド、ピラジン２−カルボン酸およびピラジ ンアミド等のジャイレース阻害剤類である。抗ウイルス剤の例は、アマンタジン およびリマンタジンである。抗原生動物剤の例は、メフロキンおよびプリマキン である。細胞増殖抑制剤の例は、ドキソルビシン等のアントラサイクリン類、ト ポイソメラーゼ阻害剤類、マイトマシンＡおよびＣ、ブレオマイシン酸、クロラ ムブシル、メルファレンならびにメトトレキセート等の葉酸拮抗剤である。 さらに、かかる物質は、セリトンブルーおよびアシッドブラック等のアミノア ントラキノンであってもよい。 さらに、かかる物質は、例えば、ｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラヒドロ キシフェニルポルフィン、ｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラカルボキシフェ ニルポルフィンならびにｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラスルホフェニルポ ルフィン等のポルフィリン、ｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラヒドロキシフ ェニルクロリン、ｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラカルボキシフェニルクロ リンならびにｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラスルホフェニルクロリン等の クロリンまたは、ｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラヒドロキシフェニルバク テリオクロリン、ｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラカルボキシフェニルバク テリオクロリンならびにｏ−、ｍ−および／またはｐ−テトラスルホフェニルバ クテリオクロリン等のバクテリオクロリン等の光反応物質であってもよい。 また、かかる物質は、トリフルオロ酢酸等の蛍光分光法、核共鳴スキャニング またはシンチスキャニングのためのコントラスト媒体であってもよい。 前記物質および／またはその類似体もしくはその誘導体の１以上が、本発明の コンジュゲートに存在する。数種類が存在する場合、それらは、同一または互い に異なってもよい。 「金属化合物に対する結合部位を有する化合物」という用語は、金属化合物に 対する結合部位を有するいかなる種類の化合物からなるものである。かかる結合 部位の例は、ヒドロキシル基、特に、Ｃ原子結合ヒドロキシル基、カルボニル基 およびカルボキシル基である。該化合物は、１以上の結合部位を有してもよい。 該化合物は、好ましくは２個、より好ましくは３〜６個の結合部位を有する。い くつかの結合部位が存在する場合、それらは、同一または互いに異なってもよい 。前記化合物の例は、エチレンジアミンテトラアセテート（ＥＤＴＡ）、ジエチ レントリアミンペンタアセテート（ＤＴＰＡ）、トリエチレンテトラミンヘキサ アセテート（ＴＴＨＥ）、アリザリンおよびそれらの誘導体である。 前記化合物の１以上が、本発明のコンジュゲートに存在する。数種類が存在す る場合、それらは、同一または互いに異なってもよい。いくつかの前記化合物の 存在が、コンジュゲートの水溶性および金属化合物との結合能力を支持する。 好ましい態様において、本発明のコンジュゲートは、検出可能な金属化合物を 有する。かかる化合物は、１以上の検出可能な金属および／または金属イオンを 含むか、またはそれらからなってもよい。かかる金属の例は、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ 、Ｆｅ、Ｎｉ、Ｐｔ、ＧｄおよびＩｎであり、それらは、好ましくは二価または 三価であり、Ｇｄ³⁺が特に好ましい。金属および／または金属イオンは、¹¹¹Ｉ ｎ等の放射性のあるものであってもよい。 別の好ましい態様において、本発明のコンジュゲートは、担体を有する。「担 体」という用語は、腫瘍または炎症病巣等のある種の組織において、コンジュゲ ートを濃縮するために適するいかなる種類の化合物からなる。かかる担体の例は 、外因性とみなされない蛋白質およびポリエーテル類である。前者は、天然型で 利用可能であることが好ましい。また、それらは、９０，０００ダルトンまでの 分子量を有することが好ましい。蛋白質アルブミン、特に、ヒト血清アルブミン （ＨＳＡ）またはトランスフェリンが特に好ましい。ポリエーテル類の例は、メ トキシポリエチレングリコール、メトキシポリエチレングリコール−ｐ−ニトロ フェニルカルボネート、メトキシポリエチレングリコール スクシンイミジルス クシネート、メトキシポリエチレングリコール トレシレート、メトキシポリオ キシエチレンアミン、メトキシポリオキシエチレンカルボン酸およびメトキシポ リオキシエチレンイミダゾールカルボニル等のポリエチレングリコール類である 。ポリエーテル類は、１００〜２０，０００ダルトンの分子量を有することが好 ましく、約５，０００ダルトンが特に好ましい。 本発明のコンジュゲートは、前記担体を１以上有してもよい。数種類の担体が 存在する場合、それらは、同一または互いに異なってもよい。 本発明のコンジュゲートにおいて、１以上の活性物質が、金属化合物に対する 結合部位を有する１以上の化合物と結合してもよい。また、活性物質および／ま たは化合物が互いに結合してもよい。 かかるコンジュゲートは、１以上の検出可能な金属化合物をも含んでよい。そ れらは、１または複数の活性物質および１または複数の化合物間の結合から免除 されてもよいし、同一のものを示してもよい。 前記コンジュゲートは、１以上の担体も含んでよい。それらは、１または複数 の活性物質、１または複数の化合物および／または１または複数の金属化合物と 結合してもよい。 本発明のコンジュゲートの前記成分は、遊離体（ｅｄｕｃｔ）として与えられ る。コンジュゲート中では、それらは、誘導体型で存在する。 本発明の好ましいコンジュゲートを、図１〜６に図示する。 前記コンジュゲートの調製方法も、本発明により提供される。かかる方法は、 酸基の活性化および活性化酸基とアミノ基との結合等の化学において起こる通常 の反応を行う。この点について、実施例１および２ならびに図１〜６のコンジュ ゲートの調製に対して参照をする。 本発明のコンジュゲートは、標識および非標識型で提供される。両方の型とも 治療目的によく適する。身体およびその効果において本発明のコンジュゲートの 吸収および分布を決定するために、別々の治療の時間で標識型を投与することが 好ましい。このことにより、コンジュゲートの個体への投与量を決めることが可 能となる。このことは、特に化学療法に効果を有する主要な有利性を示す。健常 組織に対する副作用を、個体にコンジュゲートを投与することにより最小にする ことができる。なかんずく、本発明のコンジュゲートが、例えば、腫瘍または炎 症病変等のある種の組織で該コンジュゲートの濃縮効果を有する担体を含有する 場合に、このことが達成される。したがって、本発明は、薬学製剤の標的特異的 および用量特異的投与を可能にする。図面の簡単な説明 図１は、本発明のノバントロン−ＤＴＰＡ−ＨＳＡコンジュゲートの調製を示 し、 図２は、本発明のセリトンブルー−ＤＴＰＡ−ＨＳＡコンジュゲートの調製を 示し、 図３は、本発明のアシッドブラック−ＤＴＰＡコンジュゲートの調製を示し、 図４は、本発明の７−クロロテトラサイクリン−アリザリン−ＨＳＡコンジュ ゲートの調製を示し、 図５は、本発明のセリトンブルー−ＤＴＰＡ−ＰＥＧコンジュゲートの調製を 示し、 図６は、本発明のＴＴＨＥ−ＰＥＧ（３）−ジエチレントリアミン（３）−Ｄ ＴＰＡ／Ｇｄ³⁺（６）コンジュゲートの調製を示し、括弧内の数字は、コンジュ ゲート中の特定の化合物の数を示し、 図７は、それぞれ、セリトンブルー−ＤＴＰＡ−ＨＳＡおよびノバントロン− ＤＴＰＡ−ＨＳＡ投与による腫瘍細胞の生育阻害を示し、 図８は、アシッドブラック−ＤＴＰＡを用いる腫瘍細胞の生育阻害を示し、な らびに、 図９は、腫瘍、心臓および肝臓領域の¹¹¹Ｉｎ−ノバントロン−ＤＴＰＡ−Ｈ ＳＡの分布を示す。 以下の実施例により、本発明を説明する。実施例１：本発明のノバントロン−ＤＴＰＡ−ＨＳＡコンジュゲートの調製 該コンジュゲートの調製およびその構造を、図１に示す。 ノバントロンを、０．１７Ｍ Ｂｉｃ中、１０ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解した。 薄層クロマトグラフィーによる標準条件下で、遊離ノバントロンが検出できなく なるまで、この溶液にＤＴＰＡ無水物を何度かに分けて添加した。 ＴＬＣ：標準条件 プレート：蛍光指示薬なしのシリカゲル６０（５ｘ２０ｃｍ） 溶離液：Ｅｔａｃ．７０；ＭｅＯＨ ３０（ｖ／ｖ） Ｒｆ． ノバントロン ０．５８〜０．６２ ノバントロン−ＤＴＰＡ ０．０ 次に、青色沈殿物が生成するまで（ｐＨ約２で）、該溶液に２Ｎ ＨＣｌを添 加した。次いで、生じた混合物をロータリーエバポレーターで乾燥するまで濃縮 した。 ロータリーエバポレーターで濃縮後得られた残留物を、ＤＭＦに溶解し、２倍 モル過剰のジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）および１０倍過剰のＮ− ヒドロキシスクシンイミド（ＨＳＩ）と混合した。約１２時間後、ＨＳＡ（０． １７Ｍ ＮａＨＣＯ₃中、１０ｍｇ／ｍｌ）を添加した。反応混合物を、約３０ 分間静置した。その後、常法に従って、ＤＣＣ、ＤＣＨＨ、ＤＭＦおよびＨＳＩ を分離した。純度は、ＨＰＬＣおよびＴＬＣにより調べた。ノバントロン−ＤＴ ＰＡ−ＨＳＡを得た。実施例２：本発明のセリトンブルー−ＤＴＰＡ−ＨＳＡコンジュゲートの調製 該コンジュゲートの調製およびその構造を、図２に示す。 セリトンブルー（１，４，５，８−テトラアミノアントラキノン、ＭＷ２６８ ．２８）を、ＤＭＦ中、２０ｍｇ／ｍｌの濃度で溶解した。薄層クロマトグラフ ィーにより遊離セリトンブルーが検出できなくなるまで、ＤＴＰＡ無水物を攪拌 により添加した。 ＴＬＣ：標準条件 Ｒｆ値： セリトンブルー ０．６２〜０．６６ セリトンブルー−ＤＴＰＡ ０．０ 限外濾過（ＹＣ ０５）により、青紫色に染まった物質を精製し、溶液のｐＨ を約６．５に調整した、次いで、２Ｎ ＨＣｌを用いて溶液を酸性にし（ｐＨ２ ．０〜２．５）、その後、直接ロータリーエバポレーターで乾燥するまで濃縮し た。続いて、試料をメタノール中で再溶解し、再びロータリーエバポレーターで 濃縮して残留量の水を除去した。これを少なくとも３回行った。セリトンブルー −ＤＴＰＡを、実施例１に記載のように、ＤＣＣおよびＨＳＩと反応させた。１ ２〜１４時間後、ＨＳＡとの反応を行った。約３０分間の反応時間後、付随した 物質を、実施例１に記載のように分離した。純度は、ＴＬＣおよびＨＰＬＣによ り調べた。セリトンブルー−ＤＴＰＡ−ＨＳＡを得た。実施例３：セリトンブルー−ＤＴＰＡ−ＨＳＡおよびノバントロン−ＤＴＰＡ− ＨＳＡ各投与による腫瘍細胞の生育阻害 セリトンブルー−ＤＴＰＡ−ＨＳＡおよびノバントロン−ＤＴＰＡ−ＨＳＡ各 コンジュゲートならびに対照としてのＨＳＡを、通常の条件下で、Ｗａｌｋｅｒ ２５６腫瘍細胞とともにインキュベートした。２４時間および４８時間後各々の １ｍｌ当たりの細胞数を、常法により決定した。 図７は、本発明の各コンジュゲートが、腫瘍細胞の増殖を阻害することを示す 。実施例４：アシッドブラック−ＤＴＰＡ投与による腫瘍細胞の生育阻害 コンジュゲートとしてアシッドブラック−ＤＴＰＡを投与して、前記実施例３ のようにして、実施例４を行った。 図８は、本発明のコンジュゲートが、腫瘍細胞の増殖を阻害することを示す。実施例５：腫瘍、心臓および肝臓領域の¹¹¹Ｉｎ−ノバントロン−ＤＴＰＡ−Ｈ ＳＡの分布 腫瘍産生ラット（Ｗａｌｋｅｒ２５６カルシノサルコーマ）に、本発明のコン ジュゲートを皮下注射により投与した。投与したコンジュゲートの全量に基づく 吸収パーセントを、シンチスキャニングにより測定した。 また、前記コンジュゲートを麻酔ラットに投与し、各心臓領域および肝臓領域 における本発明のコンジュゲートの減少を通常のシンチスキャニングにより測定 した。 図９は、本発明のコンジュゲートが、腫瘍に濃縮されるが、心臓または肝臓領 域には濃縮されないことを開示する。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】１９９７年１月１７日 【補正内容】 請求の範囲 １．活性物質、金属化合物に対する結合部位を有する化合物および担体を含有し てなるコンジュゲートであって、該化合物は、金属化合物に対する結合部位を有 する、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ＴＴＨＥ、アリザリンまたはそれらの誘導体であり 、該担体は、アルブミンまたはポリエチレングリコールまたはその誘導体である コンジュゲート。 ２．数種類の活性物質が存在していることを特徴とする請求項１記載のコンジュ ゲート。 ３．数個の結合部位が存在していることを特徴とする請求項１または２記載のコ ンジュゲート。 ４．２〜６個の結合部位が存在していることを特徴とする請求項３記載のコンジ ュゲート。 ５．金属化合物に対する結合部位を有する数種類の化合物が存在していることを 特徴とする請求項１〜４いずれか記載のコンジュゲート。 ６．該コンジュゲートが、検出可能な金属化合物を有することを特徴とする請求 項１〜５いずれか記載のコンジュゲート。 ７．金属化合物が、検出可能な金属および／または金属イオンを含むものか、ま たはそれらからなるものであることを特徴とする請求項６記載のコンジュゲート 。 ８．金属または金属イオンが、放射性であることを特徴とする請求項７記載のコ ンジュゲート。 ９．数種類の担体が存在していることを特徴とする請求項１〜８いずれか記載の コンジュゲート。 １０．活性物質を、金属化合物に対する結合部位を有する化合物および担体と結 合させ、ならびに任意に、検出可能な通常の金属化合物と結合させることを特徴 とし、該化合物が金属化合物に対する結合部位を有するＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、Ｔ ＴＨＥ、アリザリンまたはそれらの誘導体であり、該担体がアルブミンまたはポ リエチレングリコールもしくはその誘導体である、請求項１〜９いずれか記載の コンジュゲートの調製方法。 １１．疾患の治療および／または診断のための請求項１〜１０いずれか記載のコ ンジュゲートの使用。 １２．該疾患が、腫瘍疾患、感染性疾患、皮膚疾患および／または免疫系疾患で ある請求項１１記載の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 シュレンク，ハンス−ヘルマン ドイツ連邦共和国 ツァイスカム デー− 67278 ミッテルガッセ (72)発明者 ステーレ，ゲルト ドイツ連邦共和国 ハイデルベルク デー −69123 エディンゲル シュトラーセ 11

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．活性物質、および金属化合物に対する結合部位を有する化合物を含有してな るコンジュゲート。 ２．活性物質が、腫瘍疾患、感染性疾患、皮膚疾患および／または免疫系疾患を 治療するために使用可能な物質であることを特徴とする請求項１記載のコンジュ ゲート。 ３．数種類の活性物質が存在していることを特徴とする請求項１または２記載の コンジュゲート。 ４．金属化合物に対する結合部位が、ヒドロキシル基、カルボニル基またはカル ボキシル基であることを特徴とする請求項１〜３いずれか記載のコンジュゲート 。 ５．数個の結合部位が存在していることを特徴とする請求項１〜４いずれか記載 のコンジュゲート。 ６．２〜６個の結合部位が存在していることを特徴とする請求項５記載のコンジ ュゲート。 ７．該化合物が、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ＴＴＨＥ、アリザリンまたはそれらの誘 導体であることを特徴とする請求項１〜６いずれか記載のコンジュゲート。 ８．数種類の化合物が存在していることを特徴とする請求項１〜７いずれか記載 のコンジュゲート。 ９．該コンジュゲートが、検出可能な金属化合物を有することを特徴とする請求 項１〜８いずれか記載のコンジュゲート。 １０．金属化合物が、検出可能な金属および／または金属イオンを含むものか、 またはそれらからなるものであることを特徴とする請求項９記載のコンジュゲー ト。 １１．金属または金属イオンが、放射性であることを特徴とする請求項１０記載 のコンジュゲート。 １２．該コンジュゲートが、担体をも含むことを特徴とする請求項１〜１１いず れか記載のコンジュゲート。 １３．担体が、外因性とみなされない天然の蛋白質またはポリエーテルであるこ とを特徴とする請求項１２記載のコンジュゲート。 １４．蛋白質が、アルブミンであることを特徴とする請求項１３記載のコンジュ ゲート。 １５．ポリエーテルが、ポリエチレングリコールまたはその誘導体であることを 特徴とする請求項１３記載のコンジュゲート。 １６．数種類の担体が存在していることを特徴とする請求項１２〜１４いずれか 記載のコンジュゲート。 １７．活性物質を、金属化合物に対する結合部位を有する化合物と結合させ、お よび任意に、検出可能な金属化合物および／または通常の担体と結合させること を特徴とする、請求項１〜１６いずれか記載のコンジュゲートの調製方法。 １８．疾患の治療および／または診断のための請求項１〜１６いずれか記載のコ ンジュゲートの使用。 １９．該疾患が、腫瘍疾患、感染性疾患、皮膚疾患および／または免疫系疾患で ある請求項１８記載の使用。