JPH1087695A - 環状ペプチド化合物またはその塩の精製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】高純度の環状ペプチド化合物またはその塩を提
供することの可能な精製法を提供する。 【解決手段】式（Ｉ） 【化１】 〔式中、ＸおよびＹはそれぞれα−アミノ酸残基を、Ａ
はＤ−酸性−α−アミノ酸残基を、Ｂは中性−α−アミ
ノ酸残基を、ＣはＬ−α−アミノ酸残基を、Ｅは芳香環
基を有するＤ−α−アミノ酸残基を示す。〕で表される
環状ペプチド化合物またはその塩を有機溶媒の存在下に
結晶化し、ついで乾燥することを特徴とする環状ペプチ
ド化合物またはその塩の精製法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、エンドセリン受容
体拮抗作用およびNK2受容体拮抗作用を有し、高血圧治
療剤、心・脳循環疾患治療剤、腎疾患治療剤、喘息治療
剤、抗炎症剤、抗関節炎剤等として有用な環状ペプチド
化合物またはその塩の精製法に関する。

【０００２】

【従来の技術】式（Ｉ）

【化２】 〔式中、ＸおよびＹはそれぞれα−アミノ酸残基を、Ａ
はＤ−酸性−α−アミノ酸残基を、Ｂは中性−α−アミ
ノ酸残基を、ＣはＬ−α−アミノ酸残基を、Ｅは芳香環
基を有するＤ−α−アミノ酸残基を示す。〕で表される
環状ペプチド化合物（以下、単に化合物（Ｉ）と略記す
る）またはその塩は、エンドセリン受容体拮抗作用およ
びNK2受容体拮抗作用を有し、高血圧治療剤、心・脳循
環疾患治療剤、腎疾患治療剤、喘息治療剤、抗炎症剤、
抗関節炎剤等として有用であることが知られている（特
開平６−９６８９）。また、特開平７−８９８６８に
は、化合物（Ｉ）またはその塩、特にシクロ［Ｄ-α-ア
スパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-１-イル）
カルボニル］-Ｌ-アラニル-Ｌ-α-アスパルチル-Ｄ-２-
（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプトフ
ィル］二ナトリウム塩を製造し、ついで凍結乾燥により
溶液中から分離する方法が記載されている。しかしなが
ら、化合物（Ｉ）またはその塩を有機溶媒の存在下に結
晶化させる方法については知られていない。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】化合物（Ｉ）またはそ
の塩を活性成分として生体内に投与する場合、該活性成
分はできるだけ不純物を含まないものであることが望ま
しい。しかしながら、前述の方法、すなわち化合物
（Ｉ）またはその塩を凍結乾燥により溶液中から分離す
る方法では、十分な精製効果が得られない。したがっ
て、高純度の化合物（Ｉ）またはその塩を提供すること
の可能な精製法の開発が望まれている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明は、化合物（Ｉ）
またはその塩を有機溶媒の存在下に結晶化し、ついで乾
燥することを特徴とする環状ペプチド化合物またはその
塩の精製法；およびシクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-
［（４-フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ
-アラニル-Ｌ-α-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）
グリシル-Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプトフィル］二ナトリウ
ム塩の結晶に関する。

【０００５】式（Ｉ）において、Ｘ及びＹで表されるα
-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸はα-アミノ酸なら
ばどのようなアミノ酸でもよく、例えばアラニン、アル
ギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、
グルタミン、グルタミン酸、２-アミノマロン酸、２-ア
ミノアジピン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシ
ン、ロイシン、リジン、オルニチン、２,４-ジアミノ酪
酸、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、４-ヒ
ドロキシプロリン、チオプロリン、アゼチジン-２-カル
ボン酸、ピペコリン酸(ピペリジン-２-カルボン酸)、イ
ンドリン-２-カルボン酸、テトラヒドロイソキノリン-
３-カルボン酸、セリン、スレオニン、トリプトファ
ン、５-メチルトリプトファン、チロシン、バリン、ア
ロイソロイシン、ノルバリン、ノルロイシン、ｔｅｒｔ
-ロイシン、γ-メチルロイシン、フェニルグリシン、２
-アミノ酪酸、システイン酸、ホモシステイン酸、１-ナ
フチルアラニン、２-ナフチルアラニン、２-チエニルグ
リシン、３-チエニルグリシン、３-ベンゾチエニルアラ
ニン、４-ビフェニルアラニン、ペンタメチルフェニル
アラニン、１-アミノシクロプロパン-１-カルボン酸、
１-アミノシクロブタン-１-カルボン酸、１-アミノシク
ロペンタン-１-カルボン酸、１-アミノシクロヘキサン-
１-カルボン酸、１-アミノシクロヘプタン-１-カルボン
酸等が挙げられる。

【０００６】これらのα-アミノ酸に官能基、例えば水
酸基、チオール基、アミノ基、イミノ基、カルボキシル
基等がある場合、これらの官能基は適当な置換基で置換
されていてもよい。ここにおいて、置換された水酸基と
しては、例えばＣ_1-6アルカノイルオキシ（例えばホル
ミルオキシ、アセトキシ、プロピオニルオキシ等）、Ｃ
_4-9脂環状カルボニルオキシ（例えばシクロペンタンカ
ルボニルオキシ、シクロヘキサンカルボニルオキシ
等）、Ｃ_7-15アリールカルボニルオキシ（例えばベンゾ
イルオキシ、４-メチルベンゾイルオキシ等）、Ｃ_8-16
アラルキルカルボニルオキシ（例えばフェニルアセトキ
シ、２-フェニルプロピオニルオキシ、３-フェニルプロ
ピオニルオキシ、ジフェニルアセトキシ等）、芳香族複
素環-アルキルカルボニルオキシ（例えばインドール-２
-イルアセトキシ、インドール-３-イルアセトキシ
等）、Ｃ_1-6アルコキシ（例えばメトキシ、エトキシ、
ｎ−プロポキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ等）、Ｃ_3-8シク
ロアルコキシ（例えばシクロペンチルオキシ、シクロヘ
キシルオキシ等）、Ｃ_6-12アリールオキシ（例えばフェ
ニルオキシ、４-メチルフェニルオキシ等）、Ｃ_7-15ア
ラルキルオキシ（例えばベンジルオキシ、フェネチルオ
キシ、ジフェニルメトキシ等）等が挙げられる。

【０００７】置換された水酸基を有するα-アミノ酸と
しては、例えばＯ-アセチルセリン、Ｏ-アセチルスレオ
ニン、４-アセトキシプロリン、Ｏ-ベンゾイルセリン、
Ｏ-ベンゾイルスレオニン、４-ベンゾイルオキシプロリ
ン、Ｏ-フェニルアセチルセリン、Ｏ-フェニルアセチル
スレオニン、４-フェニルアセトキシプロリン、Ｏ-エチ
ルセリン、Ｏ-エチルスレオニン、４-エトキシプロリ
ン、Ｏ-シクロヘキシルセリン、Ｏ-シクロヘキシルスレ
オニン、４-シクロヘキシルオキシプロリン、Ｏ-フェニ
ルセリン、Ｏ-フェニルスレオニン、４-フェノキシプロ
リン、Ｏ-ベンジルセリン、Ｏ-ベンジルスレオニン、４
-ベンジルオキシプロリン、Ｏ-ジフェニルメチルセリ
ン、Ｏ-ジフェニルメチルスレオニン、４-ジフェニルメ
トキシプロリン等が挙げられる。

【０００８】置換されたチオール基としては、例えばＣ
_1-6アルカノイルチオ（例えばホルミルチオ、アセチル
チオ、プロピオニルチオ等）、Ｃ_4-9脂環状カルボニル
チオ（例えばシクロペンタンカルボニルチオ、シクロヘ
キサンカルボニルチオ等）、Ｃ_7-15アリールカルボニル
チオ（例えばベンゾイルチオ、４-メチルベンゾイルチ
オ等）、Ｃ_8-16アラルキルカルボニルチオ（例えばフェ
ニルアセチルチオ、２-フェニルプロピオニルチオ、３-
フェニルプロピオニルチオ、ジフェニルアセチルチオ
等）、Ｃ_1-6アルキルチオ（例えばメチルチオ、エチル
チオ、ｎ-プロピルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ等）、
Ｃ_3-8シクロアルキルチオ（例えばシクロペンチルチ
オ、シクロヘキシルチオ等）、Ｃ_6-12アリールチオ（例
えばフェニルチオ、４-メチルフェニルチオ等）、Ｃ
_7-15アラルキルチオエーテル（例えばベンジルチオ、フ
ェネチルチオ、ジフェニルメチルチオ等）等が挙げられ
る。置換されたチオール基を有するα-アミノ酸として
は、例えばＳ-アセチルシステイン、Ｓ-ベンゾイルシス
テイン、Ｓ-フェニルアセチルシステイン、Ｓ-エチルシ
ステイン、Ｓ-シクロヘキシルシステイン、Ｓ-フェニル
システイン、Ｓ-ベンジルシステイン等が挙げられる。

【０００９】置換されたアミノ基としては、例えばＣ
_1-6アルキルアミノ（例えばＮ-メチルアミノ、Ｎ-エチ
ルアミノ、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルアミノ等）、Ｃ_3-8シ
クロアルキルアミノ（例えばＮ-シクロペンチルアミ
ノ、Ｎ-シクロヘキシルアミノ等）、Ｃ_6-12アリールア
ミノ（例えばＮ-フェニルアミノ、Ｎ-｛４-メチルフェ
ニル｝アミノ等）、Ｃ_7-15アラルキルアミノ（例えばＮ
-ベンジルアミノ、Ｎ-フェネチルアミノ、Ｎ-｛２-クロ
ロベンジル｝アミノ、Ｎ-｛３-クロロベンジル｝アミ
ノ、Ｎ-｛４-クロロベンジル｝アミノ、Ｎ-｛２-メチル
ベンジル｝アミノ、Ｎ-｛３-メチルベンジル｝アミノ、
Ｎ-｛４-メチルベンジル｝アミノ、Ｎ-｛２-メトキシベ
ンジル｝アミノ、Ｎ-｛３-メトキシベンジル｝アミノ、
Ｎ-｛４-メトキシベンジル｝アミノ等）、芳香族複素環
-Ｃ_1-6アルキルアミノ（例えば２-フリルメチルアミ
ノ、３-フリルメチルアミノ、２-チエニルメチルアミ
ノ、３-チエニルメチルアミノ、インドール-２-イルメ
チルアミノ、インドール-３-イルメチルアミノ）；及び
置換されたアミド基として、Ｃ_1-6脂肪族アシルアミド
（例えばホルムアミド、アセトアミド、プロピオンアミ
ド等）、Ｃ_4-9脂環状アシルアミド（例えばシクロペン
タンカルボニルアミド、シクロヘキサンカルボニルアミ
ド等）、Ｃ_7-15アリールアシルアミド（例えばベンズア
ミド、４-メチルベンズアミド等）、Ｃ_8-16アラルキル
アシルアミド（例えばフェニルアセトアミド、２-フェニルフ゜
ロヒ゜オンアミト゛、3-フェニルプロピオンアミド、ジフェニルアセ
トアミド、１-ナフチルアセトアミド、２-ナフチルアセ
トアミド等）、芳香族複素環-カルボキサミド（例えば
インドール-２-イルカルボキサミド、インドール-３-イ
ルカルボキサミド等）、芳香族複素環-アルキルカルボ
キサミド（例えばインドール-２-イルアセトアミド、イ
ンドール-３-イルアセトアミド等）、スルホニルアミド
（例えばベンゼンスルホニルアミド、パラトルエンスル
ホニルアミド、４-メトキシ-２,３,６-トリメチルベン
ゼンスルホニルアミド等）等が挙げられる。

【００１０】置換されたアミノ基を有するα-アミノ酸
としては、例えばＮ-メチルグリシン(サルコシン)、Ｎ-
エチルグリシン、Ｎ-メチルロイシン、Ｎ-エチルロイシ
ン、Ｎ-メチルフェニルアラニン、Ｎ-エチルフェニルア
ラニン、Ｎ(α)-メチルトリプトファン、Ｎ(α)-エチル
トリプトファン、Ｎ-シクロペンチルグリシン、Ｎ-シク
ロヘキシルグリシン、Ｎ-フェニルグリシン、Ｎ-フェニ
ルロイシン、Ｎ-ベンジルグリシン、Ｎ-ベンジルロイシ
ン、Ｎ(π)-ベンジルヒスチジン、Ｎ(τ)-ベンジルヒス
チジン、Ｎ(π)-フェナシルヒスチジン、Ｎ(π)-ベンジ
ルオキシメチルヒスチジン、Ｎ^g-ベンゼンスルホニルア
ルギニン、Ｎ^g-パラトルエンスルホニルアルギニン、Ｎ
^g-(４-メトキシ-２,３,６-トリメチルベンゼンスルホニ
ル)アルギニン、Ｎ(ε)-ベンゼンスルホニルリジン、Ｎ
(ε)-パラトルエンスルホニルリジン、Ｎ(ε)-(４-メト
キシ-２,３,６-トリメチルベンゼンスルホニル)リジ
ン、Ｎⁱⁿ-メチルトリプトファン、Ｎⁱⁿ-エチルトリプト
ファン、Ｎⁱⁿ-ホルミルトリプトファン、Ｎⁱⁿ-アセチル
トリプトファン、Ｎ(ε)-ベンジルリジン、Ｎ(ε)-(２-
フリルメチル)リジン、Ｎ(ε)-(２-チエニルメチル)リ
ジン、Ｎ(ε)-(インドール-３-イルメチル)リジン、Ｎ
(ε)-フェニルアセチルリジン、Ｎ(ε)-(｛２-フリル｝
アセチル)リジン、Ｎ(ε)-(｛２-チエニル｝アセチル)
リジン、Ｎ(ε)-(｛インドール-３-イル｝アセチル)リ
ジン、Ｎ(ε)-ベンゾイルリジン、Ｎ(ε)-(３-フェニル
プロピオニル)リジン、Ｎ(δ)-ベンジルオルニチン、Ｎ
(δ)-(２-フリルメチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(２-チエ
ニルメチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(インドール-３-イル
メチル)オルニチン、Ｎ(δ)-ベンゾイルオルニチン、Ｎ
（δ）−フェニルアセチルオルニチン、Ｎ(δ)-(３-フ
ェニルプロピオニル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛２-メチル
フェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛３-メチル
フェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛４-メチル
フェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛２-クロロ
フェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛３-クロロ
フェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛４-クロロ
フェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛２-メトキ
シフェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛３-メト
キシフェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(｛４-メ
トキシフェニル｝アセチル)オルニチン、Ｎ(δ)-(４-ビ
フェニルアセチル)オルニチン、Ｎ(γ)-ベンジル-２,４
-ジアミノ酪酸、Ｎ(γ)-(２-フリルメチル)-２,４-ジア
ミノ酪酸、Ｎ(γ)-(２-チエニルメチル)-２,４-ジアミ
ノ酪酸、Ｎ(γ)-(インドール-３-イルメチル)-２,４-ジ
アミノ酪酸、Ｎ(γ)-ベンゾイル-２,４-ジアミノ酪酸、
Ｎ(γ)-フェニルアセチル-２,４-ジアミノ酪酸、Ｎ(γ)
-(３-フェニルプロピオニル)-２,４-ジアミノ酪酸、Ｎ
(γ)-(２-フリルアセチル)-２,４-ジアミノ酪酸、Ｎ
(γ)-(２-チエニルアセチル)-２,４-ジアミノ酪酸、Ｎ
(γ)-(｛インドール-３-イル｝アセチル)-２,４-ジアミ
ノ酪酸等が挙げられる。

【００１１】置換されたイミノ基における置換基は、そ
れぞれ上記した置換されたアミノ基又はアミド基の置換
基と同様の、Ｃ_1-6アルキル、Ｃ_3-8シクロアルキル、Ｃ
_6-12アリール、Ｃ_7-15アラルキル、芳香族複素環-Ｃ_1-6
アルキル等が挙げられる。

【００１２】置換されたカルボキシル基としては、例え
ばカルバモイル基(-CONH₂)、Ｃ_1-6アルキルカルバモイ
ル（例えばメチルカルバモイル、エチルカルバモイル、
ｎ-プロピルカルバモイル、ｔｅｒｔ−ブチルカルバモ
イル等）、Ｃ_3-8シクロアルキルカルバモイル（例えば
シクロペンチルカルバモイル、シクロヘキシルカルバモ
イル等）、Ｃ_6-12アリールカルバモイル（例えばフェニ
ルカルバモイル、｛４-メチルフェニル｝カルバモイル
等）、Ｃ_7-15アラルキルカルバモイル（例えばベンジル
カルバモイル、フェネチルカルバモイル、｛１,２-ジフ
ェニルエチル｝カルバモイル等）、｛芳香族複素環-Ｃ
_1-6アルキル｝カルバモイル（例えば[２-｛インドール-
２-イル｝エチル]カルバモイル、[２-｛インドール-３-
イル｝エチル]カルバモイル等）、ピペリジノカルボニ
ル、ピペラジンカルボニル、Ｎ⁴-Ｃ_1-6アルキルピペラ
ジンカルボニル（例えばＮ⁴-メチルピペラジンカルボニ
ル、Ｎ⁴-エチルピペラジンカルボニル等）、Ｎ⁴-Ｃ_3-8
シクロアルキルピペラジンカルボニル（例えばＮ⁴-シク
ロペンチルピペラジンカルボニル、Ｎ⁴-シクロヘキシル
ピペラジンカルボニル等）、Ｎ⁴-５ないし７員異項環ピ
ペラジンカルボニル（例えばＮ⁴-ピリジルピペラジンカ
ルボニル、Ｎ⁴-フリルピペラジンカルボニル、Ｎ⁴-チエ
ニルピペラジンカルボニル等）、Ｎ⁴-Ｃ_6-12アリールピ
ペラジンカルボニル（例えばＮ⁴-フェニルピペラジンカ
ルボニル、Ｎ⁴-｛４-メチルフェニル｝ピペラジンカル
ボニル等）、Ｎ⁴-Ｃ_7-15アラルキルピペラジンカルボニ
ル（例えばＮ⁴-ベンジルピペラジンカルボニル、Ｎ⁴-フ
ェネチルピペラジンカルボニル、Ｎ⁴-｛１,２-ジフェニ
ルエチル｝ピペラジンカルボニル等）、Ｎ⁴-｛芳香族複
素環-Ｃ_1-6アルキル｝ピペラジンカルボニル（例えばＮ
⁴-[２-｛インドール-２-イル｝エチル]ピペラジンカル
ボニル、Ｎ⁴-[２-｛インドール-３-イル｝エチル]ピペ
ラジンカルボニル等）、Ｎ⁴-Ｃ_1-6脂肪族アシルピペラ
ジンカルボニル（例えばＮ⁴-アセチルピペラジンカルボ
ニル、Ｎ⁴-プロピオニルピペラジンカルボニル等）、Ｎ
⁴-Ｃ_4-9脂環状アシルピペラジンカルボニル（例えばＮ⁴
-シクロペンタンカルボニルピペラジンカルボニル、Ｎ⁴
-シクロヘキサンカルボニルピペラジンカルボニル
等）、Ｎ⁴-Ｃ_7-15アリールアシルピペラジンカルボニル
（例えばＮ⁴-ベンゾイルピペラジンカルボニル、Ｎ⁴-
｛４-メチルベンゾイル｝ピペラジンカルボニル等）、
Ｎ⁴-Ｃ_8-16アラルキルアシルピペラジンカルボニル（例
えばＮ⁴-フェニルアセチルピペラジンカルボニル、Ｎ⁴-
｛２-フェニルプロピオニル｝ピペラジンカルボニル、
Ｎ⁴-｛３-フェニルプロピオニル｝ピペラジンカルボニ
ル、Ｎ⁴-ジフェニルアセチルピペラジンカルボニル、Ｎ
⁴-｛１-ナフチルアセチル｝ピペラジンカルボニル、Ｎ⁴
-｛２-ナフチルアセチル｝ピペラジンカルボニル等）、
Ｎ⁴-｛芳香族複素環-カルボニル｝ピペラジンカルボニ
ル（例えばＮ⁴-｛インドール-２-イルカルボニル｝ピペ
ラジンカルボニル、Ｎ⁴-｛インドール-３-イルカルボニ
ル｝ピペラジンアミド等）、Ｎ⁴-｛芳香族複素環-アル
キルカルボニル｝ピペラジンカルボニル（例えばＮ⁴-
｛インドール-２-イルアセチル｝ピペラジンカルボニ
ル、Ｎ⁴-｛インドール-３-イルアセチル｝ピペラジンカ
ルボニル等）、Ｃ_1-6アルコキシカルボニル（例えばメ
トキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ-プロポキ
シカルボニル等）、Ｃ_3-8シクロアルキルオキシカルボ
ニル（例えばシクロペンチルオキシカルボニル、シクロ
ヘキシルオキシカルボニル等）、Ｃ_7-15アラルキルオキ
シカルボニル（例えばベンジルオキシカルボニル、フェ
ネチルオキシカルボニル、１-フェニルエトキシカルボ
ニル、ジフェニルメトキシカルボニル等）等が挙げられ
る。上記したカルバモイル基の中にはα-アミノ酸との
アミドやオリゴペプチド（例えばジペプチド、トリペプ
チド、テトラペプチド等）とのアミドも含まれる。

【００１３】置換されたカルボキシル基を有するα-ア
ミノ酸としては、例えばＮ⁴-メチルアスパラギン、Ｎ⁴-
フェニルアスパラギン、Ｎ⁴-ベンジルアスパラギン、Ｎ
⁴-フェネチルアスパラギン、Ｎ⁴-(２-｛インドール-３-
イル｝エチル)アスパラギン、Ｎ⁵-メチルグルタミン、
Ｎ⁵-フェニルグルタミン、Ｎ⁵-ベンジルグルタミン、Ｎ
⁵-フェネチルグルタミン、Ｎ⁵-(２-｛インドール-３-イ
ル｝エチル)グルタミン、アスパラギン酸 β-メチルエ
ステル、アスパラギン酸 β-シクロプロピルエステル、
アスパラギン酸 β-ベンジルエステル、アスパラギン酸
β-フェネチルエステル、アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-フェ
ニルピペラジンアミド、アスパラギン酸β-Ｎ⁴-(２-メ
チルフェニル)ピペラジンアミド、アスパラギン酸 β-
Ｎ⁴-(３-メチルフェニル)ピペラジンアミド、アスパラ
ギン酸 β-Ｎ⁴-(４-メチルフェニル)ピペラジンアミ
ド、アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-(２-メトキシフェニル)ピ
ペラジンアミド、アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-(３-メトキシ
フェニル)ピペラジンアミド、アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-
(４-メトキシフェニル)ピペラジンアミド、アスパラギ
ン酸 β-Ｎ⁴-(２-クロロフェニル)ピペラジンアミド、
アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-(３-クロロフェニル)ピペラジ
ンアミド、アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-(４-クロロフェニ
ル)ピペラジンアミド、アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-(４-ニ
トロフェニル)ピペラジンアミド、アスパラギン酸 β-
Ｎ⁴-(４-フルオロフェニル)ピペラジンアミド、アスパ
ラギン酸 β-Ｎ⁴-(３-トリフルオロメチルフェニル)ピ
ペラジンアミド、アスパラギン酸 β-Ｎ⁴-(２,３-ジメ
チルフェニル)ピペラジンアミド、アスパラギン酸 β-
Ｎ⁴-(２-ピリジル)ピペラジンアミド、アスパラギン酸
β-Ｎ⁴-(２-ヒ゜リミシ゛ル)ピペラジンアミド、グルタミン酸 γ
-メチルエステル、グルタミン酸 γ-シクロプロピルエ
ステル、グルタミン酸 γ-ベンジルエステル、グルタミ
ン酸 γ-フェネチルエステル等が挙げられる。

【００１４】式（Ｉ）において、Ｘ及びＹで表されるα
-アミノ酸残基の母体となるα-アミノ酸はＤ体、Ｌ体、
ＤＬ体のいずれでもよいが、Ｘ、ＹのいずれもＬ体がよ
り好ましい。Ｙとしては、アスパラギン酸、グルタミン
酸、アラニン、プロリン、ロイシン及びトリプトファン
からなる群から選ばれるアミノ酸残基が好ましく、とり
わけＬ-アスパラギン酸残基が好ましい。

【００１５】Ｘとしては、好ましくは次の式

【化３】 で表される基を示し、ここにおいて、Ｇは部分構造式

【化４】 （式中、Ｘ¹及びＸ²はそれぞれ水素原子、Ｃ_1-6アルキ
ル基、Ｃ_1-6アルコキシ基、ハロゲン原子又はニトロ基
を示し、

【化５】 はＸ¹及びＸ²とが結合して環を形成してもよいことを示
す。）で表される基を示す。Ｘ¹及びＸ²で表されるＣ
_1-6アルキル基としては、例えばメチル、エチル、ｎ−
プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ
ｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル等が用い
られ、特にメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピ
ル等のＣ_1-3アルキル基等が好ましく、中でもメチルが
好ましい。Ｘ¹及びＸ²で表されるＣ_1-6アルコキシ基と
しては、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、
ｎ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキ
シ等が用いられ、特にメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポ
キシ等のＣ_1-3アルコキシ基等が好ましく、中でもメト
キシ、エトキシが好ましい。Ｘ¹及びＸ²で表されるハロ
ゲン原子としては、例えばフッ素、塩素、臭素、ヨウ素
等が用いられ、特に塩素が好ましい。

【００１６】Ｘ¹とＸ²とが結合して環を形成する場合、
Ｇは、式

【化６】 で表される基が好ましい。環Ｑとしては、例えばＯ，
Ｎ，Ｓ等のヘテロ原子を１ないし３個程度含んでいても
よい４ないし７員環（非芳香族炭素環、芳香族炭素環な
どの環状炭化水素基、非芳香族複素環、芳香族複素環な
どの複素環基等）等が用いられる。環Ｑの内、環状炭化
水素基としては、例えばシクロプロピル、シクロブチ
ル、シクロペンチル、シクロヘキシル等の炭素数３ない
し８のシクロアルキル基、例えばシクロプロペニル、１
−シクロペンテニル、２−シクロペンテニル、３−シク
ロペンテニル、１−シクロヘキセニル、２−シクロヘキ
セニル、３−シクロヘキセニル等の炭素数３ないし８の
シクロアルケニル基、例えばフェニル、１−又は２−ナ
フチル、１−，２−又は９−アントリル、１−，２−，
３−，４−又は９−フェナントリル、１−，２−，４
−，５−又は６−アズレニル等の炭素数６ないし１４の
アリール基等が用いられる。

【００１７】環Ｑの内、複素環基としては、例えば２−
又は３−チエニル、２−又は３−フリル、２−又は３−
ピロリル、２−、４−又は５−オキサジリル、２−、４
−又は５−チアゾリル、３−、４−又は５−ピラゾリ
ル、２−、４−又は５−イミダゾリル、３−、４−又は
５−イソオキサゾリル、３−、４−又は５−イソチアゾ
リル、３−又は５−（１,２,４−オキサジアゾリル）、
１,３,４−オキサジアゾリル、３−又は５−（１,２,４
−チアジアゾリル）、１,２,５−チアジアゾリル、１,
２,３−トリアゾリル、１,２,４−トリアゾリル、１Ｈ
−又は２Ｈ−テトラゾリル等の炭素原子以外に酸素原
子、硫黄原子、窒素原子等から選ばれたヘテロ原子を１
ないし４個含む５員環基；例えば２−、３−又は４−ピ
リジル、Ｎ−オキシド−２−、３−又は４−ピリジル、
２−、４−又は５−ピリミジニル、Ｎ−オキシド−２
−、４−又は５−ピリミジニル、チオモルホリニル、モ
ルホリニル、オキソイミダジニル、ジオキソトリアジニ
ル、ピロリジニル、ピペラジニル、ピラニル、チオピラ
ニル、１,４−オキサジニル、１,４−チアジニル、１,
３−チアジニル、ピペラジニル、トリアジニル、オキソ
トリアジニル、３−又は４−ピリダジニル、ピラジニ
ル、Ｎ−オキシド−３−又は４−ピリダジニル等の炭素
原子以外に酸素原子、硫黄原子、窒素原子等から選ばれ
たヘテロ原子を１ないし４個含む６員環基；例えばベン
ゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、テ
トラゾロ〔１,５−ｂ〕ピリダジニル、トリアゾロ〔４,
５−ｂ〕ピリダジニル、ベンゾイミダゾリル、キノリ
ル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナ
ゾリニル、キノキサリニル、インドリジニル、キノリジ
ニル、１,８−ナフチリジニル、プリニル、プテリジニ
ル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、アクリジニル、
フェナントリジニル、クロマニル、ベンゾオキサジニ
ル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニ
ル等の炭素原子以外に酸素原子、硫黄原子、窒素原子等
から選ばれたヘテロ原子を１ないし４個含む２環性又は
３環性縮合環基；などの５ないし８員環又はその縮合環
等が用いられる。

【００１８】上記したものの中でも、Ｇは式

【化７】 （Ｘ³は水素原子、Ｃ_1-6アルキル基、Ｃ_1-6アルコキシ
基、ハロゲン原子又はニトロ基を示す。）で表される基
が好ましい。その具体例を挙げれば、例えば

【化８】 等であり、とりわけ

【化９】 が好ましい。即ち、Ｘとしてはアスパラギン酸β−４−
フェニルピペラジンアミド残基が最も好ましい。また、
Ｇには、Ｄ体、Ｌ体、ＤＬ体のいずれも含まれるが、中
でもＬ体が好ましい。

【００１９】式（Ｉ）において、Ａで表されるＤ-酸性-
α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、例え
ば側鎖にカルボキシル基、スルホニル基又はテトラゾリ
ル基のような酸性基を有するアミノ酸が挙げられる。そ
の具体例としては、Ｄ-グルタミン酸、Ｄ-アスパラギン
酸、Ｄ-システイン酸、Ｄ-ホモシステイン酸、Ｄ-β-
(５-テトラゾリル)アラニン、Ｄ-２-アミノ-４-(５-テ
トラゾリル)酪酸等が挙げられるが、特にＤ-グルタミン
酸、Ｄ-アスパラギン酸、Ｄ-システイン酸が好ましい。
Ａとしては、Ｄ-アスパラギン酸残基が最も好ましい。

【００２０】式（Ｉ）において、Ｂで表される中性-α-
アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、例えばア
ラニン、バリン、ノルバリン、 ロイシン、イソロイシ
ン、アロイソロイシン、ノルロイシン、ｔｅｒｔ-ロイ
シン、γ-メチルロイシン、フェニルグリシン、フェニ
ルアラニン、１-ナフチルアラニン、２-ナフチルアラニ
ン、プロリン、４-ヒドロキシプロリン、アゼチジン-２
-カルボン酸、ピペコリン酸(ピペリジン-２-カルボン
酸)、２-チエニルアラニン、２-チエニルグリシン、３-
チエニルグリシン、１-アミノシクロプロパン-１-カル
ボン酸、１-アミノシクロブタン-１-カルボン酸、１-ア
ミノシクロペンタン-１-カルボン酸、１-アミノシクロ
ヘキサン-１-カルボン酸、１-アミノシクロヘプタン-１
-カルボン酸、２-シクロペンチルグリシン、２-シクロ
ヘキシルグリシン等のα-アミノ酸が挙げられる。上記
の中性-α-アミノ酸にＬ体とＤ体が存在する場合はＤ体
の方が好ましい。中でも、Ｃ_1-6アルキル基、Ｃ_5-7シク
ロアルケニル基、Ｃ_7-11アラルキル基、Ｃ_6-10アリール
基、Ｃ_1-6アルコキシ基又はＣ_1-6アルカノイル基で置換
されていてもよい酸素原子、硫黄原子及び窒素原子から
選ばれたヘテロ原子を１ないし４個含む５又は６員複素
環基を有していてもよいＤ-中性−α-アミノ酸残基が好
ましく、とりわけＤ-ロイシン、Ｄ-アロイソロイシン、
Ｄ-ｔｅｒｔ-ロイシン、Ｄ-γ-メチルロイシン、Ｄ-フ
ェニルグリシン、Ｄ-２-チエニルアラニン、Ｄ-２-チエ
ニルグリシン、Ｄ-３-チエニルグリシン、Ｄ-２-シクロ
ペンチルグリシン、Ｄ-フェニルアラニン、Ｄ-２-チエ
ニルアラニン、Ｄ-バリン、Ｄ-２-フリルグリシン、Ｄ-
３-フリルグリシン残基がより好ましい。Ｂとしては、
Ｄ-２−チエニルグリシン残基が最も好ましい。これら
の中性-α-アミノ酸のα-アミノ基はＣ_1-6アルキル基
（例えばメチル、エチル、ｎ-プロピル、ｔｅｒｔ-ブチ
ル等）で置換されていてもよい。このような中性-α-ア
ミノ酸としては、例えばＮ-メチルロイシン、Ｎ-メチル
アロイソロイシン、Ｎ-メチル-ｔｅｒｔ-ロイシン、Ｎ-
メチル-γ-メチルロイシン、Ｎ-メチルフェニルグリシ
ン等が挙げられ、これらもＤ体の方が好ましい。

【００２１】式（Ｉ）において、Ｃで表されるＬ-α-ア
ミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、例えばグリ
シン、Ｌ-アラニン、Ｌ-バリン、Ｌ-ノルバリン、Ｌ-ロ
イシン、Ｌ-イソロイシン、Ｌ-ｔｅｒｔ-ロイシン、Ｌ-
ノルロイシン、Ｌ-メチオニン、Ｌ-２-アミノ酪酸、Ｌ-
セリン、Ｌ-スレオニン、Ｌ-フェニルアラニン、Ｌ-ア
スパラギン酸、Ｌ-グルタミン酸、Ｌ-アスパラギン、Ｌ
-グルタミン、Ｌ-リジン、Ｌ-トリプトファン、Ｌ-アル
ギニン、Ｌ-チロシン、Ｌ-プロリン等、通常一般に知ら
れているＬ-α-アミノ酸が挙げられ、特にＬ-ロイシ
ン、Ｌ-ノルロイシン、Ｌ-トリプトファンが好ましい。
ＣとしてはＬ-ロイシン残基が最も好ましい。これらの
Ｌ-α-アミノ酸のα-アミノ基はＣ_1-6アルキル基（例え
ばメチル、エチル、ｎ-プロピル、ｔｅｒｔ-ブチル等）
で置換されていてもよい。このようなＬ-α-アミノ酸と
しては、例えばＬ-Ｎ-メチルロイシン、Ｌ-Ｎ-メチルノ
ルロイシン、Ｌ-Ｎ(α)-メチルトリプトファン等が挙げ
られる。

【００２２】式（Ｉ）において、Ｅで表される芳香環基
を有するＤ-α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸とし
ては、例えば側鎖に芳香環基を有するＤ-α-アミノ酸が
挙げられる。その具体例としては、Ｄ-トリプトファ
ン、Ｄ-５-メチルトリプトファン、Ｄ-フェニルアラニ
ン、Ｄ-チロシン、Ｄ-１-ナフチルアラニン、Ｄ-２-ナ
フチルアラニン、Ｄ-３-ベンゾチエニルアラニン、Ｄ-
４-ビフェニルアラニン、Ｄ-ペンタメチルフェニルアラ
ニン等が挙げられ、Ｄ-トリプトファン、Ｄ-５-メチル
トリプトファンが好ましい。中でもＤ-トリプトファン
がより好ましい。これらの芳香環を有するＤ-α-アミノ
酸のα-アミノ基はＣ_1-6アルキル基（例えばメチル、エ
チル、ｎ-プロピル、ｔｅｒｔ-ブチル等）で置換されて
いてもよく、また、Ｄ-トリプトファンのインドール環
のアミノ基はＣ_1-6アルキル（例えばメチル、エチル、
ｎ-プロピル、ｔｅｒｔ-ブチル等）、Ｃ_3-8シクロアル
キル（例えばシクロペンチル、シクロヘキシル等）、Ｃ
_6-12アリール（例えばフェニル、４-メチルフェニル
等）、Ｃ_7-15アラルキル（例えばベンジル、フェネチル
等）等の炭化水素基やＣ_1-6脂肪族アシル（好ましくは
Ｃ_1-6アルカノイル）（例えばホルミル、アセチル、プ
ロピオニル等）、Ｃ_4-9脂環状アシル（好ましくはＣ_5-7
シクロアルキルカルボニル）（例えばシクロペンタンカ
ルボニル、シクロヘキサンカルボニル等）、Ｃ_7-15アリ
ールアシル（好ましくはＣ_6-12アリールカルボニル）
（例えばベンゾイル、４-メチルベンゾイル等）、Ｃ
_8-16アラルキルアシル（好ましくはＣ_6-12アリール−Ｃ
_2-4アルカノイル）（例えばフェニルアセチル、２-フェ
ニルプロピオニル、３-フェニルプロピオニル、ジフェ
ニルアセチル等）、Ｃ_1-6アルコキシカルボニル（例え
ばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル等）等のア
シル基で置換されていてもよい。このようなα-アミノ
酸としては、例えばＤ-Ｎ(α)-メチルトリプトファン、
Ｄ-Ｎ-メチルフェニルアラニン、Ｄ-Ｎ-メチルチロシ
ン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-メチルトリプトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-エチルト
リプトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-ホルミルトリプトファン、Ｄ-
Ｎⁱⁿ-アセチルトリプトファン等が挙げられる。中でも
Ｄ-Ｎⁱⁿ-メチルトリプトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-ホルミルトリ
プトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-アセチルトリプトファンがより好
ましい。Ｅは、好ましくはＤ-トリプトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ
-メチルトリプトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-ホルミルトリプトフ
ァン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-アセチルトリプトファン、Ｄ-１-ナフチ
ルアラニン、Ｄ-２-ナフチルアラニン、Ｄ-３-ベンゾチ
エニルアラニン、Ｄ-４-ビスフェニルアラニン及びＤ-
ペンタメチルフェニルアラニン残基からなる群から選ば
れる基である。Ｅとしては、Ｄ-トリプトファン残基が
最も好ましい。

【００２３】化合物（Ｉ）の好ましい具体例は次のよう
なものである。ＡがＤ-グルタミン酸、Ｄ-アスパラギン
酸及びＤ-システイン酸残基からなる群から選ばれる
基；ＸがＬ-α-アミノ酸残基；ＹがＬ-α-アミノ酸残
基；ＢがＤ-ロイシン、Ｄ-アロイソロイシン、Ｄ-ｔｅ
ｒｔ-ロイシン、Ｄ-γ-メチルロイシン、Ｄ-フェニルグ
リシン、Ｄ-２-チエニルグリシン、Ｄ-３-チエニルグリ
シン、Ｄ-２-シクロペンチルグリシン、Ｄ-フェニルア
ラニン、Ｄ-２-チエニルアラニン、Ｄ-バリン、Ｄ-２-
フリルグリシン及びＤ-３-フリルグリシン残基からなる
群から選ばれる基；ＣがＬ-ロイシン、Ｌ-ノルロイシン
及びＬ-トリプトファン残基からなる群から選ばれる
基；ＥがＤ-トリプトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-メチルトリプト
ファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-ホルミルトリプトファン、Ｄ-Ｎⁱⁿ-ア
セチルトリプトファン、Ｄ-１-ナフチルアラニン、Ｄ-
２-ナフチルアラニン、Ｄ-３-ベンゾチエニルアラニ
ン、Ｄ-４-ビフェニルアラニン及びＤ-ペンタメチルフ
ェニルアラニン残基からなる群から選ばれる基である。

【００２４】化合物（Ｉ）のさらに好ましい具体例は次
のようなものである。ＡがＤ-アスパラギン酸残基；Ｘ
がＬ-（β-４-フェニルピペラジンアミド）アスパラギ
ン酸残基；ＹがＬ-アスパラギン酸残基；ＢがＤ-ロイシ
ン、Ｄ-γ−メチルロイシン、Ｄ-２-チエニルグリシン
若しくはＤ-３-チエニルグリシン残基；ＣがＬ-ロイシ
ン、Ｌ-ノルロイシン及びＬ-トリプトファン残基からな
る群から選ばれる基；及びＥがＤ-トリプトファン残基
である。化合物（Ｉ）は、特に好ましくはシクロ［Ｄ-
α-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-１-イ
ル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-Ｌ-α-アスパルチル-Ｄ
-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプ
トフィル］である。

【００２５】化合物（Ｉ）の塩としては、薬学的に許容
される塩が挙げられる。このような塩としては、例えば
無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機
酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩等が挙げら
れる。無機塩基との塩の好適な例としては、例えばナト
リウム、カリウム等のアルカリ金属；カルシウム、マグ
ネシウム等のアルカリ土類金属；アルミニウム、アンモ
ニウム等との塩が挙げられる。有機塩基との塩の好適な
例としては、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミ
ン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノ
ールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシル
アミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン等との
塩が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、例
えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等との塩が
挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、例えば
ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマール酸、シュウ
酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ
酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トル
エンスルホン酸等との塩が挙げられる。塩基性アミノ酸
との塩の好適な例としては、例えばアルギニン、リジ
ン、オルニチン等との塩が挙げられる。酸性アミノ酸と
の塩の好適な例としては、例えばアスパラギン酸、グル
タミン酸等との塩が挙げられる。化合物（Ｉ）の塩は、
好ましくは金属塩であり、さらに好ましくはナトリウム
塩である。

【００２６】化合物（Ｉ）またはその塩は、特に好まし
くはシクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-［（４-フェニル
ピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-Ｌ-α
-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロ
イシル-Ｄ-トリプトフィル］二ナトリウム塩（以下、化
合物Ａと略する）である。化合物（Ｉ）またはその塩
は、例えば特開平６−９６８９、特開平７−８９８６８
に記載の方法又はこれに準ずる方法により製造すること
ができ、またペプチド合成の常套手段で製造しうる。

【００２７】本発明の精製法は、化合物（Ｉ）またはそ
の塩を有機溶媒の存在下に結晶化し、ついで乾燥するこ
とにより行われる。有機溶媒は、化合物（Ｉ）またはそ
の塩に悪影響を及ぼさず、化合物（Ｉ）またはその塩を
溶解しにくいものであれば特に制限されない。該有機溶
媒としては、例えばアルコール類（例、メチルアルコー
ル、エチルアルコール、n-プロピルアルコール、イソプ
ロピルアルコール、エチレングリコール等のＣ_1-6アル
コール）、ケトン類（例、アセトン、メチルエチルケト
ン、メチルイソブチルケトン等のＣ_3-7ケトン）、エー
テル類（例、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテ
ル、tert-ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラ
ン、モノメチルエーテル等）、エステル類（例、酢酸エ
チル、酢酸ブチル等）、芳香族炭化水素類（例、ベンゼ
ン、トルエン、キシレン、メチルナフタレン等）、脂肪
族炭化水素類（例、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン
等）、ハロゲン化炭化水素類（例、クロロホルム、ジク
ロロメタン、四塩化炭素、１,２−ジクロロエタン
等）、ニトリル類（例、アセトニトリル、プロピオニト
リル等）、アミド類（例、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミ
ド、Ｎ,Ｎ−ジメチルアセトアミド等）等が挙げられ
る。これらの有機溶媒は、適宜の割合で混合して用いて
もよい。有機溶媒は、好ましくはアルコール類であり、
さらに好ましくはＣ_1-3アルコール、特に好ましくはエ
タノールである。有機溶媒としてアルコール類を用いる
場合、工程で設備機器等から発熱性物質等の不純物が混
入しても、該不純物を後述のろ過操作時に除去できると
いう利点がある。有機溶媒の使用量は、特に制限されな
いが、例えば化合物（Ｉ）またはその塩１重量部に対
し、例えば５から５０重量部、好ましくは１０から２０
重量部である。

【００２８】結晶化は、具体的には、化合物（Ｉ）また
はその塩を少量の水性溶媒に溶解し、ついで、前述の有
機溶媒を添加することにより行われる。水性溶媒は、化
合物（Ｉ）またはその塩に悪影響を及ぼさず、化合物
（Ｉ）またはその塩を溶解するものであれば特に制限さ
れない。該水性溶媒としては、例えば水またはアルコー
ル類（例、メチルアルコール、エチルアルコール、n-プ
ロピルアルコール、イソプロピルアルコール等のＣ_1-6
アルコール）が挙げられる。これらの水性溶媒は、適宜
の割合で混合して用いてもよい。水性溶媒は、好ましく
は水またはＣ_1-3アルコール、特に好ましくは水または
エタノールである。水性溶媒の使用量は、特に制限され
ないが、化合物（Ｉ）またはその塩１重量部に対し、例
えば０．３から３重量部、好ましくは０．４から１重量
部である。結晶化の際の温度は、例えば０〜４０℃、好
ましくは１５〜２５℃である。結晶化に要する時間は、
例えば約５分から４８時間程度、好ましくは１から２４
時間である。結晶化工程において、結晶化を促進するこ
とを目的として、化合物（Ｉ）またはその塩を水性溶媒
に溶解して得られる溶液に、あらかじめ単離した化合物
（Ｉ）またはその塩の結晶を種晶として添加してもよ
い。

【００２９】結晶化により得られる結晶は、水または上
記した有機溶媒と溶媒和物を形成していてもよい。この
ようにして得られる結晶は、ろ過操作等により分離す
る。該ろ過操作は、慣用の方法にしたがって行えばよ
い。ついで、分離した結晶を乾燥し、該結晶に含まれる
有機溶媒および水を除去する。この際、結晶が非晶質の
粉末に変化する。乾燥操作は、慣用の方法にしたがって
行えばよい。このような方法としては、具体的には、凍
結乾燥、減圧乾燥、通気乾燥およびこれらの組み合わせ
等が挙げられ、なかでも凍結乾燥および通気乾燥が好ま
しい。例えば、通気乾燥は、不活性ガスを通気すること
により行われる。該不活性ガスの種類は、特に制限され
ないが、例えば空気、窒素、ヘリウム等、好ましくは窒
素である。また、不活性ガスとして、湿度調節した不活
性ガスを用いることが好ましい。この際、湿度調節は、
化合物（Ｉ）またはその塩が潮解しない範囲であれば特
に制限されないが、相対湿度が、例えば１０％から６０
％、好ましくは３５％から４５％となるように行う。不
活性ガスの流量は、特に制限されないが、空間速度で50
0［時^-1］から5000［時^-1］、好ましくは1000［時^-1］
から3000［時^-1］である。不活性ガスの通気温度は、特
に制限されないが、１０℃から５０℃、好ましくは２５
℃から３５℃である。不活性ガスの通気時間は、特に制
限されないが、例えば５時間から５０時間、好ましくは
１５時間から３０時間である。

【００３０】化合物（Ｉ）またはその塩を注射用の原薬
として供する場合は、残留有機溶媒を数百ppm程度にま
で減少させる必要がある。そこで、本発明の精製工程に
おいて、乾燥工程を、湿度調節した不活性ガスの通気に
より行うことにより、残留有機溶媒を数十ppm程度にま
で除去できる。

【００３１】乾燥操作において、減圧乾燥を行う場合、
得られる非晶質の粉末を、さらに適当な量の水に溶解
し、凍結乾燥することにより、残留有機溶媒を数十ppm
程度にまで除去することができる。さらに、乾燥操作よ
り、有機溶媒を十分に除去した後、実質上水分を含まな
い不活性ガスを通気することにより、残留した水分を数
％程度にまで除去できる。ここにおいて、不活性ガスの
種類、不活性ガスの流量、通気温度、通気時間は、前記
した不活性ガスの場合と同様である。

【００３２】前述のように、結晶を乾燥して得られる非
晶質の粉末は、発熱性物質（パイロジェン）等の不純物
を実質的に含まない。また、該粉末は、静電気を帯びに
くく、比容が小さいために、飛散性に乏しい等の優れた
操作性を有する。したがって、例えば計量時、バイアル
充填時等に扱いやすい。

【００３３】本発明は、さらに化合物Ａの結晶に関す
る。該結晶は、水または上記した有機溶媒と溶媒和物を
形成していてもよい。化合物Ａの結晶は、エタノールの
共存下で、例えば第１図に示すような形状を有し、第２
図に示すような粉末Ｘ線回折スペクトルを有する。ま
た、化合物Ａの結晶を乾燥して得られる非晶質の粉末
は、例えば第３図に示すような形状を有し、第４図に示
すような粉末Ｘ線回折スペクトルを有する。化合物Ａの
結晶は、発熱性物質等の不純物を実質的に含まない。ま
た、該結晶は、優れた操作性を有する非晶質の粉末を製
造するための原料として有用である。

【００３４】化合物（Ｉ）またはその塩は、低毒性であ
り、哺乳動物（例えばヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、
サル、ウサギ、マウス、ラット等）に対し、エンドセリ
ン受容体拮抗剤、具体的には高血圧治療剤、心・脳循環
疾患治療剤（例えば心筋梗塞等）、腎疾患治療剤、喘息
治療剤、抗炎症剤、抗関節炎剤として用いられる。

【００３５】化合物（Ｉ）またはその塩は、単独で、あ
るいは薬理学的に許容される担体（例、アジュバンド
剤、賦形剤、補形剤及び／又は希釈剤等）と混合して得
られる医薬組成物として、経口的及び非経口的に投与で
きる。非経口的には、例えば注射投与（例、皮下注射、
静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、点滴法等）、吸
入法、直腸投入あるいは局所投与により用いることがで
き、経口的には、例えば粉末、顆粒、錠剤、ピル剤、カ
プセル剤等の固形製剤；およびシロップ剤、エマルジョ
ン剤、エリキシル剤、懸濁剤、溶液剤等の液状製剤とし
て用いることができる。

【００３６】上記した医薬組成物は、製剤技術分野にお
いて慣用の方法により製造することができる。該医薬組
成物における化合物（Ｉ）またはその塩の含有割合は、
通常、０.０１ないし１００重量％、好ましくは０.１な
いし５０重量％である。

【００３７】以下に、化合物（Ｉ）またはその塩を含有
する医薬組成物の製造法について詳述する。注射用製剤
は、非毒性で非経口投与することのできる適当な媒体、
例えば分散化剤、湿化剤、懸濁化剤、希釈剤、溶剤等を
用いて製造することができる。このような媒体として
は、例えば水、リンゲル液、等張食塩液等の水性媒体；
天然、合成あるいは半合成の脂肪性油又は脂肪酸、天
然、合成あるいは半合成のモノあるいはジあるいはトリ
グリセリド類等の油性媒体が用いられる。また、化合物
（Ｉ）またはその塩は、凍結乾燥して注射剤とすること
も可能である。凍結乾燥にあたっては、通常アンプルな
いしはバイアルに化合物（Ｉ）またはその塩を含む薬液
を充填し、凍結乾燥品とするか、あるいはトレイなどに
薬液を入れ、凍結乾燥した後に粉末小分けなどによっ
て、アンプル、バイアルに充填することも可能である。
薬液は、ろ過などによって、また、凍結乾燥粉末は、ガ
ンマ線滅菌などの通常の方法によって滅菌することが好
ましい。凍結乾燥の際には、マンニトール、ソルビトー
ルなどの賦形剤やｐＨ調整剤を添加することも可能であ
る。また、薬液をろ過により無菌化した後に、無菌操作
によって得た粉末をアンプル、バイアルなどに粉末充填
することによって注射剤とすることも可能である。この
ようにして得た注射剤は、例えば少量の蒸留水あるいは
生理食塩水などに溶解して使用することができる。ま
た、市販の輸液に配合して、点滴用にすることも可能で
ある。注射剤とする場合には、キット製剤とすることも
可能である。

【００３８】直腸投与用製剤は、化合物（Ｉ）またはそ
の塩と適当な非刺激性の補形剤、例えばココアバターや
ポリエチレングリコール類といった常温では固体である
が腸管の温度では液体で、直腸内で融解し、薬物を放出
するもの等と混合して製造することができる。

【００３９】経口投与用の固形製剤は、化合物（Ｉ）ま
たはその塩を、少なくとも一つの添加物、例えばショ
糖、乳糖、セルロース糖、マンニトール、マルチトー
ル、デキストラン、デンプン類、寒天、アルギネート
類、キチン類、キトサン類、ペクチン類、トラガントガ
ム類、アラビアゴム類、ゼラチン類、コラーゲン類、カ
ゼイン、アルブミン、合成又は半合成のポリマー類又は
グリセリド類と混合することによって製造することがで
きる。該固形製剤は、さらに、例えば不活性希釈剤；マ
グネシウムステアレート等の滑沢剤；パラベン類、ソル
ビン酸等の保存剤；アスコルビン酸、α−トコフェロー
ル、システイン等の抗酸化剤；崩壊剤；結合化剤；増粘
剤；緩衝化剤；甘味付与剤；フレーバー付与剤；パーフ
ューム剤等を含んでいてもよい。錠剤及びピル剤は、さ
らにエンテリックコーティングされていてもよい。経口
投与用の液状製剤は、不活性希釈剤、例えば水を含んで
いてよい。

【００４０】ある特定の患者に対する化合物（Ｉ）また
はその塩の投与量は、年令、体重、一般的健康状態、性
別、食事、投与時間、投与方法、排泄速度、薬物の組み
合わせ、患者のその時に治療を行っている病状の程度に
応じ、それらあるいはその他の要因を考慮して決められ
る。化合物（Ｉ）またはその塩を含有する製剤は、低毒
性で安全に使用することができ、その１日の投与量は、
患者の状態や体重、化合物の種類、投与経路等によって
異なるが、例えば、成人（６０ｋｇ）に投与する場合、
経口投与では１日量３０ないし１０００ｍｇ、好ましく
は１００ないし１０００ｍｇ；静注では１日量１ないし
５００ｍｇ、３ないし３００ｍｇ、好ましくは３０ない
し２００ｍｇを１日１回又は２ないし４回に分けて投与
するのが好ましい。

【００４１】

【発明の実施の形態】以下に実施例、参考例および製剤
例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれ
らに限定されるものではない。

【００４２】

【実施例】

実施例１化合物Ａの結晶の製造 シクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペ
ラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-Ｌ-α-ア
スパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシ
ル-Ｄ-トリプトフィル］1770 gをメタノール 41リット
ルに溶解し、４から９℃で０.１規定水酸化ナトリウム
水溶液 30リットルを滴下し、ｐＨ約８.５に調製した。
不溶物をろ去し、ろ液を減圧濃縮しメタノールを留去し
た。残留液を酢酸エチルで洗浄した後、減圧濃縮した。
残留物を、カラムに純水で充填したHP-20SS（商品名、
三菱化成製造）に吸着させ、純水 275リットル、40（v/
v）％メタノール・純水混合液 459リットルで順次溶出
した。溶出液をHPLC法で分析し、化合物Ａの純度の高い
画分を混合して、減圧濃縮した。残留物を活性炭で脱色
処理した後、限外ろ過し、ろ液を化合物Ａの含量が 44
（w/w）％になるまで減圧濃縮した。残留物をエタノー
ル 3リットルに均一に溶解した後、かき混ぜながらエタ
ノール 20リットルを滴下した。結晶が析出したのを確
認してから、かき混ぜを止め一夜熟成した。析出した結
晶を加圧ろ過で分離した。

【００４３】実施例２化合物Ａの精製 実施例１で分離した結晶を３５℃に調節した乾燥機に入
れ、露点２０℃に調節した窒素ガスを７m³／時で２４時
間通気した後、窒素ガスを７m³／時で１５時間通気し
た。化合物Ａ 1071 gを得た。

【００４４】実施例３化合物Ａの精製 実施例１と同様にして得た化合物Ａの結晶を加圧ろ過で
分離し、３５℃で２０時間減圧乾燥した。得られる残留
物を注射用蒸留水 9.6リットルに溶解し、凍結乾燥し、
化合物Ａ 1071 gを得た。

【００４５】実施例４化合物Ａの精製 シクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペ
ラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-Ｌ-α-ア
スパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシ
ル-Ｄ-トリプトフィル］ 1775 gをメタノール 42リット
ルに溶解し、４から９℃で０.１規定水酸化ナトリウム
水溶液 32リットルを滴下し、ｐＨ約８.５に調製した。
不溶物をろ去し、ろ液を減圧濃縮し、メタノールを留去
した。残留液を酢酸エチルで洗浄した後、減圧濃縮し
た。残留物を、カラムに純水で充填した HP-20（商品
名、三菱化成製造）に吸着させ、純水 290リットル、50
（v／v）％メタノール・純水混合液 480リットルで順次
溶出した。溶出液をHPLC法で分析し、化合物Ａ純度の高
い画分を混合して、減圧濃縮した。残留物を活性炭で脱
色処理した後、限外ろ過した。ろ液を化合物Ａの含量が
44（w/w）％になるまで減圧濃縮した。残留物をエタノ
ール 4リットルに均一に溶解した後、かき混ぜながらエ
タノール 20リットルを滴下した。結晶が析出したのを
確認してから、かき混ぜを止め一夜熟成した。析出した
結晶を加圧ろ過で分離した。分離した結晶を、３５℃に
調節した乾燥機に入れ、露点２０℃に調節した窒素ガス
を７m³/時で２４時間通気した後、窒素ガスを７m³/時で
１５時間通気した。化合物Ａ 1084gを得た。

【００４６】参考例１化合物Ａの精製 実施例１と同様にして得た HP-20SS（商品名、三菱化成
製造）溶出液 187リットルを、化合物Ａの濃度が 10（w
／w）％になるまで減圧濃縮した後、凍結乾燥して、化
合物Ａ 1071 gを得た。

【００４７】参考例２Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-３-［（４-フェニルピペラ
ジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニンの製造 Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｌ-アスパラギン酸α-ベン
ジルエステル 4020 gをアセトニトリル 24.1リットルに
溶解し、Ｎ-ヒドロキシ-５-ノルボルネン-２,３-ジカル
ボキシイミド 2339 g を添加して冷却した。得られる混
合物に、ジシクロヘキシルカルボジイミド 2693 g をア
セトニトリル 8リットルに溶解して得られる溶液を滴下
した。室温で一夜かき混ぜた後、1-フェニルピペラジン
2033 gをアセトニトリル 12.1リットルに溶解して得ら
れる溶液を滴下し、室温で一夜かき混ぜた。不溶物をろ
過した後、ろ液を減圧濃縮した。残留物を酢酸エチルに
溶解し、Ｎ,Ｎ-ジメチル-１,３-プロパンジアミン 727.
3 gを添加した。ついで、水、飽和重曹水、水、10（w／
v）％クエン酸水および飽和食塩水で順次洗浄した。有
機層を減圧濃縮し、残留物を酢酸エチルとヘキサンから
結晶化させた。析出した結晶をろ過、乾燥した。乾燥し
た結晶をメタノール 84リットルに溶解し、パラジウム
黒 250 gを添加し、水素気流下で一夜接触還元した。触
媒をろ去した後、ろ液を減圧濃縮した。残留物を塩化メ
チレン 40.6リットルに溶解し、10（w／v）％クエン酸
水、水で順次洗浄した。有機層を減圧濃縮し、残留物を
酢酸エチルとヘキサンから結晶化させた。析出した結晶
をろ過、乾燥し、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-３-［（４
-フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラ
ニン 4008gを得た。

【００４８】参考例３ Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリ
シン シクロヘキシルアミン塩の製造 Ｄ-２-（２-チエニル）グリシン 600 gを水 3.82リット
ルとアセトニトリル 7.63リットルとの混合溶媒に懸濁
した。懸濁液に、ジ-ｔ-ブチル ジカルボナート 916.4
gをアセトニトリル 3.82リットルに溶解して得られる
溶液と１規定水酸化ナトリウム水溶液 3.82リットルを
３時間で同時に滴下した。室温で４時間かき混ぜた後、
減圧下、溶媒を留去した。残留物に水 3.82リットルと
酢酸エチル 7.63リットルを添加し、冷却した１規定水
酸化ナトリウム水溶液 4.06リットルを３０分間で滴下
した。有機層を分取し、水 4.06リットルで３回洗浄し
た。有機層を減圧濃縮し、残留物をイソプロピルエーテ
ル 15.4リットルに溶解した。溶解液に、シクロヘキシ
ルアミン 437.8ミリリットルを滴下し、冷却した。析出
した結晶をろ過、乾燥し、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-
Ｄ-２-（２-チエニル）グリシン シクロヘキシルアミ
ン塩 1297.2 gを得た。

【００４９】参考例４Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリ
シル-Ｌ-ロイシン ベンジルエステルの製造 参考例３で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-２-（２-
チエニル）グリシンシクロヘキシルアミン塩 646.1 gを
酢酸エチル 9.05リットルと水 9.05リットルとの混合溶
媒に懸濁した。懸濁液に、１規定硫酸 1.81リットルを
添加し、有機層を分取し、減圧濃縮した。残留物を塩化
メチレン 3.62リットルに溶解し、溶液Ｉを得た。ま
た、Ｌ-ロイシンベンジルエステルトシラート 855.8 g
に酢酸エチル 9.05リットルと10（w／v）％重曹水 9.05
リットルを加え、有機層を分取し、減圧濃縮した。残留
物を塩化メチレン 3.62リットルに溶解し、溶液IIを得
た。ついで、前記した溶液Ｉと溶液IIとを混合した。こ
の混合液に、１-ヒドロキシベンゾトリアゾール ヒド
ラート 293.7 gを添加し、氷冷した。さらに、ジシクロ
ヘキシルカルボジイミド 448.6 gを塩化メチレン 1.81
リットルに溶解して得られる溶液を４０分間で滴下し、
氷冷下６時間かき混ぜた。不溶物をろ去し、ろ液を減圧
濃縮した。残留物を酢酸エチルに溶解し、１規定硫酸、
飽和食塩水、4（w／v）％重曹水および飽和食塩水で順
次で洗浄した。有機層を減圧濃縮し、残留物をヘキサン
から結晶化させた。析出した結晶をろ過、乾燥して、Ｎ
-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシ
ル-Ｌ-ロイシン ベンジルエステル 779.3 gを得た。

【００５０】参考例５Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリ
シル-Ｌ-ロイシン フェナシルエステルの製造 参考例４で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-２-（２-
チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン ベンジルエステル 3
91.6 gをメタノール 8.5リットルに溶解し、5（w／w）
％パラジウムカーボン 587.4 gを添加し、室温で常圧下
水素を導入して３時間接触還元した。触媒をろ去した
後、ろ液を減圧濃縮した。残留物に、炭酸セシウム 13
9.1 gを水 1.18リットルに溶解して得られる溶液を、氷
冷下で、３０分間で滴下した。室温で３０分間かきまぜ
た後、外温３５℃以上で減圧濃縮した。残留物に酢酸エ
チル 1.2リットルを加え、減圧濃縮する共沸脱水操作を
３回繰り返した。残留物をジメチルホルムアミド 2.36
リットルに溶解し、臭化フェナシル 169.3 gをジメチル
ホルムアミド 1.2リットルに溶解して得られる溶液を１
５分間で滴下した後、室温で３時間かき混ぜた。反応液
を減圧濃縮し、残留物を酢酸エチル 5.9リットルに溶解
し、水、10（w／v）％クエン酸水、飽和食塩水、飽和重
曹水および飽和食塩水で順次洗浄した。有機層を減圧濃
縮し、残留物を酢酸エチルとヘキサンから結晶化させ
た。析出した結晶をろ取、乾燥し、Ｎ-ｔ-ブトキシカル
ボニル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン
フェナシルエステル 338.7 gを得た。

【００５１】参考例６Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-β- ベンジル-Ｌ-アスパル
チル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン フ
ェナシルエステルの製造 参考例５で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-２-（２-
チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン フェナシルエステル
270 gに、冷却した４N-HCl/酢酸エチル 2.08リットル
を加え、室温で４０分間かき混ぜた後、減圧濃縮した。
残留物をエタノールとヘキサンから結晶化させ、析出し
た結晶をろ過、乾燥した。残留物を塩化メチレン 4.57
リットルに溶解後、Ｎ-エチルジイソプロピルアミン 10
3.2 ミリリットルを滴下し、溶液IIIを得た。また、Ｎ-
ｔ-ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパラギン
酸 178.9 gを塩化メチレン 3.51リットルに溶解し、Ｎ-
ヒドロキシ-５-ノルボルネン-２,３-ジカルボキシイミ
ド 108.7 gを添加した後、ジシクロヘキシルカルボジイ
ミド 125.2 gを塩化メチレン 0.69リットルに溶解して
得られる溶液を添加し、氷冷下４時間かき混ぜ、溶液IV
を得た。ついで、前記した溶液IIIに、溶液IVを添加
し、室温で３時間かき混ぜた。不溶物をろ去した後、ろ
液を減圧濃縮した。残留物を酢酸エチル 5.85リットル
に溶解し、水、10（w／v）％クエン酸水、飽和食塩水、
4（w／v）％重曹水、および飽和食塩水で順次洗浄し
た。有機層を減圧濃縮し、残留物を酢酸エチルとヘキサ
ンから結晶化させた。析出した結晶をろ過、乾燥し、Ｎ
-ｔ-ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル
-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシンフェナシ
ルエステル 360.9 gを得た。

【００５２】参考例７Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-３-［（４-フェニルピペラ
ジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル
-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-
ロイシン フェナシルエステルの製造 冷４N-HCl/酢酸エチル 7.1リットルに、攪拌下、参考例
６で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｌ-ア
スパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシ
ン フェナシルエステル 1550 g を添加し、室温で約３
０分間かき混ぜた。減圧下、内温３０℃以下で溶媒を留
去し、塩化メチレン約 5リットルを加え、再濃縮して、
Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチ
ル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン フェ
ナシルエステルの脱Boc（tert-ブトキシカルボニル）体
を得た。該脱Boc体を塩化メチレン約 14リットルに溶解
し、１０℃以下でN-エチルジイソプロピルアミン約 420
ミリリットルを添加し、中和して溶液Ｖを得た。また、
参考例２で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-３-［（４-
フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニ
ン 880 gとＮ-ヒドロキシ-５-ノルボルネン-２,３-ジカ
ルボキシイミド 500 gとを塩化メチレン約 14リットル
に溶解した。得られる溶液を５℃以下に冷却し、１-エ
チル-３-（３-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミ
ド 534 gを１０℃以下で添加して、２０℃で４時間かき
混ぜた。この反応液に、前記した溶液Ｖを添加し、２０
℃で４時間かき混ぜた。ついで、減圧下、溶媒を留去し
た。残留物を酢酸エチルに溶解し、N,N-ジメチル-1,3-
プロパンジアミン約 420ミリリットル、水約 15リット
ルを添加した。有機層を分離し、飽和重曹水、水、10
（w／v）％クエン酸水および水で順次洗浄した。有機層
を減圧下、内温３０℃以下で濃縮した。残留物を酢酸エ
チル 4リットルに溶解し、ヘキサン 6リットルを加え、
２０℃で約１時間かき混ぜ、晶出させた。結晶の析出を
確認した後、ヘキサン約 13リットルを加え、１０℃以
下で１時間以上かき混ぜた。結晶を分離し、酢酸エチ
ル：ヘキサン（容積比１：５）で洗浄した。減圧下、約
３０℃で乾燥し、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-３-［（４
-フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラ
ニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニ
ル）グリシル-Ｌ-ロイシン フェナシルエステル 2.01
kgを得た。

【００５３】参考例８Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｄ-アスパルチ
ル-３-［（４-フェニルピペラジン-１-イル）カルボニ
ル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２
-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン フェナシルエ
ステルの製造 冷４N-HCl/酢酸エチル 8リットルに、攪拌下、参考例７
で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-３-［（４-フェニル
ピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベ
ンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシ
ル-Ｌ-ロイシンフェナシルエステル 2020 gを添加し、
室温で約３０分間かき混ぜた。減圧下、内温３０℃以下
で溶媒を留去し、アセトニトリル約 7リットルを加え、
再濃縮して、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-３-［（４-フ
ェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル
-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）
グリシル-Ｌ-ロイシン フェナシルエステルの脱Boc体
を得た。該脱Boc体を、アセトニトリル約 25リットルに
N-エチルジイソプロピルアミン約 730ミリリットルを溶
解し、１０℃以下に冷却して得られる溶液で溶解し、中
和して溶液VIを得た。また、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル
-β-ベンジル-Ｄ-アスパラギン酸 719 gとＮ-ヒドロキ
シ-５-ノルボルネン-２,３-ジカルボキシイミド 417 g
をアセトニトリル約 5.8リットルに溶解し、５℃以下に
冷却し、１-エチル-３-（３-ジメチルアミノプロピル）
カルボジイミド 446 gを１０℃以下で添加し、２０℃で
３時間かき混ぜた。この反応液に、前記した溶液VIを添
加し、２０℃で約３時間かき混ぜた。ついで、減圧下、
内温３０℃以下で溶媒を留去した。残留物を酢酸エチル
に溶解し、N,N-ジメチル-1,3-プロパンジアミン約 190
ミリリットル、水約 30リットルを添加した。有機層を
分離し、飽和重曹水、水、10（w／v）％クエン酸水およ
び飽和食塩水で順次洗浄した。有機層を減圧下、内温３
０℃以下で濃縮した。残留物を酢酸エチル 4.5リットル
に溶解後、ヘキサン 6リットルと晶種を加え、２０℃で
約１時間かき混ぜた。結晶の析出を確認後、ヘキサン約
17リットルを加え、２０℃で約３０分間、１０℃以下
で約１時間かき混ぜた。結晶を分離し、酢酸エチル：ヘ
キサン（容積比１：５）で洗浄した。減圧下、約３０℃
で乾燥し、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｄ-
アスパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-１-イ
ル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパ
ルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン
フェナシルエステル 2.33 kgを得た。

【００５４】参考例９Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-トリプトフィル-β-ベン
ジル-Ｄ-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-
１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-
アスパルチル-Ｄ-２-（２- チエニル）グリシル-Ｌ-ロ
イシン フェナシルエステルの製造 冷４N-HCl/酢酸エチル 6.4リットルに、攪拌下、参考例
８で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｄ-ア
スパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-１-イル）
カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチ
ル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン フェ
ナシルエステル 2287 gを添加し、室温で約３０分間か
き混ぜた。減圧下、内温３０℃以下で溶媒を留去し、ア
セトニトリル約 9リットルを加え、再濃縮して、Ｎ-ｔ-
ブトキシカルボニル-β-ベンジル-Ｄ-アスパルチル-３-
［（４-フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ
-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-
チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン フェナシルエステル
の脱Boc体を得た。該脱Boc体を、アセトニトリル約14リ
ットルに溶解し、冷却下、N-エチルジイソプロピルアミ
ン約 720ミリリットルを添加し、中和して溶液VIIを得
た。一方、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-トリプトファ
ン 691 gとＮ-ヒドロキシ-５-ノルボルネン-２,３-ジカ
ルボキシイミド 443 gをアセトニトリル約 6リットルに
溶解し、５℃以下に冷却した。１-エチル-３-（３-ジメ
チルアミノプロピル）カルボジイミド 474 g を約１０
℃で添加し、２０℃で約３時間かき混ぜた。この反応液
に、前記した溶液VIIを添加し、２０℃で約5時間かき混
ぜた。ついで、減圧下、内温３０℃以下で溶媒を留去し
た。残留物を塩化メチレン約 25リットルに溶解し、N,N
-ジメチル-1,3-プロパンジアミン約 90ミリリットル 、
水約 9リットルを添加した。有機層を分離し、飽和重曹
水、水、10（w／v）％クエン酸水および飽和食塩水で順
次洗浄した。有機層を減圧下、内温３０℃以下で濃縮し
た。残留物を塩化メチレン約 11リットルに溶解後、ヘ
キサン約 3リットルと晶種を加え、２０℃で約１時間か
き混ぜた。結晶を分離し、塩化メチレン：ヘキサン（容
積比１：１０）8リットルで洗浄した。減圧下、約３０
℃で乾燥し、Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-トリプトフ
ィル-β-ベンジル-Ｄ-アスパルチル-３-［（４- フェニ
ルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-
ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリ
シル-Ｌ-ロイシン フェナシルエステル 2.06 kgを得
た。

【００５５】参考例１０Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-トリプトフィル-β-ベン
ジル-Ｄ-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-
１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-
アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイ
シンの製造 塩化メチレン 5.2リットル、メタノール 5.2リットルお
よび酢酸 11リットルの混合液に、参考例９で得たＮ−
ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-トリプトフィル-β-ベンジ
ル-Ｄ-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-１
-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-ア
スパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシ
ン フェナシルエステル 2120 gを加え、亜鉛粉末 3110
gを添加し、窒素雰囲気下、２０〜２５℃で１.５時間
かき混ぜた。不溶物をろ去し、塩化メチレン：メタノー
ル（容積比１：１）6リットルで洗浄した。ついで、減
圧下、内温３０℃以下で溶媒を留去した。残留物に塩化
メチレン 29リットルと水 22リットルを加え、分液し
た。水層を塩化メチレンで抽出し、塩化メチレン層を水
で４回洗浄した。有機層をぼう硝で乾燥した。ついで、
減圧下、内温３０℃以下で溶媒を留去した。残留物を塩
化メチレンとヘキサンから結晶化させ、析出した結晶を
分離し、ヘキサン：塩化メチレン（容積比５：１）で洗
浄した。減圧下、３０℃で乾燥し、Ｎ-ｔ-ブトキシカル
ボニル-Ｄ-トリプトフィル-β-ベンジル-Ｄ-アスパルチ
ル-３-［（４-フェニルピペラジン-１-イル）カルボニ
ル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２
-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシン 1.74 kgを得
た。

【００５６】参考例１１シクロ［Ｄ-β-ベンジル-Ｄ-アスパルチル-３-［（４-
フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニ
ル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニ
ル）グリシル-Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプトフィル］の製造 参考例１０で得たＮ-ｔ-ブトキシカルボニル-Ｄ-トリプ
トフィル-β-ベンジル-Ｄ-アスパルチル-３-［（４-フ
ェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル
-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）
グリシル-Ｌ-ロイシン 2600 g、Ｎ-ヒドロキシ-５-ノル
ボルネン-２,３-ジカルボキシイミド 760 gおよび１-エ
チル-３-（３-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミ
ド 812 gをアセトニトリル 22リットルに溶解し、２０
℃で３時間かき混ぜた。減圧下、溶媒を留去した後、４
N-HCl/酢酸エチル 12.4リットルを添加し、室温で３０
分間かき混ぜた。減圧下、溶媒を留去し、残留物を塩化
メチレン 18リットルに溶解し、再び減圧下に溶媒を留
去した。残留物を塩化メチレン 62リットルに溶解し、
Ｎ-エチルジイソプロピルアミン 2.6リットルで中和
し、飽和食塩水、飽和重曹水および10（w／v）％クエン
酸水で順次洗浄した。有機層を減圧濃縮し、残留物をシ
リカゲルクロマトグラフィー〔塩化メチレン：メタノー
ル＝９７：３（容積比）〕で精製した。有効画分を減圧
濃縮しながら、溶媒をメタノールに置換し、析出物を得
た。該析出物をろ過、減圧乾燥し、シクロ［Ｄ-β-ベン
ジル-Ｄ-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペラジン-
１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-
アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイ
シル-Ｄ-トリプトフィル］ 1890 gを得た。

【００５７】参考例１２シクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-［（４-フェニルピペ
ラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-Ｌ-α-ア
スパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシ
ル-Ｄ-トリプトフィル］の製造 参考例１１で得たシクロ［Ｄ-β-ベンジル-Ｄ-アスパル
チル-３-［（４-フェニルピペラジン-１-イル）カルボ
ニル］-Ｌ-アラニル-β-ベンジル-Ｌ-アスパルチル-Ｄ-
２-（２-チエニル）グリシル-Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプト
フィル］ 1986g をジメチルホルムアミド 33リットルに
溶解し、パラジウム黒 298 gを添加し、１０から１２℃
で、水素圧０.１から０.２ kg/cm²で３０分間かき混ぜ
た。パラジウム黒（100〜149 g）を添加して、１０から
１２℃で水素圧０.１から０.２kg/cm²で３０分間かき混
ぜる操作を５回繰り返し、合計 653 gのパラジウム黒を
添加した。反応液をろ過して、パラジウム黒を除去した
後、減圧濃縮して溶媒を留去した。残留物を少量の塩化
メチレンに溶解し、イソプロピルエーテル 94リットル
に添加し、粉末状の析出物を得た。該析出物をろ過、乾
燥して、シクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-［（４-フェ
ニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニル-
Ｌ-α-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシル-
Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプトフィル］1830 gを得た。

【００５８】製剤例１ 化合物Ａ 122.5 gを注射用水 49リットルに溶解し、得
られた溶液を除菌フィルター（ミリディスク）でろ過す
ることで、無菌化する。無菌室内で菌汚染に注意しなが
ら、得られた溶液を 2ミリリットルずつバイアルに充填
し、ゴム栓を半打栓後、凍結乾燥機庫内に搬入、通常の
方法で凍結乾燥した。４０時間後に、乾燥空気の導入に
よる凍結乾燥機庫内の復圧及び全打栓を行った。プラス
チック製のフィリップオフキャップで巻締め製剤とし
た。１バイアル中に化合物Ａ 5 mgを含有する凍結乾燥
製剤を得た。 製剤例２ 製剤例１と同様にして、化合物Ａ 361 g及び注射用水
7.22リットルを用い、１バイアル中に化合物Ａ 100 mg
を含有する凍結乾燥製剤を得た。

【００５９】製剤例３ 製剤例１と同様にして、化合物Ａ 245 g及び注射用水 4
9リットルを用い、１バイアル中に化合物Ａ 10 mgを含
有する凍結乾燥製剤を得た。 製剤例４ 製剤例１と同様にして、化合物Ａ 612.5 g及び注射用水
49リットルを用い、１バイアル中に化合物Ａ 25 mgを
含有する凍結乾燥製剤を得た。 製剤例５ 製剤例１と同様にして、化合物Ａ 190 g及び注射用水
7.6リットルを用い、１バイアル中に化合物Ａ 50 mgを
含有する凍結乾燥製剤を得た。

【００６０】

【発明の効果】本発明の精製法によれば、簡便な操作に
より、発熱性物質（パイロジェン）等の不純物を実質的
に含まない化合物（Ｉ）またはその塩を非晶質の粉末と
して製造することができる。該粉末は、静電気を帯びに
くく、比容が小さいために、飛散性に乏しい等の優れた
操作性を有する。また、本発明の結晶は、発熱性物質等
の不純物を実質的に含まない。該結晶は、優れた操作性
を有する非晶質の粉末を製造するための原料として有用
である。

【図面の簡単な説明】

【図１】エタノール共存下での化合物Ａの結晶の形状を
示す顕微鏡写真である。

【図２】エタノール共存下での化合物Ａの結晶のＸ線粉
末回折スペクトル（ＣｕＫα，５０ｋＶ，１００ｍＡ）
を示す。

【図３】化合物Ａの非晶質粉末の形状を示す顕微鏡写真
である。

【図４】化合物Ａの非晶質粉末のＸ線粉末回折スペクト
ル（ＣｕＫα，５０ｋＶ，１００ｍＡ）を示す。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 ＡＣＤ Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＣＤ ＡＣＶ ＡＣＶ ＡＥＤ ＡＥＤ Ｃ０７Ｋ 105:00

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】式（Ｉ） 【化１】 〔式中、ＸおよびＹはそれぞれα−アミノ酸残基を、Ａ
   はＤ−酸性−α−アミノ酸残基を、Ｂは中性−α−アミ
   ノ酸残基を、ＣはＬ−α−アミノ酸残基を、Ｅは芳香環
   基を有するＤ−α−アミノ酸残基を示す。〕で表される
   環状ペプチド化合物またはその塩を有機溶媒の存在下に
   結晶化し、ついで乾燥することを特徴とする環状ペプチ
   ド化合物またはその塩の精製法。
2. 【請求項２】式（Ｉ）で表される環状ペプチド化合物ま
   たはその塩が、シクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-［（４
   -フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラ
   ニル-Ｌ-α-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリ
   シル-Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプトフィル］二ナトリウム塩
   である請求項１記載の精製法。
3. 【請求項３】有機溶媒がアルコール類である請求項１記
   載の精製法。
4. 【請求項４】アルコール類がエタノールである請求項３
   記載の精製法。
5. 【請求項５】乾燥が凍結乾燥である請求項１記載の精製
   法。
6. 【請求項６】乾燥を、湿度調節した不活性ガスの通気に
   より行う請求項１記載の精製法。
7. 【請求項７】不活性ガスが窒素である請求項６記載の精
   製法。
8. 【請求項８】シクロ［Ｄ-α-アスパルチル-３-［（４-
   フェニルピペラジン-１-イル）カルボニル］-Ｌ-アラニ
   ル-Ｌ-α-アスパルチル-Ｄ-２-（２-チエニル）グリシ
   ル-Ｌ-ロイシル-Ｄ-トリプトフィル］二ナトリウム塩の
   結晶。