JPH11194129A - 免疫測定用担体及びそれを用いた免疫測定用固相の調製方法 - Google Patents
免疫測定用担体及びそれを用いた免疫測定用固相の調製方法Info
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- JPH11194129A JPH11194129A JP9368396A JP36839697A JPH11194129A JP H11194129 A JPH11194129 A JP H11194129A JP 9368396 A JP9368396 A JP 9368396A JP 36839697 A JP36839697 A JP 36839697A JP H11194129 A JPH11194129 A JP H11194129A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 ガラス繊維の組成にかかわりなく適用可能で
あり、かつ、ガラス繊維を用いた、先に開発した免疫測
定用担体を用いた場合よりも測定感度を高くすることが
できる、新規な免疫測定用担体及びそれを用いた免疫活
性物質の固相化方法を提供すること。 【解決手段】 水溶性有機溶媒で処理した後、乾燥させ
たガラス繊維から成る免疫測定用担体を提供した。
あり、かつ、ガラス繊維を用いた、先に開発した免疫測
定用担体を用いた場合よりも測定感度を高くすることが
できる、新規な免疫測定用担体及びそれを用いた免疫活
性物質の固相化方法を提供すること。 【解決手段】 水溶性有機溶媒で処理した後、乾燥させ
たガラス繊維から成る免疫測定用担体を提供した。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】従来より、抗原や抗体を免疫
測定法により測定することが広く行なわれており、中で
も固相の担体を用いる方法が広く用いられている。免疫
測定法で用いる固相担体としては、ポリスチレン製のビ
ーズや、マイクロプレートのウェル等が通常用いられて
いる。
測定法により測定することが広く行なわれており、中で
も固相の担体を用いる方法が広く用いられている。免疫
測定法で用いる固相担体としては、ポリスチレン製のビ
ーズや、マイクロプレートのウェル等が通常用いられて
いる。
【０００２】しかしながら、ポリスチレン製のビーズ
や、マイクロプレートのウェル等に抗原や抗体等の免疫
活性物質を固相化して行う従来の免疫測定方法では、免
疫反応のためにおよそ３０から１８０分、標識抗体との
反応もおよそ３０から１８０分必要であり、かなり時間
がかかる。また、ＢＦ分離の際に用いる洗浄液は１００
０から１００００μｌと多量の洗浄液を必要とする。
や、マイクロプレートのウェル等に抗原や抗体等の免疫
活性物質を固相化して行う従来の免疫測定方法では、免
疫反応のためにおよそ３０から１８０分、標識抗体との
反応もおよそ３０から１８０分必要であり、かなり時間
がかかる。また、ＢＦ分離の際に用いる洗浄液は１００
０から１００００μｌと多量の洗浄液を必要とする。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本出願人は、先に特定
の組成を有するガラス繊維から成る担体を用いることに
より、免疫測定の時間を従来よりも大幅に短縮でき、か
つ、用いる洗浄液や検体の量も従来よりも少なくするこ
とができることを見出し、特許出願した（特願平８−２
７７１５４号）。しかしながら、この方法では、ガラス
繊維の組成に制限がある。また、この方法よりもさらに
測定感度が向上すれば、好ましいことは言うまでもな
い。
の組成を有するガラス繊維から成る担体を用いることに
より、免疫測定の時間を従来よりも大幅に短縮でき、か
つ、用いる洗浄液や検体の量も従来よりも少なくするこ
とができることを見出し、特許出願した（特願平８−２
７７１５４号）。しかしながら、この方法では、ガラス
繊維の組成に制限がある。また、この方法よりもさらに
測定感度が向上すれば、好ましいことは言うまでもな
い。
【０００４】従って、本発明の目的は、ガラス繊維の組
成にかかわりなく適用可能であり、かつ、ガラス繊維を
用いた、先に開発した免疫測定用担体を用いた場合より
も測定感度を高くすることができる、新規な免疫測定用
担体及びそれを用いた免疫活性物質の固相化方法を提供
することである。
成にかかわりなく適用可能であり、かつ、ガラス繊維を
用いた、先に開発した免疫測定用担体を用いた場合より
も測定感度を高くすることができる、新規な免疫測定用
担体及びそれを用いた免疫活性物質の固相化方法を提供
することである。
【０００５】本願発明者らは、鋭意研究の結果、ガラス
繊維から成る免疫測定用担体を、水溶性有機溶媒で処理
してから免疫活性物質を固相化することにより、免疫測
定の感度を大幅に向上させることができ、ひいては固相
化する高価な免疫活性物質の量を大幅に減少させても所
期の測定感度が得られることを見出し、本発明を完成し
た。
繊維から成る免疫測定用担体を、水溶性有機溶媒で処理
してから免疫活性物質を固相化することにより、免疫測
定の感度を大幅に向上させることができ、ひいては固相
化する高価な免疫活性物質の量を大幅に減少させても所
期の測定感度が得られることを見出し、本発明を完成し
た。
【０００６】すなわち、本発明は、水溶性有機溶媒で処
理した後、乾燥させたガラス繊維から成る免疫測定用担
体を提供する。また、本発明は、上記本発明の免疫測定
用担体と、免疫活性物質とを接触させて該免疫活性物質
を前記免疫測定用担体に固相化することから成る、免疫
測定用固相の調製方法を提供する。
理した後、乾燥させたガラス繊維から成る免疫測定用担
体を提供する。また、本発明は、上記本発明の免疫測定
用担体と、免疫活性物質とを接触させて該免疫活性物質
を前記免疫測定用担体に固相化することから成る、免疫
測定用固相の調製方法を提供する。
【０００７】
【発明の実施の形態】本発明の免疫測定用担体を構成す
るガラス繊維の直径は特に限定されないが、０．１〜１
００μｍが適当であり、０．５〜２．０μｍが好まし
い。また、ガラス繊維はどのような形態にあってもよい
が、メンブレン状の形態にあるのものが利用し易く好ま
しい。この場合、メンブレンの目付重量は特に限定され
ないが９０〜１３０ｇ／ｍ2 程度が適当であり、また、
厚さも特に限定されないが０．３mmから０．６mm程度が
適当である。ガラス繊維を構成するガラスの組成は限定
されない。ガラスファイバーメンブレンはいくつか市販
されており、市販のガラスファイバーメンブレンを本発
明の免疫測定用担体として用いることができる。
るガラス繊維の直径は特に限定されないが、０．１〜１
００μｍが適当であり、０．５〜２．０μｍが好まし
い。また、ガラス繊維はどのような形態にあってもよい
が、メンブレン状の形態にあるのものが利用し易く好ま
しい。この場合、メンブレンの目付重量は特に限定され
ないが９０〜１３０ｇ／ｍ2 程度が適当であり、また、
厚さも特に限定されないが０．３mmから０．６mm程度が
適当である。ガラス繊維を構成するガラスの組成は限定
されない。ガラスファイバーメンブレンはいくつか市販
されており、市販のガラスファイバーメンブレンを本発
明の免疫測定用担体として用いることができる。
【０００８】本発明で言う「水溶性有機溶媒」とは、水
を１０v/v ％以上溶解することができる有機溶媒を意味
し、好ましくは水を２０v/v ％以上溶解することができ
る有機溶媒である。本発明に用いることができる水溶性
有機溶媒の好ましい例として、メタノール、エタノー
ル、プロパノール（n-,iso- ）、ブタノール（n-, sec
-, tert-)、のような炭素数１〜４の脂肪族アルコー
ル、アセトンのような炭素数１〜４の脂肪族ケトンを挙
げることができるが、これらに限定されるものではな
く、上記した「水溶性有機溶媒」の定義に当てはまるも
のはいずれも用いることができる。また、複数の有機溶
媒を混合して用いることも可能である。これらのうち、
イソプロパノールが最も好ましい。なお、これらの水溶
性有機溶媒は、水を全く含まない状態で使用するのが最
も好ましいが、水をさらに１０ｖ／ｖ％以上溶解するこ
とができるのであれば、水を含んでいてもよい。もっと
も、水の量は少ないほど好ましく、２０ｖ／ｖ％以下が
好ましく、さらに好ましくは１０ｖ／ｖ％以下である。
を１０v/v ％以上溶解することができる有機溶媒を意味
し、好ましくは水を２０v/v ％以上溶解することができ
る有機溶媒である。本発明に用いることができる水溶性
有機溶媒の好ましい例として、メタノール、エタノー
ル、プロパノール（n-,iso- ）、ブタノール（n-, sec
-, tert-)、のような炭素数１〜４の脂肪族アルコー
ル、アセトンのような炭素数１〜４の脂肪族ケトンを挙
げることができるが、これらに限定されるものではな
く、上記した「水溶性有機溶媒」の定義に当てはまるも
のはいずれも用いることができる。また、複数の有機溶
媒を混合して用いることも可能である。これらのうち、
イソプロパノールが最も好ましい。なお、これらの水溶
性有機溶媒は、水を全く含まない状態で使用するのが最
も好ましいが、水をさらに１０ｖ／ｖ％以上溶解するこ
とができるのであれば、水を含んでいてもよい。もっと
も、水の量は少ないほど好ましく、２０ｖ／ｖ％以下が
好ましく、さらに好ましくは１０ｖ／ｖ％以下である。
【０００９】水溶性有機溶媒による処理は、ガラス繊維
から成る担体を水溶性有機溶媒中に浸漬したり、水溶性
有機溶媒を噴霧し、又は、スピナー等を用いて塗布する
ことにより行うことができる。処理は、水溶性有機溶媒
が液体である状態を維持できるいずれの温度でも行うこ
とができ、従って、室温で行うのが最も簡便である。
から成る担体を水溶性有機溶媒中に浸漬したり、水溶性
有機溶媒を噴霧し、又は、スピナー等を用いて塗布する
ことにより行うことができる。処理は、水溶性有機溶媒
が液体である状態を維持できるいずれの温度でも行うこ
とができ、従って、室温で行うのが最も簡便である。
【００１０】処理後、ガラス繊維を乾燥させる。乾燥
は、水溶性有機溶媒の除去が達成されればよく、通常、
室温ないし１２０℃で３０秒ないし２０分間程度、好ま
しくは３０秒ないし１０分間程度行うことができる。ま
た、乾燥は乾燥機内で行ってもよいが、乾燥時間を１０
分間以下にするのであれば、室内で行ってもよい。
は、水溶性有機溶媒の除去が達成されればよく、通常、
室温ないし１２０℃で３０秒ないし２０分間程度、好ま
しくは３０秒ないし１０分間程度行うことができる。ま
た、乾燥は乾燥機内で行ってもよいが、乾燥時間を１０
分間以下にするのであれば、室内で行ってもよい。
【００１１】乾燥後、直ちに免疫活性物質を固相化す
る。乾燥後の担体を空気中に放置すると、空気中の水分
が再度担体表面に付着するので、できるだけ速やかに固
相化処理に移ることが好ましく、室内に放置する場合、
水性有機溶媒による処理から固相化処理までの時間は１
０分間以下が好ましく、さらに好ましくは５分間以下で
ある。なお、担体にリガンドを結合させる直前に水溶性
有機溶媒処理を行うことが好ましいが、水溶性有機溶媒
で処理したガラス繊維から成る担体を乾燥器内や真空包
装内に収容して湿気を遮断することにより、保存や輸送
が可能である。また、水溶性有機溶媒中に浸漬した状態
で保存や輸送を行うことも可能である。
る。乾燥後の担体を空気中に放置すると、空気中の水分
が再度担体表面に付着するので、できるだけ速やかに固
相化処理に移ることが好ましく、室内に放置する場合、
水性有機溶媒による処理から固相化処理までの時間は１
０分間以下が好ましく、さらに好ましくは５分間以下で
ある。なお、担体にリガンドを結合させる直前に水溶性
有機溶媒処理を行うことが好ましいが、水溶性有機溶媒
で処理したガラス繊維から成る担体を乾燥器内や真空包
装内に収容して湿気を遮断することにより、保存や輸送
が可能である。また、水溶性有機溶媒中に浸漬した状態
で保存や輸送を行うことも可能である。
【００１２】担体に固相化される免疫活性物質（以下、
「リガンド」ということがある）は、抗原抗体反応を行
うことができるあらゆる物質を意味し、抗原及び抗体の
みならず、それらの断片、例えばハプテンや抗体のFab
フラグメント、F(ab')2 フラグメント等をも包含する。
また、固相化は、リガンドを緩衝液中に溶解した溶液と
担体とを接触させることにより行うことができる。この
場合、固相化反応は、従来と同様、室温で１５分間〜２
時間程度、４℃なら一夜程度で行うことができる。ま
た、固相化に用いるリガンド溶液の濃度は、リガンドの
種類や測定すべき検体中の物質の種類や濃度に応じて適
宜選択することが可能であるが、通常０．５〜２００μ
ｇ／ｍｌ程度である。
「リガンド」ということがある）は、抗原抗体反応を行
うことができるあらゆる物質を意味し、抗原及び抗体の
みならず、それらの断片、例えばハプテンや抗体のFab
フラグメント、F(ab')2 フラグメント等をも包含する。
また、固相化は、リガンドを緩衝液中に溶解した溶液と
担体とを接触させることにより行うことができる。この
場合、固相化反応は、従来と同様、室温で１５分間〜２
時間程度、４℃なら一夜程度で行うことができる。ま
た、固相化に用いるリガンド溶液の濃度は、リガンドの
種類や測定すべき検体中の物質の種類や濃度に応じて適
宜選択することが可能であるが、通常０．５〜２００μ
ｇ／ｍｌ程度である。
【００１３】本発明の免疫測定用担体は、固相担体を用
いて行う免疫測定を行う方法のいずれにも用いることが
でき、これを用いた免疫測定方法自体は基本的に従来と
同様である。すなわち、本発明の免疫測定用担体には、
上記のようにリガンドを固相化する。このようなリガン
ドを本発明の免疫測定用担体に固相化したものは従来と
同様、例えばサンドイッチ法等に用いることができる。
いて行う免疫測定を行う方法のいずれにも用いることが
でき、これを用いた免疫測定方法自体は基本的に従来と
同様である。すなわち、本発明の免疫測定用担体には、
上記のようにリガンドを固相化する。このようなリガン
ドを本発明の免疫測定用担体に固相化したものは従来と
同様、例えばサンドイッチ法等に用いることができる。
【００１４】サンドイッチ法に用いる場合、従来と同
様、リガンドを固相化した本発明の担体を、カゼインや
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）等のタンパク質でブロッ
キング後、検体と反応させる。次いで、担体を洗浄後、
第２抗体を反応させ、洗浄後、固相に残っている第２抗
体を測定する。第２抗体の測定は、予め第２抗体を酵
素、蛍光色素、ビオチン、放射性物質等で標識してお
き、これらの標識を検出することにより行うことができ
る。なお、本発明の免疫測定用担体は、サンドイッチ法
に限らず、リガンドを固相化して用いるあらゆる免疫測
定に利用可能である。
様、リガンドを固相化した本発明の担体を、カゼインや
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）等のタンパク質でブロッ
キング後、検体と反応させる。次いで、担体を洗浄後、
第２抗体を反応させ、洗浄後、固相に残っている第２抗
体を測定する。第２抗体の測定は、予め第２抗体を酵
素、蛍光色素、ビオチン、放射性物質等で標識してお
き、これらの標識を検出することにより行うことができ
る。なお、本発明の免疫測定用担体は、サンドイッチ法
に限らず、リガンドを固相化して用いるあらゆる免疫測
定に利用可能である。
【００１５】下記実施例に具体的に示されるように、ガ
ラス繊維を水溶性有機溶媒で処理することにより、免疫
測定の感度が有意に上昇し、従って、同じ測定条件で同
程度の感度を達成するのに必要なリガンドの量を有意に
（例えば１／２〜１／１００に）減少させることができ
る。リガンドは高価であるので、リガンドの量を減少で
きることは大きな利点である。
ラス繊維を水溶性有機溶媒で処理することにより、免疫
測定の感度が有意に上昇し、従って、同じ測定条件で同
程度の感度を達成するのに必要なリガンドの量を有意に
（例えば１／２〜１／１００に）減少させることができ
る。リガンドは高価であるので、リガンドの量を減少で
きることは大きな利点である。
【００１６】水溶性有機溶媒による処理を行うことによ
り、なぜ免疫測定の感度が向上するのかは確認されてい
ないが、おそらく有機溶媒が蒸発する際に、ガラス繊維
の表面に付着している水が分離レベルで除去されるため
に、固相化できるリガンドの量が増大することに起因す
ると推測される。
り、なぜ免疫測定の感度が向上するのかは確認されてい
ないが、おそらく有機溶媒が蒸発する際に、ガラス繊維
の表面に付着している水が分離レベルで除去されるため
に、固相化できるリガンドの量が増大することに起因す
ると推測される。
【００１７】
【実施例】以下、実施例により、本発明をより具体的に
説明する。もっとも、本発明は下記実施例に限定される
ものではない。
説明する。もっとも、本発明は下記実施例に限定される
ものではない。
【００１８】実施例１ (1) ガラス繊維担体の処理 市販のガラス繊維メンブレン（アドバンテック社製ガラ
スファイバーメンブレンＧＡ１００、ガラス繊維の直径
は０．８μｍ〜１．５μｍ、目付重量は１１０ｇ／ｍ
2 、厚さは０．４５ｍｍ、サイズは３００ｍｍ×２００
ｍｍ）をイソプロパノール中に３０秒間浸漬し、室温で
５分間乾燥させた。直径６ｍｍのディスク状に切断し
て、自動免疫測定装置（協和メデックス社製ID-1000 ）
の反応容器内の担体として使用した。
スファイバーメンブレンＧＡ１００、ガラス繊維の直径
は０．８μｍ〜１．５μｍ、目付重量は１１０ｇ／ｍ
2 、厚さは０．４５ｍｍ、サイズは３００ｍｍ×２００
ｍｍ）をイソプロパノール中に３０秒間浸漬し、室温で
５分間乾燥させた。直径６ｍｍのディスク状に切断し
て、自動免疫測定装置（協和メデックス社製ID-1000 ）
の反応容器内の担体として使用した。
【００１９】(2) Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）コア抗
原の固相化 リガンドとして、アミノ酸４０個から成るＨＣＶコアペ
プチドを２５μｇ／ｍｌ又は１００μｇ／ｍｌの濃度に
０．０１Ｍ ＰＢＳ（ｐＨ７）で調製し、６０μｌを滴
下、室温で３０分間反応させた。続いて、８０μｌの市
販のブロッキング剤（商品名ブロックエース）の５０％
溶液及び５０％ヤギ血清（０．０１ＭＰＢＳ ｐＨ７で
希釈）を滴下、室温で３０分間反応させた。
原の固相化 リガンドとして、アミノ酸４０個から成るＨＣＶコアペ
プチドを２５μｇ／ｍｌ又は１００μｇ／ｍｌの濃度に
０．０１Ｍ ＰＢＳ（ｐＨ７）で調製し、６０μｌを滴
下、室温で３０分間反応させた。続いて、８０μｌの市
販のブロッキング剤（商品名ブロックエース）の５０％
溶液及び５０％ヤギ血清（０．０１ＭＰＢＳ ｐＨ７で
希釈）を滴下、室温で３０分間反応させた。
【００２０】(3) 免疫測定 他の測定法で抗ＨＣＶ抗体が陰性又は陽性である血清資
料を５０倍に希釈し、５０μｌを反応させた。反応は室
温で２分間行い、続いて洗浄液５０μｌで洗浄後、ペル
オキシダーゼ標識抗体希釈液５０μｌを滴下、室温で２
分間反応後、洗浄液８０μｌを２回滴下してＢＦ分離を
行った。ペルオキシダーゼの基質としてテトラメチルベ
ンジジン（ＴＭＢ）の溶液を３０μｌ滴下した。上記自
動免疫測定装置からΔｋ／ｓ値を得た。なお、Δｋ／ｓ
値は、協和メデックス社製ID-1000 により測定される値
であり、通常の免疫測定法における吸光度にほとんど完
全に対応している。従って、以下、Δｋ／ｓ値を「吸光
度」と記載する。結果を下記表１に示す。
料を５０倍に希釈し、５０μｌを反応させた。反応は室
温で２分間行い、続いて洗浄液５０μｌで洗浄後、ペル
オキシダーゼ標識抗体希釈液５０μｌを滴下、室温で２
分間反応後、洗浄液８０μｌを２回滴下してＢＦ分離を
行った。ペルオキシダーゼの基質としてテトラメチルベ
ンジジン（ＴＭＢ）の溶液を３０μｌ滴下した。上記自
動免疫測定装置からΔｋ／ｓ値を得た。なお、Δｋ／ｓ
値は、協和メデックス社製ID-1000 により測定される値
であり、通常の免疫測定法における吸光度にほとんど完
全に対応している。従って、以下、Δｋ／ｓ値を「吸光
度」と記載する。結果を下記表１に示す。
【００２１】比較例１ イソプロパノールによる処理を行わなかったことを除
き、実施例１と同じ操作を行った。結果を下記表１に示
す。
き、実施例１と同じ操作を行った。結果を下記表１に示
す。
【００２２】
【表１】
【００２３】表１に示されるように、陽性検体では、実
施例１の方が比較例１よりも有意に吸光度が高く、一
方、陰性検体では、むしろ実施例１の方が比較例１より
もやや吸光度が低くなっている。従って、実施例１の方
が比較例１よりも測定感度が有意に高い。また、リガン
ドの濃度が２５μｇ／ｍｌの場合の実施例１における陽
性検体の吸光度と、リガンド濃度１００μｇ／ｍｌの場
合の比較例１における陽性検体の吸光度がほとんど同じ
であるから、同程度の測定感度を得るために必要なリガ
ンドの量が、実施例１では比較例１の１／４でよい。
施例１の方が比較例１よりも有意に吸光度が高く、一
方、陰性検体では、むしろ実施例１の方が比較例１より
もやや吸光度が低くなっている。従って、実施例１の方
が比較例１よりも測定感度が有意に高い。また、リガン
ドの濃度が２５μｇ／ｍｌの場合の実施例１における陽
性検体の吸光度と、リガンド濃度１００μｇ／ｍｌの場
合の比較例１における陽性検体の吸光度がほとんど同じ
であるから、同程度の測定感度を得るために必要なリガ
ンドの量が、実施例１では比較例１の１／４でよい。
【００２４】実施例２ (1) ガラス繊維担体の処理 市販のガラス繊維メンブレン（ワットマン社製ガラスフ
ァイバーメンブレンＧＦ／Ｄ、目付重量は１２０ｇ／ｍ
2 、厚さは０．６８ｍｍ、サイズは１５０ｍｍ×１５０
ｍｍ）をアセトン中に６０秒間浸漬し、室温で３分間乾
燥させた。直径６ｍｍのディスク状に切断して、自動免
疫測定装置（協和メデックス社製ID-1000 ）の反応容器
内の担体として使用した。
ァイバーメンブレンＧＦ／Ｄ、目付重量は１２０ｇ／ｍ
2 、厚さは０．６８ｍｍ、サイズは１５０ｍｍ×１５０
ｍｍ）をアセトン中に６０秒間浸漬し、室温で３分間乾
燥させた。直径６ｍｍのディスク状に切断して、自動免
疫測定装置（協和メデックス社製ID-1000 ）の反応容器
内の担体として使用した。
【００２５】(2) ネイティブ梅毒抗原（ＴＰ）の固相
化 リガンドを滴下する前処理として、プロパノール２０μ
ｌを滴下、さらに純水を３０μｌ滴下した。リガンドと
して、ネイティブＴＰ抗原を１μｇ／ｍｌ又は１００μ
ｇ／ｍｌの濃度に０．０１Ｍ ＰＢＳ（ｐＨ７）で調製
し、６０μｌを滴下、室温で３０分間反応させた。続い
て、８０μｌの市販のブロッキング剤（商品名ブロック
エース）の５０％溶液及び５０％ヤギ血清（０．０１Ｍ
ＰＢＳｐＨ７で希釈）を滴下、室温で３０分間反応さ
せた。
化 リガンドを滴下する前処理として、プロパノール２０μ
ｌを滴下、さらに純水を３０μｌ滴下した。リガンドと
して、ネイティブＴＰ抗原を１μｇ／ｍｌ又は１００μ
ｇ／ｍｌの濃度に０．０１Ｍ ＰＢＳ（ｐＨ７）で調製
し、６０μｌを滴下、室温で３０分間反応させた。続い
て、８０μｌの市販のブロッキング剤（商品名ブロック
エース）の５０％溶液及び５０％ヤギ血清（０．０１Ｍ
ＰＢＳｐＨ７で希釈）を滴下、室温で３０分間反応さ
せた。
【００２６】(3) 免疫測定 免疫測定は実施例１と全く同様にして行った。結果を下
記表２に示す。
記表２に示す。
【００２７】比較例２ アセトンによる処理を行わなかったことを除き、実施例
２と同じ操作を行った。結果を下記表２に示す。
２と同じ操作を行った。結果を下記表２に示す。
【００２８】
【表２】
【００２９】表２に示されるように、陽性検体では、実
施例２の方が比較例２よりも有意に吸光度が高く、一
方、陰性検体では、実施例２の方が比較例２よりも吸光
度が低くなっている。従って、実施例２の方が比較例２
よりも測定感度が有意に高い。また、リガンドの濃度が
１μｇ／ｍｌの場合の実施例２における陽性検体の吸光
度と、リガンド濃度１００μｇ／ｍｌの場合の比較例２
における陽性検体の吸光度がほとんど同じであるから、
同程度の測定感度を得るために必要なリガンドの量が、
実施例２では比較例２の約１／１００でよい。
施例２の方が比較例２よりも有意に吸光度が高く、一
方、陰性検体では、実施例２の方が比較例２よりも吸光
度が低くなっている。従って、実施例２の方が比較例２
よりも測定感度が有意に高い。また、リガンドの濃度が
１μｇ／ｍｌの場合の実施例２における陽性検体の吸光
度と、リガンド濃度１００μｇ／ｍｌの場合の比較例２
における陽性検体の吸光度がほとんど同じであるから、
同程度の測定感度を得るために必要なリガンドの量が、
実施例２では比較例２の約１／１００でよい。
【００３０】
【発明の効果】本発明により、ガラス繊維を担体として
用いた新規な免疫測定用担体及びそれを用いたリガンド
の固相化方法が提供された。本発明によれば、ガラス繊
維を水溶性有機溶媒で処理することにより、この処理を
行わない場合に比較して免疫測定の感度が有意に高ま
り、また、同程度の測定感度を得るためには固相化する
リガンドの量を有意に減少できるという効果が奏され
る。また、マイクロタイタープレートのウェルやビーズ
を担体として用いる従来の免疫測定法と比較すると、本
発明によれば、従来よりも短い時間で免疫測定を行うこ
とができ、また、用いる洗浄液や検体の量も従来より少
なくすることができる。
用いた新規な免疫測定用担体及びそれを用いたリガンド
の固相化方法が提供された。本発明によれば、ガラス繊
維を水溶性有機溶媒で処理することにより、この処理を
行わない場合に比較して免疫測定の感度が有意に高ま
り、また、同程度の測定感度を得るためには固相化する
リガンドの量を有意に減少できるという効果が奏され
る。また、マイクロタイタープレートのウェルやビーズ
を担体として用いる従来の免疫測定法と比較すると、本
発明によれば、従来よりも短い時間で免疫測定を行うこ
とができ、また、用いる洗浄液や検体の量も従来より少
なくすることができる。
Claims (5)
- 【請求項１】 水溶性有機溶媒で処理した後、乾燥させ
たガラス繊維から成る免疫測定用担体。 - 【請求項２】 前記水溶性有機溶媒は、炭素数１〜４の
脂肪族アルコール又は脂肪族ケトンである請求項１記載
の免疫測定用担体。 - 【請求項３】 前記水溶性有機溶媒はプロパノール又は
アセトンである請求項２記載の免疫測定用担体。 - 【請求項４】 ガラス繊維から成るメンブレンの形態に
ある請求項１ないし３のいずれか１項に記載の免疫測定
用担体。 - 【請求項５】 請求項１ないし４のいずれか１項に記載
の免疫測定用担体と、免疫活性物質とを接触させて該免
疫活性物質を前記免疫測定用担体に固相化することから
成る、免疫測定用固相の調製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP36839697A JP3874520B2 (ja) | 1997-12-27 | 1997-12-27 | 免疫測定用担体及びそれを用いた免疫測定用固相の調製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP36839697A JP3874520B2 (ja) | 1997-12-27 | 1997-12-27 | 免疫測定用担体及びそれを用いた免疫測定用固相の調製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11194129A true JPH11194129A (ja) | 1999-07-21 |
| JP3874520B2 JP3874520B2 (ja) | 2007-01-31 |
Family
ID=18491712
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP36839697A Expired - Fee Related JP3874520B2 (ja) | 1997-12-27 | 1997-12-27 | 免疫測定用担体及びそれを用いた免疫測定用固相の調製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3874520B2 (ja) |
-
1997
- 1997-12-27 JP JP36839697A patent/JP3874520B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3874520B2 (ja) | 2007-01-31 |
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